專利名稱：與抑制巨噬細胞游走抑制因子有關的化合物、組合物、其制備方法和使用方法
技術領域：
本發明涉及異唑啉和有關的化合物，用于它們的制備的中間體和方法，含有它們的組合物和它們的應用。更具體地，本發明涉及含有主題化合物的藥物組合物和主題化合物和組合物的醫藥應用。甚至更具體地，本發明適用于預防和治療人類的各種狀況。
本發明的一個方面提供了一類異唑啉和異唑啉-有關的化合物，藥物組合物和有關的制備方法和它們在治療和診斷中的應用。該化合物具有巨噬細胞游走抑制因子(MIF)拮抗劑活性，和與MIF活性影響的其它細胞因子有關的活性。該化合物能起MI F的抑制劑的作用，且也能調控由MIF活性影響的其它細胞因子，包括IL-1，IL-2，IL-6，IL-8，IFN-γ和TNF。該化合物和組合物可以用于治療人或其它哺乳動物中的眾多疾病，包括任意疾病狀態，其由這樣的哺乳動物細胞(例如，但不限于，單核細胞和/或巨噬細胞)過量或失調產生MIF，IL-1，IL-2，IL-6，IL-8，IFN-γ和TNF加重或造成，或能通過抑制ERK/MAP途徑進行調控的任何疾病狀態。
在下面的化學式中，使用取代基的上標，標示取代基名稱(例如，″R2″用于指R2-命名的取代基)，并使用下標來列舉取代基在該分子位置出現的次數(例如，“R2”或“(R)2”都用于指2個簡稱作″R″的取代基)。
本發明涉及通式I或II的化合物
和
其中B是氧或硫，且每個″R″獨立地定義為 R＝H，R1，或III
條件是，每個″R″在式I或II中不能僅僅作為氫出現(即，式I或II上的至少一個R是除氫以外的″R″取代基)，且任何B獨立地是氧或硫；任何R1獨立地是氫，(C1-C6)烷基或一些其它的合適的取代基，任何R2是胺，烷氧基或一些其它的合適的取代基；且″m″獨立地是0或1-20的整數； 每個X獨立地是碳或氮；且當任何X是碳時，Y是對每個X獨立地定義為以下的取代基 Y＝H，R1，或IV
每個Z獨立地是氫，羥基，鹵素或一些其它的合適的取代基；且 ″n″獨立地是0或1-4的整數； 和其藥學上可接受的鹽和前藥。
在一個實施方案中，對于具有上面和下面的式I和II的化合物，當環″X″是氮而非碳時，該X氮不攜帶Y。例如，在該實施方案，Y基團的數目可以對應著X碳的數目，即，1，2，3或4的數目。
在一個實施方案中，本發明排除了在通式I內且具有落入式IA的化學結構的化合物
其中 每個Y1獨立地是氫或(C1-C6)烷基； 每個Y2獨立地是Y1，羥基，鹵素，-N3，-CN，-SH或-N(Y1)2； Resa獨立地是Y1，鹵素，-N3，-CN，-OY1，-N(Y1)2，-SH，＝O，＝CH2或A，且每個A獨立地是被一個或多個獨立的Y2取代基取代的苯基或芳香環；Resb定義如下 Resb＝
Y3獨立地是Y1，A，-(CH2)-A，-N(Y1)2或-NY1Y5，每個Y5是飽和的或不飽和的、直鏈的或支鏈的(C2-C18)烷基；且 Y4獨立地是Y1，-OY1，-OY5，-N(Y1)2，-NY1Y5或A。
本發明也涉及通式I或II的化合物的藥學上可接受的酸加成鹽。
堿性的式I或II的化合物能與各種無機和有機酸形成廣泛種類的不同的鹽。盡管為了給動物施用，這樣的鹽必須是藥學上可接受的，在實踐中經常需要初步從反應混合物中分離式I或II的化合物，作為藥學上不可接受的鹽，然后通過用堿性試劑處理，簡單地將后者轉化回游離堿化合物，并隨后將游離堿轉化成藥學上可接受的酸加成鹽。通過在水性溶劑介質或合適的有機溶劑例如甲醇或乙醇中，用基本上當量的選擇的無機或有機酸處理堿性化合物，能容易地制備本發明的堿性化合物的酸加成鹽。經過小心地蒸發溶劑，可以得到需要的固體鹽。用于制備前述的本發明的堿性化合物的藥學上可接受的酸加成鹽的酸，包括能形成無毒的酸加成鹽的那些，即含有藥理學上可接受的陰離子的鹽，例如氯化物，溴化物，碘化物，硝酸鹽，硫酸鹽，酸式硫酸鹽，磷酸鹽，酸式磷酸鹽，乙酸鹽，乳酸鹽，檸檬酸鹽，酸式檸檬酸鹽，酒石酸鹽，酸式酒石酸鹽，琥珀酸鹽，馬來酸鹽，延胡索酸鹽，谷氨酸鹽，L-乳酸鹽，L-酒石酸鹽，甲苯磺酸鹽，甲磺酸鹽，葡糖酸鹽，蔗糖鹽，苯甲酸鹽，甲磺酸鹽，乙磺酸鹽，苯磺酸鹽，對甲苯磺酸鹽和巴莫酸鹽(即，1，1′-亞甲基-二-(2-羥基-3-萘甲酸鹽))。
本發明也涉及該化合物的堿加成鹽。可以用作制備那些酸性的通式I或II的化合物的藥學上可接受的堿鹽的試劑的化學堿，是能與這樣的化合物形成無毒的堿鹽的那些。那些酸性的通式I或II的化合物，例如，當取代基R，R1，R2或R3包括-COOH或四唑基團時，能與各種藥理學上可接受的陽離子形成堿鹽。這樣的鹽的實例包括堿金屬或堿土金屬鹽，尤其是鈉和鉀鹽。這些鹽都通過常規方法制備。用作制備本發明的藥學上可接受的堿鹽的試劑的化學堿包括，能與本文所述的酸性的式I或II化合物形成無毒的堿鹽的那些。通過用含有需要的藥理學上可接受的陽離子的水性溶液處理對應的酸性化合物，然后蒸發得到的溶液至干燥，優選地在減壓下，可以容易地制備這些鹽。或者，通過將酸性化合物和需要的堿金屬醇鹽的低級烷醇溶液混合到一起，然后以前述的相同方式，將得到的溶液蒸發至干，也可以制備它們。在任一種情況下，優選地使用化學計量量的試劑，以確保反應完全和最大的產率。這樣的無毒的堿鹽包括但不限于源自這樣的藥理學上可接受的陽離子的那些，例如堿金屬陽離子(例如，鉀和鈉)和堿土金屬陽離子(例如，鈣和鎂)，銨或水溶性的胺加成鹽例如N-甲基葡萄糖胺-(葡甲胺)和低級烷醇銨和藥學上可接受的有機胺的其它堿鹽。
本發明的化合物和前藥可以以幾種互變異構形式、幾何異構體和其混合物存在。所有這樣的互變異構形式都包括在本發明的范圍內。互變異構體作為互變異構體的混合物存在于溶液中。在固體形式，通常一種互變異構體占優勢。即使僅僅描述一種互變異構體，本發明包括本發明的化合物的所有互變異構體。
本發明也包括本發明的阻轉異構體。阻轉異構體指可以分離成旋轉受限制的異構體的本發明的化合物。本發明的化合物可以含有烯烴樣雙鍵。當存在這樣的鍵時，本發明的化合物作為順式和反式構型和其混合物存在。
本發明也包括同位素標記的化合物，其與通式I或II中所述的那些相同，不同之處在于，一個或多個原子被具有與通常天然發現的原子質量或質量數不同的原子質量或質量數的原子替代，可以摻入本發明的化合物中的同位素的實例，包括氫，碳，氮，氧，磷，氟和氯各自的同位素，例如2H，3H，13C，14C，15N，18O，17O，31P，32P，35S，18F和36Cl。含有前述同位素和/或其它原子的其它同位素的本發明的化合物，其前藥和所述的化合物或所述前藥的藥學上可接受的鹽，在本發明的范圍內。本發明的某些同位素標記的化合物，例如其中摻入了放射性同位素例如3H和14C的那些，可以用于藥物和/或底物組織分布測定。氚標記的(即，3H)和碳-14(即，14C)同位素是特別優選的，因為它們容易制備和檢測。而且，用更重的同位素例如氘(即，2H)替換，可以提供由更大的代謝穩定性產生的某些治療優點，例如提高的體內半衰期或降低的劑量需要，因此，在有些環境下可能是優選的。通常，通過本文例如在實施例中公開的方法，通過用容易得到的同位素標記的試劑替換未同位素標記的試劑，可以制備同位素標記的本發明的式I或II化合物和其前藥。
″合適的取代基″意指化學上和藥學上可接受的官能團，即不消除本發明的化合物的抑制活性的基團。本領域的技術人員可以常規地選擇這樣的合適的取代基。合適的取代基的說明性的實例包括，但不限于，鹵素基團，全氟烷基，全氟烷氧基，烷基，環烷基，鏈烯基，炔基，羥基，氧代基團，巰基，烷硫基，烷氧基，芳基或雜芳基，芳氧基或雜芳氧基，芳烷基或雜芳烷基，芳烷氧基或雜芳烷氧基，HO-(C＝O)-基團，氨基，烷基-和二烷基氨基，氨基甲酰基，烷基羰基，烷氧基羰基，烷基氨基羰基、二烷基氨基羰基，芳基羰基，芳基氧羰基，烷基磺酰基，芳基磺酰基等。
更具體地，本發明也涉及具有通式I或II的化合物
和
其中B是氧或硫，且每個″R″獨立地定義 R＝H，R1，或III
條件是，每個″R″在式I或II中不能僅僅作為氫出現，且獨立地在每個″R″中，任何B是氧或硫；且″m″獨立地是0或1-20的整數；每個X獨立地是碳或氮；且當任何X是碳時，Y是如下為每個X獨立地定義的取代基 Y＝H，R1，或IV
每個Z獨立地是氫，羥基，氟，溴，碘，-N3，-CN，-SR3，-OR3，-N(R1)2，-R1或A，且 ″n″獨立地是0或1-4的整數； 每個R1獨立地選自氫，(C3-C20)環烷基，(C1-C20)烷氧基，(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環和(C3-C10)環烷基；(C1-C10)雜芳基-O-，(C1-C10)雜環-O-，(C3-C10)環烷基-O-，(C1-C6)烷基-S-，(C1-C6)烷基-SO2，(C1-C6)烷基-NH-SO2-，NO2，氨基，(C1-C6)烷基-氨基，[(C1-C6)烷基]2-氨基，(C1-C6)烷基-SO2-NH-，(C1-C6)烷基-(C＝O)-NH-，(C1-C6)烷基-(C＝O)-[((C1-C6)烷基)-N]-，苯基-(C＝O)-NH-，苯基-(C＝O)-[((C1-C6)烷基)-N]-，-CN，(C1-C6)烷基-(C＝O)-，苯基-(C＝O)-，(C1-C10)雜芳基-(C＝O)-，(C1-C10)雜環-(C＝O)-，(C3-C10)環烷基-(C＝O)-，HO-(C＝O)-，(C1-C6)烷基-O-(C＝O)-，H2N(C＝O)-(C1-C6)烷基-NH-(C＝O)-，[(C1-C6)烷基]2-N-(C＝O)-，苯基-NH-(C＝O)-，苯基-[((C1-C6)烷基)-N]-(C＝O)-，(C1-C10)雜芳基-NH-(C＝O)-，(C1-C10)雜環-NH-(C＝O)-，(C3-C10)環烷基-NH-(C＝O)-，(C1-C6)烷基-(C＝O)-O-和苯基-(C＝O)-O-，其中前述的(C3-C20)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環和(C3-C20)環烷基取代基中的每一個，可以任選地被1-4個獨立地選自下述的基團取代鹵素，(C1-C6)烷基，(C2-C6)鏈烯基，(C2-C6)炔基，全鹵代(C1-C6)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環，(C3-C10)環烷基，羥基，(C1-C6)烷氧基，全鹵代(C1-C6)烷氧基，苯氧基，(C1-C10)雜芳基-O-，(C1-C10)雜環-O-，(C3-C10)環烷基-O-，(C1-C6)烷基-S-，(C1-C6)烷基-SO2-，(C1-C6)烷基-NH-SO2-，-NO2，氨基，(C1-C6)烷基-氨基，[(C1-C6)烷基]2-氨基，(C1-C6)烷基-SO2-NH-，(C1-C6)烷基-(C＝O)-NH-，(C1-C6)烷基-(C＝O)-[((C1-C6)烷基)-N]-，苯基-(C＝O)-NH-，苯基-(C＝O)-[((C1-C6)烷基)-N]-，-CN，(C1-C6)烷基-(C＝O)-，苯基-(C＝O)-，(C1-C10)雜芳基-(C＝O)-，(C1-C10)雜環-(C＝O)-，(C3-C10)環烷基-(C＝O)-，HO-(C＝O)-，(C1-C6)烷基-O-(C＝O)-，H2N(C＝O)-(C1-C6)烷基-NH-(C＝O)-，[(C1-C6)烷基]2-N-(C＝O)-，苯基-NH-(C＝O)-，苯基-[((C1-C6)烷基)-N]-(C＝O)-，(C1-C10)雜芳基-NH-(C＝O)-，(C1-C10)雜環-NH-(C＝O)-，(C3-C10)環烷基-NH-(C＝O)-，(C1-C6)烷基-(C＝O)-O-和苯基-(C＝O)-O-；其中2個獨立地選擇的含有烷基的R1基團，可以與它們所結合的任何氮原子一起，形成3-40元環狀雜環或雜芳環； 每個R2獨立地選自氫，羥基，鹵素，-N3，-CN，-SH，(R1)2-N-，(R3)-O-，(R3)-S-，(C1-C6)烷基，(C2-C6)鏈烯基，(C2-C6)炔基，(C3-C10)環烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基和(C1-C10)雜環；其中前述的(C1-C6)烷基，(C3-C10)環烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基和(C1-C10)雜環取代基中的每一個，可以任選地被1-4個獨立地選自下述的基團取代鹵素，(C1-C6)烷基，(C2-C6)鏈烯基，(C2-C6)炔基，全鹵代(C1-C6)烷基，苯基，(C3-C10)環烷基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環，甲酰基，-CN，(C1-C6)烷基-(C＝O)-，苯基-(C＝O)-，HO-(C＝O)-，(C1-C6)烷基-O-(C＝O)-，(C1-C6)烷基-NH-(C＝O)-，[(C1-C6)烷基]2-N-(C＝O)-，苯基-NH-(C＝O)-，苯基-[((C1-C6)烷基)-N]-(C＝O)-，-NO2，氨基，(C1-C6)烷基氨基，[(C1-C6)烷基]2-氨基，(C1-C6)烷基-(C＝O)-NH-，(C1-C6)烷基-(C＝O)-[((C1-C6)烷基)-N]-，苯基-(C＝O)-NH-，苯基-(C＝O)-[((C1-C6)烷基)-N]-，H2N-(C＝O)-NH-，(C1-C6)烷基-HN-(C＝O)-NH-，[(C1-C6)烷基-]2N-(C＝O)-NH-，(C1-C6)烷基-HN-(C＝O)-[((C1-C6)烷基)-N]-，[(C1-C6)烷基-]2N-(C＝O)-[((C1-C6)烷基)-N]-，苯基-HN-(C＝O)-NH-，(苯基-)2N(C＝O)-NH-，苯基-HN-(C＝O)-[((C1-C6)烷基)-N]-，(苯基-)2N-(C＝O)-[((C1-C6)烷基)-N]-，(C1-C6)烷基-O-(C＝O)-NH-，(C1-C6)烷基-O-(C＝O)-[((C1-C6)烷基)-N]-，苯基-O-(C＝O)-NH-，苯基-O-(C＝O)-[((C1-C6)烷基)-N]-，(C1-C6)烷基-SO2NH-，苯基-SO2NH-，(C1-C6)烷基-SO2-，苯基-SO2-，羥基，(C1-C6)烷氧基，全鹵代(C1-C6)烷氧基，苯氧基，(C1-C6)烷基-(C＝O)-O-，苯基-(C＝O)-O-，H2N-(C＝O)-O-，(C1-C6)烷基-HN-(C＝O)-O-，[(C1-C6)烷基-]2N-(C＝O)-O-，苯基-HN-(C＝O)-O-，(苯基-)2N-(C＝O)-O-；其中當所述的R2苯基含有2個相鄰的取代基時，這樣的取代基可以任選地與它們所結合的碳原子一起，形成5-6元碳環或雜環；其中所述含有苯基可選物(alternative)的基團中的每一個，可以任選地被獨立地選自下述的1或2個基團取代(C1-C6)烷基，鹵素，(C1-C6)烷氧基，全鹵代(C1-C6)烷基和全鹵代(C1-C6)烷氧基； 每個R3獨立地選自氫，(C3-C20)環烷基，(C1-C20)烷氧基，(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環和(C3-C10)環烷基；其中前述的(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環和(C3-C20)環烷基取代基中的每一個，可以任選地被1-4個獨立地選自下述的基團取代鹵素，(C1-C6)烷基，(C2-C6)鏈烯基，(C2-C6)炔基，全鹵代(C1-C6)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環，(C3-C10)環烷基，羥基，(C1-C6)烷氧基，全鹵代(C1-C6)烷氧基，苯氧基，(C1-C10)雜芳基-O-，(C1-C10)雜環-O-，(C3-C10)環烷基-O-，(C1-C6)烷基-S-，(C1-C6)烷基-SO2-，(C1-C6)烷基-NH-SO2-，-NO2，氨基，(C1-C6)烷基-氨基，[(C1-C6)烷基]2-氨基，(C1-C6)烷基-SO2-NH-，(C1-C6)烷基-(C＝O)-NH-，(C1-C6)烷基-(C＝O)-[((C1-C6)烷基)-N]-，苯基-(C＝O)-NH-，苯基-(C＝O)-[((C1-C6)烷基)-N]-，-CN，(C1-C6)烷基-(C＝O)-，苯基-(C＝O)-，(C1-C10)雜芳基-(C＝O)-，(C1-C10)雜環-(C＝O)-，(C3-C10)環烷基-(C＝O)-，HO-(C＝O)-，(C1-C6)烷基-O-(C＝O)-，H2N(C＝O)-(C1-C6)烷基-NH-(C＝O)-，[(C1-C6)烷基]2-N-(C＝O)-，苯基-NH-(C＝O)-，苯基-[((C1-C6)烷基)-N]-(C＝O)-，(C1-C10)雜芳基-NH-(C-O)-，(C1-C10)雜環-NH-(C＝O)-，(C3-C10)環烷基-NH-(C＝O)-，(C1-C6)烷基-(C＝O)-O-和苯基-(C＝O)-O-； 或其藥學上可接受的鹽和前藥。
如本文使用的，術語″烷基，″以及在本文中提及的其它基團(例如，烷氧基)中的烷基部分，可以是直鏈的或支鏈的(例如甲基，乙基，正丙基，異丙基，正丁基，異丁基，仲丁基，叔丁基)，它們也可以是環狀的(例如，環丙基或環丁基)；任選地被1-3個如上定義的合適的取代基取代，例如氟，氯，三氟甲基，(C1-C6)烷氧基，(C6-C10)芳氧基，三氟甲氧基，二氟甲氧基或(C1-C6)烷基。如本文使用的短語″所述烷基中的每一個″指在基團如烷氧基、鏈烯基或烷基氨基內的任何在前烷基部分。優選的烷基包括(C1-C4)烷基，最優選甲基。
如本文使用的，術語″環烷基″指單環或雙環的碳環(例如，環丙基，環丁基，環戊基，環己基，環庚基，環辛基，環壬基，環戊烯基，環己烯基，雙環[2.2.1]庚烷基，雙環[3.2.1]辛烷基和雙環[5.2.0]壬烷基等)；其任選地含有1-2個雙鍵，且任選地被1-3個如上定義的合適的取代基取代，例如氟，氯，三氟甲基，(C1-C6)烷氧基，(C6-C10)芳氧基，三氟甲氧基，二氟甲氧基或(C1-C6)烷基。如本文使用的短語″所述烷基中的每一個″指在基團如烷氧基、鏈烯基或烷基氨基內的任何在前烷基部分。優選的環烷基包括環丁基，環戊基和環己基。
如本文使用的，術語″鹵素″或″鹵″包括氟，氯，溴或碘或氟化物，氯化物，溴化物或碘化物。
如本文使用的，術語″鹵素-取代的烷基″指被一個或多個鹵素取代的如上所述的烷基，包括，但不限于，氯甲基，二氯甲基，氟甲基，二氟甲基，三氟甲基，2，2，2-三氯乙基等；其任選地被1-3個如上定義的合適的取代基取代，例如氟，氯，三氟甲基，(C1-C6)烷氧基，(C6-C10)芳氧基，三氟甲氧基，二氟甲氧基或(C1-C6)烷基。
如本文使用的，術語″鏈烯基″指直鏈的或支鏈的2-6個碳原子的不飽和基團，包括，但不限于乙烯基，1-丙烯基，2-丙烯基(烯丙基)，異丙烯基，2-甲基-1-丙烯基，1-丁烯基，2-丁烯基等；其任選地被1-3個如上定義的合適的取代基取代，例如氟，氯，三氟甲基，(C1-C6)烷氧基，(C6-C10)芳氧基，三氟甲氧基，二氟甲氧基或(C1-C6)烷基。
如本文使用的，術語″(C2-C6)炔基″在本文中用于指直鏈的或支鏈的具有一個三鍵的烴鏈基團，包括，但不限于，乙炔基，丙炔基，丁炔基等；其任選地被1-3個如上定義的合適的取代基取代，例如氟，氯，三氟甲基，(C1-C6)烷氧基，(C6-C10)芳氧基，三氟甲氧基，二氟甲氧基或(C1-C6)烷基。
如本文使用的，術語″羰基″或″(C＝O)″(如在烷基羰基、烷基-(C＝O)-或烷氧基羰基等短語中使用的)指＞C＝O基團向第二個基團例如烷基或氨基的連接(即，酰氨基)。烷氧基羰基氨基(即，烷氧基(C＝O)-NH-)指烷基氨基甲酸酯基團。羰基在本文中也等同地定義為(C＝O)。烷基羰基氨基指諸如乙酰胺等基團。
