專利名稱：免疫調節化合物和相關方法
技術領域：
本發明涉及免疫調節化合物和一個相關方法，重點涉及具有類似于胸腺素α-1(thymosin α-1)活性的化合物。
背景技術：
胸腺是重要的中樞淋巴器官，位于所有哺乳類動物的頸部或上胸部。在生命的早期胸腺最發達。哺乳動物和人類的胸腺在出生時相對重量最大，但絕對重量繼續增長，直到青春期開始。此后，在整個人類生命期間胸腺持續變小。通過一系列的有絲分裂，胸腺干細胞產生大量的小淋巴細胞(胸腺細胞)。在分裂和成熟期，分化的胸腺細胞在胸腺內從表層的皮質區移動到髓質核。部分胸腺細胞在胸腺內衰亡，但大部分進入到外周血和淋巴系統。胸腺內少量T淋巴細胞(5-10％)具有抗原識別功能，能識別外源細胞或物質的抗原部位。某些T淋巴細胞可以溶解外源組織細胞，而另外一些T淋巴細胞能夠識別抗原的外源性，并協助骨髓介導的淋巴細胞(B淋巴細胞)產生特異性抗體。這兩種免疫應答的T淋巴細胞分別被稱為殺傷性T淋巴細胞和輔助性T淋巴細胞。它們在組織移植和體液抗體應答中起作用。
胸腺素α-1(thymosinα-1)是由胸腺的上皮網狀細胞合成和分泌的多肽激素。胸腺素α-1在幾個部位發揮作用(1)在胸腺中的干細胞前體或未成熟胸腺細胞中。(2)在外周血中的胸腺產生的淋巴細胞和干細胞前體中。胸腺和外周血中的干細胞前體沒有免疫活性，被稱為T0細胞。而不同的成熟期的T1和T2則具有相應的免疫活性。胸腺素α-1促進和加速T0細胞轉變成T1和T2細胞。此外，胸腺素α-1可通過加速分裂成熟和未成熟胸腺細胞而增加淋巴細胞總量。
因為胸腺素α-1具有上述的刺激淋巴細胞生成的作用，它具有明顯的治療功能。例如，已有報導胸腺素α-1在臨床上成功的用于預防和治療一級和二級感染性疾病，降低放療和化療的副作用，促進傷口愈合，具有抗衰老和增進醫療效果。此外，在手術和治療過程中胸腺素α-1作為輔助制劑已被成功地用于抗真菌、細菌和病毒，例如用于治療乙型肝炎和丙型肝炎。
顯然，胸腺素α-1具有可應用的生物學功能。因此，具有與其類似生物學功能的化合物也會有相應的藥用價值。
發明內容
該發明包括一項或多項下列特征化合物具有氨基酸序列Ser-Asp-Ala-Ala-Val-Asp-Thr-Ser-Ser-Glu-Ile-Thr-Thr-Lys-Asp-Leu-Lys-Glu-Lys-Lys-Glu-Val-Val-Glu-Glu-Ala-Glu-Asn(序列1)，或氨基酸序列X-Ser-Asp-Ala-Ala-Val-Asp-Thr-Ser-Ser-Glu-Ile-Thr-Thr-Lys-Asp-Leu-Lys-Glu-Lys-Lys-Glu-Val-Val-Glu-Glu-Ala-Glu-Asn(序列2)，此處，X為乙酰基或氫，或任一序列與此氨基酸序列至少有70％以上同源性。在序列中，至少一個或多個肽鍵是由Asp的β-羧基和Ala的α-氨基，Asp的β-羧基和Thr的α-氨基，Asp的β-羧基和Leu的α-氨基，Glu的γ-羧基和Ile的α-氨基，Glu的α-羧基和Lys的ε-氨基，Glu的γ-羧基和Lys的α-氨基，Glu的γ-羧基和Lys的ε-氨基，Glu的γ-羧基和Val的α-氨基，Glu的γ-羧基和Glu的α-氨基，Glu的γ-羧基和Ala的α-氨基，Glu的γ-羧基和Asn的α-氨基，Thr的α-羧基和Lys的ε-氨基，Leu的α-羧基和Lys的ε-氨基，Lys的α-羧基和Lys的ε-氨基，β-Ala的羧基和Ala的α-氨基，β-Ala的羧基和Glu的α-氨基，β-Ala的羧基和Val的α-氨基所構成。化合物可包含在藥用載體組份中。化合物具有E-玫瑰花結生成或抑制實驗活性，淋巴細胞增殖活性或多重淋巴細胞反應。化合物可被用于重建動物的免疫功能(如哺乳動物)。
圖1胸腺素α-1(滯留時間27.56分鐘)和本發明中的一個化合物(滯留時間26.04分鐘)的HPLC圖譜。
圖2A.胸腺素α-1的LCQ電噴霧質譜。
圖2B.本發明中化合物之一胸腺肽β-Asp2，6，15(滯留時間26.04分鐘，圖1)的LCQ電噴霧質譜。
圖3.不同濃度胸腺肽β-Asp2，6，15(滯留時間26.04分鐘)和胸腺素α-1的紅細胞玫瑰花結生成實驗結果比較。
