專利名稱：具有增強的溶解性的非晶形的他克莫司固體分散體和包含該分散體的藥物組合物的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種包含他克莫司(taclolimus)、取代的環糊精衍生物和有機酸的非晶形的他克莫司固體分散體和包含該分散體的藥物組合物，該固體分散體表現了他克莫司的增強的生物利用度。
背景技術：
分子式(I)為(-)-(1R，9S，13R，14S，17R，18E，21S，23S，24R，25S，27R)-17-烯丙基-1，14-二羥基-12-[(E)-2-[(1R，3R，4R)-4-羥-3-甲氧環己基]-1-甲基乙烯基]-23，25-二甲氧基-13，19，21，27-四甲基-11，28-二氧雜-4-氮雜三環[22.3.1.04.9]二十八碳-18-烯-2，3，10，16-四酮水合物[104987-11-3]的他克莫司(或FK-506)是由Tanaka和Kuroda等(見J.Am.Chem.Soc.，1095031(1987)和美國專利號4,894,366)發現的小環內酯基(microlide-based)免疫抑制藥物。
美國食品與藥品管理局已經批準了他克莫司用于抑制移植排斥(普樂可復(Prograf)膠囊(Fujisawa，Japan))和用于治療特應性皮炎(普特皮(protopic)軟膏)的使用。此外，已經證實他克莫司相關化合物對于治療以下疾病是有用的例如變態反應性腦脊髓炎、膠原關節炎、阻塞性支氣管疾病例如氣喘、男性型禿發、糖尿疾病、眼疾例如后葡萄膜炎、局部貧血相關肝損傷、腎小球性腎炎、系統性紅斑狼瘡、多藥耐藥、粘膜和血管的炎癥、巨細胞病毒感染、特發性血小板減少性紫癜和甲狀腺功能亢進癥。
他克莫司為白色晶體或結晶粉末，并且完全溶解于有機溶劑例如無水乙醇，但是不溶解于水中。因而，當將水不溶性的他克莫司經口給藥時，它的生物利用度不可避免地是低的。
為了克服此問題，韓國專利公布號1987-10073公開了一種商購普樂可復膠囊的制備方法，該方法包括以下步驟將水溶性的聚合物加入溶解在有機溶劑中的水不溶性的他克莫司中；任選地在那里懸浮添加劑例如賦形劑和崩解劑以獲得均勻的懸浮液；和依照常規方法將有機溶劑從那里去除，以獲得包含他克莫司和水溶性聚合物的固體分散體組合物。
本發明人出乎意料地發現的是，通過將他克莫司與取代的環糊精衍生物和有機酸一起由噴霧干燥機處理所制備的他克莫司固體分散體，表現了比任何的現有包含羥丙基甲基纖維素的他克莫司制劑更高的活性成分的溶解性和穩定性。
發明概述 因此，本發明的一個目的是提供一種比常規他克莫司制劑表現更高水溶性和生物利用度的他克莫司固體分散體，以及它的制備方法。
本發明的另一個目的是提供一種經口給藥用的，包含他克莫司固體分散體的藥物組合物。
根據本發明的一個方面，提供了一種包含他克莫司、分子式(II)的取代α-、β-或γ-環糊精衍生物和有機酸的非晶形的他克莫司固體分散體
其中， n為在6至8的范圍內的整數；和 R為任選地由羥基、羧基或羧基C1-4烷氧基取代的C1-6烷基，，或磺基C1-4烷氧基。
根據本發明的另一個方面提供的是，所述固體分散體進一步包含表面活性劑、水溶性聚合物或藥用添加劑。
附圖簡述 從結合以下附圖的本發明的以下說明，本發明的以上和其它的目的和特征將會變得顯而易見，該附圖分別表示