如本文使用的，術語″苯基-[(C1-C6)烷基)-N]-(C＝O)-″指下式的二取代的酰胺基
如本文使用的，術語″芳基″指諸如苯基，萘基，四氫萘基，茚滿基等芳基；其任選地被1-3個如上定義的合適的取代基取代，例如氟，氯，三氟甲基，(C1-C6)烷氧基，(C6-C10)芳氧基，三氟甲氧基，二氟甲氧基或(C1-C6)烷基。
如本文使用的，術語″雜芳基″指在環中具有至少一個選自O、S和N的雜原子的芳香雜環。除了所述雜原子外，芳香基團可以任選地在環中具有至多4個N原子。例如，雜芳基包括吡啶基，吡嗪基，嘧啶基，噠嗪基，噻吩基，呋喃基，咪唑基，吡咯基，唑基(例如，1，3-唑基，1，2-唑基)，噻唑基(例如，1，2-噻唑基，1，3-噻唑基)，吡唑基，四唑基，三唑基(例如，1，2，3-三唑基，1，2，4-三唑基)，二唑基(例如，1，2，3-二唑基)，噻二唑基(例如，1，3，4-噻二唑基)，喹啉基，異喹啉基，苯并噻吩基，苯并呋喃基，吲哚基等；其任選地被1-3個如上定義的合適的取代基取代，例如氟，氯，三氟甲基，(C1-C6)烷氧基，(C6-C10)芳氧基，三氟甲氧基，二氟甲氧基或(C-C6)烷基。
如本文使用的術語″雜環″指含有1-9個碳原子和1-4個選自N，O，S或NR′的雜原子的環狀基團。這樣的環的實例包括氮雜環丁烷基，四氫呋喃基，咪唑烷基，吡咯烷基，哌啶基，哌嗪基，唑烷基，噻唑烷基，吡唑烷基，硫代嗎啉基，四氫噻嗪基，四氫噻二嗪基，嗎啉基，環氧丙烷基，四氫二嗪基，嗪基，噻嗪基，二氫吲哚基，異二氫吲哚基，奎寧環基，色滿基，異色滿基，苯并嗪基等。這樣的單環的飽和或部分飽和的環系統的實例是四氫呋喃-2-基，四氫呋喃-3-基，咪唑烷-1-基，咪唑烷-2-基，咪唑烷-4-基，吡咯烷-1-基，吡咯烷-2-基，吡咯烷-3-基，哌啶-1-基，哌啶-2-基，哌啶-3-基，哌嗪-1-基，哌嗪-2-基，哌嗪-3-基，1，3-唑烷-3-基，異噻唑烷，1，3-噻唑烷-3-基，1，2-吡唑烷-2-基，1，3-吡唑烷-1-基，硫代嗎啉基，1，2-四氫噻嗪-2-基，1，3-四氫噻嗪-3-基，四氫噻二嗪基，嗎啉基，1，2-四氫二嗪-2-基，1，3-四氫二嗪-1-基，1，4-嗪-2-基，1，2，5-噻嗪-4-基等；其任選地被1-3個如上定義的合適的取代基取代，例如氟，氯，三氟甲基，(C1-C6)烷氧基，(C6-C10)芳氧基，三氟甲氧基，二氟甲氧基或(C1-C6)烷基。
本發明的另一個實施方案包括具有在下面的2個通式之一內的化學結構的那些化合物
其中R和B如上面的通式I和II中所定義，例外是，在每個上面的化學結構式中的至少一個R含有2個下述的化學亞結構之一
或
且Ar是下面的8個化學亞結構之一
或Ar定義為下面的3個化學亞結構之一
或
其中每個X獨立地是碳或氮；且當任何X是碳時，Y是為每個X獨立地定義為以下的取代基 Y＝H，R1，或IV
每個Z獨立地是氫，羥基，氟，溴，碘，-N3，-CN，-SR3，-OR3，-N(R1)2，″n″獨立地是0或1-4的整數；且R1和R3如通式I或II中所定義。這里的一個優選的實施方案是，其中B是氧，和/或R和R1定義為獨立地選自氫，(C3-C20)環烷基，(C1-C20)烷氧基，(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環和(C3-C10)環烷基；其中前述的(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環和(C3-C20)環烷基取代基中的每一個可以任選地被1-4個獨立地選自下述的基團取代鹵素，(C1-C6)烷基，(C2-C6)鏈烯基，(C2-C6)炔基，全鹵代(C1-C6)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環，(C3-C10)環烷基，羥基，(C1-C6)烷氧基，全鹵代(C1-C6)烷氧基，苯氧基，(C1-C10)雜芳基-O-，(C1-C10)雜環-O-，(C3-C10)環烷基-O-，(C1-C6)烷基-S-；其中2個獨立地選擇的含有烷基的R1基團，可以與它們所結合的任何氮原子一起，形成3-40元的環狀雜環或雜芳環。更優選地，R和R1定義為獨立地選自氫，(C3-C20)環烷基，(C1-C20)烷氧基，(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環和(C3-C10)環烷基；其中前述的(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環和(C3-C20)環烷基取代基中的每一個可以任選地被1-4個獨立地選自下述的基團取代鹵素，(C1-C6)烷基，(C2-C6)鏈烯基，(C2-C6)炔基，全鹵代(C1-C6)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環，(C3-C10)環烷基，羥基和(C1-C6)烷氧基。甚至更優選地，R和R1定義為獨立地選自氫，(C3-C10)環烷基，(C1-C10)烷氧基，(C1-C10)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環和(C3-C10)環烷基。最優選地，R和R1定義為獨立地選自氫，(C3-C6)環烷基，(C1-C6)烷氧基和(C1-C6)烷基。
本發明的另一個實施方案包括具有在下面的2個通式之一內的化學結構的那些化合物
其中Ar，R，B和R1如上面的通式I和II中所定義。這里優選的實施方案是，其中B是氧，和/或R和R1定義為獨立地選自氫，(C3-C20)環烷基，(C1-C20)烷氧基，(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環和(C3-C10)環烷基；其中前述的(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環和(C3-C20)環烷基取代基中的每一個可以任選地被1-4個獨立地選自下述的基團取代鹵素，(C1-C6)烷基，(C2-C6)鏈烯基，(C2-C6)炔基，全鹵代(C1-C6)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環，(C3-C10)環烷基，羥基，(C1-C6)烷氧基，全鹵代(C1-C6)烷氧基，苯氧基，(C1-C10)雜芳基-O-，(C1-C10)雜環-O-，(C3-C10)環烷基-O-，(C1-C6)烷基-S-；其中2個獨立地選擇的含有烷基的R1基團，可以與它們所結合的任何氮原子一起，形成3-40元的環狀雜環或雜芳環。更優選地，R和R1定義為獨立地選自氫，(C3-C20)環烷基，(C1-C20)烷氧基，(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環和(C3-C10)環烷基；其中前述的(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環和(C3-C20)環烷基取代基中的每一個可以任選地被1-4個獨立地選自下述的基團取代鹵素，(C1-C6)烷基，(C2-C6)鏈烯基，(C2-C6)炔基，全鹵代(C1-C6)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環，(C3-C10)環烷基，羥基和(C1-C6)烷氧基。甚至更優選地，R和R1定義為獨立地選自氫，(C3-C10)環烷基，(C1-C10)烷氧基，(C1-C10)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環和(C3-C10)環烷基。最優選地，R和R1定義為獨立地選自氫，(C3-C6)環烷基，(C1-C6)烷氧基和(C1-C6)烷基。
本發明的另一個實施方案包括具有在下面的2個通式之一內的化學結構的那些化合物
其中R和B如上面的通式I和II中所定義，且Ar是下面的8個化學亞結構之一
或Ar定義為下面的3個化學亞結構之一
或
其中每個X獨立地是碳或氮；且當任何X是碳時，Y是為每個X獨立地定義如下的取代基 Y＝H，R1，或IV
每個Z獨立地是氫，羥基，氟，溴，碘，-N3，-CN，-SR3，-OR3，-N(R1)2，″n″獨立地是0或1-4的整數；且R1和R3如通式I或II中所定義。這里優選的實施方案是，其中B是氧，和/或R和R1定義為獨立地選自氫，(C3-C20)環烷基，(C1-C20)烷氧基，(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環和(C3-C10)環烷基；其中前述的(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環和(C3-C20)環烷基取代基中的每一個可以任選地被1-4個獨立地選自下述的基團取代鹵素，(C1-C6)烷基，(C2-C6)鏈烯基，(C2-C6)炔基，全鹵代(C1-C6)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環，(C3-C10)環烷基，羥基，(C1-C6)烷氧基，全鹵代(C1-C6)烷氧基，苯氧基，(C1-C10)雜芳基-O-，(C1-C10)雜環-O-，(C3-C10)環烷基-O-，(C1-C6)烷基-S-；其中2個獨立地選擇的含有烷基的R1基團，可以與它們所結合的任何氮原子一起，形成3-40元的環狀雜環或雜芳環。甚至更優選地，R和R1定義為獨立地選自氫，(C3-C20)環烷基，(C1-C20)烷氧基，(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環和(C3-C10)環烷基；其中前述的(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環和(C3-C20)環烷基取代基中的每一個可以任選地被1-4個獨立地選自下述的基團取代鹵素，(C1-C6)烷基，(C2-C6)鏈烯基，(C2-C6)炔基，全鹵代(C1-C6)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環，(C3-C10)環烷基，羥基和(C1-C6)烷氧基。甚至更優選地，R和R1定義為獨立地選自氫，(C3-C10)環烷基，(C1-C10)烷氧基，(C1-C10)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環和(C3-C10)環烷基。最優選地，R和R1定義為獨立地選自氫，(C3-C6)環烷基，(C1-C6)烷氧基和(C1-C6)烷基。
本發明的另一個實施方案包括具有在下面的2個通式之一內的化學結構的那些化合物
其中Ar，R，B和R1如上面的通式I和II中所定義。這里優選的實施方案是，其中B是氧，和/或R和R1定義為獨立地選自氫，(C3-C20)環烷基，(C1-C20)烷氧基，(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環和(C3-C10)環烷基；其中前述的(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環和(C3-C20)環烷基取代基中的每一個可以任選地被1-4個獨立地選自下述的基團取代鹵素，(C1-C6)烷基，(C2-C6)鏈烯基，(C2-C6)炔基，全鹵代(C1-C6)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環，(C3-C10)環烷基，羥基，(C1-C6)烷氧基，全鹵代(C1-C6)烷氧基，苯氧基，(C1-C10)雜芳基-O-，(C1-C10)雜環-O-，(C3-C10)環烷基-O-，(C1-C6)烷基-S-；其中2個獨立地選擇的含有烷基的R1基團，可以與它們所結合的任何氮原子一起，形成3-40元的環狀雜環或雜芳環。更優選地，R和R1定義為獨立地選自氫，(C3-C20)環烷基，(C1-C20)烷氧基，(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環和(C3-C10)環烷基；其中前述的(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環和(C3-C20)環烷基取代基中的每一個可以任選地被1-4個獨立地選自下述的基團取代鹵素，(C1-C6)烷基，(C2-C6)鏈烯基，(C2-C6)炔基，全鹵代(C1-C6)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環，(C3-C10)環烷基，羥基和(C1-C6)烷氧基。甚至更優選地，R和R1定義為獨立地選自氫，(C3-C10)環烷基，(C1-C10)烷氧基，(C1-C10)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環和(C3-C10)環烷基。最優選地，R和R1定義為獨立地選自氫，(C3-C6)環烷基，(C1-C6)烷氧基和(C1-C6)烷基。
本發明的另一個實施方案包括具有在下面的2個通式之一內的化學結構的那些化合物
其中R如上面的通式I和II中所定義，且Ar是下面的8個化學亞結構之一
或Ar定義為下面的3個化學亞結構之一
或
其中每個X獨立地是碳或氮；且當任何X是碳時，Y是為每個X獨立地定義如下的取代基 Y＝H，R1，或IV
每個Z獨立地是氫，羥基，氟，溴，碘，-N3，-CN，-SR3，-OR3，-N(R1)2，″n″獨立地是0或1-4的整數；且R1和R3如通式I或II中所定義。這里優選的實施方案是，其中B是氧，和/或R和R1定義為獨立地選自氫，(C3-C20)環烷基，(C1-C20)烷氧基，(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環和(C3-C10)環烷基；其中前述的(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環和(C3-C20)環烷基取代基中的每一個可以任選地被1-4個獨立地選自下述的基團取代鹵素，(C1-C6)烷基，(C2-C6)鏈烯基，(C2-C6)炔基，全鹵代(C1-C6)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環，(C3-C10)環烷基，羥基，(C1-C6)烷氧基，全鹵代(C1-C6)烷氧基，苯氧基，(C1-C10)雜芳基-O-，(C1-C10)雜環-O-，(C3-C10)環烷基-O-，(C1-C6)烷基-S-；其中2個獨立地選擇的含有烷基的R1基團，可以與它們所結合的任何氮原子一起，形成3-40元環狀雜環或雜芳環。更優選地，R和R1定義為獨立地選自氫，(C3-C20)環烷基，(C1-C20)烷氧基，(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環和(C3-C10)環烷基；其中前述的(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環和(C3-C20)環烷基取代基中的每一個可以任選地被1-4個獨立地選自下述的基團取代鹵素，(C1-C6)烷基，(C2-C6)鏈烯基，(C2-C6)炔基，全鹵代(C1-C6)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環，(C3-C10)環烷基，羥基和(C1-C6)烷氧基。甚至更優選地，R和R1定義為獨立地選自氫，(C3-C10)環烷基，(C1-C10)烷氧基，(C1-C10)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環和(C3-C10)環烷基。最優選地，R和R1定義為獨立地選自氫，(C3-C6)環烷基，(C1-C6)烷氧基和(C1-C6)烷基。
本發明的另一個實施方案包括具有在下面的2個通式之一內的化學結構的那些化合物
其中Ar，R，B和R1如上面的通式I和II中所定義。這里優選的實施方案是，其中B是氧，和/或R和R1定義為獨立地選自氫，(C3-C20)環烷基，(C1-C20)烷氧基，(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環和(C3-C10)環烷基；其中前述的(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環和(C3-C20)環烷基取代基中的每一個可以任選地被1-4個獨立地選自下述的基團取代鹵素，(C1-C6)烷基，(C2-C6)鏈烯基，(C2-C6)炔基，全鹵代(C1-C6)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環，(C3-C10)環烷基，羥基，(C1-C6)烷氧基，全鹵代(C1-C6)烷氧基，苯氧基，(C1-C10)雜芳基-O-，(C1-C10)雜環-O-，(C3-C10)環烷基-O-，(C1-C6)烷基-S-；其中2個獨立地選擇的含有烷基的R1基團，可以與它們所結合的任何氮原子一起，形成3-40元雜環或雜芳環。更優選地，R和R1定義為獨立地選自氫，(C3-C20)環烷基，(C1-C20)烷氧基，(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環和(C3-C10)環烷基；其中前述的(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環和(C3-C20)環烷基取代基中的每一個可以任選地被1-4個獨立地選自下述的基團取代鹵素，(C1-C6)烷基，(C2-C6)鏈烯基，(C2-C6)炔基，全鹵代(C1-C6)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環，(C3-C10)環烷基，羥基和(C1-C6)烷氧基。甚至更優選地，R和R1定義為獨立地選自氫，(C3-C10)環烷基，(C1-C10)烷氧基，(C1-C10)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環和(C3-C10)環烷基。最優選地，R和R1定義為獨立地選自氫，(C3-C6)環烷基，(C1-C6)烷氧基和(C1-C6)烷基。
本發明的另一個實施方案包括具有在下面的2個通式之一內的化學結構的那些化合物
其中R和B如上面的通式I或II中所定義，Ar是下面的8個化學亞結構之一
或Ar定義為下面的3個化學亞結構之一
或
其中每個X獨立地是碳或氮；且當任何X是碳時，Y是為每個X獨立地定義如下的取代基 Y＝H，R1，或IV
