硫酸酯酶抑制劑的制作方法

專利名稱：：硫酸酯酶抑制劑的制作方法硫酸酯酶抑制劑發明領域本發明一般涉及類固醇激素，更具體地涉及新氨基磺酸苯并噻吩酯衍生物，它們是酶類固醇硫酸酯酶的抑制劑。本發明還涉及含有這些衍生物的藥物組合物和使用它們的方法。發明背景酶類固醇硫酸酯酶(E.C.3.1.6.2.，STS)催化硫酸雌酮水解成雌酮，硫酸DHEA水解成DHEA(DibbeltL,Biol.Chem，Hoppe-Seyler，1991，372,173-185和SteinC，J.Biol.Chem.，1989，264,13865-13872)。類固醇硫酸酯酶途徑近來在乳腺癌方面成為感興趣的焦點，與由硫酸雌酉同(E!S)的大量循環匯集的雌激素局部組織內形成有關(PasqualiniJR,J.SteroidBiochem.Mol.Biol"1999，69,287-292和PurohitA,Mol.Cell.Endocrinol,,2001，171，129-135)。這種酶的抑制將阻止E^產生游離雌酮(E!),它隨后可通過酶還原轉變成雌二醇(E2)。除雌酮硫酸酯酶途徑外，人們現在認為由在DHEA-S水解后的DHEA得到的另一種有效的雄烯二醇(adiol)可能是在支持激素依賴的乳腺癌的生長和發展中的另一種重要途徑。在人體中雌激素的形成在附圖1中示意說明。在患有激素依賴性癌癥的患者中，目前將芳化酶抑制劑用于預防雌激素合成，然而，臨床試驗顯示對雌激素受體陽性腫瘤的患者相對缺乏效力(Castiglione隱GertschM，Eur.J.Cancer,1996，32A,393-395andJonatW，Eur.J.Cancer,1996,32A,404-412)。作為解釋，類固醇硫酸酯酶途徑可能是乳腺腫瘤中雌激素形成的另一種重要途徑。EMATE(AhmedS,Curr.Med.Chem.，2002,9，2，263-273)，雌酮-3-氨基磺酸酯是過去的標準類固醇硫酸酯酶抑制劑，但由于其抑制機理，具有雌激素的主要缺點在酶失活過程中氨基磺酸部分斷裂，沒有由E,S而是由EMATE本身釋放E,(AhmedS，J.SteroidBiochem.Mol.Biol"2002,80,429-440)。雌二醇其它釋放沒有雌激素性質的衍生物的非類固醇氨基磺酸酯化合物作為可接受的候選藥物提出，尤其是6,6,7-COUMATE,—種文獻中的標準非雌激素硫酸酯酶抑制劑(PurohitA，CancerRes.,2000,60,3394-3396)。oh,n』_o6,6,7coumate因此，從治療特定雌激素依賴性疾病的角度考慮，需要類固醇硫酸酯酶抑制劑。發明概述本發明的目的是提供氨基磺酸苯并噻吩酯(sulfamatebenzothiophene)衍生物，它們是有效的;克酸酯酶抑制劑。本發明的另一目的是提供含有作為活性成分的如上所述的氨基磺酸苯并p塞吩酯衍生物的藥物組合物。本發明的另一目的是提供氨基磺酸苯并噻吩酯衍生物在制備用于治療或預防各種疾病和用于在女性、男性以及雌性和雄性野生或家畜中控制生殖功能的藥物中的用途。本發明的氨基磺酸苯并噻吩酯衍生物可用如下通式(Ia)或(Ib)表示<formula>formulaseeoriginaldocumentpage9</formula>(lb)其中-R,是H、(C廣C6)烷基、(CVC6)烯基、(CrC,2)環烷基或(Crd2)環烯基，其中環烷基和環烯基任選被(d-C4)烷基單-或二取代；-R2是H;-R，2是(CrC6)烷基或(C3-C,2)環烷基；-R3是H、(C廣C6)烷氧基或鹵素；-m是O、1、2;-n是0、1、2;-當m是0時，R,和R2還可一起形成基團-(CH2)p-,其中p是3、4或5;-虛線表示氨基磺酸基團在苯并噻吩環的5-或6位。在式(Ia)或(Ib)化合物中，尤其優選滿足至少如下條件之一的化合物-R,是氫、(CrC6)烷基或任選被(CrC4)烷基單-或二取代的(C3-C,2)環烷基，優選R,是任選被(OC4)烷基單-或二取代的(C3-C，o)環烷基；-m是O或l;-Ro是氫；-n是0或2;-氨基磺酸基團在苯并噻吩環的6位。在說明書和所附的權利要求中，(CrC4)或(d-C6)烷基被理解為表示分別含有l-4或l-6個碳原子的直鏈或支鏈飽和烴鏈。該烷基是例如甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、叔丁基、戊基、異戊基或己基。(C,-Q)烷氧基理解為表示基團-OR,其中R是如上定義的(C,-C6)烷基。(C3-C,2)環烷基被理解為表示含有3-12個碳原子的飽和單-或二環烴基。(CrC。)環烷基是例如環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環庚基、環辛基、環癸基或金剛烷基。卣素被理解為表示氯、溴、氟或碘原子。(C2-C6)烯基被理解為表示含有2-6個碳原子的直鏈或支鏈不飽和烴鏈。(C2-C6)烯基是例如乙烯或丙烯、丁烯、戊烯或己烯基。(CVd2)環烯基被理解為表示含有3-12個碳原子的不飽和單-或二環烴。(CrC,2)環烯基是例如環丙烯基、環丁烯基、環戊烯基、環己烯基、環辛烯基、環癸烯基或金剛烯基。考慮它們抑制類固醇硫酸酯酶的能力，與芳化酶抑制劑相比，為了排除(dryout)其它來源的內在雌激素，本發明的化合物可單獨地或與一種或多種其它性內分泌治療藥物，例如抗雌激素，SERM(選擇性雌激素受體調節劑)、抗芳化酶、抗雄激素、裂解酶抑制劑、孕酮或LH-RH激動劑或拮抗劑聯合用于治療或預防雌激素依賴性疾病或病癥。本發明的化合物還可單獨或與一種或多種其它治療藥物，例如LH-RH激動劑或拮抗劑、雌孕酮避孕藥、孕酮、抗孕酮或前列腺素聯合用于在人體或野生動物或家畜種類中控制或操縱雌激素調節的生殖功能，例如雄性或雌性生育力、懷孕、流產或分娩。乳房是雌激素剌激的增殖和/或分化的敏感目標，本發明的化合物可用于在男人或女人或在雄性或雌性家畜中治療或預防女性良性乳房疾病、男子女性型乳房和良性或轉移或非轉移的惡性乳腺腫瘤。本發明的化合物還可用于治療或預防子宮或卵巢的良性或惡性疾病。在每種情況下，本發明的化合物單獨地或與一種或多種其它性內分泌治療藥物，如上述的那些聯合使用。由于酶類固醇硫酸酯酶將硫酸DHEA轉變為DHEA，一種活性雄激素(睪丸酮和二氬睪丸酮)的前體，本發明的化合物可單獨或與一種或多種其它性內分泌治療藥物，例如抗雄激素、抗雌激素，SERM、抗芳化酶、孕酮、裂解酶抑制劑或LH-RH激動劑或拮抗劑聯合用于治療或預防雄激素依賴性疾病，例如雄激素性脫發(男性類型脫發)(HoffmanR等，J.Invest.Dermatol.,2001，117,1342-1348)或痤瘡(BillichA等，1999,WO9952890)、前列腺或睪丸的良性或惡性疾病(ReedMJ,Rev.Endocr.Relat.Cancer,1993,45，51-62)。類固醇硫酸酯酶抑制劑還有效地包含在認識功能障礙治療中，因為它們能夠提高大鼠的學習和空間記憶(JohnsonDA，BrainRes，2000，865，286-290)。