吲唑的有機磷衍生物及其作為蛋白質激酶抑制劑的應用的制作方法

專利名稱：吲唑的有機磷衍生物及其作為蛋白質激酶抑制劑的應用的制作方法
技術領域：
本發明特別涉及一種新型化合物，具體涉及新型吲唑有機磷衍生物，含有該化合物的組合物及其作為藥物的應用。
更具體說，本發明涉及通過調制蛋白質活性，特別是調制激酶的活性而具有抗癌活性的新型特殊吲唑。
迄今為止，大多數用于化療的已商品化化合物都是細胞毒類物質，它們都具有副作用和病人耐受性的嚴重問題。這些副作用在使用的藥物對癌細胞具有選擇性作用，而排斥健康細胞的范圍內能夠受到限制。因此，對不希望的化療副作用進行限制的方法包括使用涉及到代謝途徑的藥物，或者涉及這些途徑的構成要素的藥物，主要在癌細胞中表達，而在健康細胞中將不表達或很少表達。
蛋白質激酶是一類對蛋白質特定殘基，比如酪氨酸、絲氨酸或蘇氨酸殘基的羥基進行磷酸化催化的酶。這樣的磷酸化能夠大幅度地改變蛋白質的功能，因此蛋白質激酶在調節各式各樣的細胞過程中起著重要的作用，這些過程特別包括代謝、細胞增生、細胞分化、細胞遷移和細胞存活等。在涉及到蛋白質激酶激活的各種細胞功能中，某些過程對于治療癌類疾病以及其它疾病來說，代表了有吸引力的目標。
因此，本發明的目的是提供一種特別涉及到通過激酶而具有抗癌活性的組合物。在對于其活性調節進行研究的激酶中，優選是Aurora 2激酶和Tie 2激酶。
在分離染色體和集聚紡錘體時涉及到的許多蛋白質都在酵母和果蠅中被鑒別出。這些蛋白質的破壞導致染色體不分離和紡錘體單極或破壞。在這些蛋白質中，某些激酶對于染色體分離和中心體分離是有意義的，其中Aurora和lpl 1分別來源于果蠅和S.cerevisiae。最近，酵母lpl 1的人類似物已經被不同的實驗室克隆并被表征。這些激酶被命名為aurora 2、STK 15或BTAK，屬于絲氨酸/蘇氨酸家族。Bischoff等人證明了Aurora 2是致癌基因，在人類結腸癌中被擴增(EMBO J，1998，17，3052-3065)。在涉及到上皮腫瘤比如乳腺癌的癌癥中也對其進行了舉例說明。
在本發明的產物涉及到的其它激酶中，可以舉出FAK、KDR、Src、Tie 2和細胞周期蛋白依存激酶(CDK)。
FAK是在由整聯蛋白轉導傳遞信號時起著重要作用的胞質酪氨酸激酶，是一類細胞粘著異源雙體受體。FAK和整聯蛋白都位于被稱為粘著斑的圍膜結構中。在許多類型的細胞中顯示出，FAK的活化及其對酪氨酸殘基的磷酸化作用，特別是其對酪氨酸397的自動磷酸化與整聯蛋白與其細胞外配體的鍵有關，因此是當細胞粘著時誘發的[Kornberg L等人J.Biol.Chem.267(33)23439-442]。FAK對酪氨酸397的自動磷酸化表示通過其SH2區域對于另一種酪氨酸激酶Src的鍵合點[Schaller等人，Mol.Cell.Biol.141680-1688.1994；xing等人，Mol.Cell.Biol.5413-421，1994]。此時Src可以使FAK對酪氨酸925磷酸化，如此就吸收適應蛋白Grb2，并在某些細胞中誘使Ras通道和在控制增生時涉及的MAP激酶活化[Schlaepfer等人，Nature；372786-791，1994；Schlaepfer等人，Prog.Biophy.Mol.Biol.71435-478，1999；Schlaepfer和Hunter，J.Biol.Chem.，27213189-13195，1997]。FAK的活化還可以誘發Jun NH2端基激酶(JNK)信號作用通道，并導致細胞進展到細胞周期的G1期[Oktay等人，J.Cell.Biol.，1451461-1469，1999]。磷脂酰肌醇-3-羥基激酶(Pl3-激酶)也與FAK對酪氨酸397的作用有關，此相互作用對于Pl3-激酶的活化可能是必需的[Chen和Guan，Proc.Nat.Acad.Sci.USA，9110148-10152，1994；Ling等人，J.Cell.Biochem.，73533-544，1999]。復合的FAK/Src使不同的底物，比如在成纖維細胞中的樁蛋白和p130CAS磷酸化[Vuori等人，Mol.Cell.Biol.，162606-2613]。
許多研究的結果都支持一個假說，即FAK抑制劑可以用于癌的治療當中。研究使人想到，FAK可能在細胞在生體外的增生和/或存活起著重要的作用。比如，某些作者證實在CHO細胞中，p125FAk的過度表達會導致G1向S轉移的加速，這就暗示著p125FAK有助于細胞增生[Zhao J.-H等人，J.Cell Biol.，1431997-2008，1998]。其它作者們證實，用FAK的反義寡核苷酸治療的腫瘤細胞失去了其粘著，并進入凋亡進程(Xu等人，Cell.Growth Differ.4413-418.1996)。還證實FAK促進細胞在生體外的遷移。比如，缺損成纖維細胞對于FAK的表達(小白鼠對FAK的“剔除”)具有圓形的形態，即使細胞遷移對趨藥信號響應的缺陷，此缺陷是被FAK的再表達來消除的[DJ.Sieg等人，J.Cell Science，1122677-91，1999]。FAK的C端基區的過度表達(FRNK)完全阻斷了粘著細胞，在生體外減少了細胞遷移[RichardsonA.和Parsons J.T.，Nature，380538-540，1996]。在CHO、COS細胞或在人類星形細胞瘤細胞中FAK的過度表達有助于細胞的遷移。在生體外FAK介入許多類型細胞中促進細胞增生和遷移，提醒我們FAK在腫瘤進展的過程中有潛在的作用。最近的研究確實顯示出，在人類星形細胞瘤的細胞中誘發FAK表達以后，在生體內有腫瘤細胞增生[Cary L.A等人，J.Cell Sci.1091787-94；Wang D等人，J.Cell Sci.，1134221-4230，2000]。再有，人類活組織免疫組織化學研究表明，FAK在前列腺癌、乳腺癌、甲狀腺癌、結腸癌、黑色素瘤、腦癌和肺癌中都過度表達，與腫瘤直接相關的FAK表達水平表現出最有威脅性的表現型[Weiner TM等，Lancet.342(8878)1024-1025，1993；Owens等人，Cancer Research，552752-2755，1995；Maung K等人，Oncogene，186824-6828，1999；Wang D等人，J.Cell Sci.，1134221-4230，2000]。
KDR(激酶插入區受體)也稱為VEGF-R2(血管內皮生長因子受體2)，只在內皮細胞中表達。這種受體固定在血管生成因子VEGF上，其作用是通過其細胞內激酶區的活化而作為具有轉導信號的介體。直接抑制激酶VEGF-R2的活性能夠減少在外源VEGF(血管內皮生長因子)存在下的血管生成現象(Strawn等人，Cancer Research，1996，vol.56，p.3540-3545)。此過程特別借助于VEGF-R2突變體來顯示(Millauer等人，Cancer Research，1996，vol.56，p.1615-1620)。對于成人來說，只與VEGF的血管生成活性有關，受體VEGF-R2似乎沒有任何其它功能。因此，VEGF-R2激酶活性的選擇性抑制劑只應顯示出很小的毒性。
除了在血管生成動力學過程中此中心作用之外，最近的結果顯示出，VEGF的表達有助于在化療和放療之后腫瘤細胞的存活，強調出KDR的潛在抑制劑和其它試劑的協同作用(Lee等人，CancerResearch，2000，vol.60，p.5565-5570)。
Tie-2(TEK)是酪氨酸激酶受體族的一個成員，對內皮細胞是有特異性的。Tie2是具有酪氨酸激酶活性的第一個受體，是與刺激受體的自動磷酸化和細胞的信號作用的興奮劑(促血管生成素1或Ang1)[S.Davis等人(1996)Cell 87，1161-1169]和拮抗劑(促血管生成素2或Ang2)[P.C.Maisonpierre等人，(1997)Science 277，55-60]同時知道的。在新生血管生成的最后階段，促血管生成素1可以與VEGF協同作用[Ashara T.，Circ.Res.(1998)233-240]。Tie2或Ang1表達的剔除經驗和轉基因操作導致動物表現出血管形成的缺陷[D.J.Dumont等人，(1994)Genes Dev.8，1897-1909和C.Suri(1996)Cell87，1171-1180]。Ang1與其受體連接導致Tie2的激酶區自動磷酸化，這對于新血管生成以及對于血管與周皮細胞和平滑肌細胞的補充和相互作用都是很關鍵的；這些現象有助于新形成的血管成熟和穩定[P.C.Maisonpierre等人(1997)Science 277，55-60]。Lin等人(1997)，J.Clin.Invest.100，82072-2078；Lin P.(1998)PNAS 95，8829-8834證實了當在乳腺癌和黑色素瘤模型中進行腺病毒感染或從細胞外區注入Tie2(Tek)時，對腫瘤生長和形成血管的抑制以及降低肺轉移的作用。Tie2抑制劑可用于新生血管不適當形成的位置(這就是說在糖尿病的視網膜病、慢性炎癥、牛皮癬、卡波西肉瘤、由于黃斑變性造成的慢性新生血管形成、類風濕關節炎、新生兒血管瘤和癌當中)。
細胞周期的進展經常是由于與細胞周期蛋白(CDK)有關的激酶管理的，CDK由于在其族系中的平衡而被活化，由于底物磷酸化，最后由于細胞分裂而使活化終止。再有，被活化的CDK的內源抑制劑(INK4和KIP/CIP族系)以負面的方式調節CDK的活性。正常細胞的生長一般是由于在CDK(細胞周期蛋白)活化劑和CDK內源抑制劑之間的平衡。在許多種類的癌癥當中，都描述了細胞周期多個成分的異常表達或活性。
細胞周期蛋白E使激酶Cdk2活化，隨后Cdk2發生作用使pRb磷酸化，而pRb是進入細胞的不可逆分裂和向S期轉變而得到的(PLToogood，Medicinal Research Reviews(2001)，21(6)；487-498)，按照這些作者的看法，激酶CDK2和CDK3對于在G1期中的進展和進入S期都可能是必需的。當與細胞周期蛋白E形成復合物時，它們維持pRb的過度磷酸化以有助于從G1期向S期的進展。在與細胞周期蛋白A的復合物中，CDK2在使E2F失活方面起有作用，對于實現S期是必需的(TD.Davies等人，(2001)Structure 9，389-3)。
CDK1/細胞周期蛋白B復合物調節細胞周期在G2期和M期之間的進展。CDK/細胞周期蛋白B的負向調節阻止正常的細胞在正確和完全實現G2期之前進入S期(K.K.Roy和E.A.Sausville，CurrentPharmaceutical Design，2001，7，1669-1687)。
存在著CDK活性的調節水平。與激酶(CAK)有關的細胞周期蛋白活化劑對CDK的調節具有正向活性。CAK使CDK對蘇氨酸殘基磷酸化，以賦予靶酶完全的活性。
在介入細胞周期的分子中存在的缺陷導致CDK活化和周期的進展，一般希望抑制CDK酶的活性，以阻斷癌性細胞的生長。
本發明涉及新型吲唑有機磷衍生物。本發明還涉及吲唑在5位的有機磷衍生物作為激酶抑制劑，更特別作為抗癌劑的應用。其中，本發明優選涉及5-磷酰基和5-膦化(phosphino)吲唑。本發明還涉及所述衍生物用來制備用于人類治療的藥物的應用。
在至今已知的敘述5-磷酰基吲唑的先有技術中，可以舉出以WO93/18008的序號出版的專利申請書，該申請敘述了如下通式的化合物 其中X＝N、CR14(R14＝H、烷基等)；R1＝H或鹵素；R2＝H、NO2、鹵素、烷基等；R3＝H、鹵素、鹵代烷基、鹵代烷氧基、CN、NH2；R4～R6＝H、NO2、鹵素、烷基等、烷基磺酰胺基、P(＝L)(Q)(M)；L＝O、S；M、Q＝烷氧基、烷基、(烷基)n氨基、OH、H、烯氧基、(烯基)n氨基、炔氧基、(炔基)n氨基；R7＝H、鹵素、烷基、NO2和R8＝H、鹵素。
只有化合物147、161和163是在5位被含磷基團取代的吲唑，因此它們不包括在本發明中。反之，這些化合物作為藥物構成本發明的一部分。
在此申請中提出權利要求的化合物在農藝學中具有用途，而本發明的化合物具有藥物學的用途。
按照本發明的第一方面，涉及如下通式(I)的化合物 其中—W表示選自共價鍵或O的基團；—X表示共價鍵、基團-C＝O-NRa-、NRa-C＝O、-(CH2)n-、-CH＝CH-、-C≡C-、-NRa-、S、O、-SO2-、-SO、-CO、-COO，其中Ra表示H或基團(C1～C4)烷基，其可任選與R1形成環，而且其中n＝0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12；—R1表示H(除了當X＝-SO2-、-SO-時)、烷基、環烷基、芳基、雜芳基；其中R1可任選被取代；—R和R2相同或不同，表示H或選自烷基、環烷基、雜環烷基、芳基、雜芳基、羥基、烷氧基和芳氧基的基團，其中R和R2任選被取代；—Y表示共價鍵或選自-C＝O-NRa-、-C＝O-O-、-C＝O-、-(CH2)n-、-SO2-的基團，其中Ra選自H、(C1～C4)烷基和與R3相連接以形成環的(C1～C4)烷基；—R3選自H(除了當Y是-C＝O-O-或-SO2-時)、烷基、環烷基、芳基和雜芳基；R3可任選被取代；—R4、R6和R7相同或不同，可獨立地選自H、鹵素、(C1～C4)烷基、(C1～C4)烷氧基、氰基、-N(Rb)Rc、-C＝O-N(Rb)Rc、-N(Rb)-CO-Rc-，其中Rb和Rc獨立地選自H、(C1～C4)烷基和(C3～C6)環烷基；只是不包括如下化合物
W優選是O。
優選的芳基和雜芳基獨立地選自(i)含有0～4個選自O、N和S的雜原子的單環基團，和(ii)含有如下成分的稠合(condensé)雙環基團(a)含有5、6、7或8個鏈節并含有0～4個選自O、N和S的雜原子的單環基團，此基團與下面的(b)稠合(b)含有5或6個鏈節并含有0～3個選自O、N和S的雜原子的另外的環。
更優選地，芳基或雜芳基獨立地選自苯基、吡啶基、嘧啶基、三嗪基、吡咯基、咪唑基、噻唑基、呋喃基、噻吩基、吲哚基、吲唑基、氮雜吲唑基、異苯并呋喃基、異苯并噻吩基、苯并咪唑基、苯并唑基、苯并噻唑基、芳基亞乙烯基、芳基酰胺基、芳基甲酰胺基、芳烷基胺、喹啉基、異喹啉基、噌啉基、喹唑啉基、萘啶基、三唑基或四唑基。
很優選的芳基或雜芳基獨立地選自苯基、吡咯基、任選取代的吲哚基和芳基亞乙烯基。
對于通式(I)產物的定義，當X表示共價鍵而R1表示雜環基特別是吲哚基時，特別有利地實施本發明。
優選的取代基R2是(C1-C4)烷基。
優選地，Y有利地是鍵，而R3是H。
按照本發明的第二方面，涉及按照其第一方面的產物在人類治療方面的應用，特別是用來治療與出現癌相關的激酶比如Tie2、Aurora-2的不規律有關的疾病。
按照本發明的第三方面，涉及作為藥物的如下通式(I)的化合物
其中—W表示選自共價鍵或O的基團；—X表示共價鍵、基團-C＝O-NRa-、NRa-C＝O、-(CH2)n-、-CH＝CH-、-C≡C-、-NRa-、S、O、-SO2-、-SO、-CO、-COO，其中Ra表示H或基團(C1～C4)烷基，其可任選與R1形成環，而且其中n選自區間
(包含兩個端值)；—R1表示H(除了當X＝-SO2-、-SO-時)、烷基、環烷基、芳基、雜芳基；其中R1可任選被取代；—R和R2相同或不同，表示H或選自烷基、環烷基、芳基、雜芳基、羥基、烷氧基和芳氧基的基團，其中R和R2任選被取代；—Y表示共價鍵或選自-C＝O-NRa-、-C＝O-O-、-C＝O-、-(CH2)n-、-SO2-的基團，其中Ra選自H、(C1～C4)烷基和與R3相連接以形成環 的(C1～C4)烷基；—R3選自H(除了當Y是C＝O-O或-SO2-時)、烷基、環烷基、芳基和雜芳基；R3可任選被取代；—R4、R6和R7相同或不同，可獨立地選自H、鹵素、(C1～C4)烷基、(C1～C4)烷氧基、氰基、-N(Rb)Rc、-C＝O-N(Rb)Rc、-N(Rb)-CO-Rc，其中Rb和Rc獨立地選自H、(C1～C4)烷基和(C3～C6)環烷基；在符合通式(I)的化合物中可以舉出如下的化合物1)甲基膦酸甲酯3-[5-(2-嗎啉-4-基乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-基酯2)甲基膦酸甲酯3-{5-[2-(4-甲基哌嗪-1-基)-乙氧基]-1H-吲哚-2-基}-1H-吲唑-5-基酯
3)苯基膦酸甲酯3-噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基酯4)(2-甲磺酰基苯基)-膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯5)丙基膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯6)叔丁基膦酸3-(1-H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯7)環己基膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯8)(2-甲氧基苯基)膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯9)(2-甲基硫(Methylsulfanyl)苯基)膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯10)(2，6-二甲基苯基)膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯11)(2-三氟甲氧基苯基)膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯12)噻吩-2-基膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯13)呋喃-2-基膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯14)甲基膦酸3-((E)-苯乙烯基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯15)苯基膦酸3-((E)苯乙烯基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯16)苯基膦酸3-噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基酯甲酯17)甲基膦酸3-噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基酯甲酯18)甲基膦酸3-(1H-吡咯-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯19)甲基膦酸3-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基酯甲酯20)苯基膦酸3-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基酯甲酯21)苯基膦酸3-(5-甲氧基-1H-吡咯并[3，2-b]吡啶-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯22)甲基膦酸3-(5-甲氧基-1H-吡咯并[3，2-b]吡啶-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯



