專利名稱：一種蛋白質－核酸嵌合體及其制造方法和應用的制作方法
技術領域：
本發明是一種蛋白質-核酸嵌合體及其制造方法和應用，屬于蛋白質-核酸嵌合體及其制造方法和應用的創新技術。
背景技術：
蛋白質是生物體的重要功能分子。它們決定了細胞的形態，結構和各種功能。因此雖然蛋白質由基因編碼，但生物體的正常功能最終涉及到各種蛋白質之間的協調。研究蛋白質的表達，調控；不同的蛋白間的作用，及大量的不同的蛋白質組之間的作用就具有重大意義。蛋白質組學的研究有助于對生命的認識，及提供各類生物學的信息，用于診斷及醫藥開發。
目前為止，基因組學的研究已產生大量的基因序列。可是，目前對這些基因序列的生物學意義的理解相對于數據而言，是很少的。而且基因組學的研究成果是不能直接轉化為蛋白質學的數據，因為理論上只有60％的基因組學數據與蛋白質學的相符。因此有必要發明新的方法學用于蛋白質組學方面的研究及在醫學方面的應用。
目前已有若干蛋白質芯片的發明，全部應用各種不相同的點焊技術。如非特異的表面吸附；表面化學涂層，用共價聯接；這二種方法的主要缺點是蛋白質只能隨機地，多位點的和表面結合。結果是功能位點被覆沒。第三種方法是親和表面涂層。用Ni2+或avidin。而且這幾種方法都不能區別蛋白質的復合成分。并且這幾種方法都不成熟，且不易改進。主要問題是蛋白點焊技術尚不過關，且是否能過關值得懷疑。其原因在于各種蛋白結合到芯片上的能力各不相同，且大多蛋白易于降解；第二大問題是蛋白需在溫性環境下結合到芯片上，極不易運輸及保存。
發明內容
本發明的目的在于考慮上述問題而提供一種用途廣泛的蛋白質-核酸嵌合體。
本發明的另一目的在于提供一種簡單方便的蛋白質-核酸嵌合體及其制造方法。
本發明的另一目在于提供將蛋白質-核酸嵌合體制造方法應用于制造各種密度蛋白質芯片，或運用于制造可定向位置，基于DNA芯片或納米芯片的蛋白質，抗體芯片，還可用于制造有特異性細胞導向的antisense或siRNA藥物。
本發明蛋白質-核酸嵌合體，由蛋白部分(P)和核酸部分(N)及聯結倆者之間的蛋白質結合底物(SE)組成一個P-N-Block。
上述蛋白部分(P)含有興趣蛋白(Pi)，結合蛋白質(PE)，和多肽標記(Pt)。
上述核酸部分(N)含有DNA或帶標記物的DNA(No)及連鎖物(NL)。
本發明蛋白質-核酸嵌合體的制造方法，其特征在于包括有如下步驟1)把興趣蛋白(Pi)與結合蛋白質(PE)及多肽標記(Pt)通過分子生物學的方法嵌合形成蛋白部分；2)通過化學合成的方法把可分解或不可分解的連鎖物(NL)與帶或不帶標記的Oligonucleotide聯接形成核酸部分；3)通過生物化學的方法把蛋白質結合底物(SE)與核酸部分相聯；4)通過生物化學方法把蛋白部分與核酸部分相聯。
上述興趣蛋白(Pi)指生物界中所有的種類的蛋白質，結合蛋白質(PE)指生物界中所有種類的具有不可逆抑制底物的酶，或其它與蛋白質結合底物共價相聯的蛋白質，多肽標記(Pt)指生物界中所有的種類的可用于標記的多肽。
上述核酸是DNA或帶標記物的DNA(No)指化學合成的Oligo和單，雙鏈DNA片斷。
上述核酸指可轉錄為生物界中所有種類的蛋白質的基因序列，每一個核酸帶有各自的特異的基因序列。
上述連鎖物(NL)指帶有特異化學基團并合成到核酸上的分子。
上述制造蛋白質-核酸嵌合體多聚體的方法運用于制造各種密度蛋白質芯片，或運用于制造可定向位置，基于DNA芯片或納米芯片的蛋白質，抗體芯片，還可用于制造有特異性細胞導向的antisense或siRNA藥物。
上述各種密度蛋白質芯片指結合到載體上的帶標記的一個P-N-Block至多個P-N-Block形成的蛋白質芯片。
上述可定向位置，基于DNA芯片或納米芯片的蛋白質，抗體芯片指各個P-N-Block各自帶有特異的基因序列，可被DNA芯片或納米芯片上的互補的基因序列所識別。
上述蛋白質-核酸嵌合體多聚體可用于核酸藥物的傳輸。