硫酸DHEA作為神經類固醇影響許多神經遞質系統，包括那些包含乙酰膽堿、谷氨酸酯和GABA的系統，導致增加的神經元興奮性(WolfOT，BrainRes.Rev,1999，30,264-288)。此外，雌激素包含在Th,和Th2主要免疫功能間平衡的調節中，因此可用于治療或預防性依賴性自身免疫疾病，例如狼疳、多發性硬化、風濕性關節炎等(DaynesRA，J.Exp.Med,1990,171,979-996)。類固醇硫酸酯酶抑制在嚙齒動物的接觸過敏和膠原誘導的關節炎模型中顯示是被保護的(SuittersAJ,Immunology,1997,91，314-321)。使用2-MeOEMATE的研究顯示類固醇硫酸酯酶抑制劑具有有效的雌二醇非依賴性生長抑制效果(MacCARTHY-MOOROGHL，CancerResearch,2000,60，5441-5450)。用本發明的具有低腫瘤類固醇硫酸酯酶抑制作用的化合物出乎意料地觀察到腫瘤體積的減小。據此，本發明的化合物由于該新化學實體和無論組織，包括乳房、子宮內膜、卵巢、前列腺、睪丸或由其產生的轉移的癌細胞內微管網絡間的大量相互作用導致細胞分裂下降，因此，本發明的化合物可用于治療非雌激素依賴性癌癥。因此，本發明的另一目的是提供治療上述疾病或病癥，尤其是雌激素(GOLOBT，Bioorg.Med.Chem.，2002，10,3941-3953)。該方法包括向需要的患者(人或動物)給藥治療有效量的式(I)化合物。含有活性成分的藥物組合物可以是適合口服使用的形式，例如片劑、錠劑、糖錠、水或油懸浮液、可分散粉末或顆粒、乳液、硬或軟膠嚢、或糖漿或酏劑。用于口服使用的組合物可根據本領域已知的用于制備藥物組合物的任何方法制備，該組合物可含有一種或多種附加劑，其選自增甜劑、調味劑、著色劑和防腐劑，以提供可藥用的精致和可口的制劑。片劑含有與適用于制備片劑的無毒可藥用賦形劑混合的活性成分。這些賦形劑可以是例如惰性稀釋劑，例如碳酸4丐、碳酸鈉、乳糖、磷酸釣或磷酸鈉；造粒和崩解劑，例如玉米淀粉或褐藻酸；粘合劑，例如淀粉、明膠或阿拉伯樹膠和潤滑劑，例如硬脂酸鎂、硬脂酸或滑石。片劑可以是未包衣的或它們可用已知技術包衣以在胃腸道中延遲崩解和吸收，從而提供在較長時間內的持續作用。例如可采用時間延遲材料，例如甘油基硬脂酸酯或甘油二硬脂酸酯。片劑可以用在US4，256,108、4,166,452或4,265,874中描述的技術包衣以形成用于控制釋放的滲透性治療片劑。用于口服使用的制劑還可作為硬明膠膠嚢存在，其中活性成分與惰性固體稀釋劑，例如碳酸鉤、磷酸4丐或高呤土混合，或作為軟明膠膠嚢存在，其中活性成分與水或油介質，例如花生油、液體石蠟或橄欄油混合。含水懸浮液含有與適用于制備含水洗懸浮的賦形劑混合的活性成分。該賦形劑是懸浮劑，例如羧曱基纖維素鈉、甲基纖維素、羥丙基曱基纖維素、海藻酸鈉、聚乙烯基吡咯烷酮、黃芪膠和阿拉伯膠；分散劑或增濕劑，例如天然磷脂，例如卵磷脂或氧化烯與脂肪酸的縮合產物，例如聚氧乙烯硬脂酸酯或環氧乙烷與長鏈脂族醇的縮合產物，例如十七乙烯氧基十六烷醇或環氧乙烷與由脂肪酸和己糖醇得到的偏酯的縮合產物，例如聚氧乙烯山梨糖醇單油酸酯。含水懸浮液還可含有一種或多種防腐劑，例如對羥基苯曱酸乙基或正丙基酯、一種或多種著色劑、一種或多種調味劑和一種或多種增甜劑，例如蔗糖、糖精或天冬氨酰苯丙氨酸曱酯。含油懸浮液可通過將活性成分懸浮在植物油，例如落花生油、橄欄油、芝麻油或椰子油、或在礦物油，例如液體石蠟中配制。含油懸浮液可含有增稠劑，例如蜂蠟、硬石蠟或鯨蠟醇。增甜劑，例如上述的物質，和調味劑可加入以提供可口口服制劑。這些組合物可通過加入抗氧化劑，例如抗壞血酸防腐。適用于通過加入水制備含水懸浮液的可分散粉末和顆粒提供與分散劑或增濕劑、懸浮劑和一種或多種防腐劑混合的活性成分。合適的分散劑或增濕劑和懸浮劑由上面已提到的物質舉例說明的。還可存在附加的賦形劑，例如增甜劑、調味劑和著色劑。本發明的藥物組合物還可以是水包油乳液形式。油相可以是一直物油，例如橄欄油或落花生油或礦物油，例如液體石蠟或它們的混合物。合適的乳化劑可以是天然磷酯，例如大豆、卵磷脂和由脂肪酸和己糖醇酐得到的酯或偏酯，例如脫水山梨糖醇單油酸酯和所述偏酯與環氧乙烷的縮合產物，例如聚氧乙烯脫水山梨糖醇單油酸酯。乳液還可含有增甜劑和調味劑。本發明的藥物組合物可以是無菌可注射含水或含油懸浮液形式。懸浮液可根據已知方法配制，使用上面提及的合適的分散劑或增濕劑和懸浮液。無菌可注射制劑還可以是在無毒腸胃外可接受的稀釋劑或溶劑中的無菌可注射溶液或懸浮劑，例如在1,3-丁二醇中的溶液。在可使用的可接受的賦形劑和溶劑中，可提及水、Ringer溶液和等滲氯化鈉溶液。此外，無菌不揮發油按常規用作溶劑或懸浮介質，為此，可使用任何刺激性少的不揮發油，包括合成單-或二甘油酯，此外，脂肪酸，例如油酸發現用于制備注射劑。本發明的化合物可以每天每公斤體重約0.0001mg-約10mg的劑量7K平用于治療上述疾病或病癥，或者每個患者每天約0.01mg-約100mg。可與載體物質混合以制備單一劑量形式的活性成分的數量將根據所治療的宿主和給藥的具體方式變化。然而，應理解對于任何特定患者，具體劑量水平將取決于各種因素，包括年齡、體重、一般健康狀況、性別、飲食、給藥時間、給藥途徑、排泄速率、藥物聯用和所治療的具體疾病的嚴重程度。式(I)的氨基磺酸苯并噻吩酯衍生物可根據如下一般圖解1制備。圖解1<formula>formulaseeoriginaldocumentpage14</formula>根據圖解1,3-曱氧基苯硫酚(l)與2-溴-l,l-二乙氧基乙烷縮合，硫-化合物中間體(2)用不同的酸多磷酸(Bioor.Med.Chem.Lett,1999，9，759-64)或甲磺酸環化得到6-曱氧基-苯并噻吩(3)。該化合物還可通過使路易斯酸，三氟硼烷與化合物(2)使用S.Graham描述的條件(J.Med.Chem，1989,32，2548-54)反應制備。6-曱氧基-苯并噻吩(3)用N-溴琥珀酰亞胺和APTS采用Y.Fort描述的條件(Tetrahedron.1994,50,11893-902)轉化為溴衍生物(4)。(4)轉變成有機鎂溴化物，隨后采用標準條件與酮或醛縮合以得到單取代的苯并噻吩(5)。二取代的苯并p塞吩(9)可用Kano.S描述的條件(Heterocycles,1982,19，6,1033-37)通過單取代的化合物(5)的烷基化制備。其中Ri和R2—起形成基團-(CH2)p-的化合物，例如7-甲氧基-1，2，3,4-四氬二苯并p塞吩(p-4)可用Oliveira.M描述的條件(Tetrahedron,2002,58，1709-18)制備。單取代的(5)或二取代的(9)甲氧基苯并噻吩用三氟硼烷用McOmie.J.F.W描述的條件(Tetrahedron，1968，24,2289-92)脫保護得到羥基化合物(6)和(IO)。