專利名稱：新型氨基－取代的二氫嘧啶并[4,5－d]嘧啶酮衍生物、其制備方法及其作為藥劑的應用的制作方法
技術領域：
本發明涉及新型二環-取代的二氫嘧啶并[4，5-d]嘧啶酮，涉及其制備方法、含有它們的藥物及其制備方法以及這些化合物作為藥物活性劑的應用。
本領域中已知某些取代的二環氮雜環的蛋白激酶及其酪蛋白激酶抑制活性。WO 01/29042和WO 01/29041中公開了具有p38抑制活性的烷氨基-取代的二氫嘧啶并[4，5-d]嘧啶酮衍生物。WO 99/61444描述了被芳基和雜芳基胺類、硫化物、亞砜類和砜類取代的二氫嘧啶并[4，5-d]嘧啶酮類作為依賴細胞周期蛋白的激酶(cdks)和酪氨酸激酶的抑制劑。WO 00/24744中還描述了芳基和雜芳基胺取代的二氫嘧啶并[4，5-d]嘧啶酮類作為T-細胞酪氨酸激酶p56lck抑制劑。
本發明的衍生物為如下通式的新化合物及其藥物上可接受的鹽或N-氧化物 其中R1表示氫或全部任選被取代的烷基、環烷基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳基烷基；R2表示鹵素、氰基、CF3；R3獨立為鹵素、羥基、氰基、硝基、氨基、酰氨基、-CONH2、-SO2NH2、-S(O)m-烷基、-NH-烷基、-N(烷基)2、-CONH(烷基)、-CON(烷基)2、-SO2NH(烷基)、-SO2N(烷基)2或全部任選被取代的烷基、烷氧基、烷氧基烷基；R4表示氫、烷基、烷氧基、氰基；且A為如下通式的基團 或 R5為氫、鹵素、羥基、氰基、氨基、酰氨基、烷基、烷氧基、烷氧基烷基、-CONH2、-SO2NH2、-S(O)m-烷基、-MH-烷基、-N(烷基)2、-CONH(烷基)、-CON(烷基)2、-SO2NH(烷基)、-SO2N(烷基)2；R6、R6’彼此獨立地表示氫、烷基或氧代；R7為氫、酰基、烷氧羰基、烷氧基烷基；或任選被羥基、氰基、-S(O)m-烷基、氨基、-NH-烷基或-N(烷基)2取代的烷基；R8、R8’彼此獨立地表示氫、氧代、烷氧基、烷氧基烷基；或任選被氫、羥基、氰基、吡咯烷-1-基、嗎啉代、哌嗪-1-基、4-烷基-哌嗪-1-基、哌啶-1-基、-S(O)m-烷基或基團NR9R9’取代的烷基，其中R9和R9′獨立為氫、烷基或環烷基；X為氧或S(O)m；
虛線為任選的第二個化學鍵；n為0、1或2；m為0、1或2；p為0、1或2；條件是當R8和R8’表示氧代基團時，該氧代基團不與S(O)m基團鄰接。
本發明的化合物表現出作為蛋白激酶抑制劑、特別是src家族酪氨酸激酶抑制劑的活性且由此可以用于治療由所述酪氨酸激酶介導的疾病。酪氨酸激酶家族通過使肽和蛋白質的酪氨酸殘基磷酸化在調節細胞信號傳導和細胞增殖中起重要作用。已知酪氨酸激酶不適宜的活化涉及各種疾病狀態，包括炎性疾病、免疫疾病、CNS疾病或腫瘤疾病或骨疾病。
本發明的化合物可以用作預防和治療如下疾病的活性劑例如移植排斥、炎性腸綜合征、類風濕性關節炎、銀屑病、再狹窄、變應性哮喘、早老性癡呆、帕金森病、中風、骨質疏松癥、癌癥和良性增生。
令人意外地發現與本領域中已知的化合物相比，本發明的化合物表現出改善的體內藥動學參數和至少相同的對src-酪氨酸激酶的抑制活性且由此可以提供增強的生物利用度。
本發明的目的在于式I的化合物及其藥物上可接受的鹽及其對映體形式、上述化合物的制備方法、含有它們的藥物及其制備方法以及上述化合物在控制或預防疾病、尤其是上述疾病和病癥中的應用或在制備相應藥物中的應用。
本文所用的術語″烷基″單獨時指的是含有1-6個、優選1-4個碳原子的直鏈或支鏈烷基，諸如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、2-丁基、叔丁基、正戊基、正己基及其異構體。
本文所用的術語″烷氧基″指的是直鏈或支鏈烴氧基，其中″烷基″部分為如上述所定義的烷基。實例包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、2-丁氧基、叔丁氧基和正戊氧基和正己氧基及其異構體。
術語″烷氧基烷基″指的是被如上述所定義的烷氧基取代的如上述所定義的烷基，這類基團例如有甲氧基甲基、甲氧基乙基、甲氧基丙基、乙氧基甲基、乙氧基乙基、乙氧基丙基、丙氧基丙基、甲氧基丁基、乙氧基丁基、丙氧基丁基、丁氧基丁基、叔-丁氧基丁基、甲氧基戊基、乙氧基戊基、丙氧基戊基，包括其異構體。
術語″環烷基″指的是含有3-8個、優選3-6個碳原子的飽和單環，即環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環庚基或環辛基。
在術語″烷氧羰基″中，烷氧基具有上述含義。這類基團的實例為甲氧羰基、乙氧羰基、丙氧羰基、異丙氧羰基、正丁氧羰基、2-丁氧羰基、叔丁氧羰基以及正戊氧羰基和正己氧羰基及其異構體。
術語″酰基″和″酰氨基″指的是基團R′-C(O)-和R′-C(O)-NH-，其中R′為如上述所定義的烷基。
本文所用的術語″芳基″表示苯基和萘基，例如1-萘基、2-萘基。
本文所用的術語″芳烷基″表示如上述所定義的、與帶有1-3個碳原子的直鏈亞烷基連接的芳基。這類基團的實例為芐基、1-苯乙基、2-苯乙基以及苯丙基和苯丁基及其異構體。
術語″雜芳基″指的是含有可達3個獨立地選自N、O或S的雜原子的6或5元芳環。這類雜芳基的實例為吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、噠嗪基、三嗪基、噻吩基、咪唑基、吡唑基、噁唑基、異噁唑基、噻唑基、異噻唑基、噻二唑基、噁二唑基、呋喃基、三唑基。
本文所用的術語″雜芳基烷基″表示如上述所定義的與帶有1-3個碳的直鏈亞烷基連接的雜芳基。
除非另有說明，與上述基團相關的術語″任選取代的″指的是未被取代或被如下基團取代一次或幾次鹵素、羥基、氰基、硝基、氨基、酰氨基、烷基、烷氧基、烷氧基烷基、-CONH2、-SO2NH2、-S(O)m-烷基、-NH-烷基、-N(烷基)2、-CONH(烷基)、CON(烷基)2、-SO2NH(烷基)、-SO2N(烷基)2。
術語″鹵素″指的是氟、氯、溴或碘。
本發明的優選實施方案為式I的化合物及其藥物上可接受的鹽或N-氧化物，其中R1表示氫或全部任選被取代的烷基、環烷基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳基烷基；R2表示鹵素、氰基、CF3；R3獨立地為鹵素、羥基、氰基、硝基、氨基、酰氨基、-CONH2、-SO2NH2、-S(O)m-烷基、-NH-烷基、-N(烷基)2、-CONH(烷基)、-CON(烷基)2、-SO2NH(烷基)、-SO2N(烷基)2或全部任選被取代的烷基、烷氧基、烷氧基烷基；R4表示氫、烷基、烷氧基、氰基；且A為如下通式的基團 或 R5為氫、鹵素、羥基、氰基、氨基、酰氨基、烷基、烷氧基、烷氧基烷基、-CONH2、-SO2NH2、-S(O)m-烷基、-NH-烷基、-N(烷基)2、-CONH(烷基)、-CON(烷基)2、-SO2NH(烷基)、-SO2N(烷基)2；R6、R6’彼此獨立地表示氫、烷基或氧代；R7為氫、酰基、烷氧羰基、烷氧基烷基；或任選被羥基、氰基、-S(O)m-烷基、氨基、-NH-烷基或-N(烷基)2取代的烷基；R8、R8’彼此獨立地表示氫、氧代、烷氧基、烷氧基烷基；或任選被氫、氰基、吡咯烷-1-基、嗎啉代、哌嗪-1-基、4-烷基-哌嗪-1-基、哌啶-1-基、-S(O)m-烷基或基團NR9R9’取代的烷基，其中R9和R9′獨立地為氫、烷基或環烷基；X為氧或S(O)m；虛線為任選的第二個化學鍵；
n為0、1或2；m為0、1或2；p為0、1或2；條件是當R8和R8’表示氧代基團時，該氧代基團不與S(O)m基團鄰接。
本發明的另一個實施方案為式I的化合物，其中R2表示溴且n＝0。
本發明的另一個實施方案為式I的化合物，其中R2和R3彼此獨立地表示氟、氯、溴或碘且n＝1。優選式I的化合物，其中R2表示溴且R3表示氟。最優選R3位于苯環的6-位上。還優選式I的化合物，其中R2和R3均表示氯且n＝1。
本發明的另一個實施方案為化合物及其藥物上可接受的鹽，其中A為如上述所定義的式A-1、A-2、A-3、A-4、A-5或A-6的基團；R1為任選取代的烷基或芳基；R2為鹵素或氰基；R3為鹵素；n為0或1；R5為氫；且R4為氫或甲基。
這類化合物例如為7-(苯并[1，3]間二氧雜環戊烯-5-基氨基)-3-(2，4-二氯-苯基)-1-(4-甲氧基-苯基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮或2-[7-(4，4-二氧代-3，4-二氫-2H-4λ*6*-苯并[1，4]氧硫雜環己二烯-6-基氨基)-1-甲基-2-氧代-1，4-二氫-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3-基]-芐腈。
本發明的另一個實施方案為式I的化合物，其中A為如上述所定義的基團A-1。尤其優選式I的化合物及其藥物上可接受的鹽，其中A為基團A-1，其中R5為氫；R7如上述所定義；p為0；且R1為烷基；R2為鹵素；
R3為鹵素；n為0或1；R4為氫。
這類化合物例如為3-(2-溴-苯基)-3，4-二氫-7-(1′-乙酰基-螺[1，3-苯并間二氧雜環戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；3-(2-溴-苯基)-3，4-二氫-7-(1′-乙氧羰基-螺[1，3-苯并間二氧雜環戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；3-(2-溴-6-氟苯基)-3，4-二氫-7-(1′-乙酰基-螺[1，3-苯并間二氧雜環戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；3-(2-溴-6-氟苯基)-3，4-二氫-7-(1′-乙氧羰基-螺[1，3-苯并間二氧雜環戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；3-(2-溴-苯基)-3，4-二氫-7-(1′-乙基-螺[1，3-苯并間二氧雜環戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；3-(2-溴-苯基)-3，4-二氫-7-(1′-(2-甲氧基乙基)-螺[1，3-苯并間二氧雜環戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；3-(2-溴-6-氟苯基)-3，4-二氫-7-(1′-(2-甲氧基乙基)-螺[1，3-苯并間二氧雜環戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；3-(2-溴-苯基)-3，4-二氫-7-(螺[1，3-苯并間二氧雜環戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；3-(2-溴-苯基)-3，4-二氫-7-(1′-甲基-螺[1，3-苯并間二氧雜環戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；3-(2-溴-6-氟-苯基)-3，4-二氫-7-(螺[1，3-苯并間二氧雜環戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；3-(2-溴-6-氟-苯基)-3，4-二氫-7-(1′-甲基-螺[1，3-苯并間二氧雜環戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；3-(2-溴-苯基)-3，4-二氫-7-(1′-氰基甲基-螺[1，3-苯并間二氧雜環戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；3-(2-溴-5-甲氧基苯基)-3，4-二氫-7-(螺[1，3-苯并間二氧雜環戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮。
本發明的另一個實施方案為式I的化合物，其中A為如上述所定義的基團A-2。尤其優選式I的化合物及其藥物上可接受的鹽，其中A為基團A-2，其中R5為氫；X為氧；R8、R8’獨立地表示氫；或任選被氫、氰基、吡咯烷-1-基、嗎啉代、哌嗪-1-基、4-烷基-哌嗪-1-基、哌啶-1-基、-S(O)m-烷基或基團NR9R9’取代的烷基，其中R9和R9′獨立地為氫、烷基或環烷基；且R1為烷基；R2為鹵素；R3為鹵素；n為0或1；且R4為氫。
這類化合物例如為3-(2-溴-苯基)-7-(2，3-二氫-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(2-吡咯烷-1-基甲基-2，3-二氫-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(3-吡咯烷-1-基甲基-2，3-二氫-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-7-(2-二甲氨基甲基-2，3-二氫-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-6-氟-苯基)-7-(2-二甲氨基甲基-2，3-二氫-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-7-(3-二甲氨基甲基-2，3-二氫-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-6-氟-苯基)-7-(3-二甲氨基甲基-2，3-二氫苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；