圖4.在同一濃度的七個發明物(胸腺肽β-Asp2，6，15，胸腺肽β-Asp2，胸腺肽β-Asp6，胸腺肽β-Asp15，胸腺肽β-Asp2，6，胸腺肽β-Asp2，15和胸腺肽β-Asp6，15)和胸腺素α-1的紅細胞玫瑰花結生成結果比較。
圖5.本發明化合物之一胸腺肽β-Asp2，6，15圖示。
圖6.本發明化合物之一胸腺肽β-Asp2圖示。
圖7.本發明化合物之一胸腺肽β-Asp6圖示。
圖8.本發明化合物之一胸腺肽β-Asp15圖示。
圖9.本發明化合物之一胸腺肽β-Asp2，6圖示。
圖10.本發明化合物之一胸腺肽β-Asp2，15圖示。
圖11.本發明化合物之一胸腺肽β-Asp6，15圖示。
具體實施例方式
本發明可以有很多變化，在此我們給出例子并詳細討論。然而，我們不會限定本發明僅此幾種化合物，我們將會合理地包括所有的修飾物，衍生物和替換物。本發明的范圍將會在權力要求書中說明。
如前所述，胸腺素α-1是由胸腺的上皮網狀細胞合成分泌的，具有免疫調節活性的28個氨基酸的多肽激素。胸腺素α-1的氨基酸序列如下Ac-Ser-Asp-Ala-Ala-Val-Asp-Thr-Ser-Ser-Glu-Ile-Thr-Thr-Lys-Asp-Leu-Lys-Glu-Lys-Lys-Glu-Val-Val-Glu-Glu-Ala-Glu-Asn(序列3)。
值得注意的是此處所用的“同源性”是指包括在該序列中的氨基酸，但不包括該序列結構的異構體。例如，氨基酸序列Ser-Asp-Ala-Ala-Val-Asp-Thr-Ser-Ser-Glu-Ile-Thr-Thr-Lys-Asp-Leu-Lys-Glu-Lys-Lys-Glu-Val-Val-Glu-Glu-Ala-Glu-Asn(序列1)，此處肽鍵是由Asp的β羧基和Ala的α氨基形成的肽鍵，直到與氨基酸序列Ser-Asp-Ala-Ala-Val-Asp-Thr-Ser-Ser-Glu-Ile-Thr-Thr-Lys-Asp-Leu-Lys-Glu-Lys-Lys-Glu-Val-Val-Glu-Glu-Ala-Glu-Asn(序列1)具有100％的序列性。
胸腺素α-1的肽鍵是由氨基酸的α-氨基和相鄰的氨基酸的α-羧基縮和而成。本發明中的肽類化合物具有類似于胸腺素α-1的生物活性，但具有不同的化學結構至少一個肽鍵不是由氨基酸的α-氨基和相鄰的氨基酸的α-羧基縮和而成。例如，肽化合物與胸腺素α-1至少有70％以上的同源，并且有一個或一個以上的肽鍵是由Asp的β-羧基和Ala的α-氨基，Asp的β-羧基和Thr的α-氨基，Asp的β-羧基和Leu的α-氨基，Glu的γ-羧基和Ile的α-氨基，Glu的α-羧基和Lys的ε-氨基，Glu的γ-羧基和Lys的α-氨基，Glu的γ-羧基和Lys的ε-氨基，Glu的γ-羧基和Val的α-氨基，Glu的γ-羧基和Glu的α-氨基，Glu的γ-羧基和Ala的α-氨基，Glu的γ-羧基和Asn的α-氨基，Thr的α-羧基和Lys的ε-氨基，Leu的α-羧基和Lys的ε-氨基，Lys的α-羧基和Lys的ε-氨基，β-Ala的羧基和Ala的α-氨基，β-Ala的羧基和Glu的α-氨基，β-Ala的羧基和Val的α-氨基所構成。
值得注意的是此處所用“同源性”是指包括在該序列中的氨基酸，不包括該序列結構的異構體。例如，氨基酸序列Ser-Asp-Ala-Ala-Val-Asp-Thr-Ser-Ser-Glu-Ile-Thr-Thr-Lys-Asp-Leu-Lys-Glu-Lys-Lys-Glu-Val-Val-Glu-Glu-Ala-Glu-Asn(序列1)，此序列中的一個肽鍵由Asp的β-羧基和Ala的α-氨基形成的肽鍵，該序列與Ser-Asp-Ala-Ala-Val-Asp-Thr-Ser-Ser-Glu-Ile-Thr-Thr-Lys-Asp-Leu-Lys-Glu-Lys-Lys-Glu-Val-Val-Glu-Glu-Ala-Glu-Asn(序列1)(其中一個肽鍵是Asp的β-羧基與Thr的α-氨基形成)兩者具有100％同源性。
此處用“多肽”一詞，在廣義上來講是指一個能夠被一個細胞基因編碼的氨基酸序列，或者是重組核苷酸序列所編碼的氨基酸序列，或者是能以化學合成方法得到的氨基酸序列。例如本發明中的多肽是能夠被化學合成，其純化物不含脂類、蛋白質、核酸或其他細胞中的物質(在細胞中通常與多肽共存的物質)。此外，此處所述的多肽可能是大肽的一部分，或是一個完整多肽的一部分。