這些化合物通過用氫化鈉處理，用酰氨基氯磺酸處理(Nussbaumer.P，JMedChem,2002,45,4310-20)或與氨基磺酰氯在二曱基乙酰胺(DMAc)中反應(Makoto.O，Tetrahedronletters,2000,41，7047-5l)轉變為相應的氨基磺酸酯(7)和(11)。(7)和(11)用過氧化氫在三氟乙酸中用GRIVASS,和RONNEE.描述的條件(ActaChemicaScandinavia,1995，49，225-229)氧化得到最終苯并噻吩(8)和(12)。其中氨基磺酸酯基團在苯并噻吩環的5位上的式(I)化合物可以用相同方法，但用4-曱氧基硫代噻吩為原料制備。圖1示意說明在人體中雌激素的形成。如下實施例用于舉例說明，但不限制本發明的范圍。3-溴-6-曱氧基苯并噻吩(4)的制備實施例1:6-甲氧基笨并噻吩(3)將溴乙醛二乙基縮醛(16.50ml，0.11mol)在室溫下滴加到在丙酮(150ml)中的間曱氧基苯硫酚(l)(15ml，0.12mol)和K2CO3(16.60g,0.12mol)的混合物中。反應混合物攪拌16小時，隨后過濾。固體用丙酮洗滌，合并的濾液真空濃縮。殘余物用水洗滌，用Et20萃取。有才幾相用0.5MKOH、水和鹽水洗滌，用Na2S04干燥，過濾和真空濃縮得到27.40g化合物(2)暗黃色油。'H誦NMR(CDCl3):1.18(t,6H)，3.13(d,2H),3.43-3.73(m，4H)，3.77(s,3H)，4.67(t，1H)，6.60-7.27(m，4H)。在氮氣氣氛和室溫下，將(2)(13.00g,0.051mol)在CH2Cl2(100ml)中的溶液滴加到BF3.Et20(6.70ml,0.054mol)在CH2C12(1000ml)中的溶液中。水解后，反應混合物攪拌直至兩相變成透明。分離CH2Cl2層，水層用CH2C12萃取，合并的有機相用Na2S04干燥，過濾和真空濃縮得到8.68§的4和6-曱氧基苯并瘞吩(3)的1:10混合物暗棕色油。粗產物無需純化而使用。主要異構體(3)'H-NMR(CDCl3):3.85(s，3H),6.98(dd,1H),7.23(s，2H),7.35(d,1H),7.68(d，1H)。實施例2:2-溴-6-甲氧基苯并噻吩(4)將N-溴琥珀酰亞胺(14.70g，82.59醒ol)和對曱苯磺酸(2.70g,15.68mmol)加入苯并逸吩(3)(15.10g，92.07mmol)在1,2-二氯乙烷(300ml)中的溶液中。混合物保持在70°C35分鐘，在冰浴中冷卻，過濾除去琥珀酰亞胺。溶液用飽和碳酸氫鈉溶液萃取，用Na2S04干燥，過濾和真空濃縮得到22.00g油。由戊烷結晶得到白色固體(16.50g,74%)，熔點62°C。'H-畫R(CDCl3):3.85(s,3H),6.9(dd，1H)，7.50(m,2H)，7.65(d，1H)單取代的苯并噻吩(5)的制備實施例3:2-環己基-6-曱氧基苯并噻吩在氬氣氛下向在Et20(20ml)中的Mg(0.22g，9.05mmol)中滴加溴化物(4)(2.00g，8.23mmol)在Et20(20ml)中的溶液。混合物回流2小時，加入環己酮(1.00ml，9.87mmol)在Et2O(5ml)中的溶液。混合物回流，倒入水中。溶液用乙酸乙酯萃取，用Na2S04干燥，過濾和真空濃縮得到8.00g油。由二異丙基醚中研制得到2-(l-羥基環i基)-6-曱氧基苯并噻吩白色粉末(0.90g:65%)。'H-應R(DMSOd6):1.20-2.00(m,顧)，3.80(s,3H),5.30(s，1H),6.93(dd,1H)，7.10(s,lH)，7.42(d，1H),7.60(d，1H)。在氬氣氛下向在二氯甲烷(10ml)中的2-(l-羥基環己基)-6-曱氧基苯并瘞吩(0.30g，1.14mmol)中滴加三乙基甲硅烷(0.22ml,1.37mmol)。隨后溶液在0。C攪^f,加入三氟乙酸(5.00ml，67.31mmol)。在室溫下2小時后，將混合物傾入飽和NaHC03水溶液和水中，用乙酸乙酯萃取，用Na2S04干燥，過濾和真空濃縮得到0.30g油(100%)。由二異丙基醚中結晶得到白色結晶(0.20g,70%)。'H畫畫R(DMSOd6):1.00-2.20(m，11H),2.72(m，1H),3.75(s，3H)，6.93(dd,1H),7.01(s,1H),7.43(d,1H),7.58(d,1H)。用相同的方法，但用如下化合物代替環己酮-環戊酮-環庚酮-環辛酮-環癸酮-4-曱基環己酮-2-曱基環己酮2,2-二曱基環戊酮2-金剛烷酮-丙醛-己醛-環己烷曱醛-環庚烷曱醛(根據J.G.Traynham等,Tetrahedron,7,1959，165-72制備)，分別得到如下化合物實施例4:2-環戊基-6-曱氧基苯并噻吩'H-NMR(DMSOd6):1.40-2.20(m,8H)，2.72(m，1H),3.80(s,3H)，6.94(dd,1H)，7.13(s，1H),7.45(d，1H)，7.64(d,1H)。實施例5:2-環庚基-6-曱氧基苯并噻吩'H-麗R(DMSOd6):1.40-2.20(m,12H)，3.05(m，1H)，3.80(s,3H),6.90(dd,1H),7.00(s，1H)，7.41(d,1H),7.57(d,1H)。實施例6:2-環辛基-6-曱氧基苯并噻吩'H-NMR(DMSOd6):1.20-2.15(m,14H),3.10(m,1H)，3.77(s，3H)，6.92(dd,1H),7.01(s,1H)，7.41(d，1H),7.58(d，1H)。實施例7:2-環癸基-6-甲氧基苯并噻吩'H誦NMR(DMSOd6):1.20-2.15(m,18H)，3.12(m，1H)，3.75(s,3H)，6.92(dd，1H)，7.01(s,1H),7.40(d，1H)，7.55(d,1H).實施例8:2-(4-曱基環己基)-6-曱氧基苯并噻吩'H-NMR(DMSOd6):0.70-2.15(m，12H),2.72(m，0.5H,非對映異構體),2.99(m，0.5H,非對映異構體)，3.76(s，3H)，6.92(dd,1H)，7.02(s,1H),7.41(d1H),7.58(d,1H)。實施例9:2-(2-曱基環己基)-6-曱氧基苯并噻吩'H-NMR(DMSOd6):0.70-2.20(m,12H),2.70(m,0.5H,非對映異構體),3.02(m,0.5H，非對映異構體)，3.75(s,3H),6.92(dd，1H),7.02(s,1H)，7.40(d1H)，7.55(d,1H)。實施例10:2-(2，2-二曱基環戊基)-6-曱氧基苯并噻吩^-NMR(DMSOd6):0.70(s,3H)，UO(s,3H)，1.45-2.20(m，6H)，2.93(m，1H),3.78(s,3H),7.02(dd，1H)，7.04(s,1H),7.43(d,1H),7.60(d，1H)。