專利名稱：：生產高濃度咯嗪溶液的方法和組合物的制作方法生產高濃度咯溱溶液的方法和組合物相關申請的交叉參照依據35U.S.C.§119(e)，本申請要求2007年1月27日申請的U.S.臨時申請No.60/762，684和2007年1月24日提交的US專利申請號一，代理案巻號186412/US/2的權益，在此以其整體引入作為參考。本申請進一步引入2004年11月5日申請的發明名稱為"使用光敏劑和光的峰值波長減少血液和血液制品中污染"的US專利申請系列No.10/904，361，在此以其整體引入作為參考。背景a.領域提供了提高溶液中咯嗪溶解度的方法和組合物，以及滅活生物學流體中病原體的方法和組合物。還提供了一種新型的溶解度提高的核黃素。b.相關技術例如HIV、肝炎和其他的病毒以及細菌這些感染性微生物造成的全血或血液制品的污染對那些必須接受全血輸血或給予不同血液制品或血液成分的患者造成了嚴重的健康危害。這類血液成分包括紅血細胞、血漿、凝血因子VIII、血纖維蛋白溶酶原，纖連蛋白，抗凝血酶ni，冷沉淀物，人血漿蛋白級分，白蛋白，免疫血清球蛋白，凝血酶原復合物，血漿生長激素和其他從血液分離的成分。一種為受血者提供安全的血液或血液制品的解決方法是在患者體內使用該原料之前篩查血液或血液制品的污染(在此所用的術語"血液"和"血液制品"可以互換使用)。當血液制品的測試對于特定的病原體是陽性時，從流通中除去該血液制品并被銷毀。然而，血液篩查操作可能會因為不適當的特異性和靈敏度而不能檢測到致病性污染物，例如，篩查血液制品中丙肝的存在，當該血液受到西尼羅病毒感染，或篩查該血液制品丙肝，但該病毒的存在量低于特定篩查方法檢測的靈敏度時。在這些情況下，血液篩查器將會認為該血液不含有可檢測水平的丙肝污染而讓該血液處于流通中，但事實上該血液制品其實受到西尼羅病毒的污染或一定水平的丙肝污染，這將會危害受血者的健康。第二種為受血者提供安全血液制品的解決方法是在受血者體內使用前對原料"滅菌"。一種特別有用的血液制品滅菌方法是直接給血液制品添加至少一種光敏劑。一些類型的光敏劑對核酸具有高親和力。通常，血液制品中的核酸與病原體的存在是相聯系的，這讓光敏劑可以優先靶向血液制品中的病原體。隨后在對于光敏劑適當的波長下對血液制品進行輻照，使吸收的能量從光敏劑轉移至能量接受者，即，能量轉移至病原體的核酸。使用這種處理破壞了血液制品中基本上所有的病原體，否則，受血者將會接受受污染的血液并且處于受特定病原體感染的危險中。血液制品中光敏劑的有效量或有效水平是確保破壞樣品中病原體的一個重要方面。的光敏劑的含量或濃度，部分基于為了激活化合物并引起微生物殺滅而到達那些光敏劑的"光劑量"。一般而言，將光劑量最大化，以便活化光敏劑，但不會引起對周圍血液或流體產品，即紅細胞、血小板等的破壞。然而，已經證明了給血液制品提供足量的光敏劑以提供限定體積原料中的病原體的有效殺滅或滅活是困難的。特別地，不同光敏劑的溶解度(以其Ksp來測量)限制了可以加入血液制品中的光敏劑的含量。在制備用于血液制品中的光敏劑時，首先必須將固體光敏劑與溶劑混合以把原料放入溶液中，然后將該溶液以一定的比例加入產品中，該比例不會不利于血液制品的滲透壓。這通常給出了在"滅菌"處理過程中血液制品可以加入多少光敏劑的限制。光敏劑的稀釋量可能導致對病原體的殺滅和處理無效。因此，在血液制品的滅菌處理中使用高濃縮的光敏劑溶液是有益的，該光敏劑溶液以小劑量加入血液制品中，但同時為樣品提供了適當水平的光敏劑來保證病原體滅活。此外，尋找新的光敏劑和光敏劑形式來提供血液制品處理中的新手段。新的光敏劑及其形式可以提供從新化合物至帶有病原體的血液提高的能量轉移以及對于含有血液制品的包含物提供改進的溶解度特征。