按照本發明的化合物的制備方法可以按照如下方式進行 按照本發明的化合物可用于人類的治療，更特別用于癌癥的治療，更特別用于對Aurora-2和Tie2抑制劑敏感的癌癥的治療。
將借助于下面的實施例更完整地敘述本發明，這些實施例不應被看作對本發明的限制。
分析LC/MS在與設備HP 1100相連接的型號為LCT的Micromass設備上進行LC/MS分析。借助于具有HP G1315A二極管探針的檢出器在200～600nm波長的范圍內和具有Sedex 65光散射的檢出器測量產物的豐度。在180～800的范圍內獲得質譜。使用Micromass MassLynx軟件對數據進行分析。在3μm(50×4.6mm)的Hypersil BDS C18柱子上，用含有0.05vol％三氟乙酸(TFA)的乙腈在含有0.05vol％TFA的水中以5～90％的線性梯度進行洗脫，在1mL/min的流量下，在3.5min內進行分離。包括柱子再平衡期在內的總分析時間為7min。
用制備LC/MS提純使用由型號600的Waters梯度泵、型號515的Waters再生泵、Waters Reagent Manager稀釋泵、型號2700的Waters自動注射器、兩個型號LabPro的Rheodyne閥門、型號996的Waters帶有二極管探針檢出器、型號ZMD的Waters質譜儀和型號204的Gilson餾分收集器組成的Waters FractionLynx系統，通過LC/MS對產物進行提純。用Waters FractionLynx對系統進行控制。在兩個Waters Symmetry柱子(C18，5μm，19×50mm，分類號186000210)上交替進行分離，一個柱子在用含有0.07vol％三氟乙酸的水/乙腈(95/5，v/v)混合物進行再生的過程中，同時另一個柱子進行分離。使用含有0.07vol％三氟乙酸的乙腈在含有0.07vol％三氟乙酸的水中的乳液，以5～95％的線性梯度進行柱子洗脫，流量是10mL/min。在分離柱子的出口處，由LCPacking Accurate以0.5mL/min的流量分離用甲醇稀釋的千分之一的流出物，并送向檢出器，以75％送向具有二極管探針的檢出器，25％送向質譜儀。其余的流出物(999/1000)被送向餾分收集器，在這里流出物作為不打算被軟件FractionLynx檢出的產物而除去。由軟件FractionLynx提供所需產物的分子式，當檢出的質量信號相當于離子[M+H]+和/或[M+Na]+時，軟件就啟動產物的收集。在某些情況下，取決于LC/MS分析的結果不同，當檢測出相當于[M+2H]++的強離子時，軟件FractionLynx也提供相當于計算分子量一半(MW/2)的值。在這些條件下，當檢測出[M+2H]++和/或[M+Na+H]++離子質量信號時，也會啟動收集。產物被搜集在稱量了皮重的玻璃管中。在收集之后，在Savant AES 2000型或Genevac HT8型離心蒸發器中將溶劑蒸發，對蒸發溶劑之后玻璃管稱重就得到產物的質量。
用快速色譜提純在0.5bar的氬氣壓力下，在顆粒度15～35μm的二氧化硅上對粗產物進行快速色譜提純。收集相當于所需產物的餾分，在旋轉蒸發器中減壓濃縮。
中間體A按照方案1分4步制備5-芐氧基-3-碘-吲唑-1-羧酸叔丁酯。
方案1步驟1制備4-芐氧基-2-甲基-苯胺在50g4-芐氧基-2-甲基-1-硝基苯和46g鋅的混合物中滴加在300mL乙醇中的190mL濃鹽酸溶液。通過流經冰浴將溶液冷卻到大約45℃。在環境溫度下攪拌介質3h。加入500mL飽和碳酸鉀溶液將溶液的pH值調節到大約8。過濾出沉淀，并用5×500mL的乙酸乙酯洗滌沉淀。合并有機相，用2×1L的蒸餾水洗滌，然后用1L飽和氯化鈉溶液洗滌。在用硫酸鎂干燥之后，在旋轉蒸發器中減壓蒸出溶劑。用快速色譜(二氧化硅，35～70μm)提純反應粗產物，洗脫液乙酸乙酯/環己烷80∶20；75∶25；70∶30。分離出30.81g 4-芐氧基-2-甲基苯胺。
核磁共振譜1H(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，ppm)2.04(s3H)；4.40(s寬2H)；4.95(s2H)；6.55(d，J＝8.5Hz1H)；6.61(dd，J＝8.5et 2.5Hz1H)；6.68(d，J＝2.5Hz1H)；7.25至7.55(mt5H).
步驟II制備1-(5-芐氧基-吲唑-1-基)-乙酮在7.14g4-芐氧基-2-甲基-苯胺在26mL甲苯中的溶液里通入10.5mL醋酸酐。將介質加熱到大約90℃，在溶液中滴加9.28mL亞硝酸叔丁酯。在大約90℃下加熱反應介質2h。在旋轉蒸發器中將反應粗產物濃縮至干。在乙酸乙酯中對固體進行再處理然后過濾，用異丙基醚淋洗，回收3.41g 1-(5-芐氧基-吲唑-1-基)-乙酮
NMR譜1H(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，ppm)2.72(s3H)；5.21(s寬2H)；7,34(dd，J＝9和2.5Hz1H)；7.35至7.50(mt3H)；7.47(d，J＝2.5Hz1H)；7.51(dd寬，J＝7.5和1.5Hz2H)；8.23(d，J＝9Hz1H)；8.39(d，J＝1Hz1H).
步驟III程序A-制備5-芐氧基-3-碘-1H-吲唑在28.24g 1-(5-芐氧基-吲唑-1-基)-乙酮在620mL二甲基甲酰胺中的溶液里加入68.84g碘，然后加入23g氫氧化鉀。在環境溫度下攪拌反應介質大約3h。再加入23g氫氧化鉀，再在環境溫度下攪拌48h。用600mL硫代硫酸鈉溶液(100g硫代硫酸鈉在250mL蒸餾水中)、600mL蒸餾水和1L乙酸乙酯處理介質。將介質攪拌幾分鐘然后傾析。用4×600mL乙酸乙酯萃取水相。用1L飽和氯化鈉溶液洗滌合并的有機相，然后用硫酸鎂干燥。在旋轉蒸發器中減壓蒸出溶劑。在二氯甲烷中重新處理反應粗產物，過濾出固體，用二氯甲烷和乙醚漂洗。回收20.8g5-芐氧基-3-碘-1H-吲唑NMR譜1H(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，ppm)5.19(s寬2H)；6.90(d，J＝2Hz1H)；7.18(dd，J＝9和2Hz1H)；7.35(t寬，J＝7.5Hz1H)；7.43(t寬，J＝7.5Hz2H)；7.50(d，J＝9Hz1H)；7.52(d寬，J＝7.5Hz2H)；13.00至13.70(mf非常展開1H).
LC/MS[M+H]+＝351.10；保留時間3.97分鐘.
步驟IV程序B-制備5-芐氧基-3-碘-吲唑-1-羧酸叔丁酯在19.54g5-芐氧基-3-碘-1H-吲唑、36.50g二碳酸二叔丁酯、23.30mL三乙胺在550mL二氯甲烷中的溶液里加入1.70g4-二甲基氨基吡啶。觀察到很強的氣體釋放。在環境溫度下攪拌溶液過夜。用2×500mL蒸餾水洗滌有機相，用硫酸鎂干燥，過濾并在旋轉蒸發器中減壓濃縮。在乙腈中重新處理粗的固體。過濾固體，用乙腈和乙醚漂洗固體。回收19.43g5-芐氧基-3-碘-吲唑-1-羧酸叔丁酯。用快速色譜提純過濾液(二氧化硅，70～200μm)，洗脫液乙酸乙酯/環己烷3/97，回收3.05g5-芐氧基-3-碘-吲唑-1-羧酸叔丁酯。
LC/MS[M+H]+＝451.08；保留時間4.91min。
中間體B按照方案2由中間體A分兩步制備5-芐氧基-3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑 方案2程序C步驟1a按照在E.Vasquez的文章J.Org.Chem.，67，7551-7552(2002)中敘述的程序制備2-[4-(1-叔丁氧基羰基-2，3-二氫-1H-吲哚-2-基)-1，3，2，4-二氧雜二硼-2-基(diboretan-2-yl)]-吲哚-1-羧酸叔丁酯在13gN-Boc吲哚在50mL無水THF的溶液中滴加21mL硼酸三異丙酯。將反應介質冷卻到大約5℃。滴加50mL的LDA1.5M在THF中的溶液，并保持溫度在大約5℃。在此溫度下攪拌溶液90min，然后用40mL的2N鹽酸水溶液處理介質。過濾懸浮液，用2×40mL的THF洗滌固體。傾析過濾液。用80mL乙酸乙酯萃取水相，然后用硫酸鎂干燥合并的有機相并過濾。在旋轉蒸發器中減壓蒸出溶劑。得到19g橙色油狀物的2-[4-(1-叔丁氧基羰基-2，3-二氫-1H-吲哚-2-基)-1，3，2，4-二氧雜二硼-2-基]-吲哚-1-羧酸叔丁酯。
LC/MS[M+H]+＝487.19；保留時間3.30min。
步驟Ib將3.23g 5-芐氧基-3-碘-吲唑-1-羧酸叔丁酯、7.31g2-[4-(1-叔丁氧基羰基-2，3-二氫-1H-吲哚-2-基)-1，3，2，4-二氧雜二硼-2-基]-吲哚-1-羧酸叔丁酯、2.07g四(三苯基膦)鈀和11mL飽和碳酸氫鈉水溶液的懸浮液回流加熱大約2h，然后在環境溫度下過夜。用濾紙過濾反應介質，然后用150mL乙酸乙酯稀釋過濾液。用200mL蒸餾水洗滌有機相。用2×150mL乙酸乙酯萃取水相。合并有機相并用飽和氯化鈉水溶液洗滌，用硫酸鎂干燥并過濾。在旋轉蒸發器中在真空下蒸發溶劑。在70～200μm的二氧化硅上用快速色譜提純反應粗產物，洗脫液環己烷/乙酸乙酯95∶5～70∶30梯度洗脫，得到1.97g5-芐氧基-3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑。
NMR譜1H(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，ppm)5.28(s寬2H)；7.03(t分裂，J＝7.5和1.5Hz1H)；7.12(t分裂，J＝7.5和1,5Hz1H)；7.12(s寬1H)；7.19(dd，J＝9和2.5Hz1H)；7.36(t寬，J＝7.5Hz1H)；7.44(t寬，J＝7.5Hz2H)；7.47(d寬，J＝7.5Hz1H)；7.54(d，J＝9Hz1H)；7.58(d寬，J＝7.5Hz2H)；7.62(d寬，J＝7.5Hz1H)；7.65(d，J＝2.5Hz1H)；11.50(mf1H)；12.90至13.40(mf非常展開1H).
LC/MS[M+H]+＝340.24；保留時間4.23分鐘。
步驟II程序D制備3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-醇將2.54g 3-(1H-吲哚-2-基)-5-苯氧基-1H-吲唑、2.83g甲酸銨和2.54g10％的碳載鈀在150mL乙醇中的溶液回流加熱1h。用濾紙過濾出催化劑并用乙醇漂洗。將過濾液濃縮至干。得到1.74g3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-醇NMR譜1H(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，ppm)6.90(d，J＝1,5Hz1H)；6.95至7.05(mt1H)；7.01(dd，J＝9和2.5Hz1H)；7.10(t分裂，J＝7.5和1.5Hz1H)；7.39(d，J＝2.5Hz1H)；7.40至7.50(mt2H)；7.60(d寬，J＝7.5Hz1H)；9.26(s寬1H)；11.48(s寬1H)；13.05(s寬1H).
分析LC/MS[M+H]+＝250.22；保留時間3.16分鐘。
按照程序C的步驟Ib，由300mg5-芐氧基-3-碘-吲唑-1-羧酸叔丁酯、197mg硼酸E-苯基乙烯酯、192mg四(三苯基膦)鈀在12mL二甲基甲酰胺中的懸浮液和0.61mL飽和碳酸氫鈉溶液制備5-芐氧基-3((E)-苯乙烯基)-1H-吲唑。如上所述處理反應粗產物，回收150mg5-芐氧基-3((E)-苯乙烯基)-1H-吲唑。
NMR譜1H(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，ppm)5.24(s寬2H)；7.14(dd，J＝9和2Hz1H)；7.30(t寬，J＝7.5Hz1H)；7.30至7.50(mt5H)；7.38(d，J＝16.5Hz1H)；7.49(d，J＝9Hz1H)；7.56(d，J＝16.5Hz1H)；7.56(d寬，J＝7.5Hz2H)；7.68(d，J＝2Hz1H)；7.73(d寬，J＝7.5Hz2H)；12.50至13.50(mf非常展開1H).
IR(KBr)3178；3153；2924；1587；1497；1228；1075；957；947；812；787；758和691cm-1分析LC/MS [M+H]+＝327.24；保留時間4.74分鐘。
制備3-苯乙烯基-1H-吲唑-5-醇在氬氣下攪拌652mg5-芐氧基-3((E)-苯乙烯基)-1-吲唑在60mL乙腈中的溶液。在惰性氣體的氣氛中滴加1.13mL碘三甲基硅烷。在大約50℃下攪拌懸浮液3h，然后在環境溫度下攪拌過夜。將介質加熱到大約50℃，然后加入1.2mL碘三甲基硅烷。在攪拌3小時后，加入0.8ml碘三甲基硅烷。在攪拌大約4h以后，用10mL甲醇處理介質，并在環境溫度下攪拌15min。用濾紙過濾懸浮液，在旋轉蒸發器中在真空下濃縮過濾液。在50mL乙酸乙酯中重新處理反應粗產物，用2×50mL硫代硫酸鈉溶液、2×50mL飽和碳酸氫鈉溶液、50mL飽和氯化鈉溶液洗滌有機相。用硫酸鎂干燥有機相，然后在旋轉蒸發器中真空濃縮。在二氧化硅(Varian20g柱子)上用快速色譜提純反應粗產物，洗脫液乙酸乙酯/環己烷5∶95～35∶65梯度洗脫，得到265.4mg3-苯乙烯基-1H-吲唑-5-醇。
NMR譜1H(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，ppm)7.08(dd，J＝9和2Hz1H)；7.30～7.50(mt4H)；7.31(t寬，J＝7.5Hz1H)；7.38(d，J＝17Hz1H)；7.49(d，J＝17Hz1H)；7.69(d寬，J＝7.5Hz2H)；9.20(s1H)；12.41(mf1H).
IR(KBr)3397；3261；3058；2923；1629；1490；1222；1071；952；846；804；787；760；742；691；564cm-1分析LC/MS[M+H]+＝237.27；保留時間3.16分鐘。
程序E按照DS Tawfik在Synthesis，968-972(1993)；S Gobec，Tetrahedron lett.，43，167-170(2002)中的敘述制備p-硝基苯酚酯。
按照如下方法制備甲基苯基次膦酸4-硝基苯酯在氬氣下，在環境溫度下攪拌173mgNaH的50％(油中)在2mL無水四氫呋喃中的懸浮液。在環境溫度下滴加500mg4-硝基苯酚在2mL無水四氫呋喃中的溶液。在環境溫度下攪拌大約1h之后，在10min內滴加630mg甲基苯基次膦酰氯在2mL無水四氫呋喃中的溶液。在攪拌大約2h以后，用20mL蒸餾水稀釋反應介質，用2×20mL二氯甲烷萃取水相。用硫酸鎂干燥合并的有機相，過濾并在旋轉蒸發器中減壓濃縮。得到995mg純度50％的甲基苯基次膦酸4-硝基苯酯。
分析LC/MS[M+H]+＝278.1；保留時間3.16min。
實施例1制備甲基苯基次膦酸3-((E)-苯乙烯基)-1H-吲唑-5-基酯 在環境溫度下攪拌20mg3-苯乙烯基-1H-吲唑-5-醇、5.76mg咪唑、20.7mg甲基苯基次膦酰氯在5mL二氯甲烷中的溶液。在攪拌大約1h之后加入5.76mg咪唑和20.7mg甲基苯基次膦酰氯。在環境溫度下攪拌此懸浮液大約18h。加入10g咪唑和70mg甲基苯基次膦酰氯。在環境溫度下30h以后，用10mL蒸餾水處理反應介質。用2×10mL二氯甲烷萃取水相。用硫酸鎂干燥有機相并在旋轉蒸發器中減壓濃縮。用制備LC/MS提純反應粗產物，回收9.1mg甲基苯基次膦酸(phosphonic)3-((E)-苯乙烯基)-1H-吲唑-5-基酯。
NMR譜1H(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，ppm)1,93(d，J＝14.5Hz3H)；7.23(ddd，J＝9-2和1Hz1H)；7.31(d，J＝17Hz1H)；7.32(t寬，J＝7.5Hz1H)；7.43(t寬，J＝7.5Hz2H)；7.50(d，J＝17Hz1H)；7.50(d，J＝9Hz1H)；7.50～7.65(mt3H)；7.70(d寬，J＝7.5Hz2H)；7.82(mt1H)；7.95(ddd，J＝12-7.5和1.5Hz2H)；13.21(mf1H).