如上所述，本發明中的肽化合物具有類似于胸腺素α-1的生物活性。氨基酸序列可以是X-Ser-Asp-Ala-Ala-Val-Asp-Thr-Ser-Ser-Glu-Ile-Thr-Thr-Lys-Asp-Leu-Lys-Glu-Lys-Lys-Glu-Val-Val-Glu-Glu-Ala-Glu-Asn(序列2)，或相應的氨基酸序列衍生物(1)該序列至少有70％的同源性化合物；(2)有類似于胸腺素α-1的E玫瑰花結形成活性(免疫調節活性)。此處X為乙酰基或氫；(3)并且有一個或一個以上的肽鍵是由Asp的β-羧基和Ala的α-氨基，Asp的β-羧基和Thr的α-氨基，Asp的β-羧基和Leu的α-氨基，Glu的γ-羧基和Ile的α-氨基，Glu的α-羧基和Lys的ε-氨基，Glu的γ-羧基和Lys的α-氨基，Glu的γ-羧基和Lys的ε-氨基，Glu的γ-羧基和Val的α-氨基，Glu的γ-羧基和Glu的α-氨基，Glu的γ-羧基和Ala的α-氨基，Glu的γ-羧基和Asn的α-氨基，Thr的α-羧基和Lys的ε-氨基，Leu的α-羧基和Lys的ε-氨基，Lys的α-羧基和Lys的ε-氨基，β-Ala的羧基和Ala的α-氨基，β-Ala的羧基和Glu的α-氨基，β-Ala的羧基和Val的α-氨基所構成。
本發明的另一體現形式是肽類化合物氨基酸序列至少75％類似于X-Ser-Asp-Ala-Ala-Val-Asp-Thr-Ser-Ser-Glu-Ile-Thr-Thr-Lys-Asp-Leu-Lys-Glu-Lys-Lys-Glu-Val-Val-Glu-Glu-Ala-Glu-Asn(序列2)。另一種情況是本發明中肽類化合物是氨基酸序列與X-Ser-Asp-Ala-Ala-Val-Asp-Thr-Ser-Ser-Glu-Ile-Thr-Thr-Lys-Asp-Leu-Lys-Glu-Lys-Lys-Glu-Val-Val-Glu-Glu-Ala-Glu-Asn(序列2)至少80％以上同源性。同樣在不同的形式中本發明中肽類化合物的氨基酸序列至少有85％同源于X-Ser-Asp-Ala-Ala-Val-Asp-Thr-Ser-Ser-Glu-Ile-Thr-Thr-Lys-Asp-Leu-Lys-Glu-Lys-Lys-Glu-Val-Val-Glu-Glu-Ala-Glu-Asn(序列2)。進而本發明中肽類化合物具有90％同源于X-Ser-Asp-Ala-Ala-Val-Asp-Thr-Ser-Ser-Glu-Ile-Thr-Thr-Lys-Asp-Leu-Lys-Glu-Lys-Lys-Glu-Val-Val-Glu-Glu-Ala-Glu-Asn(序列2)。還有，本發明中肽類化合物具有與X-Ser-Asp-Ala-Ala-Val-Asp-Thr-Ser-Ser-Glu-Ile-Thr-Thr-Lys-Asp-Leu-Lys-Glu-Lys-Lys-Glu-Val-Val-Glu-Glu-Ala-Glu-Asn(序列2)至少有95％同源性。
本發明中一種多肽氨基酸序列如下Ac-Ser-Asp-Ala-Ala-Val-Asp-Thr-Ser-Ser-Glu-Ile-Thr-Thr-Lys-Asp-Leu-Lys-Glu-Lys-Lys-Glu-Val-Val-Glu-Glu-Ala-Glu-Asn(序列3)。
該序列如圖5所示，一個肽鍵是Asp的β-羧基和Ala的α-氨基；Asp的β-羧基和Thr的α-氨基；Asp的β-羧基和Leu的α-氨基生成(以β-Asp2，6，15表示)。
本發明化合物之二氨基酸序列如下Ac-Ser-Asp-Ala-Ala-Val-Asp-Thr-Ser-Ser-Glu-Ile-Thr-Thr-Lys-Asp-Leu-Lys-Glu-Lys-Lys-Glu-Val-Val-Glu-Glu-Ala-Glu-Asn(序列3)該序列如圖6所示，有一個肽鍵是由Asp的β-羧基和Ala的α-氨基生成(以β-Asp2表示)。
