專利名稱：肉桂酰胺、肉桂酰胺的制備方法及包含肉桂酰胺的藥物組合物的制作方法
技術領域：
本發明涉及新的反-2，5-二甲基-哌嗪衍生物的E-肉桂酰胺、它們的藥學上可接受的鹽、包含它們的藥物組合物以及它們的治療用途。
本發明另一方面是治療炎性疾病、自身免疫性疾病、增殖性疾病和過度增殖性疾病的方法。一種優選的方法是治療以下疾病的方法類風濕性關節炎、動脈粥樣硬化、全身性硬皮病、多發性硬化、阿爾茨海默病(Alzheimer′s disease)、腦脊髓炎、系統性紅斑狼瘡、急性感染性多神經炎(Guillian-Barre syndrome)、同種異體移植物排斥、蕁麻疹、血管性水腫(angioderma)、變應性結膜炎、特應性皮炎、變應性接觸性皮炎、藥物變態反應、昆蟲叮咬變態反應、全身性過敏反應、直腸炎、炎性腸病或哮喘。
背景技術：
趨化因子是由8-14kDa蛋白質組成的小的分泌型細胞因子，根據它們的保守半胱氨酸殘基，分為四個組別CXC、CC、C和CX3C。它們促進細胞粘附分子的上調，而細胞粘附分子增強粘附，導致細胞遷移。因此，趨化細胞因子在白細胞亞群的募集和運輸中具有至關重要的作用。
在CC趨化因子中，已知為CCR1、CCR3、CCR4和CCR5受體的配體的MIP-1α和RANTES涉及自身免疫性疾病，例如類風濕性關節炎、炎性腸病和多發性硬化。強有力的證據是，與野生型小鼠相比，CCR1敲出小鼠在小鼠EAE模型中疾病發生率顯著降低。Karpus等(J.Immunol.1995，155，5003)的研究進一步證明，MIP-1α在多發性硬化的相同模型中起關鍵作用。這表明抗MIP-1α抗體可阻止急性麻痹性疾病和復發性麻痹性疾病的進展，并可防止單核細胞浸潤到CNS。
另外，存在強有力的證據表明RANTES涉及類風濕性關節炎的病理生理學。例如，從類風濕性關節炎患者的滑膜組織樣品中檢測到RANTES mRNA(Snowden，N.等，Lancet，1994，343，547)。此外，抗RANTES抗體大大減輕大鼠佐劑誘發性關節炎模型中疾病的進展。
許多研究都為CCR1在同種異體移植物排斥中的作用提供了證據。已經證實，將低于腎毒性量的環孢菌素A與CCR1拮抗劑對趨化因子受體的阻斷作用相結合，對實體同種異體移植物存活具有積極作用(Horuk，R.等，J.Biol.Chem.2001，276，4199)。
因此，可抑制炎性趨化因子與其受體間相互作用的分子，將可用于治療炎性疾病、自身免疫性疾病、增殖性疾病和過度增殖性疾病。
相關公開美國專利4,368,199公開了可用于治療心臟病的哌嗪基取代的肉桂酰胺。該專利申請的焦點在于3，4，5-三甲氧基肉桂酰基哌嗪衍生物，它們在氮上被不同的芳基化烷基間隔基取代。最常見的間隔基長度包括兩個碳單元。
國際專利申請WO 98/56771要求保護芐基化哌嗪，它們可通過抑制趨化因子活性而治療炎性疾病。最優選化合物的例子總結在表1中。
表1 注解所有2，5-二甲基哌嗪衍生物都合成為外消旋混合物，經測試也為外消旋混合物。
美國專利4,742,062在合成抗高脂血癥的藥物中公開了一種芐基肉桂酰基-哌嗪衍生物1-(4-氯芐基)-4-(2，4-二氯肉桂酰基)哌嗪。
美國專利4,616,086公開了作為抗高脂血癥藥物的1-肉桂酰基-哌嗪-4-基-甲基苯甲酸衍生物及其酯。
Caignard等(Eur.J.Med.Chem.2000，35，107)公開了某些對σ位點具有低親和力的芐基哌嗪的肉桂酰胺。
發明內容
令人驚訝地發現，下式(I)的化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑合物在抑制趨化因子受體CCR1信號傳導方面具有預料不到的效果
其中式(I)中酰胺部分的雙鍵具有E構型；X為氟原子或氯原子；位于哌嗪環2位和5位的兩個甲基彼此為反式構型；R1為a)下式的芳族基 其中R2是π值為0.5-0.9且摩爾折射率(molrefractory-value，MR)為5.0-9.0的取代基，例如甲基、氯、溴、三氟甲基，或者R2為硝基或甲氧基；R3選自氫、氯、溴、甲基、三氟甲基、甲氧基和硝基，前提條件是當R2為甲氧基時，則R3為甲氧基，當R2為硝基時，則R3為氫、氯、甲基或三氟甲基；R4選自氫和甲氧基，前提條件是當R2為甲氧基時，則R4選自氫、氯、溴或甲氧基，或者當R3為氫時，則R4為氫，R5為氫、氯、甲基，前提條件是當R5為氯或甲基時，則X為氟，R2為氯或甲基，R3為氫；b)下式的雜芳族基
其中Y為O或S；R6為一個或多個獨立選自以下的取代基氫、鹵素、C1-C4烷基、C2-C4烯基、C2-C4炔基、鹵代烷基、烷氧基、鹵代烷氧基、羥基烷基、羥基、烷硫基、烷基磺酰基、烷基亞磺酰基、硝基、氰基、烷基氨基、芳基、氨基、烷基磺酰基氨基、二烷基氨磺酰基、氨磺酰基、羧基、烷基羰基、烷氧基羰基烷基、氨基羰基、單烷基氨基羰基、二烷基氨基羰基、脲基和雜芳基；c)下式的雜芳族基 其中R7為一個或多個獨立選自以下的取代基氫、鹵素、C1-C4烷基、C2-C4烯基、C2-C4炔基、鹵代烷基、烷氧基、鹵代烷氧基、羥基烷基、羥基、烷硫基、烷基磺酰基、烷基亞磺酰基、硝基、氰基、烷基氨基、芳基、氨基、烷基磺酰基氨基、二烷基氨磺酰基、氨磺酰基、羧基、烷基羰基、烷氧基羰基烷基、氨基羰基、單烷基氨基羰基、二烷基氨基羰基、脲基和雜芳基。
一組優選的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑合物中R1為a)下式的芳族基
其中R2選自甲基、氯、溴、三氟甲基、硝基和甲氧基；R3選自氫、氯、溴、甲基、三氟甲基、甲氧基和硝基，前提條件是當R2為甲氧基時，則R3為甲氧基，當R2為硝基時，則R3為氫、氯、甲基或三氟甲基；R4選自氫和甲氧基，前提條件是當R2為甲氧基時，則R4選自氫、氯、溴或甲氧基，或者當R3為氫時，則R4為氫；R5為氫、氯、甲基，前提條件是當R5為氯或甲基時，則X為氟，R2為氯或甲基，R3為氫；b)下式的雜芳族基 其中R6為一個或多個獨立選自以下的取代基氫、鹵素、甲基、乙基、鹵代烷基、烷氧基、鹵代烷氧基和硝基；c)下式的雜芳族基
其中R7為一個或多個獨立選自以下的取代基氫、鹵素、C1-C3烷基、鹵代烷基、烷氧基、鹵代烷氧基、硝基、氰基、烷基氨基、芳基、烷基羰基、氨基羰基。
優選的化合物有(1)(E)-(反)-3-(4-溴-苯基)-1-[4-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮(2)(E)-(反)-3-(4-氯-3-硝基-苯基)-1-[4-(4-氯-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮(3)(E)-(反)-3-(3，4-二氯-苯基)-1-[4-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(4)(E)-(反)-1-[4-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-3-對甲苯基-丙-2-烯-1-酮(5)(E)-(反)-1-[4-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-3-(4-硝基-苯基)-丙-2-烯-1-酮(6)(E)-(反)-3-(2，4-二氯-苯基)-1-[4-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮鹽酸鹽(7)(E)-(反)-3-苯并[b]噻吩-3-基-1-[4-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮(8)(E)-(反)-3-(3，4-二氯-苯基)-1-[4-(4-氯-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮(9)(E)-(反)-3-(3，4-二甲氧基-苯基)-1-[4-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮(10)(E)-(反)-3-(3-溴-4，5-二甲氧基-苯基)-1-[4-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮(11)(E)-(反)-3-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-1-[4-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮(12)(E)-(反)-3-苯并[2，1，3]二唑-5-基-1-[4-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮(13)(E)-(反)-3-(2，4-二甲基-苯基)-1-[4-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮(14)(E)-(反)-1-[4-(4-氯-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-3-(4-氯-苯基)-丙-2-烯-1-酮(15)(E)-(反)-1-[4-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-3-(4-甲基-3-硝基-苯基)-丙-2-烯-1-酮(16)(E)-(反)-1-[4-(4-氯-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-3-(4-甲基-3-硝基-苯基)-丙-2-烯-1-酮(17)(E)-(反)-3-苯并[2，1，3]噻二唑-5-基-1-[4-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮(18)(E)-(反)-1-[4-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-3-(3，4，5-三甲氧基-苯基)-丙-2-烯-1-酮(19)(