專利名稱:Dna抽提裝置的制作方法
技術領域:
本實用新型涉及抽提DNA的裝置。具體而言,本實用新型涉及采用離心力或用注射器注壓大量抽提DNA的裝置。
背景技術:
細菌質粒是細菌染色體外能自主復制的雙鏈DNA分子。質粒常用作克隆載體,是攜帶外源基因進入細菌中擴增或表達的重要媒介物。DNA的分離與提取是最常用、最基本的分子生物學實驗技術。隨著生物技術的發展,新的基于DNA分子的基因治療劑的開發,常常需要大量DNA滿足科研需要或作為治療制劑用。
傳統抽提方法采用苯酚與氯仿使蛋白質變性,用酒精沉淀回收純化的DNA。傳統方法耗時間,操作難度較大。現在多采用離心的方法使DNA與親和材料結合而純化DNA。盡管離心法簡單、快速,但一般僅用于DNA的少量抽提。通過少量提取成套試劑純化的DNA一般僅1微克左右。而一次細胞實驗需要至少10微克以上的DNA,動物實驗則需要至少數十毫克的純化的DNA。利用離心法增加DNA的提取量取決于高速離心機的離心容量。目前市場上僅有配合50毫升離心管的中等量DNA抽提裝置(如上海生工的產品)。由于該裝置不能經受高速離心,會產生變性蛋白質沉淀不完全等問題。
大于50毫升的細菌培養液的DNA的抽提一般采用開放系統。樣品與所用液體通過重力作用使其中的DNA與吸附膜結合。經解離液解離吸附的DNA而得到純化的DNA。開放系統操作不方便、需時較長。此外,也有用負壓抽吸的方法進行大量純化DNA的裝置。但目前市場上還沒有一個純化裝置既可以使用離心機也能夠利用注射器加壓的方法進行DNA大量純化裝置。
現在許多實驗室(尤其國外的實驗室)已經裝備有高速大容量冷凍離心機,比如Eppendorf 5810R型離心機,一次可以離心500毫升樣品,離心力高達21000g。但是現有市場產品與技術仍未提供與這些高速大容量離心機的轉子配套的質粒DNA純化裝置。
實用新型內容本實用新型的目的是提供一種DNA抽提裝置,它能解決現有產品或技術中存在的與高速大容量離心機的離心管不配套的問題;在許多實驗室僅裝備有低速大容量離心機或裝備的離心機與純化裝置不配套的情況下,也可通過加壓器(包括注射器)加壓的方法使用本實用新型裝置,從而達到大量純化DNA的目的。
本實用新型的DNA抽提裝置包括回收管5,該回收管5設有一開口端;內芯3,該內芯3可放入上述回收管5中,其下部設有吸附膜6,上部設有凸緣2,凸緣2的下沿設有通氣槽7;蓋體1,其下部與回收管5開口端相配合。
在本實用新型一個優選的實施例中,蓋體1內部具有一密封墊圈8。
在本實用新型一個優選的實施例中,蓋體1設有開口9。
在本實用新型一個優選的實施例中,回收管5的容積為10毫升以上,例如可以是50毫升、100毫升、150毫升、180毫升、200毫升、250毫升、300毫升甚或500毫升以上。
在本實用新型一個優選的實施例中,蓋體1下部與回收管5開口端以螺紋或卡口相配合。
在本實用新型一個優選的實施例中,吸附膜的孔徑為0.25微米或以上,如0.3微米、0.35微米、0.4微米、0.45微米、0.5微米、0.55微米、0.6微米等。
本實用新型對回收管的形狀并無特殊限制,只要其適用于現有的各種離心裝置即可,包括各種管狀。用于制造該回收管的材料也是本領域周知的,如聚丙乙烯等。對該回收管的容積也無特殊限制,如上所述,較佳在50毫升以上,例如可以是500毫升或以上。
對本實用新型的吸附膜也無特殊限制。適用于各種DNA抽提的本領域已知的各種吸附膜都可用于本發明的裝置,如美國微孔(Millipore)以及沃特曼(Whatman)的含硅、孔徑0.45微米的玻璃纖維膜。
在本實用新型的另一實施例中,該開口可與注射器連接,從而可進行注射器注壓抽提DNA。開口的大小也與常用的注射器口相配合。
圖1A顯示本發明DNA抽提裝置的剖面圖,圖1B顯示圖1A中所示的內芯的仰視圖。
圖2顯示采用離心法抽提DNA的示意圖。
圖3顯示使用注射器抽提DNA的示意圖。其中圖3A表示DNA的純化;圖3B顯示DNA純化時的氣流方向。
具體實施方式
以下將結合各附圖詳細描述本實用新型。應理解,這些實施方式僅僅是闡述性的,并應將其視為對本發明范圍的限定。