面對這樣的背景，產生了本發明的公開內容。發明概述一方面，提供了將水性介質中的咯溱濃度提高至高于環境溫度和氣壓下的咯溱典型飽和點的方法。將溫度超過或等于80。C的水性介質加入一定量的咯溱中以形成超過室溫(22。C)和大氣壓(l個大氣壓)下咯溱飽和點的咯溱溶液。然后將該溶液冷卻以產生咯溱濃度高于環境溫度和氣壓下咯嗪典型飽和點的水性介質。在不同的實施方案中，水性介質可以具有酸性pH(例如，約4至約5的pH)和/或約80C至約90n的溫度。水性介質可以包括鹽，如單價鹽。在特定的實施方案中，咯溱是核黃素。可以將咯嗪溶液進一步滅菌，如在大于1個大氣壓和至少120n的溫度下。在另一個方面中，提供了核黃素衍生物形式。該核黃素衍生物形式在525nm波長具有等于或小于0.95的相關系數，和/或在波長500nm以上作為濃度函數的不同于可溶性核黃素的吸光度曲線。在更進一步的實施方案中，通過將核黃素混入具有酸性pH和大于約801C溫度的水性介質中，然后冷卻該核黃素溶液的方法制得核黃素衍生物形式。在另一個方面中，提供了用于處理生物流體如血液制品的組合物。在一種變化中，組合物包括可溶性咯嗪，如核黃素，和單價鹽，可溶性咯嗪至少為120^M，超過1個大氣壓和22。C下可溶性咯嗪的飽和點。在進一步的變化中，可溶性咯嗪的濃度至少為500nM。在進一步的變化中，可溶性咯溱為約580iuM。單價鹽可以提供至少0.9%的鹽濃度。在進一步的變化中，組合物包括碳酸氫鈉，和/或具有約4至約5的pH。在其他方面中，提供了滅活生物流體中病原體的方法。將含有一定濃度的咯溱溶液的組合物加入生物流體中以滅活病原體。在不同的實施方案中，可溶性咯"秦的濃度至少為100pM、250pM、至少為500pM，或約580nM。在其他實施方案中，生物流體是血液制品。附圖簡述圖1A，1B和1C說明了根據在此所述的實施方案制備的核黃素衍生物a型的吸光度(附圖A和B)和相關系數(C)特征。發明詳述不同的實施方案提供了改良的光敏劑組合物，特別是改良的咯溱組合物，其具有提高的溶解度，并因此具有提高的濃度。所得到的咯溱溶液的溶解度和濃度超出了溶液外咯喚的溶解度和濃度。所得到的咯溱溶液提供了可以將更大量的咯噪加入含有病原體的生物流體中，導致提高的病原體滅活。還提供了比未處理的核黃素具有更高飽和點的核黃素衍生物形式。定義提供以下定義來促進理解在此常用的特定術語，但是這不意味著限定本發明公開的范圍。如在此所用的，"生物流體"指的是動物，優選哺乳動物體內發現的任何液體。通常，生物流體不含有大量含有核酸的物質。例如，在此公開的生物流體包括血液制品。"血液制品"指的是血液和全部的血液成分、血液組分和含有來自血液的蛋白質的治療性蛋白組合物。如在此所用的，"咯溱"指的是所有的咯溱和異咯瘵，及其天然和合成的衍生物，包括，但不限于7，8-二曱基-10-核糖醇基異咯溱(核黃素或維生素B-2)、7，8，10-三甲基異咯嗪(光黃素)、7，8-二甲基咯嗪(光色素)、異咯嗪-腺嘌呤二核苷酸(黃素腺噪呤二核苷酸[FAD1)和咯溱單核苷酸(例如，黃素單核苷酸[FMN])。如在此所用的，"病原體"指的是可以感染并具有在宿主體內引起疾病潛能的生物體。特別地，病原體本質上通常是細菌或病毒。如在此所述的，術語病原體和微生物可以互換。如在此所用的，術語"病原體的滅活"指的是通過殺死病原體或其他干擾病原體繁殖的能力來部分或完全防止病原體的復制。如在此所用的，術語"消滅病原體"指的是完全阻止所有的病原體的復制。如在此所用的，"水性介質"指的是其中溶劑為水的任何介質。