4-苯基-6-取代的-嘧啶-2-腈衍生物的制作方法

專利名稱：4-苯基-6-取代的-嘧啶-2-腈衍生物的制作方法
4-苯基-6-取代的-嘧咬-2-腈衍生物本發明涉及4-苯基-6-取代的-嘧啶-2-腈衍生物，包含上述衍生物 的藥物組合物，以及這些衍生物制備用于治療組織蛋白酶K相關疾病例 如骨質疏松和動脈粥樣硬化的藥物的用途。半胱氨酸蛋白酶代表一類其特征在于在酶催化部位上存在半胱氨 酸殘基的肽酶，這類蛋白酶與蛋白質的正常降解和加工有關。很多病 理病變或疾病都是半胱氨酸蛋白酶活動異常例如過度表達或活動增強 的結果。半胱氨酸組織蛋白酶例如組織蛋白酶B、 K、 L、 S、 V、 F是一 類涉及各種不同病變的溶酶體酶，這些病變包括炎癥、類風濕性關節 炎、骨關節炎、骨質疏松、腫瘤、冠心病、動脈粥樣硬化、自身免疫 性疾病和傳染性疾病。組織蛋白酶K具有強烈的溶膠原、彈性酶和明膠酶活性(Br omme等 人，J.Biol，Chem， 271， 2126-21 32， 1996)，主要表達在破骨細胞中 (Bromme和Okamoto，Biol. Chem. Hopp-Seyler， 376， 379-384， 1995)。 它可以裂解關鍵骨基質蛋白，包括膠原類型I和II (Kaffienah等 人，Biochem.J. 331, 727-732, 1998)、明膠、骨橋蛋白和骨連接素，上 述行為與正常的骨生長和重塑所必需的細胞外基質代謝有關(Bossard 等人，J. Biol. Chem. 271， 12517-12524, 1996)。抑制組織蛋白酶K將導 致破骨細胞介導的骨再吸收的減少。因此，組織蛋白酶K抑制劑代表了 用于治療人疾病狀態例如骨質疏松的新治療劑。Sukhova等人(J.Clin. Invest. 102， 576-583， 1998)后來證實了在形成人動脈粥樣硬化斑塊中遷移進入并聚集的細胞(巨噬細胞)也合成 強效的彈性酶組織蛋白酶K和S。基質降解，特別是在這類斑塊纖維帽中的降解，是粥樣硬化損傷脫穩定化的關鍵步驟。因此，在損傷纖維 帽基礎上賦予結構完整性的細胞外基質組分膠原和彈性蛋白的代謝可 以關鍵性地影響動脈粥樣硬化的臨床表現，例如由動脈粥樣硬化斑塊破裂引起的冠狀動脈血栓形成。因此，在容易破裂的斑塊部位上抑制組織蛋白酶K和/或S代表了預防上述事件的有效途徑。與組織蛋白酶K一樣，組織蛋白酶S也具有強烈的促彈性組織離解 (Arch. Biochem. Biophys. ， 299， 334-339， 1992; J. Biol. Chem. ， 267， 72 58-7262， 1992)和溶膠原活性(Biochem. J. ， 256， 433-440， 1998)。患病 人群的動脈同時過度表達組織蛋白酶K和S，且具有作為半胱氨酸蛋白 酶最豐富的內源性抑制劑的半胱氨酸蛋白酶抑制劑C的往復缺陷 (J. Clin. Invest. 102， 5T6-5g3， 1998; J. CHn. rnve化104， n91-ir97 ，1999)。 Sukhova等人(J. Clin. Invest. 111， 897-906， 2003)已經證實， 缺乏組織蛋白酶S減輕了缺乏LDL受體小鼠的動脈粥樣硬化。Bromme等 人(Biochem. Biophys. Research Comm. , 312， 1019-1024， 2003)也證實， 組織蛋白酶K和S能夠在體外降解HDL3和不含的脂質apoA-I。這進一步 說明組織蛋白酶K和S可作為動脈粥樣硬化的治療靶。據顯示，組織蛋白酶S是與人和小鼠抗原遞呈細胞中不變鏈處理相 關的關鍵酶(J. Clin. Invest. 110， 361-369, 2002)。上述不變鏈處理可 以調節MHC類別II功能，且與自身免疫病變有關。Saegusa等人 (J. Clin. Invest. 110， 361-369， 2002)后來證實組織蛋白酶S在體內的 抑制作用改變了自身抗原遞呈和器官特異性自身免疫性的形成。在WO 03/020287 (Novartis Pharma GMBH)中還公開了組織蛋白 酶S的mRNA在慢性疼痛的動物模型中顯示正向調節，并且組織蛋白酶S 抑制劑的施用在這些動物中引起機械性痛覺過敏的逆轉。4-氨基-嘧啶-2-腈衍生物已被作為組織蛋白酶K和/或S抑制劑公 開在國際專利申請WO 03/020278 (Novartis Pha簡GMBH)中，同時 在結構上相關的4-氨基-嘧啶-2-腈衍生物最近也被作為組織蛋白酶S 抑制劑公開在WO 04/000819 (ASTRAZENECA AB)中。吡咯并-嘧啶同樣 作為組織蛋白酶K和/或S抑制劑被爿/S開在WO 03/020721 (Novartis Pharma GMBH)和WO 04/000843 (ASTRAZENECA AB)中。現已發現，具有通式I的4-苯基-6-取代的-嘧啶-2-腈衍生物<formula>formula see original document page 7</formula>通式I其中R表示l-3個任選的獨立選自(Ch)烷基(任選被一個或多個囟素 取代)，(d-4)烷氧基(任選被一個或多個閨素取代)和卣素的取代基；X是NR" 0或S; R!是H或(Ch )烷基；Y是(C卜4)烷基、節基或(Ch )烷基，它們被選自0H、 ( C-4)烷 氧基、NR2R3、包含1或2個選自0， S和Nl的雜原子的4-8元飽和雜環， 和包含1-4個N原子的5或6元芳族雜環基團取代；或^和Y和與其鍵接的氮一起形成5-8元飽和雜環，其任選包含另一 個選自0、 S、 N^和N0的雜原子；該環任選地被NR^或l到4個(d—3)烷基取代；R2和Rs獨立地是H或(C!H)烷基；或R2和R3和與其鍵接的氮一起形成4-8元飽和雜環，其任選包含另一 個選自0、 S和NR4的雜原子；l是H、 (CH)烷基、(Cw)環烷基、(Ch)環烷基(Ch)烷基、 (Ch )烷氧基(Ch )烷基、千基、酰胺基(Cw )烷基、(d-6)烷氧 基羰基(Cw )烷基或羧基(Ch )烷基；或其可藥用鹽是組織蛋白酶K和組織蛋白酶S的抑制劑，因而可用 于制備治療組織蛋白酶K和組織蛋白酶S相關病變例如動脈粥樣硬化、 骨病如骨質疏松、炎癥和免疫障礙如類風濕性關節炎和多發性硬化， 以及慢性痛如神經性疼痛的藥物。通式I的定義中使用的術語(Ch)烷基是指具有l-6個碳原子的支 化或未支化烷基，如己基、戊基、3-曱基-丁基、丁基、異丁基、叔丁基、丙基、異丙基、乙基和甲基。術語(Cw)烷基是指具有l-4個碳原子的支化或未支化烷基，如 丁基、異丁基、叔丁基、丙基、異丙基、乙基和曱基。通式I的Y的定義中使用的術語(Ch)烷基同樣是指具有2-6個碳 原子的支化或未支化烷基，如己基、戊基、3-甲基-丁基、丁基、異丁 基、叔丁基、丙基、異丙基和乙基。術語(Cw)環烷基是指具有3-6個碳原子的環烷基，例如環己基、 環戊基、環丁基和環丙基。在通式I的定義中，R2和R3可以和與其鍵接的氮一起形成4-8元飽和 雜環，例如吖丁啶、吡咯烷、哌啶或lH-氮雜萆環。這類環可以含有一 個或多個選自0、 S或NRs的其它雜原子以形成例如嗎啉、硫代嗎啉、六 氫-l，4-氧氮雜萆、哌嗪、高哌嗪、咪唑啉或四氫噻唑環的環。Y的定義中使用的術語包含1或2個選自0、 S和NR,的雜原子的4-8元 飽和雜環的例子是環例如嗎啉-4-基、哌嗪-4-基、吡咯烷-l-基和哌啶 -1-基。通式I的Y的定義中使用的術語包含1-4個N原子的5或6元芳族雜環 基團的例子是環例如吡啶基、吡咯基、咪唑基、吡嗪基和四唑-5-基。在通式I的定義中，R,和Y可以和與其鍵接的氮一起形成5-8元雜 環，其任選地包含另一個選自0、 S、冊4和冊的雜原子。這種環的實例 是哌啶-l-基、哌嗪-l-基、4-氧代-哌嗪-l-基和二氮雜環庚烷-l-基。術語卣素是指F、 Cl、 Br或I。當卣素是烷基上的取代基時，優選F。 優選的被面素取代的烷基是三氟甲基。在本發明中優選的是根據通式I的4-苯基-6-取代的-嘧啶-2-腈衍 生物，其中R表示在該4-苯基的間位上的三氟曱基取代基。進一步優選的是其中X是NId的化合物。本發明的尤其優選的4-苯基-6-取代的-嘧啶-2-腈衍生物是 -4- (哌嗪-l-基)-6- ( 3-三氟甲基苯基)-嘧啶-2-腈； -4- (4-環丙基-哌嗪-l-基)-6-(三氟曱基苯基)-嘧啶_2-腈； -4- [1， 4] 二氮雜環庚烷-l-基-6- ( 3-三氟甲基苯基) -嘧啶-2-腈;-4-[甲基-(l-甲基-哌啶-4-基)-氨基]-6- ( 3-三氟甲基苯基)-嘧咬-2-腈；-4-[ (1H-四唑-5-基甲基)-氨基]-6- (3-三氟甲基苯基)-嘧啶 -2-腈；-4- (4-曱氧基-3-三氟曱基苯基)-6-哌嗪-1-基-嘧啶-2-腈； -4- ( 2-哌啶-1-基-乙氧基)-6- ( 3-三氟甲基苯基)-嘧啶-2-腈； -4-[4- (2-甲氧基-乙基)-哌嗪-1-基]-6- (3-三氟甲基苯基)-嘧啶-2-請；-4- (4-氨基甲酰基甲基-哌嗪-l-基)-6- (3-三氟甲基苯基)-嗜啶-2-腈；-4- (4-異丙基-哌嗪-1-基)-6-(三氟甲基苯基)-嘧啶-2-腈； -4- [4- ( 2-羧乙基)-哌溱-l-基]-6- ( 3-三氟曱基苯基) -嘧啶-2-腈；-4- (4-環丙基甲基-哌嗪-l-基)-6-(三氟甲基苯基)-嘧啶-2-腈；-4-( 3， 3， 4-三甲基-哌溱-l-基)-6-( 3-三氟甲基苯基)-嘧啶-2-腈；-4- (4-甲基-[1，4]二氮雜環庚烷-1-基)-6- ( 3-三氟甲基苯基) -嘧咬-2-腈；-4-(羧曱基-氨基)-6- (3-三氟曱基苯基)-嘧啶-2_腈；-4- ( 2-嗎啉-4-基-乙氧基)-6- ( 3-三氟甲基苯基)-嘧啶-2-腈；-4- ( 2-二乙基氨基-乙氧基)-6- ( 3-三氟甲基苯基)-嘧啶-2-腈。本發明另 一方面提供了藥物組合物，其含有與可藥用輔劑相混合 的具有通式I的4-苯基-6-取代的-嘧啶-2-腈衍生物，或其可藥用鹽。通式I的4-苯基-6-取代的-嗜啶-2-腈衍生物可以通過使用通常在 有機化學領域中已知的方法進行制備。例如，其中X表示NR"并且Ri、 R和Y具有此前限定的意義的通式I的化合物可以如方案1所示制備。2-甲基硫烷基-4，6-二氯嘧啶(II)與具有通式R「NH-Y (其中存在于Y中的任何其它官能團都可以攜帶合適的保護基)的胺的反應提供具有通式(ni)的化合物。在適合的溶劑如二氣甲烷、甲醇、乙腈或水或這些溶劑的混合物中，用氧化反應試劑如OXONE0、間氯過苯曱酸(MCPBA )、 過氧化氫、Nal04將具有通式(III)的硫醚氧化產生具有通式(IV) 的砜。通式(IV)的砜與芳基硼酸或其它芳基金屬反應試劑的鈀或其 它過渡金屬催化的交叉偶聯提供通式(V)的聯芳基衍生物，該聯芳基 衍生物在(V)的磺酰基結構部分用氰化物，例如氰化鈉取代，并隨后 除去任何保護基后提供通式(VI)的4-苯基-6-取代的-嗜啶-2-腈衍生 物。方案ln人nn人nOl , (An[Pd]CIA^CI> 〗ArB(OH)2(II)(l") R1(iv) R'NaCN通式(VI)的化合物還可以表示可以由其制備本發明的進一步的 化合物的中間化合物。