圖1結晶他克莫司(1)、實施例1的固體分散體(2)和比較例2的混合物(3)的差示掃描量熱計(DSC)的差示熱分析圖； 圖2實施例1的固體分散體(1)、結晶他克莫司(2)和比較例2的混合物(3)的粉末X-射線衍射的譜圖； 圖3普樂可復膠囊(對照物)和在制備實施例1，9和11，以及比較制備實施例1和2中制備的膠囊的飽和溶解度曲線； 圖4普樂可復膠囊(對照物)和在制備實施例1和比較制備實施例1中制備的膠囊的體外釋放曲線； 和圖5經口給藥的普樂可復膠囊(對照物)和在制備實施例1和比較制備實施例1中制備的膠囊的體內生物利用度曲線。
發明詳述 以下詳細描述所述包含他克莫司的固體分散體的各個組分 (1)取代的環糊精衍生物 本發明中采用的分子式(II)的取代的環糊精衍生物在具有增強的水溶性和生物利用度的本發明非晶固體分散體的形成中扮演了至關重要的角色，并且其代表性的實例包括2-羥乙基-β-環糊精、2-羥丙基-β-環糊精、2，6-二甲基-β-環糊精、磺丁基醚-7-β-環糊精、(2-羧基甲氧基)丙基-β-環糊精、2-羥乙基-γ-環糊精和2-羥丙基-γ-環糊精，并且2-羥乙基-β-環 (II) 糊精、2-羥丙基-β-環糊精、2，6-二甲基-β-環糊精和磺基丁基醚-7-β-環糊精
是優選的。該取代的環糊精衍生物可以組合使用。
其中， n為在6至8的范圍內的整數；和 R為任選地由羥基、羧基或羧基C1-4烷氧基取代的C1-6烷基，或磺基C1-4烷氧基。
(有機酸) 本發明的有機酸可以是任何一種的已知藥用有機酸，該有機酸用于在配制本發明的固體分散時穩定他克莫司。該有機酸的代表性實例包括異抗壞血酸、檸檬酸、酒石酸、抗壞血酸、乳酸、蘋果酸、琥珀酸、乙酸、三氯乙酸、三氟乙酸、二甲基三胺五乙酸、丙酮酸、丙二酸、肉豆蔻酸、苦味酸、甲磺酸、乙磺酸、對氨基苯甲酸、苯磺酸、苯甲酸、乙二胺四乙酸、山梨酸、脂肪酸、葡糖酸、氨基己酸、甘草酸、異硬脂酸、十二烷基苯磺酸、富馬酸、馬來酸、草酸、丁酸、棕櫚酸、磺酸、亞磺酸、甲酸、丙酸、單寧酸、泛酸、天冬氨酸、氨基乙酸、DL-a-氨基丙酸和它們的混合物，并且異抗壞血酸和檸檬酸是優選的。
(3)添加劑 可以將添加劑例如表面活性劑、水溶性聚合物和藥用添加劑用于本發明中，以增強本發明固體分散體的流動性和其它的物理性質，并且其實例包括下列各項。
i)表面活性劑 ①聚氧乙烯-失水山梨糖醇-脂肪酸酯 單或三月桂酸酯、棕櫚酸酯、硬脂酸酯或油酸酯(Tween，Uniquema)， ②失水山梨糖醇脂肪酸酯 失水山梨糖醇單月桂酯、失水山梨糖醇單棕櫚酯或失水山梨糖醇單硬脂酯(Span，Uniquema)， ③聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚物(Poloxamers)， ④天然或氫化植物油與乙二醇的反應產物 聚乙二醇化的天然或氫化蓖麻油(Cremophor，BASF)， ⑤聚氧乙烯脂肪酸酯 聚氧乙烯硬脂酸酯(Myrj，Uniquema)， ⑥二辛基磺基琥珀酸鈉或十二烷基硫酸鈉，和 ⑦甘油單、二和三酯、聚乙二醇單和二酯或聚乙二醇的混合物(Gelucire，Gattefosse) 在以上提及的表面活性劑中，聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚物，聚氧乙烯脂肪酸酯，甘油單、二和三酯、聚乙二醇單和二酯、聚乙二醇的混合物，二辛基磺基琥珀酸鈉和十二烷基硫酸鈉是優選的，并且聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚物是更優選的。