如在此所用的，"核酸"("NA")指的是脫氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)和肽核酸(PM)，及其修飾的和/或功能化的變型。相似地，在此所用的術語核苷酸包括核糖核酸和脫氧核糖核酸的單個單體以及核普和核苷酸類似物，以及修飾的核苷酸如標記的核苷酸。核普酸還包括非天然產生的類似物結構，例如其中糖、磷酸鹽和/或堿基單位不存在或由其他化學結構代替的那些。術語核苷酸也包括單個'，，肽核酸(PNA)單體(Nielsen等，Bioconjug.Chem.(1994)5(1):3-7)和鎖核酸(LNA)單體(Braasch和Corey，Chem.Biol.(2001)8(1):l-7)。如在此所用的，"峰值波長"指的是由具有特定峰強度的波長周圍集中的窄范圍中發射的光。如在此所用的，"溶解度"指的是與過量物質平衡的溶液中所含的物質量。在這些條件下，將溶液稱為飽和的。物質的Ksp指的是在該物質的飽和溶液中，該物質的離子濃度的乘積。光敏劑和滅活病原體的方法咯溱結合核酸的光敏劑。光敏劑通常非特異性地結合核酸分子，同時通過干擾并因此防止生物體核酸復制來滅活含有核酸的^:生物。通過光敏劑特異性的特定波長的光照射來活化光敏劑，這可以引起能量從光敏劑轉移至能量受體，例如，核酸堿基對。一般而言，光敏劑特異性是基于光敏劑與微生物核酸密切地接近，這導致了光敏劑與病原體核苷酸的結合。當待處理的生物流體缺乏或只有有限量的非病原核酸分子時，即，當生物流體中存在的核酸主要是由于病原體的存在，而不是由于同一樣品中其他細胞引起時，光敏劑是最為有用的。因此，例如，生物流體的典型處理過程包括將光敏劑加入潛在受到致病微生物污染的血液制品中。如果血液和/或血液成分的病原體的減少是所需的，將暴露于光時充當光敏劑的添加劑可以結合在此所述的方法、化合物以及組合物來使用。這樣的添加劑包括內源光敏劑。術語"內源"意思是在人或哺乳動物體內天然找到的，由軀體合成的或由于作為必需食物(例如，維生素)攝入的或體內代謝產物和/或副產物的形成。這樣的內源光敏劑的實例是咯溱，例如7，8-二曱基-10-核糖醇基異咯溱(核黃素)、7，8，10-三曱基異咯嚷(光黃素)、7，8-二甲基咯溱(光色素)、異咯溱腺嘌呤二核苷酸(黃素腺嘌呤二核苷酸[FADI)、咯嗪單核苷酸(也稱為黃素單核苷酸[FMN和核黃素-5-磷酸鹽)，其代謝產物和前體。術語"咯溱"包括異咯溱。內源基的衍生光敏劑包括合成產生的內源光敏劑的類似物和同系物，其可以含有或缺乏衍生它們的光敏劑的低級(l-5)烷基或卣素取代基，并且其保持了功能和基本上的無毒性。當使用內源光敏劑時，特別是這樣的光敏劑是本質上無毒的或在光照射后不會產生有毒光產物時，在凈化后不需要除去或純化步驟，同時處理過的產物可以直接返回患者體內或給予需要其治療效果的患者。將光敏劑暴露于特定波長的光時，它們吸收能量，使得光敏劑并且所有結合光敏劑的核酸光解。光敏劑的效力取決于病原體結合的光敏劑的濃度和光照量(因為激發的光敏劑是破壞病原體中的活化劑)。一般來講，因此光化學劑量等于加入流體的光敏劑的濃度和光劑量。光劑量基于給致病微生物提供最大破壞而對目標生物流體無不利作用。在此定義的峰值波長指的是由具有特定峰強度的波長周圍集中的窄波段發射的光。在，個實旆方案中，可見光集中在大約470nm波長的周圍，并具有大約200nm至約550nm的最大強度。在一個可替換的實施方案中，光集中在308nm周圍，并具有大約280nm至約370nm的最大強度。注意到術語"光源"或"照射"指的是輻射能的發射體，并可以包括在可見和/或紫外區的能量。如上所述，通過改變光劑量難以提高目標流體內的光敏劑劑量，因為更強或更有效的光劑量可能對流體內其他成分的穩定性有不利作用，即，裂解血液制品樣品中的紅細月包。