它們的一個實例在方案2中進行了描述，其中受 叔丁氧羰基(Boc)保護的通式(VI)的化合物(其中^和Y和與其鍵 接的氮一起形成哌嗪環)被脫保護成通式(VII)的化合物，在堿(例 如DIPEA、 K2C03)在適合溶劑如乙腈或二甲基甲酰胺中的的存在下，用 式RrX(其中R,具有此前限定的含義，X是閨素)的烷基卣對該通式(VII ) 的化合物進行N-烷基化提供具有通式(VIII)的化合物。方案2TFABocR4X， ~ 、R4(V川)(Vl> (VII) 或者，通式(VIII)的化合物可以由通式(VII)的化合物通過使用醛和還原劑例如氰基硼氫化鈉、三乙酰氧基硼氫化鈉或樹脂粘合劑還原劑(方案3)進行還原氨基化來制備。方案3(VII) ,在另一個方法中，如在方案4中所示，用羥乙胺代替2-甲基硫烷基 -4， 6-二氯嗜啶提供通式(IX)的化合物，該化合物可以通過使用硼酸 進行Suzuki偶聯反應而轉化為通式(X)的聯芳基衍生物。(X)中的 硫醚基團的氧化產生作為產物的通式(XI)的砜。如方案l中所述的對 該砜隨后的氰化產生通式(XII)的腈。通過使用Dess-Martin或其它 試劑對通式(XII )的化合物中的伯醇進行氧化提供通式(XIII )的醛。 用通式HNR2R3的伯或仲胺對(XIII)進行還原氨基化和使用三乙酰氧基 硼氫化鈉或另一種還原劑提供作為本發明的進一步的化合物的通式 (XIV)的化合物。方案4(XIV)在如方案5中所述的又一種方法中，由4-氨基-2-甲基硫烷基-6-氯嘧啶(XV)開始，Suzuki或另一種類型的過渡金屬催化的交叉偶聯 反應產生通式(XVI)的聯芳基衍生物，該衍生物的6-氨基可以通過重氮化而轉變成羥基以產生通式(XVII)的化合物，用P0Cl3處理該化合 物產生通式(XVIII)的4-氯-嘧啶衍生物。隨后使用氫化鈉作為堿使 (XVIII)與醇發生偶聯反應產生作為產物的通式(XIX)的化合物。 將該硫醚氧化為砜(XX)和隨后對該砜進行氰化產生根據本發明的進 一步的2-氛基嘧啶衍生物(XXI)。 方案5在另一種方法中，通式(I)的化合物可以根據方案6進行人工合 成。在回流溫度下在甲醇中用鹽酸處理通式(XXI)的化合物將該腈結 構部分轉化為曱基酯，同時伴隨著芐基的除去以產生通式(XXII)的 化合物。氨解和隨后用POCh進行處理產生作為關鍵中間體的通式 (XXIV)的6-氯化物衍生物，由該衍生物通過與通式H-X-Y(其中X和Y 具有此前限定的含義)的親核試劑反應獲得通式I的本發明的化合物。方案6<formula>formula see original document page 13</formula> (1)在帝r備其中Y含有堿性胺氮原子(以NR2R3或Nl形式)的通式I的4-苯基-6-取代的-嗜啶-2-腈衍生物時，這種氮將被例如酸不穩定的叔丁 氧羰基(Boc)保護基團臨時保護。其它適合在合成過程中用于臨時被保 護的官能基團的保護基團是本領域已知的，例如Wuts，P.G.M.和 Greene, T. W. : Protective Groups in Organic Synthesis,第三 版，Wiley, New York,1999。可以為游離堿形式的本發明化合物可以從反應混合物中以可藥用 鹽的形式分離。所述可藥用鹽還可以通過使用有機或無機酸處理通式I 的游離堿而得到，該有機或無機酸例如是，但不限于鹽酸、氫溴酸、 氫碘酸、硫酸、磷酸、乙酸、三氟乙酸、丙酸、乙醇酸、馬來酸、丙 二酸、甲磺酸、富馬酸、琥珀酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸和抗壞血本發明化合物可以以溶劑化和非溶劑化形式存在，包括水合物形 式。 一般來說，溶劑化形式等價于非溶劑化形式，它們均旨在包括在 本發明范圍之內。本發明化合物可以以無定形形式存在，但是多晶型 也是可能的。 一般來說，所有的物理形式對于本發明預期用途而言是 等價的，并且均旨在包括在本發明范圍之內。本發明的4-苯基-6-取代的-嘧啶-2-腈衍生物及其鹽可以在其側鏈R、 ^和Y的一或多個上含有手性中心，因而可以以純對映體形式、或對映體混合物形式、或者含有非對映體的混合物形式獲得。獲得純 立體異構體的不對稱合成方法是本領域熟知的，例如使用手性誘導或由手性中間體開始、對映選擇性酶轉化、在手性介質上采用色譜法分離立體異構體或對映體進行合成。這類方法在例如Chirality in Industry (A. N. Collins, G. N. Sheldrake和J. Crosby著，1992; John Wiley)中進行了描述。發現本發明化合物是人組織蛋白酶K和組織蛋白酶S的抑制劑，因 而在本發明另 一方面可用于治療中，特別是用于制備治療骨質疏松、炎性和免疫病變如類風濕性關節炎、慢性痛如神經性疼痛、以及涉及 骨再吸收異常的其它病變^^佩吉特氏病、骨關節炎、溶骨性骨癌和轉 移性骨病的藥物。本發明化合物可以通過腸道或非腸道給藥，對于人而言，優選日 劑量為O. 001-100mg/kg體重，優選O. 01-10mg/kg體重。通過與藥學上 適宜的助劑例如描述在標準參考文獻Gennaro等人，Remington's Pharmaceutical Sciences,(第 20版，Lippincott Williams & Wilkins， 2000，特另寸參見第5部分Pharmaceutical Manufacturing) 中的輔劑混合，可以將化合物壓制成固體劑量單位例如丸劑、片劑， 或者加工成膠嚢劑或栓劑。借助于藥學上適宜的液體，化合物還可以 以溶液、懸浮液、乳劑形式使用，例如用作注射制劑或者噴霧劑如用 作鼻腔噴霧劑。為了制備劑量單位例如片劑，可以考慮使用常規的添 加劑例如填充劑、著色劑、聚合物粘合劑等。 一般來說，可以使用任 何不干擾活性化合物功能的藥學上可接受的添加劑。可供施用組合物的適宜栽體包括以適當用量使用的乳糖、淀粉、 纖維素衍生物等、或者它們的混合物。通過下述實施例進一步對本發明進行示例性說明。方法一般化學步驟。所有試劑既可以由常規商業來源購得，或者可以 按照文獻步驟使用商購源物質合成得到。質子NMR CH NMR)在Bruker DPX 400分光計上獲得，以內標四甲基硅烷(TMS)作為參照。質譜記 錄在Shimadzu LC一8A (HPLC) PE Sciex API 150EX LCMS上。分析性反相LCMS分析在LUNA C18柱(5ni; 30x4. 6 mm)上、在流速為4 ml/min 的梯度條件(9 0%水/ 0. 1 %曱酸至9 0%乙腈/ 0. 1 %甲酸)下進行。 簡稱間氯過氧苯甲酸(MCPBA) ， 二甲基甲酰胺(DMF) ， N-曱基吡咯 烷酮(NMP) ， 二氯甲坑(DCM) ， 二甲亞砜(DMS0)，四氫吹喃(THF )， 1，2-二曱氧乙烷(DME)，高效液相色譜法(HPLC)， 二異丙基乙胺 (DIPEA )，三乙胺(TEA )，寬(br )，單重峰(s )，雙重峰(d )， 三重峰(t)，三氟乙酸(TFA)，叔丁氧碳基(Boc) ， 1-(3-二甲基 氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺HCl (EDCI) ， 1-羥基苯并三唑 (H0Bt) ， 2， 2， 6， 6-四甲基-l-哌啶氧基(TEMPO)。實施例l:4-(哌嗪-l-基)-6- ( 3-三氟曱基苯基)-嘧啶-2-腈A: 4- (6-氯-2-曱基硫烷基-嘧啶-4-基)-哌嗪-l-羧酸叔丁基酯 將4， 6-二氯-2-甲基疏烷基嘧啶(10g )溶于二氯甲烷(200 ml )中并添加三乙胺(20.6 g)。在室溫下攪拌該混合物并且分幾份添加哌溱-1-羧酸叔丁酯(9. 54g)。在室溫下攪拌該混合物一整夜。用水 (200ml)然后用鹽水(100ml)洗滌混合物。干燥(MgS(U有機層然后在減壓下蒸發以提供作為白色固體的4-( 6-氯-2-甲基-硫烷基-嘧啶-4-基)-哌溱-1-羧酸叔丁酯(17.9 g)。丄HNMR (CDCU: 5 6.11 (s， 1H)， 3.58 (m， 4H) ， 3.44 (m， 4H), 2.42(s， 3H)， 1.41 (s， 9H).4- (6-氯-2-甲基磺酰基-嘧啶-4-基)-哌嚷-1-羧酸叔丁酯 向攪拌過的4-(6-氯-2-甲基硫烷基-嘧啶-4-基)-哌溱-1-羧酸叔 丁酯(1 g)在甲醇和水的10: l混合物(25 ml)中的溶液中添加oxone⑧ (過一硫酸鉀；4. 1 g)。在室溫下攪拌所得懸浮液16小時。在用水(100 ml)稀釋之后，將產物提取進入乙酸乙酯(100ml x 3)并用鹽水(100 ml)洗滌合并的有機物質，在MgSOJi干燥并在真空中濃縮以獲得作為 白色固體的4- ( 6-氯-2-甲基磺酰基-嗜啶-4-基)-哌溱-1-羧酸叔丁酯 (l.Olg)。!H腿(CDCU: 5 6.60 (s， 1H)， 3.63-3.85 (br s， 4H) ， 3.54-3.59 (m， 4H)， 3.28 (s， 3H) ， 1.49 (s， 9H); MS邊々377.4 (M+l)，畫。C: 4-[2-曱基磺酰基-6-( 3-三氟甲基苯基)-嘧啶-4-基]-哌嗪-l-羧酸叔丁酯向攪拌下的4-( 6-氯-2-甲基磺酰基-嘧啶-4-基)-哌嗪-l-羧酸叔 丁酯(500 mg)在乙醇和甲苯的l: l混合物(10ml)中的溶液中加入3-(三氟曱基)苯基硼酸(277 mg )、碳酸鈉(422 mg )、水(500 m 1 ) 和CombiPhos-Pd6 (30.5 mg )催化劑混合物。在回流下加熱所得懸浮 液3小時，然后濾過硅藻土并在真空中濃縮以獲得作為黃色油狀物的 4-[2-甲基磺酰基-6- (3-三氟甲基-苯基)-嘧啶-4-基]-哌嗪-l-羧酸 叔丁酯(720 mg)。工H NMR (CDC1》:5 8. 24 (d， 1H) ， 8. 21 (s， 1H) ， 7. 77 (d， 1H) ， 7. 63 (t，lH)，6. 97 (s，lH),3.83 (br s， 4H) ， 3. 59-3. 62 (m，4H)，3.37 (s，3H)，1.50 (s,9H). MS邁々487.4 (M+l)，簡.D: 4- ( 4-叔-丁氣基羰基-哌嗪-l-基)-6- ( 3-三氟甲基-苯基)-嘧咬-2-腈向攪拌下的4-[2-甲基磺酰基-6- ( 3-三氟甲基-苯基)-嘧啶-4-基]-哌嚷-l-羧酸叔丁酯(720 mg)在二甲基亞砜(l"7ml )中的溶液中 加入氰化鈉(72.5 mg))。在室溫下攪拌所得溶液24小時。在用乙酸 乙酯(100 ml )稀釋之后，然后用水(4 x 50 ml )、鹽水(50 ml )洗 滌，在MgS04上干燥并在真空中濃縮。使用庚烷和乙酸乙酯(2:1)作為洗脫劑將殘留固體上硅膠柱以獲得白色固體(230 mg)。力NMR (CDC13): 5 8. 21 (s， 1H) ，8.20 (d， 1H) ， 7. 76 (d， 1H) ， 7. 62(t，lH)，6. 