IR(KBr)3427；3056；2921；1487；143；1211；1183；1124；1070；959；911；806；783；761；745；693cm-1分析LC/MS[M+H]+＝375.22；保留時間3.45分鐘。
實施例2制備二苯基次膦酸3-((E)-苯乙烯基)-1H-吲唑-5-基酯
在環境溫度下攪拌70mg3-苯乙烯基-1H-吲唑-5-醇、300mg咪唑、273μL二苯基次膦酰氯在15mL二氯甲烷中的溶液。在攪拌大約90min之后，用30mL蒸餾水處理介質。用2×30mL二氯甲烷萃取水相，然后用硫酸鎂干燥有機相，過濾并在旋轉蒸發器中減壓濃縮。用乙酸乙酯重新處理粗產物。在燒結玻璃上過濾出固體，用乙酸乙酯漂洗。在旋轉蒸發器中減壓濃縮過濾液，在35～70μm的二氧化硅上用快速色譜進行提純。洗脫液環己烷/乙酸乙酯，80∶20～70∶30梯度洗脫，回收143mg黃色固體。用制備LC/MS提純此化合物，回收47.3mg二苯基次膦酸3-((E)-苯乙烯基)-1H-吲唑-5-基酯。
NMR譜1H(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，ppm)7.31(d，J＝17Hz1H)；7.32(t寬，J＝7.5Hz1H)；7.23(dd寬，J＝9和2Hz1H)；7.44(t寬，J＝7.5Hz2H)；7.50(d，J＝17Hz1H)；7.50(d，J＝9Hz1H)；7.50～7.70(mt6H)；7.70(d寬，J＝7.5Hz2H)；7.97(mt1H)；8.00(ddd，J＝12-8和2Hz4H)；13.24(mf展開1H).
IR(KBR)3433；3174；3057；1484；1439；1226；1130；1072；962；755；734；692和565cm-1分析LC/MS[M+H]+＝437.16；保留時間3.89分鐘。
實施例3制備甲基苯基次膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯 程序F
在環境溫度下攪拌497mg純度50％的甲基苯基次膦酸4-硝基苯酯在8mL中的溶液。滴加403mg3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-醇和268μL1，8-二氮雜雙環[5.4.0]十一碳-7-烯在12mL二氯甲烷中的懸浮液。在環境溫度下攪拌反應介質過夜，然后在旋轉蒸發器中減壓蒸發至干。在50g15～35μm的二氧化硅柱子上用快速色譜提純反應粗產物。回收300mg甲基苯基次膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯，用乙酸乙酯重結晶。分離出220mg甲基苯基次膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯。
NMR譜1H(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，ppm)1.95(d，J＝14.5Hz3H)；6.87(s寬1H)；7.04(t分裂，J＝7.5和1Hz1H)；7.13(t分裂，J＝7.5和1Hz1H)；7.26(dd寬，J＝8.5和2Hz1H)；7.46(d寬，J＝8.5Hz1H)；7.50～7.70(mt5H)；7.81(mt1H)；7.97(ddd，J＝12-8和2Hz2H)；11.57(mf1H)；13.00～13.70(mf展開1H).
實施例4制備二苯基次膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯 按照程序D，由800mg5-芐氧基-3-(1-叔丁氧基羰基-1H-吲哚-2-基)-吲唑-1-羧酸叔丁酯、560mg甲酸銨、800mg10％的碳載鈀在30mL無水乙醇中制備3-(1-叔丁氧基羰基-2，3-二氫-1H-吲哚-2-基)-5-羥基-吲唑-1-羧酸叔丁酯。回收700mg3-(1-叔丁氧基羰基-2，3-二氫-1H-吲哚-2-基)-5-羥基-吲唑-1-羧酸叔丁酯。
NMR譜1H(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，ppm)1.20(mf9H)；1.63(s9H)；3.09(dd寬，J＝16.5和5Hz1H)；3.79(dd，J＝16.5和11Hz1H)；5.79(dd，J＝11和5Hz1H)；6.62(d，J＝2Hz1H)；6.95～7.10(mt2H)；7.20～7.35(mt2H)；7.81(mf1H)；7.91(d，J＝9Hz1H)；9.57(mf1H).
制備3-(1-叔丁氧基羰基-2，3-二氫-1H-吲哚-2-基)-5-(二苯基次膦酰氧基)-吲唑-1-羧酸叔丁酯。
在140mg3-(1-叔丁氧基羰基-2，3-二氫-1H-吲哚-2-基)-5-羥基-吲唑-1-羧酸叔丁酯在15mL二氯甲烷中的溶液里加入90mg咪唑和250μL二苯基次膦酰氯。在環境溫度下攪拌反應介質過夜。在用10mL二氯甲烷和10mL蒸餾水稀釋之后，傾析介質。用硫酸鎂干燥有機相，過濾并在旋轉蒸發器中減壓濃縮。在二氯甲烷-甲醇混合物中重新處理粗產物，過濾出固體。在減壓濃縮之后，用快速色譜提純過濾液，洗脫液環己烷/乙酸乙酯8∶2，得到200mg3-(1-叔丁氧基羰基-2，3-二氫-1H-吲哚-2-基)-5-(二苯基次膦酰氧基)-吲唑-1-羧酸叔丁酯。
分析LC/MS[M+H]+＝652.14；保留時間4.74min。
制備二苯基次膦酸3-(2，3-二氫-1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯在環境溫度下攪拌200mg3-(1-叔丁氧基羰基-2，3-二氫-1H-吲哚-2-基)-5-(二苯基次膦酰氧基)-吲唑-1-羧酸叔丁酯在4mL二烷中的溶液和1mL鹽酸在二烷中的4M溶液。在1h以后加入1mL鹽酸在二烷中的4M溶液。在環境溫度下攪拌反應介質過夜。在燒結玻璃上過濾懸浮液。用乙醚漂洗固體。在200mL二氯甲烷和8mL2N氫氧化鈉水溶液中重新處理固體。將此溶液攪拌幾分鐘，然后傾析。用硫酸鎂干燥有機相，過濾并減壓濃縮，得到114mg二苯基次膦酸3-(2，3-二氫-1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯分析LC/MS[M+H]+＝452.20；保留時間3.35min。
制備二苯基次膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯在100℃下，在二甲基亞砜中攪拌170mg二苯基次膦酸3(2，3-二氫-1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯10h。在30℃下減壓蒸出溶劑。在二氧化硅(8g的interchim柱子)上快速色譜提純反應粗產物，洗脫液環己烷/乙酸乙酯4∶6，2∶8，乙酸乙酯/甲醇9/1。得到23mg二苯基次膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯。
NMR譜1H(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，ppm)6.90(s寬1H)；7.04(t寬，J＝7.5Hz1H)；7.13(t寬，J＝7.5Hz1H)；7.45(mt2H)；7.50～7.70(mt8H)；7.99(mt1H)；8.02(dd寬，J＝12和7.5Hz4H)；11.57(mf1H)；13.00～13.70(mf展開1H).
分析LC/MS[M+H]+＝450.19；保留時間4.06分鐘。
中間體C按照方案3，可分5步制備3-[1-叔丁氧基羰基-5-(2-嗎啉-4-基乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-5-羥基吲唑-1-羧酸叔丁酯。
方案3步驟I程序G制備5-芐氧基-3-(1-叔丁氧基羰基-5-叔丁基甲硅氧基-1H-吲哚-2-基)吲唑-1-羧酸叔丁酯在10g5-芐氧基-3-碘-吲唑-1-羧酸叔丁酯在156mL二烷中的溶液里加入13g1-(叔丁基二甲基甲硅氧基)-5-吲哚-2-硼酸、28.9g碳酸鈰、906.4mg與二氯甲烷絡合的[1，1’-二(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀(II)和51mL水。攪拌反應介質并在88℃下加熱45min，然后冷卻到環境溫度。然后傾析反應混合物，在旋轉蒸發器中減壓蒸出有機相。用250mL二氯甲烷溶解反應粗產物，然后用每次50mL水洗滌得到的溶液3次。使洗滌水的pH值從11到7。
在用硫酸鎂干燥有機相之后，在旋轉蒸發器中減壓蒸出溶劑。用快速色譜(40～63μm二氧化硅)提純反應粗產物，洗脫液環己烷/二氯甲烷40∶60，分離出13.4g5-芐氧基-3-(1-叔丁氧基羰基-5-叔丁基甲硅氧基-1H-吲哚-2-基)-吲唑-1-羧酸叔丁酯。
NMR譜1H(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，ppm)0.26(s6H)；1.02(s9H)；1.17(s9H)；1.67(s9H)；5.16(s寬2H)；7.00(dd，J＝9和2.5Hz1H)；7.06(s1H)；7.17(d，J＝2.5Hz1H)；7.30～7.50(mt3H)；7.32(d，J＝2.5Hz1H)；7.38(dd，J＝9和2.5Hz1H)；7.47(d寬，J＝7.5Hz2H)；8.08(d，J＝9Hz2H).
步驟II程序G1-制備5-芐氧基-3-(1-叔丁氧基羰基-5-羥基-1H-吲哚-2-基)-吲唑-1-羧酸叔丁酯在13.4g5-芐氧基-3-(1-叔丁氧基羰基-5-叔丁基甲硅氧基-1H-吲哚-2-基)吲唑-1-羧酸叔丁酯在140mL四氫呋喃的溶液中加入6.15g四丁基氟化銨。在環境溫度下攪拌介質30min。用每次25mL水洗滌反應粗產物3次，然后用硫酸鎂干燥有機相，過濾并在旋轉蒸發器中減壓蒸出溶劑。得到14.4g粗產物，用快速色譜(40～63μm)將其提純，洗脫液二氯甲烷/甲醇98∶2。
分離出8.54g5-芐氧基-3-(1-叔丁氧基羰基-5-羥基-1H-吲哚-2-基)-吲唑-1-羧酸叔丁酯LC/MS[M+H]+＝556.35；保留時間4.76min。
步驟III程序G2-制備5-芐氧基-3-[5-(2-溴-乙氧基)-1-叔丁氧羰基-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯在80℃下加熱2.22g5-芐氧基-3-(1-叔丁氧基羰基-5-羥基-1H-吲哚-2-基)-吲唑-1-羧酸叔丁酯、3.90g碳酸鈰在22mL1，2-二溴乙烷中的懸浮液40h，然后將其冷卻到環境溫度，并在旋轉蒸發器中減壓蒸出。用快速色譜(40～63μm二氧化硅)提純反應粗產物，洗脫液二氯甲烷，分離出2g5-芐氧基-3-[5-(2-溴-乙氧基)-1-叔丁氧羰基-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯。
NMR譜1H(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，ppm)1.17(s9H)；1.67(s9H)；3.85(t寬，J＝5.5Hz2H)；4.41(t寬，J＝5.5Hz2H)；5.16(s2H)；7.07(s1H)；7.11(dd，J＝9和2.5Hz1H)；7.29和7.30(2d，J＝2.5Hz2H全部)；7.30～7.50(mt6H)；8.08和8.11(2d，J＝9Hz2H全部).
LC/MS[M+H]+＝664.22；保留時間5.67分鐘。
步驟IV制備5-芐氧基-3-[1-叔丁氧羰基-5-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯在80℃下加熱2.0g5-芐氧基-3-[5-(2-溴-乙氧基)-1-叔丁氧羰基-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯和498mg碘化鉀在90mL乙腈中的懸浮液7h。然后加入394μL嗎啉、150mg碘化鉀和1.24g碳酸鉀，并在80℃下加熱15h。將反應混合物冷卻到環境溫度，然后過濾。在旋轉蒸發器中減壓蒸發過濾液，得到1.90g5-芐氧基-3-[1-叔丁氧羰基-5-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯。
LC/MS[M+H]+＝669.43；保留時間3.99min。
步驟V制備3-[1-叔丁氧羰基-5-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-5-羥基-吲唑-1-羧酸叔丁酯在70℃下加熱740mg5-芐氧基-3-[1-叔丁氧羰基-5-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯、328mg甲酸銨和234mg10％的碳載鈀在56mL乙醇中的溶液35min。然后將反應混合物冷卻到環境溫度。用濾紙過濾出催化劑并用大量乙醇洗滌。得到533mg粗化合物3-[1-叔丁氧羰基-5-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-5-羥基-吲唑-1-羧酸叔丁酯LC/MS[M+H]+＝579.32；保留時間3.92min制備3-[1-叔丁氧羰基-5-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-5-(甲基苯基次膦酰氧基)-吲唑-1-羧酸叔丁酯在27mg3-[1-叔丁氧羰基-5-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-5-羥基-吲唑-1-羧酸叔丁酯在2mL二氯甲烷中的溶液里加入16mg咪唑和40.5mg甲基苯基次膦酰氯。在環境溫度下攪拌得到的溶液。在攪拌15小時之后，再次加入16mg咪唑和40.5mg甲基苯基次膦酰氯，并在環境溫度下再攪拌3.5h以使反應完成。然后過濾反應混合物并在旋轉蒸發器中減壓蒸發。用LC/MS提純得到的殘渣。分離出10.5mg3-[1-叔丁氧羰基-5-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-5-(甲基苯基次膦酰氧基)-吲唑-1-羧酸叔丁酯。
LC/MS[M+H]+＝717.41；保留時間3.61min實施例5制備甲基苯基次膦酸3-[5-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-基酯 在環境溫度下攪拌10.5mg3-[1-叔丁氧羰基-5-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-5-(甲基苯基次膦酰氧基)-吲唑-1-羧酸叔丁酯在500μL二氯甲烷和500μL三氟乙酸中的溶液4h。在氮氣流下蒸發反應混合物，然后將其重新溶解于1.4mL的DMSO中。在60℃下攪拌得到的溶液3天，然后用LC/MS提純。分離出5.1mg甲基苯基次膦酸3-[5-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-基酯。
LC/MS[M+H]+＝517.35；保留時間2.64min實施例6制備苯基膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯
步驟I按照程序E，由0.345g在3mL無水四氫呋喃中的氫化鈉和1g 4-硝基苯酚在5mL四氫呋喃中的溶液和0.701g苯基次膦酰二氯制備苯基膦酸二(4-硝基苯基)酯。得到1.46g苯基膦酸二(4-硝基苯基)酯。
步驟II按照程序F，從230mg苯基膦酸二(4-硝基苯基)酯在4mL二氯甲烷中的溶液，通過在其中加入120mg 3(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-醇和72μL的1，8-二氮雜雙環[5.4.0]十一碳-7-烯在4mL二氯甲烷中的溶液來制備苯基膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯。在環境溫度下攪拌2h之后，用4×50mL的飽和碳酸氫鈉溶液處理介質，然后用2×50mL飽和氯化鈉溶液處理。用硫酸鎂干燥有機相，然后濃縮至干。得到粗的苯基膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯。
步驟III按照程序F，從200mg在4mL二氯甲烷中的粗苯基膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯、95μL甲醇、72μL1，8-二氮雜雙環[5.4.0]-十一碳-7-烯和4mL二氯甲烷制備苯基膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯。在旋轉蒸發器中減壓濃縮之后，用8g顆粒度15～35μm的二氧化硅interchim快速柱子提純粗產物。用在環己烷中的15～50％乙酸乙酯對產物進行梯度洗脫。得到70mg不純的產物，用制備LC/MS再次提純。將得到的產物溶解并在Jouan RC1010蒸發器中濃縮至干。得到34mg黃色固體狀苯基膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯。
NMR譜1H(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，ppm)3.86(d，J＝11Hz3H)；6.93(s寬1H)；7.04(t寬，J＝7.5Hz1H)；7.13(t寬，J＝7.5Hz1H)；7.31(d寬，J＝9Hz1H)；7.46(d寬，J＝7.5Hz1H)；7.55～7.65(mt4H)；7.73(t很寬，J＝7.5Hz1H)；7.86(s寬1H)；7.93(dd寬，J＝13.5和7.5Hz2H)；11.59(mf1H)；13.41(mf1H).
分析LC/MS[M+H]+＝404.19；保留時間3.62分鐘。
實施例7
按照程序F，從在5mL二氯甲烷中的100mg粗苯基膦酸二(4-硝基苯基)酯、150L異丙醇、30μL1，8-二氮雜雙環[5.4.0]十一碳-7-烯可制備苯基膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯異丙酯。在將反應介質濃縮之后，用制備LC/MS提純粗產物。回收21.5mg化合物。
NMR譜1H(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，ppm)1.29(d，J＝6Hz3H)；1.33(d，J＝6Hz3H)；4.84(mt1H)；6.90(d，J＝1.5Hz1H)；7.04(t寬，J＝7.5Hz1H)；7.14(t寬，J＝7.5Hz1H)；7.30(dd寬，J＝8.5et 1.5Hz1H)；7.46(d，J＝8.5Hz1H)；7.50～7.65(mt4H)；7.70(mt1H)；7.86(s寬1H)；7.91(mt2H)；11.58(s寬1H)；13.39(s寬1H).