如之前在US專利公開20050112021(Hlavinka等，2005年5月26)中所述的，在此引入作為參考，將光敏劑加入目標流體中，并將所得到的流體混合物暴露于合適峰值波長和含量的光輻射來活化光敏劑，但是低于引起生物學成分顯著非特異性破壞或干擾流體中存在的其他蛋白質的生物學活性。可以通過將含有至少120jiM可溶性咯溱的溶液或組合物加入生物流體中來滅活或消滅病原體。可以通過在此所述的方法將溶液或組合物調節至所需的咯嗪濃度，高于1個大氣壓和22。C時未處理的濃度。咯溱溶液提高的溶解度和濃度使得可以將更大量的咯溱加入含有病原體的生物流體中。這導致了提高的病原體滅活。使用如在此所述的光敏劑可以消滅或滅活的微生物包括，但不限于，病毒(胞外和胞內的)、細菌、噬菌體、真菌、血液傳輸的寄生蟲和原生動物。說明性的病毒包括人獲得性免疫缺陷病毒(HIV)、甲肝病毒、乙肝病毒、丙肝i^毒、sinbis病毒、巨細胞病毒、水泡性口炎病毒、單純皰滲病毒(I型和II型)、西尼羅病毒、人親T-淋巴性逆轉錄病毒、HTLV-III、淋巴結病病毒LAV/IDAV、細小病毒、輸血-傳輸(TT)病毒、EB病毒等。可以使用光敏劑消滅或滅活的噬菌體包括，但不限于，.PHI.X174、.PHI.6、入噬菌體、R17、T4、T2等。可以使用光敏劑消滅的細菌包括，但不限于，綠膿桿菌(尸.aeri/^'/20sa)、金黃色葡萄球菌(S.ai/rei/s)、表皮葡萄球菌(ep油r邊ys)、單核細胞增生李斯特氏菌(Z』o"oc,ge/7es)、大腸軒菌(^yc/er/cA/aco//)、肺炎克雷4白氏菌(p/2ewzzo/2/a)、粘質沙雷菌(S.鵬rce"e/3S)等。制備咯嗪組合物的方法還提供了將水性介質中的咯溱濃度提高至超過咯嗪的常規飽和點的方法。在一個實施方案中，將超過咯溱飽和點含量的咯溱加入溫度高于或等于80°C的水性介質中。將溶液冷卻時，所得到咯嗪溶液中的咯溱超過了咯喚的飽和點。可以在介質加熱前或加熱時將咯噪加入水性介質中。隨著時間的推移，咯溱在溶液中是穩定的，并且不會在水性溶液中過飽和。咯溱可以商業購買。晶狀咯溱，例如，核黃素(7，8-二甲基-10-核糖醇基異咯嗪)、FMN、FAD、光色素等，與特定形式無關，可以從Merck獲得，參見例如，MerckIndex,第十版，1983。測量咯嗪的含量，用于與溶劑如水性介質或水性介質和非極性溶劑組合物混合。例如，測量在22。C和1大氣壓下的咯嗪核黃素飽和點濃度為114nM。通過在此所述的方法制備的咯嗪的濃度顯著高于最初溶解的濃度。可以將最終的咯嗪濃度定為等于和/或高于120pM、150pM、200nM、250|iM、300pM、350j^M、400pM、450jiM、500^M、550pM、580nM、600pM或650^M。在特定的實施方案中，可以將咯溱的濃度定為大約500±12.5^M。可以調節溶劑的pH。例如，調節pH至酸性pH(即小于或等于6.5)。可以改變溶劑pH至小于或等于6.5、6.0、5.5、5.0、4.5、4,0、3.5、3.0或2.5的最大pH,和任選大于或等于2.5、3.0、3.5、4.0、4.5、5.0、5.5或6.0的最小pH。例如，將pH改變至4.0至5.0。可以使用任何酸來改變pH，包括例如，鹽酸(HC1)、硫酸(H2S04)、檸檬酸(C6H807)和醋酸(CH3COOH)。通常的堿可以用來改變pH，包括氫氧化鈉(NaOH)和碳酸氫鈉(NaHC03)。可以將單價鹽，例如，氯化鈉，與溶劑混合以提供約0.9%的鹽度。另外，制備溶液來包括約200mM醋酸鈉(NaAc)。