97 (s，lH)，3. 78 (br s，4H)，3. 59 (m，4H)，1.50 (s，9H). MS邊/z; 434. 3 (M+l)， 100%.E: 4-(哌嗪-l-基)-6- ( 3-三氟甲基苯基)-嘧啶-2-腈三氟乙酸向攪拌下的4- ( 4-叔-丁氧基羰基-哌嗪-1-基)-6- ( 3-三氟甲基-苯基)-嘧啶-Z-腈(5t)mg)在二氯甲烷(lml)中的溶液中加入三氟 乙酸(250jal)。在室溫下攪拌所得溶液2小時。在真空中濃縮反應混 合物，將殘余物溶于乙腈并使用制備性HPLC純化以獲得作為白色固體 的主題化合物三氟乙酸鹽(6 mg)。'H NMR (MeOD): 5 8.44 (s，lH)，8. 39 (d，lH),7. 83 (d，lH)，7. 73 (t，lH)，7.59 (s， 1H)，4. 10-4. 13 (m， 4H) ， 3. 36-3. 39 (m， 4H). MS邁々, 334. 0 (M+l)，圃.實施例2a: 4-[4- (2-曱氧基-乙基)-哌嗪-1-基]-6- ( 3-三氟甲 基苯基)-嘧啶-2-腈向攪拌下的4-(哌嗪-l-基)-6- (3-三氟甲基苯基)-嘧啶-2-腈 三氟乙酸鹽(實施例l; 100mg)和二異丙基乙胺(78y 1)在乙腈(3 ml)中的溶液中加入2-溴代乙基曱基醚(31jil)。在室溫下攪拌所得 溶液16小時，接著在45X:加熱24小時。然后添加聚合物鍵接的異氰酸 酯(lramol/g， 300 mg)并在室溫下搖晃該混合物72小時，然后在真空 中過濾和濃縮。將殘余物溶于二甲基亞砜并使用制備性HPLC純化以獲 得作為白色固體的4-[4- (2-曱氧基乙基)哌噪-l-基]-6- (3-三氟曱 基苯基)-嘧啶_2-腈三氟乙酸鹽(8 mg)。H NMR (MeOD): 5 8.44 (s，lH)，8. 39 (d，lH)，7.84 (d，lH)，7. 73 (t，lH),7. 61(s，lH),3. 77(m，2H)，3. 45(s，3H)，3.43 (m，2H)，3.10-3.75 (m，8H). MS邊々；392.3 (M+l)，薩. 使用相同的步驟合成以下化合物，2b: 4- ( 4-氛基甲酰基甲基-哌嗪-l-基)-6- ( 3-三氟甲基-苯基) -嘧咬-2-腈^腿(MeOD): 5 8. 44 (s， 1H) ， 8. 39 (d， 1H) ， 7. 84 (d， 1H) ， 7. 73 (t，lH)，7，60 (s，lH)，3. 98 (s， 2H) ， 3. 20-3. 65 (m，8H). MS /zz々391. 5 (M+l)， 100%.實施例3: 4- (4-異丙基-哌嗪-l-基)-6-(三氟甲基-苯基) -嘧向4-(哌嗪-l-基)-6- (3-三氟甲基苯基)-嘧啶-2-腈三氟乙酸 鹽(實施例l; 50mg)在乙腈(lml)中的溶液中加入二異丙基乙胺(39 ja 1 )和2-溴丙烷(15. 5 y 1 )。將所得溶液在150X:下微波加熱5分鐘。 添加碘化鈉(2mg)并使反應混合物在180。C下進一步加熱30分鐘。在 真空中濃縮反應混合物，將殘余物溶于甲醇并使用制備性HPLC純化以 獲得4- (4-異丙基-哌嗪-l-基)-6-(三氟甲基-苯基)-嘧啶-2-腈三 氟乙酸鹽(10mg)。H NMR (MeOD): 5 8. 44 (s， 1H) ， 8. 39 (d, 1H) ， 7. 84 (d， 1H) ， 7. 72 (t， 1H) ， 7. 61 (s， 1H) ， 3. 62 (m， 1H) ， 3. 18-3. 60 (br s， 8H) ， 1. 42 (d， 6H), MS邊々376. 5 (M+l)， 100%.實施例4: 4-[4- ( 2-叔-丁氧基羰基乙基)-哌嗪-1-基]-6- ( 3-三氟甲基-苯基)嘧啶-2-腈將4_ (哌嗪-l-基)-6- (3-三氟曱基苯基)-嘧啶-2-腈三氟乙酸 鹽(112 mg)、丙烯酸ik丁酯(49|al) 、 二異丙基乙胺(59 ja 1 )和 二曱基甲酰胺(O. 2 ml)混合并在45。C下攪拌16小時。添加甲醇后， 使用制備性HPLC純化產物以產生作為白色固體的4-[4- ( 2-叔-丁氧基 羰基-乙基)-哌嗪-1-基]-6- (3-三氟甲基-苯基)-嘧啶-2_腈三氟乙酸鹽(30mg)。^NMR (MeOD): 5 8.44 (s,lH)，8.39 (d，lH)，7. 84 (d，lH)，7.72 (t， 1H) ， 7. 61 (s， 1H) ， 3. 8-4. 3 (m， 4H) ， 3. 41-3. 58 (m， 6H) ， 2. 85 (t， 2H)， 1.50 (s，9H). MS邊/z, 462. 3 (M+l)，簡.實施例5: 4-[4- (2-羧基-乙基)-哌嗪-1-基]-6- ( 3-三氟甲基-苯基) -嘧啶-2-腈三氟乙酸鹽向攪拌下的實施例4的化合物(22 mg)在二氯曱烷(2 ml)中的溶液中加入三氟乙酸nmr)。在室溫卞攪拌所得溶液l小時然后在真空中濃縮。然后使用制備性HPLC純化殘余物以獲得作為白色固體的 4-[4- ( 2-羧基-乙基)-哌嗪-1-基]-6- ( 3-三氟曱基-苯基)-嘧啶-2-腈三氟乙酸鹽(8.5 mg)。H賺(MeOD): 5 8. 44 (s， 1H) ， 8. 39 (d， 1H) ， 7. 84 (d， 1H) ， 7. 72 (t， 1H) ， 7. 61 (s， 1H) ， 4. 0-4. 21 (br s， 4H) ， 3. 42-3. 55 (br m， 6H) ， 2. 87-2.93 (t，2H). MS邁/z, 406.5 (M+l)，100%.實施例6: 4- (4-環丙基甲基-哌嗪-l-基)-6-(三氟甲基-苯基) -嘧啶-2-腈三氟乙酸鹽向攪拌下的4-(哌嗪-l-基)-6- (3-三氟甲基苯基)-嘧啶-2-腈 三氟乙酸鹽(Wmg)在曱醇(2 ml)中的溶液中加入環丙烷羧醛(13 ju 1 )、乙酸(0. 5 ml )和樹脂-鍵接的氰基氬硼化物(l鵬ol/g， 89 mg )。 在室溫下攪拌反應混合物16小時。濾出樹脂并在真空中濃縮該濾液。 將殘余物溶于甲醇并使用制備性HPLC純化以獲得作為白色固體的4-(4-環丙基甲基-哌嗪-l-基)-6-(三氟甲基-苯基)-嘧啶-2-腈三氟 乙酸鹽(10 mg)。'H NMR (MeOD): 5 8. 44 (s， 1H) ， 8. 40 (d， 1H) ， 7. 84 (d， 1H) ，7.73 (t，lH)，7. 62(s，lH)，3. 1-4. O(br s， 8H) ， 3. 14 (t， 2H) ， 1. 18 (m， 1H) ， 0.83 (m.2H)，0.48 (m，2H). MS /z 々.'388.3 (M+l)，1001同樣使用相同的步驟合成以下化合物。實施例8: 4- (4-環丙基-哌"秦-l-基)-6-(三氟甲基-苯基) -嘧 咬-2-腈鹽酸鹽向攪拌下的4-(哌溱-1-基)-6- ( 3-三氟甲基笨基)-嘧啶-2-腈 (100mg )在甲醇(2ml )中的溶液中加入(l-乙氧基環丙氧基)-三曱 基硅烷(360 jli 1 )、乙酸(173 y 1 )和氰基硼氫化鈉(85mg )。在回 流下加熱所得懸浮液2小時。用二氯甲烷(20 ml)稀釋該混合物并用 水(3x20 ml)和鹽水(20 ml)洗滌，在MgS04上干燥并在真空中濃 縮以獲得黃色固體，將該黃色固體上使用庚烷和乙酸乙酯的硅膠柱以 獲得85mg 4- (4-環丙基-哌嗪-l-基)-6-(三氟甲基-苯基)-嘧啶-2-腈。通過用醚中的HC1 (1M)處理制備作為白色固體的鹽酸(1:1)鹽。^ NMR (MeOD): 5 8.44 (s，lH)，8. 39 (d，lH)，7.84 (d，lH)，7. 73 (t，lH)，7.62 (s， 1H)， 3. 50-3. 68 (m， 8H) 1.31 (t， 1H), 1. 08-1. 12 (br s，2H)， 0.98-1.03 (m，2H). MS邊/z 374. 3 (M+l)，100%.實施例9: 4- ( 2-羥乙基氨基)-6- ( 3-三氟甲基-苯基)-嘧啶-2-渡A: 2- ( 6-氯-2-曱基硫烷基-嘧啶-4-基-氨基)-乙醇 向4， 6-二氯-2-曱基硫烷基。密啶(9.75g)在曱醇(150 ml)中的 溶液中加入氨基乙醇(3. 1 g)和三乙胺(7. 5 ml )。在室溫下攪拌該 混合物20小時。在真空下除去溶劑之后，將殘余物溶于異丙醇(15 ml )中，然后添加醚(30 ml)。通過過濾收集產物。
NMR (MeOD): 5 6.15 (s，lH)，3.69 (t，2H)，3. 50 (br， 2H) B: 2- [2-曱基硫烷基-6- ( 3-三氟甲基-苯基)-嘧啶-4-基-氛基]一
乙醇
向含幾滴DME和乙醇的2- ( 6-氯-2-曱基硫烷基-嘧啶-4-基-氛基) -乙醇(404 mg) 、 3-(三氟曱基)苯基硼酸(384 mg)和碳酸鈉(585 mg)在曱苯(12 ml )的混合物中添加Pd ( PPh3) 4 ( 106 mg)。將所 得懸浮液在150TT下微波加熱20分鐘。將反應混合物濾過硅藻土墊片， 用乙酸乙酯洗涂并在真空中濃縮。將殘留的褐色膠狀物上使用庚烷和 乙酸乙酯(1: 1 )作為洗脫劑的硅膠柱。將所獲得的產物溶于四氫呋喃 并在室溫下與3-氨基-l，2-丙二醇一起攪拌30分鐘，然后用乙酸乙酯
(40ml)稀釋并用lM鹽酸(2x100 ml)、鹽水(40ml)洗滌，在MgS04 上干燥以在真空中濃縮以獲得200mg作為褐色膠狀物的2-[2-甲基硫烷 基-6- ( 3-三氟甲基-苯基)-嘧啶-4-基-氨基]-乙醇。緩慢地中和所剩 酸性水層，過濾所得白色沉淀并干燥。這樣產生了作為白色固體的 2-[2-曱基硫烷基-6- (3-三氟曱基-苯基)-嘧啶-4-基-氨基]-乙醇
(450mg)。
!H NMR (MeOD):58. 28(s，lH)， 8. 19 (d， 1H) ， 7. 72 (d, 1H)， 7. 63(t，lH)， 6. 69(s，lH)，3. 75(t，2H), 3. 59 (t， 2H) ， 2. 49 (s， 3H). C: 2-[2-甲基磺酰基-6-( 3-三氟曱基-苯基)-嘧啶-4-基-氨基]-
乙醇
向攪拌下的2-[2-曱基硫烷基-6- (3-三氟曱基-苯基)-嘧啶-4-基-氨基]-乙醇(450mg)在10: l乙腈/水混合物(llml )中的懸浮液中 添加oxone ( 1. 93g)。在室溫下攪拌所得懸浮液4. 5小時。在用乙酸乙 酯(100ml )稀釋之后，用水(100ml )、鹽水(50ml )洗滌，在MgS04 上干燥并在真空中濃縮而獲得為黃色膠狀物(493mg)的主題化合物。
工H NMR (MeOD): 5 8. 31 (s， 1H) ， 8. 29 (s， 1H) ， 7. 79 (d, 1H)， 7. 69 (t， 1H) ， 7. 14 (s, 1H) ， 3. 76 (t， 2H) ， 3. 64 (m， 2H) ， 3. 37 (s， 3H).
