專利名稱：：多肽及相關化合物的透皮給藥系統的制作方法
技術領域：
：本發明涉及多肽及相關化合物的透皮給藥系統，通過將多肽轉化為帶正電荷的水溶性前藥，以及這些前藥在治療人或動物的多肽及相關化合物可治療的狀態中的治療用途。具體地說，本發明使多肽及相關化合物可快速穿透皮膚，并使它們可以經透皮給藥。
背景技術：
：所有的多肽都是聚合體，通過結合而構成多肽的單體是氮基酸。含有2-50個氨基酸殘基的肽鏈被總稱為多肽。如果肽鏈有超過50個氨基酸殘基，則被稱為蛋白質。多肽在所有生命體中都發揮極其多樣的作用。多肽類激素是最大的一類激素。不斷地有新的多肽激素被發現和合成。它們在生命控制過程中起著非常重要的作用。給小鼠注射1納克的促甲狀腺激素釋放激素可以提高甲狀腺從血液中對碘化物的攝取(R丄.Kisliuk,PrinciplesofMedicinalChemistry,4thEd.,W,O.Foye，etal.Eds.，Williams&Wilkins,4thEd.1995,p.606)。促吞噬素(Tuftsin,Thr-Lys-Pro-Arg)可刺激噬菌作用并促進抗體依賴的細胞毒作用(V.A.Najjar,Mol.Cell.Biochem.41,1,1981)，蛋氨酸腦啡月太(Tyr-Gly-Gly-Phe-Met)分離自腦和小腸，其作用與嗎啡相同，因其結合相同的受體且具有鎮痛作用(J.R.JaffeandW.R.Martin,inPharmacologicalBasisofTherapeutics,A,GGilman,etal"Eds.,NewYork,PergamonPress,1990,p.481)。催產素(Pierceetal"J.Biol.Chem.逃929,1952)、加壓素(Kammetal"J.Am.Chem.Soc.^，573,1928)、血管緊張素(J.C.GarrisonandM丄Peach,inPharmacologicalBasisofTherapeutics,A.G.Gilman,etal.,Eds.，NewYork,PergamonPress,1990，p,749)、胃泌激素(P.C.EmsonandB.E.B.Sandberg，A觀,Rep.Med.Chem"息31，1983)、生長激素抑制素(A.V.Schally,etal"Annu.Rev.Biochem.，42,89,1978)、強啡肽(M.GWeisskopf,etal.,Nature,巡，423，1993)、內皮素(A.M.Doherty,J.Med.Chem.,"93，1992)、分泌素(E.Jorper,Gastroenterology,157,1968)、降鈣素(M.V丄.Ray,etal.,Biotechnology,U,64,1993)、胰島素(F.Sanger,Br.Med.Bull"近183,1960)，以及其它許多激素都是多肽，其結構已知并已用于多種疾病的治療中。但是，多肽及相關化合物會被蛋白分解酶迅速分解。多肽在口服時，幾分鐘內就會被破壞。注射多肽給藥時會產生疼痛，很多時候為治療慢性病要經常到醫院注射，花費也增加。一種可以替代的給藥方式就是外用給藥。外用給藥有幾大優點。這種方法可以避免因肝臟和胃腸道的首過效應引起的藥物失活。它不需系統藥物暴露的情況下將藥物局部傳遞至目的作用位點并達到適當的局部濃度。Fishman(Fishman;Robert,美國專利號7,052,715)指出伴隨口服用藥產生的另一問題是，為了有效治療遠端位置的疼痛或炎癥，血液循環中的藥物濃度必須達到很高。這些濃度往往遠高于假設藥物能直接靶向作用于疼痛或受傷部位的實際所需。Yeager試圖通過滲透促進劑給藥PGR用于治療男性勃起功能障礙(Yeager,JamesL.美國專利號6,693,135)。SusanMilosovich等設計并合成了4-二甲基氨基丁酸睪酮酯鹽酸鹽(TSBH)，其具有一脂溶性的部分和一個在生理pH下以質子化形式存在的三級胺結構。他們發現這個前藥(TSBH)透過人體皮膚的速度是母藥(TS)的近60倍[SusanMilosovich,etal.,J.Pharm.Sci.，82,227(1993)〗。
發明內容技術問題多肽在生命體內扮演著極其多樣的作用，并且被用于治療多種疾病。但是，多肽及相關化合物會被蛋白水解酶迅速水解。多肽在口服時，它們在幾分鐘內就會被破壞。注射多肽給藥時會產生疼痛，很多時候為治療慢性病要經常到醫院注射，花費也增加。解決方案本發明涉及新型的帶有正電荷的多肽及相關化合物的制備以及它們的治療用途。這些多肽及相關化合物的前藥具有通式(1)"結構式l"所表示的結構結構式1其中，X代表O，S或NH;X!或Xn代表CO，SO，S02，PO(OR)，NO，或無；Zn或Z^代表H，CH3，C2H5，C3H7，CF3，C2F5或C3F7;Rn代表氨基酸的任一脂肪族側鏈，氨基酸的任一含有羥基或硫原子的側鏈，氨基酸的任一含有芳基的側鏈，氨基酸的任一含有氨基、咪唑基或胍基的側鏈，或氨基酸的任一含有羧基或酰胺基的側鏈，H，任一1-12個碳原子的烷基、l-12個碳原子的烷氧基、l-12個碳原子的烯基、l-12個碳原子的炔基，芳基或雜芳基，或者無；Yxl，Yx2或Yn代表H，任一1-12個碳原子的烷基、1-12個碳原子的垸氧基、1-12個碳原子的烯基、l-12個碳原子的炔基，芳基或雜芳基，或以下基團，8<formula>formulaseeoriginaldocumentpage9</formula>Rx4^^或無；Rxi，Rx2，Rx3，Rx4，Rx5或R^代表H，O，任一1-12個碳原子的烷基、1-12個碳原子的烷氧基、l-12個碳原子的烯基、l-12個碳原子的炔基，芳基或雜芳基，或無；A—代表C1—，Br-,F-，1—，AcO-，檸檬酸根或其它任何負離子；n=0，1，2，3，4，5，6，7，8，9，10;所有R，-(012)11-或-((:112)111-基團可以是支鏈或直鏈，可以包含C，H，O，S或N原子，可以有單鍵、雙鍵和三鍵。任何CH2基團可以被0，S或NH取代。多肽序列中的一個或多個氨基酸殘基可以被非天然氨基酸，如，^-氨基酸、2-萘基丙氨酸，以及任一烷基、垸氧基、烯基或炔基、芳基或雜芳基取代。多肽鏈上氨基酸的氨基和羧基可以通過內酰胺橋形成均環肽(homodeticcyclicpeptides)。半胱氨酸、同型半胱氨酸或其它氨基酸上的巰基可以通過二硫鍵橋形成雜環肽(heterodeticcyclicpeptides)。設計多肽及相關化合物的這些前藥有以下幾個原則1、前藥分子中必須有一個親脂性的部分和一個在生理pH值時以質子化形式存在的一級胺、二級胺或三級胺的結構、胍基、或單保護的胍基團(親水性部分)。2、每個多肽前藥應該只能有一個或兩個(最好是一個)在生理pH值時以質子化形式存在的一級胺、二級胺或三級胺基團、胍基、或單保護的胍基團(親水性部分)。