E)-(反)-3-(3-氯-4-硝基-苯基)-1-[4-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮(20)(E)-(反)-3-(4-氯-3-甲氧基-5-硝基-苯基)-1-[4-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮(21)(E)-(反)-1-[4-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-3-(4-三氟甲基-苯基)-丙-2-烯-1-酮(22)(E)-(反)-1-[4-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-3-(3-三氟甲基-4-硝基-苯基)-丙-2-烯-1-酮(23)(E)-(反)-3-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-1-[4-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮(24)(E)-(反)-3-(3-氯-4，5-二甲氧基-苯基)-1-[4-(4-氟芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮(25)(E)-(反)-3-(4-溴-3，5-二甲氧基-苯基)-1-[4-(4-氟芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮(26)(E)-(反)-1-[4-(4-氟芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-3-(3-甲氧基4-甲基-苯基)-丙-2-烯-1-酮(27)(E)-(反)-3-(4-溴-苯并[2，1，3]二唑-6-基)-1-[4-(4-氟芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮(28)(E)-(反)-3-(4-溴-苯基)-1-[4-(4-氯芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮(29)(E)-(反)-1-[4-(4-氯芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-3-(4-硝基-苯基)-丙-2-烯-1-酮(30)(E)-(反)-3-(3-溴-4-氯-苯基)-1-[4-(4-氟芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮(31)(E)-(反)-3-(4-溴-3-氯-苯基)-1-[4-(4-氟芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮(32)(E)-(反)-3-(3，4-二溴-苯基)-1-[4-(4-氟芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮(33)(E)-(反)-3-(4-溴-3-硝基-苯基)-1-[4-(4-氟芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮(34)(E)-(反)-3-(4-氯-苯并[2，1，3]二唑-6-基)-1-[4-(4-氟芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮(35)(E)-(反)-3-(4-溴-苯并[2，1，3]噻二唑-6-基)-1-[4-(4-氟芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮(36)(E)-(反)-3-(4-氯-苯并[2，1，3]噻二唑-6-基)-1-[4-(4-氟芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮(37)(E)-(反)-3-(4-溴-5-甲氧基-苯并[2，1，3]噻二唑-6-基)-1-[4-(4-氟芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮(38)(E)-(反)-1-[4-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-3-(4-硝基-苯并[2，1，3]噻二唑-5-基)-丙-2-烯-1-酮(39)(E)-(反)-3-(4-氯-苯基)-1-[4-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮(40)(E)-(反)-3-(4-氯-3-硝基-苯基)-1-[4-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮。
本發明以上式(I)的優選化合物的實例具有下表2中的取代基。
表2
定義本文使用的術語“治療”包括預防以及減輕疾病的癥狀。
在本說明書上下文中，烷基、烯基或炔基取代基或者某個取代基的烷基、烯基或炔基部分可以是支鏈、直鏈或環狀的。此外，氮原子可以是單取代的或者被相同或不同的烷基、烯基或炔基部分獨立地二取代。
除非另有說明，否則“烷基”是指通過碳碳單鍵連接并且具有1-4個碳原子的烴基，選自甲基、乙基、正丙基、異丙基、環丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基和環丁基。描述符C-1至C-4是指烷基中存在的碳原子數量。
“烯基”是指包含一個碳碳雙鍵和2-4個碳原子的烴基。
“炔基”是指包含一個碳碳三鍵和2-4個碳原子的烴基。
“烷氧基”是指基團-ORAlk，其中RAlk為以上定義的烷基。
“鹵代”或“鹵素”是指氟、氯、溴或碘。
“鹵代烷基”是指被一個或多個鹵素取代的以上定義的烷基，例如三氟甲基、二氟甲基、五氟乙基、三氯甲基等。
“鹵代烷氧基”是指基團-ORHal，其中RHal是以上定義的鹵代烷基。
“硝基”是指基團-NO2。
“羧基”是指基團-C(O)OH或-C(O)O-。
“氰基”是指基團-CN。
CHCl3是指氯仿。
CH2Cl2是指二氯甲烷。
“羥基”是指基團-OH。
“羥基烷基”是指被羥基取代的以上定義的烷基。
“烷硫基”是指基團-S-RAlk，其中RAlk為以上定義的烷基。
“烷基磺酰基”是指基團-S(O)2RAlk，其中RAlk為以上定義的烷基。
“烷基亞磺酰基”是指基團-S(O)RAlk，其中RAlk為以上定義的烷基。
“氨基”是指基團-NH2。
“烷基氨基”是指基團-N-(H)RAlk，其中RAlk為以上定義的烷基；或-N-(RAlk)2，其中RAlk獨立地為相同或不同的以上定義的烷基。
“芳基”是指任選取代的芳族基團，并且基團中包含至少一個具有共軛π電子系統的環，包含最多兩個共軛的和/或稠合的環系統。芳基包括碳環芳基和雙芳基，它們都是可任選取代的。取代基選自以上定義的鹵素、C1-C4烷基、NH2、OCF3、CF3、烷氧基、烷硫基、CN、烷基磺酰基和NO2。
“烷基磺酰基氨基”是指基團-N(H)-S(O)2RAlk，其中RAlk為以上定義的烷基。
“氨磺酰基”是指基團-S(O)2NH2。
“二烷基氨磺酰基”是指基團-S(O)2N(RAlk)2，其中RAlk獨立地為相同或不同的以上定義的烷基。
“烷基羰基”是指基團-C(O)RAlk，其中RAlk為以上定義的烷基。
“烷氧基羰基烷基”是指基團-C(O)ORAlk，其中RAlk為以上定義的烷基。
“氨基羰基”是指基團-C(O)NH2。
“烷基氨基羰基”是指基團-C(O)N(H)RAlk，其中RAlk為以上定義的烷基；或基團-C(O)N(RAlk)2，其中RAlk獨立地為相同或不同的以上定義的烷基。
“脲基”是指基團-N-(H)C(O)NH2。
“雜芳基”是指任選取代的芳族基團，并且基團中包含至少一個具有共軛π電子系統的環，包含最多兩個共軛的和/或稠合的環系統以及1-3個選自O、S和N的雜原子。雜芳基包括碳環雜芳基、芳基-雜芳基和雙雜芳基，它們都是可任選取代的。取代基選自以上定義的鹵素、C1-C4烷基、NH2、OCF3、CF3、烷氧基、烷硫基、CN、烷基磺酰基和NO2。雜芳基環的實例包括吡咯、呋喃、噻吩、吲哚、異吲哚、苯并呋喃、異苯并呋喃、苯并噻吩、吡啶、喹啉、異喹啉、喹嗪、吡唑、咪唑、異唑、唑、異噻唑、噻唑、噠嗪、嘧啶和吡嗪。
“反”是指兩個甲基位于哌嗪平面的相反兩側。“順”是指兩個甲基位于哌嗪平面的同側。“E”是指酰胺部分的雙鍵上的取代基是“entgegen”，即相反的。
π和MR參數的描述及其值可以參見Hansch，C.和Leo，A.，Exploring QSARFundamentals and Applications in Chemistry andBiology.ACS，Washington，DC 1995；Hansch，C.，Leo，A.和Hoekman，D.，Exploring QSARHydrophobic，Electronic，and Steric Constants.ACS，Washington，DC 1995。
結構活性關系現有技術化合物
1-[4-(4-氟-芐基)-哌嗪-1-基]-3-(3，4，5-三甲氧基-苯基)-丙-2-烯-1-酮、3-(4-氯-苯基)-1-[4-(4-氟-芐基)-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮和1-(4-氯芐基)-4-(2，4-二氯肉桂酰基)-哌嗪是現有技術化合物，在下文中分別稱為化合物A、B和C。化合物A和B在國際專利申請WO 98/56771(分別在第118頁的第25行和第19行)中披露。化合物A的E-異構體在美國專利4,368,199中披露并要求保護。化合物C在美國專利4,742,062中披露。