3-(2-溴-苯基)-7-(2-環丙氨基甲基-2，3-二氫-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(2-嗎啉-4-基甲基-2，3-二氫苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-3，4-二氫-1 H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(3-嗎啉-4-基甲基-2，3-二氫苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-6-氟-苯基)-1-甲基-7-(3-嗎啉-4-基甲基-2，3-二氫苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-6-氟-苯基)-1-甲基-7-(3-吡咯烷-1-基甲基-2，3-二氫苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。
另外優選的是式I的化合物及其藥物上可接受的鹽，其中A為基團A-2，其中R5為氫；X為氧；R8為氫；且R8’為被羥基取代的烷基；且R1為烷基；R2為鹵素；R3為鹵素；n為0或1；且R4為氫。
這類化合物例如為3-(2-溴-苯基)-7-(2-羥甲基-2，3-二氫-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-7-(3-羥甲基-2，3-二氫-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-6-氟-苯基)-7-(3-羥甲基-2，3-二氫-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；或3-(2-溴-6-氟-苯基)-7-(2-羥甲基-2，3-二氫-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。
此外，尤其優選式I的化合物及其藥物上可接受的鹽，其中A為基團A-2，其中R5為氫；X為S(O)m；m為0、1或2；R8、R8′表示氫；且R1為烷基；R2為鹵素；R3為鹵素；n為0或1；R4為氫。
這類化合物例如為3-(2-溴-苯基)-7-(2，3-二氫-苯并[1，4]氧硫雜環己二烯-7-基氨基)-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-7-(4，4-二氧代-3，4-二氫-2H-4λ*6*-苯并[1，4]氧硫雜環己二烯-7-基氨基)-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-6-氟-苯基)-7-(4，4-二氧代-3，4-二氫-2H-4λ*6*-苯并[1，4]氧硫雜環己二烯-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-7-(4，4-二氧代-3，4-二氫-2H-4λ*6*-苯并[1，4]氧硫雜環己二烯-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。
本發明的另一個實施方案為式I的化合物及其藥物上可接受的鹽，其中A為如上所述的基團A-3。尤其優選式I的化合物及其藥物上可接受的鹽，其中A為基團A-3，其中R5為氫；R7為氫或烷基；X為S(O)m；m為0、1或2；
R8、R8’獨立地表示氫、氧代或烷氧基，條件是當R8、R8’之一為氧代基團時，虛線不存在，而當R8、R8’為氫或烷氧基時，虛線可以表示形成雙鍵的另一個鍵；且R1為烷基；R2為鹵素；R3為鹵素；n為0或1；R4為氫。
這類化合物例如為3-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(3-氧代-3，4-二氫-2H-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-3-氧代-3，4-二氫-2H-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-1，3-二氧代-1，2，3，4-四氫-1λ*4*-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-3，4-二氫-2H-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(3-氧代-3，4-二氫-2H-苯并[1，4]噻嗪-6-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-6-氟-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-3-氧代-3，4-二氫-2H-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-6-氟-苯基)-1-甲基-7-(3-氧代-3，4-二氫-2H-苯并[1，4]噻嗪-6-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-3-氧代-3，4-二氫-2H-苯并[1，4]噻嗪-6-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-7-(3-甲氧基-4-甲基-1-氧代-1，4-二氫-1λ*4*-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-6-氟-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-3-氧代-3，4-二氫-2H-苯并[1，4]噻嗪-6-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；
3-(2-溴-6-氟-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-1，1-二氧代-1，2，3，4-四氫-1λ*6*-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-1，1-二氧代-1，2，3，4-四氫-1λ*6*-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-1，1，3-三氧代-1，2，3，4-四氫-1λ*6*-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-6-氟-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-1，1，3-三氧代-1，2，3，4-四氫-1λ*6*-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。
本發明的另一個實施方案為式I的化合物及其藥物上可接受的鹽，其中A為如上所述的基團A-4。尤其優選式I的化合物及其藥物上可接受的鹽，其中A為基團A-4，其中R5為氫；R6、R6′獨立地表示氫或氧代；R7為氫；或任選被羥基、氰基、-S(O)m-烷基、氨基、-NH-烷基或-N(烷基)2取代的烷基；且R1為烷基；R2為鹵素；R3為鹵素；n為0或1；R4為氫。
這類化合物例如為5-[6-(2-溴-苯基)-8-甲基-7-氧代-5，6，7，8-四氫-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-基氨基]-2-甲基-異吲哚-1，3-二酮；3-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(2-甲基-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮鹽酸鹽；5-[6-(2-溴-苯基)-8-甲基-7-氧代-5，6，7，8-四氫-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-基氨基]-異吲哚-1，3-二酮；
5-[6-(2-溴-6-氟-苯基)-8-甲基-7-氧代-5，6，7，8-四氫-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-基氨基]-2-甲基-異吲哚-1，3-二酮；3-(2-溴-6-氟-苯基)-7-[2-(2-羥基-1，1-二甲基-乙基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮鹽酸鹽。
本發明的另一個實施方案為式I的化合物及其藥物上可接受的鹽，其中A為如上所述的基團A-5。尤其優選式I的化合物及其藥物上可接受的鹽，其中A為基團A-5，其中R5為氫；X為氧；R8、R8’彼此獨立地表示氫或烷基；且R1為烷基；R2為鹵素；R3為鹵素；n為0或1；R4為氫。
這類化合物例如為7-(苯并[1，3]二氧代-5-基氨基)-3-(2-溴-苯基)-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。
此外，尤其優選式I的化合物及其藥物上可接受的鹽，其中A為基團A-5，其中R5為氫；X為S(O)m；m為0、1或2；R8、R8’彼此獨立地表示氫或烷基；且R1為烷基；R2為鹵素；R3為鹵素；
n為0或1；R4為氫。
這類化合物例如為3-(2-溴-6-氟-苯基)-7-(3，3-二氧代-2，3-二氫-3λ*6*-苯并[1，3]氧雜硫羥-5-基氨基)-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-7-(3，3-二氧代-2，3-二氫-3λ*6*-苯并[1，3]氧雜硫羥-5-基氨基)-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。
本發明的另一個實施方案為式I的化合物及其藥物上可接受的鹽，其中A為如上所述的基團A-6。尤其優選式I的化合物及其藥物上可接受的鹽，其中A為基團A-6，其中R5為氫；R6、R6′、R7具有上述含義；且R1為烷基；R2為鹵素；R3為鹵素；n為0或1；R4為氫。
另一個實施方案為式I的化合物3-(2-溴-5-甲氧基-苯基)-7-(4，4-二氧代-3，4-二氫-2H-4λ*6*-苯并[1，4]氧硫雜環己二烯-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；7-(4，4-二氧代-3，4-二氫-2H-4λ*6*-苯并[1，4]氧硫雜環己二烯-6-基氨基)-3-(2-氟-6-甲氧基-苯基)-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-7-(4，4-二氧代-3，4-二氫-2H-4λ*6*-苯并[1，4]氧硫雜環己二烯-6-基氨基)-1，4-二甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮，對映體1；3-(2-溴-苯基)-7-(4，4-二氧代-3，4-二氫-2H-4λ*6*-苯并[1，4]氧硫雜環己二烯-6-基氨基)-1，4-二甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮，對映體2；3-(2-溴-苯基)-1，4-二甲基-7-(4-甲基-1，1，3-三氧代-1，2，3，4-四氫-1λ*6*-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；對映體2；
3-(2-溴-苯基)-1，4-二甲基-7-(4-甲基-1，1，3-三氧代-1，2，3，4-四氫-1λ*6*-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮，對映體1；和2-[7-(4，4-二氧代-3，4-二氫-2H-4λ*6*-苯并[1，4]氧硫雜環己二烯-6-基氨基)-1-甲基-2-氧代-1，4-二氫-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3-基]-3-氟-芐腈。
本發明的另一個實施方案為制備本發明式I的氨基-取代的二氫嘧啶并[4，5-d]嘧啶酮衍生物的方法。可以通過下列步驟制備所述的化合物(a)使通式(II)的化合物與通式(III)的胺反應， 其中R1-R4和n如上述所定義，任何羥基或氨基可以以被保護的形式存在，且L表示離去基團，諸如例如作為芐基磺酰基、苯基磺酰基、烷磺酰基這類的磺酰基衍生物；例如作為對甲苯基磺酰氧基、甲磺酰氧基或三氟甲磺酰氧基這類的磺酰氧基衍生物；烷亞磺酰基；或鹵素，諸如氯、溴、碘、氟； 其中A如上述所定義；且如果需要，使反應產物上存在的被保護羥基或被保護氨基脫保護；或b)使式(II)的化合物與氨反應或與被保護的胺、諸如芐胺反應且隨后裂解下保護基而得到式IV的氨基衍生物