ii)水溶性聚合物 在本發明中，可以任選加入一種或更多種的水溶性聚合物，以改善固體分散體的流動性和其它的物理性質。該水溶性聚合物可以選自烷基纖維素，例如甲基纖維素；羥烷基纖維素，例如羥甲基纖維素、羥乙基纖維素、羥丙基纖維素和羥丁基纖維素；羥烷基烷基纖維素，例如羥乙基甲基纖維素和羥丙基甲基纖維素；羧烷基纖維素，例如羧甲基纖維素；羧烷基纖維素的堿金屬，例如羧甲基纖維素鈉；羧烷基烷基纖維素，例如羧甲基乙基纖維素；羧烷基纖維素酯；淀粉；果膠，例如羧甲基支鏈淀粉鈉；甲殼質衍生物，例如脫乙酰殼多糖；多糖，例如藻酸、它的堿金屬和銨鹽、角叉菜膠(caragenan)、半乳甘露聚糖、黃蓍膠、瓊脂、阿拉伯樹膠、瓜耳膠和黃原酸膠；聚甲基丙烯酸及其鹽；聚甲基丙烯酸及其鹽、甲基丙烯酸酯共聚物、氨烷基甲基丙烯酸酯共聚物；聚乙烯醇縮乙醛和二乙基氨基醋酸酯；糖型表面活性劑，例如蔗糖二硬脂酸酯、蔗糖單/二硬脂酸酯和蔗糖單棕櫚酸酯；聚乙烯醇；聚乙烯吡咯烷酮和聚乙烯吡咯烷酮-醋酸乙烯酯共聚物；聚環氧烷，例如聚環氧乙烷和聚環氧丙烷；和環氧乙烷-環氧丙烷共聚物。
在以上提及的水溶性聚合物中，烷基纖維素、羥烷基纖維素、羥烷基烷基纖維素和聚乙烯吡咯烷酮是優選的，并且羥丙基甲基纖維素、羥丙基纖維素和聚乙烯吡咯烷酮是更優選的。
iii)藥用添加劑 在本發明中，在制備包含固體分散體的經口給藥的組合物的過程中，可以任選地加入一種或更多種的藥用賦形劑，以改善固體分散體的流動性和其它的物理性質。該藥用賦形劑可以選自由乳糖、淀粉、羥基乙酸淀粉鈉、聚乙烯聚吡咯烷酮、交聯羧甲纖維素鈉、麥芽糖糊精、微晶纖維素、磷酸鈣、碳酸氫鈣和結晶纖維素組成的組。此外，在本發明中可以采用潤滑劑，例如硬脂酸、硬脂酸鎂和滑石。
在本發明的非晶形的他克莫司固體分散體的制備中，可以采用的作為藥物活性成分的他克莫司、取代的環糊精衍生物和有機酸的量對應于在1∶0.1～20∶0.1～10，優選1∶0.1～10∶0.1～5的范圍內的重量比。表面活性劑或藥用添加劑可以以基于他克莫司的20和更少的重量比的量來使用。另外，在本發明的實施例中描述的組合物可以被參考為對本發明效果的優選例證。
本發明的非晶形的他克莫司固體分散體沒有在它的DSC掃描中顯示任何的吸熱峰，也沒有在它的粉末X-射線衍射譜中顯示結晶折射峰，表明本發明分散體中所包含的他克莫司是穩定的非晶形式。
本發明的固體分散體可以通過包括以下步驟的方法來制備(a)將取代的環糊精衍生物和有機酸分散或溶解在有機溶劑中；(b)將他克莫司溶解在有機溶劑中；和(c)將以上獲得的分散體和溶液混合，隨后從那里去除溶劑。
在步驟(a)中，可以任選地將一種或更多種的表面活性劑和藥用添加劑溶解或分散在溶液中。可以在步驟(b)中使用的有機溶劑為乙醇、異丙醇、丙酮、乙腈、二氯甲烷、氯仿或任何的適合的有機溶劑。在步驟(c)中，可以通過噴霧干燥、輥筒干燥、溶劑沉淀或冷凍干燥將溶劑去除，以獲得非晶形的他克莫司固體分散體。
另外，本發明提供了一種包含與藥用載體、賦形劑和添加劑一起的固體分散體，用于經口給藥的藥物組合物。該藥物組合物可以根據任何的常規方法而以粉末、粒狀、片劑、軟或硬膠囊、丸劑或包衣制劑的形式來配制。例如，可以將以粉末或粒狀形式的固體分散體與潤滑劑或其它的藥物添加劑一起填充進入到硬膠囊中，或者與壓片用藥物添加劑一起制成片劑形式，然后任選地根據任何的常規方法包衣，以獲得包衣制劑。
本發明制劑可以以單獨劑量或分開劑量的典型量經口給藥。
以下實施例意欲進一步說明本發明而沒有限制它的范圍。
實施例他克莫司固體分散體的制備 實施例1 將400mg的2-羥丙基-β-環糊精(Aldrich，USA)、20mg的檸檬酸和20mg的泊洛沙姆(Poloxamer)188(Lutrol F68，BASF)加入到MC(二氯甲烷)和乙醇的混合物中，并且攪拌直至該溶液變為澄清。然后，往那里加入400mg的乳糖并且均勻分散。將溶解于乙醇中的100mg的他克莫司與該分散液混合，并且進行噴霧干燥，同時將噴霧干燥器(迷你噴霧干燥器B-191，Buchi，Switzerland)的入口和出口溫度分別維持在60℃和45-50℃，以獲得具有列于表1中的成分的他克莫司固體分散體。