實施例8 按照程序F，從被戊烯穩定的150mg苯基膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯4-硝基苯基酯(按照程序F制備)在2mL二氯甲烷中的溶液、310μL芐醇和44μL1，8-二氮雜雙環[5.4.0]十一碳-7-烯可制備苯基膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯芐酯。用制備LC/MS提純反應粗產物，回收16.9mg苯基膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯芐酯。
NMR譜1H(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，ppm)5.28(d，J＝8Hz2H)；6.87(d，J＝1.5Hz1H)；7.04(t寬，J＝7.5Hz1H)；7.14(t寬，J＝7.5Hz1H)；7.20～7.75(mt12H)；7.86(s寬1H)；7.94(mt2H)；11.58(s寬1H)；13.40(s寬1H).
實施例9制備甲基膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯 步驟I按照程序E，從1g 4-硝基苯酚、12mL THF、345mg在油中的50％氫化鈉和478mg甲基膦酰氯制備甲基膦酸二(4-硝基苯基)酯。得到1.07g粗的甲基膦酸二(4-硝基苯基)酯。
步驟II按照程序F，從150mg甲基膦酸二(4-硝基苯基)酯、4mL二氯甲烷、100mg3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-醇、67μL1，8-二氮雜雙環[5.4.0]十一碳-7-烯和4mL二氯甲烷制備甲基膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯。在攪拌3h之后，滴加100μL甲醇在2mL二氯甲烷中的溶液。將反應介質置于攪拌下大約16小時，然后減壓濃縮至干。用5g顆粒度15～35μm的二氧化硅Interchim快速色譜柱將得到的油狀物提純。洗脫液30％的乙酸乙酯在環己烷中的溶液，然后是80％的乙酸乙酯在甲醇中的溶液。在減壓下蒸出溶劑，用乙酸乙酯將得到的產物進行結晶。得到36mg白色結晶狀甲基膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯。
NMR譜1H(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，ppm)1.72(d，J＝17.5Hz3H)；3.80(d，J＝11Hz3H)；7.04(t寬，J＝7.5Hz1H)；7.07(s寬1H)；7.13(t寬，J＝7.5Hz1H)；7.35(d寬，J＝9Hz1H)；7.47(d寬，J＝7.5Hz1H)；7.63(d寬，J＝7.5Hz1H)；7.65(d，J＝9Hz1H)；7.95(s寬1H)；11.59(mf1H).
實施例10在4個步驟中制備3-碘-5-(甲氧基-苯基-次膦酰氧基)-吲唑-1-羧酸叔丁酯，即中間體D 步驟I制備1-(5-羥基-吲唑-1-基)-乙酮。在大約50℃下加熱939mg1-(5-芐氧基-吲唑-1-基)-乙酮、1.33g甲酸銨和939mg10％的碳載鈀在100mL無水乙醇中的懸浮液30min。當停止釋放氣體時，用濾紙過濾出催化劑并用無水乙醇漂洗。在旋轉蒸發器中減壓濃縮過濾液。回收571.1mg1-(5-羥基-吲唑-1-基)-乙酮。
NMR譜1H(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，ppm)2.69(s3H)；7.11(dd，J＝9和2Hz1H)；7.14(d，J＝2Hz1H)；8.15(d，J＝9Hz1H)；8.31(d，J＝1Hz1H)；9.40～9.90(mf展開1H).
步驟II按照程序F，從200mg苯基膦酸二(4-硝基苯基)酯、88mg1-(5-羥基-吲唑-1-基)-乙酮、74.7μL 1，8-二氮雜雙環[5.4.0]十一碳-7-烯和8mL二氯甲烷制備苯基膦酸1-乙酰基-1H-吲唑-5-基酯4-硝基苯基酯。在用0.1M的碳酸氫鈉溶液洗滌有機相以后，用硫酸鎂干燥，過濾并在旋轉蒸發器中減壓濃縮過濾液，回收219mg粗苯基膦酸1-乙酰基-1H-吲唑-5-基酯4-硝基苯基酯并無須提純用于下一步的步驟中。
步驟III按照程序F從219mg苯基膦酸1-乙酰基-1H-吲唑-5-基酯4-硝基苯基酯、5mL二氯甲烷、74.8μL 1，8-二氮雜雙環[5.4.0]十一碳-7-烯和202μL甲醇制備苯基膦酸1H-吲唑-5-基酯甲酯(實施例10)。在顆粒度35～70μm的二氧化硅上對粗產物進行快速色譜提純。洗脫液環己烷，然后是環己烷/乙酸乙酯80∶20。回收15mg無色油狀物苯基膦酸1H-吲唑-5-基酯甲酯。
NMR譜1H(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，ppm)3.82(d，J＝11Hz3H)；7.19(dd寬，J＝9和2.5Hz1H)；7.50～7.75(mt4H)；7.53(d寬，J＝9Hz1H)；7.86(dd寬，J＝13.5和8Hz2H)；8.05(s寬1H)；13.13(mf1H).
IR(CCl4)3232；3064；2953；1500；1440；1247；1133；1044；964；943；907；693和559cm-1分析LC/MS[M+H]+＝289.18；保留時間2.84分鐘步驟IV按照程序A從76mg苯基膦酸1H-吲唑-5-基酯甲酯、134mg碘、30.6mg預先在3mL二甲基甲酰胺中研制的氫氧化鉀制備苯基膦酸3-碘-1H-吲唑-5-基酯甲酯。在顆粒度15～35μm的二氧化硅上對粗產物進行快速色譜提純。洗脫液乙酸乙酯/環己烷1∶1。回收77.6mg苯基膦酸3-碘-1H-吲唑-5-基酯甲酯。
NMR譜1H(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，ppm)3.83(d，J＝11Hz3H)；7.19(t，J＝2Hz1H)；7.27(ddd，J＝9-2和1Hz1H)；7.50～7.65(mt2H)；7.56(d，J＝9Hz1H)；7.72(tq，J＝7.5和2Hz1H)；7.88(ddd，J＝13.5-7.5和1.5Hz2H)；13.20～13.90(mf展開1H).
IR(CH2Cl2)3444；3184；2853；1494；1440；1165；1133；1045；958；906；817和559cm-1分析LC/MS[M+H]+＝415.04；保留時間3.24分鐘步驟V按照程序B從77.6mg苯基膦酸3-碘-1H-吲唑-5-基酯甲酯、122.7mg二碳酸二叔丁酯、78.1μL三乙胺、5.7mg4-二甲基氨基吡啶在2.4mL二氯甲烷中的溶液制備3-碘-5-(甲氧基-苯基-次膦酰氧基)-吲唑-1-羧酸叔丁酯，即中間體D。在顆粒度15～35μm的二氧化硅上對反應粗產物進行快速色譜提純。洗脫液環己烷/乙酸乙酯80∶20，然后是50∶50。回收66.3mg3-碘-5-(甲氧基-苯基-次膦酰氧基)-吲唑-1-羧酸叔丁酯。
分析LC/MS[M+H]+＝515.02；保留時間4.13min按照程序G從66.34mg3-碘-5-(甲氧基-苯基-次膦酰氧基)-吲唑-1-羧酸叔丁酯、54.44mg硼酸2-吡咯-1-(叔丁氧羰基)、5.28mg1，1’-二(二苯基膦基)二茂鐵-二氯化鈀(II)、168mg碳酸鈰、328μL水和1mL二烷制備3-(1-叔丁氧羰基-1H-吡咯-2-基)-5-(甲氧基-苯基-次膦酰氧基)-吲唑-1-羧酸叔丁酯。在顆粒度15～35μm的二氧化硅上對粗產物進行快速色譜提純。洗脫液乙酸乙酯/環己烷20∶80，然后是30∶70。回收35.3mg3-(1-叔丁氧羰基-1H-吡咯-2-基)-5-(甲氧基-苯基-次膦酰氧基)-吲唑-1-羧酸叔丁酯。
分析LC/MS[M+H]+＝554.18；保留時間4.42min。
實施例11制備苯基膦酸3-(1H-吡咯-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯 將39mg3-(1-叔丁氧羰基-1H-吡咯-2-基)-5-(甲氧基-苯基-次膦酰氧基)-吲唑-1-羧酸叔丁酯溶解于0.5mL二氯甲烷中，然后加入0.5mL三氟乙酸。在環境溫度下攪拌溶液大約2h。在旋轉蒸發器中減壓蒸出溶劑。用制備LC/MS提純反應粗產物。得到19mg呈三氟乙酸鹽形式的苯基膦酸甲酯3-(1H-吡咯-2-基)-1H-吲唑-5-基酯NMR譜1H(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，ppm)3.84(d，J＝11.5Hz3H)；6.20(q，J＝3Hz1H)；6.52(mt1H)；6.83(mt1H)；7.24(ddd，J＝9-2.5和1.5Hz1H)；7.51(d，J＝9Hz1H)；7.50～7.65(mt2H)；7.65～7.75(mt2H)；7.89(ddd，J＝13.5-8和1.5Hz2H)；11.33(s寬1H)；13.02(s寬1H).
分析LC/MS[M+H]+＝354.19；保留時間3.23分鐘按照方案4，經一步制備三氟甲磺酸3-((E)-苯乙烯基)-1H-吲唑-5-基酯 方案4在氬氣氣氛下，在200mg預先冷卻到0℃、用戊烯穩定的3-((E)-苯乙烯基)-1H-吲唑-5-醇在20mL二氯甲烷中的溶液里滴加171μL三氟甲磺酸酐，然后滴加512μL吡啶。攪拌反應介質并在0℃下保持4h，然后在環境溫度下于攪拌下放置48h。然后用2×20mL水洗滌反應混合物。用3×30mL二氯甲烷萃取水相。用硫酸鎂干燥有機相，然后過濾并伴隨著加入10mL甲苯，在旋轉蒸發器中減壓蒸出溶劑，得到343.8mg粗產物。
LC/MS[M+H]+＝369.13；保留時間4.98min。
實施例12制備[3-((E)-苯乙烯基)-1H-吲唑-5-基]-膦酸二甲酯 程序H，按照方案5 方案5在氬氣氣氛下將40.7μL(1.09eq；0.444mmol)亞磷酸二甲酯、61.9μL(1.09eq；0.444mmol)三乙胺和18.8mg(0.04eq；0.016mmol)的四(三苯基膦)鈀(0)攪拌15min。加入150mg(1eq；0.407mmol)三氟甲磺酸3-((E)-苯乙烯基)-1H-吲唑-5-基酯在5mL二甲基甲酰胺中的溶液。在85℃下加熱介質過夜。在介質中加入41μL亞磷酸二甲酯、62μL三乙胺和20mg四(三苯基膦)鈀(0)，再加熱2h。然后在介質中加入100μL亞磷酸二甲酯、100μL三乙胺和30mg四(三苯基膦)鈀(0)，并在105℃下加熱過夜。在用濾紙過濾出催化劑以后，在旋轉蒸發器中減壓蒸出溶劑。用LC/MS提純反應粗產物。分離出8.6mg[3-((E)-苯乙烯基)-1H-吲唑-5-基]-膦酸二甲酯和27.2mg[3-((E)-苯乙烯基)-1H-吲唑-5-基]-膦酸單甲酯。
描述[3-((E)-苯乙烯基)-1H-吲唑-5-基]-膦酸二甲酯LC/MS[M+H]+＝329.20；保留時間3.20min。
NMR譜1H(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，ppm)3.71(d，J＝11.5Hz6H)；7.32(t寬，J＝7.5Hz1H)；7.43(t寬，J＝7.5Hz2H)；7.45～7.70(mt4H)；7.78(d寬，J＝7.5Hz2H)；8.57(d，J＝14Hz1H)；13.52(s寬1H).
描述[3-((E)-苯乙烯基)-1H-吲唑-5-基]-膦酸單甲酯LC/MS[M+H]+＝315.18；保留時間2.66min。
實施例13制備[3-((E)-苯乙烯基)-1H-吲唑-5-基]-膦酸單甲酯 將18.5mg[3-((E)-苯乙烯基)-1H-吲唑-5-基]-膦酸二甲酯溶解于500μL 1M苛性鈉在甲醇中的1M溶液里。在環境溫度下攪拌介質4h。向在環境溫度下攪拌了15min的混合物中加入100μL2N的鹽酸。用3mL乙酸乙酯萃取有機相。在離心蒸發器中真空蒸出溶劑。得到18mg產物。
NMR譜1H(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，ppm)3.20(d，J＝10.5Hz3H)；7.31(t寬，J＝7.5Hz1H)；7.35～7.50(mt3H)；7.45(d，J＝17Hz1H)；7.58(d，J＝17Hz1H)；7.62(d，J＝9Hz1H)；7.72(d寬，J＝7.5Hz2H)；8.33(d，J＝13Hz1H)；13.10(mf1H).
LC/MS[M+H]+＝315.18；保留時間2.73分鐘。
實施例14制備[3-((E)-苯乙烯基)-1H-吲唑-5-基]-膦酸二乙酯
按照程序H，加入70mg(1eq；0.190mmol)溶解于3mL二甲基甲酰胺的三氟甲磺酸3-((E)-苯乙烯基)-1H-吲唑-5-基酯、26.7μL(1.09eq；0.207mmol)亞磷酸二乙酯、8.9mg(0.04eq；0.0076mmol)四(三苯基膦)鈀(0)和28.8μL(1.09eq；0.207mmol)三乙胺。逐次加入27μL亞磷酸二乙酯、29μL三乙胺、10mg四(三苯基膦)鈀(0)，然后是50μL亞磷酸二乙酯、50μL三乙胺、20mg四(三苯基膦)鈀(0)，最后加入27μL亞磷酸二乙酯、29μL三乙胺和9mg四(三苯基膦)鈀(0)。分離出22mg[3-((E)-苯乙烯基)-1H-吲唑-5-基]-膦酸二乙酯和8.7mg[3-((E)-苯乙烯基)-1H-吲唑-5-基]-膦酸單乙酯。
描述[3-((E)-苯乙烯基)-1H-吲唑-5-基]-膦酸二乙酯LC/MS[M+H]+＝357.19；保留時間3.63分鐘。
NMR譜1H(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，ppm)1.28(t，J＝7Hz6H)；4.07(mt4H)；7.33(t寬，J＝7.5Hz1H)；7.43(t寬，J＝7.5Hz2H)；7.45～7.75(mt2H)；7.53(d，J＝16.5Hz1H)；7.72(d，J＝16.5Hz1H)；7.78(d寬，J＝7.5Hz2H)；8.56(d，J＝14Hz1H)；13.50(mf1H).
描述[3-((E)-苯乙烯基)-1H-吲唑-5-基]-膦酸單乙酯LC/MS[M+H]+＝329.17；保留時間3.00min。
按照方案6分4步制備反應中間體E，即5-(二甲氧基-磷酰基)-3-碘-吲唑-1-羧酸叔丁酯。
方案6步驟I程序I-制備三氟甲磺酸1-乙酰基-1H-吲唑-5-基酯在氬氣氣氛下，在預先冷卻到0℃，被戊烯穩定的98mg(1eq；0.556mmol)1-(5-羥基-吲唑-1-基)乙酮在10mL二氯甲烷中的溶液里滴加112μL(1.2eq；0.667mmol)三氟甲磺酸酐和337μL(17.5eq；49.557mmol)吡啶。在氬氣氣氛下攪拌介質并在0℃下保持過夜。在介質中加入112μL三氟甲磺酸酐和337μL吡啶，然后在0℃下攪拌2h。然后再加入112μL三氟甲磺酸酐和337μL吡啶，接著再在0℃下攪拌介質3h。用10mL水洗滌反應混合物。用2×10mL二氯甲烷處理水相。用硫酸鎂干燥有機相，然后過濾并在旋轉蒸發器中減壓蒸出溶劑。得到168.9mg三氟甲磺酸1-乙酰基-1H-吲唑-5-基酯。
NMR譜1H(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，ppm)2.76(s3H)；7.77(dd，J＝9和2.5Hz1H)；8.17(d，J＝2.5Hz1H)；8.47(d，J＝9Hz1H)；8.60(s1H).