通常包括醋酸鈉用于血液制品的最終用途，其中血液制品使用了10-20mMNaAc，用于血小板穩定性和活性，Bertulini等，Transfusion(1992)32:152;Murphy,Blood(1995)85:1929。如上所述，可以將NaAc和咯，秦以及咯嚷無關的鹽和鹽一起加入。對于含有溶劑的咯溱的生產，加入的次序不是關鍵的。在常規咯嗪溶液生產中，由于物質的邊緣溶解性，即，Ksp，只制備了大約相當于114的溶液。可以將咯溱的濃度定于高于典型飽和濃度的特定水平，如上文中所述的。將水性介質被加熱至給定的溫度。例如，可以將水性介質加熱至大于或等于60。C、65。C、70。C、75°C、80。C、85°C、90。C或95°C的最小溫度，和任選小于或等于95。C、90。C、85。C、80。C、75。C、70°C或65°C的最大溫度。在特定的變化中，溫度為約80。C至約90。C。可以將溶液混合一段時間，如至少十至六十分鐘，使咯噪溶解。然后在彈性塑料袋或其他類似的容器中，在增強的蒸汽、氣壓和溫度下將加熱并混合過的溶液高壓滅菌。溶液沒有體積的限制。特別地，在高蒸汽條件下，將溶液加熱至約60°C到約100。C，優選約75°C至約85。C，和約latm至約4個atm(50psi)的氣壓。可以將組合物貯存以備后用。例如，可以將醋酸鈉加入組合物中。將組合物分配至滅菌容器中，例如，聚丙烯袋，隨后可以將其加熱(至例如120°C-130°C)—舉合適的時間，同時以避光的方式對組合物蒸汽滅菌。這種方式制備的咯嗪溶液可以用于處理生物流體如血液制品。含有咯嗪的溶液與不是使用在此所述的方法制備的咯嗪溶液相比較具有提高的溶解度和穩定性。然后將通過在此所述方法制備的組合物直接加入生物流體，如血液制品中。在特定的實施方案中，每170ml至365ml血液制品中加入大約35ml的500jiM咯噪溶液。將咯-秦組合物加入血液制品中與先前工藝是不同的對照，它需要將更多的稀釋咯溱組合物加入血液制品中。核黃素衍生物形式通過在溶液中加熱和冷卻的核黃素制備方法產生了一種與未處理核黃素相比較在室溫下具有提高的溶解性的核黃素衍生物形式。將該化合物稱為核黃素衍生物ot。核黃素衍生物oc可以用于生物流體的滅菌處理中。核黃素衍生物ot是在酸性條件下通過加熱產生的核黃素的高溶解形式。核黃素衍生物形式的化學結構和活性與未處理的核黃素相同。不希望受到特定理論的限制，核黃素衍生物形式表現出一種改變過的核黃素構象，將水排除在水合作用范圍之外。該構象變化使得核黃素可以作為一種有機溶劑，因此提高了溶液中核黃素的溶解度。分光鏡數據與更疏水環境中溶解核黃素相一致。核黃素衍生物ot隨著時間的推移是穩定的，同時不是一種過飽和溶液。得自在此所述方法的至少一部分核黃素原料含有核黃素衍生物oc。核黃素衍生物ot可以是唯一存在或作為核黃素組合物的一部分或與其他咯溱化合物一起。化合物在室溫下是高度穩定的并且可以貯存很長時間，同時保持用于處理生物流體的高活性。如以下實施例所示的，核黃素衍生物oc提供了在500mn以上波長時作為濃度函數的變化或改變的吸光度曲線。與未處理的核黃素相比，核黃素衍生物oc改變的吸光度曲線表明這種新核黃素衍生物的存在(參見Beer定律，A-sbc,其中A是吸光度，s是克分子吸光率，b是樣品即比色皿的徑長，以及c是溶液中組合物的濃度)。在此公開的方法、組合物以及裝置也可以用來制備疫苗、減少流體中的朊病毒，也可以通過在此所述的方法、組合物以及裝置處理含有源自血液那些以外的生物活性蛋白的IV流體。具體實施方案通過參照以下的實施例將更容易理解本發明，只是通過說明來提供這些實施例并不是用來限制。