專利名稱：野生蘋果黃酮的提取方法
技術領域：
本發明涉及野生蘋果黃酮的提取方法。
背景技術：
野生蘋果生物黃酮主要為兒茶素、表兒茶素、原花青素等黃烷-3醇結構的低聚及高聚黃酮類化合物，作為一種天然存在的強效抗氧化劑，具有顯著清除人體內自由基功能，醫學研究證明人類有70多種疾病與自由基有關，如心血管類、癌癥、類風濕、早衰等，現代藥理學研究發現，具有黃烷-3醇結構的黃酮還具有顯著的降低低密度脂蛋白的作用。槲皮素作為蘋果多酚中的主要物質，藥理學研究具有的功效。其中根皮素和根皮甙具有平緩降血壓的作用。
從蘋果中提取高含量的蘋果總黃酮的研究還沒有報導，處于野生狀態的蘋果由于口味太差(苦，澀)，還沒有人去研究、開發，通過研究發現野生蘋果中黃酮類成分是產生苦澀味的主要成分，其原料中黃酮類化合物的含量是普通蘋果(山東煙臺紅富士)的8倍，蘋果皮中的4倍。
發明內容
本發明的目的是提供一種以野生蘋果為原料，進行蘋果黃酮的提取方法。
本發明的野生蘋果黃酮的提取方法，包括以下步驟1)將野生蘋果原料用壓榨機壓榨，過濾得到澄清蘋果汁；2)將壓榨后的皮渣用濃度為30～99％的C1～C6低級醇的水溶液進行提取，提取液在負壓0.70～1.0大氣壓下減壓濃縮回收醇，過濾得到澄清提取液；3)將步驟1)和2)所得的澄清液合并，用大孔樹脂的吸附柱進行吸附；4)用濃度為10～100％的C1～C6低級醇或其混合液，或其水溶液或其混合物的水溶液進行解吸附；5)將解吸附的溶液，在負壓0.70～1.0大氣壓下回收溶劑，得到野生蘋果黃酮。
綜合考慮工業化效率和溶劑使用量兩個因素，通常，用大孔樹脂進行吸附時，使提取液的流速為每小時0.5～5倍樹酯體積，解吸附時解吸附的流速為每小時0.5～4倍樹酯體積。
為了達到工業化高效率批量生產，一般使減壓濃縮的溫度為25～100攝氏度，溫度低于25攝氏度濃縮速度太慢，溫度高于100攝氏度，對成分破壞太大，會導致成品含量不能夠達到70％以上。
本發明中，大孔樹脂可選用聚苯乙烯與功能基團交聯的樹脂，如型號為Diaion HP 20-21的大孔樹脂。C1～C6低級醇可選自甲醇、乙醇、丙醇或正丁醇等。
試驗表明，以采摘不成熟的野生蘋果為好，可采摘各個生長階段的果實，重量為5克、10克、20克、50克、100克、200克、300克的野生蘋果。在對蘋果進行壓榨不破碎比破碎效果好，因為在對蘋果進行破碎過程中，蘋果處于和空氣充分接觸中，容易使蘋果中的抗氧化的黃酮類物質被氧化，從而降低成品的抗氧化活性。在對壓榨完汁的皮渣進行提取的時候，使用濃度高于30％的醇類主要原因是防止提取出野生蘋果中含量豐富的蛋白質類和多糖類等大分子物質，一方面提高產品的純度，另外一方面能夠保護吸附劑不被污染，延長其使用壽命。
本發明以野生蘋果為原料，提取蘋果黃酮的方法簡單易行，一步純化就可以使成品中總黃酮含量達到70％以上，所用原料為不能夠食用的野生蘋果，成本低且避免了資源浪費。在提取過程中沒有使用任何有毒溶劑，不污染環境，便于工業化生產。得到的野生蘋果黃酮可以用于食品抗氧化劑，其抗氧化性是人工合成抗氧化劑2，6-二叔丁基-4-甲基苯酚(BHT)的20倍，并且毒性遠遠低于人工合成的抗氧化劑，可以用于代替BHT等人工合成的抗氧化劑添加到食品、油類等產品中；作為保健食品原料開發出具有清除自由基、美容養顏的保健食品。
具體實施例方式
下面對本發明的最佳實施例做了詳細說明。該實施例只是為了說明本發明，本發明并不局限在所列舉的實施例中。