步驟II制備(1-乙酰基-1H-吲唑-5-基)-膦酸二甲酯在氬氣氣氛下，攪拌291μL(1.09eq；3.172mmol)亞磷酸二甲酯、442μL(1.09eq；3.172mmol)三乙胺和134mg(0.04eq；0.116mmol)四(三苯基膦)鈀(0)15min。將897mg(1eq；2.91mmol)三氟甲磺酸1-乙酰基-1H-吲唑-5-基酯溶解于60mL二甲基甲酰胺中。在氬氣氣氛下在105℃加熱介質4h。在加入40mL甲苯的同時，在旋轉蒸發器中減壓蒸出溶劑。在40mL乙酸乙酯中重新處理反應粗產物，然后用50mL水洗滌。用硫酸鎂干燥有機相，然后過濾并在旋轉蒸發器中減壓蒸出溶劑。得到973.6mg粗產物。通過快速色譜(35～70μm二氧化硅)提純反應粗產物，洗脫液乙酸乙酯/環己烷80∶20。分離出430.5mg(1-乙酰基-1H-吲唑-5-基)-膦酸二甲酯LC/MS[M+H]+＝269.18；保留時間2.79min。
步驟III制備(3-碘-1H-吲唑-5-基)-膦酸二甲酯在430mg(1eq；1.603mmol)(1-乙酰基-1H-吲唑-5-基)-膦酸二甲酯在20mL二甲基甲酰胺中的溶液里加入814mg(2eq；3.206mmol)碘和180mg(2eq；3.206mmol)研磨的氫氧化鉀。在環境溫度下攪拌介質48h。向介質中加入814mg碘和180mg氫氧化鉀，并在環境溫度下將其攪拌3h。加入20mL飽和硫代硫酸鈉溶液，攪拌介質10min。用40mL水洗滌反應混合物。用4×50mL乙酸乙酯處理水相。用硫酸鎂干燥有機相，然后過濾并在旋轉蒸發器中減壓蒸出溶劑。得到458mg(3-碘-1H-吲唑-5-基)-膦酸二甲酯。
分析LC/MS[M+H]+＝353.06；保留時間2.65min。
步驟IV制備5-(二甲氧基-磷酰基)-3-碘-吲唑-1-羧酸叔丁酯在458mg(1eq；1.301mmol)(3-碘-1H-吲唑-5-基)-膦酸二甲酯在10mL二氯甲烷中的溶液里加入851.7mg(3eq；3.903mmol)二碳酸二叔丁酯、39.7mg(0.25eq；0.325mmol)4-二甲基氨基吡啶和544μL(3eq；3.903mmol)三乙胺。在環境溫度下攪拌介質過夜。用20mL水，然后用10mL飽和氯化鈉溶液洗滌反應混合物。用4×20mL乙酸乙酯處理水相。用硫酸鎂干燥有機相，然后過濾并在旋轉蒸發器中減壓蒸出溶劑。得到415mg粗化合物。
LC/MS[M+H]+452.99；保留時間3.61min。
實施例15制備[3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基]-膦酸單甲酯
在130mg(1eq；0.287mmol)5-(二甲氧基-磷酰基)-3-碘-1-吲唑-1-羧酸叔丁酯中加入82.9mg(0.25eq；0.072mmol)四(三苯基膦)鈀(0)、150.1mg(2eq；0.575mmol)1-boc-吲哚-2-硼酸、5mL二甲基甲酰胺和250μL飽和碳酸氫鈉溶液。在130℃下攪拌介質5h。用濾紙過濾反應介質，在旋轉蒸發器中減壓蒸出溶劑。用LC/MS提純反應粗產物。分離出41mg[3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基]-膦酸單甲酯。
NMR譜1H(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，ppm)3.58(d，J＝11Hz3H)；7.05(t分裂，J＝7.5和1Hz1H)；7.08(s寬1H)；7.16(t分裂，J＝7.5和1Hz1H)；7.49(d寬，J＝7.5Hz1H)；7.60～7.75(mt2H)；7.67(d寬，J＝7.5Hz1H)；8.51(d，J＝14Hz1H)；11.69(s寬1H)；13.62(mf1H).
LC/MS[M+H]+＝328.17；保留時間2.57分鐘。
實施例16制備(3-噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基)-膦酸單甲酯 在70mg(1eq；0.155mmol)5-(二甲氧基-磷酰基)-3-碘-吲唑-1-羧酸叔丁酯中加入44.8mg(0.25eq；0.039mmol)四(三苯基膦)鈀(0)、39.6mg(2eq；0.310mmol)2-噻吩硼酸、3mL二甲基甲酰胺和150μL飽和碳酸氫鈉溶液。在130℃下攪拌介質5h。在濾紙上過濾反應介質并在旋轉蒸發器中減壓蒸出溶劑。用LC/MS提純反應粗產物。得到2mg(3-噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基)-膦酸二甲酯(用NMR得到純度40％)和12.9mg(3-噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基)-膦酸單甲酯NMR譜1H(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，ppm)3.53(d，J＝11Hz3H)；7.26(dd，J＝5.5和3Hz1H)；7.65(dd，J＝5.5和1Hz1H)；7.65～7.75(mt2H)；7.68(d 寬，J＝3Hz1H)；8.41(d，J＝14Hz1H)；13.49(mf1H).
實施例17制備[3-(1H-吡咯-2-基)-1H-吲唑-5-基]-膦酸單甲酯 在70mg(1eq；0.155mmol)5-(二甲氧基-磷酰基)-3-碘-吲唑-1-羧酸叔丁酯中加入44.8mg(0.25eq；0.039mmol)四(三苯基膦)鈀(0)、65.3mg(2eq；0.310mmol)1-boc-吡咯-2-硼酸、3mL二甲基甲酰胺和150μL飽和碳酸氫鈉溶液。在130℃下攪拌介質5h。在濾紙上過濾反應介質并在旋轉蒸發器中減壓蒸出溶劑。用LC/MS提純反應粗產物。得到4.10mg[3-(1H-吡咯-2-基)-1H-吲唑-5-基]-膦酸單甲酯。
NMR譜1H(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，ppm)3.55(d，J＝11Hz3H)；6.24(q，J＝3Hz1H)；6.66(mt1H)；6.91(mt1H)；7.65(mt2H)；8.36(d，J＝14.5Hz1H)；11.46(mf1H)；13.24(mf1H).
實施例18制備二甲基次膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯 按照程序E從500mg二甲基次膦酰氯、214mg氫化鈉(油中的50％)、618mg對硝基苯酚在10mL四氫呋喃中的溶液制備試劑二甲基次膦酸4-硝基苯基酯。得到700mg所需產物。
收率＝26％按照程序F從230mg3-(1H-吲哚-2-基)-H-吲唑-5-醇(中間體B)和在其中加入了170μL 1，8-二氮雜雙環[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)在2mL二氯甲烷中溶液的245mg二甲基次膦酸4-硝基苯基酯在5mL二氯甲烷的溶液制備化合物二甲基次膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯。在環境溫度下攪拌24后蒸出溶劑并用制備LC/MS提純粗產物。在濃縮餾分之后得到結晶，用乙酸乙酯將其洗滌，然后用異丙基醚洗滌。回收129mg所需產物。
收率＝43％NMR譜的化學位移(δ單位ppm)-在溶劑二甲基亞砜中，參考d6(DMSO-d6)在2.50ppm1.65(d，J＝15.0Hz，6H)；7.00～7.06(m，.2H)；7.13(t寬，J＝8.0Hz，1H)；7.30(d寬，J＝8.0Hz，1H)；7.46(d寬，J＝8.0Hz，1H)；7.58～7.65(m，2H)；7.91(m，1H)；11.6(m寬，1H)；13.4(s寬，1H).
實施例19制備3-[5-(2-哌啶-1-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-基膦酸甲酯按照如下的方案分6步制備此化合物
步驟I按照程序G從5-芐氧基-3-碘-吲唑-1-羧酸叔丁酯和如在WO 2003/020699A2中所述得到的[5-(叔丁基-二甲基硅烷氧基)-吲哚-1-羧酸叔丁酯]-2-硼酸制備5-芐氧基-3-[1-叔丁氧羰基-5-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯。
步驟II按照程序G1制備5-芐氧基-3-(1-叔丁氧羰基-5-羥基-1H-吲哚-2-基)-吲唑-1-羧酸叔丁酯。
步驟III按照程序G2制備5-芐氧基-3-[5-(2-溴-乙氧基)-1-叔丁氧羰基-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯。
步驟IV按照如下的方法制備5-芐氧基-3-[5-(2-哌啶-1-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑三氟乙酸酯在85℃下攪拌600mg5-芐氧基-3-[5-(2-溴-乙氧基)-1-叔丁氧羰基-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯、442mg碳酸鉀、272mg哌啶在30mL乙腈中的懸浮液5h。在返回到20℃以后，減壓蒸發反應混合物，然后在乙酸乙酯(100mL)和水(100mL)的混合物中重新處理殘渣。在傾析和用乙酸乙酯(1×50mL)萃取之后，合并有機萃取液，用硫酸鎂干燥，然后進行減壓蒸發。蒸發后得到的化合物在15mL二氯甲烷和5mL三氟乙酸的混合物中重新處理，然后在20℃下攪拌1h。在減壓下蒸發反應混合物，在乙酸乙酯(50mL)和10％的碳酸氫鈉(50mL)的混合物中重新處理殘渣。在傾析和用乙酸乙酯(2×50mL)萃取之后，合并有機萃取液，用硫酸鎂干燥，然后減壓蒸發。在二氧化硅(20g二氧化硅DC0210，InterChrom柱子；洗脫液二氯甲烷/甲醇9∶1，v/v，15mL/min)上進行色譜提純如此得到的粗化合物。合并含有所需化合物的餾分進行減壓蒸發。分離出360mg5-芐氧基-3-[5-(2-哌啶-1-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑三氟乙酸酯。
步驟V按照如下的方法制備3-[5-(2-哌啶-1-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-醇在90℃的溫度下，在置于微波場(Synthwave 402)中輻照下的反應器中將360mg5-芐氧基-3-[5-(2-哌啶-1-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑、916mg甲酸銨和120mg鈀在10mL乙醇中的懸浮液放置30min，然后在硅藻土床上過濾反應混合物。在減壓下蒸發過濾液，然后在乙酸乙酯(150mL)和水(50mL)混合物中重新處理殘渣。加入30％的氫氧化銨溶液，使pH值到10。在傾析和用乙酸乙酯(1×50mL)萃取之后合并有機萃取液，用硫酸鎂干燥，然后減壓蒸發。分離并鑒定193mg3-[5-(2-哌啶-1-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-醇。
步驟VI制備3-[5-(2-哌啶-1-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-5吲唑-基膦酸甲酯在193mg 3-[5-(2-哌啶-1-基-乙氧基)-1H-2-基]-1H-吲唑-5-醇和173.5mg甲基膦酸二(4-硝基苯基)酯在10mL二氯甲烷中的溶液里加入77μL 1，8-二氮雜雙環[5.4.0]-十一碳-7-烯，然后讓其在20溫度下反應。反應3h以后，加入300μL甲醇，再加入77μL1，8-二氮雜雙環[5.4.0]-十一碳-7-烯，繼續在20℃下反應16h。此時在二氯甲烷(150mL)和飽和碳酸氫鈉溶液(100mL)的混合物中重新處理反應介質。在傾析和用二氯甲烷(50mL)萃取之后合并有機萃取液，用硫酸鎂干燥，然后減壓蒸發。在二氧化硅(20g二氧化硅DC0210，InterChrom柱子；洗脫液二氯甲烷/甲醇9/1，v/v，15mL/min)上進行色譜提純如此得到的粗化合物。合并含有所需化合物的餾分并減壓蒸發。分離并鑒定89mg3-[5-(2-哌啶-1-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-基膦酸甲酯分析LC/MS[M+H]+＝469.25；保留時間3.02min。
實施例20制備甲基膦酸單-{3-[5-(2-哌嗪-1-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-基}酯按照如下的方案，分6步制備化合物
步驟I程序J-按照如下方法制備5-芐氧基-3-[1-叔丁氧羰基-5-(2-氯-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯在72mg四丁基溴化銨和270μL2N氫氧化鈉在5mL蒸餾水中的水溶液中混合100mg5-芐氧基-3-(1-叔丁氧羰基-5-羥基-1H-吲哚-2-基)-吲唑-1-羧酸叔丁酯和132μL 1-溴-2-氯乙烷在5mL二氯甲烷中的溶液。在20℃下將反應混合物置于劇烈攪拌之下6天。在傾析和用水(4×5mL)洗滌之后，合并有機萃取液，用硫酸鎂干燥，然后減壓蒸發。用制備LC/MS提純得到的粗化合物。合并含有所需化合物的餾分并減壓蒸發。分離并鑒定18.1mg5-芐氧基-3-[1-叔丁氧羰基-5-(2-氯-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯分析LC/MS[M+H]+＝618.15；保留時間5.56min。
步驟II按照如下方法制備5-芐氧基-3-{1-叔丁氧羰基-5-[2-(4-叔丁氧羰基-哌嗪-1-基)-乙氧基]-1H-吲哚-2-基}-吲唑-1-羧酸叔丁酯在85℃下攪拌330mg5-芐氧基-3-[1-叔丁氧羰基-5-(2-氯-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯、442mg碳酸鉀、133mg碘化鉀和596mgN-1-Boc-哌嗪在15mL乙腈中的懸浮液48h。在返回到20℃以后，減壓蒸發反應混合物，然后在乙酸乙酯(15mL)和水(15mL)的混合物中重新處理殘渣。在傾析和用乙酸乙酯(1×15mL)萃取之后，合并有機萃取液，用硫酸鎂干燥，然后減壓蒸發。在二氧化硅(AIT柱子，BPSUP20～40μm，25g二氧化硅；洗脫液環己烷∶乙酸乙酯1∶1v/v)上對如此得到的粗化合物進行色譜提純。合并含有所需化合物的餾分并在減壓下蒸發。將如此得到的化合物溶解于10mL二氯甲烷中，然后用350mL二碳酸二叔丁酯和10mg二甲基氨基吡啶在20℃下處理3h。在減壓下蒸發反應混合物，分離和鑒定220mg5-芐氧基-3-{1-叔丁氧羰基-5-[2-(4-叔丁氧羰基-哌嗪-1-基)-乙氧基]-1H-吲哚-2-基}-吲唑-1-羧酸叔丁酯，無須提純即可使用。
分析LC/MS[M+H]+＝768.39；保留時間4.00min。