3、一級胺、二級胺或三級胺、胍、或單保護的胍基團可以在多肽的N端、C端或側鏈。N端或C端是優選的位置。4、羧基、氨基、胍基或其它親水性基團可以用垸基、芳基或雜芳基以酯鍵或者酰胺鍵形式保護起來以提高多肽的脂溶性。以下是這些前藥的一些例子Ac-HN結構式29結構式3<formula>formulaseeoriginaldocumentpage10</formula>結構式4<formula>formulaseeoriginaldocumentpage10</formula>結構式5其中，R代表H，支鏈或直鏈，-(CH2)n-，其中，n=0，1，2,3，4，5，6，7，8，9,10;芳基或雜芳基；X4、X5、X6、X7、X8或X9代表CO，S02，PO(OR)，NO或無；R2，R3，R4，R5，Re，R7，Rs或Rs代表H，O，任一1-12個碳原子的烷基、1-12個碳原子的垸氧基、l-12個碳原子的烯基、l-12個碳原子的炔基，芳基或者雜芳基；A—代表C1—，Br—，F，I—，AcO—，檸檬酸根或其它仟何負離子；n=0，1，2，3，4，5，6，7,8，9，10;Ar代表苯基、2'-萘基，4-碘苯基，或其它芳基或者雜芳基；所有R，-(CH2)n-或-(CH2)m-基團可以是支鏈或直鏈，可以包含C，H，O，S或N原子，可以有單鍵、雙鍵和三鍵；任何CH2基團可以被O，S或NH取代。結構式6<formula>formulaseeoriginaldocumentpage11</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage12</formula>結構式10藥物無論是經過腸胃道消化系統還是其他途徑吸收，都需要以分子的形式穿過屏障膜。藥物需首先溶解，且如果藥物具有理想的生物藥學特性，它會通過高濃度的區域到低濃度的區域，跨過細胞膜進入血液或全身循環系統。所有的生物膜含有脂類作為主要成份。生物膜結構中起主導作用的分子都具有含有磷酸鹽的高極性的頭部結構，并且，在大多數情況下，兩條高度疏水的碳氫尾鏈。生物膜具有雙層結構，親水的頭部結構面向兩側的水相區域。非常親水的藥物(大多數的多肽)無法通過穿過生物膜的疏水層而非常疏水性的藥物因相似相容的原因作為生物膜的-一部分停留其中，從而不能有效進入內部的細胞質。本發明的目的是通過提高多肽及相關化合物穿過生物膜和皮膚屏障的速度，使其可通過透皮的方式給藥(外用給藥)。這些多肽及相關化合物的新型前藥在結構上有兩個共性它們都有一個親脂性部分(該親脂性部分可通過親脂性的醇形成從而保護羧基，以及通過親脂性的酸形成從而保護氨基、羥基或胍基或多肽上的其它親水基團)和一個在生理pH值時以質子化形式存在的一級胺、二級胺或三級胺的結構，胍基，或單保護的胍基(親水性部分)。這樣的水溶-油溶的平衡是藥物能有效穿過生物膜必需的條件[SusanMilosovich,etal.,J.Pharm.Sci.,82,227(1993)]。帶有正電荷的氨基大大提高了藥物在水中的溶解度，親脂性部分可以幫助前藥進入親脂性的生物膜和皮膚屏障。當這些新型的前藥以溶液、噴霧、乳液、軟膏、乳膠或凝膠等劑型透皮給藥時，它們能迅速地溶解在皮膚表面的水分中。這些前藥分子中氨基上的正電荷會與細胞膜的磷酸鹽端基的負電荷鍵合。因此，這些前藥在生物膜外側的局部濃度很高從而有助于這些前藥通過高濃度區域到低濃度的區域。當這些前藥分子進入到生物膜以后，親水性部分會推動前藥進入細胞質，一種半液態的濃縮水溶液或懸浮液。某些前藥通過人體皮膚中的穿透速度在體外通過改進的Fmnz池測量，其中人體皮膚分離自大腿部位前面或后面的人體皮膚組織(360-400/xm厚)。接受溶液由2ml含有2%的牛血清球蛋白的生理鹽水組成并以600轉/分的速度攪拌。這些前藥及其母藥穿過皮膚的累積總量對時間的關系是用特定的高效液相色譜法來測定。以含有10。/。這些前藥和多肽的0.2mlpH7.4的磷酸鹽13緩沖溶液(0.2M)作為供體溶液，結果如圖l所示。計算得到，乙酰基-酪氨酸(乙酰基)-甘氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸-蛋氨酸二乙氨基乙酯鹽酸鹽、鹽酸鹽二甲氨基丁羰基-酪氨酸(乙酰基)-甘氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸-蛋氨酸正丁酯、環(1，6)-乙酰基-正亮氨酸-天冬氨酸-組氨酸-苯丙氨酸-精氨酸(二乙酰基)-色氨酸-賴氨酸二乙氨基乙酯鹽酸鹽、環(1,6)-乙酰基-正亮氨酸-天冬氨酸-組氨酸-D-苯丙氨酸(4-碘)-精氨酸(乙酰基)-色氨酸-賴氨酸酰胺鹽酸鹽、環(1,6)-乙酰基-正亮氨酸-天冬氨酸-組氨酸-D-丙氨酸(2-萘基)-精氨酸-色氨酸-賴氨酸酰胺鹽酸鹽、乙酰基-纈氨酸-脯氨酸-甘氨酸-脯氨酸-精氨酸(二乙酰基)二乙氨基乙酯鹽酸鹽、乙酰基-酪氨酸-甘氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸-蛋氨酸、環(1,6)-乙酰基-正亮氨酸-天冬氨酸-組氨酸-苯丙氨酸-精氨酸-色氨酸-賴氨酸、環(1,6)-乙酰基-正亮氨酸-天冬氨酸-組氨酸-D-苯丙氨酸(4-碘)-精氨酸-色氨酸-賴氨酰胺和纈氨酸-脯氨酸-甘氨酸-脯氨酸-精氨酸透過人體皮膚的表觀穿透值力、另ij為0.52mg、0.55mg、0.46mg、0.34mg、0.50mg、0.60mg、0.001mg、0.001mg、0.001mg和0.001mg/cm2/h。結果說明前藥透過人體皮膚的速度比多肽及相關化合物快了340~600倍。結果說明二垸基胺基乙基基團上的正電荷對藥物穿過生物膜和皮膚屏障非常重要。一個好的前藥在血漿中應該能回到母藥。我們發現本發明中的多肽前藥在人的血漿中能以較高的產率迅速回到母藥多肽的結構。將1ml含有20mg乙酰基-酪氨酸(乙酰基)-甘氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸-蛋氨酸二乙氨基乙酯鹽酸鹽的全血在37T保溫30分鐘。混合液用HPLC分析。實驗測到3%的乙酰基-酪氨酸(乙酰基)-甘氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸-蛋氨酸二乙氨基乙酯鹽酸鹽、2%的乙酰基-酪氨酸-甘氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸-蛋氨酸二乙氨基乙酯鹽酸鹽、8%的乙酰基-酪氨酸-甘氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸-蛋氨酸、60%的酪氨酸-甘氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸-蛋氨酸和27%其它副產物(氨基酸、二肽、三肽、四肽)。