專利名稱：一種提取胡桃醌的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種提取方法。
背景技術(shù)：
胡桃醌(5-羥基-1，4-萘醌)是從核桃楸(Juglans mandshurica Maxim)中提取分離出的一種萘醌類活性物質(zhì)，能夠抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)并可以直接殺傷腫瘤細(xì)胞，可抑制柳葉柵銹病、楊樹爛皮病、側(cè)柏枯枝病、落葉松楊銹病等孢子的萌發(fā)，同時(shí)對(duì)水稻稻瘟病、稻紋枯病、棉花枯萎病、黃瓜蔓割病、茄子褐紋病和茄子黃萎病菌絲的生長(zhǎng)也有明顯的抑制作用。此外，胡桃醌還能夠能抑制其他植物的生長(zhǎng)發(fā)育，具有很好的化感作用。
胡桃醌的多種生物活性，使其在醫(yī)學(xué)和農(nóng)林業(yè)等方面都有非常廣泛的應(yīng)用前景，它的提取制備正在吸引越來越多的研究者，國(guó)內(nèi)外學(xué)者已先后從天然產(chǎn)物中分離提純出胡桃醌，國(guó)內(nèi)在這方面的研究相對(duì)較少，1985年，許紹惠等首次從核桃楸的新鮮根皮、枝皮和青果皮中分離提純出胡桃醌，并鑒定了結(jié)構(gòu)，與國(guó)際上報(bào)道完全一致，并測(cè)得胡桃醌在核桃楸枝皮中的含量可達(dá)0.02～0.4mg/g以上。1994年吳乃居等對(duì)核桃楸葉化學(xué)成分進(jìn)行了研究，從中分出6個(gè)單體，其中就有胡桃醌。但他們的提取分離方法復(fù)雜、提取物得率低，所以尋找簡(jiǎn)便、快速制得較高純度的胡桃醌產(chǎn)品的方法具有重要意義。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是為了解決現(xiàn)有的技術(shù)中提取分離方法復(fù)雜、提取物純度低、提取物得率低的問題，提供了一種提取胡桃醌的方法。本發(fā)明提供一種簡(jiǎn)單易行、經(jīng)濟(jì)可靠的方法從核桃楸中提取高純度的天然活性物質(zhì)胡桃醌(5-羥基-1，4-萘醌)。本發(fā)明提取的步驟如下a、將原料核桃楸的根、莖、葉、皮或者果皮粉碎至20目以下；b、稱取原料，按原料與溶劑重量比為1∶1～1∶1000比例加入溶劑，攪拌，浸泡0～12h；c、將浸泡后物料進(jìn)行減壓蒸餾，并補(bǔ)加溶劑，直至餾出液無色；d、收集步驟c蒸餾出來的液體，用物理方法將產(chǎn)物分離出來，再將產(chǎn)物干燥；即得到含有胡桃醌的產(chǎn)物。
本發(fā)明的產(chǎn)物為橙色的固體。本發(fā)明提取的產(chǎn)物中胡桃醌相對(duì)含量達(dá)到95％以上，產(chǎn)物得率可達(dá)到0.2％以上，產(chǎn)物得率是已有報(bào)道中的最高的。
本發(fā)明具有設(shè)備條件要求低，易于實(shí)施；步驟簡(jiǎn)潔，生產(chǎn)周期短，生產(chǎn)日程可以靈活安排；生產(chǎn)成本低，經(jīng)濟(jì)可靠；提取物純度和得率都很高的優(yōu)點(diǎn)。
圖1是本發(fā)明的產(chǎn)物和標(biāo)準(zhǔn)品的傅立葉紅外光譜圖，圖2是本發(fā)明的產(chǎn)物的總離子流色譜圖。
具體實(shí)施例方式
具體實(shí)施方式
一本實(shí)施方式提取的步驟如下a、將原料為核桃楸的根、莖、葉、皮或者果皮粉碎至20目以下；b、稱取原料，按原料與溶劑重量比為1∶1～1∶1000比例加入溶劑，攪拌，浸泡0～12h；c、將浸泡后物料進(jìn)行減壓蒸餾，并補(bǔ)加溶劑，直至餾出液無色；d、收集步驟c蒸餾出來的液體，用物理方法將產(chǎn)物分離出來，再將產(chǎn)物干燥；即得到含有胡桃醌的產(chǎn)物。
具體實(shí)施例方式
二本實(shí)施方式在步驟b中的溶劑為甲醇、乙醇或蒸餾水，甲醇和乙醇的重量百分比濃度在50％以上。其它與具體實(shí)施方式
一相同。
具體實(shí)施例方式
三本實(shí)施方式與實(shí)施方式一不同的是在步驟b中采用超聲波浸泡，超聲波的功率為50～1000w，超聲波的溫度為0～50℃。其它與具體本實(shí)施方式采用的超聲波可以使浸泡時(shí)間縮短至0～10min。