上述制造蛋白質-核酸嵌合體方法還應用在提供監測蛋白質間相互作用的如下方法1)提供各自帶有特異的基因序列的P-N-Block2)提供監測帶有特異的基因序列的P-N-Block的方法。
本發明的蛋白質-核酸嵌合體用途廣泛。本發明蛋白質-核酸嵌合體的制造方法簡單方便。本發明蛋白質-核酸嵌合體制造方法可應用于制造各種密度蛋白質芯片，或運用于制造可定向位置，基于DNA芯片或納米芯片的蛋白質，抗體芯片，還可用于制造有特異性細胞導向的antisense或siRNA藥物。
圖1為本發明概述P-N-Block的組成，結構及其制造總過程的示意圖；圖2-A為本發明蛋白部分制造的示意圖；圖2-B為Pi-PE之間，可有多種組合的可能性，可表達形成整個基因組中所有的蛋白質的示意圖；圖3-A為本發明通過化學合成的方法把可分解或不可分解的連鎖物(NL)在CPG柱上合成的示意圖；圖3-B指可光解NL的示意圖；圖3-C圖解可酸解的NL的合成過程的示意圖；圖4-A為本發明結合蛋白質(PE)及其相對應的不可逆抑制底物及其衍生物(SE)的示意圖；圖4-B為本發明圖解核酸部分(NL-NO)與SE之間的生化反應，形成SE-NL-NO的示意圖；圖4-C為本發明圖解核酸部分(NL-NO)與GSH之間的生化反應，形成SE-NL-NO的示意圖；圖5-(a)為本發明Pi不變，NO為代表整個基因組的寡核苷酸(oligonucleotide)的P-N-Block的組合的示意圖；圖5-(b)為本發明NO不變，Pi代表整個基因組所編碼的蛋白質的示意圖；圖5-(c)為本發明NO和Pi之間的任意組合的示意圖；圖6-A為本發明制備SE的五個主要步驟的示意圖；圖6-B為本發明制備NL-NO的示意圖；圖6-C為本發明合成BCL2-AGT-BG/D1-NL-NO(x)的示意圖；圖7-A為本發明制造可酸解的一個P-N-Block的流程圖；圖7-B為本發明蛋白部分(PA-ACP)制備的示意圖；圖7-C為本發明可酸解的一個P-N-Block的合成的示意圖8-A為本發明比較MCF-7細胞中BCL2和BAX的蛋白量的示意圖；圖8-B為本發明比較雌激素對MCF-7細胞中BCL2和BAX的蛋白量的影響的示意圖；圖9為本發明制造可光解的一個非標記SE-NL-NO(GSH-(PC)NO)的流程圖；圖10為本發明利用cantilever的生物敏感器的反應的全過程的示意圖；圖11為本發明制造可酸解的ErbB-2的antisense oligonucleotides及對細胞的作用的示意圖。
具體實施例方式實施例本發明蛋白質-核酸嵌合體制造的總過程如圖1所示，由蛋白部分(P)和核酸部分(N)及聯結倆者之間的蛋白質結合底物(SE)組成一個P-N-Block。蛋白部分(P)含有興趣蛋白(Pi)，結合蛋白質(PE)，和多肽標記(Pt)。核酸部分(N)含有DNA或帶標記物的DNA(No)及連鎖物(NL)。
本發明制造每一個P-N-Block須要四個主要步驟1)須把興趣蛋白與結合蛋白質及多肽標記通過分子生物學的方法嵌合形成蛋白部分；2)通過化學合成的方法把可分解或不可分解的連鎖物(NL)與帶(或不帶)標記的Oligonucleotide聯接形成核酸部分；3)須通過生物化學的方法把蛋白質結合底物(SE)與核酸部分相聯；4)再通過生物化學方法把蛋白部分與核酸部分相聯。
本發明可用于制造基于DNA芯片或納米芯片的快速，水性蛋白質芯片包括抗體芯片。本發明還可用于制造有特異性細胞導向的antisense或siRNA藥物。