在鹽酸鹽二甲氨基丁羰基-酪氨酸(乙酰基)-甘氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸-蛋氨酸丁酯實驗中測到5%鹽酸鹽二甲氨基丁羰基-酪氨酸(乙酰基)-甘氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸-蛋氨酸丁酯、6%的二甲氨基丁羰基-酪氨酸-甘氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸-蛋氨酸丁酯、10%的二甲氨基丁羰基-酪氨酸-甘氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸-蛋氨酸、55%的酪氨酸-甘氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸-蛋氨酸和24%的其它副產物。在環(1，6)-乙酰基-正亮氨酸-天冬氨酸-組氨酸-苯丙氨酸-精氨酸(二乙酰基)-酪氨酸-賴氨酸二乙氨基乙酯鹽酸鹽的實驗中測到4%的環(1，6)-乙酰基-正亮氨酸-天冬氨酸-組氨酸-苯丙氨酸-精氨酸(二乙酰基)-酪氨酸-賴氨酸二乙氨基乙酯鹽酸鹽、8%的環(1，6)-乙酰基-正亮氨酸-天冬氨酸-組氨酸-苯丙氨酸-精氨酸(乙酰基)-酪氨酸-賴氨酸、10%的環(1，6)-正亮氨酸-天冬氨酸-組氨酸-苯丙氨酸-精氨酸-酪氨酸-賴氨酸、45%的環(1，6)-乙酰基-正亮氨酸-天冬氨酸-組氨酸-苯丙氨酸-精氨酸-酪氨酸-賴氨酸和33%的其它副產物。結果顯示大多數多肽前藥回到了母肽的結構，說明多肽的透皮給藥系統是成功的。腸抑素(Enterostatins)[纈氨酸-腩氨酸-天冬氨酸-脯氨酸-精氨酸(VPDPR)，纈氨酸-脯氨酸-甘氨酸-脯氨酸-精氨酸(VPGPR)和丙氨酸-脯氨酸-甘氨酸-脯氨酸-精氨酸(APGPR)]是五肽，衍生自經胰蛋白酶剪切的輔脂肪酶前酶(procolipase)的NH2端，屬于腸-腦多肽家14族。它們調控脂肪的攝入，可用于治療肥胖(Erlanson-AlbertssonC,YorkD，Obes.Rev.1997Jul;5(4):360-72andSorhedeM,MeiJ,Erlanson-AlbertssonC.,JPhysiol.87:273—275,1993)。在饑餓過夜的Osbome-Mendd大鼠中腹腔注射纈氨酸-脯氨酸-天冬氨酸-脯氨酸-精氨酸，產生了劑量依賴性的攝食減少。在高脂食物喂養的大鼠中觀察到了攝食抑制，但在高碳水化合物低脂食物喂養的大鼠中未觀察到(OkadaS.etal.尸/ywo/5e/wv.,1991Jun;49(6):1185-9)。在黑暗的喂食期間開始時，將溶于0.5ml水中的5mg/kg的乙酰基-纈氨酸-脯氨酸-天冬氨酸(氧乙基)-脯氨酸-精氨酸(二乙酰基)-二乙氨基乙酯鹽酸鹽透皮給藥于大鼠背部(每組5只大鼠，一組為饑餓過夜后供給食物的大鼠，另一組為自由采食的大鼠)。實驗觀察到脂肪攝取的選擇性抑制。黑素細胞皮質激素II(melanocortinII)是一個內酰胺類的環肽(cycliclactampeptides),即環(1，6)-乙酰基-正亮氨酸-天冬氨酸-組氨酸-苯丙氨酸-精氨酸-色氨酸-賴氨酸。它是帕拉丁公司(Palatin,AMEX:PTN)的一個新型候選藥物，用于治療男性和女性性功能障礙。作為黑素細胞皮質激素激動劑這一新的藥物種類的第一個藥物，黑素細胞皮質激素II有望有效治療男性勃起功能障礙(ED)和女性性功能障礙而且不會產生其它ED藥物常見的心血管副作用。黑素細胞皮質激素n通過與中樞神經系統相關的作用機制起效，而不是直接作用于血管系統。因此，它的安全性和有效性顯著優于目前的產品。本發明中的新型前藥能以非常快的速度穿過人的皮膚(-0.3-0.5mg/h/cm2)，而且為治療勃起功能障礙或提高女性性興奮提供了一種幾乎沒有副作用的方法。將溶于0.2mlpH值7.0的磷酸鹽緩沖溶液(0.1M)的環(1,6)-乙酰基-正亮氨酸-天冬氨酸-組氨酸-苯丙氨酸-精氨酸(二乙酰基)-色氨酸-賴氨酸二乙胺基乙酯鹽酸鹽(肽A)和溶于0.2mlpH值7.0的磷酸鹽緩沖溶液(0.1M)的環(l，6)-乙酰基-正亮氨酸-天冬氨酸-組氨酸-苯丙氨酸-精氨酸(硝基)-色氨酸-賴氨酸二乙胺基乙酯鹽酸鹽(肽B)以2mg/kg的劑量涂于雄性大鼠(30只)的背部，每天一次連續五天。實驗結果顯示與未給藥肽A或肽B的大鼠相比，給藥肽A的大鼠和給藥肽B的大鼠的性沖動分別增加了5倍和6倍，給藥肽A的大鼠和給藥肽B的大鼠性交次數都增加了3倍。將溶于0.2mlpH值7.0的磷酸鹽緩沖溶液(0.1M)的等量的環(l,6)-乙酰基-正亮氨酸-天冬氨酸-組氨酸-苯丙氨酸-精氨酸(雙乙酰基)-色氨酸-賴氨酸二乙氨基乙酯鹽酸(肽A)和環(1,6)-乙酰基-正亮氨酸-天冬氨酸-組氨酸-苯丙氨酸-精氨酸(硝基)-色氨酸-賴氨酸二乙氨基乙酯鹽酸鹽(肽B)透皮給藥于雄性大鼠(30只)和雌性大鼠(30只)的背部，每天一次連續5天，結果顯示與不用藥的大鼠相比，給藥肽A或給藥肽B的大鼠的性沖動增加了6倍，性交配次數增加了5倍。阿片肽，如，蛋氨酸-腦啡肽(酪氨酸-甘氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸-蛋氨酸)，亮氨酸-腦啡肽(酪氨酸-甘氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸-亮氨酸)，酪氨酸-D-丙氨酸-甘氨酸-N-甲基-苯丙氨酸-蛋氨醇(氧)(H-Tyr-D-Ala-Gly-N-Me-Phe-Met(O)-OL)，酪氨酸-D-丙氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸-亮氨酸及其它許多多肽都顯示出類嗎啡樣的鎮痛作用。對小鼠腹腔注射醋酸溶液后出現的扭體次數進行計數，并基于空白組計算抑制率。在注射醋酸溶液30分鐘前，在小鼠頸部透皮給藥酪氨酸(乙酰基)-D-丙氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸-亮氨酸正己酯鹽酸鹽(10mg/kg，B)，乙酰基-酪氨酸(乙酰基)-D-丙氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸-亮氨酸二乙胺基乙乙酯鹽酸鹽(10mg/kg，C)和酪氨酸(乙酰基)-D-丙氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸-蛋氨醇(氧)鹽酸鹽(10mg/kg，D)。A組為對照組。結果見表l所示。表1.腦啡肽及相關'f七合物的前藥對扭體的抑制率<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>上述結果顯示多肽前藥的透皮給藥系統可有效治療肥胖和疼痛，以及治療男性和女性的性功能障礙。