本發明化合物之三氨基酸序列如下Ac-Ser-Asp-Ala-Ala-Val-Asp-Thr-Ser-Ser-Glu-Ile-Thr-Thr-Lys-Asp-Leu-Lys-Glu-Lys-Lys-Glu-Val-Val-Glu-Glu-Ala-Glu-Asn(序列3)此處如圖7所示，有一個肽鍵是由Asp的β-羧基和Thr的α-氨基生成(以β-Asp6表示)。
本發明化合物之四氨基酸序列如下Ac-Ser-Asp-Ala-Ala-Val-Asp-Thr-Ser-Ser-Glu-Ile-Thr-Thr-Lys-Asp-Leu-Lys-Glu-Lys-Lys-Glu-Val-Val-Glu-Glu-Ala-Glu-Asn(序列3)如圖8所示，有一個肽鍵是由Asp的β-羧基和Leu的α-氨基生成(以β-Asp15表示)。本發明化合物之五氨基酸序列如下Ac-Ser-Asp-Ala-Ala-Val-Asp-Thr-Ser-Ser-Glu-Ile-Thr-Thr-Lys-Asp-Leu-Lys-Glu-Lys-Lys-Glu-Val-Val-Glu-Glu-Ala-Glu-Asn(序列3)此處如圖9所示，有二個肽鍵分別是由Asp的β-羧基和Ala的α-氨基，Asp的β-羧基和Thr的α-氨基生成(以β-Asp2，6表示)。
本發明化合物之六氨基酸序列如下Ac-Ser-Asp-Ala-Ala-Val-Asp-Thr-Ser-Ser-Glu-Ile-Thr-Thr-Lys-Asp-Leu-Lys-Glu-Lys-Lys-Glu-Val-Val-Glu-Glu-Ala-Glu-Asn(序列3)如圖10所示，有二個肽鍵分別是由Asp的β-羧基和Ala的α-氨基，Asp的β-羧基和Leu的α-氨基生成(以β-Asp2，15表示)。
本發明化合物之七(胸腺肽β-Asp6，15)氨基酸序列如下Ac-Ser-Asp-Ala-Ala-Val-Asp-Thr-Ser-Ser-Glu-Ile-Thr-Thr-Lys-Asp-Leu-Lys-Glu-Lys-Lys-Glu-Val-Val-Glu-Glu-Ala-Glu-Asn(序列3)如圖11所示，有二個肽鍵分別是由Asp的β-羧基和Thr的α-氨基，Asp的β-羧基和Leu的α-氨基生成(以β-Asp6，15表示)。
本發明中的多肽是以固相化學合成法合成，并采用與之相匹配的保護基團。例如本發明中多肽以固相法在多肽合成儀上自動合成(ABI 431A型，購自Applied Biosystems，FosterCity，California)。本發明采用Fmoc(9-fluorenylmethoxycarbonyl)-t-butyl化學。
每次合成使用0.25毫摩爾Fmoc-Asn(Trityl)Wang樹酯(0.40毫摩爾/克，Novabiochem，San Diego，USA)，用FastMoc程序。每個反應瓶裝有1.0毫摩爾Fmoc氨基酸。偶聯劑為HBTU[2-(1H-benzotriazol-1-yl)-1，1，3，3-tetramethyluronium hexafluorophosphate]和HOBt(1-Hydroxybenzotriazole)。Fmoc脫保護用20％哌啶/NMP(N-metbylpyrrolidone)進行。當肽鏈在樹酯上連接完畢，最終切割和脫保護用20毫升三氟乙酸，酚，EDT(1，2-ethanedithiol)和水的混合物(20∶1∶0.5∶1)在室溫進行2小時。過濾除去樹酯，用350毫升冷乙醚沉淀肽。沉淀的肽溶解于100毫升20％乙腈水溶液/1.0摩爾NH4OAc，用水稀釋到300毫升然后凍干。粗肽經過C18柱反向HPLC(Vydac 218TP 101550)純化。合并純肽餾份(分析HPLC鑒定)并凍干。純化的肽經質譜鑒定分子量。