實施例11:2-(2-金剛烷基)-6-曱氧基苯并p塞吩化畫R(DMSOd6):1.40-2.40(m,14H),3.19(brs，1H),3.79(s，3H),6.92(dd，1H)，7.08(s,1H),7.43(d,1H),7.60(d,1H)。實施例12:2-丙基-6-曱氧基苯并噻吩'H-畫R(DMSOd6):0.95(t，3H),1.68(m,2H),2.78(t,2H),3.79(s,3H),6.92(dd,1H),7.00(s,1H),7.43(d，1H),7.58(d,1H)。實施例13:2-己基-6-甲氧基苯并噻吩"H-畫R(DMSOd6):0.85(t,3H)，1.10-1.80(m,8H)，2.82(t，2H)，3.79(s,3H)，6.92(dd，1H),7.01(s,1H)，7.45(d,1H),7.58(d，1H)。實施例14:2-環己基曱基-6-曱氧基苯并p塞吩!H-畫R(DMSOd6):0.75-1.85(m,11H),2.70(d，2H)，3.80(s，3H),6.92(dd,1H),7.00(s,1H)，7.42(d，1H)，7.59(d，1H)。實施例15:2-環庚基甲基-6-曱氧基苯并噻吩'H-^MR(DMSOd6):1.00-1.90(m,13H)，2.71(d，2H)，3.80(s,3H)，6.93(dd,1H),7.00(s,1H),7.42(d,1H),7.59(d,1H)。單取代的苯并噻吩(6)的制備實施例16:2-環己基-苯并p塞吩-6-醇將2-環己基-6-曱氧基苯并逸p分(4.00g，16.0醒ol)在40ml二氯曱烷中的溶液在室溫下加入到三淡化硼溶液(24ml，24mmol)中。在室溫下2小時后，混合物用飽和NaHC03水溶液水解，用二氯曱烷萃取，用Na2S04干燥，過濾和真空濃縮得到醇(3.60g油，97%)。^曙NMR(CDCl3):1.10-2.10(m,10H),2.80(m，1H)，6.78(dd,1H),6.94(s,1H),7.17(d,1H)，7.48(d,1H)，9.42(s，1H，OH)。采用相同的方法，但用如下化合物代替2-環己基-6-曱氧基苯并噻吩-2-環戊基-6-曱氧基苯并噻吩-2-環庚基-6-曱氧基苯并噻吩-2-環辛基-6-曱氧基苯并噻吩-2-環癸基-6-甲氧基苯并噻吩-2-(4-甲基環己基)-6-曱氧基苯并噻吩-2-(2-曱基環己基)-6-曱氧基苯并噻吩-2-(2,2-二曱基環戊基)-6-甲氧基苯并噻吩-2-(2-金剛烷基)-6-曱氧基苯并噻吩-2-丙基-6-曱氧基苯并噻吩-2-己基-6-曱氧基苯并噻吩-2-環己基曱基-6-曱氧基苯并噻吩-2-環庚基曱基-6-曱氧基苯并噻吩，分別得到如下化合物實施例17:2-環戊基-苯并噻吩-6-醇熔點116°C!H-NMR(DMSOd6):1.45-2.20(m,8H),3.25(m，1H)，6.78(dd,1H)，6.96(s,1H)，7.15(d,1H)，7.47(d,1H)，9,45(s，1H,OH)。實施例18:2-環庚基-苯并噻吩-6-醇熔點140°C'H-畫R(畫SOd6):1.35-2.15(m，2H),3.00(m,1H),6.79(dd,1H),6.94(s，1H)，7.17(d,1H),7.48(d,1H),9,45(s,1H，OH)。實施例19:2-環辛基-苯并蓬吩-6-醇熔點100。C'H-NMR(DMSOd6):1.35-2.10(m,14H),3.07(m,1H)，6.78(dd,1H)，6.95(s,1H),7.15(d,1H)，7.47(d，1H)，9，42(s，1H,OH)。實施例20:2-環癸基-苯并p塞吩-6-醇熔點雨。C'H陽NMR(畫SOd6):1.30-2.10(m，18H)，3.22(m,1H),6.79(dd,1H),6.99(s，1H)，7.15(d，1H),7.48(d,1H),9,42(s,1H,OH)。實施例21:2-(4-曱基環己基)-苯并瘞吩-6-醇熔點132°C'H-固R(DMSOd6):0.70-2.10(m,12H),2.70(m，1H)，6.80(dd，1H)，6.92(s，1H),7.15(d,1H)，7.48(d,1H),9,42(s，1H，OH)。實施例22:2-(2-曱基環己基)-苯并噻吩-6-醇熔點125°C'H-NMR(DMSOd6):0.60-2.20(m,12H),3.05(m,1H)，6.80(dd,1H),6.90(s，1H),7.16(d，1H),7.50(d，1H),9，45(s,1H,OH)。實施例23:2-(2，2-二曱基環戊基)-苯并p塞吩-6-醇熔點90。C'H-NMR(DMSOd6):0.70(s，3H),1.09(s,3H),1.45-2.20(m,6H)，2.92(dd1H)，6.80(dd,1H)，6.99(s，1H),7.17(d，1H)，7.51(d，1H),9.45(s,1H,OH)。實施例24:2-(2-金剛烷基)-苯并噻吩-6-醇熔點184°C'H-畫R(DMSOd6):1.40-140(m，14H),3.16(brs，1H)，6.80(dd，1H)，7.00(s，1H)，7.17(d，1H),7.50(d，1H),9,43(s,1H，OH)。實施例25:2-丙基-苯并p塞吩-6-醇熔點56°C'H-NMR(DMSOd6):0.97(t,3H),1.68(m,2H),2.79(t,2H),6.80(dd,1H),6.96(s，1H),7.17(d,1H)，7.50(d，1H),9.46(s,1H,OH)。實施例26:2-己基-苯并噻吩-6-醇熔點68°C'H-NMR(DMSOd6):0.85(t,3H)，1.10-1.80(m，8H)，2.78(t,2H)，6.79(dd，1H),6.95(s，1H),7.16(d，1H),7.48(d，1H),9.45(s，1H,OH)。實施例27:2-環己基甲基-苯并噻吩-6-醇溶點97。C'H-NMR(DMSOd6):0.75-1.80(m，11H),2.68(d,2H),6.78(dd，1H),6.91(s，1H),7.16(d,1H),7.49(d，1H),9.45(s,1H，OH)。實施例28:2-環庚基曱基-苯并噻吩-6-醇熔點82°C'H-NMR(DMSOd6):1.00-1.90(m,13H),2.72(d,2H),6.80(dd,1H),6.92(s，1H)，7.18(d,1H)，7.49(s,1H),9.48(s,1H,OH)。制備氨基磺酸單取代苯并噻吩酯(7)實施例29:氨基磺酸，2-環己基-苯并瘞吩-6-基酯在0。C將氫化鈉(0.60g,24.8mmol)小心地加入2-環己基-苯并"塞吩-6-醇(3.60g，15.50mmol)在無水DMF(36ml)中的溶液中，在室溫下攪拌30分鐘和在50。C攪拌30分鐘后，將混合物冷卻(水/水)，加入酰氨基氯磺酸(4.45g,38.00mmol)。在室溫下3小時后，混合物用飽和NH4Cl水溶液水解，用乙酸乙酯萃取，用Na2S04干燥，過濾和真空濃縮得到粗產物(4.80g油)。經硅膠快速色譜法(曱苯/l,4-二嚅烷，8/2)純化得到透明的油，其由乙醇結晶得到標題產物(0.50g,10%,熔點128°C)。