每個Z獨立地是氫，羥基，氟，溴，碘，-N3，-CN，-SR3，-OR3，-N(R1)2，″n″獨立地是0或1-4的整數；且R1和R3如通式I或II中所定義。這里優選的實施方案是，其中B是氧，和/或R和R1定義為獨立地選自氫，(C3-C20)環烷基，(C1-C20)烷氧基，(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環和(C3-C10)環烷基；其中前述(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環和(C3-C20)環烷基取代基中的每一個可以任選地被1-4個獨立地選自下述的基團取代鹵素，(C1-C6)烷基，(C2-C6)鏈烯基，(C2-C6)炔基，全鹵代(C1-C6)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環，(C3-C10)環烷基，羥基，(C1-C6)烷氧基，全鹵代(C1-C6)烷氧基，苯氧基，(C1-C10)雜芳基-O-，(C1-C10)雜環-O-，(C3-C10)環烷基-O-，(C1-C6)烷基-S-；其中2個獨立地選擇的含有烷基的R1基團，可以與它們所結合的任何氮原子一起，形成3-40元的環狀雜環或雜芳環。甚至更優選地，R和R1定義為獨立地選自氫，(C3-C20)環烷基，(C1-C20)烷氧基，(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環和(C3-C10)環烷基；其中前述的(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環和(C3-C20)環烷基取代基中的每一個可以任選地被1-4個獨立地選自下述的基團取代鹵素，(C1-C6)烷基，(C2-C6)鏈烯基，(C2-C6)炔基，全鹵代(C1-C6)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環，(C3-C10)環烷基，羥基和(C1-C6)烷氧基。甚至更優選地，R和R1定義為獨立地選自氫，(C3-C10)環烷基，(C1-C10)烷氧基，(C1-C10)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環和(C3-C10)環烷基。最優選地，R和R1定義為獨立地選自氫，(C3-C6)環烷基，(C1-C6)烷氧基和(C1-C6)烷基。
本發明的另一個實施方案包括具有在下面的2個通式之一內的化學結構的那些化合物
其中Ar，R，B和R1如上面的通式I和II中所定義。這里優選的實施方案是，其中B是氧，和/或R和R1定義為獨立地選自氫，(C3-C20)環烷基，(C1-C20)烷氧基，(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環和(C3-C10)環烷基；其中前述的(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環和(C3-C20)環烷基取代基中的每一個可以任選地被1-4個獨立地選自下述的基團取代鹵素，(C1-C6)烷基，(C2-C6)鏈烯基，(C2-C6)炔基，全鹵代(C1-C6)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環，(C3-C10)環烷基，羥基，(C1-C6)烷氧基，全鹵代(C1-C6)烷氧基，苯氧基，(C1-C10)雜芳基-O-，(C1-C10)雜環-O-，(C3-C10)環烷基-O-，(C1-C6)烷基-S-；其中2個獨立地選擇的含有烷基的R1基團，可以與它們所結合的任何氮原子一起，形成3-40元環狀雜環或雜芳環1更優選地，R和R1定義為獨立地選自氫，(C3-C20)環烷基，(C1-C20)烷氧基，(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環和(C3-C10)環烷基；其中前述(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環和(C3-C20)環烷基取代基中的每一個可以任選地被1-4個獨立地選自下述的基團取代鹵素，(C1-C6)烷基，(C2-C6)鏈烯基，(C2-C6)炔基，全鹵代(C1-C6)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環，(C3-C10)環烷基，羥基和(C-C6)烷氧基。甚至更優選地，R和R1定義為獨立地選自氫，(C3-C10)環烷基，(C1-C10)烷氧基，(C1-C10)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環和(C3-C10)環烷基。最優選地，R和R1定義為獨立地選自氫，(C3-C6)環烷基，(C1-C6)烷氧基和(C1-C6)烷基。
本發明的另一個實施方案包括具有在下面的2個通式之一內的化學結構的那些化合物
其中R如上面的通式I和II中所定義，且Ar是下面的8個化學亞結構之一
或Ar定義為下面的3個化學亞結構之一
或
其中每個X獨立地是碳或氮；且當任何X是碳時，Y是為每個X獨立地定義如下的取代基 Y＝H，R1，或IV
每個Z獨立地是氫，羥基，氟，溴，碘，-N3，-CN，-SR3，-OR3，-N(R1)2，″n″獨立地是0或1-4的整數；且R1和R3如通式I或II中所定義。這里優選的實施方案是，其中B是氧，和/或R和R1定義為獨立地選自氫，(C3-C20)環烷基，(C1-C20)烷氧基，(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C-C10)雜環和(C3-C10)環烷基；其中前述(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環和(C3-C20)環烷基取代基中的每一個可以任選地被1-4個獨立地選自下述的基團取代鹵素，(C1-C6)烷基，(C2-C6)鏈烯基，(C2-C6)炔基，全鹵代(C1-C6)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環，(C3-C10)環烷基，羥基，(C1-C6)烷氧基，全鹵代(C1-C6)烷氧基，苯氧基，(C1-C10)雜芳基-O-，(C1-C10)雜環-O-，(C3-C10)環烷基-O-，(C1-C6)烷基-S-；其中2個獨立地選擇的含有烷基的R1基團，可以與它們所結合的任何氮原子一起，形成3-40元環狀雜環或雜芳環。甚至更優選地，R和R1定義為獨立地選自氫，(C3-C20)環烷基，(C1-C20)烷氧基，(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環和(C3-C10)環烷基；其中前述的(C1-C10)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環和(C3-C20)環烷基取代基中的每一個可以任選地被1-4個獨立地選自下述的基團取代鹵素，(C1-C6)烷基，(C2-C6)鏈烯基，(C2-C6)炔基，全鹵代(C1-C6)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環，(C3-C10)環烷基，羥基和(C1-C6)烷氧基。甚至更優選地，R和R1定義為獨立地選自氫，(C3-C10)環烷基，(C1-C10)烷氧基，(C1-C10)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環和(C3-C10)環烷基。最優選地，R和R1定義為獨立地選自氫，(C3-C6)環烷基，(C1-C6)烷氧基和(C1-C6)烷基。
本發明的其它實施方案涉及上面所述的或下面所附的表I中列出的那些化合物，其作為單個的化合物本身，或在組合物中，或其制備方法，或其在根據本發明的方法中的應用。在下面的表I中列出的每個化合物中，任何氫都可以被取代基RX替代，后者是(C1-C6)烷基，(C2-C6)鏈烯基，(C2-C6)炔基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環或(C3-C10)環烷基取代基。本發明的其它實施方案涉及表I中列出的具體亞屬。在這些亞屬中，任何氫也可以被取代基RX替代 表I 化合物化學結構MFMW 1
C11H11NO4221.21 2
C13H15NO4249.29 3
C18H18N2O4 326.36 4
C11H11NO4221.21 5
C12H13NO4235.24 6
C14H17NO4263.3 7
C17H15NO4297.31 8
C12H13NO4235.24 9
C13H15NO4249.27 10
C16H19NO6321.33 表I (續) 化合物化學結構MF MW 11
C14H17NO4263.3 12
C14H15NO6293.27 13
C11H11NO4221.21 14
C17H15NO4297.31 15
C13H15NO4249.29 16
C15H19NO4277.32 17
C13H13NO6279.25 18
C12H13NO4235.24 19
C16H19NO6321.33 20
C14H17NO4263.29 表I (續) 化合物化學結構MFMW 21
C16H21NO4291.34 22
C14H15NO6293 27 23
C12H13NO4235.24 24
C15H19NO4277.32 25
C12H13NO4235.24 26
C14H15NO5277.27 27
C12H13NO5251.24 28
C15H17NO6307.31 29
C13H15NO4249.26 30
C12H13NO4235.24 表I (續) 化合物化學結構MFMW 31
C13H15NO4249.27 32
C15H19NO4277.32 33
C14H17NO4263.3 34
C15H20N2O3276.33 35
C14H17NO4263.29 36
C19H25NO4319.4 37
C15H19NO4277.32 38
C19H27NO4333 42 39
C15H19NO4277.32 表I (續) 化合物化學結構MFMW 40
C15H20N2O3 276.33 41
C15H19NO5293.32 42
C15H19NO4277.32 43
C17H21NO4303.35 44
C18H23NO4317.38 45
C18H26N2O3 318.19 46
C19H28N2O3 332.21 47
C21H24N2O3 352.18 表I (續) 化合物化學結構MFMW 48
C17H15NO4297.31 49
C15H19NO4277.32 50
C21H24N2O3 353.18 51
C19H28N2O3 333.42 52
C19H28N2O3 332.21 53
C21H23NO4353.16 54
C17H23NO430516 55
C20H22N2O3 338.16 表I (續) 化合物化學結構MFMW 56
C19H22N2O4342.16 57
C15H13NO5 287.08 58
C17H15NO4 297.31 59
C23H25N3O3391.46 60
C18H28N2O3318.41 61
C19H21NO5 343.37 62
C19H16N2O4336.34 63
C23H24N2O4392.45 表I (續) 化合物化學結構MFMW 64
C23H25N3O3 391.46 65
C23H24N2O4 392.45 66
C16H20N2O3 288 34 67
C18H18N2O3 310.35 68
C15H18N2O3 274.32 69
C15H18N2O4 290.31 70
C17H22N2O3 302.16 71
C17H24N2O3 304.38 72
C14H18N2O4 278.3 表I (續) 化合物化學結構MFMW 73
C13H16N2O4264.28 74
C14H18N2O4278.3 75
C24H18N2O4398.41 76
C24H18N2O4398.41 77
C24H18N2O4398.41 78
C14H16N2O5292.29 79
C13H14N2O5278.26 80
C18H24N2O3316.39 81
C16H19N3O5 82
C19H20N2O3324.37 表I (續) 化合物化學結構MFMW 83
C14H16N2O5292.29 84
C13H14N2O5278.26 85
C16H21N2O5321.35 86
C15H21N2O3277.34 亞屬A
可變 亞屬B
可變 亞屬C
可變 87
C20H26N3O4Cl408 88
C16H21N2O3 290 89
C16H20N2O5 321 表I (續) 化合物化學結構MFMW 90
C1 8H26N2O3319 91
C20H22N2O3 339 92
C17H24N2O3 305 93
C16H18N2O4F2 341 94
C16H19N2O4Cl 339 95
C18H26N2O2Cl 335 96
C15H16N2O3F2 311 97
C15H17N2O3Cl 309 98
C26H22N2O3 339 99
C16H23N2O3 292 表I (續) 化合物化學結構MFMW 100
C16H19N2O5 320 101
C20H20N2O2F2359 102
C20H20N2O2F2359 103
C16H20N2O2F2311 104
C17H22N2O2F2324.37 105
C15H18N2O2F2296.31 106
C19H18N2O5F 338 107
C16H21N2O3F 309 108
C15H17N2O4F 300 109
C16H20N2O2F2311 表I (續)
表I (續) 化合物化學結構MFMW 120
C16H21N2O2Cl309 121
C20H21N2O2Cl357 122
C18H24F2N2O2338.4 123
C16H18F2N2O2308.32 124
C18H24F2N2O2338.4 125
C16H22N2O3 290.37 126
C20H20F2N2O2358.38 127
C18H22F2N2O2336.38 128
C19H23ClN2O4378.85 本發明的化合物在用于治療和預防許多特征在于MIF反應的疾病和障礙的藥理學組合物中具有用途，在所述MIF反應中MIF由細胞源釋放，且MIF產生增強。可以單獨地或在它與合適的載體或賦形劑相混合的藥物組合物中，以能治療或改善特征在于MIF釋放的各種狀況的劑量，將本發明的化合物施用給人患者。治療上有效的劑量可以指，足以抑制MIF互變異構酶活性和MIF生物活性的化合物的量，應當理解，這樣的抑制可以在不同的濃度發生，所以本領域的技術人員能確定抑制目標MIF活性所需的化合物劑量。治療上有效的劑量可以單獨施用，或作為輔助治療與其它治療相聯合，例如甾族的或非甾族的抗炎劑或抗腫瘤劑。在Remington′s Pharmaceutical Sciences，MackPublishing Co.，Easton，PA，最新版中，可以發現關于配制和施用本發明的化合物的技術。
合適的給藥途徑可以包括例如經口的，直腸的，透粘膜的，口腔含化的，陰道內的或腸內的給藥；腸胃外的輸送，包括肌肉內的，皮下的，髓內的注射，以及鞘內的，直接心室內的，靜脈內的，腹膜內的，鼻內的或眼內的注射和任選地在貯庫或持續釋放制劑中。而且，可以在靶向藥物輸送系統中，例如在脂質體中，施用本發明的化合物。
可以以本身已知的方式，例如，通過常規的混合，溶解，制錠劑，漂選，乳化，包封，捕獲，或凍干方法，生產本發明的藥物組合物和化合物。因而，使用一種或多種可藥用的生理上可接受的載體，包含能促進活性化合物向制品的加工的賦形劑和輔料，可以以常規方式，配制用于根據本發明的用途的藥物組合物。合適的制劑取決于選擇的給藥途徑。
組合物中可以存在一種或多種式I，II的化合物，鹽，前藥，代謝產物，同位素標記的化合物，互變異構體，異構體和/或阻轉異構體的任意組合。
對于注射，可以在水性溶液中配制本發明的化合物，優選地在生理上相容的緩沖液中，例如Hank溶液，林格溶液或生理鹽水緩沖液。對于透粘膜給藥，在制劑中使用適合要穿透的屏障的滲透劑。這樣的滲透劑是本領域已知的。
對于經口施用，通過將活性化合物與本領域的技術人員眾所周知的藥學上可接受的載體相組合，可以容易地配制化合物。這樣的載體能使本發明的化合物配制成片劑，丸劑，錠劑，膠囊，液體，凝膠，糖漿劑，膏劑，懸浮液等，由待治療的患者經口攝入。通過使化合物與固體賦形劑相組合，任選地磨碎得到的混合物，如果需要，在加入合適的輔料后，加工顆粒的混合物，以得到片劑或或錠劑芯，可以得到經口使用的藥物制品。合適的賦形劑尤其是，填充劑例如糖，包括乳糖，蔗糖，甘露醇或山梨糖醇；纖維素制品例如，玉米淀粉，小麥淀粉，稻谷淀粉，馬鈴薯淀粉，明膠，西黃蓍膠，甲基纖維素，羥丙基甲基-纖維素，羧甲基纖維素鈉和/或聚乙烯吡咯烷酮(PVP)。如果需要，可以加入崩解劑，例如交聯聚乙烯吡咯烷酮，瓊脂或海藻酸或其鹽例如海藻酸鈉。
為錠劑芯提供合適的包衣。為此，可以使用濃縮的糖溶液，其可以任選地含有阿拉伯膠，滑石，聚乙烯吡咯烷酮，聚羧乙烯凝膠，聚乙二醇和/或二氧化鈦，漆溶液和合適的有機溶劑或溶劑混合物。可以將染料或顏料加入片劑或錠劑包衣中，用于識別或表征活性化合物劑量的不同組合。
可以經口施用的藥物制品包括由明膠制成的壓卡式膠囊，以及由明膠和增塑劑(例如甘油或山梨糖醇)制成的密封軟膠囊。壓卡式膠囊可以含有與下述成分相混合的活性成分填充劑例如乳糖，粘合劑例如淀粉和/或潤滑劑例如滑石或硬脂酸鎂，和任選存在的穩定劑。在軟膠囊中，活性化合物可以溶解或懸浮在合適的液體中，例如脂肪油，液體石蠟或液體聚乙二醇。另外，可以加入穩定劑。所有經口施用的制劑，應當是適于這樣的施用的劑量。
對于口腔含服給藥，組合物可以采取以常規方式配制的片劑或錠劑的形式。
對于吸入給藥，可以使用合適的拋射劑，例如，二氯二氟甲烷，三氯氟甲烷，二氯四氟乙烷，二氧化碳或其它合適的氣體，從壓縮包或噴霧器，以氣霧劑噴霧呈遞的形式，方便地輸送用于根據本發明的用途的化合物。在加壓的氣霧劑的情況下，通過提供閥門來輸送計量的量，可以確定劑量單位。可以配制在吸入器或吹入器中使用的例如明膠的膠囊和藥筒，其含有化合物和合適的粉末基質(例如乳糖或淀粉)的粉末混合物。
可以將化合物配制成腸胃外注射給藥，例如通過快速推注或連續輸注。注射制劑可以以單位劑型存在，例如在安瓿中，或在多劑量容器中，其具有添加的防腐劑。組合物可以采取下述形式在油性或水性載體中的懸浮液，溶液，或乳狀液，且可以含有配制試劑，例如懸浮劑，穩定劑和/或分散劑。
用于腸胃外給藥的藥物制劑包括水溶形式的活性化合物的水溶液。另外，可以將活性化合物的懸浮液制備成適當的油性注射懸浮液。合適的親脂溶劑或介質包括脂肪油例如芝麻油或合成的脂肪酸酯，例如油酸乙酯或甘油三酯或脂質體。水性注射懸浮液可以含有能增加懸浮液的粘度的物質，例如多離子嵌段(共)聚合物，羧甲基纖維素鈉，山梨糖醇或葡聚糖。任選地，懸浮液還可以含有合適的穩定劑或能增加化合物的溶解度的試劑以便于制備高度濃縮的溶液，例如，多離子嵌段(共)聚合物。
或者，活性成分可以是粉末形式，在使用前與合適的介質(例如，無菌無熱原的水)配制。
也可以將化合物配制成直腸組合物例如栓劑或保留灌腸劑，例如，其含有常規的栓劑基質，例如可可脂或其它甘油酯。
除了前述的制劑外，也可以將化合物配制成貯庫制品。這樣的長效制劑可以通過植入(例如皮下地或肌肉內地)或通過肌肉內注射來施用。因而，例如，可以用合適的聚合的或疏水的材料(例如，作為在可接受的油中的乳狀液)或離子交換樹脂配制化合物，或作為微溶的衍生物，例如，作為微溶的鹽。
脂質體和乳狀液是眾所周知的疏水藥物的輸送介質或載體的實例。也可以使用某些有機溶劑例如二甲基亞砜，盡管通常以更大的毒性為代價。另外，使用持續釋放系統，例如含有治療劑的固體疏水聚合物的半透基質，可以輸送化合物。已經確立了多種形式的持續釋放材料，且是本領域的技術人員眾所周知的。根據它們的化學性質，持續釋放膠囊可以釋放化合物幾周至超過100天。根據治療劑的化學性質和生物穩定性，可以使用能穩定蛋白的其它策略。
藥物組合物也可以包含合適的固相或凝膠相載體或賦形劑。這樣的載體或賦形劑的實例包括但不限于碳酸鈣，磷酸鈣，各種糖，淀粉，纖維素衍生物，明膠和聚合物例如聚乙二醇。
