專利名稱：一種高純度銀杏內酯的制備方法
技術領域：
本發明涉及采用高速逆流色譜法(HSCCC)從銀杏葉中制備銀杏內酯的方法，特別是一種高純度銀杏內酯的制備方法。
背景技術：
銀杏為銀杏科落葉喬木。其葉、果實、種子均有較高的藥用價值。銀杏在我國分布很廣，資源十分豐富。國內外對其研究報道較多，其藥理作用不斷被認識，臨床應用范圍逐步擴大。銀杏葉的有效成份主要有黃酮甙和二萜內酯兩類，銀杏葉黃酮甙主要有槲皮素甙、山奈酚甙及雙黃酮類化合物，銀杏葉中的雙黃酮成份為銀杏雙黃酮、異銀杏雙黃酮及7-去甲基銀杏雙黃酮。到目前為止，從銀杏葉中共提得6個萜類化合物銀杏苦內酯A、B、C、M、J和銀杏新內酯，它們都具有二萜或半萜結構，銀杏內酯分子具有獨特的十二碳骨架結構，嵌有一個叔丁基和6個5元環，包括一個螺(44)壬烷，一個四氫呋喃環和3個內酯環，常見代號BN52020、BN52021、BN52022、BN52023、BN52024，分別代表銀杏內酯A、B、C、M、J，其中BN52021在銀杏中的含量為0.2％，它的抗PAF(由血小板和多種炎癥細胞產生和分泌的一種內源性磷脂)選擇性和活動性最強。銀杏葉的藥理作用有血小板聚集和止血作用，能擴張冠脈血管增加冠脈流量，保護大腦，有抗炎、抗過敏和抗休克作用。銀杏內酯A、B、C或單獨用銀杏內酯B可以應用于轉移癌的治療。它能提高抗癌化療劑的效果，減少不良反應。銀杏內酯還應用于肺移植的供體和受體中，使遠距離肺移植成為可能。
銀杏內酯的結構式如下
銀杏內酯A R1＝OH，R2＝R3＝H銀杏內酯B R1＝R2＝OH，R3＝H銀杏內酯C R1＝R2＝R3＝OH銀杏內酯J R1＝R3＝OH，R2＝H白果內酯的結構式如下 銀杏內酯A的分子式C20H24O9，物化特性熔點300℃分解，易溶于氯仿、乙酸乙酯、丙酮、乙醇、甲醇，不溶于石油醚、正己烷等。
銀杏內酯B的分子式C20H24O10，物化特性熔點300℃分解，易溶于氯仿、乙酸乙酯、丙酮、乙醇、甲醇，不溶于石油醚、正己烷等。
銀杏內酯C的分子式C20H24O11，物化特性熔點300℃分解，易溶于氯仿、乙酸乙酯、丙酮、乙醇、甲醇，不溶于石油醚、正己烷等。
銀杏內酯J的分子式C20H24O10，物化特性熔點300℃分解，易溶于氯仿、乙酸乙酯、丙酮、乙醇、甲醇，不溶于石油醚、正己烷等。
白果內酯的分子式C15H18O8，物化特性熔點300℃分解，易溶于氯仿、乙酸乙酯、丙酮、乙醇、甲醇，不溶于石油醚、正己烷等。
銀杏葉中的五個銀杏內酯共同存在，由于這五個化合物結構相似、極性相近，因而分離工作較為困難，各個內酯之間的分離只能用傳統的色譜法進行有效分離。有機溶劑提取法是國內外使用最為廣泛的方法，由于銀杏葉中含黃酮類化合物和內酯較少(分別為1.7％及0.6％左右)，因此最終所得浸膏中此兩類成分含量往往不高，所含雜質較多，需將此浸膏用液-液萃取法、沉淀法和吸附洗脫法進行進一步的分離純化，但回收率低，成本高；樹脂吸附純化法近年來有較大的發展，將銀杏葉以65％乙醇回流提取，減壓濃縮，ZTC澄清劑沉降。其黃酮苷和內酯含量分別達到26％和6％以上。對吸附銀杏葉中銀杏總內酯用50％乙醇沸提銀杏葉干粗粉，濾液上724吸附樹脂柱，最后得淡黃色粉術狀提取物，含黃酮苷和銀杏總內酯分別為27.4％，10.6％。該法操作簡單，能耗低，但步驟復雜，回收率低；近年來國際上超臨界流體提取技術的迅速發展，用該技術提取植物中的活性成分也越來越廣泛。與有機溶劑法相比，具有提取效率高，無溶劑殘留，活性成分和熱不穩定成分不易被分解破壞等優點，通過控制溫度和壓力以及調節改性劑的種類和用量，還可以實現選擇性萃取和分離純化，歐洲已有專利報道采用SFE技術除去銀杏葉粗提物中的雜質。