實施例2 除采用200mg的2-羥丙基-β-環糊精以外，通過重復實施例1的過程來制備具有列于表1中的成分的他克莫司固體分散體。
實施例3 除采用800mg的2-羥丙基-β-環糊精以外，通過重復實施例1的過程來制備具有列于表1中的成分的他克莫司固體分散體。
表1 實施例4 除采用2，6-二甲基-β-環糊精(CAVASOLW7 M Pharma，WAKER)代替2-羥丙基-β-環糊精以外，通過重復實施例1的過程來制備具有列于表2中的成分的他克莫司固體分散體。
實施例5 除采用磺丁基醚-7-β-環糊精(CAVASOL，WAKER)代替2-羥丙基-β-環糊精以外，通過重復實施例1的過程來制備具有列于表2中的成分的他克莫司固體分散體。
實施例6 除采用異抗壞血酸代替檸檬酸作為有機酸以外，通過重復實施例1的過程來制備具有列于表2中的成分的他克莫司固體分散體。
表2 實施例7 除采用Myrj 52S(Uniqema)代替泊洛沙姆188作為表面活性劑以外，通過重復實施例1的過程來制備具有列于表3中的成分的他克莫司固體分散體。
實施例8 除采用十二烷基硫酸鈉代替泊洛沙姆188作為表面活性劑以外，通過重復實施例1的過程來制備具有列于表3中的成分的他克莫司固體分散體。
實施例9 除采用聚乙二醇硬脂酸酯(solutol)代替泊洛沙姆188作為表面活性劑以外，通過重復實施例1的過程來制備具有列于表3中的成分的他克莫司固體分散體。
表3 實施例10 除采用淀粉代替乳糖作為藥物添加劑以外，通過重復實施例1的過程來制備具有列于表4中的成分的他克莫司固體分散體。
實施例11 除采用麥芽糊精代乳糖作為藥物添加劑以外，通過重復實施例1的過程來制備具有列于表4中的成分的他克莫司固體分散體。
實施例12 除采用微晶纖維素代替乳糖作為藥物添加劑以外，通過重復實施例1的過程來制備具有列于表4中的成分的他克莫司固體分散體。
表4 實施例13 除沒有采用泊洛沙姆188以外，通過重復實施例1的過程來制備具有列于表5中的成分的他克莫司固體分散體。
實施例14 除沒有采用乳糖以外，通過重復實施例1的過程來制備具有列于表5中的成分的他克莫司固體分散體。
實施例15 除沒有采用泊洛沙姆188和乳糖以外，通過重復實施例1的過程來制備具有列于表5中的成分的他克莫司固體分散體。
表5 實施例16 除采用10mg的檸檬酸以外，通過重復實施例8的過程來制備具有列于表6中的成分的他克莫司固體分散體。
實施例17 除采用50mg的檸檬酸以外，通過重復實施例8的過程來制備具有列于表6中的成分的他克莫司固體分散體。
實施例18 除采用100mg的檸檬酸以外，通過重復實施例8的過程來制備具有列于表6中的成分的他克莫司固體分散體。
表6 實施例19 除采用800mg的乳酸以外，通過重復實施例1的過程來制備具有列于表7中的成分的他克莫司固體分散體。
實施例20 除采用1,500mg的乳酸以外，通過重復實施例1的過程來制備具有列于表7中的成分的他克莫司固體分散體。
實施例21 除采用2,000mg的乳酸以外，通過重復實施例1的過程來制備具有列于表7中的成分的他克莫司固體分散體。
表7 實施例22 除采用每種10mg的檸檬酸和異抗壞血酸作為有機酸以外，通過重復實施例1的過程來制備具有列于表8中的成分的他克莫司固體分散體。