可以提供許多鑒別為MIF活性的抑制劑的本發明的化合物，作為與藥學上相容的抗衡離子的鹽。可以用許多酸，包括但不限于鹽酸，硫酸，乙酸，乳酸，酒石酸，蘋果酸，琥珀酸等；或堿，形成藥學上相容的鹽。與對應的游離堿形式相比，鹽傾向于更易溶于水性的或其它的質子性溶劑中。藥學上可接受的鹽、載體或賦形劑的實例，是本領域的技術人員眾所周知的，參見例如，Remington′s PharmaceuticalSciences，18th Edition，A.R.Gennaro，Ed.，Mack PublishingCo.，Easton，PA(1990)。這樣的鹽包括，但不限于，鈉鹽，鉀鹽，鋰鹽，鈣鹽，鎂鹽，鐵鹽，鋅鹽，鹽酸鹽，氫溴酸鹽，氫碘酸鹽，乙酸鹽，檸檬酸鹽，酒石酸鹽和馬來酸鹽等。
適用于本發明的用途的藥物組合物包括，其中包含有效量的活性成分、以達到它們的預期目的的組合物。更具體地，治療有效量指，能有效地預防或抑制治療對象中特征在于MIF釋放和產生的疾病的發生或進展的量。本領域的技術人員能確定有效量，尤其是考慮到本文提供的詳細內容。
對于在本發明的方法中使用的任何化合物，可以從互變異構酶抑制測定和細胞培養測定，初步估計治療有效劑量。這樣的信息可以用于更準確地確定在人類中有用的劑量。通過細胞培養物或實驗動物中的標準的藥學、藥理學和毒理學的方法，可以確定這樣的化合物的毒性和治療效力，例如，用于測定LD50(對50％群體致死的劑量)和ED50(在50％群體中治療有效的劑量)。毒性和治療作用之間的劑量比，是治療指數，其可以表達為LD50和ED50之間的比例。能表現出高治療指數(ED50＞LD50或ED50＞＞LD50)的化合物是優選的。從細胞培養測定或動物研究得到的數據，可以用于配制用于人的劑量范圍。這樣的化合物的劑量，優選地在循環濃度的范圍內，其包括ED50，具有極小毒性或無毒性。根據采用的劑型和使用的給藥途徑，劑量可以在該范圍內變化。考慮患者的狀況，各醫生可以選擇確切的制劑、給藥途徑和劑量(見例如，Fingl等(1975)，The Pharmacological Basis of Therapeutics，Chapter.1 page 1)。
可以個別地調節劑量和間隔，以提供足以維持期望的調控效果的活性部分的血漿水平或最小有效濃度(MEC)。MEC可以隨每種化合物而變化，但是可以從體外數據估計到；例如，達到對MIF活性的50-90％抑制所需的濃度。達到MEC所需的劑量，取決于個體特征和給藥途徑。但是，可以使用HPLC測定，生物測定或免疫測定，來測定血漿濃度。
使用MEC值，也可以確定劑量間隔。應當使用能使血漿水平維持在MEC以上持續1-90％時間、優選地30-90％和最優選地50-90％的方案，施用化合物。這些范圍包括1，2，3，4，5，6，7，8，9，10，20，30，40，50，60，70，8，90，99和其任意組合。
活性成分可以以0.1-99.9重量％的量，存在于藥物組合物中。這些范圍包括0.1，0.5，0.9，1，2，3，4，5，6，7，8，9，10，20，30，40，50，60，70，80，90，99，99.5，99.9重量％和其任意組合。
在局部給藥的情況下，例如，直接導入靶器官或組織，或選擇性攝入，有效的局部的藥物濃度可以與血漿濃度無關。
當然，施用的組合物的量，取決于治療對象，對象的體重，對象的年齡，疾患的嚴重性，給藥方式，和處方醫生的判斷。
如果需要，組合物可以存在于包或分配裝置中，其可以含有一個或多個含有活性成分的單位劑型。該包可以包含例如金屬或塑料箔，例如泡罩。包或分配裝置可以伴有給藥說明書。也可以制備在相容的藥物載體中配制的包含本發明的化合物的組合物，置于適當的容器中，并貼上關于治療適應癥的標簽。
式I或II化合物或其藥學上可接受的鹽可以用于生產藥物，其可以用于預防性地或治療性地治療人或其它哺乳動物中的任何疾病狀態，后者由該哺乳動物的細胞(例如但不限于單核細胞和/或巨噬細胞)過量或失調產生細胞因子加重或造成。
MIF的酶活性(互變異構酶)和它接受的底物提供酶活性測定，其可以用于設計能結合MIF并破壞它的生物活性的低分子量試劑。本發明提供了使用這樣的具有異唑啉結構的化合物種類中的化合物的的方法。
本發明還提供了藥物組合物，其包含異唑啉化合物或其藥學上可接受的鹽和藥學上可接受的載體或稀釋劑，其中該組合物包含有效量的上式化合物。
本發明還提供了藥物組合物，其包含具有異唑啉或異唑啉-有關的部分的化合物和藥學上可接受的載體，其中該化合物能與MIF蛋白的至少一個氨基酸殘基形成穩定的相互作用。
本發明提供了治療下述疾病的方法炎性障礙(包括，但不限于，關節炎，增生性血管病，ARDS(急性呼吸窘迫綜合征)，細胞因子-介導的毒性，膿毒癥，敗血癥性休克，銀屑病，白介素-2毒性，哮喘，MIF-介導的狀況，自身免疫病(包括但不限于類風濕性關節炎，胰島素依賴型糖尿病，多發性硬化，移植物抗宿主疾病，狼瘡綜合征)，腫瘤生長或血管發生或特征在于局部的或全身的MIF釋放或合成的任何狀況，該方法包括施用有效量的具有異唑啉部分的化合物，其中該化合物能與MIF蛋白形成相互作用。例如，該化合物可以結合MIF蛋白，從而干擾MIF蛋白的生物和/或酶活性。結合可以是可逆的或不可逆的。
根據MIF的干擾甾族化合物(例如抗炎的糖皮質激素)的抗炎作用的活性，式I或II的化合物可以進一步用于增強內源產生的和外源施用的甾族抗炎劑的活性和治療利益。在有些情況下，這樣的利益最明顯的在于能減少對甾族化合物治療的需要(例如，更低的劑量或頻率；不太強有力的試劑；減少對全身給藥的需要)，或能減少與甾族化合物施用有關的副作用。僅僅使用本發明的MIF抑制劑作為單一療法，或作為與其它抗炎劑(更具體地，包括但不限于抗炎的甾族化合物)的聯合療法，可以實現用MIF抑制劑(更具體地，式I或II的化合物)的益處。通過施用將MIF抑制劑(更具體地，式I或II的抑制劑)和至少一種其它的抗炎劑(其可以是甾族的或非甾族的抗炎劑)相組合的單一制劑或藥物組合物，或通過彼此組合地施用分開的制劑或藥物組合物，或二者，可以實現這樣的聯合療法。
式I和II的化合物也能抑制受MIF影響的促炎性細胞因子，例如IL-1，IL-2，IL-6，IL-8，IFN-γ和TNF，因此可以用于治療。IL-1，IL-2，IL-6，IL-8，IFN-γ和TNF能影響廣泛種類的細胞和組織，且這些細胞因子，以及其它白細胞-衍生的細胞因子，是許多種類的疾病狀態和狀況的重要的和關鍵的炎性介質。抑制這些細胞因子，有助于控制、減輕和緩解許多這樣的疾病狀態。
因此，本發明提供了治療細胞因子介導的疾病的方法，其包括施用有效的細胞因子-干擾量的式I或II化合物或其藥學上可接受的鹽。
更具體地，式I或II的化合物或其藥學上可接受的鹽，可以用于治療人或其它哺乳動物的任意疾病狀態，其由這樣的哺乳動物的細胞(例如，但不限于，單核細胞和/或巨噬細胞)過量的或失調的MIF，IL-1，IL-2，IL-6，IL-8，IFN-γ和TNF產生而加重或造成。
因此，在另一個方面，本發明涉及抑制有此需要的哺乳動物中的IL-1產生的方法，其包括給所述哺乳動物施用有效量的式I或II化合物，或其藥學上可接受的鹽。存在許多疾病狀態，其中過量的或失調的IL-1產生參與加重和/或造成疾病。它們包括類風濕性關節炎，骨關節炎，腦膜炎，缺血和出血性卒中，神經外傷/閉合性顱腦損傷，中風，內毒素血癥和/或中毒性休克綜合征，其它急性或慢性炎性疾病狀態例如由內毒素誘發的炎性反應或炎性腸病，結核病，動脈粥樣硬化，肌肉退化，多發性硬化，惡病質，骨再吸收，銀屑病關節炎，萊特爾氏綜合征，類風濕性關節炎，痛風，創傷性關節炎，風疹性關節炎和急性滑膜炎。近期的證據還將IL-1活性與糖尿病，胰腺細胞疾病和阿爾茨海默病相關聯。
在另一個方面，本發明涉及抑制有些需要的哺乳動物中的TNF產生的方法，其包括給所述哺乳動物施用有效量的式I或I I化合物或其藥學上可接受的鹽。過量的或失調的TNF產生已經參與介導或加重許多疾病，包括類風濕性關節炎，類風濕性脊椎炎，骨關節炎，痛風性關節炎和其它關節炎狀況，膿毒癥，敗血癥性休克，內毒素性休克，革蘭氏陰性膿毒癥，中毒性休克綜合征，成人呼吸窘迫綜合征，中風，腦型瘧，慢性阻塞性肺病，慢性肺炎性疾病，硅肺，肺結節病，骨再吸收疾病例如骨質疏松癥，心臟的、腦和腎臟的再灌注損傷，移植物抗宿主反應，同種異體移植物排斥，感染例如流行性感冒(包括HIV-誘導的形式)引起的發熱和肌痛，腦型瘧，腦膜炎，缺血和出血性卒中，感染或惡性腫瘤繼發的惡病質，獲得性免疫缺陷綜合征(AIDS)繼發的惡病質，AIDS，ARC(AIDS相關復征)，瘢痕瘤形成，瘢痕組織形成，炎性腸病，克羅恩病，潰瘍性結腸炎和熱病(pyresis)。
式I或II的化合物也可以用于治療病毒感染，其中這樣的病毒對TNF的上調是敏感的，或在體內引起TNF產生。本文中預期能治療的病毒是這樣的，作為感染的結果產生TNF，或它對式I或II的TNF抑制-化合物的抑制敏感，例如通過直接或間接降低復制。這樣的病毒包括，但不限于HIV-1，HIV-2和HIV-3，巨細胞病毒(CMV)，流行性感冒，腺病毒和皰疹病毒例如但不限于，帶狀皰疹和單純皰疹。因此，在另一個方面，本發明涉及治療感染了人免疫缺陷病毒(HIV)的哺乳動物的方法，其包括給這樣的哺乳動物施用有效的TNF抑制量的式I或II化合物或其藥學上可接受的鹽。
式I或II的化合物也可以用于需要抑制TNF產生的人以外的哺乳動物的獸醫治療。TNF介導的動物中的需要治療的疾病包括諸如上述的那些疾病狀態，但是尤其是病毒感染。這樣的病毒的實例包括，但不限于，慢病毒屬感染，例如，馬傳染性貧血病毒，羊關節炎病毒，綿羊髓鞘脫落病毒或梅迪病毒或逆轉錄病毒感染，例如但不限于貓免疫缺陷病毒(FIV)，牛免疫缺損病毒或犬免疫缺損病毒或其它逆轉錄病毒感染。
式I或II的化合物也可以局部地用于治療局部的疾病狀態，后者由過量的細胞因子(例如分別是IL-1或TNF)產生介導或加重，例如發炎關節，濕疹，接觸性皮炎銀屑病和其它炎性皮膚狀況例如曬斑；炎性眼病包括結膜炎；熱病，疼痛和與炎癥有關的其它狀況。牙周病也已經涉及細胞因子產生(局部地和全身地)。因此，使用式I或II的化合物來控制這樣的口腔病例如齦炎和牙周炎中與細胞因子產生有關的炎癥，是本發明的另一個方面。
還已經證實，式I或II的化合物能抑制IL-8(白介素-8，NAP)的產生。因此，在另一個方面，本發明涉及抑制有此需要的哺乳動物中的IL-8的產生的方法，其包括給所述哺乳動物施用有效量的式I或II化合物或其藥學上可接受的鹽。
存在許多疾病狀態，其中過量的或失調的IL-8產生參與加重和/或造成疾病。這些疾病的特征在于大量的嗜中性粒細胞浸潤，例如，銀屑病，炎性腸病，哮喘，心臟的和腎的再灌注損傷，成人呼吸窘迫綜合征，血栓形成和腎小球腎炎。所有這些疾病都與增加的IL-8產生有關，后者負責嗜中性粒細胞向炎性部位中的趨化性。與其它的炎性細胞因子(IL-1，TNF和IL-6)相比，IL-8具有促進中性粒細胞趨化性和活化的獨特性質。因此，抑制IL-8生產，會導致嗜中性粒細胞浸潤的直接減少。
以足以抑制細胞因子、尤其是MIF，IL-1，IL-2，IL-6，IL-8，IFN-γ和TNF生產的量，施用式I或II的化合物，使其向下調節至正常水平，或在有些情況下，向下調節至亞正常水平，以便改善或預防疾病狀態。MIF，IL-1，IL-2，IL-6，IL-8，IFN-γ和TNF的異常水平，例如在本發明的上下文中，構成(i)大于或等于1pg/ml的游離的(未結合細胞的)MIF，IL-1，IL-2，IL-6，IL-8，IFN-γ和TNF的水平；(ii)任何細胞結合的MIF，IL-1，IL-2，IL-6，IL-8，IFN-γ和TNF；或(iii)存在超過在分別生產MIF，IL-1，IL-2，IL-6，IL-8，IFN-γ和TNF的細胞或組織中的基礎水平的MIF，IL-1，IL-2，IL-6，IL-8，IFN-γ和TNFmRNA。
如本文使用的，術語″抑制MIF，IL-1，IL-2，IL-6，IL-8，IFN-γ和TNF的產生″指 a)通過抑制所有或選擇細胞(包括但不限于單核細胞或巨噬細胞)對細胞因子的體內釋放，使人中過量的體內水平的細胞因子MIF，IL-1，IL-2，IL-6，IL-8，IFN-γ和TNF降低至正常的或亞正常的水平； b)在轉錄水平，將人中過量的體內水平的細胞因子MIF，IL-1，IL-2，IL-6，IL-8，IFN-γ和TNF下調節至正常的或亞正常的水平； c)在轉錄后水平，將人中過量的體內水平的細胞因子MIF，IL-1，IL-2，IL-6，IL-8，IFN-γ和TNF下調節至正常的或亞正常的水平； d)作為翻譯后事件，通過抑制細胞因子MIF，IL-1，IL-2，IL-6，IL-8，IFN-γ和TNF的直接合成，下調節至正常的或亞正常的水平；或 e)在翻譯水平，將人中過量的體內水平的細胞因子MIF，IL-1，IL-2，IL-6，IL-8，IFN-γ和TNF下調節至正常的或亞正常的水平。
如本文使用的，術語″MIF介導的疾病或疾病狀態″指，其中MIF起作用的任何和所有的疾病狀態，無論是通過MIF自身的生產或生物的或酶的(互變異構酶和/或氧化還原酶)活性，還是通過MIF造成或調控要釋放的另一種細胞因子，例如但不限于IL-1，IL-2，IL-6，IL-8，IFN-γ和TNF。因此，應當將疾病狀態，其中例如IL-1是重要組分，且它的產生或作用響應MIF而加重或分泌，視作由MIF介導的疾病狀態。
如本文使用的，術語″細胞因子″指能影響細胞功能、且是能調控免疫、炎癥或造血反應中細胞之間的相互作用的分子的任何分泌多肽。細胞因子包括，但不限于，單核因子和淋巴因子，不管哪種細胞生產它們。例如，提及的單核因子由單核的細胞生產和分泌，例如巨噬細胞和/或單核細胞。但是，許多其它的細胞也生產單核因子，例如自然殺傷細胞，成纖維細胞，嗜堿粒細胞，嗜中性粒細胞，內皮細胞，腦星形膠質細胞，骨髓基質細胞，表皮角質形成細胞和B-淋巴細胞。提及的淋巴因子通常由淋巴細胞生產。細胞因子的實例包括，但不限于，巨噬細胞游走抑制因子(MIF)，白介素-1(IL-1)，白介素-2(IL-2)，白介素-6(IL-6)，白介素-8(IL-8)，腫瘤壞死因子-α(TNF-α)和腫瘤壞死因子-β(TNF-β)。
如本文使用的，術語″細胞因子干擾″或″細胞因子抑制量″指有效量的式I或II化合物，當施用給患者來治療由過量的或失調的細胞因子生產加重或造成的疾病狀態時，其能造成體內或體外存在的細胞因子的生物活性或水平、或細胞因子的體內水平降低至正常的或亞正常的水平。
如本文使用的，在短語″抑制細胞因子用于治療HIV-感染的人″中提及的細胞因子是參與下述活動的細胞因子(a)啟動和/或維持T細胞活化和/或活化的T細胞-介導的HIV基因表達和/或復制，和/或(b)任何細胞因子-介導的疾病有關的問題，例如惡病質或肌肉退化。
由于TNF-β(也稱作淋巴毒素)具有與TNF-α(也稱作惡病質素)接近的結構同源性，且由于各自都能誘導類似的生物反應和結合相同的細胞受體，TNF-α和TNF-β都能被本發明的化合物抑制，因而在本文中一起稱作″TNF″，除非另有特別說明。
這些式I或II的抑制劑化合物，有助于測定參與炎性反應的信號傳遞途徑。更具體地，可以為脂多糖在巨噬細胞細胞因子產生中的作用，描述確定的信號轉導途徑。除了本文已經指出的那些疾病外，也包括對中風，神經外傷/CNS顱腦損傷，心臟的、腦和腎臟的再灌注損傷，血栓形成，腎小球腎炎，糖尿病和胰腺細胞疾病，多發性硬化，肌肉退化，濕疹，銀屑病，曬斑和結膜炎的治療。
還認識到，IL-6和IL-8都在鼻病毒(HRV)感染過程中產生，且有助于普通感冒的發病和與HRV感染有關的哮喘的惡化(Turner等，(1998)，Clin.Infec.Dis.，Vol.26，p.840；Teren等(1997)，Am.J.Respir.Crit.Care Med.，Vol.155，p.1362；Grunberg等(1997)，Am.J.Respir.Crit.Care Med.，Vol.156，p.609和Zhu等，J.Clin.Invest.(1996)，Vol.97，p421)。還已經體外地證實，HRV對肺上皮細胞的感染，會導致L-6和IL-8的產生(Subauste等，J.Clin.Invest.(1995)，Vol.96，p.549)。上皮細胞代表著HRV感染的首要部位。因此，本發明的另一個方面是，減輕與鼻病毒感染有關的炎癥的治療方法，所述炎癥不一定是病毒自身的直接效應。
本發明的另一個方面涉及這些細胞因子抑制劑用于治療由過量的或不適當的血管發生造成的慢性的炎性的或增殖性的或血管發生性的疾病的新應用。具有不適當的血管發生組分的慢性疾病是各種眼新血管形成，例如糖尿病性視網膜病和黃斑變性。具有過量的或增加的血管系統增殖的其它慢性疾病是腫瘤生長和轉移，動脈粥樣硬化和某些關節炎狀況。因此，細胞因子抑制劑可以用于阻斷這些疾病狀態的血管發生組分。
如本文使用的術語″過量的或增加的血管系統不適當的血管發生的增殖″包括，但不限于，特征在于血管瘤的疾病和眼病。
如本文使用的術語″不適當的血管發生″包括，但不限于，特征在于伴有組織增殖的囊泡增殖的疾病，例如發生在癌癥，轉移，關節炎和動脈粥樣硬化中。
本發明也包括治療或預防哺乳動物、優選人中的疾病的方法，該疾病可以通過抑制ERK/MAP來治療或預防，其包括給所述哺乳動物施用有效量的式I或II化合物。因此，本發明提供了治療有此需要的哺乳動物、優選人中的ERK/MAP激酶介導的疾病的方法，其包括給所述哺乳動物施用有效量的式I或II化合物或其藥學上可接受的鹽。
優選的可治療的ERK/MAP介導的疾病包括，但不限于，銀屑病關節炎，萊特爾氏綜合征，類風濕性關節炎，痛風，創傷性關節炎，風疹性關節炎和急性滑膜炎，類風濕性脊椎炎，骨關節炎，痛風性關節炎和其它關節炎狀況，膿毒癥，敗血癥性休克，內毒素性休克，革蘭氏陰性膿毒癥，中毒性休克綜合征，阿爾茨海默病，中風，缺血和出血性卒中，神經外傷/閉合性顱腦損傷，哮喘，成人呼吸窘迫綜合征，慢性阻塞性肺病，腦型瘧，腦膜炎，慢性肺炎性疾病，硅肺，肺結節病，骨再吸收疾病，骨質疏松癥，再狹窄，心臟的再灌注損傷，腦和腎的再灌注損傷，慢性腎衰竭，血栓形成，腎小球腎炎，糖尿病，糖尿病性視網膜病，黃斑變性，移植物抗宿主反應，同種異體移植物排斥，炎性腸病，克羅恩病，潰瘍性結腸炎，神經變性疾病，多發性硬化，肌肉退化，糖尿病性視網膜病，黃斑變性，腫瘤生長和轉移，血管發生疾病，鼻病毒感染，口腔疾病例如齦炎和牙周炎，濕疹，接觸性皮炎，銀屑病，曬斑和結膜炎。
如本文使用的，術語″治療(treating)″指，逆轉、減輕、抑制這樣的術語應用的障礙或狀況、或這樣的障礙或狀況的一種或多種癥狀的進展，或預防它們。如本文使用的，術語″治療(treatment)″指治療行為，“治療”如上面定義。
本發明也包括用于治療哺乳動物、包括人中的選自下述的狀況的藥物組合物關節炎，銀屑病關節炎，萊特爾氏綜合征，痛風，創傷性關節炎，風疹性關節炎和急性滑膜炎，類風濕性關節炎，類風濕性脊椎炎，骨關節炎，痛風性關節炎和其它關節炎狀況，膿毒癥，敗血癥性休克，內毒素性休克，革蘭氏陰性膿毒癥，中毒性休克綜合征，阿爾茨海默病，中風，神經外傷，哮喘，成人呼吸窘迫綜合征，腦型瘧，慢性肺炎性疾病，硅肺，肺結節病，骨再吸收疾病，骨質疏松癥，再狹窄，心臟的和腎的再灌注損傷，血栓形成，腎小球腎炎，糖尿病，移植物抗宿主反應，同種異體移植物排斥，炎性腸病，克羅恩病，潰瘍性結腸炎，多發性硬化，肌肉退化，濕疹，接觸性皮炎，銀屑病，曬斑或結膜炎，其包含在這樣的治療中有效的量的式I或II化合物和藥學上可接受的載體。
本發明的一個實施方案提供了滅活人MIF的酶活性和生物活性的方法，其包括使人MIF接觸化合物或化合物的組合，形成與人MIF的至少一個氨基酸殘基的穩定的相互作用。本發明也涉及抑制受MIF活性影響的其它的細胞因子，包括IL-1，IL-2，IL-6，IL-8，IFN-γ和TNF。本發明包括治療或預防哺乳動物、優選人中的障礙的方法，該障礙可以通過抑制ERK/MAP途徑來治療或預防，其包括給所述哺乳動物施用有效量的化合物。