D: 4- (2-羥基-乙氨基)-6- (3-三氟曱基苯基)-嘧啶-2-腈向攪袢下的2-[2-甲基磺酰基-6- (3-三氟甲基-苯基)-嘧啶-4-基-氨基]-乙醇(493mg)在二甲基亞砜(15ml)中的溶液中加入氰化 鈉(100mg)。在室溫下攪拌所得溶液72小時。用乙酸乙酯(100 ml) 稀釋之后，用水(100ml)、鹽水(100 ml)洗滌，在MgSOJi干燥并 在真空中濃縮以獲得作為淺黃色固體的主題化合物(380mg)。
'H NMR (MeOD): & 8. 30(s，lH), 8. 22 (s， 1H) ， 7. 80 (d， 1H)， 7. 71 (t， 1H) ， 7. 16 (s， 1H) ， 3. 74 (t， 2H) ， 3. 64 (t， 2H) ， 3. 37 (t， 2H).
實施例10:《-(2-嗎啉-4-基-乙氨基)-6- ( 3-三氟甲基-苯基)-嘧啶-2-腈
A:向攪拌下的4- (2-羥基-乙氨基)-6- (3-三氟甲基-苯基)— 嘧啶-2-腈(308 mg)在二氯曱烷(5 ml )中的溶液中加入Dess-Mart in 高碘烷(periodinane ) ( 424 mg )并在室溫下攪拌所得懸浮液45分鐘。 用二氯曱烷(50ml)稀釋反應混合物并用水(3x50ml)、鹽水(50 ml)洗滌，在MgS04上干燥并在真空中濃縮。
將殘余物濾過使用庚烷和乙酸乙酯(1: 1 )作為洗脫劑的硅膠墊片， 在真空中除去溶劑以獲得作為白色固體的4-(2-氧代-乙氨基)-6-( 3-三氟曱基苯基)-嘧啶-2-腈。MS m/z: 307. 5 (M+l)。
B:向甲醇(2ml)中的100mg上迷產物中添加嗎啉(57y 1)、乙 酸(0.5 ml)和樹脂-鍵接的氛基氫硼化物(190mg)。在室溫下攪拌 反應混合物一小時，然后將樹脂濾出并在真空中濃縮產物。將殘余物 溶于甲醇并使用制備性HPLC純化以獲得作為白色固體的4-( 2-嗎啉-4-基-乙氨基)-6- ( 3-三氟曱基-苯基)-嘧啶-2-腈三氟乙酸鹽(26 mg )。
^ NMR (MeOD): 5 8.33 (s，lH)，8.29 (d，lH)，7. 83 (d，lH)，7. 74 (t，lH),7. 25 (s， 1H)， 3. 78-4. 15 (br s，4H)，3. 91 (t， 2H) ， 3. 25—3. 72 (br s，4H)，3.45 (t，2H). MS邊々378. 5 (M+l)，100%.
實施例ll: 4- ( 3， 3，4-三甲基-4-氧代-哌嗪-1-基)-6- ( 3-三氟 甲基-苯基)-嘧啶-2-腈<formula>formula see original document page 23</formula>^2-曱基硫烷基-6- (3-三氟甲基苯基)-嘧啶-4-基胺 在氮氣氣氛下向攪拌下的4-氨基-6-氯-2-甲基硫嘧啶(3. 5 g )在 甲苯(45mL)中的溶液中依次加入3-(三氟-甲基)苯基硼酸(4. 15 g)、 碳酸鉀(25 mL， 2M)和四(三苯基膦)鈀(d) (I 16 gK將混合 物加熱到回流十小時。加入乙酸乙酯(150mL)并用水(2x100 mL ) 洗滌該混合物。分離有機層，用飽和氯化鈉(100 fflL)洗滌，在硫酸 鈉上干燥并在減壓下蒸發溶劑以產生粗產物。通過急驟層析的純化產 生產物2-甲基-硫烷基-6-( 3-三氟甲基-苯基)-嘧啶-4-基胺(3. 45 g) ^ NMR (CDCU : 5 8. 25 (s, 1H) ，8.19 (d， 1H) ， 7. 70 (d， 1H) ， 7. 58 (t，lH)，6. 56 (s，lH)，4. 92 (s，2H)，2.61 (s，3H). MS 286.3 (M+l).
l 2-甲基硫烷基-6- (3-三氟曱基苯基)-嘧啶-4-醇 在乙酸(6ml )中將2-曱基硫烷基-6-( 3-三氟甲基苯基)-嘧啶-4-基胺 (2.42 g)加熱到40"C直到溶解。逐滴添加亞硝酸鈉(1.17 g,
在5 ml水中)的溶液并在^x:下繼續攪拌30分鐘并在9ox:下繼續攪拌
90分鐘。允許該反應混合物冷卻到室溫并過濾。用水洗滌該濾餅，然 后溶于乙酸乙酯(200mL)并用飽和碳酸氬鈉(2 x 300 ml )洗涂。分 離有機物，在硫酸鈉上干燥并在減壓下蒸發溶劑而產生為淺黃色固體 的產物2-甲基硫烷基-6- ( 3-三氟甲基-苯基)-嘧啶-4-醇(2. 11 g)。 NMR (CDC13): 5 8.30 (s，lH)，8. 18 (d，lH)，7.71 (d，lH)，7. 61 (t，lH)，6.70 (s，lH),2.72 (s，3H).
^_ 4-氯-2-甲基硫烷基-6- ( 3-三氟甲基苯基)-嘧啶 將2-甲基硫烷基-6- (3-三氟曱基-苯基)-嘧啶-4-醇(500 mg) 和氯氧化磷(2.5 ml)加熱到回流保持四小時。在減壓下濃縮該反應 混合物并將殘存的殘余物溶于乙酸乙酯(50 ml )并用水(2 x 30 ml )
23洗滌。分離有機物，在硫酸鈉上干燥并在減壓下除去溶劑而產生為褐
色固體的4-氯-2-甲基硫烷基-6-( 3-三氟甲基-苯基)-嘧啶(478mg)。 ^ NMR (CDC1》:5 8.35 (s，lH)，8. 28 (d，lH)，7. 78 (d，lH)，7. 67
(t，lH)，7. 41 (s，lH)，2. 66 (s，3H).
5L2-曱基硫烷基-4- ( 3， 3， 4-三甲基哌嗪-l-基)-6- ( 3-三氟甲基
苯基) -嘧咬
在室溫下將二氯甲烷(2 ml)中的4-氯-2-甲基硫烷基-6- (3-三 氟甲基苯基)-嘧啶(200 mg ) 、 3， 3， 4-三甲基-哌嗪二鹽酸鹽(mg ) 和三乙胺(457jul)攪拌一整夜。用二氯甲烷(30 ml)稀釋該混合物 并用水(2x25ml)洗滌。分離有機物，在硫酸鈉上干燥并在減壓下蒸 發溶劑而產生粗產物。在二氧化硅上的急驟層析產生為淺黃色固體的 產物2-甲基硫烷基-4- ( 3， 3， 4-三甲基-哌嗪-l-基)-6- ( 3-三氟甲基-苯基)-嘧啶(199 mg)。
丄H NMR (MeOD):.8.38 (s,lH)，8.28 (d，lH)，7.78 (d，lH)，7.67 (t，lH)，6.94 (s，lH)，3. 85 (t，2H)，3.58 (s，2H)，2.67 (t，2H)，2.54 (s， 3H)， 2. 282 (s， 3H)， 1. 09 (s， 6H).
iL2-曱基磺酰基-4-( 3， 3,4-三曱基-4-氧基-哌嗪-1-基)-6-( 3-三氟甲基-苯基)-嘧啶
在室溫下在乙腈(3. 5 ml)、曱醇(1 ml )和水(0. 5 ml )的混 合物中，攪拌2-甲基硫烷基-4- (3，3，4-三甲基-哌嘹-1-基)-6- (3-三氟曱基-苯基)-嘧啶U88mg)和oxone ( 670 mg)攪拌兩小時。在 減壓下蒸發溶劑并將殘存的殘余物溶于乙酸乙酯(40mL)并用飽和碳 酸鈉(40 ml)洗滌。分離有機物，在硫酸鈉干燥上，并在減壓下蒸發 溶劑而產生產物2-甲基磺酰基-4-( 3， 3, 4-三曱基-4-氧基-哌溱-l-基) -6- ( 3-三氟曱基-苯基)-嘧啶。
MS歷/z 445. 5 (M+l).
^_4-( 3， 3,4-三甲基-4-氧基-哌嗪-1-基)-6-( 3-三氟甲基-苯基) -嘧咬-2-腈
在二曱基亞砜(lml )中將2-甲基磺酰基-4- ( 3， 3，4-三曱基-4-氧基-哌溱-l-基)-6- ( 3-三氟甲基-苯基)-嘧啶(117 mg)和氰化鈉 (27 mg)加熱到45X:保持四小時。用二氯甲烷(40 ml )稀釋該反應 混合物并用水(3x50ml)洗滌。分離有機物，在硫酸鈉上干燥并在減 壓下蒸發溶劑而產生粗產物。通過在二氧化硅上的急驟層析接著通過 制備LCMS將20mg粗產物純化產生為白色固體的4- ( 3， 3，4-三甲基-4-氧基-哌嗪-l-基)-6- (3-三氟甲基-苯基)-嘧啶-2-腈(7 mg)。
^ NMR (MeOD):5 8.45(s，lH)，8.41(d, 1H)，7. 84
(d，lH)，7.73 (t，lH)，7.66 (s，lH)，4.76 (t，lH)，4. 47 (d，m)，4.13 (m，lH)，3. 85 (m，3H)，3.53 (s，3H)，1.63 (s，3H)，1.59 (s，3H).
實施例12: 4- ( 3， 3，4-三甲基-哌嗪-1-基)-6- ( 3-三氟曱基-苯 基)-嘧啶-2-腈<formula>formula see original document page 25</formula>
在室溫下在四氫呋喃(500 中將4- ( 3， 3，4-三甲基-4-氧基-哌嗪-l-基)-6-( 3-三氟曱基-苯基)-嘧啶-2-腈(實施例ll; 16mg)、 聚(甲基羥基硅氧烷)(8mg)和四(三苯基膦)鈀(0) (5mg)攪 拌三小時。在減壓下蒸發四氫呋喃并將殘存的殘余物溶于二氯曱烷(5 ml)并用水(5 ml)洗滌。分離有機物，在硫酸鈉上千燥并在減壓下 蒸發溶劑而產生粗產物。通過制備LCMS純化產生作為三氟乙酸鹽的產 物4- (3， 3，4-三曱基-哌嗪-l-基)-6- (3-三氟甲基-苯基)-嘧啶-2-腈(2.5 mg)。
HNMR (MeOD): 5 8.45 (s，lH)，8.40 (d, 1H)，7. 84 (d，lH)，7. 73 (t，lH)，7. 64 (s，lH)，3. 47 (m，3H)，3. 30 (m，3H),2.89 (s，3H)，1.43 (m， 6H). MS ;t7々376. 7 (M+l).