實施例23 除采用每種200mg的乳酸和微晶纖維素作為藥物添加劑以外，通過重復實施例1的過程來制備具有列于表8中的成分的他克莫司固體分散體。
實施例24 除采用每種10mg的泊洛沙姆188和十二烷基硫酸鈉作為表面活性劑以外，通過重復實施例1的過程來制備具有列于表8中的成分的他克莫司固體分散體。
表8 實施例25 除采用每種200mg的2-羥丙基-β-環糊精和磺丁基醚-7-β-環糊精以外，通過重復實施例1的過程來制備具有列于表9中的成分的他克莫司固體分散體。
實施例26 除采用200mg的乳酸和200mg的添加的羥丙基甲基纖維素2910作為水溶性聚合物以外，通過重復實施例1的過程來制備具有列于表9中的成分的他克莫司固體分散體。
實施例27 除采用200mg的乳酸和200mg的添加的聚乙烯吡咯烷酮作為水溶性聚合物以外，通過重復實施例1的過程來制備具有列于表9中的成分的他克莫司固體分散體。
表9 比較例1 將與實施例1(見表10)相同的成分簡單混合而不噴霧干燥，以獲得混合物。
比較例2 除不采用2-羥丙基-β-環糊精以外，通過重復實施例1的過程來制備具有列于表10中的成分的他克莫司固體分散體。
比較例3 除不采用檸檬酸以外，通過重復實施例1的過程來制備具有列于表10中的成分的他克莫司固體分散體。
表10 制備實施例膠囊制劑的制備 制備實施例1 將940mg的實施例1的固體分散體(他克莫司100mg)、5,495mg的乳糖和65mg的硬脂酸鎂均勻混合，并且以相應于1mg的他克莫司的量將所得的混合物填充進入到5號明膠膠囊中，以獲得具有列于表11中的成分的膠囊制劑。
制備實施例2 除采用1,340mg的實施例3的固體分散體(他克莫司100mg)和5,095mg的乳糖以外，通過重復制備實施例1的過程來制備具有列于表11中的成分的膠囊制劑。
制備實施例3 除采用940mg的實施例5的固體分散體(他克莫司100mg)以外，通過重復制備實施例1的過程來制備具有列于表11中的成分的膠囊制劑。
表11 制備實施例4 除采用940mg的實施例6的固體分散體(他克莫司100mg)以外，通過重復制備實施例1的過程來制備具有列于表12中的成分的膠囊制劑。
制備實施例5 除采用940mg的實施例8的固體分散體(他克莫司100mg)以外，通過重復制備實施例1的過程來制備具有列于表12中的成分的膠囊制劑。
制備實施例6 除采用940mg的實施例11的固體分散體(他克莫司100mg)以外，通過重復制備實施例1的過程來制備具有列于表12中的成分的膠囊制劑。
表12 制備實施例7 除采用920mg的實施例13的固體分散體(他克莫司100mg)和5,515mg的乳糖的以外，通過重復制備實施例1的過程來制備具有列于表13中的成分的膠囊制劑。
制備實施例8 除采用540mg的實施例14的固體分散體(他克莫司100mg)和5,895mg的乳糖的以外，通過重復制備實施例1的過程來制備具有列于表13中的成分的膠囊制劑。
制備實施例9 除采用520mg的實施例15的固體分散體(他克莫司100mg)和5,915mg的乳糖的以外，通過重復制備實施例1的過程來制備具有列于表13中的成分的膠囊制劑。
表13 制備實施例10 除采用320mg的實施例15的固體分散體(他克莫司100mg)和6,115mg的乳糖的以外，通過重復制備實施例1的過程來制備具有列于表14中的成分的膠囊制劑。
制備實施例11 除采用微晶纖維素代替乳糖作為藥物添加劑以外，通過重復制備實施例1的過程來制備具有列于表14中的成分的膠囊制劑。