實施例1取野生蘋果(平均單個重量在40克左右，新疆伊梨，夏季采摘)1000公斤，用袋式壓榨機，在10～50℃，壓榨得到蘋果汁600升，過120目濾布后，用板框過濾器過濾，得到澄清液體590升；取蘋果皮渣400公斤，用濃度為65％的乙醇水溶液2000升，回流提取2小時，得到提取液1600升，減壓濃縮(負壓0.75大氣壓，溫度55攝氏度)到體積400升，靜置冷卻12小時，吸取上清液通過板框過濾器，得到380升液體；合并蘋果汁和提取液，共得到970升液體，以每小時150升的流速通過體積為200升的大孔樹脂層析柱，進行吸附。吸附完成后，用500升體積的去離子水進行沖洗，去除雜質；用濃度為70％的乙醇水溶液600升體積進行解吸附，流速400升/小時，最終得到650升體積的洗脫液體，減壓濃縮(負壓0.92大氣壓，溫度35攝氏度)到密度1.08，體積為61升；將濃縮液噴霧干燥得到成品21.3公斤，經紫外分光光度法(中國藥典2000版一部)檢測總黃酮含量為78.9％。
實施例2取野生蘋果(平均重量在100克左右/個，新疆伊梨，夏季采摘)200公斤，用袋式壓榨機，得到蘋果汁120升(密度1.02-1.10)，過120目濾布后，用板框過濾器過濾，得到澄清液體119升；取蘋果皮渣80公斤，用75％濃度甲醇水溶液400升，回流提取2小時，得到提取液320升，減壓濃縮(負壓0.70大氣壓，溫度70℃)到體積81升，靜置冷卻12小時，吸取上清液體通過板框過濾器，得到80升液體；合并蘋果汁和提取液，共得到199升液體，以每小時40升的流速通過體積為40升的大孔樹脂層析柱，進行吸附。吸附完成后，用100升體積的去離子水進行沖洗，去除雜質；用100％甲醇100升體積進行解吸附，流速40升/小時，最終得到120升體積的洗脫液體，減壓濃縮(負壓0.75大氣壓，溫度90攝氏度)到密度1.08，體積為13升；將濃縮液噴霧干燥得到成品5.3公斤，經紫外分光光度法(中國藥典2000版一部)檢測總黃酮含量為82.1％。
實施例3取野生蘋果(平均重量在5克左右/個，新疆伊梨5月采摘)10公斤，用手工食品壓榨機，得到蘋果汁5.20升(密度1.02)，過120目濾布后，濾紙過濾，得到澄清液體4.8升；取蘋果皮渣4.9公斤，用95％濃度正丁醇水溶液20升，回流提取2小時，得到提取液18升，旋轉蒸發器濃縮(負壓0.85大氣壓，溫度低于65攝氏度)到體積5升，靜置冷卻12小時，吸取上清液體過濾，得到5升液體；合并蘋果汁和提取液，共得到10.1升液體，以每小時4升的流速通過體積為2升的大孔樹脂層析柱，進行吸附。吸附完成后，用5升體積的去離子水進行沖洗，去除雜質；用30％乙醇的水溶液10升體積進行解吸附，流速4升/小時，最終得到12升體積的洗脫液體，減壓濃縮(負壓0.85大氣壓，溫度低于65攝氏度)到密度1.06公斤/升，體積為1升；將濃縮汁噴霧干燥得到成品150克，經紫外分光光度法(中國藥典2000版一部)檢測總黃酮含量為76.1％。
實施例4取野生蘋果(平均重量在10克左右/個，新疆伊梨6月1日采摘)10公斤，用手工食品壓榨機，得到蘋果汁6.20升(密度1.02)，過120目濾布后，濾紙過濾，得到澄清液體5.8升；取蘋果皮渣4.2公斤，用30％濃度乙醇水溶液20升，回流提取2小時，得到提取液18升，實驗室旋轉蒸發器(20L)濃縮(負壓0.85大氣壓，溫度30攝氏度)到體積5升，靜置冷卻12小時，吸取上清液體濾紙過濾，得到5升液體；合并蘋果汁和提取液，共得到10.8升液體，以每小時4升的流速通過體積為2升的大孔樹脂，進行吸附。吸附完成后，用5升體積的去離子水進行沖洗，去除雜質；用40％濃度甲醇的水溶液10升體積進行解吸附，流速4升/小時，最終得到12升體積的洗脫液體，減壓濃縮(負壓0.85大氣壓，溫度30攝氏度)到密度1.06公斤/升，體積為1升；將濃縮汁噴霧干燥得到成品190克，經紫外分光光度法(中國藥典2000版一部)方法檢測總黃酮含量為74.3％。