作為本發明的治療方法的一個實例，本發明的含有異唑啉的化合物可以用于治療ARDS(急性呼吸窘迫綜合征)患者。ARDS經常被視作原型臨床反應，其中免疫反應的動態平衡向過度的炎癥和組織破壞遷移。MIF在II型肺泡細胞和浸潤的免疫細胞中表達。與對照對象相比，發現ARDS患者的支氣管肺泡灌洗中的MIF水平顯著升高(Donnelly等，Nat.Med.，3，320-323(1997))。與對照細胞相比，人MIF能增強ARDS肺泡巨噬細胞(離體)的TNFα和IL-8分泌。用抗-MIF抗體預處理這些細胞，能顯著減少ARDS肺泡細胞的TNFα和IL-8產生。而且，如上面“發明背景”中所討論的，發現rMIF(重組MIF)能以濃度依賴性的方式，克服糖皮質激素-介導的對ARDS巨噬細胞中細胞因子分泌的抑制。這些是表明在人疾病過程中MIF/糖皮質激素二聯體在體內已經經歷促炎癥激活的細胞中是有活性的最初數據(Donnelly等，Nat.Med.，3，320-323(1997)。在處于向ARDS進展危險中的那些患者中，發現了比沒有危險的患者中明顯升高的肺泡MIF水平。MIF可能作為重要的介質，促進和維持ARDS中的肺炎性反應。它在ARDS中的顯著表達，可以解釋該疾病的暴發進程，并可能解釋為什么在確定的病例中糖皮質激素治療被證實是令人失望的。因而，包含本發明的含有異唑啉的化合物的藥物組合物，可以用于治療ARDS患者。
作為本發明的治療方法的另一個實例，本發明的含有異唑啉的化合物可以用于治療類風濕性關節炎患者。從類風濕性關節炎患者的患病關節得到的滑液，含有比從骨關節炎患者或從正常的對照對象得到的那些明顯更高水平的MIF(Metz等，Adv.Immunol.，66，197-223(1997)；Leech等，Arthritis Rheum.，41，910-917(1998)；Onodera等，Cytokine，11，163-167(1999))。如免疫組織化學染色方法所揭示的，人關節炎關節內的浸潤性單核細胞是MIF的主要來源。在關節炎的2個動物模型中，中和抗-MIF mAb顯著抑制疾病進展和疾病嚴重性(Leech等，Arthritis Rheum.，41，910-917(1998)；Mikulowska等，J.Immunol.，158，5514-5517(1997))，刺激開發用于炎性疾病的潛在治療性應用的其它MIF抑制劑的需要。因而，本發明的包含異唑啉化合物或異唑啉-有關的化合物的藥物組合物，可以用于治療關節炎患者。
在本發明的治療方法的另一個實例中，本發明的含有異唑啉的化合物可以用于治療特應性皮炎患者。特應性皮炎是一種慢性的瘙癢的炎性皮膚病.認為它的發病部分地是由于外周單核細胞的失調的細胞因子產生。在特應性皮炎患者的病損中，MIF蛋白彌漫地分布在整個表皮層中，角質形成細胞表達增加(Shimizu等，FEBS Lett.，381，199-202(1996))。在正常的人皮膚中，MIF主要定位在表皮角質形成細胞。特應性皮炎患者的血清MIF水平，是對照對象的6倍那么高。另外，特應性皮炎患者的血清MIF水平，隨著臨床特征的改善而降低，表明在皮炎過程中，MIF在皮膚的炎性反應中起關鍵作用。因而，本發明的包含含有異唑啉的化合物的藥物組合物，可以用于治療特應性皮炎患者。
以類似的方式，本發明還提供了治療或預防其它炎性或自身免疫病的方法，包括但不限于，增生性血管病，細胞因子-介導的毒性，膿毒癥，敗血癥性休克，銀屑病，白介素-2毒性，哮喘，MIF-介導的狀況，胰島素依賴型糖尿病，多發性硬化，移植物抗宿主疾病，狼瘡綜合征和特征在于局部的或全身的MIF釋放或合成或受MIF影響的其它細胞因子的其它狀況。
在本發明的治療方法的另一個實例中，本發明的化合物可以用于治療具有腫瘤生長的患者。已經發現，中和抗-MIF抗體，能在體內顯著減少小鼠38C13B細胞淋巴瘤的生長和血管化(血管發生)(Chesney等，Mol.Med.，5，181-191(1999))。MIF主要在腫瘤有關的新血管系統中表達。觀察到培養的微血管內皮細胞(但不是38C13 B細胞)能產生MIF，且在體外增殖中需要它的活性(Takahashi等，Mol.Med.，4，707-714(1998))。另外，發現給小鼠施用抗-MIF抗體，能顯著抑制由Matrigel植入引起的新血管形成反應，后者是一種體內新血管形成的模型(Bozza等，J.Exp.Med.，189，341-346(1999))。這些數據表明，MIF在腫瘤血管發生中起重要作用，是開發能抑制腫瘤新血管形成的抗腫瘤劑的新靶物。
因而，本發明還提供了治療或預防腫瘤生長或血管發生的方法，其包括施用有效量的化合物或化合物的組合，其具有異唑啉部分，且能與MIF蛋白的至少一個氨基酸殘基形成穩定的相互作用。
本發明還提供了式I或II化合物或其藥學上可接受的鹽，作為前述任一種的藥物組合物，其用于治療或預防下述疾病的藥物中或藥物的生產中炎性障礙包括關節炎，增生性血管病，ARDS，細胞因子-介導的毒性，膿毒癥，敗血癥性休克，銀屑病，白介素-2毒性，哮喘，MIF-介導的狀況，自身免疫病(包括，但不限于，類風濕性關節炎，胰島素依賴型糖尿病，多發性硬化，移植物抗宿主疾病，狼瘡綜合征)，腫瘤生長或血管發生或特征在于局部的或全身的MIF釋放或合成的任何狀況。
本發明也包括用于治療哺乳動物、包括人的疾病的藥物組合物，該疾病可以通過抑制ERK/MAP激酶途徑來治療，其包含在這樣的治療中有效的量的式I或II化合物和藥學上可接受的載體。
本發明也包括式I或II化合物的前藥，和含有這些前藥的藥物組合物。可以將具有游離氨基、酰氨基、羥基或羧基的式I或II的化合物，轉化成前藥。前藥包括這樣的化合物，其中氨基酸殘基或2個或多個(例如，2，3或4個)氨基酸殘基的多肽鏈，通過肽鍵共價連接到式I或II化合物的游離氨基、羥基或羧酸基上。氨基酸殘基包括20種天然存在的通常用3字母符號命名的氨基酸，也包括4-羥基脯氨酸，羥賴氨酸，demosine，isodemosine，3-甲基組氨酸，正纈氨酸，β-丙氨酸，γ-氨基丁酸，瓜氨酸，高半胱氨酸，高絲氨酸，鳥氨酸和甲硫氨酸砜。前藥也包括這樣的化合物，其中碳酸酯，氨基甲酸酯，酰胺和烷基酯，通過羰基碳前藥側鏈，共價結合到式I的上述取代基上。本發明也包括持續釋放組合物。
本領域的普通技術人員能認識到，本發明的化合物可以用于治療多種疾病。本領域的普通技術人員也能認識到，當使用本發明的化合物治療特定疾病時，本發明的化合物可以與各種現有的用于該疾病的治療劑相組合。
對于類風濕性關節炎的治療，本發明的化合物可以與下述藥劑相組合例如TNF抑制劑例如抗-TNF單克隆抗體和TNF受體免疫球蛋白分子，COX-2抑制劑，例如塞來考昔，羅非考昔，伐地考昔和艾托考昔，低劑量甲氨蝶呤，lefunomide，羥氯喹，d-青霉胺，金諾芬或者胃腸外或口服金。
本發明的化合物也可以與現有的用于治療骨關節炎的治療劑組合使用。要組合使用的合適的試劑包括標準的非甾族抗炎劑例如吡羅昔康，雙氯芬酸，丙酸類例如萘普生，氟苯布洛芬，非諾洛芬，酮洛芬和布洛芬，滅酸酯類例如甲芬那酸，茚甲新，舒林酸，阿扎丙宗，吡唑酮類例如保泰松，水楊酸類例如阿司匹林，COX-2抑制劑例如塞來考昔，伐地考昔，羅非考昔和艾托考昔，鎮痛藥和關節內治療劑例如皮質甾類和透明質酸例如海爾根和synvisc。
本發明的化合物也可以與下述物質組合使用抗癌劑例如內皮他丁和血管他丁或細胞毒性藥物例如阿霉素，道諾霉素，順鉑，依托泊苷，紫杉酚，泰索帝和生物堿類，例如長春新堿，法尼基轉移酶抑制劑，VegF抑制劑和抗代謝物例如甲氨蝶呤。
本發明的化合物也可以與下述物質組合使用抗病毒劑例如奈非那韋，疊氮胸苷，阿昔洛韋和泛昔洛韋和防腐化合物例如Valant。
本發明的化合物也可以與下述物質組合使用心血管藥物例如鈣通道阻滯劑，降脂藥例如他汀類藥物，貝特類藥物，β-受體阻斷劑，Ace抑制劑，血管緊張素-2受體拮抗劑和血小板聚集抑制劑。
本發明的化合物也可以與下述物質組合使用骨質疏松癥藥物例如roloxifene，屈洛昔芬，拉索昔芬或fosomax和免疫抑制劑例如FK-506和雷帕霉素。
本發明的化合物也可以與下述物質組合使用CNS藥物例如抗抑郁藥，例如舍曲林，抗帕金森病藥物例如塞利吉林，左旋多巴，Requip，普拉克索，MAOB抑制劑例如selegine和雷沙吉蘭，comP抑制劑例如托卡朋，A-2抑制劑，多巴胺重攝取抑制劑，NMDA拮抗劑，煙堿激動劑，多巴胺激動劑和神經元氧化亞氮合酶的抑制劑，和抗-阿爾茨海默病藥物例如多奈哌齊，他克林，COX-2抑制劑，丙戊茶堿或metryfonate。
本發明也包括用于治療哺乳動物、包括人中的狀況的藥物組合物，所述狀況可以通過抑制ERK/MAP激酶來治療，其包含在這樣的治療中有效的量的式I或II化合物和藥學上可接受的載體。
本發明還提供了治療炎性障礙的方法，包括，但不限于，關節炎，增生性血管病，ARDS(急性呼吸窘迫綜合征)，細胞因子-介導的毒性，膿毒癥，敗血癥性休克，銀屑病，白介素-2毒性，哮喘，MIF-介導的狀況，自身免疫病(包括，但不限于，類風濕性關節炎，胰島素依賴型糖尿病，多發性硬化，移植物抗宿主疾病，狼瘡綜合征)，腫瘤生長或血管發生或特征在于局部的或全身的MIF釋放或合成的任何狀況，該方法包括施用有效量的具有異唑啉部分的化合物，其中該異唑啉部分能與MIF蛋白的至少一個氨基酸殘基形成穩定的共價相互作用。優選地，相互作用發生在MIF蛋白的互變異構酶活性的活性部位或其附近。本發明還提供了藥物組合物，其包含具有異唑啉或異唑啉-有關的部分的化合物和藥學上可接受的載體，其中該部分能與MIF蛋白的至少一個氨基酸殘基形成穩定的共價相互作用。
本發明涉及與抑制巨噬細胞游走抑制因子(MIF)活性有關的化合物，組合物，其制備方法和使用方法。該化合物包含一類包含任選地取代的異唑啉環系統的低分子量化合物，其能起MIF的抑制劑的作用，且也能抑制受MIF活性影響的其它細胞因子，包括IL-1，IL-2，IL-6，IL-8，IFN-γ和TNF。本發明也包括治療或預防哺乳動物、優選人中的障礙的方法，所述障礙可以通過抑制ERK/MAP途徑來治療或預防，該方法包括給所述哺乳動物施用有效量的化合物。該化合物可以用于治療人或其它哺乳動物中的許多疾病，包括任何疾病狀態，其由這樣的哺乳動物的細胞(例如，但不限于，單核細胞和/或巨噬細胞)過量的或失調的MIF，IL-1，IL-2，IL-6，IL-8，IFN-γ和TNF產生而加重或造成，或可以通過抑制ERK/MAP途徑來調控的任何疾病狀態。
本發明的一個實施方案提供了一類新的結構上與異唑啉有關的MIF和其它細胞因子的抑制劑，其適用于中和內源的和外源的MIF和其它細胞因子。因此，本發明提供了一類抑制劑化合物。該類化合物概括地由本文的通式I和II描述。除非另有說明，結構式I和II和所述的取代基如本文所述。
根據本文的教導，通過具有本領域的普通技術的有機化學人員已知的多種途徑，可以合成所述化合物。
實施例 已經概括地描述了本發明，參考某些具體的實施例，可以進一步得到理解，除非另有說明，在本文中提供的實施例僅僅用于解釋目的，無意進行限制。
實施例1 靶分子的結構 1A 1B
R R --- --- OH OH O-異丁基O-異丁基 N-異丁基N-異丁基 現在參考
圖1A中的苯基系列反應圖 向氯肟(化合物8，14.8g)在THF(100ml)中的溶液中，加入三乙胺(14.2g)，并將溶液冷卻至5-10℃。向上述溶液中，緩慢加入苯乙烯基乙酸甲酯(5g)，并將得到的溶液在室溫攪拌24小時。蒸餾去除溶劑，將殘余物溶于乙酸乙酯(100ml)，并用水(2×50ml)、然后用鹽水溶液洗滌。經無水硫酸鈉干燥有機層，過濾，并濃縮成殘余物。TLC表明，形成了2種區域異構體(化合物23a和23b)。對作為2種區域異構體的混合物的黃色固體(25g)，采取水解步驟。
將粗反應物質(化合物23a和23b，25g)吸收于甲醇(200ml)中，并加入25％氫氧化鈉溶液(13.0ml)。將得到的溶液回流2小時。蒸餾去除溶劑，用水(100ml)稀釋殘余物，并用鹽酸(2M)調至pH2。用乙酸乙酯(2×200ml)萃取化合物。用鹽水(100ml)進一步洗滌有機層。經無水硫酸鈉干燥得到的有機層，過濾，并濃縮。通過柱色譜(100-200目硅膠，50％乙酸乙酯-石油醚)，純化2種異構體(化合物24a和24b)的混合物，產生白色固體狀的24a(0.700g)。取該物質，不進一步表征。
將芐基化的酸衍生物(化合物24a，0.300g)溶于乙醇(60ml)中，并加入10％碳披鈀。使用氣球壓(balloon pressure)，氫化反應混合物4小時。通過硅藻土墊，過濾反應混合物，并用乙醇(30ml)洗滌濾床。蒸發乙醇，得到殘余物。使用60-120目硅膠和作為洗脫劑的10％甲醇-氯仿，通過柱色譜進一步純化化合物25a，產生米色固體狀的純25a(0.060g)。熔點203-206℃。
HPLC條件 柱Symmetry shield RP-18(4.6×150)mm 最大流動相0.01M KH2PO4(PH＝2.5)∶乙腈(70∶30) 流速1.0mL/min；波長215nm 保留時間13.33；純度92.38％ IR(KBr，vmax)3382，3035，1704，1607，1516，1433，1219，1173，872. 1H NMR(DMSO-d6，300MHz)；δ12.3(br.s，1H)，9.9(br.s，1H)，7.3(d，2H)，7.2(m，5H)，6.8(d，2H)，4.8(d，1H)，4.7(m，1H)，2.7(m，2H). 質量m/z.298(M+1)。
在0℃，向芐基化的酸衍生物(化合物24a，0.300g)中，加入亞硫酰氯(1ml)，將得到的澄清溶液在室溫攪拌30分鐘。在減壓(10mmHg)下，去除多余的亞硫酰氯。向殘余物中，加入異丁醇(1.6g)，將反應混合物在室溫攪拌2小時。用乙酸乙酯(5ml)稀釋溶液，并用水(2×5ml)洗滌。將有機層濃縮成殘余物。通過柱色譜(60-120目硅膠，20％乙酸乙酯-石油醚)，純化化合物26a，產生液體狀的26a(0.150g)。
將芐基化的酸衍生物(化合物26a，0.150g)溶于乙醇(15ml)，并加入10％碳披鈀。使用氣球壓氫化反應混合物4小時。通過硅藻土墊，過濾反應混合物，并用熱乙醇(30ml)洗滌濾床。蒸發乙醇，產生殘余物。使用100-200目硅膠和作為洗脫劑的40％乙酸乙酯-石油醚，通過柱色譜進一步純化酯27a，產生固體狀的27a(0.060g)。熔點143-146℃. HPLC條件 柱Zorbax SBC-18(4.6×250)mm 最大流動相0.1％TFA∶乙腈(50∶50) 流速1.0mL/min；波長275nm 保留時間.18.93min；純度95.10％ IR(KBr，vmax)3407，2961，1707，1608，1516，1428，1346，1279，1213，1169，1050，1005，877，700cm-1.1H NMR(DMSO-d6，300MHz)；δ9.8(s，1H)，7.6(d，2H)，7.3-7.5(m，5H)，6.8(d，2H)，4.9(d，1H)，4.8(m，1H)，3.9(d，2H)，2.8(2dd，2H)，1.9(m，1H)，0.9(d，6H).質量m/z.354(M+1)，235； 在0℃，向芐基化的酸衍生物(化合物24a，0.300g)中，加入亞硫酰氯(1ml)，將得到的澄清溶液在室溫攪拌30分鐘。在減壓(10mm-Hg)下，去除多余的亞硫酰氯，并向殘余物中加入異丁基胺(1.46g)，在室溫攪拌反應2小時。用乙酸乙酯(5ml)稀釋溶液，并用水(2×5ml)洗滌，將有機層濃縮成殘余物。通過柱色譜(60-120目硅膠，30％乙酸乙酯-石油醚)，純化化合物28a，產生液體狀的純28a(0.180g)。化合物用于下一步，不進一步表征。
將芐基化的酰胺衍生物(化合物28a，0.150g)溶于乙醇(15ml)，并加入10％碳披鈀。使用氣球壓，氫化反應混合物4小時。通過硅藻土墊，過濾反應混合物，并用熱乙醇(30ml)洗滌濾床。蒸發乙醇，產生殘余物。使用100-200目硅膠和作為洗脫劑的40％乙酸乙酯-石油醚，通過柱色譜，進一步純化化合物29a，產生固體狀的目標產物29a(0.060g)。熔點144-149℃。
HPLC條件 柱Symmetry C-18(4.6×250)mm 最大流動相0.01M KH2PO4(PH＝2.5)∶乙腈(60∶40) 流速0.6mL/min；波長270nm 保留時間21.38min；純度92.35％ IR(KBr，vmax)3373，2959，1647，1607，1517，1440，1273，1171，882，839，700cm-1.1H NMR(CDC13，300MHz)，δ7.5(d，.2H)，7.3(m，5H)，6.8(d，2H)，6.1-6.2(2br.s，2H)，4.8(m，1H)，4.7(d，1H)，3.1(m，2H)，2.7(m，2H)，1.8(m，1H)，0.8(m，6H).質量m/z.353(M+1)，335，232. 現在參考圖1B中的苯基系列反應圖 向氯肟(化合物8，14.8g)在THF(100ml)中的溶液中，加入三乙胺(14.2g)，并將溶液冷卻至5-10℃。向上述溶液中，緩慢加入苯乙烯基乙酸甲酯(5.0g)，并將得到的溶液在室溫攪拌24小時。然后通過蒸餾去除溶劑，將殘余物溶于乙酸乙酯(100ml)，并用水(2×50ml)、然后用鹽水溶液洗滌。經無水硫酸鈉干燥有機層，濃縮成殘余物。TLC表明，形成了2種區域異構體(化合物23a和23b)。對2種區域異構體的黃色固體混合物(粗質量25g)，采取水解步驟。
將粗23a和23b(25.0g)吸收于甲醇(200ml)中，并加入氫氧化鈉溶液(25％，3.24g)，將得到的溶液回流2小時。蒸餾去除溶劑，用水(100ml)稀釋殘余物，并用鹽酸(2M)酸化至pH2。用乙酸乙酯(2×200ml)萃取化合物。用鹽水(100ml)進一步洗滌有機層。經無水硫酸鈉干燥得到的有機層，過濾，并真空濃縮。通過柱色譜(100-200目硅膠，50％乙酸乙酯-石油醚)，進一步純化2種異構體(化合物24a和24b)的混合物，產生白色晶體固體狀的24b(1.1g)。該化合物用于下一步。
將芐基化的酸衍生物(24b，0.300g)溶于乙醇(60ml)中，隨后加入10％碳披鈀(0.060g)。使用氣球壓，氫化反應混合物4小時。通過硅藻土床，過濾反應混合物，并用乙醇(30ml)洗滌濾床。蒸發乙醇，得到殘余物25b。使用60-120目硅膠和作為洗脫劑的10％甲醇-氯仿，通過柱色譜進一步純化化合物25b，產生米色固體狀的25b(0.050g)(熔點153-159℃)。
IR(KBr，vmax)3150，1707，1600，1517，1437，1350，1275，961，755cm-1.1H NMR(CD3OD，300MHz)；δ7.3(d，2H)，7.2(m，5H)，6.8(d，2H)，5.5(d，1H)，4.0(m，1H)，2.7(m，2H).質量m/z.296(M-1)，252，171，133. 在0℃，向芐基化的酸衍生物(24b，0.300g)中，加入亞硫酰氯(1ml)。將得到的澄清溶液在室溫攪拌30分鐘。在減壓(10mmHg)下，去除多余的亞硫酰氯。向殘余物中，加入異丁醇(1.6g)，將溶液在室溫攪拌2小時。用乙酸乙酯(5ml)稀釋溶液，并用水(2×5ml)萃取。將有機層濃縮成殘余物。通過柱色譜(60-120目硅膠，20％乙酸乙酯-石油醚)，純化化合物26b。分離液體狀的產物(180mg)。
將芐基化的酸衍生物(化合物26b，0.150g)溶于乙醇(15ml)，并加入碳披鈀(0.030g)。使用氣球壓氫化反應混合物4小時。通過硅藻土墊，過濾反應混合物，并用熱乙醇(30ml)洗滌濾床。蒸發乙醇，產生殘余物。使用100-200目硅膠和作為洗脫劑的40％乙酸乙酯-石油醚，通過柱色譜進一步純化化合物27b，產生米色固體狀的目標27b(80mg)。熔點136-143℃。