實施例13: 4-[1，4]二氮雜環庚烷-1-基-6- ( 3-三氟曱基苯基)-嘧啶-2-腈IIN八Nk 4-[2-甲基硫烷基-6- (3-三氟曱基苯基)-嘧啶-4-基]-[1，4] 二氮雜環庚烷-l-羧酸叔丁基酯在室溫下在二氣甲烷(1 ml)將4-氯-2-甲基硫烷基-6- (3-三氟 曱基苯基)-嘧啶U40mg) 、 l-高哌,羧酸叔丁酯(181m1)和三乙 胺(320jli 1 )攪拌一整夜。用二氯曱烷(30ml )稀釋該反應混合物并 用水(2x20ml)洗滌。分離有機物，在硫酸鈉上干燥并在減壓下蒸發 溶劑而產生粗產物。通過在二氧化硅上的急驟層析純化產生為黃色油 的產物4-[2-曱基硫烷基-6- (3-三氟曱基-苯基)-嗜啶-4-基]-[1，4] 二氮雜環庚烷-l-羧酸叔丁基酯(185 mg)。NMR (MeOD): .8.19 (s，lH)，8. 12 (d，lH)，7.68 (d，lH)，7. 57 (t，lH)，6. 50 (s，lH)，3. 80 (m，4H)，3.59 (m，2H)，3. 38 (t，lH)，3. 27 (t，lH)，2.57 (s，3H)，1.99 (t，2H)，1.42 (d，9H).lL 4- [2-甲基磺酰基-6- ( 3-三氟甲基-苯基)-嘧啶-4-基]-[1， 4] 二氮雜環庚烷-1-羧酸叔丁基酯在室溫下在乙腈(3ml)和水(30Qjil)中將4-[2-甲基硫烷基-6-(3-三氟曱基-苯基)-嘧啶-4-基]-[l，4]二氮雜環庚烷-l-羧酸叔丁基 酯(185 mg)和過一硫酸鉀(558 mg )攪拌八小時。然后用乙酸乙酯 (50 ml)稀釋反應混合物并用水(2x40ral)洗滌。分離有機物，在甲基磺酰基二二 3-2氟甲k-苯基)-嘧咬-4-基]-[I, 4] 二氮雜環庚烷 -l-羧酸叔丁基酯(139mg) 。 MS范/z 501.3 (M+l).[1，4]二氮雜環庚烷-1-基-6-( 3-三氟甲基-苯基)-嘧啶-2-腈三氟乙酸鹽在二曱基亞砜中將4-[2-曱基磺酰基-6- ( 3-三氟曱基-苯基)-嘧啶-4-基]-[l，4]二氮雜環庚烷-l-羧酸叔丁基酯(139mg)和氰化鈉 (22mg)加熱到45匸保持四小時。用二氯甲烷(50ml )稀釋該反應混 合物并用水(3x 30ml )洗滌。分離有機物，在硫酸鈉上干燥并在減壓 下蒸發溶劑而產生產物4-[2-氰基-6- (3-三氟曱基-苯基)-嘧啶-4-基]-[1，4]二氛雜環庚烷-1-羧酸叔丁基酯(104mg)。然后將上面產物 溶于二氯甲烷(lml)并冷卻到OX:。添加三氟乙酸(200juL)并攪拌 該混合物十分鐘。在減壓下蒸發溶劑以產生粗產物。通過制備性HPLC 純化產生作為白色回體的產物4-[1，4〗二氮雜環庚烷-1-基-6-{ 3-三氟 甲基-苯基)-嘧啶-2-腈三氟乙酸鹽(52 mg)。卞腿(MeOD):.8.42 (s，lH)，8. 37 (d，lH)，7.82 (d，lH)，7. 71 (t，lH)，7.45 (s，lH)，4.16 (m， 2H) ， 3. 92 (m，2H)，3. 47 (t，2H)，3. 37 (t，2H)，2.24 (m，2H).實施例14: 4- (4-甲基-[1，4]二氮雜環庚烷-1-基)-6- ( 3-三氟 曱基-苯基)-嘧啶-2-腈在室溫下在曱醇(500|al)中將4-[l，4]二氮雜環庚烷-l-基-6-(3-三氟甲基-苯基)-嘧啶-2-腈三氟乙酸鹽(實施例13; 30 mg)和 甲醛(6 mg， 37wt%水溶液)攪拌十分鐘。添將三乙酰氧基硼氫化鈉 (17mg)添加到反應中并繼續攪拌二小時。在減壓下蒸發溶劑以產生 粗產物。通過在二氧化硅上的急驟層析純化產生產物4-( 4-甲基-[1， 4] 二氮雜環庚烷-l-基)-6- ( 3-三氟曱基-苯基)-嘧啶-2-腈(10mg)。^ NMR (MeOD): 5 8.39 (s，lH)，8.36 (d，lH)，7. 82 (d，lH)， 7.71 (t，lH)，7. 30 (s，lH)，4. 10—3. 75 (m，4H)，2. 81 (m，2H)，2.69 (m，2H)，2. 40 (s， 3H) ， 2. 18-1. 96 (m， 2H).MS邁々362. 5 (M+l).實施例15: 4-芐氧基-6- (3-三氟甲基-苯基)-嘧啶-2-腈
<formula>formula see original document page 27</formula>AL 2-甲基硫坑基-6- (3-三氟曱基苯基)-嘧啶-4-基胺 在氮氣氣氛下向攪拌下的4-氛基-6-氯-2-甲基硫嘧啶(3. 5 g )在 曱苯(45mL)中的溶液中依次加入3-(三氟-甲基苯基)硼酸(4. 15 g)、 碳酸鉀(25 mL， 2M)和四(三苯基膦)鈀(0) (1.16 g)。將該混 合物加熱到回流保持十小時并在室溫下攪拌一周。加入乙酸乙酯 (150mL)并用水(2x 100mL)洗滌該混合物。分離有機層，用飽和氯 化鈉(100mL)洗滌，在硫酸鈉上干燥并在減壓下蒸發溶劑而產生粗產 物。通過急驟層析的純化產生產物2-甲基硫烷基-6-( 3-三氟甲基苯基) -嗜啶-4-基胺(3. 45 g)。^NMR (CDC1》5 8.25 (s，lH)，8. 19 (d，lH)，7.70 (d，lH)，7.58 (t，lH)，6. 56 (s，lH)，4. 92 (s，2H)，2.61 (s，3H). MS邁/z 286. 3 (M+l). B: 2-曱基硫烷基-6- ( 3-三氟甲基苯基)-嘧啶-4-醇 在乙酸(6ml)中將2-甲基硫烷基-6- (3-三氟甲基-苯基)-嘧啶 -4-基胺(2.42g)加熱到40X:直到溶解。逐滴添加亞硝酸鈉(1.17g， 在最小體積的水中)的溶液并在40X:下繼續攪拌30分鐘并在90"C下繼 續攪拌90分鐘。允許該反應混合物冷卻到室溫并過濾。用水洗滌該濾 餅，然后溶于乙酸乙酯(200mL )并用飽和碳酸氫鈉(2 x 300mL )洗滌。 分離有機物，在硫酸鈉上干燥并在減壓下蒸發溶劑而產生為淺黃色固 體的產物2-曱基硫烷基-6-( 3-三氟-曱基苯基)-嘧啶-4-醇(2. llg )。 ^麗R (CDCU : 5 8.30 (s， 1H) ，8.18 (d， 1H) ， 7. 71 (d， 1H) ， 7. 61 (t，lH),6. 70 (s，lH)，2.72 (s，3H).^_ 4-氯-2-曱基硫烷基-6- (3-三氟甲基-苯基)-嘧啶 在氯氧化磷(15mL)中將2-甲基硫烷基-6- ( 3-三氟曱基-苯基)-嘧啶-4-醇(2. llg)加熱到回流保持四小時。在減壓下蒸發氯氧化磷 并將殘存的殘余物溶于乙酸乙酯U00mL)并用飽和氯化鈉(50mL)洗 滌。分離有機物，在硫酸鈉上干燥并在減壓下蒸發溶劑而產生為棕色 油的產物4-氯-2-甲基硫烷基-6- ( 3-三氟曱基-苯基) -嘧啶(2. 11 g )。 工H腿(CDC13): 5 8. 32 (s， 1H) ， 8. 25 (d， 1H) ，7.80 (d， 1H) ， 7. 65 (t， 1H) ， 7. 41 (s， 1H) ， 2. 66 (s， 3H).4-千氧基-2-甲基硫坑基-6- (3-三氟曱基苯基)-嘧啶 向在On下的攪拌下的氫化鈉(630 mg， 60%在礦物油中的分散體) 在四氫呋喃(20 ml)中的懸浮液中添加苯曱醇(1.09 ml)。攪拌該 混合物15分鐘，然后逐滴添加4-氯-2-甲基硫烷基-6- (3-三氟曱基-苯基)-嘧啶(1.6 g)在四氫呋喃(Mml)中的溶液。允許該反應回 暖到室溫并攪拌二小時。在減壓下蒸發溶劑并將殘存的殘余物溶于二 氯甲烷(200 ml)并用水(2xl50ml)洗滌。分離有機物，在硫酸鈉 上干燥并在減壓下除去溶刑而產生粗產物< 2. 5 g> 。在二氧化硅上的 急驟層析產生為黃色固體的4-節氧基-2-曱基硫烷基-6-( 3-三氟甲基-苯基)-嘧啶(1.75 g)。'HNMR (CDC1》5 8.30 (s，lH)，8. 19 (d，lH)，7. 71 (d，lH)，7. 58 (t，lH)，7. 47 (d，2H)，7. 39 (m，3H)，6.86 (s，lH)，5.48 (s，2H)，2. 64 (s， 3H).|!_ 4-芐氧基-2-甲基磺酰基-6- (3-三氟曱基苯基)-嘧啶 在室溫下在乙腈(2 ml)和水(200 m 1)中將4-節氧基-2-甲基硫 烷基-6- ( 3-三氟曱基-苯基)-嗜啶(100 mg)和過一硫酸鉀(WOmg) 攪拌20小時。用乙酸乙酯(40 ml)稀釋該反應混合物并用水(40 ml) 洗滌。分離有機物，在硫酸鈉上干燥并在減壓下蒸發溶劑而產生產物 4-千氧基-2-甲基磺酰基-6- ( 3-三氟甲基-苯基)-嘧啶(93 mg)。NMR (CDCh): 5 8.28 (s，lH)，8.25 (d，lH)，7. 80 (d，lH)，7.68 (t，lH)，7. 48 (d，2H)，7.41 (m，3H),7. 32 (s，lH)，5.59 (s，2H)，3.40 (s， 3H).EL 4-芐氧基-6- ( 3-三氟曱基-苯基)-嘧啶-2-腈 在室溫下在二甲基亞砜(500 ja 1 )中將4-芐氧基-2-甲基磺酰基-6-(3-三氟甲基-苯基) -嘧啶(92mg)和氰化鈉(22mg)攪拌20分鐘。 用二氯甲烷(40 ml)稀釋該反應混合物并用水(3x50ml)洗滌。分 離有機物，在硫酸鈉上干燥并在減壓下蒸發溶劑而產生為黃色油的粗 產物(86rag)。通過在二氧化硅上的急驟層析純化產生產物4-芐氧基 -6- (3-三氟曱基-苯基)-嘧啶-2-腈(54 mg)。力腿(CDCU : 5 8. 20 (s， 1H) ， 8. 12 (d， 1H) ， 7. 69 (d， 1H) ， 7. 55 (t，lH)，7. 39 (d，2H)，7.30 (m，3H)，7. 23 (s，lH)，5.42 (s，2H).實施例16a:4-二乙基氦基-6- (3-三氟曱基-苯基)-嘧啶-2-腈AL 4-羥基-6- ( 3-三氟甲基苯基)-嗜啶-2-羧酸曱基酯 向OX:的曱醇(10 ml)中添加亞硫酰氯(500jjl)。攪拌該混合 物30分鐘，然后添加4-節氧基-6-( 3-三氟甲基-苯基)-嘧啶-2-腈(300 mg)并將該反應加熱到回流保持五小時。在減壓下蒸發溶劑以產生粗 產物。通過在二氧化硅上的急驟層析純化所得的殘余物提供產物4-羥 基-6- (3-三氟甲基苯基)-嘧啶-2-羧酸甲基酯(104 mg)。^腿(DMS0): 5 8.41 (s，lH)，8.40 (d，lH)，7.89 (d，lH)，7. 78 (t， 1H)， 7. 36 (s， 1H)， 3. 93 (s， 3H).B: 4-羥基-6- ( 3-三氟曱基苯基)-嘧啶-2-羧酸酰胺 在室溫下在氨水(500jil)中將4-羥基-6- (3-三氟甲基苯基)— 嘧啶-2-羧酸曱基酯(17 mg)攪拌一小時。