實施例1:高可溶性核黃素的批量生產混合大量溶液的方法以下操作是在凈化室進行的。對于給定所需大體積制造的核黃素溶液，稱量足夠的固體核黃素和氯化鈉并分配至裝有80°C水的罐中來產生具有500pM±12.5|uM的核黃素和大約153.6mM±3.6mM的溶液。特別地，IOOOL的批量中由0.1882kg核黃素9.0kg氯化鈉構成。注意到核黃素和氯化鈉可以同時或以任一次序單獨加入。更特別地，將氯化鈉加入WFI(注射質量的水或"注射用水")。WFI的溫度為80。C,同時用0.1MHC1將pH調節至5.0±0.1。然后加入核黃素，并混合約15分鐘。再次注意到氯化鈉和核黃素的加入次序是無關的。將溶液的溫度維持在約80°C。進行質量控制分析來測定組合物的純度。填充袋子和蒸汽滅菌的方法然后將上述溶液通過Durapore10"0.45nm—列式濾器過濾。然后將過濾的大量溶液轉移至灌裝機，在那里將溶液分配至35ml標記的PVC袋中。然后在使用超量殺滅法蒸汽滅菌之前，將該袋子包裹于聚丙烯真空外包裝中。超量殺滅法按照ISO11134:1994進行，名稱為保健產品的滅菌方法-批準和常規控制的要求-工業濕熱滅菌。ISO為使用蒸汽滅菌技術制備醫藥制品提供了指導。滅菌周期包括在聚丙烯袋中在4個atm氣壓下將溶液加熱至121。C大約15分鐘。然后將袋子放入標記的鉑袋中以防止光暴露于溶液(避免核黃素的光降解作用)來進行蒸汽滅菌。然后通過精加工品測試來測試樣品-該樣品具有以下參數核黃素，500土25^iM;光色素，<75|uM;氯化鈉，154±7mM;顯微鏡下可見顆粒，>10pm(6000/容器)，>25nm(600/容器)；pH，4.0-5.1;內毒素，<0.5EU/ml;以及無菌度，S10-6(流體路徑的無菌保證水平(SAL))。實施例2:核黃素衍生物ot使用實施例1中上述的方法制備稱為核黃素衍生物ot的核黃素衍生物。為了證實所述物質含有核黃素，在波長490nm和530nm之間以2nm到5rnn的間隔測試組合物的吸光度。然后將吸光度值代入Beer定律(A=Ebc)中，其中A是吸光度，s是核黃素克分子吸光率，b是樣品即比色皿的徑長，以及c是溶液中組合物的濃度。對應每個吸光度準備濃度，并且如圖1A，1B和1C中所示的繪制。吸光度對濃度的直線斜率等于克分子吸光率(s)。有趣的是，當測量圖1C數據的相關系數時，即，對每個波長作圖的濃度和制得的相關系數，鑒定500nm以上波長的實質性偏差，特別是在510nm。圖1C中的數據表明測試的組合物中存在不同的核黃素衍生物形式，因此可以〗吏用在此所述的方法制備。將該f汙生物稱為核黃素4汙生物a。實施例3將核黃素(大約70mg)加入鹽水(大約200ml)中，并在加熱板上連續混合。將容器封蓋，并且將溶液混合40分鐘。將溶液通過O.2微米的過濾器過濾。將過濾的溶液以1:IO的比例稀釋，并測量其吸光度。測定核黃素的濃度為540|liM。光譜顯示沒有核黃素分解的跡象。將3mL核黃素和147ml鹽水混合。測量其吸光度，同時測定濃度為9.9nM。將30ml核黃素/鹽水溶液分別轉移至四個75cn^燒瓶中，其中同時照射兩個。測定核黃素溶液的濃度為515nM和528^M,超過了環境溫度和氣壓下溶解于溶液中的未處理核黃素的114^M濃度。實施例4隨著時間測量核黃素濃度的穩定性來確定其穩定性。制備了不同的核黃素制劑。在22°C時將核黃素溶解于水性介質中，同時測量其濃度為114通過將10mg核黃素加入100mL鹽水中，在37°C加熱30分鐘，在攪動板上混合20分鐘，并通過20微米的過濾器過濾而制得樣品1-3。通過將10mg核黃素加入100mL鹽水中，加熱，并通過0.2;微米的過濾器過濾而制得樣品4。