多肽及相關化合物親水性高，它們很難穿過皮膚和膜屏障。當口服多肽時，多肽及相關化合物會在幾分鐘內被胃腸道中的蛋白水解酶迅速分解。注射多肽給藥時會產生疼痛，很多時候為治療慢性病要經常到醫院注射，花費也增加。當多肽前藥局部涂于皮膚給藥時，它們能迅速地溶于皮膚表面的水分中。這些前藥分子的氨基上的正電荷可與皮膚膜的磷酸鹽端基的負電荷鍵合。因此，膜外面的藥物局部濃度很高，有利于藥物通過高濃度區域到低濃度的區域。這些前藥分子進入生物膜后，前藥分子中的親水性部分將推動前藥進入細胞質中。上述通式(l)"結構式l"所表示的化合物可以通過標準的多肽合成方法合成。通式(4-C)"結構式4-C"中的環肽及相關化合物的制備中，多肽鏈可通過標準的多肽合成方法合成，亮氨酸側鏈可通過2-，或4-Pyoc保護基團保護，多肽的環化可在樹脂上完成。優點本發明中的多肽及相關化合物的這些前藥結構中都有一個脂溶性部分和一個水溶性部分(在生理pH值時以質子化形式存在的胺基)。這些前藥中帶正電荷的氨基有兩大好處。首先，它使這些前藥可溶于水；當這些新型前藥以諸如溶液、噴劑、乳液、軟膏、乳膠或凝膠等劑型透皮給藥時，其能迅速與皮膚、眼睛、生殖部位、嘴、鼻子或身體其他部位表面的水分迅速混合。第二，這些前藥氨基上的正電荷可與生物膜的磷酸鹽端基負電荷鍵合。因此，生物膜外側的局部濃度很高從而促進這些前藥通過高濃度區域到低濃度區域。前藥分子的親脂性部分(通過對極性基團用親脂性的烷基修飾)有助于藥物進入皮膚膜。當這些前藥分子進入生物膜后，親水性部分會推動前藥分子進入細胞質，一種半液態的濃縮水溶液或懸浮液。由于在皮膚、眼睛、生殖部位、嘴巴、鼻子或身體其它部位停留的時間很短，前藥不會引起皮膚、眼睛、生殖部位、嘴巴、鼻子或身體其它部位的瘙癢、灼燒或疼痛。實驗結果顯示超過40%的前藥可以在幾分鐘內變回母肽結構。前藥甚至可以很容易地穿過血腦屏障。多肽及相關化合物的透皮給藥系統可使多肽激素在醫藥領域得到應用。這些前藥透皮給藥的另一大好處是給藥更加方便，特別是對兒童給藥。圖l:通過Franz池(n=5)中分離的人體皮膚組織的乙酰基-酪氨酸(乙酰基)-甘氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸-蛋氨酸-二乙胺基乙酯鹽酸鹽、一甲氨基丁羰基-酪氨酸(乙酰基)-甘氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸-蛋氨酸丁酯、環(1，6)-乙酰基-正亮氨酸-天冬氨酸-組氨酸-苯丙氨酸-精氨酸(二乙酰基)-色氨酸-賴氨酸二乙胺基乙酯鹽酸鹽、環(1,6)乙酰基-正亮氨酸-大冬氨酸-組氨酸-D-苯丙氨酸(4-碘)-精氨酸(乙酰基)-色氨酸-賴氨酰胺鹽酸鹽、環(1,6)乙酰基-正亮氨酸-天冬氨酸-組氨酸-D-丙氨酸(2-萘基)-精氨酸-色氨酸-賴氨酰胺鹽酸鹽，乙酰基-纈氨酸-脯氨酸-甘氨酸-脯氨酸-精氨酸(雙乙酰基)二乙胺基乙酯鹽酸鹽、乙酰基-酪氨酸-甘氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸-蛋氨酸、環(1,6)乙酰基-正亮氨酸-天冬氨酸-組氨酸-苯丙氨酸-精氨酸-色氨酸-賴氨酸、環(1,6)乙酰基-正亮氨酸-天冬氨酸-組氨酸-D苯內氨酸(4-碘)-精氨酸-色氨酸-賴氨酰胺和纈氨酸-脯氨酸-甘氨酸-脯氨酸-精氨酸的累積總量。在每個例子中，載體溶液均為pH7.4的磷酸鹽緩沖溶液(0.2M)。圖2:結構式l。其中，X代表O，S或NH;X！或Xn代表CO，SO,S02，PO(OR)，NO，或無；Zn或Zni代表H，CH3，C2H5，C3H7，CF3，(3^5或<:^7;Rn代表氨基酸的任-脂肪族側鏈，氨基酸的任一含有羥基或硫原子的側鏈，氨基酸的任一芳基側鏈，氨基酸的任一含有氨基、咪唑基或胍基的側鏈，或氨基酸的任一含有羧基或酰胺基的側鏈，任一含有1-12個碳原子的烷基、l-12個碳原子的垸氧基、l-12個碳原子的烯基，l-12個碳原子的塊基，芳基或雜芳基，或者無；Yxl，Yx2或Y,'代表H，任一含有1-12個碳原子的烷基、1-12個碳原子的l-12個碳原子的垸氧基、l-12個碳原子的烯基、l-12個碳原了的炔基，芳基或雜芳基，Rx3Rx4RxsN+A-或無；Rxl，Rx2，Rx3，Rx4，Rx5或R^代表H，O，任一1-12個碳原子的垸基、l-12個碳原子的烷氧基、l-12個碳原子的烯基、l-12個碳原子的炔基，芳基或雜芳基或無；A-代表Cr，Br—，F，I—,AcCT，擰檬酸根或其它任何負離子；n=0，1，2，3，4，5，6，7，8,9，10……；所有R,-(CH2)n-或-(CH2)m-基團可以是支鏈或直鏈，可以包含C，H，O，S或N原子，可以有單鍵、雙鍵和二鍵；任何CH2基團可以被0，S或NH取代；多肽序列中一個或多個氨基酸殘基可以被非天然氨基酸，如/3-氨基酸，2-萘基丙氨酸，和任烷基、烷氧基、烯基或炔基，芳基或雜芳基取代。多肽鏈上氨基酸的氨基和羧基可以通過內酰胺橋形成均環肽。半胱氨酸、同型半胱氨酸或其它氨基酸上的巰基可以通過二硫鍵橋形成雜環肽。最佳實施方式乙酰基-纈氨酸-脯氨酸-天冬氨酸(氧乙基)-脯氨酸-精氨酸(雙乙酰基)二乙胺基乙酯鹽酸鹽的合成1.精氨酸(雙乙酰基)-二乙胺基乙酯的合成。30.8gZ-精氨酸溶解于500ml丙酮中。將200ml20y。的氫氧化鈉溶液加入反應混合液中。將40g醋酸酐滴加至混合液中。混合溶液在室溫下攪拌2小時。蒸干溶劑。殘留物用500ml乙酸乙酯提取。乙酸乙酯溶液用水洗三次，每次100ml。乙酸乙酯層用無水硫酸鈉干燥。蒸干乙酸乙酯溶液。殘留物(Z-精氨酸(雙乙酰基)，30g)溶解于300ml乙腈中。混合液用冰水浴冷卻到0°C。將12gN，N-二乙胺基乙醇、2g4-二甲氨基吡啶，和22gl,3-二環己基碳酰亞胺加入至反應混合液中。17混合液在0。C攪拌1小時，然后室溫攪拌過夜。過濾除去固體，并把溶液蒸干。殘留物用乙酸乙酯提取兩次，每次250ml。乙酸乙酯溶液用5%的碳酸氫鈉溶液洗一次，每次500ml，以及用水洗三次，每次100ml。乙酸乙酯溶液用無水硫酸鈉干燥。溶液蒸干。殘留物[Z-精氨酸(雙乙酰基)二乙胺基乙酯，28g]溶解于300ml甲醇中。將2g10%的Pd/C加入至溶液。混合液在氫氣氣氛中室溫攪拌10小時。過濾除去Pd/C。溶液蒸干，得到22g精氨酸(雙乙酰基)二乙胺基乙酯(H-Arg(di-Ac)-OCH2CH2N(CH2CH3)2)。2.叔丁氧基碳酰基-天冬氨酸(氧乙基)-脯氨酸-N-丁二酰亞胺(Boc-Asp(OEt)-Pro-OSu)的合成。將15gL-脯氨酸溶解于300ml10%的碳酸氫鈉溶液。接著將150ml丙酮和36g叔丁氧基碳酰基-天冬氨酸(氧乙基)-丁二酰亞胺加入至混合液。