制備實施例12 除采用5,195mg的乳糖和300mg的交聯羧甲纖維素鈉作為藥物添加劑以外，通過重復制備實施例1的過程來制備具有列于表14中的成分的膠囊制劑。
表14 制備實施例13 除采用4,845mg的乳糖和650mg的添加的羥丙基甲基纖維素作為水溶性聚合物以外，通過重復制備實施例1的過程來制備具有列于表15中的成分的膠囊制劑。
制備實施例14 除采用4,845mg的乳糖和650mg的交聚維酮作為藥物添加劑以外，通過重復制備實施例1的過程來制備具有列于表15中的成分的膠囊制劑。
制備實施例15 除采用4,845mg的磷酸鈣和650mg的交聚維酮代替乳糖以外，通過重復制備實施例1的過程來制備具有列于表15中的成分的膠囊制劑。
表15 比較制備實施例1 除采用940mg的比較例1的混合物(他克莫司100mg)以外，通過重復制備實施例1的過程來制備具有列于表16中的成分的膠囊制劑。
比較制備實施例2 除采用540mg的比較例2的固體分散體(他克莫司100mg)和5,895mg的乳糖以外，通過重復制備實施例1的過程來制備具有列于表16中的成分的膠囊制劑。
比較制備實施例3 除采用920mg的比較例3的固體分散體(他克莫司100mg)和5,515mg的乳糖以外，通過重復制備實施例1的過程來制備具有列于表16中的成分的膠囊制劑。
表16 測試例1熱力學穩定性測試 通過研究在其DSC掃描中的吸熱峰中的變化來對比較例1的混合物、實施例1的固體分散體和結晶他克莫司分別進行熱力學穩定性測試。將表現各個吸熱峰的溫度表示于表17中，并且將全部的DSC結果表示于圖1中。
表17 由表17和圖1中可見，本發明的他克莫司固體分散體在其DSC掃描中沒有表現出任何突出的吸熱峰，因此，它是以非晶形式存在的，該非晶形式在考察的溫度范圍內是穩定的。
測試例2X射線粉末衍射分析 在CuX-射線、40kV和300mA的條件下，采用M18XHF-SRA(Macscience Co.，LTD，Japan)來測定結晶他克莫司、比較例1的混合物和實施例1的固體分散體的X-射線衍射花樣，并且將結果表示于圖2中。
由圖2中可見，本發明的固體分散體中的他克莫司通過噴霧干燥過程而變為非晶的，并且是熱力學穩定的。
測試例3溶解性測試 采用普樂可復膠囊作為對照物對每個制備實施例1、9和11，以及比較制備實施例1和2的制劑進行溶解度測試。將取自每個制劑的包含5mg的他克莫司的樣品溶解于10ml的蒸餾水中，并且在25℃水浴中貯存。在貯存以后在1、3、6、15和24小時收集測試樣品，并且在以下條件下測量每個樣品中的他克莫司的量 [測試方法液相色譜儀] 柱-TSK凝膠ODS80TM柱(150mm×4.6mm，5μm)， 流動相-水∶異丙醇∶四氫呋喃＝5∶2∶2(v/v/v)， 注射體積-20μl， 流速-控制他克莫司的保留時間為約10分鐘， 柱溫-50℃，和 檢測-220nm。
結果表示于圖3中。
由圖3中可見，每個本發明的他克莫司的固體分散體都具有比比較制備實施例1的簡單混合物顯著更高的溶解性。此外，當貯存在25℃水浴中24小時的時候，每個包含采用了環糊精衍生物的固體分散體的制劑都比比較制備實施例2的制劑，或對照物制劑維持了15小時的更高的溶解性。
因此，取代的環糊精衍生物的采用抑制了藥物在水溶液中的結晶，并且在長的時期保持以非晶的和生物可用的形式。
測試例4體外釋放測試 根據在韓國藥典(槳法)中描述的釋放測試方法，采用普樂可復膠囊(1mg，Fujisawa island)作為對照物，對制備實施例1和比較制備實施例1的制劑各個進行體外釋放測試，并且在以下條件下分析釋放模式 [釋放測試方法] 釋放測試系統-Erweka DT80， 釋放溶液-在減壓下脫氣10分鐘的900ml的蒸餾水， 釋放溶液溫度-37±0-5℃， 旋轉速率100rpm，和 樣品量-1個膠囊/每個沉錘(sinker)。