其中所示的符號如上述所定義；然后使該化合物與式V的二環化合物反應 其中L′表示如對L所定義的離去基團，優選鹵素，諸如氯、溴、碘或例如作為對甲苯基磺酰氧基、甲磺酰氧基或三氟甲磺酰氧基這類的磺酰氧基衍生物；且A如上文所定義；可以使用本領域中公知的過渡金屬催化劑催化(IV)與(V)的反應；和c)如果需要，用酸將獲自a)或b)的式I的堿性化合物轉化成藥物上可接受的鹽或用堿將獲自a)或b)的式I的酸性化合物轉化成藥物上可接受的鹽；和d)如果需要，通過與氧化劑如3-氯-過苯甲酸、三氟過乙酸或二甲基二環氧乙烷的氧化反應將式I的化合物轉化成N-氧化物。
可以在有或沒有溶劑存在下進行方法(a)中式II化合物與式III的胺的反應。當使用溶劑時，它通常可以為鹵化脂族烴，例如二氯甲烷或1，2-二氯乙烷；開鏈醚，例如乙醚或二異丙醚或二甘醇二甲醚；環醚，例如四氫呋喃(THF)；任選鹵化芳香烴，例如苯、甲苯、二甲苯或氯苯；或甲酰胺，例如二甲基甲酰胺(DMF)；或N-甲基吡咯烷酮(NMP)或二甲亞砜(DMSO)；或環丁砜。
該反應適宜在約0℃-約200℃、優選約100℃-約200℃的溫度范圍內進行。該反應可以在酸、如鹽酸(HCl)、甲苯磺酸、三氟乙酸或間氯苯甲酸存在下進行。此外，可以使式III的二環苯胺類作為預先形成的鹽參與反應。備選地，該反應可以在堿存在下進行，如碳酸鉀、三乙胺、叔丁醇鉀、氫化鈉、二異丙基酰胺鋰(LDA)、丁基鋰(buthyl lithium)或六甲基二硅疊氮化鋰。當使用強堿時，該反應還可以在-20℃-50℃的低溫下進行。
可以任選按照本領域中公知的方法保護存在于式II或III原料上的羥基或氨基或羧酸部分。例如，可以以醚、例如烷基醚或甲硅烷基醚或酯、例如烷基酯的形式保護羥基。就被保護的氨基而言，苯二酰亞氨基是這類基團的實例。例如，被保護的羧酸為酯，例如烷基酯。
可以通過本身公知的方式使經式II化合物與式III的胺反應所得產物上存在的這類被保護基團脫保護。因此，例如，可以通過用氫溴酸處理將諸如烷基醚這類醚轉化成羥基；且可以使用堿金屬氫化鋁、諸如氫化鋁鋰將諸如烷基酯這類酯轉化成羥基。此外，例如，可以通過用肼水合物處理將苯二酰亞氨基轉化成氨基。例如，可以通過用堿金屬氫氧化物裂解將被保護的羧酸、諸如酯、例如烷基酯轉化成游離羧酸基團。
在b)方法中，使式II的化合物與氨或被保護的胺反應而生成式IV的2-氨基-衍生物。可以使用本身公知的方法裂解保護基，諸如4-甲氧基芐基。例如，可以使用三氟乙酸、便利的是在升溫、優選在反應混合物的回流溫度下進行裂解。
可以按照與WO2001 4425類似的方法、例如通過在堿存在的惰性溶劑中使用Pd-膦復合物催化使式IV的2-氨基衍生物與式V的二環殘基偶聯，其中所述的Pd-膦復合物如Pd(OAc)2/BINAP、Pd(dba)2/P(叔-Bu)3或Xantphos，所述的堿如Cs2CO3、NaOtert-Bu、NaOPh或K3PO4，所述的惰性溶劑如甲苯或二甲苯或THF或NMP，反應溫度為50-180℃。
例如，可以通過兩步反應由帶有相應羥基-烷基取代基的式I化合物制備其中A為基團A-1、A-2、A-3、A-4、A-5或A-6且基團R7、R8或R8’之一為任選取代的氨基烷基的式I的化合物，所述的兩步反應通過在例如有甲苯磺酰氯或亞硫酰氯存在下用鹵素或甲苯磺酰氧基取代羥基且隨后使氯化物或甲苯磺酸酯與任選取代的氨基如反應方案I中所示進行反應來進行。
方案1 還可以通過在有本領域中公知的催化劑、諸如W-、V-或Mo化合物或其它氧化試劑存在下用3-氯過苯甲酸(MCPBA)、過硫酸氫鉀制劑、2-苯基磺酰基-3-苯基氧丙啶、高碘酸鈉或H2O2按照標準步驟氧化相應的式I的硫烷基化合物來制備式I的化合物，其中任意A-2、A-3或A-5的基團或其任意的取代基含有氧化形式的硫原子-S(O)-或-S(O)2-。
按照所述方法的步驟c)，式I的堿性化合物可以與無機酸或與有機酸成鹽，所述的無機酸例如有氫鹵酸，諸如鹽酸或氫溴酸；硫酸；硝酸；或磷酸；所述的有機酸例如有甲酸、乙酸、三氟乙酸、檸檬酸、富馬酸、蘋果酸、馬來酸、琥珀酸、酒石酸、水楊酸、甲磺酸、乙磺酸、4-甲苯磺酸等。式I的酸性化合物可以與堿成鹽，例如無機堿，諸如堿金屬和堿土金屬；或有機堿，諸如胺類。無機堿的實例為用作陽離子的金屬，如鈉、鉀、鎂、鈣等。合適的胺類的實例為乙二胺，2-羥乙胺、二(2-羥乙基)胺、乙胺等。可以按照本身公知的方式形成和分離這些鹽。優選式I的堿性化合物與酸形成的鹽。
已知式II的原料來自WO 00/24744，其中L為烷基-、苯基-或芐基磺酰基。可以如方案2中對L＝甲基磺酰基所述制備它們
方案2 其中R1和R4如上述所定義且Ar為如下殘基 其中R2、R3和n如上述所定義。
步驟1使式VI的化合物與胺R1-NH2反應而得到式VII的化合物。該反應便利的是在反應條件下惰性的溶劑中進行，優選鹵化脂族烴，尤其是二氯甲烷，任選的鹵化芳香烴、開鏈或環醚、甲酰胺或低級鏈烷醇。該反應適宜在約-20℃-約120℃下進行。
步驟2步驟2包括還原式VII的化合物而得到式VIII的醇。使用氫化鋁鋰、按照本身公知的方式進行該還原反應，例如在還原條件下惰性的溶劑中，優選開鏈或環醚，尤其是四氫呋喃，反應溫度約-20℃-約70℃，優選約0℃-約室溫。
步驟3將式VIII的醇氧化成式IX的甲醛。使用二氧化錳、按照本身公知的方式、便利的是在氧化條件下惰性的溶劑中進行該氧化反應，所述的溶劑優選鹵化烴、尤其是二氯甲烷或任選鹵化的芳香烴。該氧化反應適宜在約0℃-約60℃下進行。
步驟3a對通式IX的醛進行親核加成得到通式VIIIa的取代醇類。可以在0℃-回流溫度下使用格利雅試劑、如溴化甲基或乙基錳在惰性溶劑、如乙醚或THF中進行這類加成。可以將其它親核體、例如三甲代甲硅烷基氰化物或三丁基甲錫烷基氰化物加入到在惰性溶劑、如二氯甲烷或甲苯或THF中的醛中。備選地，可以在乙酸存在下使用氰化鈉。這些加成反應可以在-20℃-150℃的溫度下進行。
步驟4使式IX的甲醛與式XIII的胺反應而得到式X的亞胺。該反應在酸、例如芳族磺酸、優選4-甲苯磺酸存在下進行，其中通過共沸除去反應過程中形成的水。該反應便利地在反應條件下惰性的溶劑中進行，優選任選鹵化的芳香烴，尤其是甲苯，反應溫度約為70℃-約150℃，尤其是溶劑的回流溫度。
步驟5步驟5包括將式X的亞胺還原成式XI的化合物。使用硼氫化鈉、氫化鋁鋰或三乙酰氧基硼氫化鈉、按照本身公知的方式進行這種還原。優選不純化式X的化合物，而是濃縮制備的反應混合物并將得到的濃縮物吸收在還原條件下惰性的溶劑中，優選開鏈或環醚，尤其是四氫呋喃或任選的鹵化芳香烴或低級鏈烷醇，且然后用上述還原劑處理。該還原反應適于在約0℃-約100℃、優選約25℃下進行步驟5a備選地，可以通過下列步驟將式VIII或VIIIa的醇轉化成式XI的胺首先按照與Okuda，Price在《有機化學雜志》(J.Org.Chem.)24(1959)14中所述類似的方式用亞硫酰氯氯化式VIII或VIIIa的醇并在有如碘化鈉這類催化劑存在的惰性溶劑、如乙腈、DMF、THF或NMP中用式XIII的芳族胺取代氯。該取代反應可以在15℃-200℃、優選室溫-120℃的溫度范圍內進行。
步驟5b備選地，按照與步驟3a類似的方式可以對式X的亞胺進行親核加成而得到式XI的亞胺。與如步驟3a中所述相同的試劑和條件在本文中也是合適的。此外，可以使用更具反應性的親核體，如甲基-或乙基鋰。還可以用過渡金屬鹽、如Yb(OTf)3或Zr(OtBu)4催化甲硅烷基氰化物或氰化錫試劑對所述亞胺的加成。在具體的變化形式中，可以如Kinko，K.等在《加拿大化學雜志》(Can.J.Chem.)51(1973)333-337中所述在惰性溶劑、如苯或二氯甲烷中用光氣環化式X的亞胺而得到R4＝Cl的式XII的中間體。在這類中間體中，可以適于在堿、如碳酸氫鈉、碳酸鉀、乙基-二異丙胺或氫化鈉存在下用低級醇類取代所述的氯而得到R4＝烷氧基的式XII的化合物。
步驟6環化式XI的化合物而得到通式XII的化合物。這種環化通過按照本身公知的方式在叔有機堿存在的溶劑中與光氣或氯甲酸三氯甲酯反應來進行，所述的叔有機堿優選三(C1-C6-烷基)胺，尤其是三乙胺，且所述的溶劑在反應條件下是惰性的，優選開鏈或環醚，尤其是THF，任選鹵化的芳香烴或鹵化的脂族烴。備選地，可以在較強堿、如氫化鈉或叔丁醇鉀存在的溶劑、如THF、NMP或DMF中使用光氣的等價物，如羰二咪唑。便利的是該反應在約-20℃-約50℃、優選約0℃-約室溫下進行。
步驟7用3-氯過苯甲酸氧化式XII的化合物而得到式II-A的原料，即式II的化合物，其中L為烷基-S(O)m。按照本身公知的方式、便利的是在溶劑中進行這種氧化反應，所述的溶劑在氧化條件下是惰性的，優選鹵化脂族烴，尤其是二氯甲烷，且反應溫度約-20℃-約50℃，優選約0℃-約室溫。
可以通過用堿金屬氫化物、尤其是氫化鈉處理且隨后與通式R1a-L″的化合物反應對方案2中的式XII化合物或式II的原料進行N-取代，其中R1表示氫，在通式R1a-L″中，Rla具有上文R1的任意值，但不包括氫、芳基或雜芳基，且L″表示如對L所定義的離去基團，諸如磺酰基衍生物，諸如芐基磺酰基、苯基磺酰基、烷磺酰基；磺酰氧基，諸如對-甲苯基磺酰氧基、甲磺酰氧基或三氟甲磺酰氧基和烷亞磺酰基；或鹵素，諸如氯、溴、碘或氟。L″優選表示碘。
N-取代便利的是在溶劑中進行，所述的溶劑在反應條件下是惰性的，優選甲酰胺，尤其是二甲基甲酰胺、開鏈或環醚或任選的鹵化芳香烴。該反應適宜在約50℃-約200℃、優選在約50℃-約150℃下進行。
當R1包括含氮雜芳基時，該方法可以導致N-氧化物形成。可以通過標準方法、例如通過與三苯膦反應將這種N-氧化物轉化成游離N化合物。
式(III)的原料和胺類R1-NH2是已知的或可以通過本領域中公知的標準步驟制備。例如，可以通過用H2/Pd-C、Sn/HCl或NaS2O4還原由相應的硝基化合物或通過霍夫曼或庫爾提斯重排由相應的苯甲酸衍生物制備芳族胺類。
式(V)的原料是己知的或可以通過標準步驟制備。例如，如果L為Cl或Br，那么可以通過鹵化芳香環引入它。如果L為OSO2CF3，那么可以通過在有堿存在下使相應的苯酚與三氟甲磺酸酐或N，N-雙-三氟甲基磺酰基-苯胺反應制備它。
還可以通過用例如NaBH4、LiAlH4、DIBAL或BH3SMe2將羰基部分還原成-CH2-或-CHOH-部分而將在式A-1-A-6的環上含有氧代基團的式III和V的中間體轉化成式III和V的化合物。這類還原反應適于在0℃-150℃的溫度范圍內和醚、THF或二氯甲烷中進行。備選地，還可以用式I的化合物進行這類還原反應。
可以將基團A-1-A-6上的取代基R5-R8引入式III或V的原料或可以選擇將它們在隨后的反應步驟中加入而得到相應的式I的化合物。例如，可以通過使氨基-或-S(O)m-CH2部分與親電子試劑在堿存在下反應而引入所述的取代基。合適的親電子試劑為C1-C6-烷基鹵，例如MeI；醛類和酮類，例如甲醛或丙酮；環氧化物，例如環氧乙烷；或酰化試劑，例如乙酐等。合適的堿可以為氫化鈉、叔丁醇鉀、丁基鋰、三乙胺、吡啶、碳酸鉀等。可以通過標準步驟將式III或IV的中間體中基團A-1-A-6上的羥基烷基殘基轉化成離去基團，例如氯烷基或甲苯磺酰氧基-烷基部分，且隨后被氰化物、胺類、醇類或硫醇類取代。這些取代反應適于在堿存在的溶劑中反應，所述的堿如烷醇鈉、乙基-二異丙胺、碳酸鉀或氫化鈉，所述的溶劑如THF、DMF、NMP、DMSO或乙醇，反應溫度范圍為0℃-180℃。
在含有未氧化形式的硫原子的式III或IV的中間體和式I的化合物中，可以用標準試劑在V或W或Ru催化劑存在下將這些硫原子氧化成亞磺酰基和磺酰基部分，所述的標準試劑例如有3-氯過苯甲酸、三氟過乙酸、過硫酸氫鉀制劑、高碘酸鈉、二甲基環氧乙烷或過氧化氫。
本發明的另一個實施方案為通式A-1-I的化合物
其中R5、R6、R7和p具有上述含義；且X為NO2或任選被保護的NH2基團。
本發明的另一個實施方案為通式A-1-I的化合物作為制備通式I化合物的中間體的應用。通過使用本領域技術人員眾所周知的適宜保護基可以使所述的NH2基團任選以被保護形式存在。
通式I的化合物可以含有一個或幾個手性中心且隨后可以以外消旋或旋光形式存在。可以按照公知的方法將外消旋物分離成對映體。例如，通過與旋光酸反應可以由外消旋混合物形成可以通過結晶分離的非對映體鹽，所述的旋光酸例如有D-或L-酒石酸、扁桃酸、蘋果酸、乳酸或樟腦磺酸。另一方面，還可以通過使用商購的手性HPLC-相進行的色譜法分離對映體。當使用手性相Chiracel OD-CSP(來自Daicel的20μm商品材料；洗脫劑庚烷/異丙醇1∶1)分離外消旋物時，本文所用的術語″對映體1″和″對映體2″分別表示第一次和第二次洗脫的對映體。因此，該術語用于原料或中間體以及從相應的原料或中間體得到的終產物。
本發明的化合物可以以其藥物上可接受的鹽形式存在。術語″藥物上可接受的鹽″指的是保持式I化合物的生物有效性和特性且由適宜的非毒性有機酸或無機酸或有機堿或無機堿形成的常用酸加成鹽或堿加成鹽。酸加成鹽包括例如來源于無機酸和那些來源于有機酸的那些酸加成的鹽，所述的無機酸諸如鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸和硝酸；所述的有機酸諸如對-甲苯磺酸、水楊酸、甲磺酸、草酸、琥珀酸、檸檬酸、蘋果酸、乳酸、富馬酸等。堿加成的鹽包括那些來源于銨、鉀、鈉的鹽和季銨氫氧化物，諸如氫氧化四甲基銨。將藥物化合物化學修飾成鹽是藥物化學工作者眾所周知的技術，目的是為使化合物獲得改善的物理和化學穩定性、吸濕性、流動性和溶解性。例如，Ansel，H.等在《藥物劑型和藥物傳遞系統》(Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems)第6版1995，pp.196和1456-1457中描述了該項技術。