每一個肽化合物，胸腺肽β-Asp2，6，15，胸腺肽β-Asp2，胸腺肽β-Asp6，胸腺肽β-Asp15，胸腺肽β-Asp2，6，胸腺肽β-Asp2，15和胸腺肽β-Asp6，15詳細合成如下以合成胸腺肽β-Asp2，6，15為例，裝有1.0毫摩爾(4倍過量)的每種Fmoc氨基酸反應瓶被裝在ABI 431A自動合成儀上。每個氨基酸的α-氨基由Fmoc基團保護。側鏈官能團保護基10，18，21，24，25，和27位的Glu殘基的γ-羧基為t-butyl酯保護；14，17，19和20位的Lys殘基的ε-氨基為t-Boc(叔丁氧羰酰基)保護；2，6和15位的Asp殘基的α-羧基為t-butyl酯保護，而允許其β-羧基進行偶聯；Ser1，8，9和Thr7，12，13的羥基為t-butyl醚保護；剩余的8個殘基-Val5，20，23，Leu16，Ile11 and Ala3，24，26的側鏈不需要保護。反應瓶中的Fmoc氨基酸衍生物溶解之后，通過氮氣送入活化器，然后反應器中。合成從C-端到N-端進行。最終從樹酯切割和脫保護如前所述。
胸腺肽β-Asp2，胸腺肽β-Asp6，胸腺肽β-Asp15，胸腺肽β-Asp2，6，胸腺肽β-Asp2，15和胸腺肽β-Asp6，15詳細合成方法與胸腺肽β-Asp2，6，15的合成相同，只是Fmoc Asp氨基酸側鏈保護的位置不同，如表1所示。
表1
正如前述，以電噴霧質譜法鑒定β-Asp2，6，15，β-Asp2，β-Asp6，β-Asp15，β-Asp2，6，β-Asp2， 15。每個肽β-Asp2，6，15，β-Asp2，β-Asp6，β-Asp15，β-Asp2，6，β-Asp2，15，的合成產率和質譜分析(MW)如下胸腺肽β-Asp2，6，15的產率為26.0％，MH+＝3108.9(計算分子量為3108.1)；胸腺肽β-Asp2的產率為10.3％，MH+＝3108.6(計算分子量為3108.1)；胸腺肽β-Asp6的產率為8.0％，MH+＝3108.9(計算分子量為3108.1)；胸腺肽β-Asp15的產率為4.8％，MH+＝3108.4(計算分子量為3108.1)；胸腺肽β-Asp2，6的產率為15.8％，MH+＝3107.9(計算分子量為3108.1)；胸腺肽β-Asp2，15的產率為5.5％，MH+＝3107.2(計算分子量為3107.5)；胸腺肽β-Asp6，15的產率為10.1％，MH+＝3108.6(計算分子量為3108.1)。
圖1為胸腺肽β-Asp2，6，15和胸腺素α-1的HPLC圖譜比較。胸腺肽β-Asp2，6，15的滯留時間(26.04分鐘)比胸腺素α-1的滯留時間(27.56分鐘)短，表明了比較好的水溶性。分析HPLC條件如下A液0.1％TFA水溶液；B液70％乙腈/水，0.09％TFA；層析柱Vydac C184.6×250mm；洗脫條件0-20％B，1.0ml/min，洗脫30分鐘。此處注意到多肽β-Asp2，6， 15的產率為26％，比胸腺素α-1的產率19％要高。圖2B是β-Asp2，6，15的質譜。圖2A是胸腺α-1的質譜。MH+，MH2++，MH3+++和MH4++++分別為3107.5，1554.3，1036.5和777.6。
本發明中的多肽化合物的生物活性和藥用治療效果可通過多種體外實驗(in vitro)方法檢測，但不限于這些方法。在此，我們選用紅細胞玫瑰花結(E-Rosette)生成實驗來評估胸腺肽β-Asp2，6，15，胸腺肽β-Asp2，胸腺肽β-Asp6，胸腺肽β-Asp15，胸腺肽β-Asp2，6，胸腺肽β-Asp2，15和胸腺肽β-Asp6，15的生物活性。
紅細胞玫瑰花結(E-Rosette)實驗試劑和材料肝素溶液200單位肝素/毫升生理鹽水。
Alserver′s溶液將氯化鈉(0.42克)，葡萄糖(2.00克)，檸檬酸(0.055克)，檸檬酸二氫鈉(0.766克)溶于100毫升水中，煮沸1小時滅菌。
固定液25％戊二醛，3.5％NaHCO3和Hanks溶液(1∶1∶38)。
Hanks溶液磷酸二氫鉀(KH2PO4，0.06克)，磷酸氫二鈉(Na2HPO4，0.06克)，氯化鉀0.42克，氯化鈉8.00克和葡萄糖1.00克溶于1000毫升水中。用4％Na2HCO3調pH至7.2-7.3后，滅菌。
染色液將2毫升Gimesa染色液與6毫升Hanks溶液混合，1500rpm/分鐘離心10分鐘，取上清。
Gimesa染色液加33毫升甘油到0.50克Gimesa染料中，加熱到55-60℃使染料溶解。在室溫加入33毫升甲醇，室溫放置24小時。
豬胸腺豬胸腺取自健康的豬。
羊血收集羊靜脈血，并用抗凝劑肝素處理。加入等體積的Alserver′s溶液，儲存于4℃。