具體的表達為，在第一主要步驟中，須要通過分子生物學的克隆方法把興趣蛋白與結合蛋白質相嵌合形成蛋白部分。更具體的表達為將興趣蛋白與帶有TAG(Pt)，如HIS，FLAG多肽的結合蛋白相聯。形成蛋白部分，表達為興趣蛋白-結合蛋白分子-TAG(即為Pi-PE-Pt)。更具體的表達為圖2A，在選用合適的表達載體(expression vector)后，蛋白Pi，PE，Pt各部分可用分子生物學的方法通過PCR放大相聯或在相關的酶切位點各自插入相應Pi，PE和Pt，以得到Pi-PE-Pt表達載體(expression vectors for Pi-PE-Pt)。表達載體可為原核生物或真原核生物的表達載體。表達載體在導入細菌或動物細胞后，表達興趣蛋白-結合蛋白分子-TAG。更具體的表達如圖2B所示，Pi-PE之間，可有多種組合的可能性，跟據具體的需要可以得到多樣的蛋白部分。因此各種興趣蛋白可通過cDNA表達形成整體的生物體蛋白組。另一具體的表達，Pi可以是各種不同的其中蛋白；其中的興趣蛋白也可特指為抗體結合蛋白。更具體的表達指protein A，G，L及各類可以抗體結合的蛋白。PE指可與不可逆抑制底物結合的酶。同樣，本發明不限定只使用圖2B所示的幾種興趣蛋白(Pi)和結合蛋白質(PE)。可以是整個基因組中所有的蛋白質。本發明所指基因組，表達為人類基因組，鼠基因組及其它所有動，植物的基因組。
在第二主要步驟中，通過化學合成的方法把可分解或不可分解的連鎖物(NL)與帶(或不帶)標記的DNA聯接形成核酸部分(NL-NO)。具體的表達為DNA可以是單鏈DNA也可以是雙鏈DNA。更具體的表達為DNA可以是DNA長片段(fragment)也可以是通過化學合成的寡核苷酸(oligonucleotide)。再具體的表達如圖3。Oligo可在CPG柱上合成。另一具體的表達為，oligonucleotide是帶有一組特異DNA序列。更具體的表達為一DNA序列與其他的每一個DNA序列各不相同，所以各具特異的DNA序列。以代表特定生物體中的所有基因序列。更具體的表達為，各序列的長度為10-99個堿基對。在5’端可以被修飾，形成帶-NH2，-COOH，-SH，phosphate基團或帶acrylic acid基團的末端(圖3A)。另一具體的表達為，oligonucleotide可帶有標記。更具體的表達為，在3’端帶上帶有Cy5或Cy3或6-FAM標記。另一具體的表達為，連鎖物(NL)是一個化學linker，是可以通過化學或生物反應切斷的分子。更具體的表達為可光解(圖3B)，酸解的分子(圖3C)或fluoride-cleavable phosphoramidite。另一具體的表達為可光解或酸解之oligonucleotide的5’端可以為其它任何可和蛋白質結合底物(SE)，如酶的不可逆抑制底物相聯的基團，如-NH，-OH，-SH。
在第三主要步驟中須要通過生物化學方法把蛋白質結合底物(SE)聯接到核酸部分的連鎖物(NL)，形成蛋白質結合底物(SE)-NL-NO(圖4)。具體的表達為，蛋白質結合底物可以是酶的不可逆抑制底物(irreversible substrates)或者是底物的衍生物(derivatives of substrates)。例如圖4A，BG衍生物，GSH及衍生物，CO-A及衍生物，penicillin類衍生物。圖4-A中所示只為范例。本發明覆蓋所有的酶及其不可逆抑制底物。第三主要步驟中的生物化學反應具體的表達為圖4-B。更具體的表達為核酸部分的NH鍵通過與連鎖物(NL)(a)或(b)在pH6-7，更進一步在pH7.5的條件下，形成NL-NO。更進一步的表達，化學交聯體不只限定于(a)或(b)，更可以為帶長間隔(spacer)的化學交聯體。在pH＞7.5的條件下，更進一步的在pH8.2的條件下，中間物(M)與酶的不可逆抑制底物(SE)形成蛋白質結合底物(SE)-NL-NO。