可以將本發明的化合物及其藥物上可接受的鹽作為藥劑使用，例如藥物制劑形式。可以通過口服、例如以片劑、包衣片、錠劑、硬膠囊和軟膠囊、溶液、乳劑或混懸劑形式給予所述藥物制劑。然而，還可以通過直腸、例如以栓劑形式或通過非腸道、例如以注射液形式進行給藥。
還可以通過用藥物上惰性的無機或有機載體加工本發明的化合物而得到上述藥物制劑。例如，可以將乳糖、玉米淀粉或其衍生物、滑石、硬脂酸或其鹽等用作片劑、包衣片、錠劑和硬膠囊的載體。用于軟明膠膠囊的適宜載體例如植物油、蠟、脂肪、半固體和液體多元醇類等。然而，隨活性物質特性的不同，就軟明膠膠囊而言通常不需要載體。用于生產溶液和糖漿劑的適宜載體例如有水、多元醇類、甘油、植物油等。用于栓劑的適宜載體例如有天然或硬化油、蠟、脂肪、半固體或液體多元醇類等。
此外，藥物制劑可以含有防腐劑、加溶劑、穩定劑、濕潤劑、乳化劑、增甜劑、著色劑、調味劑、用于改變滲透壓的鹽、緩沖劑、掩蔽劑或抗氧化劑。它們還可以含有其它治療上有價值的物質。
通過使用下列步驟得到優選的藥物制劑1.將4.0g玻璃珠稱入定制的4cm GL 25管(珠填充半支管)。
2.加入50mg化合物、用刮刀(spatulum)分散并渦旋。
3.加入2ml明膠溶液(珠∶明膠溶液＝2∶1稱重)并渦旋。
4.加蓋并用鋁箔包封以避光。
5.為研磨物制備平衡重。
6.在Retsch研磨機中以20/s研磨4小時(對某些物質以30/s研磨達24小時)。
7.通過以400g離心2分鐘在與接收小瓶連接的過濾儲蓄器上用兩層濾膜(100μm)從珠上提取混懸劑。
8.將提取物移入量筒。
9.用小體積反復洗滌(本文為1ml步驟)至達到終體積或提取物澄清。
10.用明膠填充至終體積并勻化。
上述描述的制備產生具有1-10μm顆粒大小的式I化合物的微混懸劑。該混懸劑適合于口服應用且用于下述體內藥動學測試。
通過使用下列試驗證實本發明化合物作為src-家族酪氨酸激酶抑制劑的活性。
SRC-抑制劑-試驗參數反應混合物
ATP 5μM肽(Ro+Jal33-Ro) 10μMJal33-Ro 196nMRo9.8μMPT66 230ng/ml試驗緩沖液 4mM MgCl22mM TCEP50mM HEPES0，1％Tween 20pH7.3酶 2.5U/ml抑制劑 最大值25μM最小值0.42nM材料Eu-標記的磷酸酪氫酸抗體-Lck Cisbio Mab PT66-K；-Src EG&G Wallac PT66 Eu-W1024(均為商購)。
肽類RoNH2-A-E-E-E-I-Y-G-E-F-E-A-K-K-K-K-CONH2；和Jal33-RoJal33-G-氨基辛酸-A-E-E-E-I-Y-G-E-F-E-A-K-K-K-K-CONH2，其中Jal33為LightCycler-Red640-N-羥基琥珀酰亞胺酯；由此通過最優化固相肽合成方案、用Zinsser SMP350肽合成儀合成兩種肽類(Merrifield，Fed.Proc.Fed.Amer. Soc.Exp.Biol.21(1962)412)。簡單的說，通過反復偶聯20倍過量的氨基酸將所述肽固定在160mg(22.8μmol級)Rink-Linker修飾的聚苯乙烯固相上，其中所述的氨基酸隨側鏈功能的不同而各自被臨時的哌啶不穩定的Fmoc-和永久的酸不穩定的叔-Bu-、BOC-和Otert-Bu-基團保護。底物序列AEEEIYGEFEAKKKK在N-末端還固定有間隔基氨基酸、即氨基辛酸和甘氨酸。在裂解N-末端臨時保護基后，用1.5倍量的LightCycler-Red 640-N-羥基琥珀酰亞胺酯(購自RocheDiagnostics GmbH)和三乙胺標記仍然連接和被保護的肽。3小時后，用二甲基甲酰胺和異丙醇洗滌樹脂，直到藍色樹脂的洗脫液變無色為止。從固相中取出完全被保護和標記的肽并通過用80％三氟乙酸、10％乙二硫醇、5％硫代茴香醚和5％水的混合物處理使其從永久保護基上釋放。最終通過制備型反相HPLC純化分離底物。該純化步驟得到12.2mg RP-HPLC單峰的純藍色物質(凍干物)。通過MALDI質譜證實同一性[2720.0]。
酶Upstate Lck(p56lck，活性)、Upstate Src(p60c-src，部分純化)購自BI。
時間分辨熒光試驗讀出器Perkin Elmer，Wallac Viktor 1420-040多標記計數器；液相操作系統Beckman Coulter，Biomek 2000。
ATP、Tween 20、HEPES購自Roche Molecular Biochemicals；MgCl2和MnCl2購自Merck Eurolab；TCEP購自Pierce，384 Well低體積熒光板購自Falcon。
分析描述首先將所述酶在15℃下的含有相應量本發明抑制劑的水溶液中預保溫15分鐘。然后通過加入含有ATP、肽和PT66的反應混合物且隨后進行振搖啟動磷酸化反應。立即使用時間分辨熒光光譜法在合適的孔平板讀出器上監測反應的進行情況。
可以通過使用非線性曲線擬合(Excelfit)由反應速率得到IC50-值。
試驗結果
藥動學研究按照下列步驟證實本發明的化合物的改進藥動學特性對29-35g體重的雄性NMRI小鼠口服給予作為微混懸劑的30mg/kg劑量的本發明化合物(7.5％修飾的明膠和0.22％NaCl)(藥物濃度3mg/mL。給藥體積10mL/kg)并作為單劑量給藥。
研究方案在給予化合物后達4小時使動物禁食過夜。對每個口服單劑量而言，將小鼠分成3組，每組4只動物。在0.5、3和24小時時從第1組中、在1和6小時時從第2組中且在2和8小時時從第3組中采集血樣。
通過眼眶后穿刺得到約200μl血樣。通過在室溫下離心從肝素化/EDTA血液中得到血漿樣品并將其冷凍儲存在-20℃下至分析為止。
分析使血漿脫蛋白且隨后通過化合物特異性HPLC-MS法分析化合物的血漿濃度。將WinNonlinTM用于計算藥動學參數。
結果
通過下列非限制性制備實施例進一步解釋本發明，其中使用如下的縮寫TCL薄層色譜法HPLC高效液相色譜法MS質譜法TFA三氟乙酸NMPN-甲基吡咯烷酮DMFN，N-二甲基甲酰胺THF四氫呋喃mCPBA間-氯-過苯甲酸LAH氫化鋁鋰制備實施例原料a)2-羥甲基-6-硝基-1，4-苯并二噁烷用己烷洗滌1.93g 60％氫化鈉并懸浮于90ml DMF中。在5℃下和15分鐘內滴加5.15g 4-硝基兒茶酚在30ml DMF中的溶液。隨后在15分鐘內加入在10ml DMF中的5.00g表溴醇(epibromohydrine)。在室溫下持續攪拌30分鐘、然后在80℃下再攪拌3小時。將該混合物分部分傾入冰水并用二乙醚提取。干燥有機相并蒸發且使殘余物從甲苯中重結晶。在室溫下將第一批產生的晶體(2.78g)懸浮于20ml MeOH、過濾并蒸發濾液而得到1.65g標題產物。
從甲苯母液中又得到0.5g第二批產量。
b)2-羥甲基-6-氨基-1，4-苯并二噁烷在大氣壓和室溫下用10％Pd-C將在120ml MeOH中的4.2g上述硝基化合物氫化3小時。過濾該混合物并蒸發濾液而得到3.13g標題化合物。
c)1′-乙酰基-5-硝基-螺[1，3-苯并間二氧雜環戊烯并-2，4′-哌啶]將156g 65％硝酸與40ml乙酸混合，同時冷卻。在4-8℃下和50分鐘內加入在60m乙酸中的19.8g 1′-乙酰基-螺[1，3-苯并間二氧雜環戊烯并-2，4′-哌啶]。將該混合物在5℃下攪拌1.5小時、然后傾入冰水并用乙酸乙酯提取。用碳酸氫鈉水溶液洗滌合并的有機相并蒸發至得到17.5g標題產物。
d)5-氨基-1′-乙酰基-螺[1，3-苯并間二氧雜環戊烯并-2，4′-哌啶]在環境壓力和溫度下在THF中用Pd-C將上述硝基化合物氫化5小時。過濾并蒸發濾液而得到12.35g標題化合物。
e)5-氨基-螺[1，3-苯并間二氧雜環戊烯并-2，4′-哌啶]將5g 5-氨基-1′-乙酰基-螺[1，3-苯并間二氧雜環戊烯并-2，4′-哌啶](來自d))和5.317g氫氧化鉀在30ml乙醇和10ml水的混合物中回流18小時。在冷卻至室溫后，該混合物固化并用20ml水稀釋且用CH2Cl2提取3次。干燥合并的有機相并蒸發至得到3.45g標題化合物。
f)5-氨基-1′-(2-甲氧基乙基)-螺[1，3-苯并間二氧雜環戊烯并-2，4′-哌啶]將1.134g上述化合物懸浮于30ml THF中并加入0.782g乙基-二異丙胺。在10℃下滴加在3ml THF中的0.764g 2-甲氧基溴乙烷并在室溫下持續攪拌3.5小時，然后將該混合物加熱至50℃下68小時。加入3ml濃碳酸氫鈉水溶液并蒸發THF。再用10ml水稀釋殘余物并用CH2Cl2提取產物且通過硅膠色譜法純化(CHCl3/MeOH 95/5)。
產率0.543g標題化合物。
g)6-硝基-2，3-二氫-苯并[1，4]氧硫雜環己二烯-4，4-二氧化物在0℃下混合2.554g 66％H2SO4和1.454g 65％硝酸。在0℃下分部分加入2.395g 2，3二氫-苯并[1，4]氧硫雜環己二烯-4，4-二氧化物。在攪拌30分鐘后，用水稀釋該混合物并通過過濾分離產物。進行硅膠色譜而得到1.6g標題化合物和0.37g 0.58g的8-硝基異構體。
h)6-氨基-2，3-二氫-苯并[1，4]氧硫雜環己二烯-4，4-二氧化物在大氣氫氣壓力和室溫下在20ml THF和20ml MeOH的混合物中用0.90g 5％Pd-C將0.917g 6-硝基-2，3-二氫-苯并[1，4]氧硫雜環己二烯-4，4-二氧化物(來自g))氫化90分鐘。過濾出催化劑，蒸發濾液并對殘余物進行硅膠色譜而得到370mg標題化合物。
i)6-氨基-4-甲基-4H-苯并[1，4]噻嗪-3-酮在室溫下用0.695g 95％氫化鈉分部分處理在50ml DMF中的4.5g 6-氨基-4H-苯并[1，4]噻嗪-3-酮。30分鐘后，在0℃下滴加3.548g甲基碘且再持續攪拌30分鐘。將該混合物傾入冰和氯化銨溶液并用CH2Cl2提取。進行硅膠色譜而得到3.1g粗產物，通過與二乙醚一起研磨進一步純化。
產率3.00g標題化合物。
j)7-硝基-4-甲基-4H-苯并[1，4]噻嗪-3-酮將7.3g 7-硝基-4H-苯并[1，4]噻嗪-3-酮懸浮于65ml DMF中并用1.6g55％氫化鈉分部分處理。在室溫下持續攪拌0.5小時，然后(than)滴加在15ml DMF中的5.2g甲基碘。再經過3小時后，將該混合物傾入冰水并通過過濾分離標題產物，產率為7.5g。
k)7-氨基-4-甲基-4H-苯并[1，4]噻嗪-3-酮在室溫下用10％Pd-C在THF中氫化3.7g上述硝基化合物。過濾和蒸發溶劑而得到3.07g標題產物。
l)7-硝基-4-甲基-4H-苯并[1，4]噻嗪在室溫下用在THF中的67.57ml 2M硼烷二甲硫復合物逐滴處理在10ml THF中的7g 7-硝基-4-甲基-4H-苯并[1，4]噻嗪-3-酮(來自j))。16小時后，將該混合物傾入飽和碳酸氫鈉水溶液并用乙酸乙酯提取。蒸發溶劑并將固體殘余物與乙醚一起研磨。
產率5.80g標題化合物。
m)7-硝基-4-甲基-4H-苯并[1，4]噻嗪-1，1-二氧化物向在70ml CH2Cl2中的3g 7-硝基-4-甲基-4H-苯并[1，4]噻嗪(來自l))中滴加8.62g 60％mCPBA在100ml CH2Cl2中的溶液、用硫酸鈉干燥。在室溫下攪拌16小時后，用亞硫酸鈉和碳酸鈉水溶液洗滌該混合物，然后蒸發并進行硅膠色譜。
產率2.55g標題化合物和0.34g相應的亞砜。
n)7-氨基-4-甲基-4H-苯并[1，4]噻嗪-1，1-二氧化物如實施例k中所述氫化2.4g上述硝基化合物并通過硅膠色譜法純化。
產率1.15g標題化合物o)7-硝基-4-甲基-4H-苯并[1，4]噻嗪-3-酮-1，1-二氧化物在室溫下用5.387g 60％mCPBA在150ml CH2Cl2中的干燥的溶液處理在30ml CH2Cl2中的2g 7-硝基-4-甲基-4H-苯并[1，4]噻嗪-3-酮(來自j))。攪拌16小時后，用亞硫酸氫鈉和碳酸鈉水溶液洗滌該混合物、干燥并蒸發。將殘余物與乙醚一起研磨。
產率2.18g標題化合物。
p)7-氨基-4-甲基-4H-苯并[1，4]噻嗪-3-酮-1，1-二氧化物在大氣壓下和70ml THF中用3g 10％Pd-C氫化1.5g上述硝基化合物。2小時后，過濾該混合物并蒸發濾液。將固體殘余物與乙醚一起研磨。
產率1.03g標題化合物。
q)2-甲基-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基胺將2.643g 4-氨基-N-甲基苯鄰二甲酰亞胺懸浮于50ml THF中并在室溫下加入到在50ml THF中的1.328g氫化鋁鋰中。將該混合物回流3小時，然后在室溫下再攪拌3天。通過加入水處理過量的LAH并將該混合物通過硅藻土過濾。分離水相并用CH2Cl2提取。干燥合并的有機相并蒸發。將殘余物與在MeOH中的HCl一起攪拌并蒸發至得到1.6g標題化合物，為鹽酸鹽。
r)2-(1，1-二甲基-2-羥乙基)-5-硝基-2，3-二氫-1H-異吲哚將20g 4-硝基-鄰苯二甲酸酐和8.94g 2-氨基-2-甲基丙醇加熱至170℃下30分鐘。冷卻后，加入水和CH2Cl2并分離有機相、濃縮并通過硅膠色譜法純化(洗脫劑CH2Cl2/MeOH 97/3)。