圖1A顯示了本發明優選的抽提裝置例子。圖中所示的例子包括蓋體1、內芯3和回收管5。
蓋體1的上部具有一開口9,該開口9可與注射器相連。蓋體內部具有一密封墊圈8,蓋體下部與回收管5的開口端配合。
在蓋體1和回收管5之間的是內芯3。內芯3的上部是凸緣2,凸緣2的下沿設有通氣槽7。凸緣2的直徑要大于回收管5的內徑,以可安放在該回收管5的開口上而不至于落入回收管中。內芯3的下部內側設有吸附膜6。對該吸附膜6離內芯3下部開口的距離并無特殊要求。圖1B顯示了內芯3的仰視圖。其中編號10表示該內芯的塑料網狀格,編號7顯示圖1A中所示的內芯凸緣中的通氣槽。
回收管5可以是具有常規離心管形狀的容器,其開口端外側為螺紋,可與蓋體1下部相配合。當然,用于使蓋體1和回收管5相配合的方式并不限于所示的螺紋4方式。本領域已知其它各種合適的方式,如卡口,它們也可用于本發明裝置。回收管5的容量可達500毫升以上,以適用于高速大容量離心機的DNA抽提。當然,任何適用于本領域所使用的離心機的容量都在本發明考慮的范圍之內,如50毫升等。
圖2顯示了離心法抽提DNA的示意圖。圖中,內芯3已被裝入回收管5內,其凸緣支撐于回收管5開口上。蓋體1蓋在該內芯上,其下部內側與回收管5的螺紋4相吻合。同時,蓋體內側的密封墊圈8也與內芯3的凸緣2的上沿緊密配合,因此在回收管5內形成了密封的狀態。在離心力的作用下,內芯3內待純化的樣品通過吸附膜,DNA被吸附于膜上,雜質通過膜進入回收管5而被丟棄。吸附有DNA的膜經沖洗后用解離液回收純化的DNA。其工作原理與一般的少量抽提裝置類似。
圖3顯示了使用注射器抽提DNA的過程。與離心法抽提DNA一樣,先將待純化樣品裝入內芯中,然后將內芯架在回收管上,旋緊蓋子,使回收管內部密封。蓋體上部的開口與注射器連接。注射器向內芯注入的正壓氣流使樣品液通過吸附膜時,DNA吸附于膜上,雜質通過膜進入回收管并丟棄。回收管內的壓力通過內芯凸緣下沿的通氣槽消除。利用同樣的原理可以使洗滌液通過并清洗吸附膜,然后用解離液解離并回收純化的DNA。
有益效果本實用新型裝置可與高速大容量離心機的離心管配套,利用離心力快速大量抽取DNA。在許多實驗室僅裝備有低速大容量離心機或裝備的離心機與純化裝置不配套的情況下,可使用本實用新型裝置,利用加壓器(包括注射器)加壓的方法達到大量純化DNA的目的。
在不偏離本實用新型的實質和范圍的前提下,本領域技術人員可以對本實用新型進行各種改動或修改,這些等價的形式同樣落在本申請所附權利要求書所限定的范圍內。
權利要求1.一種DNA抽提裝置,它包括回收管(5),該回收管(5)設有一開口端;內芯(3),該內芯(3)可放入上述回收管(5)中,其下部設有吸附膜(6),上部設有凸緣(2),凸緣(2)的下沿設有通氣槽(7);蓋體(1),其下部與回收管(5)開口端相配合。
2.如權利要求1所述的DNA抽提裝置,其特征在于,所述蓋體(1)內部具有一密封墊圈(8)。
3.如權利要求2所述的DNA抽提裝置,其特征在于,所述蓋體(1)設有開口(9)。
4.如權利要求1所述的DNA抽提裝置,其特征在于,所述回收管(5)的容積為10毫升以上。
5.如權利要求1所述的DNA抽提裝置,其特征在于,所述蓋體(1)下部與回收管(5)開口端以螺紋或卡口相配合。
6.如權利要求1所述的DNA抽提裝置,其特征在于,所述吸附膜的孔徑為0.25微米或以上。
專利摘要本實用新型涉及一種DNA抽提裝置,它包括回收管5,該回收管5設有一開口端;內芯3,該內芯3可放入上述回收管5中,其下部設有吸附膜6,上部設有凸緣2,凸緣2的下沿設有通氣槽7;蓋體1,其下部與回收管5開口端相配合。在一優選實施例中,本實用新型DNA抽提裝置的蓋體1內部還具有密封墊圈,其上部還設有開口。本實用新型抽提裝置可適用于高速大容量離心機。在許多實驗室僅裝備有低速大容量離心機或裝備的離心機與純化裝置不配套的情況下,也可使用本實用新型的抽提裝置進行注射器注壓抽提。
文檔編號C07H1/00GK2793074SQ20052003964
公開日2006年7月5日 申請日期2005年2月7日 優先權日2005年2月7日
發明者劉運康 申請人:寧波唯奧基因科技發展有限公司