步驟III按照如下方法制備3-{1-叔丁氧羰基-5-[2-(4-叔丁氧羰基-哌嗪-1-基)-乙氧基]-1H-吲哚-2-基}-5-羥基-吲唑-1-羧酸叔丁酯在劇烈攪拌的同時放置在80℃下的反應器中放置220mg 5-芐氧基-3-{1-叔丁氧羰基-5-[2-(4-叔丁氧羰基-哌嗪-1-基)-乙氧基]-1H-吲哚-2-基}-吲唑-1-羧酸叔丁酯、108mg甲酸銨和29.8mg鈀在30mL乙醇中的懸浮液。在4h以后，用硅藻土床過濾反應混合物。再使過濾液與108mg甲酸銨和29.8mg鈀反應4h。此時在硅藻土床上過濾反應混合物，在減壓下蒸發，然后在乙酸乙酯(20mL)和飽和碳酸氫鈉溶液(20mL)混合物中重新處理殘渣。在傾析和用乙酸乙酯(2×20mL)萃取之后，合并有機萃取液，用硫酸鎂干燥，然后在減壓下蒸發。
在用微波爐中(90℃)輻照的同時，在38mg甲酸銨和12mg鈀存在下，在30mL乙醇中使得到的化合物(60mg)經歷反應的第三期30min。在硅藻土床上過濾反應混合物，在減壓下蒸發。分離出含有3-{1-叔丁氧羰基-5-[2-(4-叔丁氧羰基-哌嗪-1-基)-乙氧基]-1H-吲哚-2-基}-5-羥基-吲唑-1-羧酸叔丁酯的粗化合物，在下面的步驟中不經提純就將其使用。
分析LC/MS[M+H]+＝678.74；保留時間3.31min。
步驟IV3-{1-叔丁氧羰基-5-[2-(4-叔丁氧羰基-哌嗪-1-基)-乙氧基]-1H-吲哚-2-基}-5-(羥基-甲基-次膦酰氧基)-吲唑-1-羧酸叔丁酯在冰浴中冷卻34mg 3-{1-叔丁氧羰基-5-[2-(4-叔丁氧羰基-哌嗪-1-基)-乙氧基]-1H-吲哚-2-基}-5-羥基-吲唑-1-羧酸叔丁酯在1.5mL二氯甲烷中的溶液。加入16.9mg按照程序E制備的甲基膦酸二(4-硝基苯基)酯和7.6mg 1，8-二氮雜雙環[5.4.0]-十一碳-7-烯在500μL二氯甲烷中的混合物并在20℃下繼續反應3h。用2×3mL飽和碳酸氫鈉溶液，然后用蒸餾水3mL洗滌反應介質。在傾析之后用硫酸鎂干燥有機萃取液，然后在減壓下蒸發。分離出39mg主要含有3-{1-叔丁氧羰基-5-[2-(4-叔丁氧羰基-哌嗪-1-基)-乙氧基]-1H-吲哚-2-基}-5-(羥基-甲基-次膦酰氧基)-吲唑-1-羧酸叔丁酯的混合物，不經提純就將其用于下一步。
分析LC/MS[M+H]+＝756.76；保留時間3.45min。
步驟V甲基膦酸單-{3-[5-(2-哌嗪-1-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-基}酯在20℃下將39mg主要含有3-{1-叔丁氧羰基-5-[2-(4-叔丁氧羰基-哌嗪-1-基)-乙氧基]-1H-吲哚-2-基}-5-(羥基-甲基-次膦酰氧基)-吲唑-1-羧酸叔丁酯的上述混合物在1mL二氯甲烷和200μL三氟乙酸中的溶液攪拌4h，然后在減壓下蒸發反應混合物。用制備LC/MS提純得到的粗化合物，合并含有分子量455化合物的餾分并在減壓下蒸發。分離并鑒定4mg甲基膦酸單-{3-[5-(2-哌嗪-1-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-基}酯分析LC/MS[M+H]+＝456.33；保留時間1.85min。
實施例21和22按照下面的方案，可分4步制備化合物甲基膦酸單-{3-[5-(2-二乙基氨基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-基}酯和甲基膦酸3-[5-(2-二乙基氨基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-基}酯甲酯 實施例21實施例22步驟I制備5-芐氧基-3-[1-叔丁氧羰基-5-(2-二乙基-氨基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯在80℃下加熱含有1.5g按照程序J制備的5-芐氧基-3-[1-叔丁氧羰基-5-(2-氯-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯、1g碳酸鉀、600mg碘化鉀和761μL乙胺在75mL乙腈中的溶液18h。在此時期之后，加入1.5mL乙胺，在80℃下再繼續反應18h。在另外18h之后重新進行此操作，然后在減壓下蒸發反應混合物。在乙酸乙酯(80mL)和水(80mL)的混合物中重新處理得到的棕色油狀物。在傾析和用乙酸乙酯(80mL)萃取之后，合并有機萃取液，用水(100mL)和鹽水(100mL)洗滌，用硫酸鎂干燥，然后在減壓下蒸發。分離出1.15g5-芐氧基-3-[1-叔丁氧羰基-5-(2-二乙基-氨基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯，將其原樣用于下一步。
步驟II制備{2-[2-(5-芐氧基-1H-吲唑-3-基)-1H-吲哚-5-基氧]-乙基}-二乙基胺在20℃下攪拌含有1.15g 5-芐氧基-3-[1-叔丁氧羰基-5-(2-二乙基氨基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯和4mL三氟乙酸在5mL二氯甲烷中的溶液2h。在減壓下蒸發反應混合物，用色譜(NucléodurC18柱子，100-10，250mm×40mm，編號No762020，系列號3051180，批號2023，洗脫液A水/三氟乙酸0.07％，洗脫液B乙腈/三氟乙酸0.07％，組成梯度A/B 95％/5％～5％/95％，流量75mL/min，在52min，檢出300nm)提純如此得到的粗化合物。合并含有所需化合物的餾分并在減壓下蒸發。在乙酸乙酯(20mL)中重新處理該化合物，用硫酸鎂干燥，然后減壓蒸發。分離并鑒定320mg{2-[2-(5-芐氧基-1H-吲唑-3-基)-1H-吲哚-5-基氧]-乙基}-二乙基胺步驟III制備3-[5-(2-二乙基氨基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-醇在75℃下，以5％的功率在在大氣壓下的Synthwave 402微波爐中輻照320mg{2-[2-(5-芐氧基-1H-吲唑-3-基)-1H-吲哚-5-基氧]-乙基}-二乙基胺、32mg 10％的碳載鈀、180mg甲酸銨的懸浮液35min，然后在20％的功率下輻照10min。在硅藻土床上過濾出催化劑，在減壓下蒸發過濾液。在乙酸乙酯(20mL)和飽和碳酸氫鈉溶液(20mL)中重新處理得到的化合物，傾析，用硫酸鎂干燥，然后在減壓下蒸發。分離和鑒定115mg3-[5-(2-二乙基氨基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-醇分析LC/MS[M+H]+＝365.29；保留時間2.33min。
步驟IV制備甲基膦酸單-{3-[5-(2-二乙基-氨基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-基}酯和甲基膦酸3-[5-(2-二乙基-氨基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-基酯甲酯在20℃下攪拌115mg3-[5-(2-二乙基氨基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-醇在3mL二氯甲烷中的懸浮液，同時加入107mg甲基膦酸二(4-硝基苯基)酯(按照程序E制備)和48μL 1，8-二氮雜雙環[5.4.0]-十一碳-7-烯。在此溫度下18h之后，加入在1mL四氫呋喃中的128μL甲醇和50μL 1，8-二氮雜雙環[5.4.0]-十一碳-7-烯并繼續反應4h。在減壓下蒸發反應混合物。分離300mg化合物，用色譜(Nucléodur C18柱子，100-10，250mm×40mm，編號No762020，系列號3051180，批號2023，洗脫液A水/三氟乙酸0.07％，洗脫液B乙腈/三氟乙酸0.07％，組成梯度A/B 95％/5％～5％/95％，流量75mL/min，在52min，檢出300nm)將其提純。
合并含有甲基膦酸單-{3-[5-(2-二乙基-氨基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-基}酯(MM 442)的餾分，并在減壓下蒸發。
合并含有甲基膦酸3-[5-(2-二乙基-氨基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-基酯甲酯(MM 456)的餾分，并在減壓下蒸發。
在500μL甲醇中重新處理如上分離分每一種化合物，然后將其沉積在SCX型柱子(Varian，500mg)上。在沉積之后，首先用甲醇淋洗該柱子，然后用甲醇和2M氨的混合物進行洗脫。在減壓下蒸發流出液。用制備LC/MS提純得到的化合物。
合并含有分子量442化合物的餾分，并在減壓下蒸發。分離出22.9mg甲基膦酸單-{3-[5-(2-二乙基-氨基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-基}酯(實施例21)，用分析LC/MS對其鑒定。
分析LC/MS[M+H]+＝442.18；保留時間2.43min。
合并含有分子量456化合物的餾分，并在減壓下蒸發。分離出12.8mg甲基膦酸3-[5-(2-二乙基-氨基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-基酯甲酯(實施例22)，用LC/MS對其進行鑒定。
分析LC/MS[M+H]+＝456.19；保留時間2.76min。
實施例23制備苯基膦酸乙酯3-(5-甲氧基-1H-吡咯并[3，2-b]吡啶-2-基)-1H-吲唑-5-基酯按照下面的方案，分6步制備此化合物
程序K相當于步驟I～V。
步驟I制備苯基膦酸乙酯3-(5-甲氧基-1H-吡咯并[3，2-b]吡啶-2-基)-1H-吲唑-5-基酯按照在合成中間體A的步驟2中敘述的方法制備1-(5-芐氧基-吲唑-1-基)乙酮。
將1g 1-(5-芐氧基-吲唑-1-基)-乙酮、1.42g甲酸銨和0.59g 10％碳載鈀在乙醇中的懸浮液回流加熱16h。在恢復到20℃之后，在硅藻土床上過濾反應混合物，在減壓下蒸發過濾液。在10mL二異丙基醚中研制如此得到的粗化合物，然后過濾并減壓干燥。分離并鑒定400mg1-(5-羥基-吲唑-1-基)乙酮。
步驟II制備苯基膦酸1-乙酰基-1H-吲唑-5-基酯4-硝基苯基酯在冰浴中冷卻2.36g苯基膦酸二(4-硝基苯基)酯(按照程序E制備)在60mL二氯甲烷中的溶液。在其中加入在40mL二氯甲烷中的1.041g1-(5-芐氧基-吲唑-1-基)乙酮和900mg 1，8-二氮雜雙環[5.4.0]十一碳-7-烯，在20℃下繼續反應2h。用飽和碳酸氫鈉溶液洗滌反應介質，直至使有機相脫色。在傾析之后用硫酸鎂干燥有機萃取液，然后在減壓下蒸發。分離出2.4g苯基膦酸1-乙酰基-1H-吲唑-5-基酯4-硝基苯基酯，不經提純就將其用于下一步。
步驟III制備苯基膦酸1H-吲唑-5-基酯甲酯在20℃下攪拌2.4g苯基膦酸1-乙酰基-1H-吲唑-5-基酯4-硝基苯基酯在30mL被乙醇穩定化的二氯甲烷中的溶液。在其中加入在30mL二氯甲烷中的3.78mL甲醇和836mg 1，8-二氮雜雙環[5.4.0]十一碳-7-烯。在此溫度下繼續反應過夜。在減壓下蒸發反應混合物，然后在二氧化硅(AIT BP-SUP 20～40μm，洗脫液二氯甲烷/甲醇90/10)上用色譜提純如此得到的粗化合物。合并含有所需化合物的餾分，在減壓下蒸發。分離并鑒定980mg苯基膦酸1H-吲唑-5-基酯甲酯分析LC/MS[M+H]+＝289.13；保留時間2.83min。
此化合物被沒有分離的苯基膦酸1H-吲唑-5-基酯乙酯污染。
分析LC/MS[M+H]+＝303.0；保留時間3.01min。
步驟IV制備苯基膦酸3-碘-1H-吲唑-5-基酯甲酯請注意，在此反應的進程中，使用了在步驟III中敘述的含有25％乙酯異構體的原料，這使得也能夠分離出相應的碘衍生物。
在20℃和激烈攪拌下放置980mg被苯基膦酸1H-吲唑-5-基酯乙酯污染的苯基膦酸1H-吲唑-5-基酯甲酯在二甲基甲酰胺中的溶液。在其中加入1.72g碘和381.5mg氫氧化鉀，然后讓其反應16h。在乙酸乙酯(60mL)和飽和硫代硫酸鈉溶液(40mL)的混合物中稀釋反應介質。在20℃下攪拌10min以后，傾析反應介質，用蒸餾水(40mL)洗滌，合并有機萃取液，用硫酸鎂干燥，然后在減壓下蒸發。如此分離出1.08g粗化合物，用色譜(Nucléodur C18柱子，100-10，250mm×40mm，編號No762020，系列號3051181，批號2023，洗脫液A水/三氟乙酸0.07％，洗脫液B乙腈/三氟乙酸0.07％，組成梯度A/B95％/5％～5％/95％，流量75mL/min，在52min)將其提純。
合并含有分子量414化合物的餾分并在減壓下蒸發。分離并鑒定510mg苯基膦酸3-碘-1H-吲唑-5-基酯甲酯。
合并含有分子量428化合物的餾分并在減壓下蒸發。分離并鑒定80mg苯基膦酸3-碘-1H-吲唑-5-基酯乙酯。
步驟V制備5-(乙氧基-苯基-次膦酰氧基)-3-碘-吲唑-1-羧酸叔丁酯在20℃下攪拌80mg苯基膦酸3-碘-1H-吲唑-5-基酯乙酯在2mL二氯甲烷中的溶液。在其中加入40mg二碳酸二叔丁酯和22mg二甲基氨基吡啶，并在20℃下繼續反應16h。在減壓下蒸發反應混合物，分離并鑒定60mg5-(乙氧基-苯基-次膦酰氧基)-3-碘-吲唑-1-羧酸叔丁酯，該化合物原樣使用。
分析LC/MS[M+H]+＝529.06；保留時間4.29min。
步驟VI制備5-甲氧基-吡咯并[3，2-b]吡啶-2-硼酸1-羧酸叔丁酯如在下面所述，分兩步從5-甲氧基-吡咯并[3，2-b]吡啶制備此化合物。
步驟VIa制備5-甲氧基-吡咯并[3，2-b]吡啶-1-羧酸叔丁酯在20℃和磁性攪拌下，在4.50g 5-甲氧基-吡咯并[3，2-b]吡啶(如在Liebigs Ann.Chem.，1988，203-208中所述制備)和10.7g二碳酸二叔丁酯在10mL無水二氯甲烷中的溶液里加入102mg4-二甲基氨基吡啶。在環境溫度下攪拌得到的溶液過夜，然后用75mL水，再用75mL鹽水洗滌反應介質。用硫酸鎂干燥有機萃取液，然后在減壓下蒸發。在二氧化硅上用二氯甲烷洗脫，然后用二氯甲烷和乙酸乙酯90/10的混合物洗脫對如此得到的粗化合物進行色譜提純，得到7.06g呈琥珀色油狀物的5-甲氧基-吡咯并[3，2-b]吡啶-1-羧酸叔丁酯。用NMR對其進行鑒定。
NMR譜1H NMR[300Mhz，(CD3)2SO]δ8.21(d，J＝9Hz，1H)，7.85(d，J＝4Hz，1H)，6.76(d，J＝9Hz，1H)，6.70(d，J＝4Hz，1H)，3.89(s，3H)，1.63(s，9H).
步驟VIb引入硼酸保持在干燥的氮氣流下，在4.66g 5-甲氧基-吡咯并[3，2-b]-吡啶-1-羧酸叔丁酯(如上制備)在85mL無水四氫呋喃中的溶液里分批加入15mL叔丁基鋰在戊烷中的1.5M溶液。在-78℃攪拌如此得到的反應介質40min，然后在2min內加入8mL硼酸三異丙酯溶液(37.7mmol)，然后攪拌反應介質并在-78℃下保持20min。在2.5h內將反應介質加熱到0℃，然后加入50mL水。在20℃下攪拌1h以后，在減壓下蒸發四氫呋喃。加入5N氫氧化銨將得到的水相堿化，然后用乙酸乙酯(30mL)洗滌兩次。將水性萃取液冷卻到0℃，然后用硫酸鉀水溶液處理直至pH值為4。在0℃下攪拌反應介質15min。過濾分離出帶有孔隙的固體，將其干燥得到2.48g白色粉末狀5-甲氧基-吡咯并[3，2-b]吡啶-2-硼酸1-羧酸叔丁酯NMR譜[300Mhz，(CD3)2SO]δ8.28(s，2H)，8.23(d，J＝9Hz，1H)，6.70(d，J＝9Hz，1H)，6.58(s，1H)，3.87(s，3H)，1.60(s，9H).