^-畫R(CDCl3):1.15-2.20(m,10H),2.90(m,1H)，7.18(s，1H),7.24(dd，1H)，7.30(d,1H),7.32(s,1H),7.98(s,2H，NH2)。采用相同的方法但用如下化合物代替2-環己基苯并p塞吩-6-醇-2-環戊基-苯并噻吩-6-醇-2-環庚基-苯并漆吩-6-醇-2-環辛基-苯并噻吩-6-醇-2-環癸基-苯并噻吩-6-醇_2-(4-曱基環己基)-苯并噻吩-6-醇-2-(2-曱基環己基)-苯并噻吩-6-醇-2-(2,2-二曱基環戊基)-苯并噻吩-6-醇-2-(2-金剛烷基)-苯并噻吩-6-醇-2-丙基-苯并噻吩-6-醇-2-己基-苯并噻吩-6-醇-2-環己基曱基-苯并p塞吩-6-醇-2-環庚基曱基-苯并噻吩-6-醇，分別得到如下化合物實施例30:氨基磺酸,2-環戊基-苯并噻吩-6-基酯熔點110°CH-NMR(DMSOd6):1.50-2.30(m，8H)，3.39(m,1H),7.20(s,1H),7.72(dd,1H)，7.78(d,1H)，7.95(s,2H，NH2)。實施例31:氨基磺酸,2-環庚基-苯并噻吩-6-基酯熔點132°CH-NMR(DMSOd6):1.35-2.20(m,12H),3.12(m，1H)，7.19(s，1H),7.24(dd,1H)，7.75(d,1H)，7.80(d,1H),7.95(s,2H，NH2)。實施例32:氨基磺酸，2-環辛基-苯并噻吩-6-基酯熔點126°C'H-麗R(DMSOd6):0.90-2.20(m，14H),3.18(m，1H)，7.17(s，1H),7.23(dd，1H),7.76(d，1H)，7.80(d，1H)，7.95(s,2H,NH2)。實施例33:氨基磺酸，2-環癸基-苯并噻吩-6-基酯熔點98°C'H誦NMR(DMSOd6):1.30-2,10(m,18H),3.31(m，1H)，7.20(s，1H)，7,23(dd,1H),7.76(d，1H)，7.79(d，1H)，7.96(s，2H，NH2)。實施例34:氨基磺酸，2-(4-曱基環己基)-苯并噻吩-6-基酯熔點132°C'H-畫R(DMSOd6):0.75-2.15(m,12H),2.55(m，1H)，7.25(s,1H)，7.55(dd,1H)，7.60(d，1H),7.70(d,1H),8.25(s,2H，NH2)。實施例35:氨基磺酸,2-(2-甲基環己基)-苯并噻吩-6-基酯熔點110°C'H-畫R(DMSOd6):0.65-2.30(m，12H),3.15(m，1H),7.05-7,35(m,2H),7.70-7.89(m，2H),7.97(s，2H,NH2)。實施例36:氨基磺酸，2-(2,2-二曱基環戊基)-苯并噻吩-6-基酯熔點72。C'H-NMR(DMSOd6):0.70(s，3H)，U0(s,3H),1.45-2.30(m,6H),3.02(dd1H),7.20(s，1H)，7.23(dd,1H),7.78(d,1H),7.80(s,1H)，7.96(s，2H，麗2)。實施例37:氨基磺酸,2-(2-金剛烷基)-苯并噻吩-6-基酯炫點185。C'H-NMR(DMSOd6):1.50-2.40(m,12H)，3.37(brs,1H),7.24(m,2H),7.80(d，1H),7.82(s，IH)，7.97(s，2H,NH2)。實施例38:氨基磺酸，2-丙基-苯并噻吩-6-基酯熔點112°C'H-畫R(DMSOd6):0.96(t,3H),1.70(m，2H)，2.88(t，2H),7.19(s,IH)，7.24(dd,IH)，7.78(d，IH)，7.80(s，1H),7.97(s,2H,NH2)。實施例39:氨基磺酸,2-己基-苯并p塞吩-6-基酯炫點125。C'H-NMR(DMSOd6):0.95(t,3H)，1.10-1.80(m,8H)，2.88(t,2H)，7.19(s,IH)，7.22(dd,1H),7.77(d，1H),7.79(s,IH)，7.96(s,2H，NH2)。實施例40:氨基磺酸，2-環己基曱基-苯并漆吩-6-基酯熔點115°C'H-NMR(DMSOd6):0.80-1.80(m,11H),2.78(d,2H),7.16(s,IH)，7.24(dd,IH)，7.77(d,IH)，7.79(s，1H),7.97'(s,2H，NH2)。實施例41:氨基磺酸,2-環庚基曱基-苯并噻吩-6-基酯熔點90。C'H-麗R(DMSOd6):1.00-2.00(m,13H)，2.82(d,2H)，7.18(s，1H),7.22(dd,1H),7.78(d,IH)，7.80(s，1H),7.97(s，2H,NH2)。單或二氧化的單取代的化合物(8)的制備實施例42:氨基磺酸，2-環己基-苯并噻吩-6-基-l-氧化物酯向在二氯曱烷(20ml)和三氟乙酸(5ml)中的氨基磺酸，2-環己基-苯并噻吩-6-基酯(1.00g,3.21mmol)溶液中加入35%過氧化氬水溶液(0.35ml，3.42mmol，1.05當量).。在50。C2小時后，混合物用飽和NaHC03水溶液水解，用二氯曱烷萃取，用Na2S04干燥，過濾和真空濃縮得到粗產物。經硅膠快速色譜法純化(曱苯/1,4-二喝烷:6Z4)得到透明油，其由乙醇結晶得到標題產物(0.25g，24。/0,熔點U0。C)。'H-醒R(DMSOd6):1.10-2.15(m，麗)，2.72(m，1H)，7.10(s，1H),7.45(dd，1H)，7.64(d,1H)，7.84(d,1H)，8.16(s，2H,NH2)。用相同的方法，但用氨基磺酸，2-環癸基-苯并噻吩-6-基酯代替氨基磺酸2-環己基-苯并噻吩-6-基酯，得到如下化合物實施例43:氨基磺酸，2-環癸基-幕并噻吩-6-基酯-l-氧化物熔點146。C,'H-NMR(DMSOd6):1.35-2.10(m，18H),3.12(m,1H),7.15(s，1H)，7.45(dd,1H)，7.62(d，1H)，7.83(d，lH),8.15(s,2H,麗2)。用實施例42的方法，但用2.2當量過氧化氫，得到如下化合物實施例44:氨基磺酸,2-環己基-苯并噻吩-6-基酯-l,l-二氧化物熔點180°C■H-NMR(DMSOd6):1.15-2.15(m,麗)，2.52(m，1H)，7.30(s,1H),7.53(dd，1H),7.63(d,1H)，7.71(d，1H)，8.25(s,2H，麗2)。