s)2-(1，1-二甲基-2-羥乙基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基胺在室溫和大氣壓下用2.2g Pd/炭(10％)在130ml THF中氫化1.1g上述硝基-化合物。2.5小時后，過濾該混合物并蒸發濾液而得到0.78g標題化合物。
t)1-(4-甲氨基-2-甲基硫烷基-嘧啶-5-基)-乙醇將1.5g 4-甲氨基-2-甲基硫烷基-嘧啶-5-醛溶于30ml THF并在低于5℃下滴加14ml溴化甲基鎂在乙醚中的1.4M溶液。在0℃下攪拌1小時后，在30分鐘內再加入14ml格利雅溶液。在0℃下持續攪拌30分鐘且最終在RT下攪拌25小時。用飽和氯化銨溶液使該混合物猝滅并用乙酸乙酯提取。
產率1.57g粗標題產物。
u)[5-(1-氯-乙基)-2-甲基硫烷基-嘧啶-4-基]-甲胺將來自實施例t)的0.25g產物溶于10ml氯仿并滴加0.30g亞硫酰氯。將該混合物回流2小時并蒸發至得到0.31g標題產物，為鹽酸鹽。
v)5-[1-(2-溴-苯基氨基)-乙基]-2-甲基硫烷基-嘧啶-4-基-甲胺將在10ml中的0.25g來自實施例u)的產物和34mg碘化鈉在RT下攪拌15分鐘。在RT下將所得混懸劑滴加到0.21g 2-溴苯胺和0.33g N-乙基-二-異丙胺在5ml乙腈中的混合物中。持續攪拌16小時并用20ml水稀釋該混合物且用二氯甲烷提取。進行硅膠色譜(洗脫劑CHCl3)而得到158mg標題產物。
w)2-[(4-甲氨基-2-甲基硫烷基-嘧啶-5-基甲基)-氨基]-芐腈按照與實施例v)類似的方式由1.0g(5-氯甲基-2-甲基硫烷基-嘧啶-4-基)-甲胺鹽酸鹽和0.527g 2-氰基-苯胺得到0.4g標題產物。
x)2-羥甲基-7-硝基-1，4-苯并二噁烷在10℃下200ml DMF中攪拌17.6g 4-硝基兒茶酚和11.0g碳酸氫鉀。滴加在10ml DMF中的13.99g表溴醇并在60℃下再持續攪拌17小時。蒸發DMF并用50ml水稀釋殘余物且用乙酸乙酯提取。用苛性鈉和水洗滌合并的有機相、干燥并蒸發。將粗油狀產物與200ml甲苯一起加熱至90℃并從不溶性部分中筆洗上清液。在冷卻至RT后，再次從不溶性油狀物中筆洗該溶液并保持在RT下3天。得到第一批0.75g晶體標題產物。蒸發母液并在RT下將殘余物溶于20二氯甲烷。種晶并冷卻至0℃而又得到2.78g晶體標題產物。
y)2-氯甲基-7-硝基-1，4-苯并二噁烷在4ml甲苯中用2.06g亞硫酰氯處理在50ml甲苯中的3.5g來自實施例x)的產物并回流1.5小時。再加入0.5g亞硫酰氯并持續回流7小時。再加入0.5g亞硫酰氯并再持續回流9小時。在冷卻至RT后，加入1.6ml吡啶并將該混合物加熱至60-70℃下16小時，同時用TLC控制。再加入0.2ml吡啶并再持續加熱4小時。最終用水和碳酸鈉溶液洗滌該混合物、干燥并蒸發至得到3.05g粗標題產物，不經進一步純化將其用于隨后的反應。
z)4-(7-硝基-2，3-二氫-苯并[1，4]二氧芑-2-基甲基)-嗎啉將在2.5ml NMP中的來自實施例x)的0.80g氯甲基化合物、0.61g嗎啉和50mg碘化鈉加熱至100℃下21小時。用10ml水和1ml飽和碳酸鈉溶液稀釋該混合物并用乙酸乙酯提取。對粗產物進行硅膠色譜而得到0.67mg標題產物。
za)3-(2-溴-苯基)-1，4-二甲基-7-甲基硫烷基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮，對映體1+2向在10ml干DMF中的1.1g來自實施例v)的產物中加入0.236氫化鈉(95％)，同時冷卻。在RT下攪拌20分鐘后，將該混合物冷卻至5℃并用總計1.01g羰二咪唑分小部分處理。在5℃下持續攪拌30分鐘并在RT下攪拌過夜。然后通過在冷卻環境下加入少量水處理過量的氫化鈉。用水稀釋該混合物、用乙酸乙酯提取并蒸發合并的有機相。
對粗產物進行手性相Chiracel OD-CSP(來自Daicel的20μm商品材料；洗脫劑庚烷/異丙醇1∶1)色譜而得到各470mg標題產物的兩種分離的對映體，為淡黃色粉末。第一次和第二次洗脫的對映體分別稱作′對映體1′和′對映體2′。同樣，來源于兩種對映體原料之一的手性終產物的相應對映體也分別稱作′對映體1′或′對映體2′。
zb)3-(2-溴-苯基)-7-甲磺酰基-1，4-二甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮，對映體1將0.628g商品間-氯過苯甲酸(77％)溶于50ml CH2Cl2并通過用硫酸鈉過濾干燥該溶液。在RT下將干燥的MCPBA溶液滴加到0.437g來自實施例za)的對映體1在20ml CH2Cl2中的溶液中并持續攪拌過夜。通過用稀亞硫酸氫鈉溶液處理過量的過酸。用碳酸氫鈉水溶液洗滌有機相、干燥并蒸發。使用乙酸乙酯/庚烷進行硅膠色譜而得到430mg標題產物。
終產物實施例13-(2-溴-苯基)-7-(2-羥甲基-2，3-二氫-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮將1.2g 3-(2-溴-苯基)-3，4-二氫-7-甲磺酰基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1 H)-酮和1.54g 2-羥甲基-6-氨基-1，4-苯并二噁烷(原料b))在20ml NMP中混合。加入0.348g TFA并將該混合物加熱至140℃下7小時。將該混合物傾入10％HCl水溶液并用乙酸乙酯提取。將水相調節至pH＞9并用CH2Cl2提取。合并有機相并蒸發。在室溫下將殘余物懸浮于CH2Cl2并過濾出固體雜質。再用水洗滌濾液以除去剩余的NMP、然后蒸發。將殘余物與水一起研磨、過濾并干燥至得到0.6g標題產物(mp156-158℃)。
NMR(CDCl3，以ppm計的6)2.03(寬峰s，1H)；3.48(s，3H)；3.89(dd，1H)；3.95(dd，1H)；4.15(dd，1H)；4.28(m，1H)；4.33(dd，1H)；4.55(d，1H)；4.71(d，1H)；6.89(d，1H)；6.98(m，2H)；7.25(m，1H)；7.40(m，3H)；7.71(d，1H)；7.98(s，1H)。
MS(APCI+)498(M+1)，420(M-Br)實施例23-(2-溴-苯基)-3，4-二氫-7-(2-氯甲基苯并二噁烷-6-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮將170mg來自實施例1的產物懸浮于20ml甲苯中。在100℃下加入45mg亞硫酰氯并將該混合物加熱至回流。在幾小時后，TLC和HPLC顯示轉化完全并在90℃下通過施加少許真空蒸餾出溶劑。不經進一步純化而使用由此獲得的氯甲基衍生物。
實施例33-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(2-嗎啉-4-基甲基-2，3-二氫-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮將來自實施例2的85mg氯甲基化合物和130mg嗎啉在8ml NMP中混合。加入24mg溴化四丁基銨并將該混合物加熱至50℃下18小時。再加入24mg溴化四丁基銨并使溫度升至100℃下16小時，然后再升至130℃下6小時。通過HPLC-MS分離粗混合物而得到40mg標題化合物。
實施例43-(2-溴-苯基)-3，4-二氫-7-[2-(對-甲苯磺酰基)氧基甲基-苯并二噁烷-6-基]氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮將520mg來自實施例1的產物溶于20ml CHCl3。加入213mg甲苯磺酰氯和13mg 4-二甲氨吡啶并將該混合物冷卻至5℃。滴加166mg吡啶并在室溫下持續攪拌3小時。將該混合物在60℃下攪拌1小時，然后再加入105mg甲苯磺酰氯并在室溫下持續攪拌16小時。用50ml CHCl3稀釋該混合物并用0.5M HCl洗滌、干燥并蒸發。進行硅膠色譜而得到180mg標題化合物。
實施例53-(2-溴-苯基)-7-(2-二甲氨基甲基-2，3-二氫-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮用0.62ml 2M在THF中的二甲胺處理在8ml NMP中的90mg來自實施例4的甲苯磺酸鹽并在室溫下攪拌3天。將該混合物加熱至50℃下4小時、然后再加熱至65℃下2小時。在45℃下持續攪拌過夜。通過HPLC-MS進行分離而得到污染有NMP的粗產物，通過溶于CHCl3并用水洗滌而將其進一步純化。
產率27mg標題化合物。
實施例63-(2-溴-苯基)-3，4-二氫-7-(1′-乙酰基-螺[1，3-苯并間二氧雜環戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮用23mg TFA處理在0.8ml NMP中的80mg 3-(2-溴-苯基)-3，4-二氫-7-甲磺酰基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮和207mg 5-氨基-1′-乙酰基-螺[1，3-苯并間二氧雜環戊烯并-2，4′-哌啶](原料d))并在N2環境中加熱至140℃下15小時。通過制備型HPLC-MS進行純化，隨后將該體系溶于乙酸乙酯并用稀HCl水溶液洗滌而得到57mg標題化合物(mp200-201℃)。
實施例73-(2-溴-苯基)-3，4-二氫-7-(螺[1，3-苯并間二氧雜環戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮在0℃下將在2ml THF中的82mg 5-氨基-螺[1，3-苯并間二氧雜環戊烯并-2，4′-哌啶](原料e))加入到0.4ml 1M六甲基二硅疊氮化鋰在THF中的溶液中并攪拌20分鐘。在0℃下加入作為在2ml THF中的混懸液的89mg3-(2-溴-苯基)-3，4-二氫-7-甲磺酰基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮并在室溫下持續攪拌16小時。將該混合物傾入水并用乙酸乙酯提取。濃縮有機相并通過制備型HPLC-MS純化。將含有產物的級分溶于CH2Cl2并用氫氧化鈉水溶液洗滌、然后干燥并蒸發。
產率5mg標題化合物(mp229-231℃)。
實施例83-(2-溴-6-氟-苯基)-7-(4，4-二氧代-3，4-二氫-2H-4λ*6*-苯并[1，4]氧硫雜環己二烯-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮0.2ml在乙醚中的2M HCl處理在0.8ml NMP中的83mg 3-(2-溴-6-氟苯基)-3，4-二氫-7-甲磺酰基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮和80mg6-氨基-2，3-二氫-苯并[1，4]氧硫雜環己二烯-4，4-二氧化物(原料h))并加熱至120℃下6小時。通過制備型HPLC-MS從該混合物中分離21mg標題產物(mp230-233℃)。
實施例 8a3-(2-溴-苯基)-7-(4，4-二氧代-3，4-二氫-2H-4λ*6*-苯并[1，4]氧硫雜環己二烯-6-基氨基)-1，4-二甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮，對映體1可以按照與實施例8類似的步驟、但使用100mg來自實施例zb)的產物和145mg原料h)得到標題化合物，為淡黃色粉末。
產率25mg標題化合物。
實施例93-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-3-氧代-3，4-二氫-2H-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮用92mg TFA處理在4ml NMP中的320mg 3-(2-溴-苯基)-3，4-二氫-7-甲磺酰基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮和626mg 7-氨基-4-甲基-4H-苯并[1，4]噻嗪-3-酮(原料k))并加熱至140℃下12小時。用HCl水溶液稀釋該混合物并通過過濾收集沉淀的產物。
產率245mg標題化合物。
實施例103-(2-溴-苯基)-7-(3-甲氧基-4-甲基-1-氧代-1，4-二氫-1λ*4*-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮在室溫下將100mg來自實施例9的化合物和108mg過硫酸氫鉀制劑(oxone)在2ml MeOH中攪拌17小時。過濾該混合物并用THF洗滌殘余物。濃縮合并的濾液并通過制備型HPLC-MS純化而得到10mg標題化合物。
實施例113-(2-溴-6-氟-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-1，1-二氧代-1，2，3，4-四氫-1λ*6*-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮用0.2ml 2M在乙醚中的HCl處理在0.8ml NMP中的83mg 3-(2-溴-6-氟苯基)-3，4-二氫-7-甲磺酰基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮和85mg7-氨基-4-甲基-4H-苯并[1，4]噻嗪-1，1-二氧化物(原料n))并加熱至120℃下6小時。通過制備型HPLC-MS純化該混合物而得到34mg標題化合物。