制備T-淋巴細胞溶液將剔除脂肪后新鮮豬胸腺切成小塊，加入適量的Hanks溶液。用100目分子篩過濾懸浮液。將上清液轉移到裝有三分之一體積淋巴細胞分離液的離心管中，在2000rpm離心20分鐘。收集細胞，懸浮在適量的Hanks溶液中，1500rpm離心3分鐘。此程序重復3次。淋巴細胞溶液的終濃度配制成4×106細胞/毫升Hanks。
制備羊紅細胞溶液與制備T-淋巴細胞相同，羊紅細胞被洗滌3次后，配制成4×107細胞/毫升Hanks的溶液。
肽樣品溶液用Hanks溶液溶解胸腺肽β-Asp2，6，15或胸腺素α-1，配制成200微克/毫升，20微克/毫升，2.0微克/毫升，0.2微克/毫升和0.02微克/毫升的系列溶液。胸腺肽β-Asp2，胸腺肽β-Asp6，胸腺肽β-Asp15，胸腺肽β-Asp2，6，胸腺肽β-Asp2，15和胸腺肽β-Asp6，15被配制成200微克/毫升的溶液。
方法在試管中加入0.1毫升肽樣品溶液，對照管中加入0.1毫升Hanks溶液。在樣品管和對照管中分別加入0.2毫升4×106細胞/毫升Hanks的T-淋巴細胞溶液，37℃保溫1小時。然后加入0.2毫升4×107細胞/毫升Hanks的羊紅細胞溶液，溫和混合。500rpm離心3分鐘，4℃放置過夜。去掉上清液，輕微振搖懸浮細胞，用Gimesa染色液染色。在玻片上數200個T-細胞來計算玫瑰花結細胞生成比率(RFC％)。
結果胸腺肽β-Asp2，6，15和胸腺素α-1的紅細胞玫瑰花結生成實驗結果如圖3所示。當加入0.1毫升系列稀釋的(從0.02微克/毫升到200微克/毫升)的胸腺肽β-Asp2，6，15或胸腺素α1時，玫瑰花結細胞生成比率明顯地增加了16％到35％。在胸腺肽β-Asp2，6，15和胸腺素α1的活性之間，沒有明顯差別。
圖4顯示了胸腺肽β-Asp2，6，15(χ坐標樣品8)，胸腺肽β-Asp2(χ坐標樣品1)，胸腺肽β-Asp6(χ坐標樣品2)，胸腺肽β-Asp15(χ坐標樣品3)，胸腺肽β-Asp2，6(χ坐標樣品4)，胸腺肽β-Asp2，15(χ坐標樣品5)，胸腺肽β-Asp6，15(χ坐標樣品6)和胸腺素α-1(χ坐標樣品7)的玫瑰花結細胞生成比率。當加入0.1毫升200微克/毫升的胸腺肽β-Asp2，6，15，胸腺肽β-Asp2，胸腺肽β-Asp6，胸腺肽β-Asp15，胸腺肽β-Asp2，6，胸腺肽β-Asp2，15和胸腺肽β-Asp6，15和胸腺素α-1時，它們之間沒有明顯差別。
因此，由于其免疫調節功能，本發明中這些胸腺肽衍生物具有明顯的治療用途。例如，它們可被用于預防和治療一級和二級感染，降低放療和化療的副作用，促進傷口愈合，抗衰老和增加醫藥療效。此外，它們還可用于手術和臨床中的抗真菌、細菌和病毒的輔助治劑(例如，用于治療乙型肝炎和丙型肝炎)。
值得強調的是基于體外實驗結果(例如E玫瑰花結實驗)本發明中的多肽單獨或與其他免疫調節因子結合使用，可以推測其在體內具有免疫增強的醫用效果。預計通過已有的診斷和處理原則本發明中的主體物質在處理疾病或增進免疫功能方面的臨床前和臨床上治療方面的應用將會被很好的解決。
因此，本發明中的化合物或多肽將會應用于免疫調節組份中，如重建生物功能免疫制劑中。舉例來說，重建哺乳動物免疫調節功能的一種方法包括給予哺乳動物下列具有免疫調節效果的一種化合物或肽，其氨基酸序列如下X-Ser-Asp-Ala-Ala-Val-Asp-Thr-Ser-Ser-Glu-Ile-Thr-Thr-Lys-Asp-Leu-Lys-Glu-Lys-Lys-Glu-Val-Val-Glu-Glu-Ala-Glu-Asn(序列2)，或任一序列(1)與此氨基酸序列至少有70％以上(例如，75％，80％，85％，90％，或95％)同源性，(2)有免疫調節活性，例如，紅細胞玫瑰花結生成活性。在序列中，X為乙酰基或氫，至少一個或多個肽鍵是由Asp的β-羧基和Ala的α-氨基，Asp的β-羧基和Thr的α-氨基，Asp的β-羧基和Leu的α-氨基，Glu的γ-羧基和Ile的α-氨基，Glu的α-羧基和Lys的ε-氨基，Glu的γ-羧基和Lys的α-氨基，Glu的γ-羧基和Lys的ε-氨基，Glu的γ-羧基和Val的α-氨基，Glu的γ-羧基和Glu的α-氨基，Glu的γ-羧基和Ala的α-氨基，Glu的γ-羧基和Asn的α-氨基，Thr的α-羧基和Lys的ε-氨基，Leu的α-羧基和Lys的ε-氨基，Lys的α-羧基和Lys的ε-氨基。