近年來國內學者(姚渭溪.銀杏葉中活性成分的提取工藝測定及其進展.中草藥，1995，26(3)157)也探索和研究用該技術提取銀杏葉黃酮類化合物，得黃綠色精提物，收率為4.1％，其中黃酮苷含量在35％成本高。以乙醇和用大孔樹脂提取的銀杏葉精提物，于CO2-SFE精制前，毒性成分白果酸含量為2.0％，而用CO2-SFE精提后，白果酸含量降低到0.02％(夏開元.二氧化碳超臨界流體萃取研究進展.中成藥，1997，19(5)43)；高速逆流色譜技術(High-SpeedCountercurrent Chromatography，HSCCC)是近30年發展起來的一種連續的無需任何固體支持物的高效、快速的液液分配色譜分離技術，其原理是利用螺旋柱在行星運動時產生的離心力，使互不相溶的兩相不斷混合，同時保留其中的一相(固體相)，利用恒流泵連續輸入另一相(流動相)，隨流動相進入螺旋柱的溶質在兩相之間反復分配，按分配系數的次序，被依次洗脫。在流動相中分配比例大的先被洗脫，反之，在固體相中分配比例大的后被洗脫。它避免了固態支持體或載體帶來的各種問題——樣品容易被吸附、損耗和變性，使其他液相色譜技術進行制備量分離時，其分配效率會明顯降低，溶劑消耗量大，HSCCC保證較高峰型分辨率，分離量大、樣品無損耗、回收率高、分離環境緩和，節約溶劑。高速逆流色譜儀能直接進大量粗提物樣品或合成混合物，分離結果能夠達到相當高的純度，甚至能直接接質譜儀等儀器。因此，HSCCC具有操作簡便，理論回收率為100％，重現性好和分離效率高、分離量較大的特點，已廣泛應用于生物、醫藥、環保等領域化學物質的制備分離和純化，使其成為制備銀杏黃酮苷元以及各銀杏內酯和白果內酯對照品的較佳手段。
發明內容
本發明要解決的技術問題是采用高速逆流色譜法(HSCCC)，提供一種高純度銀杏內酯的制備方法。
本發明的技術方案包括如下步驟1.制備銀杏總內酯作為進樣物將銀杏提取物以乙醇加熱溶解，按1∶1-10的比例拌入硅膠，以乙酸乙酯、丙酮、正己烷-乙醇混合液、石油醚-丙酮混合液等有機溶劑進行洗脫，洗脫液蒸干濃縮。
2.制備銀杏內酯A采用高速逆流色譜制備方法，銀杏總內酯作為進樣物，體系1為四個組分(A，B，C，D)，溶劑A組分可選自石油醚、正庚烷、正己烷等正構烷烴，B組分可選自乙醚、乙酸乙酯、氯仿、二氯甲烷，C組分可選自甲醇、乙醇、異丙醇、丙酮、丁酮等脂肪醇及脂肪酮，D組分為水。
調節體系1中A，B，C，D四組組分的體積比依次為1-5∶5-9∶3-7∶1-5例如2∶6∶3∶5；3∶5∶3∶5；10∶50∶30∶50等，經一次分離后可得到銀杏內酯A、混合組分a、混合組分b。其中混合組分a包括銀杏內酯C和銀杏內酯J；混合組分b包括銀杏內酯B和白果內酯。
優選正己烷—乙酸乙酯—乙醇—水，體積比5∶5∶5∶4。
3.分別制備銀杏內酯C、J和銀杏內酯B、白果內酯體系2為上述四個組分(A，B，C，D)，調節體系2中A，B，C，D四組組分的體積比依次為0.5-3∶8-15∶2-5∶8-15例如2∶8∶3∶9；3∶11∶3∶12；10∶80∶30∶90等，取混合組分a經體系2分離后可得到銀杏內酯C、銀杏內酯J；優選體系2為正己烷—乙酸乙酯—乙醇—水，體積比1∶8∶2∶8。
體系3為上述三個組分(B，C，D)，調節體系3中B，C，D三組組分的體積比依次為1-5∶3-7∶1-5例如2∶3∶5；3∶3∶5；10∶30∶50等，取混合組分b經體系3分離后得到銀杏內酯B和白果內酯；優選體系3為氯仿—甲醇—水，體積比5∶4∶3。