[分析方法液相色譜儀] 柱-Inertsil CN-3(150mm×4.6mm，5μm)， 流動相-水∶乙腈∶異丙醇＝7∶2∶1(v/v/v)， 注射體積-300μl， 流速-0.5ml/分鐘， 柱溫-50℃，和 檢測-210nm。
結果表示于圖4中。
由圖4中可見，包含本發明的非晶形的他克莫司固體分散體的制劑(制劑1)表現了與對照物相類似的釋放速率，但是顯著高于與其它成分混合的他克莫司制劑(比較制劑1)的釋放速率。
測試例5穩定性測試 在60℃的加速老化條件下，將制備實施例1和比較制備實施例3的制劑與作為對照物的1mg的普樂可復(硬膠囊，Fujisawa island)一起貯存，并且在以下條件下，通過HPLC分析在其雜質和互變異構體的產生中的時間依賴性變化。
柱-縱向連接的2個Supelcosil LC-Diol(250mm×4mm，5μm)， 流動相-正己烷∶正丁基氯∶乙腈＝7∶2∶1(v/v/v)， 注射體積-20μl， 流速-控制他克莫司的保留時間為約15分鐘， 柱溫-25℃，和 檢測-225nm。
結果表示于表18中。
表18 由表18中可見，在苛刻的老化條件下，在包含取代的環糊精衍生物和有機酸的本發明的制劑(制備實施例1)中的他克莫司，比對照物或比較制備實施例3的制劑穩定得多，并且可以抵抗互變異構物質或雜質的產生。
測試例6體內吸收測試 采用對照物對每個制備實施例1和比較制備實施例1的制劑進行體內吸收測試，以研究本發明化合物的經口給藥的生物利用度。
將分配有各個制劑的5只雄性Sprague-Dawley大鼠(重量每只250g；14-15個星期)適應超過4天，同時允許自由獲得食物和水。然后將該大鼠禁食48小時，同時允許它們自由獲得水。
用測試或對照物制劑，以相應于10mg/kg他克莫司的量，連同水對大鼠經口給藥。在給藥前和給藥后0.5、1、1.5、2、3、4、5、7和24小時從大鼠采集血樣。
向200μl的每個血樣中加入400μl的0.2M ZnSO4和MeOH(2∶8(v/v))的混合物，并且將該混合物搖動。將該混合物在12,000rpm離心30秒以獲得上層清液，將該上層清液過濾通過0.22μm的過濾器，并且在以下條件下通過LC-MS分析 柱-Waters MS C 18(150mm×2.1mm具有保護柱)， 流動相-濃度梯度(65％MeOH→-95％MeOH)， 注射體積-30μl， 流速-0.3ml/分鐘，和 檢測-SIR類型m/z826.7(Na加合物)。
結果表示于表19和圖5中。
表19 由表19和圖5中可見，根據本發明制備的制劑在所有的方面中表現了比普樂可復膠囊(對照物制劑)更高的生物利用度。因此，本發明中采用的取代環糊精和有機酸的結合應用產生了通過在先技術不能實現的有益效果。
雖然關于以上特別實施方案而描述了本發明，但是需要認識到的是，可以進行不同的更改和變化，并且該更改和變化也落入由后附權利要求所定義的本發明的范圍中。
權利要求
1.一種非晶形的他克莫司固體分散體，其包含他克莫司、分子式(II)的取代α-、β-或γ-環糊精衍生物和有機酸
其中，
n為在6至8的范圍內的整數；和
R為任選地由羥基、羧基或羧基C1-4烷氧基取代的C1-6烷基，或磺基C1-4烷氧基。
2.按照權利要求1所述的非晶形的他克莫司固體分散體，其中他克莫司∶取代的環糊精衍生物∶有機酸的重量比在1∶0.01-20∶0.1-10范圍內變化。