在第四主要步驟中具體的表達為，須要通過生物化學方法把蛋白部分與核酸部分相聯形成一個P-N-Block。例如圖5所示。更具體的表達為圖5a，每一個P-N-Block帶有各自特異的DNA序列(帶有不同的OLIGO)，但具有相同的蛋白部分。例如，Pi為protein A，PE為GST；而NO則為全基因組的50mer的各種oligonucleotides。另一具體的表達為圖5b，每一個P-N-Block帶有各自特異的結合蛋白和蛋白質結合底物，但具有相同的DNA序列(帶有相同的oligonucleotides)。另一具體的表達為圖5c，每一個P-N-Block帶有各自特異的結合蛋白和蛋白質結合底物，而且NO帶有各自特異的DNA序列。NO和Pi之間可以形成任意或對應的組合。由此，每一個P-N-Block可以由一個基因及其編碼的蛋白質相對應。因此可得到全基因組編碼蛋白質的P-N-Block。
制造一個P-N-Block(AGT-BG/D1-)的總過程如圖6-A所示，通過5個主要步驟合成出SE(BG/D1)。如圖6-B所示，NO(x)(Oligonucleotide)的序列為CAAGTTCCTGGCCAACGTGAGCACCGTGCGACCTCCAAATATCGTTAAG。Oligonucleotide在合成時于5’修飾有Cy5基團，在3’修飾有-SH基團。在pH8.2的條件下，與NL(sulfo-SIAB)反應生成NL-NO。BG/D1在pH7的條件下與NL-NO(x)生成BG/D1-NL-NO(x)。
BCL2及AGT酶全長cDNA通過PCR放大，與6XHis和Enterokinase(E)識別序列接入pEZZ18載體。pEZZ18-6XHis-E-AGT轉入E。Coli-HB101進行蛋白質生產。
將被轉化的E。Coli HB101細胞溶解物加到Ni+2T柱上，使6XHis-E-PA-AGT蛋白質特異的結合到Ni+2T柱上。
如圖6-C所示，BG/D1-NL-NO(x)在酸堿平衡，緩沖液置換后，加到Ni+2T柱上與柱中的6XHis-E-PA-AGT結合。形成6XHis-E-PA-AGT-BG/D1-NL-NO(x)。加入Enterokinase進行洗脫，獲得BCL2-AGT-BG/D1-NL-NO(x)，并進行HPLC純化。
圖7表達基于DNA芯片的蛋白質，抗體芯片的制備。通過4個主要步驟(a-d)，可合成出CoA-oligonucleotides(SE-NL-NO，圖7-A)。oligonucleotide帶3’-phosphate基團，5’-Cy5/Cy3。Oligo(1)，的序列為TTATTAGCCAGAAGTCAGATGCTCAAGGGGCTTCATGATGTCCCCATAAT。
如圖7-B所示，ACP酶全長cDNA通過PCR放大，與6XHis和Enterokinase識別序列接入pEZZ18載體。pEZZ18-6XHis-E-ACP轉入E。Coli-HB101進行蛋白質生產。
將被轉化的E。Coli HB101細胞溶解物加到Ni+2T柱上，使6XHis-E-PA-ACP蛋白質特異的結合到Ni+2T柱上。
CoA-NL-NO(1)在酸堿平衡，緩沖液置換后，加到Ni+2T柱上與柱中的6XHis-E-PA-ACP結合。形成6XHis-E-PA-ACP-CoA-NL-NO(1)(圖7C)。
此時加入可以與PA結合的抗BCL2單克隆抗體，就形成6XHIS-E-(抗BCL2抗體)PA-ACP-CoA-NL-NO(1)。此時，加入Enterokinase進行洗脫，獲得(抗BCL2抗體)PA-ACP-CoA-NL-NO(1)，并進行HPLC純化。
同樣，通過a-d步驟，帶3’-phosphate基團，5’-Cy5/Cy3的Oligo(2)序列CAAGTTCCTGGCCAACGTGAGCACCGTGCGACCTCCAAATATCGTTAAG(NL-NO)與蛋白部分合成(抗BAX抗體)PA-ACP-CoA-NL-NO(2)。
因此，(抗BCL2抗體)-PA-ACP-CoA-NL-NO(1)和(抗BAX抗體)-PA-ACP-CoA-NL-NO(2)分別含有5’-Cy3或Cy5。即(抗BCL2抗體)-PA-ACP-CoA-NL-NO(1)(Cy5)，(抗BCL2抗體)-PA-ACP-CoA-NL-NO(1)(Cy3)和(抗BAX抗體)-PA-ACP-CoA-NL-NO(2)(Cy5)，(抗BAX抗體)-PA-ACP-CoA-NL-NO(2)(Cy3)兩對(圖8)。