與現有技術化合物A、B(E構型和Z構型)、C以及不同的對照化合物相比，本發明化合物在結合親和性測定中顯示出對CCR1的親和力增加(見下表3)。此外，令人驚奇的是在Ca2+流出測定中，本發明化合物比現有技術化合物及對照化合物具有強得多的抑制作用。本發明化合物(R1為芳族基)功效的改善尤其與三個結構特征有關，即1.芐基哌嗪部分的對位引入X(氯或優選氟)使功效和親和力顯著增加。在現有技術中沒有公開這種效應。然而，用另外的官能團(例如烷基或氫)置換X將降低功效和親和力。
2.式(I)中2，5-位的兩個甲基為反式構型。反-2，5-位的甲基替換為2，6-位、3，5-位或者用氫取代以及改變取向為順-2，5取代，則化合物在Ca2+流出測定以及結合親和性測定中功效顯著下降。
3.肉桂酰胺部分的雙鍵構型為E構型。肉桂酰胺部分的雙鍵構型從E構型變為Z構型將降低功效和親和力。雙鍵還原為亞乙基或取代雙鍵將降低功效和親和力。
綜合以上1、2和3項特征的本發明提供具有令人驚奇又意想不到的功效和親和力的化合物。
此外，口服生物利用度是經口服給藥后吸收劑量分數，描述了本發明化合物到達體循環的比率和數量。因此，優化生物利用度對改善化合物的藥代動力學方面是至關重要的。
化合物的制備本發明還提供以下兩種制備式(I)化合物的方法。
方法A 式(I)化合物可以通過已知方法制備，例如以上所給出的方法使式(II)哌嗪衍生物與式(III)苯甲醛反應，其中X如式(I)中的定義，Y為甲酰基(-CHO)。此類還原性胺化反應是文獻已知的，例如Berger等，Bioorg.Med.Chem.Lett.2002，12，2989。另一個例子是，使式(II)哌嗪衍生物與式(III)芐基鹵反應，其中X如式(I)中的定義，Y為鹵代甲基(-CH2Br或-CH2Cl)。在催化量碘化鉀存在下，式(II)化合物與摩爾過量的式(III)化合物在質子惰性極性溶劑(例如二甲基甲酰胺)中反應。在酸清除性堿(例如三甲胺)存在下，將所得反應混合物在60℃攪拌約3小時至24小時。然后通過標準分離技術，例如有機相萃取、溶劑蒸發和快速柱色譜純化，將式(I)化合物從反應混合物中分離出來。通式(II)化合物可以通過例如Sekiya等(J.Med.Chem 1983，26，411)介紹的方案制備。式(II)范圍內的化合物可以由通常類似于所述文獻的方法制備。通式(III)化合物是市售的。
方法B 式(I)化合物還可以如下制備將式(IV)哌嗪衍生物(其中X如式(I)中的定義)用式(V)化合物處理，其中L1為離去基團(例如鹵離子(例如氯離子)、羥基、苯并三唑-1-基酯、異脲基)，R1如式(I)中的定義。本發明方法可以方便地在有機溶劑(例如CH2Cl2或CHCl3)中于例如0℃以上(例如20-120℃)實施。
最優選這樣的方法在摩爾過量的碳二亞胺(例如N-環己基碳二亞胺)、N′-甲基聚苯乙烯和1-羥基苯并三唑存在下，將式(IV)胺衍生物的氯仿溶液用摩爾過量的式(V)化合物處理，其中L1為羥基。在微波烘箱(Personal Chemistry的Smith Synthesiser)中，通常將反應混合物在60℃-150℃攪拌100-1000秒。在這些條件下，收率提高到99％。式(IV)化合物可通過例如Tabia等(J.Med.Chem.1999，42，2870)或實施例9描述的已知方案制備。式(IV)范圍內的化合物可以由通常類似于所述文獻的方法制備。式(V)化合物是市售的或者例如以下文獻介紹的Soloshonok等，Helv.Chim.Acta，2002，85，3616；Anderson等，J.Med.Chem.，1988，31，2097和Larhed等，J.Org.Chem.，1996，61，9582。式(V)范圍內的化合物可以由通常類似于所述文獻的方法制備或者按照實施例1、實施例2、實施例3和實施例4制備。
本發明還可使用二甲基-哌嗪衍生物的酸加合物，其中這樣的酸包括例如鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硫酸、磷酸、碳酸、蘋果酸、檸檬酸、富馬酸、酒石酸、草酸、甲磺酸、對甲苯磺酸、三氟乙酸，等等。其它合適的鹽參見Remington′s Pharmaceutical Sciences，第17版，Mack Publishing Company，Easton，PA，1985，第1418頁。
實施例1(E)-3-氯-4-硝基-肉桂酸將2-氯-4-溴-苯胺(413mg，2.0mmol)和間氯過苯甲酸(60％，1.72g，6mmol)的二氯甲烷(30ml)的混合物回流24小時。冷卻后，將溶液用碳酸鈉(3×10ml)和水(20ml)洗滌。蒸發有機相，將殘余物上樣到快速柱色譜，得到355mg 4-溴-2-氯-1-硝基-苯(收率75％)。4-溴-2-氯-1-硝基苯(237mg，1.0mmol)、丙烯酸甲酯(108μl，1.2mmol)、碳酸鉀(150mg，1.1mmol)、三丁胺(263μl，1.1mmol)和催化量二氯化雙(三苯膦基)合鈀(II)(0.005eq.)的DMF(5ml)溶液在微波烘箱中于150℃加熱10分鐘。加入1M氫氧化鈉水溶液(1ml)和水(4ml)，將混合物在微波烘箱中于130℃加熱5分鐘。溶液用1N鹽酸酸化，水層用乙酸乙酯萃取。真空除去有機溶劑，將殘余物上樣到快速柱色譜，得到標題化合物，收率40％。
1H NMRδ(CDCl3)7.94(d，1H)，7.72(d，1H)，7.719(d，1H)，7.57(dd，2H)，6.56(d，1H)按照類似的方法，用芳基溴或芳基碘可以獲得其它肉桂酸。
實施例2(E)-3-苯并[2，1，3]二唑-5-基-丙烯酸向氫化鈉(29mg，1.2mmol)的無水THF(6ml)懸浮液中滴加膦酰基乙酸三乙酯(269mg，1.2mmol)，在室溫下攪拌反應混合物1小時。加入苯并[2，1，3]二唑-5-甲醛(148mg，1.0mmol)，在微波烘箱中于140℃加熱混合物5分鐘。加入1eq Wang-苯甲醛樹脂，將混合物在微波烘箱中于140℃再加熱5分鐘。加入氯仿(6ml)，濾出樹脂，用氯仿洗滌。蒸發有機溶劑，將殘余物上樣到快速柱色譜。將所得酯溶于EtOH(3ml)，加入1M氫氧化鈉水溶液(1.5ml)。混合物在微波烘箱中于120℃加熱5分鐘。溶液用1N鹽酸酸化，濾出固體，用水洗滌，干燥，得到標題化合物，收率73％。
1H NMRδ(CDCl3)8.36(s，1H)，8.05(m，2H)，7.74(d，1H)，6.82(d，1H)按照類似的方法，用芳基醛或雜芳基醛可以獲得其它(E)-丙烯酸。
實施例3(E)-3-(5-甲氧基-苯并[2，1，3]二唑-6-基)-丙烯酸將1-氨基-5-甲氧基-4-甲基-2-硝基苯的冰醋酸(20ml)溶液逐步加入到攪拌后的冰冷亞硝酰基硫酸[用NaNO2(11mmol)和H2SO4(20mlsp gr 1.84)制備]中，溫度不要超過15℃。加入完畢后，在5℃繼續攪拌1小時，然后將溶液倒在碎冰(100g)上。將此重氮鹽溶液加入到NaN3(10mmol)的H2O(25ml)溶液中，沉淀出固體疊氮化物，因為可能分解，所以不要將其進一步純化。將粗制的潮濕疊氮化物在冰醋酸(10ml)中回流1小時。冷卻后，蒸發溶劑，得到5-甲氧基-6-甲基-苯并呋咱(benzofuroxan)(收率72％)。向含5-甲氧基-6-甲基-苯并呋咱(6.2mmol)的回流EtOH(6ml)溶液中滴加P(OMe)3(12.4mmol)。加入完畢后(20分鐘)，繼續回流1小時。通過旋轉蒸發除去溶劑，將殘余物與水(10ml)振蕩。濾出所得固體，用水洗滌。產物用EtOH-H2O重結晶，得到5-甲氧基-6-甲基-苯并[2，1，3]二唑(收率64)。將5-甲氧基-6-甲基-苯并[2，1，3]二唑(2.8mmol)、N-溴丁二酰亞胺(3.1mmol)和Bz2O2(催化劑)在CCl4(6ml)中回流22小時。冷卻的混合物用H2O(2×6ml)洗滌，干燥(Na2SO4)有機相，蒸發溶劑。將殘余物溶于二烷(8ml)，加入碳酸鈣(14mmol)和水(8ml)。將混合物回流3小時，然后真空蒸發。殘余物依次用CH2Cl2、2N鹽酸處理，直到產生的白色沉淀溶解。分離出的水相用CH2Cl2萃取。真空除去有機溶劑，將殘余物上樣到快速柱色譜(甲苯→甲苯∶EtOAc，20∶1→甲苯∶EtOAc，1∶1)，得到6-羥基甲基-5-甲氧基-苯并[2，1，3]二唑(收率61％)。將所得醇(1.7mmol)溶于CHCl3(15ml)，加入活性二氧化錳(15mmol)。在室溫下攪拌混合物2.5小時，然后通過硅藻土過濾。真空濃縮濾液，得到5-甲氧基-苯并[2，1，3]二唑-6-甲醛(收率86％)。將5-甲氧基-苯并[2，1，3]二唑-6-甲醛(0.8mmol)、丙二酸(0.9mmol)、哌啶(5μl)、吡啶(0.5ml)和EtOH(1.5ml)的混合物在攪拌下回流5小時。在冷卻至室溫后，沉淀出產物。加入2N鹽酸，攪拌混合物1小時。過濾收集沉淀，用水洗滌，減壓干燥，得到標題化合物(收率50％)。
1H NMRδ(CDCl3)12.76(bs，1E)，8.49(s，1H)，7.77(d，1H)，7.32(s，1H)，6.81(d，1H)，4.00(s，3H).
按照類似的方法制備(E)-3-(4-溴-苯并[2，1，3]二唑-6-基)-丙烯酸、(E)-3-苯并[2，1，3]二唑-4-基-丙烯酸和(E)-3-(5-氯-苯并[2，1，3]二唑-6-基)-丙烯酸。
實施例4(E)-3-(4-硝基-苯并[2，1，3]噻二唑-5-基)-丙烯酸向4-氯-2-甲基-6-硝基苯胺(5.0g，27mmol)的1，4-二烷(20ml)溶液中加入鐵粉(5.2g，940mmol)和NH4Cl水溶液(5.0g，940mmol，在13ml水中)。將反應混合物回流5小時，然后讓其達到室溫。通過硅藻土過濾反應混合物，然后濃縮。將粗產物溶于CH2Cl2，過濾后濃縮(3，4-二氨基-2-硝基甲苯的產量4.3g，99％)。
向3，4-二氨基-2-硝基甲苯(1.91g，11mmol)的三乙胺(7.7ml)溶液中加入SOCl2(2.23g，19mmol)。將反應混合物回流3小時，然后讓其達到室溫。過濾反應混合物，濃縮，殘余物用甲苯/庚烷重結晶(5-甲基-4-硝基-苯并[2，1，3]噻二唑的產量1.3g，61％)。
1H NMRδ(CDCl3)8.11(d，1H)，7.69(d，1H)，2.67(s，3H).