在減壓下蒸發溶劑而產生 為白色固體的產物4-幾基-6- (3-三氟甲基-苯基)-嘧啶-2-羧酸酰胺 (17 mg)。H NMR (DMS0): 5 8.66 (s，lH)，8.61 (s，lH)，8.54 (d，lH)，8. 13 (s，lH)，7. 87 (d，lH)，7.73 (t，lH)，7.22 (s，lH).^_ 4-氯-6- ( 3-三氟曱基-苯基)-嘧啶-2-腈在乙酸乙酯(2 ml)和氯氧化磷(8 ml)中將4-羥基-6- ( 3-三氟 甲基-苯基)-嘧啶-2-羧酸酰胺(340 mg)加熱到回流保持四小時。在 減壓下蒸發溶劑并將殘存的殘余物溶于乙酸乙酯(30ml )并用飽和氯 化鈉(20 ml)洗滌。分離有機物，在硫酸鈉上干燥并除去溶刑而產生 為褐色固體的產物4-氯-6- ( 3-三氟曱基苯基)-嘧啶-2-腈(362mg)。在沒有進一步純化下將這一產物用于下一個步驟。2: 4-二乙基氨基-6- ( 3-三氟曱基苯基)-嘧啶-2-腈 在室溫下在乙腈(500|il)中將4-氯-6- (3-三氟曱基苯基) -嘧 啶-2-腈(10mg) 、 二曱胺(18jjl)和三乙胺(50)Jl)攪拌一小時。 在減壓下除去溶劑之后，通過制備LCMS純化該殘余物而產生為白色固 體的4-二乙基氨基-6- (3-三氟-曱基-苯基)-嘧啶-2-腈(2. 5 mg)。 丄H NMR (MeOD): 5 8.38 (s，lH)，8.32 (d，lH)，7. 81 (d，lH)，7.72 (t，lH),7. 20 (s,lff)，J.70 (m，4H)，1.25 (t，6H》.MS范/z 320.32 (M+l).使用合適的胺衍生物進一步應用上述步驟以制備以下化合物16b: 4- (2-吡咯烷-1-基-乙氨基)-6- ( 3-三氟甲基-苯基) -嘧 啶-2-腈三氟乙酸鹽'H腿(MeOD): 5 8.32 (s，lH)，8.27 (d，lH)，7.83 (d，lH)，7. 72 (t，lH)，7. 24 (s，lH)，3. 88 (t，2H),3.80 (m，2H),3. 49 (t，2H),3. 19 (m，2H)，2. 19 (m，2H)，2. 08 (m，2H). MS /zz/z 362. 5 (M+l).16c: 4- (2-二曱基氨基-乙氨基)-6- ( 3-三氟曱基-苯基)-嘧啶 -2-腈三氟乙酸鹽'H NMR (MeOD): 5 8. 19 (s， 1H) ， 8. 08 (d， 1H) ， 7. 66 (d， 1H) ，7.53 (t，lH)，6.96 (s，lH)，3. 89 (m，2H)，3. 28 (t，2H)，2. 85 (s，6H). MS邊/z 336. 3 (M+l).16d: 4- ( 2-哌啶-1-基-乙氨基)-6- ( 3-三氟曱基-苯基) -嘧啶-2-腈三氟乙酸鹽HNMR (MeOD): 5 8.32 (s，lH)，8.27 (d，lH)，7.82 (d，lH)，7.71 (t，lH)，7.23 (s，lH)，3. 88 (t，2H)，3. 70 (d，2H)，3. 37 (t,2H)，3. 02 (t， 2H) ， 1. 97 (d， 2H) ，1.83 (m， 3H) ， 1. 54 (m， 1H). MS zs/z 376. 5 (M+l).16i:4- ( 3-二曱基氨基-2，2-二曱基-丙氨基)-6- ( 3-三氟曱基-苯基)-嘧啶-2-腈三氟乙酸鹽NMR (Me0D): 5 8.30 (s，lH)，8.25 (d，lH)，7.82 (d，lH)，7.70 (t，lH)，7.23 (s，lH)，3.52 (s，2H)，3.18 (s，2H)，3.00 (s，6H)，1.18(s， 6H). MS邁々378. 7 (M+l).16j: 4- (4-吡咯烷-1-基-哌啶-1-基)-6- ( 3-三氟曱基-苯基)— 嘧啶-2-腈三氟乙酸鹽^ NMR (MeOD): 5 8.40 (s，lH)，8. 35 (d，lH)，7.83 (d, 1H)，7.70 (t，lH)，7.52 (s，lH),4.81 (m，2H)，3. 67 (邁，2H)，3.51 (m，lH)，3. 20 (ni，2H)，3.10 (t，2H)，2.30 (m，2H)，2.17 (m， 2H) ， 2. 02 (m，2H)，1.69 (ra， 2H). MS /ff/z 402.5 (M+l).l化4-f曱基-(t-甲基-旅啶-4-基)-氨基-6- (1-三氟甲基-苯基)-嘧啶-2-腈三氟乙酸鹽!H畫R (MeOD): 5 8.40 (s，lH)，8. 36 (d，lH)，7.82 (d，lH)，7.71 (t，lH)，7.35 (s，lH)，3. 64 (m，2H)，3. 30 (m，3H)，3. 10 (s，3H)，2. 92 (s，3H)，2. 18 (m，2H)，2. 02 (m，2H). MS /zz々376. 7 (M+l) 161: 4- ( 2-吡啶-2-基-乙氨基)-6- ( 3-三氟甲基-苯基) -嘧啶-2-腈三氟乙酸鹽H腿(MeOD): 5 8.70 (d， 1H) ， 8. 38 (t， 1H) ， 8. 26 (s， 1H) ， 8. 21 (d，lH)，7. 90 (d，lH)，7.84 (m，lH)，7. 90 (d，lH)，7.69 (t，lH)，7. 10 (s，lH)，3, 95 (t，2H)，3. 34 (t，2H). MS邊/z 370. 1 (M+l) 16n: 4-[ ( 1H-四唑-5-基甲基)-氨基]-6- ( 3-三氟甲基-苯基)—嗜咬-2-腈^ NMR (DMSO): 5 8.57 (t,lH)，8.28 (m，2H)，7.89 (d, 1H)，7.79 (t，lH)，7.43 (s，lH)，4. 94 (d， 2H). MS邁々344. 9 (M-l).16o:4-(羧甲基氨基)-6- (3-三氟曱基-苯基)-嘧啶-2-腈H NMR (DMSO): 5 8.28 (m，2H)，8. 15 (m, 1H)，7. 88 (d，lH)，7. 78 (t,lH)，7.43 (s，lH)，4.10 (d，2H). MS邁々32 3. 5 (M+l) 16p: 4- (2-二甲基氨基-乙基硫烷基)-6- (3-三氟曱基-苯基)-嘧啶-2-腈三氟乙酸鹽^NMR (MeOD): 5 8.63 (s，lH)，8.58 (d，lH)，8.28 (s，lH)，7.89 (d，lH)，7. 78 (t，lH)，3. 61 (s，4H)，3. 03 (s，6H). MS邁/z 353.5 (M+l).16r: 4-(氨基曱酰基曱基-氨基)-6- ( 3-三氟曱基-苯基)-嘧啶 -2-腈^ NMR (DMSO): 5 8.28 (m， 2H) ， 8. 03 (t， 1H) ， 7. 88 (d， 1H) ， 7. 78 (t，lH)，7.44 (s，lH)，4.00 (d，2H). MS邁々322. 5 (M+l).實施例16s: 4-< 2-二甲基氨基甲基^芐氨基> -6-(，-三氟曱基-苯基)-嘧啶-2-腈三氟乙酸鹽!H NMR (MeOD): 5 8.60 (s，lH)，8. 55 (d，lH)，8. 10 (d，lH)，8. 00 (t， 1H) ， 7. 89-7. 71 (m， 4H) ， 7. 51 (s， 1H) ， 5. 08 (s， 2H) ， 4. 89 (s， 2H) ， 3. 30 (s， 6H). MS /7/々412. 5 (M+l) 實施例17:4- (4-曱氧基-3-三氟甲基-苯基)-6-哌嗪-1-基-嘧啶-2-腈AL 3-三氟甲基-4-甲氧基苯基硼酸將3-溴-6-甲氧基-苯并三氟化物(5 g)溶于干THF (100 ml)并 在氮氣下將該混合物冷卻到-78t:。在l()分鐘內逐滴添加n-BuLi( 12. 25 ml在己烷中的l. 6M溶液)。在-78。C下攪拌混合物10分鐘。按一份添加 硼酸三異丙酯(3. 87g)并在-78。C下攪拌該混合物30分鐘，然后允許 回暖到RT。通過添加水(50ml)和乙酸(lml)使混合物淬滅。蒸發 混合物以除去THF，然后在DCM (100ml)和水(50ml)之間分配。干 燥有機物并在減壓下蒸發而提供2. 1 g白色固體。將水層酸化(5M HC1; 5 ml )，然后用乙酸乙酯(100 ml )萃取而提供l. 9g白色固體。將白 色固體合并而產生為白色固體的4. Og 3-三氟甲基-4-甲氧基苯基硼 酸。'H腿 (MeOH):5 8.0-7.8 (m， 1H) ， 7. 25-7. 1 (m，2H)，3. 95(s， 3H).IL 4-[2-氰基-6- (4-曱氧基-3-三氟曱基-苯基)-嘧啶-4-基]-哌溱-l-羧酸叔丁基酯在甲苯(25 ml)、乙醇(25 ml)和水(2 ml )的混合物中攪拌 3-三氟曱基-4-曱氧基苯基硼酸(1.5 g) 、 4-(6-氯-2-甲基硫烷基-嘧啶-4-基) -哌溱-l-羧酸叔丁基酯(2. 38 g) 、 Combiphos Pd6 ( 142 mg)和碳酸鈉(1. 97 g)并將該混合物加熱到回流保持l小時。蒸發混 合物，然后在乙酸乙酯(200 ml》和水(200ml)之間分配，然后過濾。 分離有機物，然后干燥(MgSOj并蒸發而提供3. 4 g棕色油。將該油 溶于DMSO (50 ml)，添加氰化鈉(653 mg)并在室溫下攪拌該混合物 72小時。在醚(200 ml)中調和混合物，然后用水(2 x 200 ml)洗滌。 干燥有機物并在減壓下蒸發而提供2. 9 g褐色固體。通過在二氧化硅上 的急驟層析(10%乙酸乙酯/庚烷至40%乙酸乙酯/庚烷)純化產生為白 色固體的l. 83g 4-[2-氰基-6-( 4-甲氧基-3-三氟甲基-苯基)-嘧啶-4-基]-哌喚-l-羧酸叔丁基酯。丄H謹(CDC13): 5 8. 23 (d， 1H) ， 8. 15 (s， 1H) ， 7. 11 (d， 1H) ， 6. 87 (s，lH)，3.98 (s，3H)，3.76 (m，4H)，3.58 (m，4H)，1.49 (s， 9H). MS邊/z 464. 3 (M+l).C: 4- ( 4-曱氧基-3-三氟甲基-苯基)-6-哌嗪-l-基-嘧啶-2-腈三 氟乙酸鹽將4-[2-甲基磺酰基-6- (4-甲氧基-3-三氟甲基-苯基)-嘧啶-4-基]-哌嗪-l-羧酸叔丁基酯U.73g)溶于二氯曱烷(50 ml)中并在5 分鐘內逐滴添加TFA ( 3ml )。在室溫下攪拌該反應混合物30分鐘。蒸 發混合物，然后在減壓下與氯仿共蒸發而提供為白色固體的1.82g (96% ) 4- ( 4-甲氧基-3-三氟甲基-苯基)-6-哌嗪-l-基-嘧啶-2-腈三 氟乙酸鹽。NMR (MeOH): 58.38 (ra，2H)，7. 