步驟VII制備苯基膦酸乙酯3-(5-甲氧基-1H-吡咯并[3，2-b]吡啶-2-基)-1H-吲唑-5-基酯在100℃下加熱50mg 5-(乙氧基-苯基-次膦酰氧基)-3-碘-吲唑-1-羧酸叔丁酯、55.3mg 5-甲氧基-吡咯并[3，2-b]吡啶-2-硼酸-1-羧酸叔丁酯、3.78mg1，1’-二(二苯基膦基(phosphino))二茂鐵-氯化鈀(ii)和123.4mg碳酸鈰在800μL二烷水和250μL水的混合物中的懸浮液45min。在恢復到20℃之后，用3mL乙酸乙酯稀釋反應介質，然后用1.5mL蒸餾水洗滌兩次。在傾析以后，用硫酸鎂干燥有機萃取液，然后在減壓下蒸發。用制備LC/MS提純得到的粗化合物。合并含有所需化合物的餾分并在減壓下蒸發。分離并鑒定16.7mg苯基膦酸乙酯3-(5-甲氧基-1H-吡咯并[3，2-b]吡啶-2-基)-1H-吲唑-5-基酯分析LC/MS[M+H]+＝449.17；保留時間3.05min。
實施例24程序L-制備苯基膦酸3-(5-甲氧基-1H-吡咯并[3，2-b]吡啶-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯在反應器中放入由50mg按照程序K得到的3-碘-5-(甲氧基-苯基-次膦酰氧基)吲唑-1-羧酸叔丁酯、3.9mg 1，1’-二(二苯基膦基)二茂鐵-二氯化鈀(ii)、56.81mg 5-甲氧基-吡咯并[3，2-b]吡啶-1-羧酸叔丁酯2-硼酸、126mg碳酸鈰、260μL二烷和813μL蒸餾水，然后在100℃下加熱反應混合物45min。在恢復到20℃以后，用4mL乙酸乙酯稀釋反應介質，然后用2×3mL蒸餾水洗滌。在傾析以后，用硫酸鎂干燥有機相，然后在減壓下蒸發。用制備LC/MS提純得到的粗化合物。合并含有所需化合物的餾分，在減壓下蒸發。
將如此得到的中間體化合物置于在300μL 1M鹽酸二烷中形成溶液，在20℃下攪拌2h，然后在減壓下蒸發反應混合物。用制備LC/MS提純得到的粗化合物。合并含有所需化合物的餾分并在減壓下蒸發。
分離并鑒定3mg苯基膦酸3-(5-甲氧基-1H-吡咯并[3，2-b]吡啶-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯分析LC/MS[M+H]+＝435；保留時間2.95min。
實施例25制備苯基膦酸甲酯3-苯乙烯基-1H-吲唑-5-基酯按照程序L由28.78mg反式-β-苯乙烯硼酸制備此化合物。分離并鑒定3mg苯基膦酸甲酯3-苯乙烯基-1H-吲唑-5-基酯。
分析LC/MS[M+H]+＝391；保留時間3.66min。
實施例26制備苯基膦酸3-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基酯甲酯按照程序L，由24.89mg噻吩-2-硼酸制備此化合物。分離并鑒定3mg苯基膦酸3-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基酯甲酯。
分析LC/MS[M+H]+＝371；保留時間3.41min。
實施例27苯基膦酸3-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基酯甲酯按照程序L，由30mg3-碘-5-(甲氧基-苯基-次膦酰氧基)吲唑-1-羧酸叔丁酯、21.2mg苯并[b]噻吩-2-硼酸、2.23mg 1，1’-二(二苯基膦基)二茂鐵-二氯化鈀(ii)、71mg碳酸鈰在500μL二甲基甲酰胺中制備此化合物。分離0.7mg苯基膦酸3-苯并[b]噻吩-2-基-1H-吲唑-5-基酯甲酯分析LC/MS[M+H]+＝421.18；保留時間3.86min。
實施例28制備甲基-膦酸甲酯3-[5-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-基酯由中間體A分7步制備此化合物。

步驟I制備5-芐氧基-3-[1-叔丁氧羰基-5-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯(程序M)在10g 5-芐氧基-3-碘-吲唑-1-羧酸叔丁酯(中間體A)在156mL二烷中的溶液里相繼加入13g1-(叔丁基-二甲基硅烷氧基)-5-吲哚-2-硼酸、28.9g碳酸鈰、906.5mg 1，1’-二(二苯基膦基)二茂鐵-二氯化鈀(II)與二氯甲烷的絡合物，然后加入51mL蒸餾水。由預先加熱到100℃的油浴加熱反應混合物45min。用水浴將此混合物冷卻到環境溫度。傾析介質。除去下相(大約50mL)在真空下濃縮有機相。將得到的棕色膠狀物溶解于250mL二氯甲烷中，用3×50mL水洗滌有機相。用硫酸鎂和活性炭干燥有機相，然后在濾紙上過濾并在旋轉蒸發器中濃縮。在500g40～63μm的二氧化硅上對反應粗產物進行快速色譜提純，洗脫液是環己烷/二氯甲烷40/60混合物。分離出13.4g5-芐氧基-3-[1-叔丁氧羰基-5-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯步驟II制備5-芐氧基-3-(1-叔丁氧羰基-5-羥基-1H-吲哚-2-基)吲唑-1-羧酸叔丁酯在環境溫度下攪拌13.4g 5-芐氧基-3-[1-叔丁氧羰基-5-(叔丁氧羰基-二甲基-硅烷氧基)-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯和6.15g四丁基氟化銨在140mL無水四氫呋喃中的溶液30min。在真空下蒸發溶劑。用50mL二氯甲烷重新處理反應粗產物。用25mL蒸餾水洗滌有機相兩次。用硫酸鎂干燥有機相。在過濾和真空濃縮之后，在450g40～63μm的二氧化硅上對反應粗產物進行快速色譜提純。用100％的二氯甲烷，然后用二氯甲烷/甲醇98/2，然后用95/5的混合物洗脫。分離出8.54g 5-芐氧基-3-(1-叔丁氧羰基-5-羥基-1H-吲哚-2-基)吲唑-1-羧酸叔丁酯分析LC/MSTr＝4.75min；[M+H]+＝446.34。
步驟III制備5-芐氧基-3-[5-(2-溴-乙氧基)-1-叔丁氧羰基-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯在80℃下(油浴的溫度)，在22mL二氯甲烷中攪拌2.22g 5-芐氧基-3-(1-叔丁氧羰基-5-羥基-1H-吲哚-2-基)-吲唑-1-羧酸叔丁酯、7.8g碳酸鈰48h。在燒結玻璃上過濾反應混合物，用20mL二氯甲烷淋洗固體。在真空下濃縮過濾液。在160g二氧化硅上對反應粗產物進行快速色譜提純。洗脫液是100％的二氯甲烷。分離出2g 5-芐氧基-3-[5-(2-溴-乙氧基)-1-叔丁氧羰基-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯步驟IV制備5-芐氧基-3-[1-叔丁氧羰基-5-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯(程序N)在90mL乙腈中攪拌2.0g 5-芐氧基-3-[5-(2-溴-乙氧基)-1-叔丁氧羰基-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯。加入498mg碘化鉀并在80℃下加熱懸浮液。在7h20min以后，逐次加入如下試劑394μL嗎啉、1.24g碳酸鉀、150mg碘化鉀。在80℃下加熱懸浮液過夜。過濾出不溶物并在真空下濃縮過濾液。在50mL二氯甲烷中重新處理反應粗產物。用2×25mL蒸餾水洗滌有機相。用硫酸鎂干燥有機相并過濾。在旋轉蒸發器中蒸發溶劑。分離出1.90g5-芐氧基-3-[1-叔丁氧羰基-5-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯。
分析LC/MSTr＝3.99min；[M+H]+＝669.43。
步驟V制備5-芐氧基-3-[5-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑在環境溫度下，在6mL的4M鹽酸在二烷中的溶液里攪拌1.0g 5-芐氧基-3-[1-叔丁氧羰基-5-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯16h。在燒結玻璃上過濾產物，用二烷淋洗。回收692.4mg5-芐氧基-3-[5-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑。
分析LC/MSTr＝3.05min；[M+H]+＝469.34。
步驟VI制備3-[5-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-醇在55mL無水乙醇中溶解1.12g 5-芐氧基-3-[5-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑，然后相繼加入424mg碳載鈀、587mg甲酸銨、227μL三乙胺。在67℃(懸浮液內溫)下攪拌反應介質。觀察到釋放出大量氣體。在攪拌1h以后，在濾紙上過濾介質，用無水乙醇淋洗催化劑。在真空下濃縮過濾液。回收558mg3-[5-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-醇。
分析LC/MSTr＝2.29min；[M+H]+＝379.37。
步驟VII制備甲基膦酸甲酯3-[5-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-基酯在環境溫度下攪拌170mg甲基膦酸二(4-硝基苯基)酯(按照程序E制備)和189.7mg 3-[5-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-醇在17mL二氯甲烷(用戊烯穩定化)中的懸浮液。在10min內滴加在500μL二氯甲烷中的75μL DBU的溶液。保持一夜攪拌。在同時加入204μL甲醇和75μL DBU。攪拌此溶液24h。在真空下濃縮反應介質，然后用25mL乙酸乙酯重新處理粗產物，再用4×25mL蒸餾水洗滌。用硫酸鎂干燥有機相，過濾并在真空下濃縮。在5g 40～63μm的二氧化硅上對反應粗產物進行快速色譜提純，洗脫液二氯甲烷/甲醇98/2，然后是95/5。回收95mg甲基膦酸甲酯3-[5-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-基酯。
分析LC/MSTr＝2.25min；[M+H]+＝471.11。
實施例29制備甲基膦酸3-[6-(2-二乙基氨基乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-基酯甲酯按照如下方案7分10步制備此化合物 方案7步驟I制備6-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-1H-吲哚在環境溫度下攪拌3.52g 6-羥基吲哚、4.78g叔丁基二甲基氯硅烷、4.5g咪唑在16mL二甲基甲酰胺中的溶液過夜。用乙酸乙酯稀釋反應介質，然后用2×50mL蒸餾水洗滌有機相。用硫酸鎂干燥有機相，過濾并在旋轉蒸發器中蒸出溶劑。回收6.5g6-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-1H-吲哚。
分析LC/MSTr＝4.55min；[M+H]+＝248.30。
步驟II制備6-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-吲哚-1-羧酸叔丁酯在環境溫度下攪拌6.5g 6-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-1H-吲哚、9.23g二碳酸二叔丁酯、646mg4-二甲基氨基吡啶在65mL二氯甲烷中的溶液。在攪拌4h以后，在旋轉蒸發器中蒸出溶劑，并在35～70μm的二氧化硅上對反應粗產物進行快速色譜提純，洗脫液環己烷。分離出9.20g黃色油狀物的6-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-吲哚-1-羧酸叔丁酯。
分析LC/MSTr＝6.0min；[M+H]+＝348.3。
步驟III制備6-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-吲哚-1-羧酸叔丁基-3-硼酸用丙酮干冰浴將8.20g 6-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-吲哚-1-羧酸叔丁酯在120mL無水四氫呋喃中的溶液冷卻到-78℃。在40min內滴加19mL叔丁基鋰在戊烷中的1.5M溶液。在-78℃攪拌溶液30min。此時加入5.3mL硼酸三甲酯。在將介質重新加熱到0℃以后，在此溫度下攪拌溶液2h。加入75mL飽和氯化銨水溶液和200mL乙醚。在環境溫度下攪拌介質20min。在用60mL 10％的硫酸氫鈉水溶液和2mL濃硫酸將介質酸化之后，傾析有機相并先后用120mL蒸餾水和120mL飽和氯化鈉水溶液洗滌。在用硫酸鎂干燥并過濾后蒸出溶劑。在用環己烷洗滌得到的固體并在燒結玻璃上弄干。回收5.79g6-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-吲哚-1-羧酸叔丁基-3-硼酸。
步驟IV制備5-芐氧基-3-[1-叔丁氧羰基-6-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯按照程序M，從5.12g中間體A、5.79g 6-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-吲哚-1-羧酸叔丁基-3-硼酸、466mg[1，1’-二(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀(II)與二氯甲烷的絡合物、14.82g碳酸鈰在水(30mL)和二烷(70mL)混合物中的懸浮液制備此化合物。在105℃加熱反應介質1h30min。在處理之后，在35～70μm的二氧化硅上對反應粗產物進行快速色譜提純，洗脫液環己烷。回收5.56g5-芐氧基-3-[1-叔丁氧羰基-6-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯。
步驟V制備5-芐氧基-3-(1-叔丁氧羰基-6-羥基-1H-吲哚-2-基)-吲唑-1-羧酸叔丁酯在環境溫度下攪拌1.50g 5-芐氧基-3-[1-叔丁氧羰基-6-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯在35mL四氫呋喃和770mg水合四丁基氟化銨中的溶液。在攪拌1h30min之后，用二氯甲烷稀釋介質，然后用蒸餾水洗滌有機相。在用硫酸鎂干燥之后進行過濾，在旋轉蒸發器中真空蒸出溶劑。回收1.05g5-芐氧基-3-(1-叔丁氧羰基-6-羥基-1H-吲哚-2-基)-吲唑-1-羧酸叔丁酯。
分析LC/MSTr＝4.73min；[M+H]+＝556.06。
步驟VI制備5-芐氧基-3-[6-(2-溴-乙氧基)-1-叔丁氧羰基-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯在環境溫度下攪拌1.05g 5-芐氧基-3-(1-叔丁氧羰基-6-羥基-1H-吲哚-2-基)-吲唑-1-羧酸叔丁酯在10.4mL二溴乙烷中的溶液。加入1.85g碳酸鈰并在80℃加熱介質24h。蒸出溶劑并用水/乙酸乙酯的混合物重新處理粗產物。用硫酸鎂干燥有機相。在過濾之后，在旋轉蒸發器中蒸出溶劑。在50g二氧化硅的柱子上，通過梯度的環己烷/乙酸乙酯95/5～65/35在60min內對反應粗產物進行快速色譜提純。回收1.23g5-芐氧基-3-[6-(2-溴-乙氧基)-1-叔丁氧羰基-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯。
分析LC/MSTr＝5.43min；[M+H]+＝664.04。
步驟VII按照程序N，從1.23g 5-芐氧基-3-[6-(2-溴乙氧基)-1-叔丁氧羰基-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯、50mL乙腈、401mg碘化鉀、204mg二乙胺和770mg碳酸鈰制備化合物5-芐氧基-3-[1-叔丁氧羰基-6-(2-二乙基-氨基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯。在處理之后，在20g二氧化硅柱子上對反應粗產物進行色譜提純；洗脫液二氯甲烷/甲醇98/2，95/5，92/8。回收390mg 5-芐氧基-3-[1-叔丁氧羰基-6-(2-二乙基氨基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯。
分析LC/MSTr＝4.62min；[M+H]+＝655.45。
步驟VIII按照如下方法制備化合物{2-[2-(5-芐氧基-1H-吲唑-3-基)-1H-吲哚-6-基氧基]-乙基}-二乙胺在環境溫度下攪拌390mg 5-芐氧基-3-[1-叔丁氧羰基-6-(2-二乙基氨基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-吲唑-1-羧酸叔丁酯在5mL二氯甲烷和2mL三氟乙酸中的溶液20h。在旋轉蒸發器中真空蒸出溶劑。回收480mg三氟乙酸鹽形式的{2-[2-(5-芐氧基-1H-吲唑-3-基)-1H-吲哚-6-基氧基]-乙基}-二乙胺。
分析LC/MSTr＝3.87min；[M+H]+＝455.51。
步驟IX按照如下方法制備化合物3-[6-(2-二乙基氨基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-醇在100mg碳載鈀和1.1g甲酸銨存在下，在90℃的大氣壓力下的微波爐中加熱990mg{2-[2-(5-芐氧基-1H-吲唑-3-基)-1H-吲哚-6-基氧基]-乙基}-二乙胺在15mL無水乙醇中的溶液30min。在硅藻土上過濾反應粗產物，用無水乙醇淋洗催化劑，在真空下濃縮過濾液。在80mL乙酸乙酯中重新處理反應粗產物，用2×50mL的飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌。在用硫酸鎂干燥之后，將有機相濃縮至干。用二氯甲烷和異丙基醚洗滌得到的固體。回收280mg3-[6-(2-二乙基氨基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-醇。
步驟X如下所述制備化合物甲基膦酸3-[6-(2-二乙基氨基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-基酯甲酯在環境溫度下攪拌100mg3[6-(2-二乙基氨基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-醇在4mL二氯甲烷和93mg甲基膦酸二-(4-硝基苯基)酯(按照程序E制備)中的溶液。滴加41μL 1，8-二氮雜雙環[5.4.0]-十一碳-7-烯(DBU)在1mL二氯甲烷中的溶液。在環境溫度下攪拌溶液過夜。當加完41μL DBU時然后加入115μL甲醇。在攪拌4h15min之后重復此操作。在環境溫度下再攪拌1h以后，蒸發出溶劑，并在25g二氧化硅柱子上對粗產物進行快速色譜提純，洗脫液是二氯甲烷/甲醇90/10逐步到60/40。濃縮得到的餾分并用制備LC/MS提純。回收30mg無色油狀物甲基膦酸3-[6-(2-二乙基氨基-乙氧基)-1H-吲哚-2-基]-1H-吲唑-5-基酯甲酯。
NMR譜0.99～1.18(m，6H)；1.70(d，J＝17.0Hz，3H)；2.63(m寬，4H)；2.85(m寬，2H)；3.78(d，J＝11.0Hz，3H)；4.05(m寬，2H)；6.78(d寬，J＝9.0Hz，1H)；6.97(m寬，2H)；7.30(d寬，J＝9.0Hz，1H)；7.48(d，J＝9.0Hz，1H)；7.60(d，J＝9.0Hz，1H)；7.89(m寬，1H)；11.4(m寬，1H)；13.3(s寬，1H).
實施例30制備乙基膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯按照程序E，從528mg乙基膦酰二氯、1g對硝基苯酚、345mg氫化鈉(在油中的50％)和10mL四氫呋喃制備中間體乙基膦酸二(硝基苯基)酯。回收1.29g乙基膦酸二(硝基苯基)酯。
按照程序F，從282.5mg乙基膦酸二(硝基苯基)、200mg 3-(1H-吲哚-2-基)-H-吲唑-5-醇(中間體B)在10mL二氯甲烷中的溶液、120μL 1，8-二氮雜雙環[5.4.0]-十一碳-7-烯(DBU)制備化合物乙基膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯。在環境溫度下7h以后加入120μL DBU和144.5μL甲醇，并讓其在環境溫度下過夜。在濃縮之后，用50g二氧化硅柱子對粗產物進行色譜提純。洗脫液環己烷/乙酸乙酯9/1逐漸到乙酸乙酯/甲醇9/1。濃縮含有所需化合物的餾分得到固體，用乙酸乙酯然后用乙醚洗滌，回收83mg乙基膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯。
在400MHz下在溶劑二甲基亞砜中用BRUKER AVANCE DRX-400上進行1H核磁共振的化學位移(δ單位ppm)譜，參考d6(DMSO-d6)在2.50ppm1.17(td，J＝7.0和20.0Hz，3H)；1.95～2.07(m，2H)；3.77(d，J＝11.0Hz，3H)；6.98～7.07(m，2H)；7.15(t寬，J＝8.0Hz，1H)；7.33(d寬，J＝8.0Hz，1H)；7.46(d寬，J＝8.0Hz，1H)；7.58～7.65(m，2H)；7.92(s寬，1H)；11.6(m寬，1H)；13.45(m展開，1H).
實施例31制備甲基硫代膦酸O-[3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基]酯O-甲酯按照程序E，從536mg甲基硫代膦酰二氯、345mg氫化鈉(油中的50％)、1g對硝基苯酚、10mL四氫呋喃制備中間體甲基硫代膦酸O，O-二(4-硝基苯基)酯。回收1.19g所需化合物。
按照程序F，從200mg 3-(1H-吲哚-2-基)-H-吲唑-5-醇(中間體B)和284mg甲基硫代膦酸O，O-二(4-硝基苯基)酯在6mL二氯甲烷(用戊烯穩定化)中的溶液，在其中加入120μL 1，8-二氮雜雙環[5.4.0]-十一碳-7-烯(DBU)在1mL二氯甲烷中的溶液來制備化合物甲基硫代膦酸O-[3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基]酯O-甲酯。在環境溫度下攪拌4h30min以后，加入325μL甲醇和120μL DBU在1mL二氯甲烷中的溶液。在環境溫度下過夜之后，蒸出溶劑，用35～70μm的二氧化硅對粗產物進行快速色譜提純，洗脫液環己烷/乙酸乙酯90/10直至50/50。濃縮得到的餾分并用制備LC/MS提純，回收47.7mg甲基硫代膦酸O-[3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基]酯O-甲酯。
在400MHz下在溶劑二甲基亞砜中用BRUKER AVANCE DRX-400上進行1H核磁共振的化學位移(δ單位ppm)譜，參考d6(DMSO-d6)在2.50ppm2.11(d，J＝15.0Hz，3H)；3.81(d，J＝14.0Hz，3H)；7.02(t寬，J＝9.0Hz，1H)；7.07～7.14(m，2H)；7.28(d寬，J＝9.0Hz，1H)；7.44(d寬，J＝9.0Hz，1H)；7.58～7.65(m，2H)；7.49(m，1H)；11.6(m寬，1H)；13.35(s寬，1H).