實驗條件適合溫度15-30℃，在上述溫度范圍內，溫度較低時，出峰時間略有提前，分離效率變化不大，對峰形無多大影響。
主機轉速和流速需控制在一定范圍內，按體積比將溶劑體系置于分液漏斗中，搖勻靜置分層。待平衡一定時間后，將上相(固定相)和下相(流動相)分開，采用TBE-300高速逆流色譜儀，該機型柱體積為300ml，進樣圈為20ml，配有NS-1007泵，8823A-UV紫外檢測器，ELSD(蒸發光散射檢測儀)和Yokogawa3057便攜式記錄儀。進樣前，先用固定相存滿整個柱子，調整主機轉速為700-1200rpm，以1.0-2.5ml/min的流速將流動相泵入柱內。
本發明制備步驟包括有三個體系，二次分離過程。經過體系1的一次分離后收集到的銀杏內酯A的餾分蒸干后乙醇結晶，可得到銀杏內酯A的白色片狀結晶。接收到的混合組分a經過體系2分離后，得到銀杏內酯C、銀杏內酯J；餾分蒸干后乙醇結晶可分別得到白色針狀結晶和無色棱柱狀結晶；接收到的混合組分b經過體系3分離后，得到銀杏內酯B和白果內酯，餾分蒸干后乙醇結晶可分別得到白色棱柱狀和白色粉術狀結晶，經過紫外和蒸發光散射儀檢測，純度均在99％以上。
本發明方法采用了高速逆流色譜分離技術，是一種連續的無需任何固體支持物的高效、快速的液液分配色譜分離技術，它克服了固態支持物或載體不可逆吸附、損耗和變性，使被分離物回收率高，理論達100％，本發明實際達到99％以上。又因為采用優選的溶劑體系，控制實驗條件溫度、調整主機轉速和流速的工藝條件，可以高效率的分離，獲得高純度的銀杏內酯A、銀杏內酯B、銀杏內酯C、銀杏內酯J和白果內酯單體(達到99％以上)。并且適合從各種工藝途徑制備的銀杏提取物。保證較高峰形分辨度，分離量大、回收率高、分離環境緩和、節約溶劑、操作簡便。
圖1 銀杏內酯分離流程。
具體實施例方式
實施例11.銀杏內酯A的分離將銀杏內酯粗提物以乙醇加熱溶解，按1∶8的比例拌入硅膠，以乙酸乙酯、丙酮、正己烷-乙醇混合液、石油醚-丙酮混合液等有機溶劑進行洗脫，洗脫液蒸干濃縮后作為進樣物。
從體系1中選取正己烷—乙酸乙酯—乙醇—水在半制備型高速逆流色譜儀上來分離制備銀杏內酯A。按5∶5∶5∶4體積比將上述溶劑組分配置于分液漏斗中，搖勻后靜置分層。待平衡一段時間后，將上相(固定相)和下相(流動相)分開，實驗條件溫度25℃。采用TBE-300型高速逆流色譜儀，配有NS-1007泵，8823A-UV紫外檢測器，ELSD(蒸發光散射檢測儀)和Yokogawa3057便攜式記錄儀。
稱取1000mg進樣物溶于20ml流動相中待用。進樣前，用固定相存滿整個柱子，調整主機轉速為800rpm，以1.0ml/min的流速將流動相泵入柱內直至建立動態平衡，由進樣閥進樣；然后根據ELSD(蒸發光散射檢測儀)檢測圖譜，接收目標成分。目標餾分蒸干后用乙醇結晶可得到銀杏內酯A的白色片狀結晶，經過HPLC-UV及ELSD的檢測，它們的純度在99％以上，同時得到包括銀杏內酯C和銀杏內酯J的混合組分a和包括銀杏內酯B和白果內酯混合組分b。
2.銀杏內酯C和銀杏內酯J的分離從體系2中選取正己烷—乙酸乙酯—乙醇—水在半制備型高速逆流色譜儀上來分離制備銀杏內酯C和銀杏內酯J。按1∶8∶2∶8體積比將上述溶劑組分配置于分液漏斗中，搖勻后靜置分層。待平衡一段時間后，將上相(固定相)和下相(流動相)分開，實驗條件溫度控制在25℃。采用TBE-300型高速逆流色譜儀，配有NS-1007泵，8823A-UV紫外檢測器，ELSD(蒸發光散射檢測儀)和Yokogawa3057便攜式記錄儀。