48 (s，lH)，7.33 (d， 1H) ， 4. 12 (m ， 4H) ， 4. 01 (s， 3H) ， 3. 38 (m， 4H). MS邁々364. 3 (M+l).實施例18a:2-{4-[2-氰基-6- (4-曱氧基-3-三氟曱基-苯基)-嘧啶-4-基]-哌溱-l-基)—乙酰胺三氟乙酸鹽<formula>formula see original document page 35</formula>將4- (4-甲氣基-3-三氟曱基-苯基)-6-哌嗪-1-基-嘧啶-2-猜三 氟乙酸鹽(50 mg) ， 二異丙基乙胺(40 mg)和2-溴乙酰胺(22 mg ) 溶于乙腈(2 ffll )并在651C下攪拌該混合物一整夜。在乙酸乙酯(1G仿1 ) 和水(10 ml)之間分配混合物，干燥有機物并在減壓下蒸發而提供白 色固體。通過制備性HPLC的純化提供18 mg為白色固體的2- {4- [2-氛基 -6- (4-甲氧基-3-三氟曱基-苯基)-嘧啶-4-基]-哌溱-1-基}-乙酰胺 三氟乙酸鹽。NMR (MeOH): 5 8.36 (m，2H)，7. 45 (s，lH)，7. 31 (d，lH)，4. 08 (m，4H)，3. 98 (s，3H)，3.80 (s，2H)，3. 34 (m， 4H). MS邁/z 421. 1 (M+l).通過使用上述的相同步驟還制備了以下化合物。18b: 4- (4-芐基-哌嗪-l-基)-6- (4-曱氧基-3-三氟甲基-苯基) -嘧啶-2-腈三氟乙酸鹽^ NMR (MeOH): 5 8.35 (m，2H)，7. 53 (m，5H)，7. 48 (s,lH)，7. 33 (d，lH)，4.5-3. 6 (broad m，4H)，4.40 (s，2H)，3.99 (s，3H)，3.42 (m， 4H).MS /77/z 454. 3 (M+l).實施例19: 4- (2-羥基-乙氨基)-6- (4-甲氧基-3-三氟曱基-苯基)-嘧啶-2-腈<formula>formula see original document page 35</formula>'A: 2-[2-曱基磺酰基-6- (4-甲氧基-3-三氟甲基-苯基)-嘧啶-4-基氨基]-乙醇將2- (6-氯-2-曱基硫烷基-嘧啶-4-基氨基)-乙醇(0.82 g)、 3-三氟甲基-4-曱氧基苯基硼酸(1.24g)、四三苯膦鈀(434 mg)和 碳酸鉀(1. 6 g)溶于DMF (10ml)和水(1 ml)中并在CEM Discoverer 微波中將該混合物加熱到150X:保持10分鐘。在乙酸乙酯(50 ml)和 水(50 ml)之間分配混合物。干燥有機物，在減壓下蒸發，然后在二 氧化硅上急驟層析(在庚烷中的20%乙酸乙酯至在庚烷中的50%乙酸乙 酯)而提供O. 82 g靜置時固結的透明油。將這一固體溶于乙腈(15 ml ) 和水(5 mit中并攪拌，同對在5分鐘內分成幾份添加0xone。在RT下 攪拌該混合物72小時。在減壓下蒸發混合物，然后在乙酸乙S旨(100 ml ) 和水(100ml)之間分配。干燥有機(MgS0j ，然后在減壓下蒸發而 提供O. 68 g為白色固體的2-[2-曱基磺酰基-6-( 4-甲氧基-3-三氟甲基 -苯基)-嘧啶-4-基氨基]-乙醇。'HNMR (CDCh): 5 8.10 (m，2H)，7. 00 (d, 1H)，6. 86 (s，lH)，6.20 (bs， 1H) ， 3. 96 (s， 3H) ， 3. 87 (m， 2H) ， 3. 62 (m， 2H) ， 3. 34 (s， 3H). MS頂/z 392.5 (M+l).B: 4- ( 2-羥基-乙氨基)-6- ( 4-甲氧基-3-三氟甲基-苯基)-嘧啶 -2-腈將2-[2-甲基磺酰基-6- (4-甲氧基-3-三氟甲基-苯基)-嘧啶-4-基氨基]-乙醇(0. 68 g )溶于DMS0 (10 ml)中并添加氰化鈉(0. 17 g )。 在RT下攪拌該混合物48小時。在乙酸乙酯(100 ml)和水(100 ml) 之間分配混合物。干燥有機物并蒸發，然后在二氧化硅上急驟層析 (DCM-在DCM中的2。/。甲醇)而提供420 mg為白色固體的4- (2-羥基-乙 氨基)-6- (4-甲氧基-3-三氟甲基-苯基)-嘧啶-2-腈。NMR (MeOH): 5 8.23 (m，2H)，7.30 (d，lH)，7. 07 (s，lH)，3. 98 (s，3H)，3.73 (m，2H)，3.56 (m， 2H). MS /zz々339. 1 (M+l).實施例20: 4- (4-甲氧基-3-三氟甲基苯基)-6- ( 2-嗎啉-4-基-乙氨基)-嘧啶-2-腈將4- ( 2-羥基-乙氨基)-6- ( 4-甲氧基-3-三氟甲基-苯基)-嘧啶 -2-腈(150 mg)溶于THF (10 ml)并按一份添加Dess-Martin高捵烷 (periodinane)。在室溫下攪拌該混合物l. 5小時。在減壓下蒸發混 合物，然后在二氧化硅上急驟層析(在庚烷中的50%乙酸乙酯)而提供 84mg油狀固體。將20mg這一固體溶于甲醇(lml )和乙酸(0. lml )。 添加嗎啉(13mg)并在室溫下攪拌該混合物30分鐘。添加三乙酰氧基 硼氫化鈉(24mg)并在室溫下攪拌該混合物一整夜。蒸發混合物，溶 于乙腈，然后制備-LCMS純化而提供為透明油的4- (4-甲氧基-3-三氟 甲基-苯基)-6- (2-嗎啉-4-基-乙氨基)-嘧啶-2-腈。H醒(CDCU : 5 8. 34 (s， 1H) ， 8. 14 (d， 1H) ， 7. 91 (bs， 1H) ， 7. 09 (d，lH)，6. 92 (s,lH)，4. 04 (m，4H)，3. 96 (m，5H)，3. 53 (bs，2H)，3. 32 (m，2H)，2. 96 (m，2H).MS范/z 408. 5 (M+l).實施例21: 4-羥基-6- ( 3-三氟曱基-苯基)-嘧啶-2-腈將mCPBA ( 550 mg, 70% w/w)添加到2-曱硫基-6- ( 3-三氟甲基-苯基)-嘧啶-4-醇(200 mg， 0. 75 mmol )在乙腈(7ml )中的溶液中。 在48 h之后，添加Na2S03 ( 5ml， 1N )的溶液并在減壓下濃縮該反應混 合物而獲得lg中間體。在80。C下加熱238 mg該中間體和氰化鈉(73mg， 1. 49 mmol )在干DMSO ( 7. 5 ral )中的混合物32h。在減壓下除去該溶 劑。添加水(2 ml)以溶解殘存的NaCN。通過制備性HPLC純化該固體 而獲得上面主題化合物(20 mg，產率10%) 。 HPLC : 100%.力NMR (DMSO-cO :5 8.44 (2H， s) ， 7. 94 (1H， d) ， 7. 80 (1H， t) ， 7. 71 (lH，m).MS / 々266 (M+l).實施例22a: 4- ( 2-哌啶-l-基-乙氧基)-6- (3-三氟甲基-苯基) -嘧淀-2-腈<formula>formula see original document page 38</formula>A: 2-甲硫基-4- (2-哌啶-l-基-乙氧基)-6- ( 3-三氟甲基-苯基) -嘧咬將氫化鈉(30 mg， 1. 23 mmol)添加到4-氯-2-甲硫基-6- ( 3-三 氟曱基-苯基)_嘧啶(187 mg， 0. 62 mmol )和l- ( 2-羥乙基)哌啶(120 yl， 0. 92 mmol )在干THF ( 6 ml )中的混合物中。在40C下加熱該混 合物2h。在冷卻后，添加水和叔丁基甲基醚。用tBuOMe萃取該水層兩 次。在MgSO,上干燥合并的有機層并在減壓下濃縮。在硅膠上層析該殘 余物(洗脫液CH2Cl2至CH2Cl2/MeOH 95/5)而產生上面主題化合物 190 mg (產率78%)。丄H NMR (CDC13): 5 8. 29 (1H，s)，8. 20 (1H，d)，7. 71 (1H，d)，7. 59 (1H，m)，6. 83 (lH，s)，4. 55 (2H，m)，2. 78 (2H，m)，2.62 (3H，s)，2. 51 (4H，m)，1.61 (4H，m)，1.45 (2H，m).B: 2-曱基磺酰基-4- ( 2-哌啶-l-基-乙氧基)-6- (3-三氟甲基-苯基)-嘧啶將HC1的溶液(720 m 1，在Et20中，2N, 1.43 mmol)添加到2-甲 硫基-4- ( 2-哌啶-1-基-乙氧基)-6- ( 3-三氟甲基-苯基)-嘧啶(190 mg， 0.48 mmol)在Et20 ( 1 ml )中的溶液中。蒸發溶劑并將沉淀物溶 于水(1 ml )和乙腈(6 ml )的混合物。添力口Oxone ( 586 mg, .96 mmol ) 并在室溫下攪拌該反應混合物60h。添加Na2C03飽和水溶液(6ml) ( pH 值=9)接著添加AcOEt。用Na2S03、鹽水洗滌有機層，在MgS04上干燥 并在減壓下濃縮而獲得上面主題化合物184 mg (產率90 %)，在沒有更進一步純化下將它用于下一步驟。!H NMR (CDC1》5 8. 27 (2H，m)，7. 80 (1H， d, / = 7. 6 Hz) ， 7. 69 (lH，d，/= 8 Hz) ，7. 26 (lH，s)，4. 67 (2H， t， / - 5.6 Hz)，3. 42 (3H, s)，2.79 (2H，t，/= 5.6 Hz) ，2. 50 (4H，m),1.59 (4H,m)，1.45 (2H，m).MS ;z7々；4 30 (M+l).C: 4- (2-哌啶-l-基-乙氣基)-6- ( 3-三氟甲基-苯基)-嘧啶-2-在室溫下將含幾滴DMS0的2-甲基磺酰基-4- ( 2-哌啶-1-基-乙氧 基)-6- (3-三氟-甲基-苯基)-嘧啶(50 mg， 0.12 mmol )和氛化鈉 (12mg, 0. 23咖ol)在乙腈(1. 5 ml )中的混合物攪拌18h。在減壓 下除去該溶劑。在硅膠上層析該殘余物(洗脫液CH2Cl2iCH2Cl2/MeOH 95/5)而產生31 mg上面主題化合物產率70%。 HPLC : 99.5%.'H腿(CDCU 5:8. 31 OH， br s) ， 8. 24 (111， d，/= 了. 6 Hz)， 7. 79 (lH，d，/= 7.6 Hz) ，7. 66 (1H， t， / = 7.6 Hz) ，7. 34 (1H， br s)，4.61 (2H，m)，2.81 (2H，m)，2. 54 (4H，m)，1.63 (4H，m)，1.46 (2H， m). MS zz 々, 377 (M+l).使用合適的胺衍生物進一步應用上述步驟以制備以下化合物 22b: 4- (2-嗎啉-4-基-乙氧基)-6- (3-三氟曱基-苯基)-嘧啶 -2-腈賺(CDCh) 5 : 8. 