用相同的方法，但用如下化合物代替氨基磺酸，2-環己基-苯并謹吩-6-基酯-氨基磺酸,2-環庚基-苯并噻吩-6-基酯-氨基磺酸，2-環辛基-苯并噻吩-6-基酯-氨基磺酸,2-環癸基-苯并噻吩-6-基酯-氨基磺酸，2-(4-曱基環己基)-苯并噻吩-6-基酯-氨基磺酸,2-(2-曱基環己基)-苯并噻吩-6-基酯-氨基磺酸，2-(2,2-二曱基環戊基)-苯并噻吩-6-基酯-氨基磺酸,2-(2-金剛烷基)-苯并噻吩-6-基酯-氨基磺酸，2-丙基-苯并噻吩-6-基酯-氨基磺酸,2-己基-苯并噻吩-6-基酯-氨基磺酸，2-環己基甲基-苯并噻吩-6-基酯-氨基磺酸，2-環庚基甲基-苯并噻吩-6-基酯，分別得到如下化合物實施例45:氨基磺酸,2-環庚基-苯并p塞吩-6-基酯-l,l-二氧化物熔點137°C'H畫畫R(DMSOd6):1.35-2.15(m,12H),2.75(m,1H)，7.32(s，1H),7.52(dd，1H)，7.61(d，1H)，7.70(d,1H)，8.25(s,2H,NH2)。實施例46:氨基磺酸,2-環辛基-苯并噻吩-6-基酯-l，l-二氧化物熔點122°C1HNMR(DMSOd6):1.35-2.10(m,14H),2.81(m,1H),7.32(s，1H)，7.52(dd,1H)，7.61(d，1H)，7.70(d，1H)，8.22(s，2H，麗2)。實施例47:氨基磺酸，2-環癸基-苯并噻吩-6-基酯-l，l-二氧化物熔點102。C^-NMR(DMSOd6):1.35-2.10(m,18H),2.97(m,1H),7.38(s,1H)，7.52(dd,1H),7.60(d，1H)，7.70(d,1H),8.22(s,2H，NH2)。實施例48:氨基磺酸，2-(4-甲基環己基)-苯并噻吩-6-基酯-l,l-二氧化物炫點170°C'H-畫R(DMSOd6):0.75-2.20(m,12H),2.83(m，1H)，7.18(s,1H),7.22(dd,1H)，7.78(d，1H)，7.80(d，1H),7.95(s,2H,NH2)。實施例49:氨基磺酸，2-(2-曱基環己基)-苯并噻吩-6-基酯-l，l-二氧化物熔點92。C，H誦NMR(DMSOd6):0.70-2.45(m，12H),2.85(m,1H),7.25(s，1H)，7.52(m,3H)，8.25(s,2H，NH2)。實施例50:氨基磺酸，2-(2,2-二曱基環戊基)-苯并噻吩-6-基酯-l,l-二氧化物熔點172°C'H-畫R(DMSOd6):0.90(s，3H),1.16(s,3H),1.50-2.15(m，6H)，2.66(t，1H),7.49(s,1H)，7.52(dd,1H)，7.61(d,1H),7.70(d,1H)，8.24(s，2H,麗2)。實施例51:氨基磺酸,2-(2-金剛烷基)-苯并噻吩-6-基酯-l，l-二氧化物熔點230°C'H-NMR(DMSOd6):1.45-2.45(m,14H)，3.04(brs,1H),7.38(s，1H),7.53(d,1H),7.64(d，1H)，7.70(d,1H)，8.25(s,2H,麗2)。實施例52:氨基磺酸，2-丙基-苯并噻吩-6-基酯-l,l-二氧化物熔點159°C'H-NMR(DMSOd6):0.99(t,3H)，1.70(m,2H),2.49(t,2H),7.29(s,1H),7.52(dd,1H)，7.63(d,1H),7.73(d，1H)，8.50(s,2H，麗2)。實施例53:氨基磺酸,2-己基-苯并噻吩-6-基酯-l，l-二氧化物熔點98°C'H陽畫R(DMSOd6):0.85(t,3H),1.10-1.80(m,8H)，2.50(t,2H),7.30(s,1H)，7.52(dd,1H),7.62(d,1H)，7.73(d，1H)，8.27(s，2H，NH2)。實施例54:氨基磺酸,2-環己基曱基-苯并噻吩-6-基酯-l,l-二氧化物熔點132°C'H-NMR(DMSOd6):0.80-1.95(m,11H),2.40(d,2H),7.30(s，1H)，7.53(dd,1H),7.62(d，1H)，7.72(d，1H)，8.25(s,2H，NH2).實施例55:氨基磺酸,2-環庚基曱基-苯并噻吩-6-基酯-l,l-二氧化物熔點135°C'H陽畫R(DMSOd6):1.00-2.15(m,13H)，2.45(d，2H),7.29(s,1H)，7.53(dd,1H),7.62(d,1H),7.73(d，1H),8.25(s，2H，NH2)。制備二取代的6-曱氧基-苯并噻吩(9)實施例56:2-環庚基-6-曱氧基-2-曱基-苯并噻吩在-70。C向在無水THF(20ml)中的2-環庚基-6-曱氧基-苯并瘞吩(2.00g:7.69mmol)溶液中滴加2.5M正丁基鋰在己烷(5ml,12.16mmol)中的溶液。隨后，將混合物在10分鐘內溫熱到-30。C,冷卻到-70。C,加入碘曱烷(l.Oml,15.38mmol)。將混合物溫熱到室溫過夜，用飽和NH4C1水溶液水解，用乙酸乙酯萃取，干燥(Na2S04)，過濾和真空濃縮得到2.1g油。經硅膠快速色譜法純化(庚烷/乙酸乙酯1/1)得到透明油(1.50g,72%)，它無需提純而使用。'H-畫R(DMSOd6):1.35-2.15(m，12H),2.29(s,3H)，3.00(m,1H),3.80(s3H)，7.00(s，1H),7.04(d,1H)，7.49(d，1H)。用相同的方法，但用溴丁烷代替碘曱烷，得到如下化合物實施例57:2-環庚基-6-曱氧基-3-丁基-苯并噻吩'H-畫R(DMSOd6):0.90(t,3H),1.10-2.20(m，16H),2.75(t，2H),3.04(m，1H)，3.80(s，3H)，7.00(s，1H)，7.05(d，1H)，7.51(d，1H)。二取代的苯并p塞吩-醇(10)的制備按照用于單取代的化合物的方法，但用如下化合物代替2-環己基-6-曱氧基-苯并噻吩-2-環庚基-3-曱基-6-曱氧基-苯并噻吩-2-環庚基-6-曱氧基-3-丁基-苯并噻吩-7-甲氧基-l，2,3,4-四氬-二苯并噻吩，分別得到如下化合物實施例59:2-環庚基-3-曱基-苯并噻吩-6-醇熔點96°C'H-NMR(DMSOd6):1.30-2.15(m,12H),2.44(s，3H),3.01(m,1H)，6.87(d,1H)，6.97(s,1H),7.34(d,1H),9.31(s，1H,OH)。實施例60:2-環庚基-3-丁基-苯并噻吩-6-醇透明油'H-畫R(DMSOd6):0.92(t,3H)，1.15-2.20(m,16H),2.80(t，2H),3.02(m，1H)，6.85(d,1H),6.95(s,1H)，7.32(d,1H),9.22(s,1H，OH)。氨基磺酸二取代的苯并噻吩酯(ll)的制備按照用于單取代的化合物的方法，但用如下化合物代替2-環己基-苯并噢吩-6-醇-2-環庚基-3-曱基-苯并噻吩-6-醇-2-環庚基-3-丁基-苯并噻吩-6-醇-1，2，3，4-四氫-二苯并噻吩-7-醇，分別得到如下化合物實施例62:氨基磺酸，2-環庚基-3-曱基-笨并噻吩-6-基酯熔點107。C'H-NMR(DMSOd6):1.40-2.20(m,12H)，2.46(s,3H),3.14(m，1H)，7.20(s,1H),7.30(dd，1H),7.60(d，1H),8.00(s,2H，麗2)。