具體實(shí)施例方式
四本實(shí)施方式與實(shí)施方式一不同的是在步驟b中采用超聲波浸泡，超聲波的功率為100～1000w，超聲波的溫度為20～40℃。其它與具體實(shí)施方式
一相同。
具體實(shí)施例方式
五本實(shí)施方式在步驟c中的蒸餾溫度為20～80℃，真空度為0.05～0.1MPa。其它與具體實(shí)施方式
一相同。
具體實(shí)施例方式
六本實(shí)施方式在步驟d中將產(chǎn)物分離出來的物理方法為吸附、鹽析、萃取、過濾、蒸餾、干燥、真空干燥中的一種或幾種方法；吸附采用活性炭或活性白土作為吸附劑，鹽析采用無水氯化鈉作為鹽析劑，萃取采用石油醚、氯仿或乙酸乙酯作為萃取劑。其它與具體實(shí)施方式
一相同。
具體實(shí)施例方式
七本實(shí)施方式的參數(shù)為稱取40～60目核桃楸樹葉20g做為原料，加60％的甲醇水溶液200ml，先浸泡5min將原料充分潤(rùn)濕，再用超聲波浸泡1min后，液體呈現(xiàn)明顯的棕黃色。超聲條件為超聲功率300w，溫度不高于30℃。將超聲波浸提后物料在55℃減壓蒸餾，直至餾出液無色。向餾出液中加入少量活性炭進(jìn)行吸附，過濾，再用氯仿洗脫，蒸干溶劑，即得到含有胡桃醌的產(chǎn)物。
本實(shí)施方式得到產(chǎn)物重量是46mg，產(chǎn)率為0.23％，產(chǎn)物中胡桃醌相對(duì)含量為96.12％。
具體實(shí)施例方式
八本實(shí)施方式的參數(shù)為稱取60～80目用的核桃楸樹皮20g做為原料，加75％乙醇水溶液300ml，先浸泡10min將原料充分潤(rùn)濕，再用超聲波浸泡5min后，液體呈現(xiàn)明顯的棕黃色。超聲條件為超聲功率100w，溫度不高于40℃。將超聲波浸提后物料在55℃減壓蒸餾，直至餾出液無色。在餾出液中加無水氯化鈉至飽和，有橙色的固體析出，過濾，干燥，即得到含有胡桃醌的產(chǎn)物。
本實(shí)施方式得到產(chǎn)物重量是40mg，產(chǎn)率為0.20％，產(chǎn)物中胡桃醌相對(duì)含量為96.82％。
具體實(shí)施例方式
九本實(shí)施方式的參數(shù)稱取20～40目核桃楸樹根20g作為原料，加水400ml，先浸泡15min將原料充分潤(rùn)濕，再用超聲波浸泡3min后，液體呈現(xiàn)明顯的棕黃色。超聲條件為超聲功率500w，溫度不高于50℃。將超聲波浸提后物料在80℃減壓蒸餾，直至餾出液無色。將餾出液用少量氯仿萃取，真空干燥，即得到含有胡桃醌的產(chǎn)物。
本實(shí)施方式得到產(chǎn)物重量是44mg，產(chǎn)率為0.22％，產(chǎn)物中胡桃醌相對(duì)含量為95.86％。
(參見圖1)官能團(tuán)表征采用美國(guó)尼高力公司生產(chǎn)的MagnaIR560E.S.P傅里葉紅外光譜儀，以KBr壓片法分析產(chǎn)物的化學(xué)結(jié)構(gòu)，并與標(biāo)準(zhǔn)物紅外譜圖對(duì)照分析，對(duì)比產(chǎn)物和標(biāo)準(zhǔn)品的傅立葉紅外光譜可以看出，產(chǎn)物具有了胡桃醌標(biāo)準(zhǔn)品的所有特征吸收，并且與標(biāo)準(zhǔn)品紅外譜圖相似性極好，證明了產(chǎn)物具有羥基萘醌的化學(xué)結(jié)構(gòu)。
采用美國(guó)安捷倫公司生產(chǎn)的6890N5973insert GC-MS對(duì)產(chǎn)物的化學(xué)組成進(jìn)行分析。色譜條件為DB17MS型毛細(xì)管色譜柱，柱長(zhǎng)30m，內(nèi)徑0.25mm，膜厚0.25μm。氣化室溫度260℃，載氣為氦氣，柱流量1mL/min，進(jìn)樣量1μL分流比30∶1。起始溫度為60℃，以20℃/min升溫至200℃，再以5℃/min升溫至280℃，保留5min。GC-MS接口溫度290℃。質(zhì)譜條件電離源EI電子能量70ev，離子源溫度230℃。掃描范圍15260amu(原子質(zhì)量單位)。