混合溶液在室溫攪拌5小時。反應溶液用300ml乙醚洗一次。將500ml乙酸乙酯加入至水溶液層。用冰冷卻的3NHC1將乙酸乙酯和水的混合液pH值調至2.4-2.5。收集乙酸乙酯層，并用水洗三次，每次300ml。有機溶液用無水硫酸鈉干燥。蒸干溶液。將25g殘留物(叔丁氧基碳酰基-天冬氨酸(氧乙基)-脯氨酸)和llgN-羥基丁二酰亞胺溶解于300ml二氯甲垸中。混合溶液冷卻到0°C。然后將16gl,3-二環己基碳酰亞胺加入至反應混合液。混合液在0。C攪拌1小時。過濾除去固體副產物。二氯甲垸溶液用200ml5。/。的碳酸氫鈉溶液洗一次和水洗三次，每次200ml。有機溶液用無水硫酸鈉干燥。蒸干溶液。得到28g叔丁氧基碳酰基-天冬氨酸(氧乙基)-脯氨酸-N-丁二酰亞胺。3.天冬氨酸(氧乙基)-脯氨酸-精氨酸(雙乙酰基)-二乙胺基乙酯.雙三氟醋酸鹽的合成。將22g精氨酸(雙乙酰基)-二乙胺基乙酯溶解于30011115%碳酸氫鈉水溶液中。反應混合液中加入150ml含有24g叔丁氧基碳酰基-天冬氨酸(氧乙基)-脯氨酸-N-丁二酰亞胺的丙酮。混合溶液在室溫攪拌5小時。混合液中加入500ml乙酸乙酯。乙酸乙酯層用水洗三次，每次100ml。有機溶液用無水硫酸鈉干燥。蒸干溶液。殘留物溶解在250ml二氯甲垸中。混合液中加入250ml三氟醋酸，混合溶液攪拌30分鐘。將混合溶液蒸干。得到32g天冬氨酸(氧乙基)-脯氨酸-精氨酸(雙乙酰基)-二乙胺基乙酯.雙三氟醋酸鹽(H-Asp(OEt)-Pro-Arg(di-Ac)-CH2CH2N(CH2CH3)2.2TFA)。4.乙酰基-纈氮酸-脯氨酸-N-丁二酰亞胺的合成。將15gL-脯氨酸溶解于300mllOy。的碳酸氫鈉溶液。反應混合液中加入溶解了26g乙酰基-纈氨酸-N-羥基丁二酰亞胺的丙酮溶液。混合液在室溫攪拌5小時。混合液用300ml乙醚洗一次。將500ml乙酸乙酯加入至水層。混合液的pH值用冰冷卻的3NHCl調至2.4-2.5。收集乙酸乙酯層，用水洗三次，每次300ml。有機溶液用無水硫酸鈉干燥。蒸干有機溶液。將20g殘留物(乙酰基-纈氨酸-脯氨酸)和11gN-羥基丁二酰亞胺溶解于300ml二氯甲垸。混合溶液冷卻到0°C。將16g1，3-二環己基碳酰亞胺加入至反應混合液。混合溶液在0。C攪拌1小時，室溫攪拌l小時。過濾除去固體副產物。二氯甲烷溶液用200ml5。/。碳酸氫鈉水溶液洗一次和200ml水洗三次。有機溶液用無水硫酸鈉干燥。蒸干溶劑。得到20g乙酰基-纈氨酸-脯氨酸-N-丁二酰亞胺(Ac畫Val-Pro-OSu)。185.乙酰基-纈氨酸-脯氨酸-天冬氨酸(氧乙基)-脯氨酸-精氨酸(雙乙酰基)二乙胺基乙酯鹽酸鹽的合成(Ac-Val-Pro-Asp(OEt)-Pro-Arg(di-Ac)-OCH2CH2N(CH2CH3)2.HCl)。將31g天冬氨酸(氧乙基)-脯氨酸-精氨酸(雙乙酰基)二乙胺基乙酯雙三氟醋酸鹽溶于300ml10%的碳酸氫鈉水溶液。將150ml丙酮和15g乙酰基-纈氨酸-脯氨酸-N-丁二酰亞胺加入至反應混合溶液。混合液室溫攪拌5小時。將500ml乙酸乙酯加入至混合液。有機層用水洗三次，每次100ml。乙酸乙酯層用無水硫酸鈉干燥。過濾除去硫酸鈉。將含有3.5g鹽酸氣的二氧六環(50ml)加入至乙酸乙酯溶液。過濾收集固體，并用乙醚洗三次，每次50ml。干燥后得到20克易吸濕的目標產物。水中的溶解度150mg/ml。元素分析C39H66ClN9On;MW:872.45。理論值(%):C:53.69;H:7.62;Cl:4.06;N:14.45;0:20.17;實測值(%)53.61;H:7.67;Cl:4.10;N:14,40，0:20.22。質譜m/e:836.4;m/e+l:836,4。實施方案乙酰基-酪氨酸(乙酰基)-甘氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸-蛋氨酸二乙胺基乙酯鹽酸鹽的合成(Ac-Tyr(Ac)-Gly-Gly-Phe-Met-0CH2CH2N(CH2CH3)2.HC1).1.蛋氨酸二乙胺基乙酯三氟醋酸鹽(H-Met-OCH2CH2N(CH2CH3)2.TFA)的制備。將25g叔丁氧基碳酰基-蛋氨酸溶解于300ml二氯甲烷中。混合物用冰水浴冷卻到0。C。反應混合液中加入12gN,N-二乙胺基乙醇，2g4-二甲基氨基吡啶和22gl,3-二環己基碳酰亞胺。反應混合液0。C攪拌1小時，然后室溫攪拌過夜。過濾除去固體副產物，二氯甲垸溶液用500ml5。/。碳酸氫鈉洗一次和用水洗三次，每次100ml。乙酸乙酯溶液用無水硫酸鈉干燥。蒸干溶液。殘留物[叔丁氧基碳酰基-蛋氨酸二乙胺基乙酯，30g]溶解于250ml二氯甲烷。250ml三氟醋酸加入至混合液，攪拌混合液30分鐘。溶液蒸干。得到26g蛋氨酸二乙胺基乙酯三氟醋酸鹽。2.叔丁氧基碳酰基-甘氨酸-苯丙氨酸-N-丁二酰亞胺的制備。將20gL-苯丙氨酸溶解于300ml10%的碳酸氫鈉水溶液。150ml丙酮和28g叔丁氧基碳酰基-甘氨酸-N-丁二酰亞胺加入至反應混合液。混合液室溫攪拌5小時。混合液用300ml乙醚洗一次。將500ml乙酸乙酯加入至水層。混合液的pH值用冰冷卻的3NHCl調至2.4-2.5。收集乙酸乙酯層，并用水洗三次，每次300ml。有機溶液用無水硫酸鈉干燥。蒸干溶液。將22g殘留物(叔丁氧基碳酰基-甘氨酸-苯丙氨酸)和10gN-羥基丁二酰亞胺溶解在300ml二氯甲垸中。混合液冷卻至0°C。將15g1,3-二環己基碳酰亞胺加入至反應混合液。混合液在0°C攪拌1小時。過濾除去固體副產物。二氯甲烷溶液用200ml5。/。的碳酸氫鈉溶液洗一次和用水洗三次，每次200ml。有機溶液用無水硫酸鈉干燥。蒸干溶液。得到25g叔丁氧基碳酰基-甘氨酸-苯丙氨酸-N-丁二酰亞胺。3.甘氨酸-苯丙氨酸-蛋氨酸-二乙胺基乙酯三氟醋酸鹽的制備。25g蛋氨酸-二乙胺基乙酯三氟醋酸溶解在300ml5%的碳酸氫鈉溶液中。反應混合液中加入150ml含有22g叔丁氧19基碳酰基-甘氨酸-苯丙氨酸-N-羥基丁二酰亞胺的丙酮溶液。混合溶液室溫攪拌5小時。500ml乙酸乙酯加入混合液。乙酸乙酯溶液用水洗三次，每次100ml。有機溶液用無水硫酸鈉干燥。蒸干溶液。殘留物溶解在250ml二氯甲烷中。將200ml三氟醋酸加入至混合液，并攪拌30分鐘。混合液蒸干。得到25g甘氨酸-苯丙氨酸-蛋氨酸-二乙胺基乙酯三氟醋酸±卜4.乙酰基-酪氨酸(乙酰基)-甘氨酸-N-丁二酰亞胺的制備。11gL-甘氨酸溶解于300ml10%的碳酸氫鈉溶液。將150ml丙酮和36g乙酰基-酪氨酸(乙酰基)-N-羥基丁二酰亞胺加入至反應混合液。混合溶液室溫攪拌5小時。混合溶液用300ml乙醚洗一次。水層加入500ml乙酸乙酯。混合溶液的pH值用冰冷卻的3NHC1調至2.4-2.5。收集乙酸乙酯層，并用水洗三次，每次300ml。