向5-甲基-4-硝基-苯并[2，1，3]噻二唑(1.3g，6.7mmol)的CCl4(10ml)溶液中加入Br2(1.07g，6.7mmol)和Bz2O2(20mg)。將反應混合物回流120小時，讓其達到室溫，然后蒸發至干。殘余物由快速色譜純化(硅膠60和CH2Cl2/甲醇(1∶0→95∶5))，獲得原料和所需產物(約40％)的混合物。將該混合物溶于1，4-二烷(10ml)。加入CaCO3(2.0g，20mmol)和水(10ml)，將反應混合物回流18小時。讓反應混合物達到室溫，濃縮至干。向殘余物的CH2Cl2(20ml)的懸浮液中加入2M HCl水溶液，直到沒有固體剩下。水層用CH2Cl2萃取，干燥合并的有機層，過濾后濃縮。將粗產物溶于甲苯，用快速色譜純化(硅膠60，庚烷/乙酸乙酯(4∶1→2∶1→1∶1))(5-(羥基甲基)-4-硝基-苯并[2，1，3]噻二唑的產量0.20g，14％)。
1H NMRδ(CDCl3)7.94(d，1H)，7.83(d，1H)，4.97(s，2H)，2.04(bs，1H).
向5-(羥基甲基)-4-硝基-苯并[2，1，3]噻二唑(0.20g，0.95mmol)的CHCl3(18ml)溶液中加入MnO2(0.74g，8.5mmol)，將反應混合物在室溫下靜置18小時。通過硅藻土過濾反應混合物，然后濃縮(4-硝基-苯并[2，1，3]噻二唑-5-基-甲醛的產量0.18g，96％)。
1H NMRδ(CDCl3)10.61(s，1H)，8.11(d，1H)，8.02(d，1H).
向4-硝基-苯并[2，1，3]噻二唑-5-基-甲醛(0.18g，0.86mmol)的吡啶(2ml)溶液中加入丙二酸(0.14g，1.34mmol)和哌啶(0.1ml)。將反應混合物回流30分鐘，然后讓其達到室溫。反應混合物用1M HCl水溶液酸化，過濾收集沉淀出的粗制產物，用CH2Cl2充分洗滌((E)-3-(4-硝基-苯并[2，1，3]噻二唑-5-基)-丙烯酸的產量0.043g，19％)。
1H NMRδ(DMSO-d6)8.23(d，1H)，8.07(m，2H)，6.90(d，1H).
按照類似的方法制備其它(E)-3-(苯并[2，1，3]噻二唑基)-丙烯酸。
實施例55.1(E)-(反)-3-(4-溴-苯基)-1-[4-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮將(反)-1-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪(222mg，1.0mmol)、(E)-3-(4-溴-苯基)-丙烯酸(341mg，1.5mmol)、1-羥基苯并三唑(203mg，1.5mmol)以及N-環己基碳二亞胺、N′-甲基聚苯乙烯(167g，3mmol載荷1.8mmol/g的樹脂)在CHCl3中的混合物在微波烘箱中于110℃加熱5分鐘。讓混合物達到室溫，加入TBD-甲基聚苯乙烯(1003mg，3mmol載荷2.9mmol/g的樹脂)，攪拌混合物過夜。將兩種樹脂濾出，用CHCl3和EtOAc洗滌。真空濃縮濾液，將殘余物上樣到快速柱色譜(甲苯→甲苯∶EtOAc，20∶1→甲苯∶EtOAc，1∶1)，得到標題產物，收率97％。
1H NMRδ(CDCl3)7.61(d，1H)，7.50(dd，2H)，7.37(d，2H)，7.33(dd，2H)，7.01(dd，2H)，6.84(d，1H)，3.53(m，2H)，3.06(bs，1H)，2.74(bs，1H)，2.29(d，1H)，1.34(d，3H)，1.01(d，3H)按照類似的方法制備下列化合物5.2(E)-(反)-3-(4-氯-3-硝基-苯基)-1-[4-(4-氯-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮1H NMRδ(CDCl3)8.01(dd，1H)，7.59(m，3H)，7.30(m，4H)，6.92(d，1H)，3.54(m，2H)，3.08(bs，1H)，2.76(d，1H)，2.30(d，1H)，1.35(d，3H)，1.01(d，3H)5.3(E)-(反)-3-(3，4-二氯-苯基)-1-[4-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮1H NMRδ(CDCl3)7.59(m，1H)，7.43(m，1H)，7.33(m，3H)，7.01(dd，2H)6.83(d，1H)，3.53(m，2H)，3.07(bs，1H)，2.74(d，1H)，2.29(d，1H)，1.34(bs，3H)，1.01(d，3H)5.4(E)-(反)-1-[4-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-3-對甲苯基-丙-2-烯-1-酮1H NMRδ(CDCl3)7.66(d，1H)，7.41(d，2H)，7.32(m，2H)，7.17(d，2H)，7.01(dd，2H)，6.81(d，1H)，3.52(m，2H)，3.05(bs，1H)，2.74(dd，1H)，2.36(s，3H)，2.28(dd，1H)，1.33(d，3H)，1.01(d，3H)5.5(E)-(反)-1-[4-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-3-(4-硝基-苯基)-丙-2-烯-1-酮1H NMRδ(CDCl3)8.23(d，2H)，7.70(d，1H)，7.65(d，2H)，7.33(dd，2H)，7.02(dd，2H)，6.97(d，1H)，3.54(m，3H)，3.08(bs，1H)，2.76(d，1H)，231(d，1H)，1.36(bs，3H)，1.02(d，3H)5.6(E)-(反)-3-(2，4-二氯-苯基)-1-[4-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮鹽酸鹽1H NMRδ(CDCl3)7.98(d，1H)，7.91(dd，1H)，7.49(m，2H)，7.29(m，2H)，7.15(dd，2H)，6.74(d，1H)，4.38(m，2H)，3.93(m，2H)，2.97(bs，1H)，2.85(d，1H)，1.63(bs)，1.40(d，3H)5.7(E)-(反)-3-苯并[b]噻吩-2-基-1-[4-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮1H NMRδ(CDCl3)7.90(d，1H)，7.76(m，2H)，7.42(s，1H)，7.34(m，4H)，7.01(d，2H)，6.71(d，1H)，3.53(m，2H)，3.07(bs，1H)，2.75(d，1H)，2.30(d，1H)，1.34(bs，3H)，1.02(d，3H)5.8(E)-(反)-3-苯并[b]噻吩-3-基-1-[4-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮1H NMRδ(CDCl3)8.01(s，1H)，7.98(d，2H)，7.88(d，1H)，7.69(s，1H)，7.43(m，2H)，7.33(dd，2H)，7.01(dd，2H)，6.95(d，1H)，3.54(m，2H)，3.07(bs，1H)，2.77(dd，1H)，2.31(d，1H)，1.36(d，3H)，1.03(d，3H)5.9(E)-(反)-3-(3，4-二氯-苯基)-1-[4-(4-氯-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮1H NMRδ(CDCl3)7.57(m，2H)，7.44(d，1H)，7.31(m，5H)，6.83(d，1H)，3.53(m，2H)，3.07(bs，1H)，2.75(d，1H)，2.29(d，1H)，1.34(bs，3H)，1.01(d，3H)
5.10(E)-(反)-3-(3，4-二甲氧基-苯基)-1-[4-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮1H NMRδ(CDCl3)7.63(d，1H)，7.33(dd，2H)，7.11(dd，1H)，7.01(m，3H)，6.86(d，1H)，6.71(d，1H)，3.92(s，3H)，3.91(s，3H)，3.53(m，2H)，3.05(bs，1H)，2.75(dd，1H)，2.29(dd，1H)，1.34(d，3H)，1.01(d，3H)5.11(E)-(反)-3-(3-溴-4，5-二甲氧基-苯基)-1-[4-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮1H NMRδ(CDCl3)7.54(d，1H)，7.33(m，3H)，7.01(dd，2H)，6.93(d，1H)，6.75(d，1H)，3.89(s，3H)，3.88(s，3H)，3.53(m，2H)，3.06(bs，1H)，2.75(d，1H)，2.29(d，1H)，1.34(d，3H)，1.01(d，3H)5.12(E)-(反)-3-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-1-[4-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮1H NMRδ(CDCl3)，7.80(d，1H)，7.63(d，1H)，7.51(d，1H)，7.33(dd，2H)，7.01(dd，2H)，6.88(d，1H)，3.53(m，2H)，3.07(bs，1H)，2.75(d，1H)，2.30(d，1H)，1.35(bs，3H)，1.01(d，3H)5.13(E)-(反)-3-苯并[2，1，3]二唑-5-基-1-[4-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮1H NMRδ(CDCl3)7.89(s，1H)，7.85(d，1H)，7.72(d，1H)，7.62(d，1H)，7.38(dd，2H)，7.03(m，3H)，3.63(m，2H)，3.21(bs，1H)，2.81(bs，1H)，2.38(d，1H)，1.38(d，3H)，1.07(d，3H)5.14(E)-(反)-3-(2，4-二甲基-苯基)-1-[4-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮1H NMRδ(CDCl3)7.94(d，1H)，7.44(d，1H)，7.34(dd，2H)，7.02(m，4H)，6.73(d，1H)，3.54(m，2H)，3.06(bs，1H)，2.75(dd，1H)，2.41(s，3H)，2.33(s，3H)，2.29(d，1H)，1.34(d，3H)，1.02(d，3H)5.15(E)-(反)-1-[4-(4-氯-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-3-(4-氯-苯基)-丙-2-烯-1-酮1H NMRδ(CDCl3)7.63(d，1H)，7.44(d，2H)，7.34(m，6H)，6.82(d，1H)，3.53(m，2H)，3.06(bs，1H)，2.75(dd，1H)，2.28(d，1H)，1.34(d，3H)，1.01(d，3H)5.16(E)-(反)-1-[4-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-3-(4-甲基-3-硝基-苯基)-丙-2-烯-1-酮1H NMRδ(CDCl3)8.12(d，1H)，7.63(m，2H)，7.34(m，3H)，7.03(dd，2H)，6.91(d，1H)，3.54(m，2H)，3.07(bs，1H)，2.75(d，1H)，2.62(s，3H)，2.30(d，1H)，1.35(bs，3H)，1.01(d，3H)5.17(E)-(反)-1-[4-(4-氯-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-3-(4-甲基-3-硝基-苯基)-丙-2-烯-1-酮1H NMRδ(CDCl3)8.13(d，1H)，7.65(d，1H)，7.59(dd，1H)，7.35(d，1H)，7.30(m，4H)，6.91(d，1H)，3.54(m，2H)，3.08(bs，1H)，2.76(bs，1H)，2.62(s，3H)，2.29(d，1H)，1.35(bs，3H)，1.01(d，3H)5.18(E)-(反)-3-苯并[2，1，3]噻二唑-5-基-1-[4-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮1H NMRδ(CDCl3)8.08(s，1H)，7.99(d，1H)，7.81(dd，2H)，7.34(dd，2H)，7.02(m，3H)，3.55(m，H)，3.09(bs，1H)，2.77(d，1H)，2.32(d，1H)，1.37(bs，3H)，1.04(d，3H)5.19(E)-(反)-1-[4-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-3-(3，4，5-三甲氧基-苯基)-丙-2-烯-1-酮1H NMRδ(CDCl3)7.59(d，1H)，7.33(m，2H)，7.01(dd，2H)，6.73(m，3H)，3.89(s，6H)，3.87(s，3H)，3.53(m，2H)，3.06(bs，1H)，2.75(dd，1H)，2.29(dd，1H)，1.34(d，3H)，1.01(d，3H)5.20(E)-(反)-3-(4-氯-2-硝基-苯基)-1-[4-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮
1H NMRδ(CDCl3)8.03(d，1H)，7.85(d，1H)，7.58(m，2H)，7.33(dd，2H)，7.01(dd，2H)，6.69(d，1H)，3.54(m，2H)，3.07(bs，1H)，2.76(dd，1H)，2.30(dd，1H)，1.35(d，3H)，1.03(d，3H)5.21(E)-(反)-3-(3-氯-4-硝基-苯基)-1-[4-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮1H NMRδ(CDCl3)7.89(d，1H)，7.64(m，1H)，7.59(d，1H)，7.48(dd，1H)，7.31(dd，2H)，6.99(m，3H)，3.52(m，2H)，3.06(bs，1H)，2.72(bs，1H)，2.29(d，1H)，1.34(bs，3H)，0.99(d，3H)；MS(ESI)432[M+H]+.