稱取混合組份a 700mg溶于10ml流動相中待用。進樣前，用固定相存滿整個柱子，調整主機轉速為800rpm，以1.0ml/min的流速將流動相泵入柱內直至建立動態平衡，由進樣閥進樣；然后根據ELSD(蒸發光散射檢測儀)檢測圖譜，接收目標成分。目標餾分蒸干后用乙醇結晶可得到銀杏內酯C的白色針狀結晶和銀杏內酯J的無色棱柱狀晶體，經過HPLC-UV及ELSD的檢測，它們的純度在99％以上。
3.銀杏內酯B和白果內酯的分離從體系3中選取氯仿—甲醇—水在半制備型高速逆流色譜儀上來分離制備銀杏內酯B和白果內酯。按5∶4∶3體積比將上述溶劑組分配置于分液漏斗中，搖勻后靜置分層。待平衡一段時間后，將上相(固定相)和下相(流動相)分開，實驗條件溫度控制在25℃。采用TBE-300型高速逆流色譜儀，配有NS-1007泵，8823A-UV紫外檢測器，ELSD(蒸發光散射檢測儀)和Yokogawa3057便攜式記錄儀。
稱取混合組分b 400mg溶于10ml流動相中待用。用固定相存滿整個柱子，調整主機轉速為800rpm，以1.0ml/min的流速將流動相泵入柱內直至建立動態平衡，由進樣閥進樣；然后根據ELSD(蒸發光散射檢測儀)檢測圖譜，接收目標成分。目標餾分蒸干后用乙醇結晶可得到銀杏內酯B的白色棱柱狀和白果內酯的白色粉末狀晶體，經過HPLC-UV及ELSD的檢測，它們的純度在99％以上。
實施例21.銀杏內酯A的分離將銀杏內酯粗提物以乙醇加熱溶解，按1∶2或1∶9的比例拌入硅膠，以乙酸乙酯、丙酮、正己烷-乙醇混合液、石油醚-丙酮混合液等有機溶劑進行洗脫，洗脫液蒸干濃縮后作為進樣物。
從體系1中選取正己烷—乙酸乙酯—乙醇—水在半制備型高速逆流色譜儀上來分離制備銀杏內酯A。按2∶6∶4∶2體積比將上述溶劑組分配置于分液漏斗中，搖勻后靜置分層。待平衡一段時間后，將上相(固定相)和下相(流動相)分開，實驗條件溫度25℃。采用TBE-300型高速逆流色譜儀，配有NS-1007泵，8823A-UV紫外檢測器，ELSD(蒸發光散射檢測儀)和Yokogawa3057便攜式記錄儀。
稱取1000mg進樣物溶于20ml流動相中待用。進樣前，用固定相存滿整個柱子，調整主機轉速為800rpm，以1.0ml/min的流速將流動相泵入柱內直至建立動態平衡，由進樣閥進樣；然后根據ELSD(蒸發光散射檢測儀)檢測圖譜，接收目標成分。目標餾分蒸干后用乙醇結晶可得到銀杏內酯A的白色片狀結晶，經過HPLC-UV及ELSD的檢測，它們的純度在99％以上，同時得到包括銀杏內酯C和銀杏內酯J的混合組分a和包括銀杏內酯B和白果內酯混合組分b。
2.銀杏內酯C和銀杏內酯J的分離從體系2中選取正庚烷—乙酸乙酯—甲醇—水在半制備型高速逆流色譜儀上來分離制備銀杏內酯C和銀杏內酯J。按0.5∶9∶3∶8體積比將上述溶劑組分配置于分液漏斗中，搖勻后靜置分層。待平衡一段時間后，將上相(固定相)和下相(流動相)分開，實驗條件溫度控制在25℃。采用TBE-300型高速逆流色譜儀，配有NS-1007泵，8823A-UV紫外檢測器，ELSD(蒸發光散射檢測儀)和Yokogawa3057便攜式記錄儀。
稱取混合組分a 700mg溶于10ml流動相中待用。進樣前，用固定相存滿整個柱子，調整主機轉速為800rpm，以1.0ml/min的流速將流動相泵入柱內直至建立動態平衡，由進樣閥進樣；然后根據ELSD(蒸發光散射檢測儀)檢測圖譜，接收目標成分。目標餾分蒸干后用乙醇結晶可得到銀杏內酯C的白色針狀結晶和銀杏內酯J的無色棱柱狀晶體，經過HPLC-UV及ELSD的檢測，它們的純度在99％以上。