通過將20mg核黃素加入100mL鹽水中，加熱，同時混合30分鐘，并通過0.2微米的過濾器過濾而制得樣品5。通過將5mg核黃素加入lOmL鹽水中，在60。C水浴加熱30分鐘，劇烈震蕩30秒，并通過0.2微米的過濾器過濾而制得樣品6。顯示了每種制備的核黃素組合物的濃度穩定性。每個實驗熱處理過的核黃素樣品的核黃素濃度都超過未處理的對照樣品。此外，儲存于環境溫度和大氣壓下時，該濃度在一段時間內保持穩定。表1<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>應理解對于本發明公開的目的可以對本發明形成各種改變和變化，這些改變和變化落入本發明的范圍之內。本領域技術人員可以形成顯而易見的各種其他改變，并且包括在在此公開的方法，化合物和組合物的精神中。說明書含有對專利，專利申請和出版物的各種引用，在此將其引入作為參考，用于所有的目的。權利要求1.一種將水性介質中的咯嗪濃度提高至超過咯嗪飽和點的方法，該方法包括將一定量的所述咯嗪加入所述水性介質中，其中咯嗪量超過所述咯嗪在1個大氣壓和22℃下的飽和點；將所述水性介質加熱至等于或大于80℃的溫度；和將所述水性介質冷卻來產生具有超過咯嗪飽和點的咯嗪濃度的水性介質。2.權利要求1的方法,其中在所述加熱步驟前加入咯溱。3.權利要求1的方法,其中在所述加熱步驟后加入咯-秦。4.權利要求1的方法，其中水性介質具有約4至約5的pH。5.權利要求1的方法，其中水性介質具有約80°C至約90°C的溫度。6.權利要求1的方法，其中水性介質進一步包括單價鹽。7.權利要求1的方法，其中咯嗪是核黃素。8.權利要求1的方法，進一步包括在至少120。C溫度及氣壓下將水性介質滅菌。9.一種滅活生物流體中病原體的方法，包括將包括至少120jiM可溶性咯嗪的組合物加入生物流體中來滅活生物流體中的生物病原體。10.權利要求9的方法，其中組合物含有至少250jLiM可溶性咯嗪。11.權利要求9的方法，其中組合物含有至少500jnM可溶性咯溱。12.權利要求9的方法，其中組合物具有約580jLiM可溶性咯溱的濃度。13.權利要求9的方法，其中所述制備步驟包括將一定量的所述咯溱加入所述水性介質中，其中咯嗪量超過所述咯溱在1個大氣壓和22。C下的飽和點；將所述水性介質加熱至等于或大于80°C的溫度；和將所述水性介質冷卻。14.權利要求9的方法，其中生物流體是血液制品。15.—種核黃素衍生物形式，其在525nm波長時具有等于或小于0.95的相關系數和在超過500認波長時不同于可溶性咯溱的作為濃度函數的吸光度曲線。16.權利要求15的核黃素衍生物形式，通過以下方法制得，將核黃素混入具有酸性pH和具有至少80。C溫度的水性介質中，然后冷卻核黃素溶液。17.用于處理血液制品的組合物，包括約150jaM至約580pM可溶性咯溱和單價鹽。18.權利要求16的組合物，其中可溶性咯噪的濃度為約580jaM。19.權利要求16的組合物，其中咯嗪是核黃素。20.權利要求16的組合物，進一步包括碳酸氫鈉。21.權利要求16的組合物，其中組合物具有約4至約5的pH。22.權利要求16的組備物，其中單價鹽提供了至少O.9%的鹽度。全文摘要提供了與使用常規技術制備的組合物相比，制備含有提高水平的可溶性咯嗪的組合物的方法。還提供了組合物和在溶液中具有較高溶解度的核黃素形式。文檔編號C07D475/14GK101360747SQ200780001510公開日2009年2月4日申請日期2007年1月24日優先權日2006年1月27日發明者E·T·漢森,R·P·古德里奇申請人:納維甘特生物技術有限責任公司