5.22(E)-(反)-3-(4-氯-3-甲氧基-5-硝基-苯基)-1-[4-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮1H NMRδ(CDCl3)7.58(d，1H)，7.54(d，1H)，7.31(dd，2H)，7.12(d，1H)，7.00(dd，2H)，6.88(d，1H)，3.98(s，3H)，3.52(m，2H)，3.06(bs，1H)，2.74(d，1H)，2.29(d，1H)，1.33(bs，3H)，0.99(d，3H)；MS(ESI)462[M+H]+.
5.23(E)-(反)-1-[4-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-3-(4-三氟甲基-苯基)-丙-2-烯-1-酮1H NMRδ(CDCl3)7.62(d，1H)，7.55(m，4H)，7.26(dd，2H)，6.96(m，2H)，6.86(d，1H)，3.47(m，2H)，3.01(bs，1H)，2.69(d，1H)，2.23(d，1H)，1.28(bs，3H)，0.95(d，3H).
5.24(E)-(反)-3-(2-氯-4-甲基-苯基)-1-[4-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮1H NMRδ(CDCl3)7.98(d，1H)，7.48(d，1H)，7.34(dd，2H)，7.24(s，1H)，7.07(d，1H)，7.02(dd，2H)，6.81(d，1H)，3.54(m，2H)，3.06(bs，1H)，2.75(dd，1H)，2.35(s，3H)，2.29(dd，1H)，1.35(d，3H)，1.02(d，3H).
5.25(E)-(反)-1-[4-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-3-(3-三氟甲基-4-硝基-苯基)-丙-2-烯-1-酮7.93(m，2H)，7.81(d，1H)，7.69(d，1H)，7.34(dd，2H)，7.02(m，3H)，3.55(m，2H)，3.10(bs，1H)，2.76(bs，1H)，2.32(d，1H)，1.37(bs，3H)，1.03(d，3H).
5.26(E)-(反)-3-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-1-[4-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮1H NMRδ(CDCl3)7.63(d，1H)，7.35(m，3H)，7.10(dd，1H)，7.03(dd，2H)，6.83(d，1H)，3.94(s，3H)，3.54(m，2H)，3.08(bs，1H)，2.76(dd，1H)，2.32(d，1H)，1.36(d，3H)，1.02(d，3H).
5.27(E)-(反)-3-(3-氯-4，5-二甲氧基-苯基)-1-[4-(4-氟芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮1H NMRδ(CDCl3)7.56(d，1H)，7.34(dd，2H)，7.19(d，1H)，7.02(dd，2H)，6.91(d，1H)，6.77(d，1H)，3.91(s，3H)，3.90(s，3H)，3.54(m，2H)，3.07(bs，1H)，2.76(m，1H)，2.30(d，1H)，1.35(d，3H)，1.02(d，3H).
5.28(E)-(反)-1-[4-(4-氟芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-3-(5-甲氧基-苯并[2，1，3]二唑-6-基)-丙-2-烯-1-酮1H NMRδ(CDCl3)7.88(m，2H)，7.33(dd，2H)，7.01(m，3H)，6.90(s，1H)，3.97(s，3H)，3.54(m，2H)，3.08(bs，1H)，2.76(d，1H)，2.31(d，1H)，1.36(bs，3H)，1.03(d，3H).
5.29(E)-(反)-3-(4-溴-3，5-二甲氧基-苯基)-1-[4-(4-氟芐基)-3，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮1H NMRδ(CDCl3)7.61(d，1H)，7.34(dd，2H)，7.02(dd，2H)，6.85(d，1H)，6.70(s，2H)，3.94(s，6H)，3.54(m，2H)，3.08(bs，1H)，2.77(dd，1H)，2.31(d，1H)，1.36(d，3H)，1.02(d，3H).
5.30(E)-(反)-1-[4-(4-氟芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-3-(3-甲氧基-4-甲基-苯基)-丙-2-烯-1-酮1H NMRδ(CDCl3)7.66(d，1H)，7.34(dd，2H)，7.14(d，1H)，7.07(d，1H)，7.02(dd，2H)，6.94(s，1H)，6.81(d，1H)，3.87(s，3H)，3.54(m，2H)，3.07(bs，1H)，2.76(dd，1H)，2.30(d，1H)，2.24(s，3H)，1.35(d，3H)，1.02(d，3H).
5.31(E)-(反)-3-苯并[2，1，3]二唑-4-基-1-[4-(4-氟芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮1H NMRδ(CDCl3)7.93(bs，1H)，7.79(m，2H)，7.45(m，2H)，7.35(dd，2H)，7.02(dd，2H)，4.37(bs，1H)，3.79(bs，1H)，3.55(m，2H)，3.10(d，2H)，2.78(s，1H)，2.34(bs，1H)，1.39(d，3H)，1.04(d，3H).
5.32(E)-(反)-3-(4-溴-苯并[2，1，3]二唑-6-基)-1-[4-(4-氟芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮1H NMRδ(CDCl3)7.83(s，2H)，7.68(d，1H)，7.34(dd，2H)，7.01(m，3H)，3.55(m，2H)，3.11(bs，1H)，2.78(d，1H)，2.33(d，1H)，1.38(bs，3H)，1.04(d，3H).
5.33(E)-(反)-3-(4-溴-苯基)-1-[4-(4-氯芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮1H NMRδ(CDCl3)7.61(d，1H)，7.50(d，2H)，7.37(d，2H)，7.30(m，4H)，6.84(d，1H)，3.53(m，2H)，3.06(bs，1H)，2.74(d，1H)，2.28(d，1H)，1.34(d，3H)，1.00(d，3H).
5.34(E)-(反)-3-(3-溴-4，5-二甲氧基-苯基)-1-[4-(4-氯芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮1H NMRδ(CDCl3)7.54(d，1H)，7.34(d，1H)，7.30(m，4H)，6.93(d，1H)，6.74(d，1H)，3.89(s，3H)，3.88(s，3H)，3.53(m，2H)，3.06(bs，1H)，2.75(d，1H)，2.28(d，1H)，1.34(d，3H)，1.01(d，3H).
5.35(E)-(反)-1-[4-(4-氯芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-3-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-丙-2-烯-1-酮1H NMRδ(CDCl3)7.80(d，1H)，7.63(d，1H)，7.58(dd，1H)，7.51(d，1H)，7.30(m，4H)，6.88(d，1H)，3.53(m，2H)，3.07(bs，1H)，2.75(d，1H)，2.29(d，1H)，1.35(bs，3H)，1.01(d，3H).
5.36(E)-(反)-1-[4-(4-氯芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-3-(4-硝基-苯基)-丙-2-烯-1-酮1H NMRδ(CDCl3)8.23(d，2H)，7.70(d，1H)，7.65(d，2H)，7.30(m，4H)，6.98(d，1H)，3.54(m，2H)，3.08(bs，1H)，2.76(d，1H)，2.30(d，1H)，1.36(bs，3H)，1.02(d，3H).