有機溶液用無水硫酸鈉干燥。蒸干有機溶液。28g殘留物(乙酰基-酪氨酸(乙酰基)-甘氨酸)和13gN-羥基丁二酰亞胺溶解于300ml二氯甲垸。混合溶液冷卻至0。C。18gl,3-二環己基碳酰亞胺加入反應混合溶液。混合液在0。C攪拌1小時。過濾除去固體副產物。二氯甲烷溶液用200ml5。/。的碳酸氫鈉洗一次和用水洗三次，每次200ml。有機溶液用無水硫酸鈉干燥。蒸干溶液。得到20g乙酰基-酪氨酸(乙酰基)-甘氨酸-N-丁二酰亞胺。5.乙酰基-酪氨酸(乙酰基)-甘氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸-蛋氨酸二乙胺基乙酯鹽酸鹽的合成。24g甘氨酸-苯丙氨酸-蛋氨酸二乙胺基乙酯三氟醋酸鹽溶解于300ml10%的碳酸氫鈉溶液。將150ml丙酮和15g乙酰基-酪氨酸(乙酰基)-甘氨酸-N-丁二酰亞胺加入至反應混合溶液。混合液室溫攪拌5小時。500ml乙酸乙酯加入至混合溶液。有機層用水洗三次，每次100ml。乙酸乙酯層用硫酸鈉干燥。過濾除去硫酸鈉。將含有3.5g鹽酸氣的二氧六環溶液(50ml)加入至乙酸乙酯溶液。收集固體，并用乙醚洗三次，每次50ml。干燥后得到18g易吸濕的目標產物。水中的溶解度200mg/ml;元素分析C37H53C1N609S;分子量793.37。理論值(％):C:56.01;H:6.73;Cl:4.47;N:10.59;0:18.15;S:4.04。實測值(%):C:55.96;H:6.76;Cl:4.52;N:10.54，0:18.19;S:4.03。質譜:m/e:757.4;m/e+l:758.4。乙酰基-纈氨酸-脯氨酸-甘氨酸-脯氨酸-精氨酸(雙乙酰基)二乙胺基乙酯鹽酸鹽的制備(Ac-Val-Pro-Gly-Pro-Arg(diAc)-OCH2CH2N(CH2CH3)2.HCl)1.叔丁氧基碳酰基-甘氨酸-脯氨酸-N-丁二酰亞胺的制備。15gL-脯氨酸溶解于300ml10%的碳酸氫鈉溶液。將150ml丙酮和27.2g叔丁氧基碳酰基-甘氨酸-N-丁二酰亞胺加入至反應混合溶液。混合液室溫攪拌5小時。混合液用300ml乙醚洗一次。水層加入500ml乙酸乙酯。混合溶液的pH值用冰冷卻的3NHC1調至2.4-2.5。收集乙酸乙酯層，并用水洗三次，每次300ml。有機溶液用無水硫酸鈉干燥。蒸干溶劑。將21g殘留物(叔丁氧基碳酰基-甘氨酸-脯氨酸)和11gN-羥基丁二酰亞胺溶解于300ml二氯甲垸。混合液冷卻至0°C。將17g1，3-二環己基碳酰亞胺加入至反應溶液。混合液在0°C攪拌1小時。過濾20除去固體副產物。二氯甲烷溶液用200ml5。/。的碳酸氫鈉水溶液洗一次和用水洗三次，每次200ml。有機溶液用無水硫酸鈉干燥。蒸干溶劑。得到23g叔丁氧基碳酰基-甘氨酸-脯氨酸-N-丁二酰亞胺。2.甘氨酸-脯氨酸-精氨酸(雙乙酰基)-二乙胺基乙酯雙三氟醋酸鹽的合成。22g精氨酸(雙乙酰基)二乙胺基乙酯溶解于300ml5%的碳酸氫鈉溶液。反應混合液中加入150ml含有20g叔丁氧基碳酰基-甘氨酸-脯氨酸-N-丁二酰亞胺的丙酮溶液。混合溶液室溫攪拌5小時。混合溶液中加入500ml乙酸乙酯。乙酸乙酯溶液用水洗三次，每次100ml。有機溶液用無水硫酸鈉干燥。過濾除去硫酸鈉。蒸干溶劑。殘留物溶解在250ml二氯甲垸中。將250ml三氟醋酸加入至混合溶液并攪拌30分鐘。混合溶液蒸干。得到28g甘氨酸-脯氨酸-精氨酸(雙乙酰基)二乙胺基乙酯雙三氟醋酸鹽。3.乙酰基-纈氨酸-脯氨酸-甘氨酸-脯氨酸-精氨酸(雙乙酰基)-二乙胺基乙酯鹽酸鹽的合成。26g甘氨酸-脯氨酸-精氨酸(雙乙酰基)二乙胺基乙酯雙三氟醋酸鹽溶于300mllO。/。的碳酸氫鈉溶液。將150ml丙酮和15g乙酰基-纈氨酸-脯氨酸-N-丁二酰亞胺加入至反應混合液。混合溶液室溫攪拌5小時。將500ml乙酸乙酯加入至混合溶液。有機層用水洗三次，每次100ml。乙酸乙酯層用無水硫酸鈉干燥。過濾除去硫酸鈉。將含有3.5g鹽酸氣的二氧六環(50ml)加入至乙酸乙酯溶液。收集固體，并用乙醚洗三次，每次50ml。干燥后得到18g易吸濕的目標產物。水中的溶解度150mg/ml;元素分析C35H6()C1N909;分子量786.36。理論值(%)C:53.46;H:7.69;Cl:4.51;N:16.03;0:18.31;實測值(％)C:53.43;H:7.73;Cl:4.55;N:16.01，0:18.29。質譜m/e:750.4;m/e+l:751.4。環(1,6)-乙酰基-正亮氨酸-天冬氨酸-組氨酸-苯丙氨酸-精氨酸(雙乙酰基)-色氨酸-賴氨酸二乙胺基乙酯鹽酸鹽的合成(Cycl0(1,6)-Ac-Nle-Asp-His-Phe-Arg(diAc)-Trp-Lys-OCH2CH2N(CH2CH3)2.HCl)1.乙酰基-正亮氨酸-天冬氨酸(9-芴甲醇酯)的合成。43g天冬氨酸(9-芴甲醇酯)三氟醋酸鹽(H-Asp(OFm)-OH.TFA)和27g乙酰基-正亮氨酸-N-丁二酰亞胺懸于300ml丙酮中。將300ml5%的碳酸氫鈉溶液加入至反應混合液。混合溶液室溫攪拌過夜。混合溶液用300ml乙醚洗一次。將500ml乙酸乙酯加入水層。混合溶液的pH值用冰冷卻的3NHC1調至2.4-2.5。收集乙酸乙酯層，并用水洗三次，每次300ml。有機溶液用無水硫酸鈉干燥。蒸干溶液。得到42g乙酰基-正亮氨酸-天冬氨酸(9-芴甲醇酯)[Ac-Nle-Asp(OFm)-OH]。2.9-荷甲氧碳酰基-色氨酸-賴氨酸(4-Pyoc)的合成。根據參考文獻(H.KunzandS.Bimbach,TetrahedronLett.,21,3567，1984;H.KunzandR.Barthels,Angew.Chem.,Int.Ed.Engl"22,783,1983)制備賴氨酸(4-Pyoc)[H-Lys(4墨Pyoc)-0H]。33g賴氨酸(4-Pyoc)懸于300ml5%的碳酸氫鈉溶液中。將300ml丙酮和52g芴甲氧碳酰基-色氨酸-N-丁二酰亞胺加入至反應混合溶液。混合液室溫攪拌過夜。混合溶液加入500ml乙醚洗一次。將500ml乙酸乙酯加入至混合液，混合溶液的pH值用冰冷卻的3N鹽酸調至2.2-2.3。收集乙酸乙酯層，并用水洗。有機溶液用無水硫酸鈉干燥。蒸干有機溶液。得到55g芴甲氧碳酰基-色氨酸-賴氨酸(4-Pyoc)[Fmoc-Trp-Lys(4-Pyoc)-OH]。3.環(1,6)-乙酰基-正亮氨酸-天冬氨酸-組氨酸-苯丙氨酸-精氨酸(雙乙酰基)-色氨酸-賴氨酸的合成。100g王-樹脂懸于700ml二甲基甲酰胺。將50g芴甲氧碳酰基-色氨酸-賴氨酸(4-Pyoc)，13gl-羥基苯并二唑，2g4-二甲氨基吡啶和12gN,N-二異丙基碳酰亞胺。混合溶液室溫攪拌過夜。過濾收集樹脂并用二甲基甲酰胺洗三次，每次400ml、用甲醇洗三次，每次400ml、用二氯甲垸洗三次，每次400ml。