如圖8所示，比較MCF7細胞中BCL2和BAX的蛋白量。MCF7細胞經過48小時無血清37度培養。一等量MCF7細胞繼續培養10小時，另一等量MCF7細胞，加入10-7nM雌激素(E2)同樣培養10小時后。兩部分細胞分別收取。提取蛋白質。測定蛋白量后。分別固定兩部分細胞的等蛋白質量到PVDF膜上。一等量蛋白質加入(抗BCL2抗體)PA-ACP-CoA-NL-NO(1)(Cy5)和(抗BAX抗體)-PA-ACP-CoA-NL-NO(2)(Cy5)。另一等量蛋白質加入(抗BCL2抗體)PA-ACP-CoA-NL-NO(1)(Cy3)和(抗BAX抗體)-PA-ACP-CoA-NL-NO(2)(Cy3)，做為對照。在用緩沖液洗去沒有結合的抗體后，用pH4。5緩沖液裂解。收取NO(1)(Cy5)，NO(2)(Cy5)和NO(2)(Cy3)，NO(2)(Cy3)。將兩者混合。雜交到DNA芯片上。用芯片掃描儀測定螢光強度。因此，利用DNA芯片上的DNA互補鏈可測定各種蛋白質的表達。
圖9表達基于cantilever芯片的生物敏感器的制備。在oligonucleotide合成時，5’端合成出可光解的oligonucleotide((PC)NO)，其序列為TTATTAGCCAGAAGTCAGATGCTCAAGGGGCTTCATGATGTCCCCATAAT。通過2個主要步驟，可合成出GSH-oligonucleotides(GSH-(PC)NO)。
如圖10所示，GST酶全長cDNA通過PCR放大，與6XHis和Enterokinase識別序列接入pEZZ18載體。pEZZ18-6XHis-E-GST轉入E。Coli-HB101進行蛋白質生產。
將被轉化的E。Coli HB101細胞溶解物加到Ni+2T柱上，使6XHis-E-PA-GST蛋白質特異的結合到Ni+2T柱上。
GSH-(PC)NO在酸堿平衡，緩沖液置換后，加到Ni+2T柱上與柱中的6XHis-E-PA-GST結合。形成6XHis-E-PA-GST-GSH-(PC)NO。加入抗BCL2單克隆抗體(Y)，就形成6XHIS-E-(抗BCL2抗體)PA-GST-GSH-(PC)NO。此時，加入Enterokinase進行洗脫，獲得(抗BCL2抗體)PA-GST-GSH-GSH-(PC)NO，并進行HPLC純化。
如圖10所示，測定MCF7細胞中的BCL2。固定50微克從MCF7細胞提取的蛋白質到PVDF膜上。加入(抗BCL2抗體)PA-GST-GSH-(PC)NO。用緩沖液洗去沒有結合的抗體，用360nm紫外線裂解。收取NO后，雜交到帶有互補序列的cantilever上。測定cantilever彎曲。另外surface plasmon resonace(SPR)可替代cantilever進性蛋白質測定。
核酸藥物的傳輸如圖11所示，先合成可酸解的ErbB-2的antisenseoligonucleotide(或dsRNA的可酸解其中之一條鏈。dsRNA的互補鏈則在合成后加入，退火，雜交形成雙鏈dsRNA)。為了監測導入細胞的效率，合成時在5’端加上Cy5。
ACP酶全長cDNA通過PCR放大，接入pcDNA3。HisB載體。
pcDNA3-His-(apo)ACP-EGF轉入HEK293細胞中進行無血清培養。細胞溶解物加到Ni+2T柱上，使6XHis-(apo)ACP-EGF蛋白質特異的結合到Ni+2T柱上進行蛋白質純化。可酸解Oligo在堿平衡，緩沖液置換后，加到Ni+2T柱上與柱中的6XHis-(apo)ACP-EGF進行結合。形成Oligo-6XHis-(apo)ACP-EGF。經洗脫可得到Oligo-(apo)ACP-EGF。