31 (lH，s)，8.25 (1H， d， / = 8 Hz)，7.80 (lH，d，/= 8 Hz)，7.66 (1H， t， / = 8 Hz) ， 7. 34 (1H，s),4. 62 (2H， t， / =5.6Hz)，3.73 (4H，m)，2. 82 (2H， t，/= 5. 6 Hz) ， 2. 59 (4H， m). MS/zz/z , 379 (M+l).22c: 4- ( 2-二乙基氨基-乙氧基)-6- ( 3-三氟甲基-苯基)-嘧啶-2-腈力NMR (CDC1》5 : 8. 31 (1H, s)，8.23 (1H， d， / = 7. 6 Hz) ， 7. 79 (lH，d，/= 8 Hz)，7.66 (1H， t，/= 7. 8 Hz) ， 7. 32 (1H，s)，4. 55 (2H， t， / =6 Hz) ， 2. 89 (2H， t， /- 6 Hz) ， 2. 65 (4H, q， /= 7. 2 Hz) ， 1. 08 (6H， t， / =7. 2 Hz).MS邁々..365 (M+l).22d: 4- ( ( 2S ) -1-曱基-吡咯烷-2-基曱氧基)-6- ( 3-三氟甲基-苯基)-嘧啶-2-腈丄H NMR (CDC13) 5 : 8. 31 (1H，s)，8.24 (1H， d， / = 8 Hz)，7.79 (lH，d，/= 7.6 Hz) ，7. 66 (1H， t， / = 7.8 Hz) ，7, 34 (lH，s)，4. 47(2H，m)，3.14 (1H, t，/ - 9 Hz)，2.66 (1H，m)，2.48 (3H， s) ， 2. 31 (1H，m)，2. 02 (1H，m)， 1. 70-1. 90 (3H， m). MS邊/z : 363 (M+l) 11^_4- (2-叔丁基氨基-乙氧基)-6- ( 3-三氟甲基-苯基)-嘧啶 +腈NMR (CDCU: 5 8.30 (lH，s)，8. 24 (1H， d， / = 8 Hz)，7. 79 (lH，d，/- 7.6 Hz)，7.65 (1H， t， / = 7.8 Hz)，7.33 (1H，s)，4.60 (2H， t， / = 5.2 Hz) ， 3. 08 (2H， t， / = 5.4 Hz) ， 1. 20 (9H， s). MS邁/z ; 365 (M+l).實施例23:試驗步驟組織蛋白酶K活性通過如下所示測量對重組人組織蛋白酶K的抑制作用證實本發明 化合物在體外的抑制活性向384孔微滴定板中加入5 ja 1的測試化合物在試驗緩沖液(100mM 乙酸鈉pH5. 5， 5mMEDTA， 5mM二硫蘇糖醇)中的100 m m的溶液，其中含有 10。/。二曱亞砜(DMSO)，加上10ia l底物Z-Phe-Arg-AMC (Bachem; 二肽N-芐氧羰基-Phe-Arg-0H的7-酰氨基-香豆素衍生物)在試驗緩沖液中的 100jiM的溶液以及25jaL試驗緩沖液。然后向孔中加入IO n l的活化的 重組人組織蛋白酶K在試驗緩沖液中的lmg/l的溶液，得到濃度為10 m M 的最終抑制劑。在10分鐘時，通過使用390nM激發測量釋放的氨甲基香豆素在 440nM處的熒光確定酶活性。將此活性與不含抑制劑的溶液的活性進行對照，計算得到酶活性百分比。接下來將化合物進行劑量響應曲線分 析，以測定活性化合物的1(:5。值(其中1(:5。是指引起酶活性50%抑制作用的測試化合物的濃度)。本發明化合物一般具有的抑制人組織蛋白酶K的pIC5。 (ICs。濃度的 負對數)大于6，更優選大于7，例如實施例1、 2a、 2b、 3、 5、 6、 8、 12、 14、 13、 16k、 16n、 16o、 17、 22a、 22b、 22c的化合物，最優選pIC5。大于8。組織蛋白酶s活性。通過如下所示測量對重組人組織蛋白酶s的抑制作用證實本發明化合物在體外的抑制活性向384孔微滴定板中加入10jn l的測試化合物在試驗緩沖液(100mM 乙酸鈉pH5. 5，5mMEDTA， 5mM二硫蘇糖醇)中的100 p M的溶液，其中含有 10。/。二甲亞砜(DMSO)，加上20p l底物Z-Val-Val-Arg-AMC (Bachem;三 肽N-芐氧羰基-Val-Va卜Arg-0H的7-酰氨基-香豆素衍生物)在試驗緩 沖液中的250juM的溶液以及45 ft l，緩沖液。然后向孔中加入25m I 活化的重組人組織蛋白酶S在試驗緩沖液中的2mg /1的溶液，得到濃度 為10nM的最終抑制劑。在20分鐘時，通過使用390nM激發測量釋放的氨曱基香豆素在 440nM處的熒光確定酶活性。將此活性與不含抑制劑的溶液的活性進行 對照，計算得到酶活性百分比。接下來將化合物進行劑量響應曲線分 析，以測得活性化合物的ICw值(其中ICs。是指《1起酶活性5 0%抑制作用 的測試化合物的濃度)。本發明化合物一般具有的抑制人組織蛋白酶S的pICs。 (ICs。濃度的 負對數)大于6。本發明的大多數化合物具有大于7的pICs。。
權利要求
1.具有通式I的4-苯基-6-取代的-嘧啶-2-腈衍生物，或它們的藥學上可接受的鹽id="icf0001" file="S2006800348456C00011.gif" wi="54" he="34" top= "58" left = "86" img-content="drawing" img-format="tif" orientation="portrait" inline="no"/>通式I其中R表示1-3個任選的獨立選自(C1-4)烷基(任選被一個或多個鹵素取代)，(C1-4)烷氧基(任選被一個或多個鹵素取代)和鹵素的取代基；X是NR1、O或S；R1是H或(C1-4)烷基；Y是(C1-4)烷基、芐基或(C2-6)烷基，它們被選自OH、(C1-4)烷氧基、NR2R3、包含1或2個選自O，S和NR4的雜原子的4-8元飽和雜環，和包含1-4個N原子的5或6元芳族雜環基團取代；或R1和Y和與其鍵接的氮一起形成5-8元飽和雜環，其任選地包含另一個選自O、S、NR4和NO的雜原子；該環任選地被NR2R3或1到4個(C1-3)烷基取代；R2和R3獨立地是H或(C1-4)烷基；或R2和R3和與其鍵接的氮一起形成4-8元飽和雜環，其任選地包含另一個選自O、S和NR4的雜原子；R4是H、(C1-6)烷基、(C3-6)環烷基、(C3-6)環烷基(C1-4)烷基、(C1-4)烷氧基(C1-4)烷基、芐基、酰胺基(C1-4)烷基、(C1-6)烷氧基羰基(C1-4)烷基或羧基(C1-4)烷基。
2.根據權利要求1的所述4-苯基-6-取代的-嘧啶-2-腈衍生物，其中 R表示該4-苯基的間位上的三氟甲基取代基。
3. 根據權利要求1或2的所述4 -苯基-6-取代的-嗜啶-2-腈衍生物， 其中X是NR"
4. 選自以下的所述通式1的4-苯基-6-取代的-嘧啶-2-腈衍生物， -4- (哌嗪-l-基)-6- (3-三氟甲基苯基)-嘧啶-2-腈；-4- (4-環丙基-哌嗪-l-基)-6-(三氟曱基苯基)-嘧啶-2-腈； -4_[1，4]二氮雜環庚烷-1-基-6- (3-三氟甲基苯基)-嘧啶-2-腈； -4-[甲基-(l-甲基-哌啶-4-基)-氨基]-6- (3-三氟曱基苯基)-嘧啶-2，腈;-4- [ ( lH-四唑-5-基甲基)-氨基]-6- ( 3-三氟甲基苯基) -嘧啶-2-腈；-4- (4-甲氧基-3-三氟甲基苯基)-6-哌嗪-1-基-嘧啶-2-腈； -4- ( 2-哌啶-l-基-乙氧基)-6- ( 3-三氟甲基苯基)-嘧啶-2-腈； -4-[4- (2-甲氧基-乙基)-哌溱-l-基]-6- (3-三氟甲基苯基)-嘧啶-2-腈；-4- (4-氨基甲酰基甲基-哌。秦-l-基)-6- ( 3-三氟曱基苯基) -嘧啶-2-腈；-4- (4-異丙基-哌嗪-1-基)-6-(三氟甲基苯基)-嘧啶-2-腈； -4-[4- (2-羧基-乙基)-哌嗪-1-基]-6- ( 3-三氟甲基苯基)-嘧啶 -2-腈；一4- (4-環丙基甲基-哌喚-l-基)-6-(三氟甲基苯基)-嘧啶-2-腈；-4- ( 3， 3，4-三甲基-哌溱-l-基)-6- ( 3-三氟甲基苯基)-嘧啶-2-腈；-4- (4-甲基-[l，4]二氮雜環庚烷-l-基)-6- ( 3-三氟甲基苯基)-嘧啶-2-腈；-4-(羧甲基-氨基)-6- (3-三氟甲基苯基)-嘧啶-2-腈；-4- (2-嗎啉-4-基-乙氧基)-6- ( 3-三氟曱基苯基)-嘧啶-2-腈；-4- (2-二乙基氨基-乙氧基)-6- (3-三氟甲基苯基)-嘧啶-2-腈。
5. 根據權利要求1-4中任一項的用于在治療中的用途的4-苯基-6-取代的-嘧啶-2-腈衍生物
6. 藥物組合物，包含權利要求1-4中任一項的4-苯基-6-取代的-嘧啶-2-腈衍生物，或其藥學上可接受的鹽，所述藥物組合物與藥學上 可接受的助劑混合。
7. 權利要求1-4中任一項的4-苯基-6-取代的-嘧啶-2-腈衍生物在 制備治療組織蛋白酶K和組織蛋白酶S相關病變例如骨質疏松、動脈粥樣 硬化、炎癥和免疫障礙如類風濕性關節炎和慢性痛的藥物的用途。
全文摘要
本發明涉及具有通式I的4-苯基-6-取代的-嘧啶-2-腈衍生物，其中R表示1-3個任選的獨立選自(C_1-4)烷基(任選被一個或多個鹵素取代)，(C_1-4)烷氧基(任選被一個或多個鹵素取代)和鹵素的取代基；X是NR₁、O或S；R₁是H或(C_1-4)烷基；Y是(C_1-4)烷基、芐基或(C_2-6)烷基，它們被選自OH、(C_1-4)烷氧基、NR₂R₃、包含1或2個選自O、S和NR₄的雜原子的4-8元飽和雜環，和包含1-4個N原子的5或6元芳族雜環基團取代；或R₁和Y和與其鍵接的氮一起形成5-8元飽和雜環，其任選地包含另一個選自O、S、NR₄和NO的雜原子；該環任選地被NR₂R₃或1到4個(C_1-3)烷基取代；R₂和R₃獨立地是H或(C_1-4)烷基；或R₂和R₃和與其鍵接的氮一起形成4-8元飽和雜環，其任選地包含另一個選自O、S和NR₄的雜原子；R₄是H、(C_1-6)烷基、(C_3-6)環烷基、(C_3-6)環烷基(C_1-4)烷基、(C_1-4)烷氧基-(C_1-4)烷基、芐基、酰胺基-(C_1-4)烷基、(C_1-6)烷氧基羰基(C_1-4)烷基或羧基(C_1-4)烷基；或其可藥用鹽，涉及包含該化合物的藥物組合物，以及這些4-苯基-6-取代的-嘧啶-2-腈衍生物在制備治療組織蛋白酶K和組織蛋白酶S相關病變例如骨質疏松、動脈粥樣硬化、炎癥和免疫障礙如類風濕性關節炎和慢性痛的藥物的用途。
文檔編號C07D403/12GK101268058SQ200680034845
公開日2008年9月17日 申請日期2006年9月21日 優先權日2005年9月23日
發明者Z·蘭科維克, 蔡家強 申請人:歐加農股份有限公司