實施例123-(2-溴-6-氟-苯基)-7-[2-(2-羥基-1，1-二甲基-乙基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮鹽酸鹽將80mg 3-(2-溴-6-氟苯基)-3，4-二氫-7-甲磺酰基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮和82mg 2-(1，1-二甲基-2-羥乙基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基胺(原料s))在1ml干NMP中混合。加入0.2ml在乙醚中的2M HCl并將該混合物在N2氣體環境中加熱至120℃。通過制備型HPLC-MS從該混合物中分離產物并通過二次硅膠色譜法進一步純化。將純級分溶于CH2Cl2并用一個當量2M在乙醚中的HCl處理。蒸發而得到1.5mg標題產物的鹽酸鹽。
實施例13按照上文所述的制備方法和實施例得到下列其它化合物
13-13-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(3-氧代-3，4-二氫-2H-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；13-25-[6-(2-溴-苯基)-8-甲基-7-氧代-5，6，7，8-四氫-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-基氨基]-2-甲基-異吲哚-1，3-二酮；13-33-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(2-甲基-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮鹽酸鹽；13-43-(2-溴-苯基)-7-(3，3-二氧代-2，3-二氫-3λ*6*-苯并[1，3]氧雜硫羥-5-基氨基)-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；13-53-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-1，3-二氧代-1，2，3，4-四氫-1λ*4*-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；13-63-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-3，4-二氫-2H-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；13-73-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(3-氧代-3，4-二氫-2H-苯并[1，4]噻嗪-6-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；13-87-(苯并[1，3]間二氧雜環戊烯-5-基氨基)-3-(2-溴-苯基)-1-甲基-3，4-二氫-1H嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；13-93-(2-溴-苯基)-7-(2，3-二氫-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；13-103-(2-溴-苯基)-3，4-二氫-7-(1′-乙氧羰基-螺[1，3-苯并間二氧雜環戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；
13-115-[6-(2-溴-苯基)-8-甲基-7-氧代-5，6，7，8-四氫-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-基氨基]-異吲哚-1，3-二酮；13-123-(2-溴-6-氟-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-3-氧代-3，4-二氫-2H-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(mp145-149℃)；13-133-(2-溴-6-氟-苯基)-1-甲基-7-(3-氧代-3，4-二氫-2H-苯并[1，4]噻嗪-6-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；13-143-(2-溴-6-氟苯基)-3，4-二氫-7-(1’-乙酰基-螺[1，3-苯并間二氧雜環戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；13-153-(2-溴-6-氟苯基)-3，4-二氫-7-(1’-乙氧羰基-螺[1，3-苯并間二氧雜環戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；13-165-[6-(2-溴-6-氟-苯基)-8-甲基-7-氧代-5，6，7，8-四氫-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-基氨基]-2-甲基-異吲哚-1，3-二酮；13-173-(2-溴-6-氟-苯基)-7-(3，3-二氧代-2，3-二氫-3λ*6*-苯并[1，3]氧雜硫羥-5-基氨基)-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；13-183-(2-溴-苯基)-3，4-二氫-7-(1′-乙基-螺[1，3-苯并間二氧雜環戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；13-193-(2-溴-苯基)-7-(2，3-二氫-苯并[1，4]氧硫雜環己二烯-7-基氨基)-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；13-203-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-3-氧代-3，4-二氫-2H-苯并[1，4]噻嗪-6-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；
13-213-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(2-吡咯烷-1-基甲基-2，3-二氫-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(mp201-203℃)；13-223-(2-溴-苯基)-7-(2-環丙氨基甲基-2，3-二氫-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；13-233-(2-溴-6-氟-苯基)-7-(2-羥甲基-2，3-二氫-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；13-243-(2-溴-苯基)-7-(4，4-二氧代-3，4-二氫-2H-4λ*6*-苯并[1，4]氧硫雜環己二烯-7-基氨基)-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；13-253-(2-溴-6-氟-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-3-氧代-3，4-二氫-2H-苯并[1，4]噻嗪-6-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；13-263-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-1，1-二氧代-1，2，3，4-四氫-1λ*6*-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(mp250-251℃)；13-273-(2-溴-苯基)-7-(4，4-二氧代-3，4-二氫-2H-4λ*6*-苯并[1，4]氧硫雜環己二烯-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；13-283-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-1，1，3-三氧代-1，2，3，4-四氫-1λ*6*-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；13-293-(2-溴-6-氟-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-1，1，3-三氧代-1，2，3，4-四氫-1λ*6*-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；(mp271-275℃)；13-303-(2-溴-苯基)-3，4-二氫-7-(1′-(2-甲氧基乙基)-螺[1，3-苯并間二氧雜環戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；13-313-(2-溴-6-氟苯基)-3，4-二氫-7-(1′-(2-甲氧基乙基)-螺[1，3-苯并間二氧雜環戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；13-323-(2-溴-6-氟-苯基)-7-(2-二甲氨基甲基-2，3-二氫苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；13-333-(2-溴-苯基)-3，4-二氫-7-(1′-甲基-螺[1，3-苯并間二氧雜環戊烯并-2，4′哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；13-347-(苯并[1，3]間二氧雜環戊烯-5-基氨基)-3-(2，4-二氯-苯基)-1-(4-甲氧基-苯基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；13-353-(2-溴-6-氟-苯基)-3，4-二氫-7-(1′-甲基-螺[1，3-苯并間二氧雜環戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮(mp191-195℃)；13-363-(2-溴-苯基)-3，4-二氫-7-(1′-氰基甲基-螺[1，3-苯并間二氧雜環戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；13-373-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(3-吡咯烷-1-基甲基-2，3-二氫苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；13-383-(2-溴-6-氟-苯基)-1-甲基-7-(3-吡咯烷-1-基甲基-2，3-二氫苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；13-393-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(3-嗎啉-4-基甲基-2，3-二氫-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；13-403-(2-溴-6-氟-苯基)-1-甲基-7-(3-嗎啉-4-基甲基-2，3-二氫苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；13-413-(2-溴-苯基)-7-(3-二甲氨基甲基-2，3-二氫-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；13-423-(2-溴-6-氟-苯基)-7-(3-二甲氨基甲基-2，3-二氫苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；13-433-(2-溴-苯基)-7-(3-羥甲基-2，3-二氫-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；13-443-(2-溴-6-氟-苯基)-7-(3-羥甲基-2，3-二氫-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；13-453-(2-溴-5-甲氧基苯基)-3，4-二氫-7-(螺[1，3-苯并間二氧雜環戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；13-463-(2-溴-6-氟-苯基)-3，4-二氫-7-(螺[1，3-苯并間二氧雜環戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；NMR(CDCl3，以ppm計的δ)2.00(m，4H)；3.07(m，4H)；3.45(s，3H)；4.58(s，2H)；6.71(d，1H)；6.83(dd，1H)；6.92(s，1H)；7.19(m，1H)；7.25(m，2H)；7.47(dd，1H)；7.96(s，1H)，MS(APCI+)541(M+1)，Mp146-153℃。