700ml20%哌啶加入至樹脂中。攪拌混合液30分鐘。過濾收集樹脂并用二甲基甲酰胺洗三次，每次400ml、用甲醇洗三次，每次400ml和用二氯甲烷洗三次，每次400ml。樹脂中加入700ml二甲基甲酰胺，48g芴甲氧碳酰基-精氨酸(雙乙酰基)，13gl-羥基苯并三唑，35ml三乙胺和38gO-(苯并三唑-l-基)-N,N,N',N'-四甲基脲加入至樹脂。在室溫下混合溶液攪拌2h。過濾收集樹脂并分別用二甲基甲酰胺洗三次，每次400ml、甲醇洗三次，每次400ml、二氯甲烷洗三次，每次400ml。700ml20。/。哌啶加入至樹脂中。攪拌混合液30分鐘。過濾收集樹脂并用二甲基甲酰胺洗三次，每次400ml、甲醇洗三次，每次400ml和用二氯甲烷洗三次，每次400ml。700ml二甲基甲酰胺，39g芴甲氧碳酰基-苯丙氨酸，13g1-羥基苯并三唑，35ml三乙胺和38gO-(苯并二唑-l-基)-N,N,N',N'-四甲基脲加入至樹脂中。在室溫K混合溶液攪拌2小時。過濾收集樹脂并分別用—一甲基甲酰胺洗三次，每次400ml、甲醇洗三次，每次400ml、二氯甲烷洗三次，每次400ml。700ml20%哌啶加入至樹脂中。攪拌混合液30分鐘。過濾收集樹脂并用二甲基甲酰胺洗三次，每次400ml、甲醇洗三次，每次400ml和二氯甲垸洗三次，每次400ml。700ml二甲基甲酰胺，60g芴甲氧碳酰基-組氨酸(芴甲氧碳酰基)，13gl-羥基苯并三唑，35ml二乙胺和38gO-(苯并三唑-l-基)-N，N,N',N'-四甲基脲加入至樹脂中。在室溫下混合溶液攪拌2小吋。過濾收集樹脂并分別用二甲基甲酰胺洗三次，每次400ml、甲醇洗三次，每次400ml、一氯甲垸洗三次，每次400ml。700ml20%哌啶加入至樹脂屮。攪拌混合液30分鐘。過濾收集樹脂并用二甲基甲酰胺洗三次，每次400ml、甲醇洗三次，每次400ml和一氯甲烷洗三次，每次400ml。700ml二甲基甲酰胺，60g乙酰基-正亮氨酸-天冬氨酸(9-芴基甲醇酯)，13gl-羥基苯并三唑，35ml三乙胺和38gO-(苯并三唑-l-基)-N,N,N'，N'-四甲基脲加入至樹脂中。在室溫下混合溶液攪拌2小時。過濾收集樹脂并分別用二甲基甲酰胺洗二次，每次400ml、甲醇洗二次，每次400ml、二氯甲垸洗三次，每次400ml。帶有肽的樹脂懸于700ml二甲基甲酰胺中。反應混合物中加入50g碘甲烷(Mel)。混合溶液在室溫下攪拌1小時和在50。C攪拌1小時。過濾收集樹脂并用二甲基甲酰胺洗三次，每次400ml、甲醇洗三次，每次400ml、二氯甲烷洗三次，每次400ml。700ml30。/。哌啶加入至樹脂中。攪拌混合液60分鐘。過濾收集樹脂并用二甲基甲酰胺洗三次，每次400ml、甲醇洗三次，每次400ml和用二氯甲垸洗三次，每次400ml。700ml二甲基甲酰胺，13gl-羥基苯并三唑，35ml三乙胺和38g0-(苯并三唑-l-基)-N,N，N'，N'-四甲基脲加入至樹脂中。混合溶液室溫攪拌IO小時。過濾收集樹22脂并分別用二甲基甲酰胺洗三次，每次400ml、甲醇洗三次，每次400ml、二氯甲烷洗三次，每次400ml。500ml三氟醋酸加入至樹脂中，混合溶液室溫攪拌1小時。過濾除去樹月旨，有機溶液蒸干。殘留物用乙醚洗三次，每次100ml。4.環(1,6)-乙酰基-正亮氨酸-天冬氨酸-組氨酸-苯丙氨酸-精氨酸(雙乙酰基)-色氨酸-賴氨酸-二乙胺基乙酯鹽酸鹽的制備。10g環(1,6)-乙酰基-正亮氨酸-天冬氨酸-組氨酸-苯丙氨酸-精氨酸(雙乙酰基)-色氨酸-賴氨酸溶解于300ml二甲基甲酰胺。混合溶液用冰水浴冷卻至0°C。將12gN,N-二甲氨基乙醇，2g4-二甲氨基吡啶和22g1,3-二環己基碳酰亞胺加入至反應混合溶液。反應溶液在0。C攪拌1小時，室溫攪拌過夜。過濾除去固體副產物，二氯甲垸溶液用500ml5。/。的碳酸氫鈉溶液洗一次和用水洗三次，每次100ml。乙酸乙酯溶液用無水硫酸鈉干燥。將含有2g鹽酸氣的二氧六環(20ml)加入至乙酸乙酯溶液。收集固體，并用乙醚洗三次，每次100ml。得到8g。工業實用性通式(1)"結構式1"中所表示的這些前藥能很容易地穿過皮膚屏障。多肽及相關化合物的透皮給藥系統可以使多肽激素在治療人或動物的許多疾病上得到應用，如類風濕性關節炎和骨關節炎的疼痛，發燒，男性勃起功能障礙和女性性功能障礙，體循環血壓，低血壓控制，抑制血小板凝聚，肺病，腸胃疾病，炎癥，休克，生殖疾病，不育癥等癥狀。2權利要求1.通式(1)“結構式1”所表示的化合物，結構式1其中，X代表O，S或NH；X1或Xn代表CO，SO，SO2，PO(OR)，NO或無；Zn或Zn1代表H，CH3，C2H5，C3H7，CF3，C2F5或C3F7；Rn代表氨基酸的任一脂肪族側鏈，氨基酸的任一含有羥基或硫原子的側鏈，氨基酸的任一芳基側鏈，氨基酸的任一含有氨基、咪唑基或胍基的側鏈，氨基酸的任一含有羧基或酰胺基的側鏈，任一1-12個碳原子的烷基、1-12個碳原子的烷氧基、1-12個碳原子的烯基，1-12個碳原子的炔基，芳基或雜芳基，或者無；Yx1，Yx2或Yn代表H，任一1-12個碳原子的烷基、1-12個碳原子的烷氧基、1-12個碳原子的烯基，1-12個碳原子的炔基，芳基或雜芳基，任一以下基團，或無；Rx1，Rx2，Rx3，Rx4，Rx5或Rxn代表H，O，任一1-12個碳原子的烷基、1-12個碳原子的烷氧基、1-12個碳原子的烯基，1-12個碳原子的炔基，芳基或雜芳基，或無；A-代表Cl-，Br-，F-，I-，AcO-，檸檬酸根或其它負離子；n＝0，1，2，3，4，5，6，7，8，9，10......；所有R，-(CH2)n-或-(CH2)m-基團可以是支鏈或直鏈，可以包含C，H，O，S或N原子，可以有單鍵、雙鍵和三鍵；任何CH2基團可以被O，S或NH取代；氨基酸可以是L-構型或D-構型；多肽序列中的一個或多個氨基酸殘基可以被非天然氨基酸如β-氨基酸、2-萘基丙氨酸，任一烷基、烷氧基、烯基，炔基，芳基或雜芳基取代；多肽鏈上氨基酸中的氨基和羧基可以通過酰胺鍵橋形成均環肽，多肽鏈上的半胱氨酸、同型半胱氨酸或其它氨基酸上的巰基可以通過二硫鍵橋形成雜環肽。2.多肽及相關化合物的透皮給藥系統的設計；設計這些多肽或相關化合物的前藥的原則如下1、前藥分子中必須有一個親脂性的部分和一個在生理pH值時以質子化形式存在的一級胺、二級胺或三級胺的基團、胍基、或單保護的胍基團(親水性部分)；2、每個多肽前藥應該只能有一個或兩個(最好是一個)在生理pH值時可以質子化形式存在的一級胺、二級胺A或三級胺基團、胍基、或單保護的胍基團(親水性部分)；3、所述一級胺、二級胺或三級胺、胍、或單保護的胍基團可以在多肽的N端、C端或側鏈；N端或C端是優選的位置；4、羧基、氨基、胍基或其它親水性基團可以用烷基、芳基或雜芳基的酯基或者酰胺基保護起來以提高多肽的脂溶性。3.