HPLC條件 柱Symmetry shield RP-18(4.6×150)mm 流動相0.01M KH2PO4(PH＝2.5)∶乙腈(40∶60) 流速1.0mL/min.；波長275nm 保留時間7.13min.；純度96.4％ IR(KBr，vmax)3174，2965，1735，160，1517，1350，1274，1171，752cm-1. 1H NMR(CD3OD，300MHz)；δ7.6(d，2H)，7.3-7.5(m，5H)，6.8(d，2H)，5.5(d，1H)，4.1(m，1H)，3.9(m，2H)，2.8(2dd，2H)，1.9(m，1H)，0.9(d，6H).質量m/z.354(M+1)，335，307. 在0℃，向芐基化的酸衍生物(化合物24b，0.300g)中，加入亞硫酰氯(1ml)，將得到的澄清溶液在室溫攪拌30分鐘。在減壓(10mmHg)下，去除多余的亞硫酰氯。向殘余物中，加入異丁基胺(2ml)，將溶液在室溫攪拌2小時。用乙酸乙酯(5ml)稀釋溶液，并用水(2×5ml)洗滌。將有機層真空濃縮成殘余物。通過柱色譜(60-120目硅膠，30％乙酸乙酯-石油醚)，純化化合物28b，產生液體狀的28b(170mg)。
向芐基化的酰胺衍生物(化合物28b，0.150g)在乙醇(15ml)中的溶液中，加入碳披鈀，并使用氣球壓，在室溫氫化反應混合物4小時。通過硅藻土床，過濾反應混合物，并用熱乙醇(30ml)洗滌濾床。蒸發乙醇，產生殘余物。使用100-200目硅膠和作為洗脫劑的40％乙酸乙酯-石油醚，通過柱色譜進一步純化化合物29b，產生0.060g固體狀的純29b。熔點185-190℃。
HPLC條件 柱Symmetry C-18(4.6×250)mm 流動相0.05％TFA∶乙腈(55∶45) 流速1.0mL/min.；波長210nm 保留時間13.57min.；純度98.16％ IR(KBr，vmax)3396，2961，1649，1606，1544，1441，1346，1278，1241，1172，839，747cm-1. 1HNMR(DMSO-d6，300MHz)，δ8.1(t，1H)，(br.s，1H)，7.5(d，2H)，7.3(m，5H)，6.8(d，2H)，5.5(d，1H)，4.0(m，1H)，3.0(m，2H)，2.5(m，2H)，1.7(m，1H)，0.8(m，6H).質量m/z.353(M+1)，335，234. 實施例2 靶分子的結構 2A 2B
R R ------ OH O-異丁基 O-異丁基 N-異丁基 N-異丁基 現在參考圖2A中的丙基系列反應圖 向4-羥基苯甲醛(化合物5，10g)在THF(200ml)中的溶液中，加入碳酸鉀(16.95g)，隨后加入芐基溴(16.8g)，并將得到的反應混合物回流24小時。將反應混合物冷卻至室溫，并在減壓(10mm-Hg)下去除THF。將殘余物溶于乙酸乙酯(100ml)，并用水(100ml)、隨后用鹽水(100ml)洗滌。經無水硫酸鈉干燥有機層，過濾，并濃縮。蒸發溶劑，得到殘余物，用石油醚磨碎，產生晶體狀固體。過濾固體化合物，用石油醚洗滌，并在減壓(10mm-Hg)下干燥，得到米色晶體狀固體(化合物6，15.6g)。
向芐基化的衍生物(化合物6，10g)在甲醇(100ml)中的溶液中，加入鹽酸羥胺(4.9g)和乙酸鈉(9.6g)。將得到的反應混合物回流3小時。將反應物冷卻至室溫。在減壓(10mm-Hg)下去除溶劑，將殘余物溶于乙酸乙酯(100ml)，用水(100ml)、隨后用鹽水(100ml)洗滌。經無水硫酸鈉干燥有機層，過濾，并濃縮。蒸發溶劑，產生白色晶體狀固體，用石油醚沖洗，在減壓(10mm-Hg)下干燥，產生化合物7(8.0g)。
在0℃，經30分鐘的時間，向肟衍生物(化合物7，10g)在THF(100ml)中的溶液中，加入在THF中的N-氯琥珀酰亞胺(8.8g)，并在0-5℃攪拌得到的溶液2-3小時。在40℃，在減壓下，蒸發溶劑。將殘余物溶于乙酸乙酯(100ml)，用水(100ml)、隨后用鹽水(100ml)洗滌。經無水硫酸鈉干燥有機層，過濾，并濃縮成殘余物。用己烷洗滌殘余物，并在減壓(10mm-Hg)下干燥，產生淺黃色固體(化合物8，11.0g)。
向氯肟(化合物8，16.74g)在THF(100ml)中的溶液中，加入三乙胺(14.2g)，將反應混合物冷卻至5-10℃。向該溶液中，緩慢加入3-庚烯酸甲酯(4.5g)，并將得到的溶液在室溫攪拌24小時。在減壓(10mm-Hg)下去除溶劑，將殘余物溶于乙酸乙酯(100ml)，用水(2×50ml)、隨后用鹽水溶液洗滌。經無水硫酸鈉干燥有機層，過濾，并濃縮成殘余物。TLC表明，形成了2種區域異構體(結構9a和結構9b)。2種區域異構體的粗質量(25g)用于水解步驟。
將粗反應物質(25g)吸收于甲醇(200ml)中，并加入氫氧化鈉溶液(25％，13.6ml)。將得到的溶液回流2小時。蒸餾去除溶劑，用水(100ml)稀釋殘余物，并用鹽酸(2M)將pH調節至2。用乙酸乙酯(2×200ml)萃取化合物。用鹽水(100ml)再次洗滌合并的有機層，經無水硫酸鈉干燥得到的有機層，過濾，并濃縮。通過柱色譜(100-200目硅膠，50％.乙酸乙酯-石油醚)，進一步純化2種異構體的混合物，產生白色固體狀的化合物10a(0.700g)。
將酸衍生物(化合物10a，0.300g)溶于乙醇(30ml)，并加入碳披鈀(0.030g)。使用氣球壓，氫化溶液4小時。經硅藻土墊過濾反應混合物，并用乙醇(30ml)洗滌濾床。蒸發乙醇，得到殘余物。使用60-120目硅膠和作為洗脫劑的30％乙酸乙酯-石油醚，通過柱色譜進一步純化產物，產生米色固體狀的11a(0.060g)。熔點175-177C HPLC條件 柱Symmetry shield RP-18(4.6×150)nm 最大流動相0.01 M KH2PO4(PH＝2.5)∶乙腈(65∶35) 流速1.0ml/min；波長210nm 保留時間5.49min.；純度94.44％ IR(KBr，vmax)3372，3284，2931，1703，1607，1516，1435，1351，1283，1220，1171，943，878，834，674cm-1.1H NMR(DMSO-d6，300MHz)；δ12.2(br.s，1H，10(br.s，1H)，7.5(d，2H)，6.8(d，2H)，4.7(m，1H)，3.5(m，1H)，2.5(m，2H)，1.2-1.4(m，4H)，0.8(t，3H).質量m/z，263(M+1)，219，178. 在0℃，向化合物10a(0.300g)中加入亞硫酰氯(1ml)，并在室溫攪拌得到的澄清溶液30分鐘。在減壓(10mm-Hg)下，去除多余的亞硫酰氯，向殘余物中加入異丁醇(1.6g)，并將得到的溶液在室溫攪拌2小時。用乙酸乙酯(5ml)稀釋溶液，并用水(2×5ml)洗滌。將有機層濃縮成殘余物，通過柱色譜(60-120目硅膠，20％乙酸乙酯-石油醚)純化，產生液體狀的12a(0.150g)。
將化合物12a(0.150g)溶于乙醇(15ml)，并加入10％碳披鈀(0.30g)。使用氣球壓，氫化溶液4小時。經硅藻土墊過濾反應混合物，并用熱乙醇(30ml)洗滌濾床。蒸發乙醇，得到殘余物，使用100-200目硅膠和作為洗脫劑的30％乙酸乙酯-石油醚，通過柱色譜進一步純化產物，產生液體狀的13a(0.060g)。產量60mg. HPLC條件 柱Symmetry Sheild RP-18(4.6×150) 最大流動相0.01M KH2PO4(PH＝5)∶乙腈 流速1.0ml/min波長270nm 保留時間5.82min；純度96.30％ IR(KBr，vmax)3390，2961，1729，1607，1516，1464，1350，1272，1173，738cm-1.1H NMR(CDC13，300MHz)；δ7.5(d，2H)，6.9(d，2H)，4.8(m，1H)，3.9(d，2H)，3.4(m，1H)，2.6(2dd，2H)，1.9(m，1H)，1.3-1.5(m，4H)，0.8(m，9H).質量m/z.320(M+1). 在0℃，向化合物10a(0.300g)中加入亞硫酰氯(1ml)，并在室溫攪拌得到的澄清溶液30分鐘。在減壓(10mm-Hg)下，去除多余的亞硫酰氯，向殘余物中加入異丁胺(1.46g)，將溶液在室溫攪拌2小時。用乙酸乙酯(5ml)稀釋溶液，并用水(2×5ml)萃取。將有機層濃縮成殘余物，通過柱色譜(60-120目硅膠，30％乙酸乙酯-石油醚)純化，產生液體狀的14a(0.180g)。
將化合物14a(0.150g)溶于乙醇(15ml)，并加入10％碳披鈀(0.030g)。使用氣球壓，氫化溶液4小時。經硅藻土墊過濾反應混合物，并用熱乙醇(30ml)洗滌濾床。蒸發乙醇，得到殘余物，使用100-200目硅膠和作為洗脫劑的30％乙酸乙酯-石油醚，通過柱色譜進一步純化產物，產生固體狀的15a(0.060g)。熔點136.6-143.5℃ HPLC條件 柱Zorbax SBC-18(4.6×250)mm 最大流動相水∶乙腈(60∶40) 流速1.0ml/min；波長220nm 保留時間10.28min純度95.10％ IR(KBR，vmax)3296，2934，1646，1608，1517，1462，1352，1278，1172，880，838，605cm-1.1H NMR(CDC13，300MHz)；δ7.5(d，2H)，6.8(d，2H)，6.3(br.t，1H)，4.8(m，1H)，3.4(m，1H)，3.1(m，2H)，2.6(2dd，2H)，1.8(m，1H)，1.3-1.5(m，4H)，0.8(m，9H).質量m/z319(M+1)，301，200. 現在參考圖2B中的丙基系列反應圖 向4-羥基苯甲醛(化合物5，10.0g)在THF(200ml)中的溶液中，加入碳酸鉀(16.95g)，隨后加入芐基溴(16.8g)，并將得到的反應混合物回流24小時。將反應混合物冷卻至室溫，并在減壓(10mm-Hg)下去除THF。將殘余物溶于乙酸乙酯(100ml)，并用水(100ml)、隨后用鹽水(100ml)洗滌。經無水硫酸鈉干燥有機層。蒸發溶劑，得到殘余物，用石油醚潷析殘余物，產生晶體狀固體。過濾固體化合物，用石油醚洗滌，并在減壓(10mm-Hg)下干燥，得到米色晶體狀固體(化合物6，15.6g)。取該化合物，不進一步表征。
向芐基化的衍生物(化合物6，10.0g)在甲醇(100ml)中的溶液中，加入鹽酸羥胺(4.9g)和乙酸鈉(9.6g)。將得到的反應混合物回流3小時。將反應物冷卻至室溫，在減壓(10mm-Hg)下去除溶劑，將殘余物溶于乙酸乙酯(100ml)，用水(100ml)、隨后用鹽水(100ml)洗滌。經無水硫酸鈉干燥有機層，過濾，并濃縮，產生白色晶體狀固體(化合物7)，用石油醚沖洗，在減壓(10mm-Hg)下干燥，產生8.0g化合物7。取該化合物，不進一步表征。
在0℃，經30分鐘的時間，向肟衍生物(化合物7，10.0g)在THF(90ml)中的溶液中，加入在THF(10ml)中的N-氯琥珀酰亞胺(8.8g)，并在0-5℃攪拌得到的溶液2-3小時。在40℃，在減壓下，蒸發溶劑。將殘余物溶于乙酸乙酯(100ml)，用水(100ml)、隨后用鹽水(100ml)洗滌。經無水硫酸鈉干燥有機層，過濾，并濃縮成殘余物。用己烷洗滌殘余物，產生晶體狀固體(化合物8)，在減壓(10mm-Hg)下干燥，產生11.0g淺黃色半固體狀的氯-肟8。取產物，不進一步表征。
向氯肟(化合物8，16.74g)在THF(100ml)中的溶液中，加入三乙胺(14.2g)，將反應混合物冷卻至5-10℃。向該溶液中，緩慢加入3-庚烯酸甲酯(4.5g)，并將得到的溶液在室溫攪拌24小時。在減壓(10mm-Hg)下去除溶劑。將殘余物溶于乙酸乙酯(100ml)，用水(2×50ml)、隨后用鹽水溶液洗滌。經無水硫酸鈉干燥有機層，過濾，并濃縮成殘余物。TLC表明，形成了2種區域異構體(結構9a和結構9b)。2種區域異構體的黃色固體粗質量(25g)用于水解步驟。
TLC系統20％乙酸乙酯-石油醚.Rf0.4 將9a和9b的粗反應混合物(25g)吸收于甲醇(200ml)中，并加入氫氧化鈉溶液(25％，13.6ml)。將得到的溶液回流2小時。蒸餾去除溶劑，用水(100ml)稀釋殘余物，并用鹽酸(2M)將pH調節至2。用乙酸乙酯(2×200ml)萃取化合物。用鹽水(100ml)再次洗滌合并的有機層。經無水硫酸鈉干燥得到的有機層，過濾，并濃縮。通過柱色譜(100-200目硅膠，50％.乙酸乙酯-石油醚)，進一步純化2種異構體(化合物10a和10b)的混合物，產生白色晶體固體狀的10b(1.3g)，取它，不進一步表征。
在0℃，向化合物10b(0.300g)中加入亞硫酰氯(1ml)，并在室溫攪拌得到的澄清溶液30分鐘。在減壓(10mm-Hg)下，去除多余的亞硫酰氯，向殘余物中加入異丁醇(1.6g)，并將得到的溶液在室溫攪拌2小時。用乙酸乙酯(5ml)稀釋溶液，并用水(2×5ml)洗滌。將有機層濃縮成殘余物，通過柱色譜(60-120目硅膠，20％乙酸乙酯-石油醚)純化化合物12b，產生液體狀的12b(0.150g)。取該物質，用于下一步驟。
將化合物12b(0.150g)溶于乙醇(15ml)，然后加入碳披鈀(0.030g)。使用氣球壓，氫化溶液4小時。經硅藻土墊過濾溶液，并用熱乙醇(30ml)洗滌濾床。蒸發乙醇，得到殘余物，使用100-200目硅膠和作為洗脫劑的30％乙酸乙酯-石油醚，通過柱色譜進一步純化產物，產生淺黃色液體狀的13b(70mg)。
HPLC條件 柱Symmetry Sheild RP-18(4.6×150)mm 最大流動相0.01M KH2PO4(PH＝2.5)∶乙腈(45∶55) 流速1.0ml/min；波長270nm 保留時間8.99min；純度92.24％ IR(KBr，vmax)3781，3377，2962，1728，1602，1267，1170，738cm-1.1H NMR(DMSO-d6，300MHz)；δ7.5(d，2H)，6.8(d，2H)，4.3(m，1H)，3.9(m，2H)，3.8(m，1H)，2.6(2dd，2H)，1.9(m，1H)，1.3-1.5(m，4H)，0.8(m，9H).質量m/z.320(M+1)，302，248，192. 在0℃，向化合物10b(0.300g)中加入亞硫酰氯(1ml)，并在室溫攪拌得到的澄清溶液30分鐘。在減壓(10mm-Hg)下，去除多余的亞硫酰氯，向殘余物中加入異丁胺(1.46g)，將溶液在室溫攪拌2小時。然后，用乙酸乙酯(5ml)稀釋溶液，并用水(2×5ml)洗滌。將有機層濃縮成殘余物，通過柱色譜(60-120目硅膠，30％乙酸乙酯-石油醚)純化殘余物，產生液體狀的14b(0.180g)。
將化合物14b(0.150g)溶于乙醇(15ml)，然后加入碳披鈀(0.030g)。使用氣球壓，氫化溶液4小時。經硅藻土墊過濾反應混合物，并用熱乙醇(30ml)洗滌濾床。蒸發乙醇，得到殘余物，使用100-200目硅膠和作為洗脫劑的30％乙酸乙酯-石油醚，通過柱色譜進一步純化產物，產生淺褐色半固體狀的15b(0.080g)。
HPLC條件 柱Symmetry Sheild RP-18(4.6×150)mm 最大流動相0.01M KH2PO4∶乙腈(55∶45) 流速1.0ml/min；波長210nm 保留時間6.27min；純度93.87％ IR(KBr，vmax)3416，3300，2924，1653，1610，1550，1515，1348，1275，809cm-1.1H NMR(CDC13，300MHz)；δ8.2(br.s，1H)，7.5(d，2H)，6.8(d，2H)，6.2(m，1H)，4.4(m，1H)，3.8(m，1H)，3.1(m，2H)，2.6(2dd，2H)，1.8(m，1H)，1.3-1.5(m，4H)，0.8(m，9H).質量m/z319(M+1)，301，200. 實施例3 靶分子的結構 3A 3B
R R --- --- OH OH O-異丁基O-異丁基 N-異丁基N-異丁基 現在參考圖3A中的丁基系列反應圖 向氯肟衍生物(化合物8，16.74g)在THF(100ml)中的溶液中，加入三乙胺(14.2g)，并將溶液冷卻至5-10℃。向該溶液中，緩慢加入3-辛烯酸甲酯(5.0g)，并將得到的溶液在室溫攪拌24小時。蒸餾去除溶劑，將殘余物溶于乙酸乙酯(100ml)，用水(2×50ml)、隨后用鹽水洗滌。經無水硫酸鈉干燥有機層，過濾，并濃縮成殘余物。TLC表明，形成了黃色固體狀的2種區域異構體(化合物16a和16b，25g)。取粗物質，進行酯水解步驟。
將粗反應物質(16a和16b，25g)吸收于甲醇(200ml)，加入25％氫氧化鈉溶液。將得到的溶液回流2小時。在減壓(10mm-Hg)下去除溶劑，用水(100ml)稀釋殘余物，并用鹽酸(2M)調至pH2。用乙酸乙酯(2×200ml)萃取溶液。用鹽水(100ml)再次洗滌有機層，經無水硫酸鈉干燥得到的有機層，過濾，并濃縮。通過柱色譜(100-200目硅膠40％乙酸乙酯-石油醚)純化混合物，得到白色固體狀的17a(0.700g)。
將芐基化的酸衍生物(化合物17a，0.300g)溶于乙醇(60ml)，并加入碳披鈀(0.060g)。使用氣球壓，氫化溶液4小時。通過硅藻土墊，過濾反應混合物，并用熱乙醇(30ml)洗滌濾床。在減壓下去除乙醇，得到殘余物，使用60-120目硅膠和作為洗脫劑的10％甲醇和氯仿，通過柱色譜進一步純化產物，產生米色固體狀的18 a(0.060g)。熔點174-176℃ HPLC條件 柱Symmetry shield(4.6×150)mm 流動相0.01M KH2PO4(2.5)∶ACN(60∶40) 流速1.0ml/min；波長225nm 保留時間5.53min；純度94.35％ IR(KBr vmax)3406，2930，1701，1606，1516，1434，1351，1283，1221，1170，936，828，833，675cm-1.1H NMR(DMSO-d6，300MHz)；δ10(s.br，1H)，7.5(d，2H)，6.9(d，2H)，4.8(m，1H)，3.4(m，1H)，2.5(m，2H)，1.2-1.4(m，6H)，0.8(t，3H).質量m/z.278(M+1)，234，192，65. 在0℃，向芐基化的酸衍生物(化合物17a，0.300g)中加入亞硫酰氯(1ml)，并在室溫攪拌得到的澄清溶液30分鐘。在減壓(10mm-Hg)下，去除多余的亞硫酰氯，向殘余物中加入異丁醇(1.6g)，并將溶液在室溫攪拌2小時。用乙酸乙酯(5ml)稀釋溶液，并用水(2×5ml)、隨后用鹽水洗滌。將有機層濃縮成殘余物，通過柱色譜(60-120目硅膠，石油醚和乙酸乙酯(10％))進一步純化，產生液體狀的19a(0.150g)。
反應時間4小時 反應溫度25-30℃ 將芐基化的酸衍生物(化合物19a，0.150g)溶于乙醇(15ml)，并加入10％碳披鈀。使用氣球壓，氫化溶液4小時。通過硅藻土墊，過濾反應混合物，并用熱乙醇(30ml)洗滌濾床。蒸發乙醇，產生殘余物，使用100-200目硅膠和作為洗脫劑的20％乙酸乙酯-石油醚，通過柱色譜進一步純化產物，產生20a(0.060g)。