5.37(E)-(反)-1-[4-(4-氯芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-3-(4-甲基-苯基)-丙-2-烯-1-酮1H NMRδ(CDCl3)7.66(d，1H)，7.41(d，2H)，7.30(m，4H)，7.17(d，2H)，6.81(d，1H)，3.53(m，2H)，3.05(bs，1H)，2.74(dd，1H)，2.37(s，3H)，2.27(dd，1H)，1.33(d，3H)，1.00(d，3H).
5.38(E)-(反)-3-(5-氯-苯并[2，1，3]二唑-6-基)-1-[4-(4-氟芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮1H NMRδ(CDCl3)8.03(s，1H)，7.96(m，2H)，7.33(dd，2H)，7.02(m，2H)，6.94(bs，1H)，3.54(m，2H)，3.09(bs，1H)，2.76(bs，1H)，2.31(d，1H)，1.37(bs，3H)，1.04(d，3H).
5.39(E)-(反)-3-(3-溴-4-氯-苯基)-1-[4-(4-氟芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮1H NMRδ(CDCl3)7.77(d，1H)，7.58(d，1H)，7.45(d，1H)，7.37(d，1H)，7.32(dd，2H)，7.02(t，2H)，6.83(bd，1H)，3.61(d，1H)，3.46(d，1H)，3.07(bs，1H)，2.75(bd，1H)，2.30(d，1H)，1.34(bs，3H)，1.01(d，3H).
5.40(E)-(反)-3-(4-溴-3-氯-苯基)-1-[4-(4-氟芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮1H NMRδ(CDCl3)7.58(m，3H)，7.33(dd，2H)，7，24(d，1H)，7.02(t，2H)，6.87(bd，1H)，3.61(d，1H)，3.46(d，1H)，3.07(bs，1H)，2.75(bd，1H)，2.29(d，1H)，1.26(bs，3H)，1.01(d，3H).
5.41(E)-(反)-3-(3，4-二溴-苯基)-1-[4-(4-氟芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮1H NMRδ(CDCl3)7.76(d，1H)，7.61(d，1H)，7.54(d，1H)，7.33(dd，2H)，7.27(m，1H)，7.02(t，2H)，6.86(bd，1H)，3.61(d，1H)，3.46(d，1H)，3.07(bs，1H)，2.75(bd，1H)，2.30(d，1H)，1.34(bs，3H)，1.01(d，3H).
5.42(E)-(反)-3-(4-溴-3-硝基-苯基)-1-[4-(4-氟芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮
1H NMRδ(CDCl3)7.97(d，1H)，7.74(d，1H)，7.63(d，1H)，7.52(d，1H)，7.33(dd，2H)，7.02(t，2H)，6.94(bd，1H)，3.61(d，1H)，3.46(d，1H)，3.08(bs，1H)，2.75(bd，1H)，2.31(d，1H)，1.32(bs，3H)，1.01(d，3H).
5.43(E)-(反)-3-(4-氯-苯并[2，1，3]二唑-6-基)-1-[4-(4-氟芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮1H NMRδ(CDCl3)7.80(s，1H)，7.68(d，1H)，7.63(s，1H)，7.33(dd，2H)，6.99(m，3H)，3.62(d，1H)，3.48(d，1H)，3.09(bs，1H)，2.77(bs，1H)，2.32(d，1H)，1.33(bs，3H)，1.03(d，3H).
5.44(E)-(反)-3-(6-氯-苯并[2，1，3]二唑-4-基)-1-[4-(4-氟芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮1H NMRδ(CDCl3)7.96(bt，1H)，7.82(d，1H)，7.69(d，1H)，7.39(d，1H)，7.34(dd，2H)，7.02(dd，2H)，[4.88(bs)and 3.33(bs)(1H)]，4.34(bd，1H)，3.76(bs，1H)，3.62(d，1H)，3.48(d，1H)，3.10(bs，1H)，2.80(bs，1H)，2.33(bs，1H)，1.35(bs，3H)，1.03(d，3H).
5.45(E)-(反)-3-(4-溴-苯并[2，1，3]噻二唑-6-基)-1-[4-(4-氟芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮1H NMRδ(CDCl3)8.04(s，1H)，8.01(s，1H)，7.77(d，1H)，7.34(dd，2H)，7.01(m，3H)，3.62(d，1H)，3.48(d，1H)，3.10(bs，1H)，2.78(bs，1H)，2.31(d，1H)，1.31(bs，3H)，1.04(d，3H).
5.46(E)-(反)-3-(4-氯-苯并[2，1，3]噻二唑-6-基)-1-[4-(4-氟芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮1H NMRδ(CDCl3)7.98(s，1H)，7.84(s，1H)，7.78(d，1H)，7.34(dd，2H)，7.02(m，3H)，3.62(d，1H)，3.47(d，1H)，3.10(bs，1H)，2.78(bd，1H)，2.32(d，1H)，1.31(bs，3H)，1.04(d，3H).
5.47(E)-(反)-3-(4-溴-5-甲氧基-苯并[2，1，3]噻二唑-6-基)-1-[4-(4-氟芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮1H NMRδ(CDCl3)8.10(s，1H)，7.94(d，1H)，7.34(dd，2H)，7.02(m，3H)，3.98(s，3H)，3.62(d，1H)，3.47(d，1H)，3.09(bs，1H)，2.78(bs，1H)，2.32(d，1H)，1.31(bs，3H)，1.04(d，3H).
5.48(E)-(反)-1-[4-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-3-(4-硝基-苯并[2，1，3]噻二唑-5-基)-丙-2-烯-1-酮1H NMRδ(CDCl3)8.17(d，1H)，7.93(d，1H)，7.81(d，1H)，7.34(dd，2H)，7.02(m，3H)，3.63(d，1H)，3.48(d，1H)，3.09(bs，1H)，2.78(bd，1H)，2.32(d，1H)，1.38(bs，3H)，1.05(d，3H).
5.49(E)-(反)-3-(6-氯-苯并[2，1，3]噻二唑-4-基)-1-[4-(4-氟芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮1H NMRδ(CDCl3)8.17(bd，1H)，7.98(d，1H)，7.83(bd，1H)，7.61(d，1H)，7.34(dd，2H)，7.02(t，2H)，[4.89(bs)and 3.33(bs)(1H)]，4.37(bs，1H)，3.78(bs，1H)，3.62(d，1H)，3.48(d，1H)，3.10(bs，1H)，2.79(bs，1H)，2.34(bd，1H)，1.38(bs，3H)，1.04(d，3H).
實施例66.1(E)-(反)-3-(4-氯-苯基)-1-[4-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮向(反)-1-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪(1.30g，6.7mmol)和三甲胺(1.41ml，10.1mmol)的15ml CHCl3溶液中加入(E)-4-氯-肉桂酰基氯(1.34g，6.7mmol)的溶液，在室溫下攪拌反應混合物3小時。有機層用1M NaOH水溶液洗滌，干燥，濃縮。殘余物用EtOH∶水(7∶3)重結晶，得到純產物，收率80％。
1H NMRδ(d6-丙酮)7.66(m，2H)，7.54(d，1H)，7.40(m，4H)，7.22(d，1H)，7.06(m，2H)，4.59(bs，1H)，4.10(bs，1H)，3.56(m，2H)，3.05(bs，1H)，2.73(d，1H)，2.29(dd，1H)，1.27(d，3H)，0.97(d，3H)按照類似的方法制備下列化合物6.2(E)-(反)-3-(4-氯-3-硝基-苯基)-1-[4-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮1H NMRδ(d6-丙酮)8.29(d，1H)，7.95(dd，1H)，7.71(d，1H)，7.59(d，1H)，7.42(m，3H)，7.06(m，2H)，4.60(bs，1H)，4.11(bs，1H)，3.56(m，2H)，3.05(bs，1H)，2.73(bs，1H)，2.29(d，1H)，1.27(bs，3H)，0.97(d，3H).
實施例7對氯-順-肉桂酸將18-冠-6(5.0g，18.9mmol)的THF(20ml)溶液冷卻至-40℃，依次加入雙(2，2，2-三氟乙基)-(甲氧基羰基甲基)膦酸酯(0.85ml，4mmol)、KHMDS(890mg，4mmol)。在攪拌15分鐘后，加入對氯苯甲醛(560mg，3.78mmol)，攪拌溶液2小時。加入飽和氯化銨水溶液(50ml)和乙醚(30ml)，有機相用1N HCl洗滌。在干燥并蒸發后，殘余物用色譜(SiO2，H/E 4/1)純化，得到對氯-順-肉桂酸甲酯(610mg，82％)。將該甲酯在EtOH/1M NaOH水溶液(2/1，15ml)中于120℃水解5分鐘。在加入水和HCl水溶液后，收集沉淀，得到純對氯-順-肉桂酸(402mg，71％)。
1H NMRδ(CDCl3)11.26(bs，1H)，7.54(m，2H)，7.32(m，2H)，7.00(d，1H)，5.97(d，1H).