通式(2-C)"結構式2-C"所表示的化合物及其在治療牙痛、頭痛、關節炎、其它任何炎癥、發燒、癌癥、月經疼痛和急性偏頭痛等疾病上的應用；結構式2-C<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>其中，R代表支鏈或直鏈，-(CH2)n-，其中n二0，1，2，3，4，5，6，7，8，9，10......，芳基或雜芳基；X代表CO，SO，S02或無；Xi代表CH3SCH2CH2-，CH3SOCH2CH2-或(CH3)2CHCH2-;X2代表H，CH3或CF3;X3代表H,CH3，C2Hs或CF3;R,，R2，R3,R4或Rs代表H，任一l-12個碳原子的烷基、l-12個碳原子的垸氧基、l-12個碳原子的烯基，l-12個碳原子的炔基，芳基或雜芳基，或無；A—代表C1—，Br—，F—，I—，AcO—，檸檬酸根，或其它任何負離子；n=0，1，2，3，4，5，6，7，8，9，10......;氨基酸可以是L-構型或D-構型；所有的R，Rn，-(CH2)n-或-(CH2)m-基團可以是支鏈或支鏈，可以包含C，H，O，S或N原子，可以有單鍵、雙鍵和三鍵；任何CH2可以被0，S或NH取代。4.通式(3-C)"結構式3-C"所表示的化合物及其在治療牙痛、頭痛，關節炎，其它任何炎癥，發燒，癌癥，月經疼痛和急性偏頭痛的應用；<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>結構式3-C其中，R4或R2代表H，任一l-12個碳原子的烷基、l-12個碳原子的烷氧基、1-12個碳原子的烯基，l-12個碳原子的炔基，芳基或雜芳基或無；R3代表H或CH3;A—代表Cr，Br.，F，r，AcO-，檸檬酸根或其它負離子；n=0,1，2，3，4，5，6，7，8，9，10......;氨基酸可以是L-構型或D-構型；所有的R，Rn，-(CH2)n-或-(CH2)m-基團可以是支鏈或直鏈，可以包含C，H，O，S或N原子，可以有單鍵、雙鍵和三鍵；任何CH2可以被0，S或NH取代。5.通式(4-C)"結構式4-C"所表示的化合物及其在治療男性勃起功能障礙，女性功能障礙，白化病和其它皮膚疾病上的用途。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>其中，R代表直鏈或支鏈，-(CH2)n-，其中11=0，1，2，3，4，5，6，7，8，9，10......，芳基或雜芳基；X4，X5，X6，X7，Xs或X9代表CO，S02，PO(OR)，NO,或無；R,，R2,R3，R4，R5，Ro，R7，Rs或R9代表H，O，任一1-12個碳原子的垸基、1-12個碳原子的烷氧基、l-12個碳原子的烯基，l-12個碳原子的炔基，芳基或雜芳基，或無；A—代表C1—，Br—，F—，I-，AcCT，檸檬酸根，或其它任何負離子；n=0，1，2，3，4，5,6，7，8，9，10……；Ar代表苯基，2'-萘基，4-碘苯基，或者其它芳基或雜芳基；氨基酸可以是L-構型或D-構型；所有的R，-(012)-或-((:112)111-基團可以是直鏈或支鏈，可以包含C，H，O，S或N原子，可以有單鍵、雙鍵和三鍵；任何CH2基團可以被0，S或NH取代。6.通式(5-C)"結構式5-C"所表示的化合物及其在治療肥胖癥上的用途；結構式5-C其中，R代表支鏈或直鏈，-(CH2)n-，其中n-0，1，2，3，4，5，6，7，8，9,10......，芳基或雜芳基，或無；X,代表H或RiOCOCH2-;X2代表H或(CH3)2CH-;R"R2，R3，R4，R5或R^代表H，任一1-12個碳原子的烷基、l-12個碳原子的垸氧基、l-12個碳原子的烯基，l-12個碳原子的炔基，芳基或雜芳基；A-代表Cr，Br.，F.，r，AcO.，檸檬酸根，或其它任何負離子；n=0，1，2，3，4，5，6，7，8,9，10;所有的R，Rn，-(CH2)n-或-(CH2V-基團可以是支鏈或直鏈，Bj-以包含C，H，O，S或N原子，可以有單鍵、雙鍵和二鍵；任何CH2可以被0，S或NH取代。7.如權利要求5所述的通式(4-C)"結構式4-C"所表示的環肽及其相關化合物的制備方法，其中所述肽鏈可以通過標準多肽合成方法制備，亮氨酸側鏈被2-，或4-Pyoc保護基團保護，所述肽的環化在樹脂上進行。8.如權利要求1所述的通式(1)"結構式l"所表不的化合物或含有至少一種通式(1)"結構式l"所表示的化合物作為活性成分的組合物，其可以口服或透皮給藥用于治療任何多肽及相關物可以治療的人或動物的狀態；這些狀態包括但不限于青光眼或高眼壓，男性勃起功能障礙和女性性功能障礙，全身的血壓，人工流產，低血壓控制、抑制血小板凝固，肺病，腸胃疾病，炎癥，休克，生殖疾病，不育癥，肥胖等。9.治療人或動物的任何多肽及相關化合物可以治療的狀態的方法，該方法通過對人或動物的任何部位透皮給藥權利要求1所述的通式(1)"結構式l"所表示的化合物或含有至少一種通式(1)"結構式l"所表示的化合物作為活性成分的組合物，并達到治療有效濃度，其中透皮給藥方式包括溶液、噴劑、乳液、軟膏、乳膠或凝膠。10.透皮治療應用系統，含如權利要求1所述通式(1)"結構式l"表示的化合物或含有至少一種通式(1)"結構式l"表示的化合物作為活性成分的組合物，可用于治療人或動物的任何多肽及相關化合物可治療的狀態；以上所述系統可以是繃帶或貼片，其含有一包含活性物質的基質層和一非滲透的保護層，最優選的系統是一活性物質儲庫，含有一可滲透的面向皮膚的底部；通過控制釋放速度，該系統可使多肽及相關化合物穩定在最佳治療血藥濃度從而提高療效并減少多肽及相關化合物的副作用。全文摘要通式(1)“結構式1”中新型帶有正電荷的多肽及其相關化合物的前藥已被設計并合成。上述通式(1)“結構式1”所表示的化合物可以由標準的多肽合成方法制備。多肽前藥分子中帶正電荷的氨基不僅使藥物在水中可溶，而且還可結合生物膜磷酸鹽端基上的負電荷從而推動藥物進入細胞質。前藥分子中的親脂性部分(通過將極性基團用親脂性的烷基修飾)將會促進藥物進入皮膚膜。實驗結果表明這些前藥分子穿過人體皮膚的速度比多肽及相關化合物快了約100-1000倍。在血漿中，超過40％的前藥分子能在幾分鐘內回到母藥結構。在治療中前藥可用于治療人或動物的任何多肽及相關化合物可以治療的狀態。前藥可以通過透皮給藥用于任何藥物治療，并且可以避免在胃腸道中被蛋白水解酶水解。通過前藥的控釋透皮給藥系統可以使血液中多肽及相關化合物的濃度穩定在最佳治療血藥濃度，提升療效并減少多肽及相關化合物產生的副作用。這些前藥的透皮給藥系統還有另一大好處，就是給藥更加便利，特別是對兒童給藥。文檔編號C07C323/26GK101541743SQ200680056334公開日2009年9月23日申請日期2006年11月8日優先權日2006年11月8日發明者于崇曦申請人:于崇曦