13-472-[7-(4，4-二氧代-3，4-二氫-2H-4λ*6*-苯并[1，4]氧硫雜環己二烯-6-基氨基)-1-甲基-2-氧代-1，4-二氫-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3-基]-芐腈；13-483-(2-溴-5-甲氧基-苯基)-7-(4，4-二氧代-3，4-二氫-2H-4λ*6*-苯并[1，4]氧硫雜環己二烯-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；
13-497-(4，4-二氧代-3，4-二氫-2H-4λ*6*-苯并[1，4]氧硫雜環己二烯-6-基氨基)-3-(2-氟-6-甲氧基-苯基)-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；13-503-(2-溴-苯基)-7-(4，4-二氧代-3，4-二氫-2H-4λ*6*-苯并[1，4]氧硫雜環己二烯-6-基氨基)-1，4-二甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮，對映體2；13-513-(2-溴-苯基)-1，4-二甲基-7-(4-甲基-1，1，3-三氧代-1，2，3，4-四氫-1λ*6*-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮，對映體2；13-523-(2-溴-苯基)-1，4-二甲基-7-(4-甲基-1，1，3-三氧代-1，2，3，4-四氫-1λ*6*-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮，對映體1；13-532-[7-(4，4-二氧代-3，4-二氫-2H-4λ*6*-苯并[1，4]氧硫雜環己二烯-6-基氨基)-1-甲基-2-氧代-1，4-二氫-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3-基]-3-氟-芐腈。
參考文獻目錄Ansel，H.等，《藥物劑型與藥物傳遞系統》(Pharmaceutical DosageForms and Drug Delivery Systems)，第6版，1995，pp.196和1456-1457；Kinko，K.等，《加拿大化學雜志》(Can.J.Chem.)51(1973)333；Merrifield，Fed.《美國食品與實驗生物學協會學報》(Proc.Fed.Amer.Soc.Exp.Biol.)21(1962)412；Okuda，Price，《有機化學雜志》(J.Org.Chem.)24(1959)14；WO 00/24744；WO 01/29041；WO 01/29042；WO 99/61444。
權利要求
1.式I的化合物及其藥物上可接受的鹽或N-氧化物 其中R1表示氫或全部任選被取代的烷基、環烷基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳基烷基；R2表示鹵素、氰基、CF3；R3獨立地為鹵素、羥基、氰基、硝基、氨基、酰氨基、-CONH2、-SO2NH2、-S(O)m-烷基、-NH-烷基、-N(烷基)2、-CONH(烷基)、-CON(烷基)2、-SO2NH(烷基)、-SO2N(烷基)2或全部任選被取代的烷基、烷氧基、烷氧基烷基；R4表示氫、烷基、烷氧基、氰基；且A為如下通式的基團 或 R5為氫、鹵素、羥基、氰基、氨基、酰氨基、烷基、烷氧基、烷氧基烷基、-CONH2、-SO2NH2、-S(O)m-烷基、-NH-烷基、-N(烷基)2、-CONH(烷基)、-CON(烷基)2、-SO2NH(烷基)、-SO2N(烷基)2；R6、R6’彼此獨立地表示氫、烷基或氧代；R7為氫、酰基、烷氧羰基、烷氧基烷基；或任選被羥基、氰基、-S(O)m-烷基、氨基、-NH-烷基或-N(烷基)2取代的烷基；R8、R8’彼此獨立地表示氫、氧代、烷氧基、烷氧基烷基；或任選被氫、羥基、氰基、吡咯烷-1-基、嗎啉代、哌嗪-1-基、4-烷基-哌嗪-1-基、哌啶-1-基、-S(O)m-烷基或基團NR9R9’取代的烷基，其中R9和R9′獨立地為氫、烷基或環烷基；X為氧或S(O)m；虛線為任選的第二個化學鍵；n為0、1或2；m為0、1或2；p為0、1或2；條件是當R8和R8’表示氧代基團時，該氧代基團不與S(O)m基團鄰接。
2.權利要求1的式I的化合物及其藥物上可接受的鹽或N-氧化物，其中R1表示氫或全部任選被取代的烷基、環烷基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳基烷基；R2表示鹵素、氰基、CF3；R3獨立地為鹵素、羥基、氰基、硝基、氨基、酰氨基、-CONH2、-SO2NH2、-S(O)m-烷基、-NH-烷基、-N(烷基)2、-CONH(烷基)、-CON(烷基)2、-SO2NH(烷基)、-SO2N(烷基)2或全部任選被取代的烷基、烷氧基、烷氧基烷基；R4表示氫、烷基、烷氧基、氰基；且A為如下通式的基團 R5為氫、鹵素、羥基、氰基、氨基、酰氨基、烷基、烷氧基、烷氧基烷基、-CONH2、-SO2NH2、-S(O)m-烷基、-NH-烷基、-N(烷基)2、-CONH(烷基)、-CON(烷基)2、-SO2NH(烷基)、-SO2N(烷基)2；R6、R6’彼此獨立地表示氫、烷基或氧代；R7為氫、酰基、烷氧羰基、烷氧基烷基；或任選被羥基、氰基、-S(O)m-烷基、氨基、-NH-烷基或-N(烷基)2取代的烷基；R8、R8’彼此獨立地表示氫、氧代、烷氧基、烷氧基烷基；或任選被氫、氰基、吡咯烷-1-基、嗎啉代、哌嗪-1-基、4-烷基-哌嗪-1-基、哌啶-1-基、-S(O)m-烷基或基團NR9R9’取代的烷基，其中R9和R9′獨立地為氫、烷基或環烷基；X為氧或S(O)m；虛線為任選的第二個化學鍵；n為0、1或2；m為0、1或2；p為0、1或2；條件是當R8和R8’表示氧代基團時，該氧代基團不與S(O)m基團鄰接。
3.權利要求2的化合物及其藥物上可接受的鹽，其中A為如權利要求1所定義的式A-1、A-2、A-3、A-4、A-5或A-6的基團；R1為任選取代的烷基或芳基；R2為鹵素或氰基；R3為鹵素；n為0或1；R5為氫；且R4為氫或甲基。
4.權利要求3所述的化合物；7-(苯并[1，3]間二氧雜環戊烯-5-基氨基)-3-(2，4-二氯-苯基)-1-(4-甲氧基-苯基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；2-[7-(4，4-二氧代-3，4-二氫-2H-4λ*6*-苯并[1，4]氧硫雜環己二烯-6-基氨基)-1-甲基-2-氧代-1，4-二氫-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3-基]-芐腈。
5.權利要求2的化合物及其藥物上可接受的鹽，其中A為基團A-1，其中R5為氫；R7如權利要求2所定義；p為0；且R1為烷基；R2為鹵素；R3為鹵素；n為0或1；R4為氫。
6.權利要求5所述的化合物，3-(2-溴-苯基)-3，4-二氫-7-(1′-乙酰基-螺[1，3-苯并間二氧雜環戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；3-(2-溴-苯基)-3，4-二氫-7-(1′-乙氧羰基-螺[1，3-苯并間二氧雜環戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；3-(2-溴-6-氟苯基)-3，4-二氫-7-(1′-乙酰基-螺[1，3-苯并間二氧雜環戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；3-(2-溴-6-氟苯基)-3，4-二氫-7-(1′-乙氧羰基-螺[1，3-苯并間二氧雜環戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；3-(2-溴-苯基)-3，4-二氫-7-(1′-乙基-螺[1，3-苯并間二氧雜環戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；3-(2-溴-苯基)-3，4-二氫-7-(1′-(2-甲氧基乙基)-螺[1，3-苯并間二氧雜環戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；3-(2-溴-6-氟苯基)-3，4-二氫-7-(1′-(2-甲氧基乙基)-螺[1，3-苯并間二氧雜環戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；3-(2-溴-苯基)-3，4-二氫-7-(螺[1，3-苯并間二氧雜環戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；3-(2-溴-苯基)-3，4-二氫-7-(1′-甲基-螺[1，3-苯并間二氧雜環戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；3-(2-溴-6-氟-苯基)-3，4-二氫-7-(螺[1，3-苯并間二氧雜環戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；3-(2-溴-6-氟-苯基)-3，4-二氫-7-(1′-甲基-螺[1，3-苯并間二氧雜環戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；3-(2-溴-苯基)-3，4-二氫-7-(1′-氰基甲基-螺[1，3-苯并間二氧雜環戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；3-(2-溴-5-甲氧基苯基)-3，4-二氫-7-(螺[1，3-苯并間二氧雜環戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮。
7.權利要求2的化合物及其藥物上可接受的鹽，其中A為基團A-2，其中R5為氫；X為氧；R8、R8’獨立地表示氫；或任選被氫、氰基、吡咯烷-1-基、嗎啉代、哌嗪-1-基、4-烷基-哌嗪-1-基、哌啶-1-基、-S(O)m-烷基或基團NR9R9’取代的烷基，其中R9和R9′獨立地為氫、烷基或環烷基；且R1為烷基；R2為鹵素；R3為鹵素；n為0或1；且R4為氫。
8.權利要求7所述的化合物3-(2-溴-苯基)-7-(2，3-二氫-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(2-吡咯烷-1-基甲基-2，3-二氫-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(3-吡咯烷-1-基甲基-2，3-二氫-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-7-(2-二甲氨基甲基-2，3-二氫-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-6-氟-苯基)-7-(2-二甲氨基甲基-2，3-二氫-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-7-(3-二甲氨基甲基-2，3-二氫-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-6-氟-苯基)-7-(3-二甲氨基甲基-2，3-二氫苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-7-(2-環丙氨基甲基-2，3-二氫-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(2-嗎啉-4-基甲基-2，3-二氫苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(3-嗎啉-4-基甲基-2，3-二氫苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-6-氟-苯基)-1-甲基-7-(3-嗎啉-4-基甲基-2，3-二氫苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-6-氟-苯基)-1-甲基-7-(3-吡咯烷-1-基甲基-2，3-二氫苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。
9.權利要求1的化合物及其藥物上可接受的鹽，其中A為基團A-2，其中R5為氫；X為氧；R8為氫；且R8’為被羥基取代的烷基；且R1為烷基；R2為鹵素；R3為鹵素；n為0或1；且R4為氫。