本發明中化合物也可用于藥物組份。本發明的藥物組份可以用于任何經過實驗證明本發明化合物有效的動物，最重要的是用于人，但本發明不限于此。本發明的藥用組份可以是多肽的中性制劑或鹽類，可作為藥物的鹽類包括游離的氨基和鹽酸、磷酸、乙酸、草酸、酒石酸等生成的鹽類，或游離的羧基和鈉、鉀、銨、鈣、氫氧化鐵、異丙胺、三乙胺、2-乙基氨基乙醇、組氨酸等生成的鹽類。
本發明中這些胸腺肽衍生物可通過各種方法或途徑達到藥用的目的，例如，給藥可以是腸道的，皮下，靜脈，肌肉，腹腔或口腔，也可以是口服給藥。藥物劑量將依據受試者年齡、健康狀況和體重、并行處理的種類、處理頻率和所需效果的性質而定。
在此，“藥用”這一術語是指國家藥品管理局批準，或列入美國藥典，或其它用于動物，特別是用于人的被公認的藥典中。所謂載體即稀釋劑，佐劑，藥物賦形劑。該藥用載體可能是無菌的液體，如水或油，包括來自石油，動物，植物或合成品，如花生油，大豆油，礦物油，芝麻油等，以及聚乙二醇，甘油，乙二醇或其他合成溶劑。當藥物組份以靜脈給藥時，水可以作載體。生理鹽水，水溶性葡聚糖和甘油溶液也可用作液體載體，特別是用作注射液。適當的藥品賦形劑包括淀粉、葡萄糖、半乳糖、蔗糖、明膠、麥芽、米、面、硅膠、天然碳酸鈣、硬脂酸鈉，單硬脂酸甘油酯、滑石粉、氯化鈉、脫脂奶粉、甘油丙二醇、水和乙醇等。該組份(如果需要的話)，也可以含有微量潤濕劑或乳化劑，或PH緩沖液，如乙酸、檸檬酸、或磷酸。抗菌劑如芐基乙醇、或甲基parabens。抗氧化劑，如抗壞血酸，或二硫化物。鰲合劑如乙二胺四乙酸。輔助劑，如氯化鈉或葡聚糖也在視野之內。此外，安瓶，一次性注射器或多次使用的玻璃和塑料制品也應包括在內。
藥用組份可以采用不同的形式，如溶液，懸浮液，乳濁液、片劑、丸劑、膠囊、粉劑緩釋配方等。該組份也可以制成栓劑，用傳統的結合劑和載體，如甘油三酯，微晶纖維素，面黃著膠或明膠。口服劑型通常含有標準的載體，如藥物級別的甘露醇、半乳糖、淀粉、硬脂酸錳、糖精鈉，纖維素，碳酸錳等。藥物組份的載體在E.W.Marti所著Remington’sPharmaceutical Science”中有詳細描述。該藥物組份將含有有效量的本發明中的多肽，最好是純化物，與適當量的載體配合，提供一個劑型以便適合于患者用藥。
在另一實體中，依據通用程序該組份被制備成適用于給動物靜脈用藥(例如人)的藥用制劑。典型例子是把適用于靜脈的組份制成無菌的等滲水緩沖溶液。如果必要的話，該組份也包括溶解劑和一個局部麻醉劑，如利多卡因減輕注射部位的疼痛。一般而言，配料被分別或以單位劑量形式混合在一起提供，例如在氣密封容器中(如安瓶，或標示出活性試劑量的包裝物)的凍干粉劑或無水濃縮物。當組份以輸注方式用藥時，可用含有藥用級別的水或生理鹽水的輸注瓶。當組份以注射方式用藥時，采用注射的無菌水或(生理鹽水)的安瓶，以便在施藥前配料能被充分混合。本發明中的多肽用量將依據處理具體疾病的有效性，或疾病的性質和狀況而定。
此外，在體外實驗中(如上述討論中所述內容)的結果可被選擇的應用于確立合理劑量范圍。本發明中組份的用藥劑量范圍是足以產生藥效的大劑量，如達到免疫調節的有效劑量。然而，劑量不能大到引起不利的副反應，如不希望發生的交叉副反應等。一般而言，正如前文所述，其劑量是隨年齡、身體狀況、患者性別和疾病狀況而變化。還有，免疫耐受和其它可變因素也將影響用藥劑量。此外，在制劑中精確的使用劑量也依賴于用藥途徑，疾病的嚴重程度而變，而且也應取決于從業醫生的對具體情況的判斷。
在此，雖然我們已對本發明做了圖解和詳細說明，但這些圖解和說明可被認為是特殊例子。所有與此發明中肽化合物相關的修飾物和衍生物都將受到相應的保護。
序列表<110>李惟，郭莉莉，羅斯克.羅杰<120>免疫調節化合物和相關方法<130>29920-71479<150>PCT/US2003/002627<151>2003-01-29<160>3<170>專利說明3.2<210>1<211>28<212>PRT<213>人工序列<220>