實施例63:氨基磺酸,2-環庚基-3-丁基-苯并噻吩-6-基酯透明油'H-麗R(DMSOd6):0.91(t，3H)，1.15-2.20(m，16H)，2.77(t，2H)，3.11(m:1H),7.15(s，1H)，7.32(d，1H)，7.59(d，1H),8.04(s，2H,麗2)。二氧化二取代的化合物(12)的制備按照用于單取代的化合物的方法，但用如下化合物代替氨基磺酸，2-環庚基-苯并噻吩-6-醇酯-氨基磺酸，2-環庚基-3-曱基-苯并噻吩-6-醇酯-氨基磺酸，2-環庚基-3-丁基-苯并噻吩-6-醇酯畫氨基磺酸，1,2，3，4陽四氫-二苯并噻吩-7-醇酯，分別得到如下化合物實施例65:氨基磺酸,2-環庚基-3-甲基-苯并落吩-6-基酯-l，l-二氧化物炫點90°C'H-畫R(DMSOd6):1.30-2.20(m，12H),2.48(s，3H)，2.76(m,1H),7.28(s，1H)，7.41(d,1H),7.52(d，1H)，8.27(s,2H,NH2)。實施例66:氨基磺酸，2-環庚基-3-丁基-苯并遂吩-6-基酯-l,l-二氧化物透明油'H-NMR(DMSOd6):0.91(t,3H),1.15-2.15(m，畫)，2.75(m,1H)，2.90(t2H),7.25(s，1H),7.40(d，1H)，7.56(d,1H)，8.31(s,2H，NH2)。生物學試驗結果類固醇硫酸酯酶的體外抑制硫酸雌酮(E,S)是主要的循環血漿雌激素，它由類固醇硫酸酯酶轉化為雌酮(E,),它隨后通過酶促還原轉化為雌二醇(E2)。類固醇辟u酸酯酶活性存在于大多數組織(子宮、肝、乳房等)中，在惡性時明顯高于正常乳腺組織。雌激素與促進乳腺癌生長和發展的緊密關系長期被人們認識，因此，類固醇硫酸酯酶似乎是就地抑制雌激素形成的潛在靶。已合成了含有被認為涉及類固醇k酸酯酶的不可逆抑制的氨基磺酸酯部分的該酶的有效抑制劑。至今，最具活性的化合物是EMATE，雌酮-3-氨基磺酸酯，但它的雌激素活性使得該化合物不適合用于治療激素依賴性腫瘤。已報導了許多結構變化的類固醇硫酸酯酶抑制劑，其中6,6,7-COUMATE顯示為標準非類固醇抑制劑，其缺乏雌激素性質。體外結果使用兩種全細胞的體外模型。由人胎盤絨毛膜癌得到的JEG-3細胞系自然非常富集人體雌酮硫酸酯酶，因此，是有用的實際生物學體系以在96孔微滴板格式篩選大量化合物和評價推定的體外類固醇硫酸酯酶抑制劑。盡管在類固醇硫酸酯酶活性中含量較低，但MCF-7細胞構成另一種合適模型以測試對人體乳腺癌細胞的類固醇^e克酸酯酶抑制劑。而且，這些細胞用于激素依賴誘導的異種移植物的體內模型。雌酮辟u酸酯酶細胞試-驗全細胞試驗如Duncan等(CancerRes.，1993，53:298-303)最初描述的用完整MCF-7細胞單層進行。試驗在96-孔(JEG-3)或24-孔(MCF-7)微滴板上用對數生長期的細胞進行。在研究前24小時(JEG-3)或72小時(MCF-7)，細胞在去補體的補加胎牛血清(dFCS)培養基中接種。隨后除去接種培養基，細胞用PBS漂洗以除去任何痕量的dFCS。然后，加入SH-E,S，接著加入10-12M-l(y5M的試驗化合物。處理4h(JEG-3)或20h(MCF-7)后，培養基轉移到96-深孔微滴板(JEG-3)或塑料管(MCF-7)中，在甲苯萃取前以200xg離心10分鐘以使細胞沉淀。培養基部分用于曱苯萃取以分離共軛的底物和未共軛的產物，在曱苯相中的放射性用液體閃爍計數(LSC)測量。最后，雌酮硫酸酯酶活性用每4或20小時每pgDNA形成的pmole的SH-E,+SH-E2和以沒有抑制劑的對照活性的百分數表示的雌酮硫酸酯酶抑制作用表示。用％抑制作用對抑制劑濃度的非線性擬合分析(GmphPadPrismSoftware)確定50%抑制濃度(ICso):最低ICso相應于最有效的抑制劑(表1)。表1:全細胞試驗中雌酮硫酸酯酶的抑制作用<table>tableseeoriginaldocumentpage29</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage30</column></row><table>在試—險化合物中，實施例42、實施例44、實施例48、實施例49、實施例50、實施例54和實施例55顯示在JEG-3細胞中人體雌酮硫酸酯酶活性的強抑制作用(IC5o約10nM)。在典型向子宮試驗中通過口服途徑向青春期前的雌性大鼠中給藥3天后檢測這些化合物的體內殘留雌激素活性。類固醇硫酸酯酶體內抑制作用體內殘留雌激素活性青春期前雌性大鼠以lmg/大鼠/天口服處理3天，在最后處理的當天，摘除子宮，記錄濕重。結果用與對照組比較的子宮重量刺激％表示。表2:殘留雌激素活性化合物%刺激動物數量<table>tableseeoriginaldocumentpage30</column></row><table>抗向子宮/抗硫酸酯酶活性改進由Purohit方法得到的短模型用于體內評價非雌激素類固醇硫酸酯酶抑制劑。將Wistar雌性大鼠卵巢切除，放置4周，在處理前，用陰道涂片檢測不存在周期性。將動物補加50pg/kg/天s.c的石克酸雌酮(E,S),單獨或與口服給藥1mg/kg/天有效硫酸酯酶抑制劑聯用，持續4天，摘除子宮，剝離相鄰組織，濕稱重。結果用E,S誘導刺激的抑制。/。表示。表3:抗向子宮活性<table>tableseeoriginaldocumentpage31</column></row><table>實施例55選擇用作類固醇硫酸酯酶活性的有效抑制劑，這是因為缺乏動情性和E,S刺激的子宮重量的明顯抑制。這些體內結果與在JEG-3和MCF-7全細胞試驗中得到的體外結果相當一致。實施例55的效力評l介評價實施例55對E,S刺激的子宮重量的活性與0.03mg/kg/天-lmg/kg/天p.o的標準抑制劑6,6,7COUMATE關系。在該研究中，最后的給藥在E,S和E2血清含量試驗的尸體解剖前24小時進行。摘除子宮，剝離相鄰組織，濕稱重，立即深度冷凍直至測定硫酸酯酶活性。E'S刺激的子宮重量的抑制作用表4劑量:mg/kg/天6i6，7-COUMATE實施例550.030%0%0.113%0%0.352%36%184%72%，在子宮內雌酮硫酸酯酶活性的測量雌酮硫酸酯酶活性根據Purohit等描述的方法，稍加改進測定。簡單地說，解凍子宮，稱重，均化。上清液等分樣品用右旋糖苷涂覆的活性炭處理，測試硫酸酯酶。在用5nM3H-E，S和20pM未標記的E,S作為基質培養30分鐘后評價E,S活性。放射性用LSC測量。雌酮石克酸酯酶活性用pmol/h/mg蛋白質表示，以對的抑制百分數表示。表5_<table>tableseeoriginaldocumentpage32</column></row><table>.血清雌激素含量E,S和E2含量根據供應商的標準方法測定(DSL，Webster,TX,USA)。