實施例32制備環己基膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯 按照程序E，從722mg環己基膦酰二氯、1g對硝基苯酚、345mg氫化鈉(油中的50％)和10mL四氫呋喃制備中間體環己基膦酸二(硝基苯基)酯。回收1.47g所需化合物。
收率＝定量按照程序F，從200mg 3-(1H-吲哚-2-基)-H-吲唑-5-醇(中間體B)和325mg環己基膦酸二(硝基苯基)酯在6mL二氯甲烷(用戊烯穩定化)中的溶液，在其中加入120μL 1，8-二氮雜雙環[5.4.0]-十一碳-7-烯(DBU)在1mL二氯甲烷中的溶液來制備化合物環己基膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯。在環境溫度下攪拌4h30min之后，加入325μL甲醇在1mL二氯甲烷中的溶液。在環境溫度下過夜之后蒸出溶劑，并在35～70μm二氧化硅上對粗產物進行快速色譜提純，洗脫液環己烷/乙酸乙酯90/10直至50/50。濃縮得到的餾分并用制備LC/MS提純，回收64.5mg環己基膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯甲酯。
NMR譜化學位移(δ單位ppm)-在溶劑二甲基亞砜中-d6(DMSO)在2.50ppm1.20～1.50(m，6H)；1.62～1.83(m，3H)；1.93～2.15(m，2H)；3.75(d，J＝11.0Hz，3H)；6.96～7.05(m，2H)；7.11(t寬，J＝8.0Hz，1H)；7.31(d寬，J＝9.0Hz，1H)；7.45(d寬，J＝9.0Hz，1H)；7.59～7.64(m，2H)；7.40(m，1H)；11.6(m寬，1H)；13.5(m展開，1H).
實施例33制備化合物苯基膦酸單-[3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基]酯 為了制備化合物[3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基甲基]-苯基-次膦酸N-乙基酰胺，在環境溫度下攪拌150mg苯基膦酸3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基酯4-硝基苯基酯(按照程序E制備)和1.5mL二乙胺(在四氫呋喃中的2M溶液)在二氯甲烷(用戊烯穩定化)中的溶液。加入44μL 1，8-二氮雜雙環[5.4.0]-十一碳-7-烯(DBU)并在環境溫度下攪拌介質過夜。在旋轉蒸發器中蒸出溶劑，并用制備LC/MS提純反應粗產物，以分離質量[M+H]+＝390與所需產物不符合的化合物。回收23mg灰色固體，被鑒定為苯基膦酸單-[3-(1H-吲哚-2-基)-1H-吲唑-5-基]酯分析LC/MSTr＝2.72min；[M+H]+＝390.27NMR譜化學位移(δ單位ppm)-在溶劑二甲基亞砜中-d6(DMSO)在2.50ppm對于混合物中的主要產物(70％)，具有如下譜線6.82(s寬，1H)；7.02(t寬，J＝8.5Hz，1H)；7.11(t寬，J＝8.5Hz，1H)；7.21(d寬，J＝9.0Hz，1H)；7.43(d寬，J＝9.0Hz，1H)；6.90～7.62(m，5H)；7.76(s寬，1H)；7.82(dd寬，J＝8.5和12.5Hz，2H)；11.55(m寬，1H)；13.3(s寬，1H).
在生物化學中的實驗操作步驟1.FAK通過使用時間分辨的(résolue dans le temps)熒光(HTRF)測試測定對酶自動磷酸化的抑制來確定化合物對FAK的抑制活性。
人類FAK的完全cDNA，其N-端基的標志是組氨酸，在桿狀病毒的表達載體pFastBacHTc中克隆此DNA。將蛋白質表達并以大約70％的均勻度(homogénéité)提純。
在37℃下，在50mM pH值＝7.5的Hepes緩沖液、5％的甘油、0.03％的Triton x-100、50mM的NaCl、1mM的DTT、5mM的MgCl2、5μM的ATP、最后1％的DMSO當中，用不同濃度的待測試化合物培養酶(4.6μg/mL)10min來測定激酶的活性。加入320mM的EDTA來終止酶反應，在4℃下，通過在緩沖液中加入用XL665標記的抗組氨酸抗體和與銪穴合物(Eu-K)結合的酪氨酸磷特異性單克隆抗體，在含有0.8mM KF、0.2％BSA的pH值＝7.5的100mM Hepes緩沖液中進行標記過夜。在G.Mathis等人的Anticancer Research，1997，17，3011-3014中得到兩種熒光團的特征。在被激發的銪穴合物向XL665受體之間的能量傳遞正比于FAK的自動磷酸化程度。在PackardDiscovery平板計數器中測量XL-665特定長壽命的信號。全部實驗都以兩個實例進行，計算出兩次實驗的平均值。用本發明的化合物抑制FAK自動磷酸化活性的效果，以相對于對照組的抑制百分數來表示，對照組的活性是在沒有測試化合物存在的情況下測試的。為了計算出抑制的％，考慮了比值[在665nm的信號/在620nm的信號]。
2.KDR使用閃爍技術(96孔平板，NEN)，在生體外對由酶KDR使底物磷酸化的測試中測定化合物的抑制劑效果。
在以在桿狀病毒的表達載體pFastBac中融合GST的形式克隆人類KDR酶的胞質區。在SF21細胞中表達此蛋白質，并以大約60％的均勻度進行提純。
在10mM MgCl2、100μM Na3VO4、1mM NaF存在下，在pH值＝7.2的20mM的MOPS、10mM的氯化鎂、10mM的MnCl2、1mM的DTT、2.5mM的EGTA、10mM的b-甘油磷酸酯中測定KDR的激酶活性。在4℃下在70μL含有100ngKDR酶的激酶緩沖液中加入10μL化合物。加入20μL含有2μg底物(以融合GST蛋白質的形式表達的PLCγ的SH2-SH3片段)、2μCiγ33P[ATP]和2μM冷ATP的溶液開始反應。在37℃下培養1h以后，加入1體積(100μL)的200mMEDTA終止反應。去掉培養緩沖液，用300μL PBS洗滌孔3次。使用Top Count NXT(Packard)放射性計數器在每個孔中測量放射性。
在含有放射性ATP和只含底物的4個不同孔中，通過測量放射性來確定本底噪音。
在含有各種試劑(γ33P-[ATP]、KDR和底物PLCγ)但不含化合物的4個不同孔中測定對照的總活性。
用本發明的化合物對KDR活性的抑制表示為對沒有化合物的情況下測定的對照組活性抑制的百分比。
化合物SU5614(Calbiochem)(1μM)作為抑制的對照組包括在每個板中。
3.Aurora 2通過使用螯合鎳的放射性閃爍測試來確定化合物對激酶Aurora 2的抑制效果。
完全重組的Aurora 2酶，其N-端基是被組氨酸標記的，在E.coli中表達此酶，并提純直至接近均勻的質量。
在E.coli中表達NuMA(與有絲分裂器相連的核蛋白)的C-端基片段(Q1687-H2101)，其N-端基是由組氨酸標記的，在螯合鎳上用色譜對其提純，并在激酶Aurora 2測試中用作底物。
為了測定激酶的活性，在添加了10vol％甘油和0.05wt/vol％的NP40的緩沖液(50mM Tris-HCl、pH＝7.5、50mM的氯化鈉、10mM氯化鎂)中，在PD10Pharmacia柱子上通過色譜使底物NuMA平衡。
通過使用螯合鎳(New England Nuclear，型號SMP 107)的閃爍測試來測定Aurora 2的激酶活性。每個孔裝有100μL如下的溶液0.02μM的Aurora 2、0.5μM的底物NuMA、1μM的ATP加入0.5μCi的ATP-[33P]。在37℃下培養溶液30min。然后除去測試的緩沖液，再用300μL激酶緩沖液淋洗孔兩次。借助于Packard型號TopCount NXT的計數器測量每個孔的放射性。
從通過在裝有只含包括與其它試樣同樣處理的緩沖激酶的放射性ATP的孔中的兩次實驗測定的放射性減去本底噪音。
通過兩次測量全部測試物(ATP、Aurora 2和底物NuMA)但不合測試化合物的混合物中的放射性得到對照組的活性。
用本發明的化合物對Aurora 2活性的抑制效果用對沒有測試化合物的對照組活性抑制的百分比來表示。在每個板中加入星形胞菌素(staurosporin)作為抑制的對照。
4.CDK2/細胞周期蛋白E用IMAC(固定金屬親合性色譜)提純CDK2/細胞周期蛋白E-(His)6絡合物使用兩種分別帶有對CDK2和細胞周期蛋白E(后者在C-端基上帶有六-組氨酸的標記)人類編碼序列的重組桿狀病毒，用來對昆蟲細胞Sf21進行協同感染。在開始協同感染之后2～3天，通過離心收集這些細胞，然后保存在-40℃下直至使用。在使細胞解凍和機械溶解之后，用在鎳上的親合性色譜(IMAC)提純上清液中存在的絡合物并將其保存在-80℃。
在96孔規格的板上進行CDK2/細胞周期蛋白E的閃爍板試驗使用涂有鏈酶抗生物素(streptavidine)的96孔規格板來測定化合物對CDK2/細胞周期蛋白E激酶的活性。
為了進行此試驗，將生物素化的肽底物，即蛋白質片段pRb，(生物素酰基-SACPLNLPLQNNHTAADMYLSPVRSPKKKGSTTROH)以1mM的濃度溶解于激酶緩沖液(HEPES/NaOH 50mM、NaCl 1mM、MgCl25mM，pH值7.5)中，以構成在-20℃下以110μL一份的形式保存的基礎溶液。試驗這一天，將一份此溶液解凍并在含有1mM的二硫蘇糖醇的激酶緩沖液中稀釋，立即加入到緩沖液中，得到14.3μM的濃度。將70μL此溶液加入到閃爍板的每個孔中，得到最終的底物濃度為10μM，此時酶反應導致反應介質的最終體積為100μL(參見下面)。
在分離管中，在DMSO中從濃度10mM的基礎溶液制備具有不同濃度的抑制劑(本發明的化合物)的中間稀釋液。如此將其稀釋到1000μM、333.3μM、111.1μM、37.03μM、12.35μM、4.11μM和1.37μM。將這些溶液中每一種1μL(或對于對照組是1μL DMSO)轉移到測試板的孔中。
然后在每個孔中加入19μL三磷酸腺苷(ATP)和ATPy33P混合物在ATP總濃度為5.26μM，33P的濃度為52.6μCi/mL的激酶緩沖液中的溶液。每個孔中加入10μL CDK2/細胞周期蛋白E在含有1mM二硫蘇糖醇(或對于反應空白是10μL含有1mM二硫蘇糖醇的激酶緩沖液)激酶緩沖液中的200nM溶液來激發酶反應。
在加入每一種試劑之后，每個孔的最終體積是100μL，底物的最終濃度是10μM，抑制劑的最終濃度是10μM、3.33μM、1.11μM、0.37μM、0.123μM、0.041μM和0.014μM(按照中間稀釋液濃度不同)，ATP的最終濃度是1μM，33P的最終量是1μCi/孔，CDK2/細胞周期蛋白E絡合物的最終濃度是20nM。
在加入各種試劑之后，在650rpm的軌道攪拌下于30℃下培養測試板。
當培養結束時，每個孔用300μL的PBS(磷酸鹽緩沖鹽水，pH值＝7.4，沒有Ca和Mg，編號10010-015，Gibco BRL)洗滌3次。使用Packard Topcount.NXT設備通過閃爍計數對加入到肽中的33P進行定量。通過測定能夠將酶的活性降低50％的抑制劑濃度(Cl50)來評價本發明產物的抑制活性。
5.Tie2使用從作為模型的人胎盤中分離的cDNA，通過PCR方法產生與胞內區776-1124的氨基酸相應的人類Tie2編碼序列。將此序列引入呈融合GST蛋白質形式的桿狀病毒的表達載體pFastBacGT中。
在提純到大約80％均勻度的GST-Tie 2存在下，在通過Tie 2使PLC磷酸化的測試中確定分子的抑制劑效果。底物由以融合GST形式表達的PLC的SH2-SH3片段構成。
在含有10mM的MgCl2、10mM的MnCl2、1mM的DTT、10mM的甘油磷酸酯的20mM pH值7.2的MOPS緩沖液中測定Tie2的激酶活性。在保持在冰中的96孔閃爍板中，每個孔放入由70μL含有100ngGST-Tie 2酶的激酶緩沖液構成的反應混合物。然后加入10μL在DMSO稀釋到最大濃度10％的待測試分子。對于給定的濃度，每一次測試進行4次試驗。通過加入20μL含有2μg GST-PLC、2μM冷ATP和1μCi33P[ATP]的溶液引發反應。在37℃下培養1h以后，加入200mM的一個體積(100μL)的EDTA使反應終止。在除去培養緩沖液之后，孔用300μL PBS洗滌3次。用MicroBeta 1450 Wallac測量放射性。
計算出Tie2活性的抑制能力，表示為相對于在沒有化合物的情況下測定的對照組活性的抑制能力的百分數。
按照本發明實施例的產物一般對各種激酶都具有活性，特別是對Tie 2和Aurora-2，據估計抑制激酶活性50％的濃度為3～500nM。
權利要求
1.如下通式(I)的產物 其中-W表示選自共價鍵或O的基團；-X表示共價鍵、基團-C＝O-NRa-、NRa-C＝O、-(CH2)n-、-CH＝CH-、-C≡C-、-NRa-、S、O、-SO2-、-SO、-CO、-COO，其中Ra表示H或基團(C1～C4)烷基，其可任選與R1形成環，而且其中n＝0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12；-R1表示H(除了當X＝-SO2-、-SO-時)、烷基、環烷基、芳基、雜芳基；其中R1可任選被取代；-R和R2相同或不同，表示H或選自烷基、環烷基、雜環烷基、芳基、雜芳基、羥基、烷氧基和芳氧基的基團，其中R和R2任選被取代；-Y表示共價鍵或選自-C＝O-NRa-、-C＝O-O-、-C＝O-、-(CH2)n-、-SO2-的基團，其中Ra選自H、(C1～C4)烷基和與R3相連接以形成環的(C1～C4)烷基；-R3選自H(除了當Y是-C＝O-O-或-SO2-時)、烷基、環烷基、芳基和雜芳基；R3可任選被取代；-R4、R6和R7相同或不同，可獨立地選自H、鹵素、(C1～C4)烷基、(C1～C4)烷氧基、氰基、-N(Rb)Rc、-C＝O-N(Rb)Rc、-N(Rb)-CO-Rc-，其中Rb和Rc獨立地選自H、(C1～C4)烷基和(C3～C6)環烷基；只是不包括如下化合物
2.按照權利要求1的產物，其特征在于W是O。
3.按照前面各項權利要求中任何一項的產物，其特征在于，該芳基和雜芳基獨立地選自(i)含有0～4個選自O、N和S的雜原子的單環基團，和(ii)含有如下成分的稠合雙環基團(a)含有5、6、7或8個鏈節并含有0～4個選自O、N和S的雜原子的單環基團，此基團與下面的(b)稠合(b)含有5或6個鏈節并含有0～3個選自O、N和S的雜原子的另外的環。
4.按照權利要求3的產物，其特征在于，該芳基或雜芳基獨立地選自苯基、吡啶基、嘧啶基、三嗪基、吡咯基、咪唑基、噻唑基、呋喃基、噻吩基、吲哚基、吲唑基、氮雜吲唑基、異苯并呋喃基、異苯并噻吩基、苯并咪唑基、苯并唑基、苯并噻唑基、芳基亞乙烯基、芳基酰胺基、芳基甲酰胺基、芳烷基胺、喹啉基、異喹啉基、噌啉基、喹唑啉基、萘啶基、三唑基或四唑基。
5.按照權利要求4的產物，其特征在于，該芳基或雜芳基獨立地選自苯基、吡咯基、任選取代的吲哚基和芳基亞乙烯基。
6.按照權利要求1的產物，其中X表示共價鍵，R1表示雜環基，特別是吲哚基。
7.按照權利要求1的產物，其中R2表示(C1～C4)烷基。
8.按照權利要求1的產物，其中Y是鍵，R3是H。
9.按照前面各項權利要求中之一項的產物在人類治療方面的應用。
10.按照權利要求9的產物，在用來治療與出現癌相關的激酶比如Tie2、Aurora-2的不規律有關的疾病的應用。
11.作為藥物的如下通式(I)的產物 其中-W表示選自共價鍵或O的基團；-X表示共價鍵、基團-C＝O-NRa-、NRa-C＝O、-(CH2)n-、-CH＝CH-、-C≡C-、-NRa-、S、O、-SO2-、-SO、-CO、-COO，其中Ra表示H或基團(C1～C4)烷基，其可任選與R1形成環，而且其中n選自區間
，包括兩個端值；-R1表示H(除了當X＝-SO2-、-SO-時)、烷基、環烷基、芳基、雜芳基；其中R1可任選被取代；-R和R2相同或不同，表示H或選自烷基、環烷基、芳基、雜芳基、羥基、烷氧基和芳氧基的基團，其中R和R2任選被取代；-Y表示共價鍵或選自-C＝O-NRa-、-C＝O-O-、-C＝O-、-(CH2)n-、-SO2-的基團，其中Ra選自H、(C1～C4)烷基和與R3相連接以形成環 的(C1～C4)烷基；-R3選自H(除了當Y是C＝O-O或SO2時)、烷基、環烷基、芳基和雜芳基；R3可任選被取代；-R4、R6和R7相同或不同，可獨立地選自H、鹵素、(C1～C4)烷基、(C1～C4)烷氧基、氰基、-N(Rb)Rc、-C＝O-N(Rb)Rc、-N(Rb)-CO-Rc-，其中Rb和Rc獨立地選自H、(C1～C4)烷基和(C3～C6)環烷基。
全文摘要
本發明涉及新型化合物，特別涉及新型有機磷吲唑衍生物，涉及含有該化合物的組合物及其作為用于治療癌癥的藥物方面的應用。
文檔編號C07F9/44GK1894264SQ200480037695
公開日2007年1月10日 申請日期2004年12月15日 優先權日2003年12月17日
發明者M·－P·謝里耶, F·克萊爾, A·科梅康, P·馬耶, H·米努瓦, B·菲洛歇－羅梅 申請人:艾文蒂斯藥品公司