實施例5取野生蘋果(平均重量在200克左右/個，新疆伊梨6月30日采摘)10公斤，用手工食品壓榨機，得到蘋果汁6.50升(密度1.02)，過120目濾布后，濾紙過濾，得到澄清液體6.4升；取蘋果皮渣3.5公斤，用濃度75％乙醇水溶液18升，回流提取2小時，得到提取液15升，實驗室旋轉蒸發器(20L)濃縮(負壓0.85大氣壓，溫度100攝氏度)到體積5升，靜置冷卻12小時，吸取上清液體濾紙過濾，得到5升液體；合并蘋果汁和提取液，共得到11.4升液體，以每小時4升的流速通過體積為2升的大孔樹脂，進行吸附。吸附完成后，用5升體積的去離子水進行沖洗，去除雜質；用25％甲醇的水溶液20升體積進行解吸附，流速4升/小時，最終得到22升體積的洗脫液體，減壓濃縮(負壓0.85大氣壓，溫度100攝氏度)到密度1.06公斤/升，體積為1升；將濃縮液噴霧干燥得到成品180克，經紫外分光光度法(中國藥典2000版一部)檢測總黃酮含量為72.3％。
實施例6取野生蘋果(平均重量在300克左右/個，新疆伊梨6月30日采摘)10公斤，用手工食品壓榨機，得到蘋果汁6.60升(密度1.02)，過120目濾布后，濾紙過濾，得到澄清液體6.5升；取蘋果皮渣3.4公斤，用75％濃度甲醇水溶液18升，回流提取2小時，得到提取液15升，實驗室旋轉蒸發器(20L)濃縮(負壓0.85大氣壓，溫度70攝氏度)到體積5升，靜置冷卻12小時，吸取上清液體濾紙過濾，得到5升液體；合并蘋果汁和提取液，共得到1 1.5升液體，以每小時4升的流速通過體積為2升的大孔樹脂，進行吸附。吸附完成后，用5升體積的去離子水進行沖洗，去除雜質；用乙醇∶正丁醇∶水＝30∶30∶40溶液30升體積進行解吸附，流速4升/小時，最終得到33升體積的洗脫液體，減壓濃縮(負壓0.85大氣壓，溫度70攝氏度)到密度1.06公斤/升，體積為1升；將濃縮汁噴霧干燥得到成品120克，經紫外分光光度法(中國藥典2000版一部)方法檢測總黃酮含量為71.8％。
權利要求
1.野生蘋果黃酮的提取方法，其特征是包括以下步驟1)將野生蘋果原料用壓榨機壓榨，過濾得到澄清蘋果汁；2)將壓榨后的皮渣用濃度為30～99％的C1～C6低級醇的水溶液進行提取，提取液在負壓0.70～1.0大氣壓下減壓濃縮回收醇，過濾得到澄清提取液；3)將步驟1)和2)所得的澄清液合并，用大孔樹脂的吸附柱進行吸附；4)用濃度為10～100％的C1～C6低級醇或其混合液，或其水溶液或其混合物的水溶液進行解吸附；5)將解吸附的溶液，在負壓0.70～1.0大氣壓下回收溶劑，得到野生蘋果黃酮。
2.根據權利要求1所述的野生蘋果黃酮的提取方法，其特征是步驟2)減壓濃縮的溫度為25～100攝氏度。
3.根據權利要求1所述的野生蘋果黃酮的提取方法，其特征是用大孔樹脂進行吸附時，提取液的流速為每小時0.5～5倍樹酯體積。
4.根據權利要求1所述的野生蘋果黃酮的提取方法，其特征是解吸附的流速為每小時0.5～4倍樹酯體積。
全文摘要
本發明公開的野生蘋果黃酮的提取方法，包括以下步驟1)將野生蘋果原料用壓榨機壓榨，過濾得到澄清蘋果汁；2)將壓榨后的皮渣用濃度為30～99％的C
文檔編號C07D311/00GK1616447SQ200410066618
公開日2005年5月18日 申請日期2004年9月21日 優先權日2004年9月21日
發明者閆衛東, 邵云東 申請人:浙江大學