3.按照權利要求1所述的非晶形的他克莫司固體分散體，所述分散體進一步包含表面活性劑、水溶性聚合物或藥用添加劑。
4.按照權利要求1所述的非晶形的他克莫司固體分散體，其中所述取代的環糊精衍生物選自由2-羥乙基-β-環糊精、2-羥丙基-β-環糊精、2，6-二甲基-β-環糊精、磺丁基醚-7-β-環糊精、(2-羧基甲氧基)丙基-β-環糊精、2-羥乙基-γ-環糊精和2-羥丙基-γ-環糊精組成的組。
5.按照權利要求4所述的非晶形的他克莫司固體分散體，其中所述取代的環糊精衍生物選自由2-羥乙基-β-環糊精、2-羥丙基-β-環糊精、2，6-二甲基-β-環糊精和磺丁基醚-7-β-環糊精組成的組。
6.按照權利要求1所述的非晶形的他克莫司固體分散體，其中所述有機酸選自由異抗壞血酸、檸檬酸、酒石酸、抗壞血酸、乳酸、蘋果酸、琥珀酸、乙酸、三氯乙酸、三氟乙酸、二甲基三胺五乙酸、丙酮酸、丙二酸、肉豆蔻酸、苦味酸、甲磺酸、乙磺酸、對氨基苯甲酸、苯磺酸、苯甲酸、乙二胺四乙酸、山梨酸、脂肪酸、葡糖酸、氨基己酸、甘草酸、異硬脂酸、十二烷基苯磺酸、富馬酸、馬來酸、草酸、丁酸、棕櫚酸、磺酸、亞磺酸、甲酸、丙酸、單寧酸、泛酸、天冬氨酸、氨基乙酸、DL-a-氨基丙酸和它們的混合物組成的組。
7.按照權利要求6所述的非晶形的他克莫司固體分散體，其中所述有機酸為異抗壞血酸或檸檬酸。
8.按照權利要求1所述的非晶形的他克莫司固體分散體，其中所述表面活性劑選自由聚氧乙烯-失水山梨糖醇-脂肪酸酯，失水山梨糖醇脂肪酸酯，聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚物，天然或氫化植物油與乙二醇的反應產物，聚氧乙烯脂肪酸酯，二辛基磺化琥珀酸鈉，十二烷基硫酸鈉，甘油單、二和三酯、聚乙二醇單和二酯、和聚乙二醇的混合物組成的組。
9.按照權利要求3所述的非晶形的他克莫司固體分散體，其中所述水溶性聚合物選自由烷基纖維素、羥烷基纖維素、羥烷基烷基纖維素、羧烷基纖維素和它們的堿金屬、羧烷基烷基纖維素、羧烷基纖維素酯、淀粉、果膠、甲殼質衍生物、多糖、聚丙烯酸和它們的鹽、聚甲基丙烯酸和它們的鹽、甲基丙烯酸酯共聚物、氨烷基甲基丙烯酸酯共聚物、聚乙烯醇縮乙醛、二乙基氨基醋酸酯、糖型表面活性劑、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯吡咯烷酮-醋酸乙烯酯共聚物、聚環氧烷、和環氧乙烷與環氧丙烷的共聚物組成的組。
10.藥物組合物，其包含權利要求1的非晶形的他克莫司固體分散體、表面活性劑、水溶性聚合物和藥用添加劑。
11.一種制備權利要求1的非晶形的他克莫司固體分散體的方法，所述方法包括以下步驟(1)將取代的環糊精衍生物和有機酸分散或溶解在有機溶劑中；(2)將他克莫司溶解在有機溶劑中；和(3)將以上獲得的分散體和溶液混合，隨后通過噴霧干燥從混合物去除溶劑。
12.按照權利要求11所述的方法，其中在步驟(2)中采用的溶劑選自由乙醇、異丙醇、丙酮、乙腈、二氯甲烷、氯仿和它們的混合物組成的組。
13.按照權利要求11所述的方法，其中將表面活性劑、水溶性聚合物或藥用添加劑進一步加入到步驟(1)的溶液中。
全文摘要
一種包含他克莫司、取代的環糊精衍生物和有機酸的非晶形的他克莫司固體分散體，所述固體分散體具有高的熱力學穩定性和溶解性，可以提供增強的釋放速率和生物利用度。
文檔編號C07D498/18GK101115758SQ200680004075
公開日2008年1月30日 申請日期2006年2月3日 優先權日2005年2月4日
發明者禹鐘守, 李鴻基, 樸貞姬 申請人:韓美藥品株式會社