HPLC條件 柱Symmetry shield(4.6×150)mm 流動相0.01M KH2PO4(PH＝2.5)∶乙腈(40∶60) 流速1.0ml/min；波長270nm 保留時間7.51min；純度97.19％ IR(KBr，vmax)3378，2960，1729，1606，1517，1464，1352，1276，1173，993，888，839cm-1.1H NMR(CDC13，300MHz)；δ7.5(d，2H)，6.9(d，2H)，5.3(br.s，1H)，4.8(m，1H)，3.8(d，2H)，3.4(m，1H)，2.6(2dd，2H)，1.9(m，1H)，1.3-1.6(m，6H)，0.9(d，6H)，0.8(t，3H).質量m/z.334(M+1)，192. 在0℃，向芐基化的酸衍生物(化合物17a，0.300g)中加入亞硫酰氯(1ml)，并在室溫攪拌得到的澄清溶液30分鐘。在減壓(10mm-Hg)下，去除多余的亞硫酰氯，向殘余物中加入異丁胺(1.46g)，將所得溶液在室溫攪拌2小時。用乙酸乙酯(5ml)稀釋溶液，并用水(2×5ml)、然后用鹽水洗滌。將有機層濃縮成殘余物，通過柱色譜(60-120目硅膠，20％乙酸乙酯-石油醚)進一步純化，產生液體狀的21a(0.180g)。
將芐基化的酰胺衍生物(化合物21a，0.150g)溶于乙醇(15ml)，并加入10％碳披鈀。使用氣球壓，氫化溶液4小時。經硅藻土墊過濾反應混合物，并用熱乙醇(30ml)洗滌濾床。蒸發乙醇，得到殘余物，使用100-200目硅膠和作為洗脫劑的20％乙酸乙酯-石油醚，通過柱色譜進一步純化產物，產生油狀固體22a(0.060g)。
HPLC條件 柱Symmetry C-18(4.6×250)mm 最大流動相水∶乙腈(40∶60) 流速0.8ml/min；波長210nm 保留時間5.65min；純度94.73％ IR(KBr vmax)3298，2959，2930，1646，1607，1517，1461，1353，1278，1172，888，838cm-1.1H NMR(CDC13，300MHz)δ7.5(d，2H)，6.8(d，2H)，6.1(br.s，1H)，4.8(m，1H)，3.4(m，1H)，3.2(m，2H)，2.6(2dd，2H)，1.8(m，1H)，1.3(m，4H)，0.8(m，9H).質量m/z.333(M+1)，315，308，287，286 現在參考圖3B中的丁基系列反應圖 向氯肟衍生物(化合物8，16.74g)在THF(100ml)中的溶液中，加入三乙胺(14.2g)，并將溶液冷卻至5-10℃。向該溶液中，緩慢加入3-辛烯酸甲酯(5.0g)，并將得到的溶液在室溫攪拌24小時。蒸餾去除溶劑，將殘余物溶于乙酸乙酯(100ml)，并用水(2×50ml)、然后用鹽水洗滌。經無水硫酸鈉干燥有機層，過濾，并濃縮成殘余物。TLC表明，形成了2種區域異構體(化合物16a和16b)。取粗黃色固體(25g)，不經進一步純化，用于水解步驟。
將16a和16b的混合物(25.0g)吸收于甲醇(200ml)中，并加入25％氫氧化鈉溶液(13.6ml)。將得到的溶液回流2小時。在減壓(10mm-Hg)下去除溶劑，用水(100ml)稀釋殘余物，并用鹽酸(2M)調至pH2。用乙酸乙酯(2×200ml)萃取溶液。用鹽水(100ml)再次洗滌有機層，經無水硫酸鈉干燥得到的有機層，過濾，并濃縮。通過柱色譜(100-200目硅膠，40％乙酸乙酯-石油醚)，進一步純化2種異構體(化合物17a和17b)的混合物，產生白色固體狀的化合物17b(1.4g)。
將芐基化的酸衍生物(化合物17b，0.300g)溶于乙醇(60ml)，并加入10％碳披鈀。使用氣球壓，氫化溶液4小時。經硅藻土床過濾反應混合物，并用熱乙醇(30ml)洗滌濾床。在減壓下去除乙醇，使用60-120目硅膠和作為洗脫劑的10％甲醇和氯仿，通過柱色譜進一步純化殘余物。分離米色晶體狀的化合物18b(0.080g)。熔點163-168℃。
HPLC條件 柱Symmetry shield C-18(4.6×250)mm 最大流動相0.01M KH2PO4(PH＝2.5)∶乙腈(50∶50) 流速0.7ml/min；波長270nm 保留時間6.87min；純度95.72％ IR(KBr vmax)3209，2958，1711，1612，1597，1519，1434，1352，1274，909，838cm-1.1H NMR(DMSO-d6，300MHz)；δ10.0(s.br，1H)，7.5(d，2H)，6.9(d，2H)，4.5(m，1H)，3.7(m，1H)，2.5(m，2H)，1.5(m，2H)，1.2(m，4H)，0.8(m，3H).質量M/z.278(M+1). 在0℃，向芐基化的酸衍生物(化合物17b，0.300g)中加入亞硫酰氯(1ml)，并在室溫攪拌得到的澄清溶液30分鐘。在減壓(10mm-Hg)下，去除多余的亞硫酰氯，向殘余物中加入異丁醇(1.6g)，將溶液在室溫攪拌2小時。用乙酸乙酯(5ml)稀釋溶液，并用水(2×5ml)、然后用鹽水洗滌。將有機層濃縮成殘余物，通過柱色譜(60-120目硅膠，20％乙酸乙酯-石油醚)進一步純化殘余物，產生液體狀的19b(0.150g)。
將芐基化的酸衍生物(化合物19b，0.150g)溶于乙醇(15ml)，然后加入10％碳披鈀(0.030g)。使用氣球壓，氫化溶液4小時。經硅藻土床過濾反應混合物，并用熱乙醇(30ml)洗滌濾床。蒸發乙醇，得到殘余物，使用100-200目硅膠和作為洗脫劑的20％乙酸乙酯-石油醚，通過柱色譜進一步純化產物。分離固體狀的目標酯20b(0.060g)。熔點114-116℃. HPLC條件 柱Symmetry shield RP-18(4.6×150)mm 最大流動相0.01 M KH2PO4(PH＝2.5)∶乙腈(40∶60) 流速1.0ml/m in；波長270nm； 保留時間8.74min；純度97.76％ IR(KBr vmax)3159，2958，2870，1734，1614，1596，1519，1445，1354，1273，1236，1173，898，838cm-1.1H NMR(CDC13，300MHz)，δ7.5(d，2H)，6.9(d，2H)，5.8(br.m，1H)，4.4(m，1H)，3.9(m，2H)，3.7(m，1H)，2.6(2dd，2H)，1.9(m，1H)，1.3-1.6(m，6H)，0.8(m，9H).質量M/z.334(M+1). 在0℃，向芐基化的酸衍生物(化合物17b，0.300g)中加入亞硫酰氯(1ml)，并在室溫攪拌得到的澄清溶液30分鐘。在減壓(10mm-Hg)下，去除多余的亞硫酰氯。向殘余物中加入異丁基胺(1.46g)，將得到的溶液在室溫攪拌2小時。用乙酸乙酯(5ml)稀釋溶液，并用水(2×5ml)、然后用鹽水洗滌。將有機層濃縮成殘余物，通過柱色譜(60-120目硅膠，20％乙酸乙酯-石油醚)進一步純化化合物21b，產生液體狀的純21b(0.180g)。取該化合物，不進一步表征。
將芐基化的酰胺衍生物(化合物21b，0.150g)溶于乙醇(15ml)，然后加入10％碳披鈀。使用氣球壓，氫化溶液4小時。經硅藻土墊過濾反應混合物，并用熱乙醇(30ml)洗滌濾床。蒸發乙醇，得到殘余物，使用100-200目硅膠和作為洗脫劑的20％乙酸乙酯-石油醚，通過柱色譜進一步化合物22b，產生固體狀的純22b(0.060g)。熔點157-161℃ HPLC條件 柱Symmetry C-18(4.6×150)mm 最大流動相0.01M KH2PO4(PH＝2.5)∶乙腈(40∶60) 流速1.0ml/min；波長270nm 保留時間10.07min；純度91.43％ IR(KBr vmax)3286，2961，1653，1610，1558，1516，1461，1348，1277，1229，886，840cm-1.1H NMR(CDC13，300MHz)；δ7.5(d，2H)，6.8(d，2H)，6.1(br.s，1H)，4.8(m，1H)，3.3(m，1H)，2.6(2dd，2H)，1.8(m，1H)，1.3(m，4H)，0.8(m，9H).質量M/z.333(M+1)，315，214. 實施例4 靶分子的結構 4
R --- OH O-異丁基 N-異丁基 現在參考圖4中的呋喃基系列反應圖 向氯肟(化合物8，15.7g)在THF(100ml)中的溶液中，加入三乙胺(14.2g)，并將溶液冷卻至5-10℃。向上述溶液中，緩慢加入4-呋喃-2-基-丁-3-烯酸甲基酯(5.0g)，并將得到的溶液在室溫攪拌24h。蒸餾去除溶劑，將殘余物溶于乙酸乙酯(100ml)，并用水(2×50ml)洗滌。經無水硫酸鈉干燥有機層，過濾，濃縮成淺黃色液體(4.0g)。TLC表明，僅僅形成了單一異構體。將粗反應物質用于水解步驟。
將粗反應物質(化合物30，1.5g)吸收于甲醇(20ml)中，加入氫氧化鈉溶液(25％)(0.2g)。將得到的溶液在25-30℃攪拌16小時。蒸餾去除溶劑，用水(100ml)稀釋殘余物，并用鹽酸(2M)將pH調節至2。用乙酸乙酯(2×200ml)萃取羧酸衍生物，用鹽水(100ml)進一步洗滌有機層。經無水硫酸鈉干燥合并的有機層，干燥，并濃縮。通過柱色譜(100-200目硅膠，30％乙酸乙酯-石油醚)，進一步純化化合物31，為固體(800mg)。
將芐基化的酸衍生物(化合物31，0.150g)溶于乙醇(15ml)，并加入碳披鈀(0.030g)。使用氣球壓，氫化溶液4小時。經硅藻土床過濾反應混合物，并用熱乙醇(30ml)洗滌濾床。蒸發乙醇，得到殘余物。使用100-200目硅膠和作為洗脫劑的40％乙酸乙酯-石油醚，通過柱色譜進一步純化化合物32，產生米色固體狀的32(0.060g)。熔點192-194℃。
HPLC條件 柱Symmetry shield RP-18(4.6×250)mm 最大流動相0.01M KH2PO4(PH＝2.5)∶乙腈(60∶40) 流速0.8mL/min.；波長210nm 保留時間6.15min.；純度97.82％ IR(KBr.vmax)3149，2923，1711，1612，1592，1437，1352，1283，911，837，745cm-1.1H NMR(DMSO-d6，300MHz)；δ12.3(br.s，1H)，9.9(br.s，1H)，7.6(s，1H)，7.5(d，2H)，6.8(d，2H)，6.5(d，2H)，5.4(d，1H)，4.2(m，1H)，2.6(m，2H).質量m/z.288(M+1)，270，24 2，192，164，97. 在0℃，向芐基化的酸衍生物(化合物31，0.300g)中加入亞硫酰氯(1ml)，將得到的澄清溶液在室溫攪拌30分鐘。在減壓(10mm-Hg)下去除多余的亞硫酰氯。向殘余物中，加入異丁醇(1.6g)，并在室溫攪拌溶液2小時。用乙酸乙酯(5ml)稀釋溶液，并用水(2×5ml)洗滌。將有機層濃縮成殘余物，通過柱色譜(60-120目硅膠，20％乙酸乙酯-石油醚)純化。分離液體狀的產物33(0.180g)。
將芐基化的酸衍生物(化合物33，0.200g)溶于乙醇(15ml)，加入碳披鈀。使用氣球壓，氫化反應混合物4小時。經硅藻土墊過濾反應混合物，并用熱乙醇(30ml)洗滌濾床。蒸發乙醇，得到殘余物，使用100-200目硅膠和作為洗脫劑的40％乙酸乙酯-石油醚，通過柱色譜進一步純化產物，產生米色固體狀的34(0.80g)。熔點123-125℃。
HPLC條件 柱Symmetry C-18(94.6×250)mm 最大流動相0.01M KH2PO4∶乙腈(50∶50) 流速1.0mL/min.；波長215nm 保留時間13.58分鐘。；純度95.97％ IR(KBr.vmax)3781，3221，1735，1598，1517，1440，1348，1276，1228，1175，736cm-1.1H NMR(CDC13，300MHZ)，δ7.5(d，2H)，7.3(s，1H)，6.9(d，2H)，6.5(2d，2H)，5.5(d，1H)，5.2(br.s，1H)，4.2(m，1H)，3.8(d，2H)，2.8(2dd，2H)，1.9(m，1H)，0.8(d，6H).質量m/z.344(M+1)，326，248，192，151. 在0℃，向芐基化的酸衍生物(化合物31，0.500g)中加入亞硫酰氯(1ml)，并在室溫攪拌得到的澄清溶液30分鐘。在減壓(10mm-Hg)下，去除多余的亞硫酰氯，向殘余物中加入異丁基胺(1.46g)，將溶液在室溫攪拌2小時。然后，用乙酸乙酯(5ml)稀釋溶液，并用水(2×5ml)洗滌。將有機層濃縮成殘余物，通過柱色譜(60-120目硅膠，40％乙酸乙酯-石油醚)純化化合物，產生液體狀的35(0.280g)，其不作進一步表征。
將芐基化的酸衍生物(35)溶于乙醇(15ml)，并加入碳披鈀(10％w/w，0.030mg)。使用氣球壓，氫化溶液4小時。經硅藻土床過濾反應混合物，并用熱乙醇(30ml)洗滌濾床。蒸發乙醇，得到殘余物，使用100-200目硅膠和作為洗脫劑的40％乙酸乙酯-石油醚，通過柱色譜進一步純化產物，產生米色固體狀的36(0.60g)。熔點167-169℃。
HPLC條件 柱Symmetry C-18(4.6×150)mm 最大流動相0.01M KH2PO4(PH＝2.5)∶乙腈(60∶40) 流速1.0ml/min.；波長210nm 保留時間8.05min，純度98.17％ IR(KBr.vmax)3286，2961，1653，1608，1516，1350，1278，1231，1167，841，748.1H NMR(CDC13，300MHz)，δ7.5(d，2H)，7.3(s，1H)，6.9(d，2H)，6.3(d，2H)，5.4(br.s，1H)，5.3(d，1H)，4.3(m，1H)，3.1(m，2H)，2.6(m，2H)，1.8(m，1H)，0.8(m，6H).質量m/z.343(M+1)，325，275，224. 根據下述測定中的一個或多個，可以確定本發明的化合物對上述的各種障礙的活性。
材料和方法 合成。在下面的合成實施例中，以最高的商品質量，購買使用的所有試劑和溶劑。使用的所有溶劑都是購自Fisher的HPLC級。在JEOLEclipse 270波譜儀上記錄1H(270MHz)和13C NMR(67.5MHz)NMR波譜。以赫茲(Hz)為單位記錄偶合常數，以CDCl3，DMSO或CD3OD為溶劑，以相對于四甲基硅烷(TMS，0.0ppm)的百萬分率(ppm)記錄化學位移。使用分別購自Selecto Scientific和Fisher Scientific Basicalumina Brockman activityI的Alumina B，F-254 TLC平板，進行薄層(TLC)和快速柱色譜。通過TLC和1HNMR監測反應，當根據1H NMR的粗產量是90-95％時停止。
試劑。除非另有說明，所有化學試劑都購自Aldrich或SigmaChemicals Companies，且是可商業得到的最高級別。與以前公開的方法類似地制備多巴色素甲基酯(Bendrat等，Biochemistry，36，15356-15362(1997)；Swope等，EMBO J.，17，3534-3541(1998))。
當在475nm的吸光度達到最大值時(這表示消耗了限制試劑NaIO4)，開始測定。在大腸桿菌中表達重組人和小鼠MIF，并如前報道進行純化(Bernhagan等，Biochemistry，33，14144-14155(1994)。
MIF互變異構酶活性 將式I或II的化合物鑒別為MIF抑制劑，因為它們能體外抑制MIF酶活性。MIF能催化互變異構化(即，酮-烯醇異構化)反應(Rosengren等，Molecular Medicine，2，143-149(1996))。MIF能催化多巴色素-有關的MIF底物向無色產物的互變異構化。除非特別地相反說明，在本文中提及的抑制濃度(例如，IC50或其它活性指數)指實驗化合物在MIF互變異構酶測定中的抑制活性(如在下面和Bendrat等，Biochemistry，36，15356-15362(1997)中進一步詳細描述的)。鑒別出的最有活性的底物是多巴色素的非生理的D-異構體。該反應能預測治療性MIF抑制劑(見美國專利號6,420,188和美國專利號6,599,938，其內容在這里整體引作參考)。對MIF互變異構酶活性的抑制，能預測對MIF生物活性的抑制。
測定MIF多巴色素互變異構酶活性的方法，從DOPA-有關的底物前體(例如L-3，4-二羥基苯丙氨酸甲基酯)的制備和氧化開始。用高碘酸鈉進行的該氧化，會產生對應的多巴色素衍生物(例如，L-3，5-二氫-6-羥基-5-氧-2H-吲哚-2-羧酸甲基酯(″多巴色素甲基酯″)，它是橙色的，且構成在作為互變異構酶的MIF的酶活性的光度計測定中使用的方便底物。MIF(典型地，終濃度為50-1000ng/ml的重組MIF的純化制品)的添加，會造成有色的多巴色素底物向無色的5，6-二羥基吲哚-2-羧酸甲基酯產物的快速互變異構化。根據多巴色素-有關的底物在合適的緩沖液中的有色溶液的脫色速度，典型地在添加最終的測定組分和混合后20秒的時間，測量MIF的酶活性。在約475nm(或550nm，對于超過0.5nM的底物濃度)，測量吸光度。在測定溶液中可以包含實驗化合物，以便通過記錄底物互變異構化動力學與在沒有實驗抑制劑化合物存在下進行的對照測定相比的變化，可以測量實驗化合物對MIF互變異構酶活性的作用(即，作為抑制劑)。更具體地，可以基本上如下進行MIF互變異構酶測定 L-3，4-二羥基苯丙氨酸甲基酯(例如，Sigma D-1507)是多巴色素底物前體，且制成在ddH2O中的4mM溶液。將高碘酸鈉制成在ddH2O中的8mM溶液。制備了測定緩沖液(50mM磷酸鉀/1mM EDTA，pH6.0)。在150mM NaCl/20mM Tris緩沖液(pH.4)中制備純化的重組MIF，作為能方便地供應約700ng/ml的終濃度的MIF的原液。在即將開始測定之前，將3.6ml多巴色素底物前體溶液，2.4ml高碘酸鹽溶液和4.0ml測定緩沖液合并成均勻的混合物(在1min后和之后約30min，該多巴色素底物制品適用于測定用途)。然后，將實驗化合物(典型地制備成在DMSO中的濃縮原液)和MIF與0.7ml測定緩沖液+0.3ml多巴色素底物溶液混合，提供需要的實驗化合物在均勻混合物中的終濃度，在475nm監視該測定混合物的光密度(吸光度)。典型地，每5秒記錄OD475，進行0-60秒，然后將給定時間點的OD475與沒有添加MIF或省略實驗化合物的平行測定相對比。通過抑制測定混合物的脫色，經常在20秒時間點，測定實驗化合物對MIF互變異構酶活性的抑制。通過從在幾個不同的抑制劑濃度的MIF互變異構酶測定得到的結果的內插，確定具有MIF互變異構酶抑制活性的化合物的IC50值，這對應著能抑制MIF互變異構酶活性達50％的抑制劑濃度。這些IC50值能提供實驗化合物的MIF酶抑制活性和對MIF的生物活性的抑制之間的合理關聯。
MIF互變異構酶測定表明，某些化合物能抑制MIF酶活性。該數據提供了MIF互變異構酶酶測定和生物測定中的MIF拮抗作用之間的合理關聯。總之，這些數據表明，化合物在MIF互變異構酶測定中的抑制，能預測它在抑制MIF生物活性中的潛在治療用途。還合理地將對MIF的抑制與調控受MIF影響的其它細胞因子和ERK/MAPK途徑相關聯。
用抑制劑處理MIF 用不同濃度的抑制劑處理MIF樣品，然后用多巴色素互變異構酶測定，分析經處理的MIF樣品的酶活性。
多巴色素互變異構酶測定 向重組小鼠或人MIF樣品的室溫溶液中，加入多巴色素甲基酯。立即監視樣品與未處理的MIF溶液和沒有添加MIF的多巴色素甲基酯相比，在475nm的吸光度損失。
酶抑制研究 該測定解釋了本發明的化合物對人MIF的酶活性的抑制。使用L-多巴色素甲基酯作為產色底物，進行了重組人MIF的酶促互變異構化活性(Bendrat等，Biochemistry，36，15356-15362(1997))。如上面詳細描述的，MIF催化的互變異構化反應，會導致無色的二羥基吲哚產物的形成。
制備和測試了幾種化合物在MIF多巴色素互變異構酶測定中的活性。化合物68和69(表I)以劑量依賴性的方式抑制MIF互變異構酶活性，IC50為約10μM。
因而，根據本發明，在結構上與化合物68和69有關的化合物，構成了對MIF酶活性的新的一大類低分子量特異性抑制劑。