2.銀杏內酯B和白果內酯的分離從體系3中選取氯仿—甲醇—水在半制備型高速逆流色譜儀上來分離制備銀杏內酯B和白果內酯。按2∶4∶3體積比將上述溶劑組分配置于分液漏斗中，搖勻后靜置分層。待平衡一段時間后，將上相(固定相)和下相(流動相)分開，實驗條件溫度控制在25℃。采用TBE-300型高速逆流色譜儀，配有NS-1007泵，8823A-UV紫外檢測器，ELSD(蒸發光散射檢測儀)和Yokogawa3057便攜式記錄儀。
稱取混合組分b 400mg溶于10ml流動相中待用。用固定相存滿整個柱子，調整主機轉速為800rpm，以1.0ml/min的流速將流動相泵入柱內直至建立動態平衡，由進樣閥進樣；然后根據ELSD(蒸發光散射檢測儀)檢測圖譜，接收目標成分。目標餾分蒸干后用乙醇結晶可得到銀杏內酯B的白色棱拄狀結晶和白果內酯的白色粉末狀晶體，經過HPLC-UV及ELSD的檢測，它們的純度在99％以上。
實施例31.銀杏內酯A的分離將銀杏內酯粗提物以乙醇加熱溶解，按1∶5的比例拌入硅膠，以乙酸乙酯、丙酮、正己烷-乙醇混合液、石油醚-丙酮混合液等有機溶劑進行洗脫，洗脫液蒸干濃縮后作為進樣物。
從體系1中選取正己烷—乙酸乙酯—乙醇—水在半制備型高速逆流色譜儀上來分離制備銀杏內酯A。按4∶8∶6∶4體積比將上述溶劑組分配置于分液漏斗中，搖勻后靜置分層。待平衡一段時間后，將上相(固定相)和下相(流動相)分開，實驗條件溫度25℃。采用TBE-300型高速逆流色譜儀，配有NS-1007泵，8823A-UV紫外檢測器，ELSD(蒸發光散射檢測儀)和Yokogawa3057便攜式記錄儀。
稱取1000mg進樣物溶于20ml流動相中待用。進樣前，用固定相存滿整個柱子，調整主機轉速為800rpm，以1.0ml/min的流速將流動相泵入柱內直至建立動態平衡，由進樣閥進樣；然后根據ELSD(蒸發光散射檢測儀)檢測圖譜，接收目標成分。目標餾分蒸干后用乙醇結晶可得到銀杏內酯A的白色片狀結晶，經過HPLC-UV及ELSD的檢測，它們的純度在99％以上，同時得到包括銀杏內酯C和銀杏內酯J的混合組分a和包括銀杏內酯B和白果內酯混合組分b。
2.銀杏內酯C和銀杏內酯J的分離從體系2中選取正己烷—乙酸乙酯—乙醇—水在半制備型高速逆流色譜儀上來分離制備銀杏內酯C和銀杏內酯J。按2∶14∶4∶12體積比將上述溶劑組分配置于分液漏斗中，搖勻后靜置分層。待平衡一段時間后，將上相(固定相)和下相(流動相)分開，實驗條件溫度控制在25℃。采用TBE-300型高速逆流色譜儀，配有NS-1007泵，8823A-UV紫外檢測器，ELSD(蒸發光散射檢測儀)和Yokogawa3057便攜式記錄儀。
稱取混合組分a 700mg溶于10ml流動相中待用。進樣前，用固定相存滿整個柱子，調整主機轉速為800rpm，以1.0ml/min的流速將流動相泵入柱內直至建立動態平衡，由進樣閥進樣；然后根據ELSD(蒸發光散射檢測儀)檢測圖譜，接收目標成分。目標餾分蒸干后用乙醇結晶可得到銀杏內酯C的白色針狀結晶和銀杏內酯J的無色棱柱狀晶體，經過HPLC-UV及ELSD的檢測，它們的純度在99％以上。
2.銀杏內酯B和白果內酯的分離從體系3中選取氯仿—甲醇—水在半制備型高速逆流色譜儀上來分離制備銀杏內酯B和白果內酯。按4∶6∶4體積比將上述溶劑組分配置于分液漏斗中，搖勻后靜置分層。待平衡一段時間后，將上相(固定相)和下相(流動相)分開，實驗條件溫度控制在25℃。采用TBE-300型高速逆流色譜儀，配有NS-1007泵，8823A-UV紫外檢測器，ELSD(蒸發光散射檢測儀)和Yokogawa3057便攜式記錄儀。