10.權利要求9所述的化合物3-(2-溴-苯基)-7-(2-羥甲基-2，3-二氫-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-7-(3-羥甲基-2，3-二氫-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-6-氟-苯基)-7-(3-羥甲基-2，3-二氫-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；或3-(2-溴-6-氟-苯基)-7-(2-羥甲基-2，3-二氫-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。
11.權利要求2的化合物及其藥物上可接受的鹽，其中A為基團A-2，其中R5為氫；X為S(O)m；m為0、1或2；R8、R8′表示氫；且R1為烷基；R2為鹵素；R3為鹵素；n為0或1；R4為氫。
12.權利要求11所述的化合物3-(2-溴-苯基)-7-(2，3-二氫-苯并[1，4]氧硫雜環己二烯-7-基氨基)-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-7-(4，4-二氧代-3，4-二氫-2H-4λ*6*-苯并[1，4]氧硫雜環己二烯-7-基氨基)-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-6-氟-苯基)-7-(4，4-二氧代-3，4-二氫-2H-4λ*6*-苯并[1，4]氧硫雜環己二烯-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-7-(4，4-二氧代-3，4-二氫-2H-4λ*6*-苯并[1，4]氧硫雜環己二烯-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。
13.權利要求2的化合物及其藥物上可接受的鹽，其中A為基團A-3，其中R5為氫；R7為氫或烷基；X為S(O)m；m為0、1或2；R8、R8’獨立地表示氫、氧代或烷氧基，條件是當R8、R8’之一為氧代基團時，虛線不存在，而當R8、R8’為氫或烷氧基時，虛線可以表示形成雙鍵的另一個鍵；且R1為烷基；R2為鹵素；R3為鹵素；n為0或1；R4為氫。
14.權利要求13所述的化合物3-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(3-氧代-3，4-二氫-2H-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-3-氧代-3，4-二氫-2H-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-1，3-二氧代-1，2，3，4-四氫-1λ*4*-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-3，4-二氫-2H-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(3-氧代-3，4-二氫-2H-苯并[1，4]噻嗪-6-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-6-氟-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-3-氧代-3，4-二氫-2H-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-6-氟-苯基)-1-甲基-7-(3-氧代-3，4-二氫-2H-苯并[1，4]噻嗪-6-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-3-氧代-3，4-二氫-2H-苯并[1，4]噻嗪-6-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-7-(3-甲氧基-4-甲基-1-氧代-1，4-二氫-1λ*4*-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-6-氟-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-3-氧代-3，4-二氫-2H-苯并[1，4]噻嗪-6-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-6-氟-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-1，1-二氧代-1，2，3，4-四氫-1λ*6*-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-1，1-二氧代-1，2，3，4-四氫-1λ*6*-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-1，1，3-三氧代-1，2，3，4-四氫-1λ*6*-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-6-氟-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-1，1，3-三氧代-1，2，3，4-四氫-1λ*6*-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。
15.權利要求2的化合物及其藥物上可接受的鹽，其中A為基團A-4，其中R5為氫；R6、R6′獨立地表示氫或氧代；R7為氫；或任選被羥基、氰基、-S(O)m-烷基、氨基、-NH-烷基或-N(烷基)2取代的烷基；且R1為烷基；R2為鹵素；R3為鹵素；n為0或1；R4為氫。
16.權利要求15所述的化合物5-[6-(2-溴-苯基)-8-甲基-7-氧代-5，6，7，8-四氫-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-基氨基]-2-甲基-異吲哚-1，3-二酮；3-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(2-甲基-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮鹽酸鹽；5-[6-(2-溴-苯基)-8-甲基-7-氧代-5，6，7，8-四氫-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-基氨基]-異吲哚-1，3-二酮；5-[6-(2-溴-6-氟-苯基)-8-甲基-7-氧代-5，6，7，8-四氫-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-基氨基]-2-甲基-異吲哚-1，3-二酮；3-(2-溴-6-氟-苯基)-7-[2-(2-羥基-1，1-二甲基-乙基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮鹽酸鹽。
17.權利要求2的化合物及其藥物上可接受的鹽，其中A為基團A-5，其中R5為氫；X為氧；R8、R8’彼此獨立地表示氫或烷基；且R1為烷基；R2為鹵素；R3為鹵素；n為0或1；R4為氫。
18.權利要求17所述的化合物7-(苯并[1，3]二氧代-5-基氨基)-3-(2-溴-苯基)-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。
19.權利要求2的化合物及其藥物上可接受的鹽，其中A為基團A-5，其中R5為氫；X為S(O)m；m為0、1或2；R8、R8’彼此獨立地表示氫或烷基；且R1為烷基；R2為鹵素；R3為鹵素；n為0或1；R4為氫。
20.權利要求19所述的化合物3-(2-溴-6-氟-苯基)-7-(3，3-二氧代-2，3-二氫-3λ*6*-苯并[1，3]氧雜硫羥-5-基氨基)-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-7-(3，3-二氧代-2，3-二氫-3λ*6*-苯并[1，3]氧雜硫羥-5-基氨基)-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。
21.權利要求2的化合物及其藥物上可接受的鹽，其中A為基團A-6，其中R5為氫；R6、R6′、R7具有權利要求2所給出的含義；且R1為烷基；R2為鹵素；R3為鹵素；n為0或1；R4為氫。
22.權利要求2所述的化合物3-(2-溴-5-甲氧基-苯基)-7-(4，4-二氧代-3，4-二氫-2H-4λ*6*-苯并[1，4]氧硫雜環己二烯-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；7-(4，4-二氧代-3，4-二氫-2H-4λ*6*-苯并[1，4]氧硫雜環己二烯-6-基氨基)-3-(2-氟-6-甲氧基-苯基)-1-甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-7-(4，4-二氧代-3，4-二氫-2H-4λ*6*-苯并[1，4]氧硫雜環己二烯-6-基氨基)-1，4-二甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮，對映體1；3-(2-溴-苯基)-7-(4，4-二氧代-3，4-二氫-2H-4λ*6*-苯并[1，4]氧硫雜環己二烯-6-基氨基)-1，4-二甲基-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮，對映體2；3-(2-溴-苯基)-1，4-二甲基-7-(4-甲基-1，1，3-三氧代-1，2，3，4-四氫-1λ*6*-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；對映體2；3-(2-溴-苯基)-1，4-二甲基-7-(4-甲基-1，1，3-三氧代-1，2，3，4-四氫-1λ*6*-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氫-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮，對映體1；和2-[7-(4，4-二氧代-3，4-二氫-2H-4λ*6*-苯并[1，4]氧硫雜環己二烯-6-基氨基)-1-甲基-2-氧代-1，4-二氫-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3-基]-3-氟-芐腈。
23.通式A-1-I的化合物 其中R5、R6、R7和p具有權利要求1中所述的含義；且X為NO2或任選被保護的NH2基團。
24.權利要求1-22之一的式I化合物的制備方法，包括(a)使通式(II)的化合物與通式(III)的胺反應， 其中R1-R4和n如權利要求1所定義，任何羥基或氨基可以以被保護的形式存在，且L表示離去基團，如芐基磺酰基、苯基磺酰基、烷磺酰基、對甲苯基磺酰氧基、甲磺酰氧基、或三氟甲磺酰氧基、烷亞磺酰基、或鹵素如氯、溴、碘、氟； 其中A如權利要求1所定義；且如果需要，使反應產物上存在的被保護羥基或被保護氨基脫保護；或b)使式(II)的化合物與氨反應或與被保護的胺、諸如芐胺反應且隨后裂解下保護基而得到式IV的氨基衍生物 其中所示的符號如權利要求1所定義；然后使該化合物與式V的二環化合物反應 其中L′表示如對L所定義的離去基團，且A如權利要求1所定義；可以使用本領域中公知的過渡金屬催化劑催化(IV)與(V)的反應，和c)如果需要，用酸將獲自a)或b)的式I的堿性化合物轉化成藥物上可接受的鹽或用堿將獲自a)或b)的式I的酸性化合物轉化成藥物上可接受的鹽；和d)如果需要，通過與氧化劑如3-氯-過苯甲酸、三氟過乙酸或二甲基二環氧乙烷的氧化反應將式I的化合物轉化成N-氧化物。
25.一種藥物，含有權利要求1-22中任何一項的一種或多種化合物作為活性組分以及藥物上可接受的輔藥。
26.權利要求25的藥物在治療由src家族酪氨酸激酶不適當的激活介導的疾病中的應用。
27.權利要求25的藥物在治療炎性疾病、免疫疾病、CNS疾病或骨疾病中的應用。
28.權利要求25的藥物在治療癌癥中的應用。
29.利要求1-22中任何一項的一種或多種化合物在制備用于治療由src家族酪氨酸激酶不適當的激活介導的疾病的藥物中的應用。
30.權利要求1-22中任何一項的一種或多種化合物作為src家族酪氨酸激酶抑制劑的應用。
31.權利要求1-22中任何一項的一種或多種化合物作為細胞信號傳導調節劑和抗增殖劑的應用。
32.權利要求1-22中任何一項的一種或多種化合物在治療炎性疾病、免疫疾病、CNS疾病或骨疾病中的應用。
33.權利要求1-22中任何一項的一種或多種式I的化合物在治療癌癥中的應用。
34.如權利要求24中所述方法或通過等同方法制備的權利要求1-22中任何一項的化合物。
35.如上文所述的本發明。
全文摘要
本發明描述了通式(I)的化合物、其制備方法、含有它們的藥物及其制備方法以及這些化合物作為藥物活性劑的應用。所述的化合物表現出作為蛋白激酶抑制劑、特別是src家族酪氨酸激酶抑制劑的活性且由此可以用于治療由所述酪氨酸激酶介導的疾病。
文檔編號C07D491/10GK1711265SQ200380102849
公開日2005年12月21日 申請日期2003年11月3日 優先權日2002年11月4日
發明者蔡建平, N·迪穆蒂斯, K·霍諾爾德, 陸建春, S·沙伊布勒赫, H·祖德加特, G·蒂芬塔勒, O·托恩 申請人:霍夫曼-拉羅奇有限公司