實施例8在實施例5描述的相同方法中，使對氯-順-肉桂酸分別與以下化合物反應a)(反)-1-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪8.1(Z)-(反)-3-(4-氯-苯基)-1-[4-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮；化合物D1H NMRδ(CDCl3)7.43(d，1H，旋轉異構體A)，7.37(d，1H，旋轉異構體B)，7.28(m，10H，旋轉異構體A+B)，6.96(m，4H，旋轉異構體A+B)，6.56(d，1H，旋轉異構體A)，6.55(d，1H，旋轉異構體B)，6.06(d，1H，旋轉異構體A)，6.02(d，1H，旋轉異構體B)，4.77(m，1H，旋轉異構體B)，4.27(d，1H，旋轉異構體)，3.97(m，1H，旋轉異構體A)，3.53(m，2H，旋轉異構體A+B)，3.37(m，3H，旋轉異構體A+B)，3.28(dd，1H，旋轉異構體B)，3.16(dd，1H，旋轉異構體A)，3.04(m，1H，旋轉異構體A)，2.83(m，1H，旋轉異構體B)，2.64(dd，1H，旋轉異構體B)，2.39(dd，1H，旋轉異構體A)，2.21(d，1H，旋轉異構體B)，2.07(d，1H，旋轉異構體A)，1.22(d，3H，旋轉異構體B)，1.12(d，3H，旋轉異構體A)，0.93(d，3H，旋轉異構體A)，0.80(d，3H，旋轉異構體B)；m/z＝387[M+H]+。
b)1-(4-氟-芐基)-哌嗪8.2(Z)-3-(4-氯-苯基)-1-[4-(4-氟-芐基)-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮；Z構型的化合物B。
1H NMRδ(CDCl3)7.30(m，4H)，7.23(m，2H)，6.99(dd，2H)，6.61(d，1H)，6.05(d，1H)，3.67(dd，2H)，3.38(s，2H)，3.33(dd，2H)，2.38(dd，2H)，2.06(dd，2H).
實施例9(E)-(順)-3-(4-氯-苯基)-1-[4-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮；化合物E將順-2，5-二甲基哌嗪二氫溴酸鹽(248mg，0.9mmol；T.T.Thang等，J.Am.Chem.Soc.，1985，50，4913)的EtOH(10ml)溶液用三乙胺(91mg，0.9mmol)處理。在60℃加熱混合物，加入對氟芐基溴(85mg，0.45mmol)。30分鐘后，將第二部分的三乙胺(45mg，0.45mmol)和對氟芐基溴(42mg，0.22mmol)加入到反應混合物中。在60℃再攪拌1小后，加入最后一部分三乙胺(46mg，0.45mmol)和對氟芐基溴(43mg，0.23mmol)。讓反應混合物達到室溫，真空除去溶劑。將殘余物溶于CH2Cl2，用1M NaOH水溶液洗滌，用CH2Cl2萃取。將有機層濃縮，然后上樣到快速柱色譜(EtOAc∶MeOH∶NEt330∶2∶1→10∶1∶1)，得到(4％)(順)-1-(4-氟芐基)-2，5-二甲基-哌嗪(8mg，0.036mmol)。按照實施例3描述的相同方法，使(順)-1-(4-氟芐基)-2，5-二甲基-哌嗪(8mg，0.036mmol)與(E)-對氯肉桂酸反應，得到(E)-(順)-3-(4-氯-苯基)-1-[4-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮(10mg，0.025mmol，收率72％)。
平衡狀態的構象異構體，1H NMRδ(CDCl3)7.62(d，1H)，7.45(m，2H)，7.34(m，2H)，7.30(dd，2H)，7.01(dd，2H)，6.81(d，1H)，4.77(bs)，4.44(d)，4.15(m)，3.72(d)，3.19(m)，2.96(d，1H)，2.78(m)，2.59(d，1H)，2.34(bs，1H)，2.17(m，1H)，1.29(m，3H)，1.23(d，3H).
藥理學方法體外試驗在競爭性結合親和性測定中，通過測量化合物從CCR1受體置換出125I-Mip-1α的能力，可以確定化合物對CCR1受體的結合親和性。
Mip-1α在CCR1受體的結合導致胞內鈣濃度升高。在Ca2+流出測定中確定本發明化合物對CCR1受體的這種生物反應的阻斷能力。
由于化合物結合CCR1受體不一定與受體的生物活性相關聯，因此Ca2+流出測定與證明本發明化合物的效果更相關。
體外競爭性結合親和性測定法試劑和溶液1.Screen ReadyTMTargets克隆的人CCR1趨化因子受體，在CHO細胞中表達，包被在96孔FlashPlate上(Perkin Elmer Cat#6120525)2.配體將125I-MIP-1α(Perkin Elmer，比活為2200Ci/mmol)用水復溶至25μCi/ml。
3.測定緩沖液50mM HEPES，1mM CaCl2，5mM MgCl2，0.2％BSA，pH 7.4。
4.MIP-1α(Peprotech EC Ltd Cat#300-08)。
5.將本發明化合物溶于DMSO。進行連續稀釋，每種化合物篩選10個濃度，繪制劑量曲線，IC50值根據劑量曲線確定。
測定程序將包被在FlashPlate上的細胞膜與125I-MIP-1α一起在不同濃度的化合物存在或不存在下于室溫孵育1小時。各個孔的放射性用微量培養板閃爍計數器測定。非特異性結合定義為在1250倍未標記的MIP-1α存在下的結合。按照生產商的Screen ReadyTMTargets說明書進行測試。在此測定中，證明本發明化合物對CCR1受體具有親和性。
對人單核細胞的體外Ca2+流出測定法試劑和溶液1.細胞培養a)THP-1(ATCC Cat#TIB202)b)組織培養基補充了10％(v/v)胎牛血清的RPMI 1640和Ultraglutamine 1。在下文中稱該培養基為“生長培養基”。
2.測定緩沖液HBSS(Hanks平衡鹽溶液)，20mM HEPES，1mMCaCl2，1mM MgCl2，2.5mM丙磺舒，pH 7.4。
3.Fluo-4AM(Molecular Probes Cat#F14201)4.PluronicF-127(Molecular Probes Cat#P-6867)5.將本發明化合物溶于DMSO。進行連續稀釋，每種化合物篩選9個濃度，繪制劑量曲線，IC50值根據劑量曲線確定。
6.MIP-1α(Peprotech EC Ltd Cat#300-08)7.Victor21420(Perkin Elmer)8.MicroliteTM2+(Dynex Cat#7572)測定程序在T-75cm2培養瓶中，THP-1細胞在生長培養基中于37℃、5％CO2下生長。離心收獲細胞，重新懸浮于測定緩沖液。在37℃、5％CO2下將細胞加載5μM Fluo-4和0.02％pluronic acid(終濃度)30分鐘。用測定緩沖液洗滌以除去過量染料。將細胞重新懸浮，以105細胞/孔加入到裝有化合物的Microlite板中，然后在37℃、5％CO2下孵育15分鐘。將細胞用MIP-1α刺激，用Victor2測量胞內游離Ca2+濃度變化。在此測定中，證明本發明化合物對THP-1細胞中MIP-1α介導的Ca2+動員具有抑制能力。
小鼠的體內生物利用度給予雌性小鼠(SJL/N Tac)一劑靜脈內(iv)或口服(po)劑量的每盒5種或6種化合物的混合物(標稱劑量1mg/kg/化合物)，混合物溶于包含0.5％N，N′-二甲基乙酰胺(DMA)和15％磺丁基醚β-環糊精(Captisol)的溶液。在每個時間點從每個劑量組的一只小鼠采集血樣，直到各自給藥24小時后。各個化合物的劑量制劑和血漿濃度由LC-MS/MS測定。用WinNonlin Professional(4.0.1版)通過非房室分析確定藥代動力學參數。線性回歸分析對數血漿濃度-時間曲線的末端斜率，估計消除速率常數λ。用線性/對數梯形法則計算血漿濃度-時間曲線下面積AUC0-t。用估計為Cz/λ的剩余面積計算AUCinf。計算的最后時間點的血漿濃度Cz由回歸方程得出。口服生物利用度(F)計算為F口服＝(AUCinf，po/AUCinf，iv)·(劑量iv/劑量po)。
藥效動力學測定采用Horuk，R.和Ng，H.，Med.Res.Rev.，2000，20，155和Horuk，R.Methods，2003，29，369及其中的參考文獻所介紹的方法，證實了本發明化合物治療炎性疾病、自身免疫性疾病、增殖性疾病或過度增殖性疾病(例如類風濕性關節炎、多發性硬化、系統性紅斑狼瘡、炎性腸病或哮喘)的治療功效。
因此，本發明的一個實施方案提供包含式I化合物的組合物，用于治療炎性疾病、自身免疫性疾病、增殖性疾病或過度增殖性疾病。
利用所述參考文獻中的方法，還證實了本發明化合物與環孢菌素A聯合使用的協同作用。因此，本發明的一個實施方案提供包含式I化合物以及低于腎毒性量的環孢菌素A的組合物。
采用競爭性結合親和性測定法以及Ca2+流出測定法描述的程序，測試了本發明不同化合物的親和性(IC50af)以及阻斷Ca2+流出的能力(IC50Ca)。表3列出了部分實施例以及化合物A、B、C、D、E和F(化合物D、E和F是對照化合物)的試驗結果，其中所有的IC50值單位都為nM(納摩爾)。表3僅僅示例性說明本發明，并非對本發明范圍進行限制。
表3
注解所有2，5-二甲基哌嗪衍生物都合成為外消旋混合物，經測試也為外消旋混合物。
本發明化合物在小鼠中具有口服生物利用度。采用體內生物利用度測定法描述的程序，在給予1mg/kg標稱劑量的本發明的不同化合物后，測試各種化合物的清除率(CL；L/h/kg)、血漿半衰期(t1/2；hrs)以及口服生物利用度(F；％)。表4列出了部分實施例的試驗結果。表4僅僅示例性說明本發明，并非對本發明范圍進行限制。
表4 給藥方法有效量的式(I)化合物優選通過常用給藥途徑并配制為常用藥物組合物給予需要這種治療的患者，所述藥物組合物包含有效量的活性成分以及合適的藥學上可接受的載體。這樣的組合物可以采用各種不同的形式，例如用于口服給藥的溶液劑、混懸劑、乳劑、片劑、膠囊劑和散劑，用于胃腸外給藥的無菌溶液劑，用于直腸給藥的栓劑，或者合適的局部制劑。選擇和制備合適藥物制劑的常規方法參見例如Pharmaceuticals-The Science of Dosage Form Design，M.B.Aulton，Churchill Livingstone，1988。