Oligo-(apo)ACP-EGF可加入有表達ErbB-2的細胞(如MCF-7乳腺癌細胞)。經過EGF/ErbB-2相互作用，Oligo-(apo)ACP-EGF可導入細胞。經細胞內酸解。Oligo被釋放到細胞內，起藥物作用。測定熒光及抑制細胞生長的功效。
通過把EGF替換成其他興趣蛋白(如transferrin)可獲得各種有效的嵌合體。經受體調控的內吞作用(Receptor-mediated endocytosis)以完成細胞受體特異的DNA藥物傳輸。
權利要求
1.一種蛋白質-核酸嵌合體，其特征在于由蛋白部分(P)和核酸部分(N)及聯結倆者之間的蛋白質結合底物(SE)組成一個P-N-Block。
2.根據權利要求1所述的蛋白質-核酸嵌合體，其特征在于上述蛋白部分(P)含有興趣蛋白(Pi)，結合蛋白質(PE)，和多肽標記(Pt)。
3.根據權利要求1所述的蛋白質-核酸嵌合體，其特征在于上述核酸部分(N)含有DNA或帶標記物的DNA(No)及連鎖物(NL)。
4.根據權利要求1所述蛋白質-核酸嵌合體的制造方法，其特征在于包括有如下步驟1)把興趣蛋白(Pi)與結合蛋白質(PE)及多肽標記(Pt)通過分子生物學的方法嵌合形成蛋白部分；2)通過化學合成的方法把可分解或不可分解的連鎖物(NL)與帶或不帶標記的Oligonucleotide聯接形成核酸部分；3)通過生物化學的方法把蛋白質結合底物(SE)與核酸部分相聯；4)通過生物化學方法把蛋白部分與核酸部分相聯。
5.根據權利要求4所述的制造蛋白質-核酸嵌合體的方法，其特征在于上述興趣蛋白(Pi)指生物界中所有的種類的蛋白質，結合蛋白質(PE)指生物界中所有種類的具有不可逆抑制底物的酶，或其它與蛋白質結合底物共價相聯的蛋白質，多肽標記(Pt)指生物界中所有的種類的可用于標記的多肽。
6.根據權利要求4所述的制造蛋白質-核酸嵌合體的方法，其特征在于上述核酸是DNA或帶標記物的DNA(No)指化學合成的Oligo和單，雙鏈DNA片斷。
7.根據權利要求4所述的制造蛋白質-核酸嵌合體的方法，其特征在于上述核酸指可轉錄為生物界中所有種類的蛋白質的基因序列，每一個核酸帶有各自的特異的基因序列。
8.根據權利要求4所述的制造蛋白質-核酸嵌合體的方法，其特征在于上述連鎖物(NL)指帶有特異化學基團并合成到核酸上的分子。
9.根據權利要求4所述制造蛋白質-核酸嵌合體方法的應用，其特征在于上述制造蛋白質-核酸嵌合體多聚體的方法運用于制造各種密度蛋白質芯片，或運用于制造可定向位置，基于DNA芯片或納米芯片的蛋白質，抗體芯片，還可用于制造有特異性細胞導向的antisense或siRNA藥物。
10.根據權利要求9所述制造蛋白質-核酸嵌合體方法的應用，其特征在于上述各種密度蛋白質芯片指結合到載體上的帶標記的一個P-N-Block至多個P-N-Block形成的蛋白質芯片。
11.根據權利要求9所述制造蛋白質-核酸嵌合體方法的應用，其特征在于上述可定向位置，基于DNA芯片或納米芯片的蛋白質，抗體芯片指各個P-N-Block各自帶有特異的基因序列，可被DNA芯片或納米芯片上的互補的基因序列所識別。
12.根據權利要求4所述制造蛋白質-核酸嵌合體方法的應用，其特征在于上述蛋白質-核酸嵌合體多聚體可用于核酸藥物的傳輸。
13.根據權利要求4所述制造蛋白質-核酸嵌合體方法的應用，其特征在于上述制造蛋白質-核酸嵌合體方法還應用在提供監測蛋白質間相互作用的如下方法1)提供各自帶有特異的基因序列的P-N-Block2)提供監測帶有特異的基因序列的P-N-Block的方法。
全文摘要
本發明是一種蛋白質－核酸嵌合體及其制造方法和應用。本發明蛋白質－核酸嵌合體，由蛋白部分(P)和核酸部分(N)及聯結倆者之間的蛋白質結合底物(S
文檔編號C07H21/00GK101074439SQ20061012429
公開日2007年11月21日 申請日期2006年12月19日 優先權日2006年12月19日
發明者張宏, 周巖 申請人:張宏, 周巖