MIF活性的生物測定 該測定表明，所述化合物不僅僅能特異性地抑制MIF酶活性，而且也能抑制MIF免疫調節活性，更具體地，MIF糖皮質激素調節活性。測試了根據本發明的化合物中和MIF影響對人單核細胞產生TNFα的抗炎作用的效應的能力。化合物的性質是劑量依賴性的。為了解釋該抑制作用對MIF的特異性，測試了不是MIF互變異構酶活性的這樣有效的抑制劑的其它類似物。
這些結果與下述假說相一致，即通過小分子在互變異構酶活性位點處的結合，可以中和MIF的促炎癥作用，盡管認為該作用不依賴于互變異構酶活性本身的中和。
另外，評估了化合物在任何多種MIF生物活性測定中對MIF生物活性的抑制，包括，例如，對MIF結合靶細胞的抑制，對MIF釋放或合成的抑制，用MIF-特異性的抗體對MIF免疫反應性的抑制，根據圓二色譜學、液體NMR-光譜學、X-射線結晶學、熱穩定性測量評估的MIF構象或結構完整性的改變，抑制MIF對靜止期NIH/3T3細胞的促增殖作用和抑制其中有關的延長的ERK激活，對MIF-誘導的NIH/3T3細胞釋放花生四烯酸的抑制，對L6肌細胞中MIF-誘導的2，6二磷酸果糖形成的抑制，對MIF、TNF或LPS-攻擊的實驗動物中MIF毒性的抑制，對MIF在體外或體內的糖皮質激素反調節活性的抑制，對MIF-誘導的p53腫瘤抑制蛋白的功能滅活的抑制(Hudson等，J.Exp.Med.，190，1375-1382(1999))，對MIF-誘導的前列腺素E2的釋放的抑制，和對許多特征在于MIF的釋放、生產和/或出現的人疾病動物模型中的發病率或死亡率的抑制。
從前面的描述可以看出，本發明包含新的且獨特的化合物，組合物，制備方法，和與上述化合物抑制MIF有關的使用方法。本領域的技術人員能認識到，可以改變本發明的上述實施方案，而不背離其廣泛的發明構思。因此，應當理解，本發明不限于公開的特定實施方案，而是意在涵蓋在本發明的精神和范圍內的所有和任何改變。
權利要求
1.具有式I或II的化合物
和
其中B是氧或硫；且
每個R獨立地定義如下
R＝H，R1，或 III
其中在式I和式II中，至少一個R不是氫；
其中每個R1獨立地是氫，烷基，環烷基，鹵素基團，全氟烷基，全氟烷氧基，鏈烯基，炔基，羥基，氧代基團，巰基，烷硫基，烷氧基，芳基，雜芳基，芳氧基，雜芳氧基，芳烷基，雜芳烷基，芳烷氧基，雜芳烷氧基，HO-(C＝O)-基團，氨基，烷基氨基，二烷基氨基，氨基甲酰基，烷基羰基，烷氧基羰基，烷基氨基羰基，二烷基氨基羰基，芳基羰基，芳基氧羰基，烷基磺酰基或芳基磺酰基；
每個R2獨立地是烷基，環烷基，鹵素基團，全氟烷基，全氟烷氧基，鏈烯基，炔基，羥基，氧代基團，巰基，烷硫基，烷氧基，芳基，雜芳基，芳氧基，雜芳氧基，芳烷基，雜芳烷基，芳烷氧基，雜芳烷氧基，HO-(C＝O)-基團，氨基，烷基氨基，二烷基氨基，氨基甲酰基，烷基羰基，烷氧基羰基，烷基氨基羰基，二烷基氨基羰基，芳基羰基，芳基氧羰基，烷基磺酰基或芳基磺酰基；
每個m獨立地是0或1-20的整數；且
每個X獨立地是碳或氮，其中當任何X是碳時，每個Y獨立地如下定義
Y＝H，R1，或IV
其中每個Z獨立地是氫，烷基，環烷基，鹵素基團，全氟烷基，全氟烷氧基，鏈烯基，炔基，羥基，氧代基團，巰基，烷硫基，烷氧基，芳基，雜芳基，芳氧基，雜芳氧基，芳烷基，雜芳烷基，芳烷氧基，雜芳烷氧基，HO-(C＝O)-基團，氨基，烷基氨基，二烷基氨基，氨基甲酰基，烷基羰基，烷氧基羰基，烷基氨基羰基，二烷基氨基羰基，芳基羰基，芳基氧羰基，烷基磺酰基或芳基磺酰基；且
每個n獨立地是0或1-4的整數；
其藥學上可接受的鹽和其藥學上可接受的前藥。
2.權利要求1的化合物，它是具有式I的化合物，其藥學上可接受的鹽或其藥學上可接受的前藥。
3.權利要求1的化合物，它是具有式II的化合物，其藥學上可接受的鹽或其藥學上可接受的前藥。
4.權利要求1的化合物，其中式I和II中的至少一個R具有下面的式III
或
5.權利要求1的化合物，其中式I和II中的Ar是下列之一
6.權利要求1的化合物，其中Ar是下列之一
或
其中X和Y如上所定義。
7.權利要求1的化合物，其中B是氧。
8.權利要求1的化合物，其中R和R1各自獨立地選自氫，(C3-C20)環烷基，(C1-C20)烷氧基，(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環和(C3-C10)環烷基；其中前述的(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環和(C3-C20)環烷基取代基中的每一個可以任選地被1-4個獨立地選自下述的基團取代鹵素，(C1-C6)烷基，(C2-C6)鏈烯基，(C2-C6)炔基，全鹵代(C1-C6)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環，(C3-C10)環烷基，羥基，(C1-C6)烷氧基，全鹵代(C1-C6)烷氧基，苯氧基，(C1-C10)雜芳基-O-，(C1-C10)雜環-O-，(C3-C10)環烷基-O-，(C1-C6)烷基-S-；其中2個獨立地選擇的含有烷基的R1基團可以與它們所結合的任何氮原子一起形成3-40元的環狀雜環或雜芳環。
9.權利要求1的化合物，其中R和R1各自獨立地選自氫，(C3-C20)環烷基，(C1-C20)烷氧基，(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環和(C3-C10)環烷基；其中前述的(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環和(C3-C20)環烷基取代基中的每一個可以任選地被1-4個獨立地選自下述的基團取代鹵素，(C1-C6)烷基，(C2-C6)鏈烯基，(C2-C6)炔基，全鹵代(C1-C6)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環，(C3-C10)環烷基，羥基和(C1-C6)烷氧基。
10.權利要求1的化合物，其中R和R1各自獨立地選自氫，(C3-C10)環烷基，(C1-C10)烷氧基，(C1-C10)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環和(C3-C10)環烷基。
11.權利要求1的化合物，其中每個R和R1定義為獨立地選自氫，(C3-C6)環烷基，(C1-C6)烷氧基和(C1-C6)烷基。
12.權利要求1的化合物，其具有式IA
其中每個Y1獨立地是氫或(C1-C6)烷基；
每個Y2獨立地是Y1，羥基，鹵素，-N3，-CN，-SH或-N(Y1)2；
Resa獨立地是Y1，鹵素，-N3，-CN，-OY1，-N(Y1)2，-SH，＝O，＝CH2或A，其中每個A獨立地是被一個或多個獨立的Y2取代基取代的苯基或芳香環；
Resb定義如下
其中Y3獨立地是Y1，A，-(CH2)-A，-N(Y1)2或-NY1Y5，其中每個Y5獨立地是飽和的或不飽和的、直鏈的或支鏈的(C2-C18)烷基；且
其中Y4獨立地是Y1，-OY1，-OY5，-N(Y1)2，-NY1Y5或A；
其藥學上可接受的鹽和其藥學上可接受的前藥。
13.權利要求1的化合物，其具有下面的式I或II
其中B是氧或硫；，且
每個R獨立地定義如下
R＝H，R1，或III
其中在式I和式II中，至少一個R不是氫；
每個m獨立地是0或1-20的整數；且
每個X獨立地是碳或氮，其中當任何X是碳時，則對于每個碳X，Y獨立地定義為
Y＝H，R1，IV
其中每個Z獨立地是氫，羥基，氟，溴，碘，-N3，-CN，-SR3，-OR3，-N(R1)2，-R1或A；其中每個A獨立地是被一個或多個獨立的Y2取代基取代的苯基或芳香環；其中每個Y2獨立地是Y1，羥基，鹵素，-N3，-CN，-SH或-N(Y1)2；且其中每個Y1獨立地是氫或(C1-C6)烷基；
其中n獨立地是0或1-4的整數；
其中每個R1獨立地選自氫，(C3-C20)環烷基，(C1-C20)烷氧基，(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環和(C3-C10)環烷基；(C1-C10)雜芳基-O-，(C1-C10)雜環-O-，(C3-C10)環烷基-O-，(C1-C6)烷基-S-，(C1-C6)烷基-SO2-，(C1-C6)烷基-NH-SO2-，-NO2，氨基，(C1-C6)烷基-氨基，[(C1-C6)烷基]2-氨基，(C1-C6)烷基-SO2-NH-，(C1-C6)烷基-(C＝O)-NH-，(C1-C6)烷基-(C＝O)-[((C1-C6)烷基)-N]-，苯基-(C＝O)-NH-，苯基-(C＝O)-[((C1-C6)烷基)-N]-，-CN，(C1-C6)烷基-(C＝O)-，苯基-(C＝O)-，(C1-C10)雜芳基-(C＝O)-，(C1-C10)雜環-(C＝O)-，(C3-C10)環烷基-(C＝O)-，HO-(C＝O)-，(C1-C6)烷基-O-(C＝O)-，H2N(C＝O)-(C1-C6)烷基-NH-(C＝O)-，[(C1-C6)烷基]2-N-(C＝O)-，苯基-NH-(C＝O)-，苯基-[((C1-C6)烷基)-N]-(C＝O)-，(C1-C10)雜芳基-NH-(C＝O)-，(C1-C10)雜環-NH-(C＝O)-，(C3-C10)環烷基-NH-(C＝O)-，(C1-C6)烷基-(C＝O)-O-和苯基-(C＝O)-O-，其中R1的前述的(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環和(C3-C20)環烷基取代基中的每一個可以任選地被1-4個獨立地選自下述的基團取代鹵素，(C1-C6)烷基，(C2-C6)鏈烯基，(C2-C6)炔基，全鹵代(C1-C6)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環，(C3-C10)環烷基，羥基，(C1-C6)烷氧基，全鹵代(C1-C6)烷氧基，苯氧基，(C1-C10)雜芳基-O-，(C1-C10)雜環-O-，(C3-C10)環烷基-O-，(C1-C6)烷基-S-，(C1-C6)烷基-SO2-，(C1-C6)烷基-NH-SO2-，-NO2，氨基，(C1-C6)烷基-氨基，[(C1-C6)烷基]2-氨基，(C1-C6)烷基-SO2-NH-，(C1-C6)烷基-(C＝O)-NH-，(C1-C6)烷基-(C＝O)-[((C1-C6)烷基)-N]-，苯基-(C＝O)-NH-，苯基-(C＝O)-[((C1-C6)烷基)-N]-，-CN，(C1-C6)烷基-(C＝O)-，苯基-(C＝O)-，(C1-C10)雜芳基-(C＝O)-，(C1-C10)雜環-(C＝O)-，(C3-C10)環烷基-(C＝O)-，HO-(C＝O)-，(C1-C6)烷基-O-(C＝O)-，H2N(C＝O)-(C1-C6)烷基-NH-(C＝O)-，[(C1-C6)烷基]2-N-(C＝O)-，苯基-NH-(C＝O)-，苯基-[((C1-C6)烷基)-N]-(C＝O)-，(C1-C10)雜芳基-NH-(C＝O)-，(C1-C10)雜環-NH-(C＝O)-，(C3-C10)環烷基-NH-(C＝O)-，(C1-C6)烷基-(C＝O)-O-和苯基-(C＝O)-O-；且其中2個獨立地選擇的含有烷基的R1基團可以與它們所結合的任何氮原子一起形成3-40元環狀雜環或雜芳環；
其中每個R2獨立地選自氫，羥基，鹵素，-N3，-CN，-SH，(R1)2-N-，(R3)-O-，(R3)-S-，(C1-C6)烷基，(C2-C6)鏈烯基，(C2-C6)炔基，(C3-C10)環烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基和(C1-C10)雜環；其中R2的前述的(C1-C6)烷基，(C3-C10)環烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基和(C1-C10)雜環取代基中的每一個可以任選地被1-4個獨立地選自下述的基團取代鹵素，(C1-C6)烷基，(C2-C6)鏈烯基，(C2-C6)炔基，全鹵代(C1-C6)烷基，苯基，(C3-C10)環烷基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環，甲酰基，-CN，(C1-C6)烷基-(C＝O)-，苯基-(C＝O)-，HO-(C＝O)-，(C1-C6)烷基-O-(C＝O)-，(C1-C6)烷基-NH-(C＝O)-，[(C1-C6)烷基]2-N-(C＝O)-，苯基-NH-(C＝O)-，苯基-[((C1-C6)烷基)-N]-(C＝O)-，-NO2，氨基，(C1-C6)烷基氨基，[(C1-C6)烷基]2-氨基，(C1-C6)烷基-(C＝O)-NH-，(C1-C6)烷基-(C＝O)-[((C1-C6)烷基)-N]-，苯基-(C＝O)-NH-，苯基-(C＝O)-[((C1-C6)烷基)-N]-，H2N-(C＝O)-NH-，(C1-C6)烷基-HN-(C＝O)-NH-，[(C1-C6)烷基-]2N-(C＝O)-NH-，(C1-C6)烷基-HN-(C＝O)-[((C1-C6)烷基)-N]-，[(C1-C6)烷基-]2N-(C＝O)-[((C1-C6)烷基)-N]-，苯基-HN-(C＝O)-NH-，(苯基-)2N-(C＝O)-NH-，苯基-HN-(C＝O)-[((C1-C6)烷基)-N]-，(苯基-)2N-(C＝O)-[((C1-C6)烷基)-N]-，(C1-C6)烷基-O-(C＝O)-NH-，(C1-C6)烷基-O-(C＝O)-[((C1-C6)烷基)-N]-，苯基-O-(C＝O)-NH-，苯基-O-(C＝O)-[((C1-C6)烷基)-N]-，(C1-C6)烷基-SO2NH-，苯基-SO2NH-，(C1-C6)烷基-SO2-，苯基-SO2-，羥基，(C1-C6)烷氧基，全鹵代(C1-C6)烷氧基，苯氧基，(C1-C6)烷基-(C＝O)-O-，苯基-(C＝O)-O-，H2N-(C＝O)-O-，(C1-C6)烷基-HN-(C＝O)-O-，[(C1-C6)烷基-]2N-(C＝O)-O-，苯基-HN-(C＝O)-O-，(苯基-)2N-(C＝O)-O-；其中當所述的R2苯基含有2個相鄰的取代基時，這樣的取代基可以任選地與它們所結合的碳原子一起形成5-6元碳環或雜環；其中所述含有苯基可選物的基團中的每一個可以任選地被獨立地選自下述的1或2個基團取代(C1-C6)烷基，鹵素，(C1-C6)烷氧基，全鹵代(C1-C6)烷基和全鹵代(C1-C6)烷氧基；且
其中每個R3獨立地選自氫，(C3-C20)環烷基，(C1-C20)烷氧基，(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環和(C3-C10)環烷基；其中R3的前述的(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環和(C3-C20)環烷基取代基中的每一個可以任選地被1-4個獨立地選自下述的基團取代鹵素，(C1-C6)烷基，(C2-C6)鏈烯基，(C2-C6)炔基，全鹵代(C1-C6)烷基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環，(C3-C10)環烷基，羥基，(C1-C6)烷氧基，全鹵代(C1-C6)烷氧基，苯氧基，(C1-C10)雜芳基-O-，(C1-C10)雜環-O-，(C3-C10)環烷基-O-，(C1-C6)烷基-S-，(C1-C6)烷基-SO2-，(C1-C6)烷基-NH-SO2-，-NO2，氨基，(C1-C6)烷基-氨基，[(C1-C6)烷基]2-氨基，(C1-C6)烷基-SO2-NH-，(C1-C6)烷基-(C＝O)-NH-，(C1-C6)烷基-(C＝O)-[((C1-C6)烷基)-N]-，苯基-(C＝O)-NH-，苯基-(C＝O)-[((C1-C6)烷基)-N]-，-CN，(C1-C6)烷基-(C＝O)-，苯基-(C＝O)-，(C1-C10)雜芳基-(C＝O)-，(C1-C10)雜環-(C＝O)-，(C3-C10)環烷基-(C＝O)-，HO-(C＝O)-，(C1-C6)烷基-O-(C＝O)-，H2N(C＝O)-(C1-C6)烷基-NH-(C＝O)-，[(C1-C6)烷基]2-N-(C＝O)-，苯基-NH-(C＝O)-，苯基-[((C1-C6)烷基)-N]-(C＝O)-，(C1-C10)雜芳基-NH-(C＝O)-，(C1-C10)雜環-NH-(C＝O)-，(C3-C10)環烷基-NH-(C＝O)-，(C1-C6)烷基-(C＝O)-O-和苯基-(C＝O)-O-；
其藥學上可接受的鹽和其藥學上可接受的前藥。
14.權利要求1的化合物，其具有下式
其中Rx是(C1-C6)烷基，(C2-C6)鏈烯基，(C2-C6)炔基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環或(C3-C10)環烷基。
15.權利要求1的化合物，其具有下式
其中Rx是(C1-C6)烷基，(C2-C6)鏈烯基，(C2-C6)炔基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環或(C3-C10)環烷基。
16.權利要求1的化合物，其具有下式
其中Rx是(C1-C6)烷基，(C2-C6)鏈烯基，(C2-C6)炔基，苯基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環或(C3-C10)環烷基。
17.一種方法，其包括通過給對象施用抑制有效量的權利要求1的化合物，抑制有此需要的哺乳動物對象中至少一種選自MIF，IL-1，IL-2，IL-6，IL-8，IFN-γ，TNF和其組合的細胞因子的產生。
18.權利要求17的方法，其中所述對象是人。
19.一種方法，其包括通過給對象施用抑制有效量的權利要求1的化合物，抑制有此需要的哺乳動物對象中的ERK/MAP途徑。
20.權利要求19的方法，還包括治療或預防選自下述的至少一種ERK/MAP介導的疾病銀屑病關節炎，萊特爾氏綜合征，類風濕性關節炎，痛風，創傷性關節炎，風疹性關節炎和急性滑膜炎，類風濕性脊椎炎，骨關節炎，痛風性關節炎和其它關節炎狀況，膿毒癥，敗血癥性休克，內毒素性休克，革蘭氏陰性膿毒癥，中毒性休克綜合征，阿爾茨海默病，中風，缺血性和出血性卒中，神經外傷/閉合性顱腦損傷，哮喘，成人呼吸窘迫綜合征，慢性阻塞性肺病，腦型瘧，腦膜炎，慢性肺炎性疾病，硅肺，肺結節病，骨再吸收疾病，骨質疏松癥，再狹窄，心臟再灌注損傷，腦和腎的再灌注損傷，慢性腎衰竭，血栓形成，腎小球腎炎，糖尿病，糖尿病性視網膜病，黃斑變性，移植物抗宿主反應，同種異體移植物排斥，炎性腸病，克羅恩病，潰瘍性結腸炎，神經變性疾病，多發性硬化，肌肉退化，糖尿病性視網膜病，黃斑變性，腫瘤生長和轉移，血管發生性疾病，鼻病毒感染，口腔疾病例如齦炎和牙周炎，濕疹，接觸性皮炎，銀屑病，曬斑，結膜炎和其組合。
21.一種方法，其包括通過使抑制有效量的權利要求1的化合物接觸細胞培養物中的至少一個細胞，抑制細胞培養物中至少一種選自MIF，IL-1，IL-2，IL-6，IL-8，IFN-γ，TNF和其組合的細胞因子的產生。
22.權利要求21的方法，其中所述細胞是人細胞。
全文摘要
本發明提供了具有式I或II的化合物，其中B，R，X，Ar和Y如本文中所定義，其藥學上可接受的鹽和其藥學上可接受的前藥。本發明還提供了制備和使用所述化合物的方法。
文檔編號C07D413/06GK101098697SQ200580009879
公開日2008年1月2日 申請日期2005年3月28日 優先權日2004年3月26日
發明者T·西萊克, V·D·L·克魯茲 申請人:塞托凱恩藥物科學公司