治療RA的合適日劑量為0.005mg/kg體重至約10mg/kg體重，優選0.025mg/kg體重至2mg/kg體重，這取決于所治療的具體疾病、患者的年齡和體重、以及患者對藥物治療的反應。準確的個體劑量以及日劑量將由醫生根據標準醫學原則確定。
權利要求
1.一種下式(I)的化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑合物 其中式(I)中酰胺部分的雙鍵具有E構型；X為氟原子或氯原子；位于哌嗪環2位和5位的兩個甲基彼此為反式構型；R1為a)下式的芳族基 其中R2是π值為0.5-0.9且摩爾折射率(MR)為5.0-9.0的取代基，例如甲基、氯、溴、三氟甲基，或者R2為硝基或甲氧基；R3選自氫、氯、溴、甲基、三氟甲基、甲氧基和硝基，前提條件是當R2為甲氧基時，則R3為甲氧基，當R2為硝基時，則R3為氫、氯、甲基或三氟甲基；R4選自氫和甲氧基，前提條件是當R2為甲氧基時，則R4選自氫、氯、溴或甲氧基，或者當R3為氫時，則R4為氫，R5為氫、氯、甲基，前提條件是當R5為氯或甲基時，則X為氟，R2為氯或甲基，R3為氫；b)下式的雜芳族基 其中Y為O或S；R6為一個或多個獨立選自以下的取代基氫、鹵素、C1-C4烷基、C2-C4烯基、C2-C4炔基、鹵代烷基、烷氧基、鹵代烷氧基、羥基烷基、羥基、烷硫基、烷基磺酰基、烷基亞磺酰基、硝基、氰基、烷基氨基、芳基、氨基、烷基磺酰基氨基、二烷基氨磺酰基、氨磺酰基、羧基、烷基羰基、烷氧基羰基烷基、氨基羰基、單烷基氨基羰基、二烷基氨基羰基、脲基和雜芳基；c)下式的雜芳族基 其中R7為一個或多個獨立選自以下的取代基氫、鹵素、C1-C4烷基、C2-C4烯基、C2-C4炔基、鹵代烷基、烷氧基、鹵代烷氧基、羥基烷基、羥基、烷硫基、烷基磺酰基、烷基亞磺酰基、硝基、氰基、烷基氨基、芳基、氨基、烷基磺酰基氨基、二烷基氨磺酰基、氨磺酰基、羧基、烷基羰基、烷氧基羰基烷基、氨基羰基、單烷基氨基羰基、二烷基氨基羰基、脲基和雜芳基。
2.權利要求1的化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R1為a)下式的芳族基 其中R2選自甲基、氯、溴、三氟甲基、硝基和甲氧基；R3選自氫、氯、溴、甲基、三氟甲基、甲氧基和硝基，前提條件是當R2為甲氧基時，則R3為甲氧基，當R2為硝基時，則R3為氫、氯、甲基或三氟甲基；R4選自氫和甲氧基，前提條件是當R2為甲氧基時，則R4選自氫、氯、溴或甲氧基，或者當R3為氫時，則R4為氫；R5為氫、氯、甲基，前提條件是當R5為氯或甲基時，則X為氟，R2為氯或甲基，R3為氫；b)下式的雜芳族基 其中R6為一個或多個獨立選自以下的取代基氫、鹵素、甲基、乙基、鹵代烷基、烷氧基、鹵代烷氧基和硝基；c)下式的雜芳族基 其中R7為一個或多個獨立選自以下的取代基氫、鹵素、C1-C3烷基、鹵代烷基、烷氧基、鹵代烷氧基、硝基、氰基、烷基氨基、芳基、烷基羰基、氨基羰基。
3.權利要求1-2中任一項的化合物，其中X為氟。
4.權利要求1-3中任一項的化合物，所述化合物為(1)(E)-(反)-3-(4-溴-苯基)-1-[4-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮；(2)(E)-(反)-3-(4-氯-3-硝基-苯基)-1-[4-(4-氯-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮；(3)(E)-(反)-3-(3，4-二氯-苯基)-1-[4-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮；(4)(E)-(反)-3-(2，4-二氯-苯基)-1-[4-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮鹽酸鹽；(5)(E)-(反)-1-[4-(4-氯-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-3-(4-氯-苯基)-丙-2-烯-1-酮；(6)(E)-(反)-3-苯并[2，1，3]噻二唑-5-基-1-[4-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮；(7)(E)-(反)-3-(4-氯-3-甲氧基-5-硝基-苯基)-1-[4-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮；(8)(E)-(反)-3-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-1-[4-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮；(9)(E)-(反)-3-(4-溴-3，5-二甲氧基-苯基)-1-[4-(4-氟芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮；(10)(E)-(反)-1-[4-(4-氟芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-3-(3-甲氧基-4-甲基-苯基)-丙-2-烯-1-酮；(11)(E)-(反)-3-(4-溴-苯基)-1-[4-(4-氯芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮；(12)(E)-(反)-3-(3-溴-4-氯-苯基)-1-[4-(4-氟芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮；(13)(E)-(反)-3-(4-溴-3-氯-苯基)-1-[4-(4-氟芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮；(14)(E)-(反)-3-(3，4-二溴-苯基)-1-[4-(4-氟芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮；(15)(E)-(反)-3-(4-溴-3-硝基-苯基)-1-[4-(4-氟芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮；(16)(E)-(反)-3-(4-溴-苯并[2，1，3]噻二唑-6-基)-1-[4-(4-氟芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮；(17)(E)-(反)-3-(4-氯-苯并[2，1，3]噻二唑-6-基)-1-[4-(4-氟芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮；(18)(E)-(反)-1-[4-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-3-(4-硝基-苯并[2，1，3]噻二唑-5-基)-丙-2-烯-1-酮；[(19)(E)-(反)-3-(4-氯-苯基)-1-[4-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮；或(20)(E)-(反)-3-(4-氯-3-硝基-苯基)-1-[4-(4-氟-芐基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-丙-2-烯-1-酮。
5.一種制備式(I)化合物的方法 該方法包括將式(IV)的哌嗪衍生物用式(V)的化合物在有機溶劑于0℃-120℃處理，其中L1為離去基團。
6.一種組合物，該組合物包含治療有效量的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑合物以及藥學上可接受的成分 其中式(I)中酰胺部分的雙鍵具有E構型；X為氟原子或氯原子；位于哌嗪環2位和5位的兩個甲基彼此為反式構型；R1為a)下式的芳族基 其中R2是π值為0.5-0.9且摩爾折射率(MR)為5.0-9.0的取代基，例如甲基、氯、溴、三氟甲基，或者R2為硝基或甲氧基；R3選自氫、氯、溴、甲基、三氟甲基、甲氧基和硝基，前提條件是當R2為甲氧基時，則R3為甲氧基，當R2為硝基時，則R3為氫、氯、甲基或三氟甲基；R4選自氫和甲氧基，前提條件是當R2為甲氧基時，則R4選自氫、氯、溴或甲氧基，或者當R3為氫時，則R4為氫，R5為氫、氯、甲基，前提條件是當R5為氯或甲基時，則X為氟，R2為氯或甲基，R3為氫；b)下式的雜芳族基 其中Y為O或S；R6為一個或多個獨立選自以下的取代基氫、鹵素、C1-C4烷基、C2-C4烯基、C2-C4炔基、鹵代烷基、烷氧基、鹵代烷氧基、羥基烷基、羥基、烷硫基、烷基磺酰基、烷基亞磺酰基、硝基、氰基、烷基氨基、芳基、氨基、烷基磺酰基氨基、二烷基氨磺酰基、氨磺酰基、羧基、烷基羰基、烷氧基羰基烷基、氨基羰基、單烷基氨基羰基、二烷基氨基羰基、脲基和雜芳基；c)下式的雜芳族基 其中R7為一個或多個獨立選自以下的取代基氫、鹵素、C1-C4烷基、C2-C4烯基、C2-C4炔基、鹵代烷基、烷氧基、鹵代烷氧基、羥基烷基、羥基、烷硫基、烷基磺酰基、烷基亞磺酰基、硝基、氰基、烷基氨基、芳基、氨基、烷基磺酰基氨基、二烷基氨磺酰基、氨磺酰基、羧基、烷基羰基、烷氧基羰基烷基、氨基羰基、單烷基氨基羰基、二烷基氨基羰基、脲基和雜芳基；所述組合物用作藥物。
7.權利要求6的組合物，所述組合物還包含低于腎毒性量的環孢菌素A。
8.權利要求1-4中任一項的化合物在制備用于治療以下疾病的藥物中的用途炎性疾病、自身免疫性疾病、增殖性疾病或過度增殖性疾病。
9.權利要求8的用途，其中所述藥物用于治療類風濕性關節炎、多發性硬化、系統性紅斑狼瘡、炎性腸病、同種異體移植物排斥或哮喘。
全文摘要
式(I)的哌嗪衍生物的E－肉桂酰胺、它們的藥學上可接受的鹽、包含它們的藥物組合物以及它們的治療用途，它們用于治療炎性疾病、自身免疫性疾病、增殖性疾病或過度增殖性疾病，式中X為氯或氟，R
文檔編號C07D271/12GK1918139SQ200480041974
公開日2007年2月21日 申請日期2004年11月23日 優先權日2004年2月25日
發明者E·維爾納, H·桑丁 申請人:活躍生物技術有限公司