對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行GC-MS分析，共分離出3個(gè)化合物，化合物的定量按峰面積歸一化法計(jì)算，其總離子流圖參見圖2。成分分析是根據(jù)GC-MS聯(lián)用所得質(zhì)譜信息數(shù)據(jù)庫檢索與標(biāo)準(zhǔn)譜圖對(duì)照、分析，鑒定了它們的化學(xué)結(jié)構(gòu)，結(jié)果見表1。
表1
由圖2及表1可以看出，產(chǎn)物中主要成分為胡桃醌，相對(duì)含量大于95％。另外1，4-萘醌相對(duì)含量低于1％，7-甲氧基3，4-二氫1萘醌相對(duì)含量不高于4％。由此可見，通過超聲波浸泡、減壓蒸餾、萃取后蒸干溶劑的方法可以簡(jiǎn)便、快捷地制得較高純度的胡桃醌產(chǎn)品。
本發(fā)明具有設(shè)備條件要求低，易于實(shí)施；步驟簡(jiǎn)潔，生產(chǎn)周期短，生產(chǎn)日程可以靈活安排；生產(chǎn)成本低，經(jīng)濟(jì)可靠；提取物純度和得率都很高的優(yōu)點(diǎn)。
權(quán)利要求
1.一種提取胡桃醌的方法，其特征在于提取的步驟如下a、將原料為核桃楸的根、莖、葉、皮或者果皮粉碎至20目以下；b、稱取原料，按原料與溶劑重量比為1∶1～1∶1000比例加入溶劑，攪拌，浸泡0～12h；c、將浸泡后物料進(jìn)行減壓蒸餾，并補(bǔ)加溶劑，直至餾出液無色；d、收集步驟c蒸餾出來的液體，用物理方法將產(chǎn)物分離出來，再將產(chǎn)物干燥；即得到含有胡桃醌的產(chǎn)物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種提取胡桃醌的方法，其特征在于在步驟b中的溶劑為甲醇、乙醇或蒸餾水，甲醇和乙醇的重量百分比濃度在50％以上。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種提取胡桃醌的方法，其特征在于在步驟b中采用超聲波浸泡，超聲波的功率為50～1000w，超聲波的溫度為0～50℃。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種提取胡桃醌的方法，其特征在于在步驟b中采用超聲波浸泡，超聲波的功率為100～1000w，超聲波的溫度為20～40℃。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種提取胡桃醌的方法，其特征在于在步驟d中的蒸餾溫度為20～80℃，真空度為0.05～0.1MPa。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種提取胡桃醌的方法，其特征在于在步驟d中將產(chǎn)物分離出來的物理方法為吸附、鹽析、萃取、過濾、蒸餾、干燥、真空干燥中的一種或幾種方法；吸附采用活性炭或活性白土作為吸附劑，鹽析采用無水氯化鈉作為鹽析劑，萃取采用石油醚、氯仿或乙酸乙酯作為萃取劑。
全文摘要
一種提取胡桃醌的方法，涉及一種提取方法。本發(fā)明解決了現(xiàn)有的技術(shù)中提取分離方法復(fù)雜、提取物純度低、提取物得率低的問題，它提取的步驟如下a、將原料為核桃楸的根、莖、葉、皮或者果皮粉碎至20目以下；b、稱取原料，按原料與溶劑重量比為1∶1～1∶1000比例加入溶劑，攪拌，浸泡0～12h；c、將浸泡后物料進(jìn)行減壓蒸餾，并補(bǔ)加溶劑，直至餾出液無色；d、收集步驟c蒸餾出來的液體，用物理方法將產(chǎn)物分離出來，再將產(chǎn)物干燥；即得到含有胡桃醌的產(chǎn)物。本發(fā)明具有設(shè)備條件要求低，易于實(shí)施；步驟簡(jiǎn)潔，生產(chǎn)周期短，生產(chǎn)日程可以靈活安排；生產(chǎn)成本低，經(jīng)濟(jì)可靠；提取物純度和得率都很高的優(yōu)點(diǎn)。
文檔編號(hào)C07C50/00GK1931816SQ20061015087
公開日2007年3月21日 申請(qǐng)日期2006年10月11日 優(yōu)先權(quán)日2006年10月11日
發(fā)明者孫墨瓏, 李淑君, 袁海艦, 宋湛謙, 方桂珍, 劉志明, 劉毓琪 申請(qǐng)人:東北林業(yè)大學(xué)