稱取混合組分b 400mg溶于10ml流動相中待用。用固定相存滿整個柱子，調整主機轉速為800rpm，以1.0ml/min的流速將流動相泵入柱內直至建立動態平衡，由進樣閥進樣；然后根據ELSD(蒸發光散射檢測儀)檢測圖譜，接收目標成分。目標餾分蒸干后用乙醇結晶可得到銀杏內酯B的白色棱拄狀結晶和白果內酯的白色粉末狀晶體，經過HPLC-UV及ELSD的檢測，它們的純度在99％以上。
權利要求
1.一種高純度銀杏內酯的制備方法，其特征在于包括如下步驟(1)制備銀杏總內酯作為進樣物將銀杏提取物以乙醇加熱溶解，拌入硅膠，用有機溶劑洗脫蒸干濃縮；(2)制備銀杏內酯A采用高速逆流色譜制備方法，銀杏總內酯作為進樣物，溶劑體系1是四個組分(A，B，C，D)，體系A組分可選自石油醚、正庚烷、正己烷等正構烷烴，B組分可選自乙醚、乙酸乙酯、氯仿、二氯甲烷，C組分可選自甲醇、乙醇、異丙醇、丙酮、丁酮等脂肪醇及脂肪酮，D組分為水；調節體系1中A，B，C，D四組組分的體積比依次為1-5∶5-9∶3-7∶1-5，經分離后可得到銀杏內酯A、混合組分a、混合組分b；(3)分別制備銀杏內酯C、J和銀杏內酯B、白果內酯體系2是四個組分(A，B，C，D)，調節A，B，C，D四組組分的體積比依次為0.5-3∶8-15∶2-5∶8-15，取混合組分a經體系2分離后得到銀杏內酯C、銀杏內酯J；體系3是三個組分(B，C，D)，調節B，C，D三組組分的體積比依次為1-5∶3-7∶1-5，取混合組分b經體系3分離后得到銀杏內酯B和白果內酯。
2.根據權利要求1所述的一種高純度銀杏內酯的制備方法，其特征在于所述的實驗條件溫度是15-30℃，主機轉速是700-1200rpm，所述的流動相泵入柱內的流速為1.0-2.5ml/min。
3.根據權利要求1所述的一種高純度銀杏內酯的制備方法，其特征在于所述的溶劑體系1是正己烷—乙酸乙酯—乙醇—水，體積比3-5∶5-7∶4-6∶3-5。
4.根據權利要求1所述的一種高純度銀杏內酯的制備方法，其特征在于所述的溶劑體系2是正己烷—乙酸乙酯—乙醇—水，體積比0.5-1.5∶8-10∶2-4∶8-10。
5.根據權利要求1所述的一種高純度銀杏內酯的制備方法，其特征在于所述的溶劑體系3是氯仿—甲醇—水，體積比4-5∶3-5∶2-4。
6.根據權利要求3所述的一種高純度銀杏內酯的制備方法，其特征在于所述的溶劑體系1體積比是1-3∶5-7∶3-5∶1-5。
7.根據權利要求4所述的一種高純度銀杏內酯的制備方法，其特征在于所述的溶劑體系2體積比是0.5-1∶8-10∶2-4∶7-10。
8.根據權利要求5所述的一種高純度銀杏內酯的制備方法，其特征在于所述的溶劑體系3體積比是1-5∶2-5∶2-4。
9.根據權利要求1或4或7所述的一種高純度銀杏內酯的制備方法，其特征在于所述的溶劑體系2是正庚烷—乙酸乙酯—甲醇—水。
全文摘要
本發明涉及采用高速逆流色譜法(HSCCC)從銀杏葉中分離一種高純度銀杏內酯的制備方法。用三個溶劑體系，分別經過兩次HSCCC分離后，可得到銀杏內酯A、銀杏內酯B、銀杏內酯C、銀杏內酯J和白果內酯，純度均達到99％以上。本方法適用各種型號高速逆流色譜儀和各種含量的銀杏內酯的制備，具有分離量大，回收率高，操作簡便的特點。
文檔編號C07D493/04GK1680392SQ20051002316
公開日2005年10月12日 申請日期2005年1月7日 優先權日2005年1月7日
發明者符曉暉, 鄧秋云 申請人:上海同田生化技術有限公司