表6:E,S含量(ng/ml)__<table>tableseeoriginaldocumentpage32</column></row><table>表7:E2含量(pg/ml)<table>tableseeoriginaldocumentpage33</column></row><table>激素依賴誘導的異種移植物將由人體乳腺腺癌得到的MCF-7細胞皮下注射到切除卵巢的無胸腺棵小鼠，其補充雌酮硫酸酯(顆粒0.5mg/90天釋放)。每周測量異種移植物體積一次，當腫瘤體積達到明顯增加時，以O.lmg/kg/天口服給藥6，6，7COUMATE和實施例55共6周。測量異種移植物，摘除，稱重，深度冷凍直至測量類固醇硫酸酯酶活性。表8:異種移纟直物體積(mm3)_治療治療6周后異種移植物體積對照組安慰劑__71土8,2_E,S顆粒(0.5mg/90天釋放)_1816±337_E,S+6，6，7-COUMATE0.1mg/kg/天1854±243_E!S+實施例55O.lmg/kg/天_1488±233_在以O.lmg/kg/天口服給藥6周后，6,6,7COUMATE不抑制E!S誘導的刺激。相反，在相同劑量水平下，實施例55得到18%抑制。表9:異種移植物重量(mg)_<table>tableseeoriginaldocumentpage33</column></row><table>6,6,7COUMATE不抑制異種移才直物重量，而用實施例55得到35%的抑制。表10:異種移植物類固醇硫酸酯酶活性(pmol/h/mg蛋白質)<table>tableseeoriginaldocumentpage34</column></row><table>用實施例55腫瘤內類固醇硫酸酯酶活性的抑制(84%)高于6，6，7COUMATE(67%)。權利要求1、式(Ia)或(Ib)的化合物其中-R1是H、(C1-C6)烷基、(C2-C6)烯基、(C3-C12)環烷基或(C3-C12)環烯基，其中環烷基和環烯基任選被(C1-C4)烷基單-或二取代；-R2是H；-R’2是(C1-C6)烷基或(C3-C12)環烷基；-R3是H、(C1-C6)烷氧基或鹵素；-m是0、1、2；-n是0、1、2；-當m是0時，R1和R2還可一起形成基團-(CH2)p-，其中p是3、4或5；-虛線表示氨基磺酸基團在苯并噻吩環的5-或6位。2、根據權利要求1的化合物，其中R,是氯、(d-C6)烷基或任選被(d-C4)烷基單-或二取代的(CVC,2)環烷基。3、根據權利要求2的化合物，其中R,是任選被(C,-C4)烷基單-或二取代的(Crdo)環烷基。4、根據權利要求l-3之一的化合物，其中m是O或l。5、根據權利要求l-3之一的化合物，其中R3是氫。6、根據權利要求1-3之一的化合物，其中n是0或2。7、根據權利要求l-3之一的化合物，其中氨基磺酸基團在苯并蓬吩環的6位。8、根據權利要求1的式(Ia)化合物，其中-R,是環己基；-R2是H;-R3是H;-n=m=0。9、根據權利要求1的式(Ia)化合物，其中-R,是環己基；隱R2是H;匪R3是H;-n=1;-m=0。10、根據權利要求1的式(Ia)化合物，其中-R,是環癸基；畫R2是H;-R3是H;-n=m=0。11、根據權利要求1的式(Ia)化合物，其中-R,是環癸基；-R2是H;-R3是H;-m=0，n=1。12、根據權利要求1的式(Ia)化合物，其中-R,是環己基；-R2是H;隱R3是H;-m=0，n=2。13、根據權利要求1的式(Ia)化合物，其中-R,是環庚基；畫R2是H;-R3是H;-n=m=0。14、根據權利要求1的式(Ia)化合物，其中-R,是環庚基；-R2是H;-R3是H;-m=0,n=2。15、根據權利要求1的式(Ia)化合物，其中-R,是環辛基；-R2是H;-R3是H;-n=m=0。16、根據權利要求1的式(Ia)化合物，其中-R,是環辛基；畫R2是H;-R3是H;-m=0,n=2。17、根據權利要求1的式(Ia)化合物，其中-R,是環癸基；-R2是H;-R3是H;-m=0,n=2。18、根據權利要求1的式(Ia)化合物，其中-R!是4-曱基環己基；-R2是H;畫R3是H;-n=0,m=0。19、根據權利要求1的式(Ia)化合物，其中-R!是4-曱基環己基；-R2是H;-R3是H;-m=0,n=2。20、根據權利要求1的式(Ia)化合物，其中-1^是2-曱基環己基；-R2是H;畫R3是H;-n=0,m=0。21、根據權利要求1的式(Ia)化合物，其中-R,是2-曱基環己基；-R2是H;陽R3是H;-n=2，m=0。22、根據權利要求1的式(Ia)化合物，其中-&是2,2-二曱基環戊基；-R2是H;UH;-n=0，m=0。23、根據權利要求1的式(Ia)化合物，其中-1^是2,2-二曱基環戊基；-R2是H;-R3是H;-n=2，m=0。24、根據權利要求1的式(Ia)化合物，其中-R,是2-金剛烷基；隱R2是H;-R3是H;-n=0，m=0。25、根據權矛j要求1的式(Ia)化合物，其中-R,是2-金剛烷基；-R2是H;-R3是H;-n=2，m=0。26、根據權利要求1的式(Ia)化合物，其中-R,是丙基；-R2是H;-Rs是H;-n=0,m=0。27、根據權利要求1的式(Ia)化合物，其中-R,是丙基;-R2是H;-R3是H;-n=2，m=0。28、根據權利要求1的式(Ia)化合物，其中-R,是己基；-R2是H;-R3是H;-n=0,m=0。29、根據權利要求1的式(Ia)化合物，其中-R,是己基；-Rz是H;-Rs是H;-n=2，m=0。30、根據權利要求1的式(Ia)化合物，其中-R,是環己基；-R2是H;-R3是H;腸n=0，m=1。31、根據權利要求1的式(Ia)化合物，其中-R,是環己基；-R2是H;'R3是H;-n=2，m=1。32、根據權利要求1的式(Ia)化合物，其中-Rj是環庚基；-R2是H;陽R3是H;-n=0,m=1。33、根據權利要求1的式(Ia)化合物，其中-R,是環庚基；-R2是H;畫R3是H;-n=2,m=1。34、根據權利要求1的式(Ib)化合物，其中-R,是環庚基；-R'2是曱基；-R3是H;-n=0，m=0。35、根據權利要求1的式(Ib)化合物，其中-R,是環庚基；-R'2是曱基；-R3是H;-n=2，m=0。36、根據權利要求1的式(Ib)化合物，其中-R,是環庚基；-R'2是丁基；隱R3是H;-n=0,m=0。37、根據權利要求1的式(Ib)化合物，其中-是環庚基；-R，2是丁基；-Rs是H;-n=2，m=0。38、根據權利要求1的式(Ib)化合物，其中是環戊基；-R'2是H;-R3是H;-n=0,m=0。全文摘要本發明涉及式(Ia)或(Ib)的氨基磺酸苯并噻吩酯化合物，其中R₁，R₂，R’₂，R₃，m和n如說明書中所定義。本發明還涉及含有這些化合物的藥物組合物和使用它們的方法。文檔編號C07D333/64GK101157683SQ200610139999公開日2008年4月9日申請日期2006年10月8日優先權日2006年10月8日發明者丹尼斯·卡尼亞托,埃里克·杜蘭蒂,杰奎琳·希爾茲,艾戈爾·達克,葆拉·邦尼特,蒂里·克拉克,讓·拉斐,貝努伊特·龍多特申請人:特拉梅克斯實驗室