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<221>MISC_FEATURE<222>(27)..(28)<223>Glu的γ羧基與Asn的α氨基形成肽鍵<400>1Ser Asp Ala Ala Val Asp Thr Ser Ser Glu Ile Thr Thr Lys Asp Leu1 5 10 15Lys Glu Lys Lys Glu Val Val Glu Glu Ala Glu Asn20 25<210>2<211>28<212>PRT<213>人工序列<220>
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<221>MISC_FEATURE<222>(27)..(28)<223>Glu的γ羧基與Asn的α氨基形成肽鍵<400>3Ser Asp Ala Ala Val Asp Thr Ser Ser Glu Ile Thr Thr Lys Asp Leu1 5 10 15Lys Glu Lys Lys Glu Val Val Glu Glu Ala Glu Asn20 2權利要求
1.化合物結構組成(氨基酸序列)中包括X-Ser-Asp-Ala-Ala-Val-Asp-Thr-Ser-Ser-Glu-Ile-Thr-Thr-Lys-Asp-Leu-Lys-Glu-Lys-Lys-Glu-Val-Val-Glu-Glu-Ala-Glu-Asn(序列1)，或任一序列與此氨基酸序列至少有70％以上同源性的化合物。在序列中，至少一個肽鍵是由Asp的β-羧基和Ala的α-氨基，Asp的β-羧基和Thr的α-氨基，Asp的β-羧基和Leu的α-氨基，Glu的γ-羧基和Ile的α-氨基，Glu的α-羧基和Lys的ε-氨基，Glu的γ-羧基和Lys的α-氨基，Glu的γ-羧基和Lys的ε-氨基，Glu的γ-羧基和Val的α-氨基，Glu的γ-羧基和Glu的α-氨基，Glu的γ-羧基和Ala的α-氨基，Glu的γ-羧基和Asn的α-氨基，Thr的α-羧基和Lys的ε-氨基，Leu的α-羧基和Lys的ε-氨基，Lys的α-羧基和Lys的ε-氨基，β-Ala的羧基和Ala的α-氨基，β-Ala的羧基和Glu的α-氨基，β-Ala的羧基和Val的α-氨基所構成。
2.權利要求1的結構組成中該氨基酸序列或變體中至少一個肽鍵是由Asp的β-羧基和Ala的α-氨基構成。
3.權利要求1的結構組成中該氨基酸序列或變體中至少一個肽鍵是由Asp的β-羧基和Thr的α-氨基形成。
4.權利要求1的結構組成中該氨基酸序列或變體中至少一個肽鍵是由Asp的β-羧基和Leu的α-氨基構成。
5.權利要求1的結構組成中該氨基酸序列或變體中至少一個肽鍵是由Glu的γ-羧基和Ile的α-氨基構成。
6.權利要求1的結構組成中該氨基酸序列或變體中至少一個肽鍵是由Glu的γ-羧基和Lys的ε-氨基構成。
7.權利要求1的結構組成中該氨基酸序列或變體中至少一個肽鍵是由Glu的γ-羧基和Lys的α-氨基構成。
8.權利要求1的結構組成中該氨基酸序列或變體中至少一個肽鍵是由Glu的γ-羧基和Lys的ε-氨基構成。
9.權利要求1的結構組成中該氨基酸序列或變體中至少一個肽鍵是由Glu的γ-羧基和Val的α-氨基構成。
10.權利要求1的結構組成中該氨基酸序列或變體中至少一個肽鍵是由Glu的γ-羧基和Glu的α-氨基構成。
11.權利要求1的結構組成中該氨基酸序列或變體中至少一個肽鍵是由Glu的γ-羧基和Ala的α-氨基構成。
12.權利要求1的結構組成中該氨基酸序列或變體中至少一個肽鍵是由Glu的γ-羧基和Asn的α-氨基所構成。
13.權利要求1的結構組成中該氨基酸序列或變體中至少一個肽鍵是由Thr的α-羧基和Lys的ε-氨基構成。
14.權利要求1的結構組成中該氨基酸序列或變體中至少一個肽鍵是由Leu的α-羧基和Lys的ε-氨基構成。
15.權利要求1的結構組成中該氨基酸序列或變體中至少一個肽鍵是由Lys的α-羧基和Lys的ε-氨基所構成。
16.權利要求1的結構組成中該氨基酸序列或變體中至少一個肽鍵是由β-Ala的羧基和Ala的α-氨基構成。
17.權利要求1的結構組成中該氨基酸序列或變體中至少一個肽鍵是由β-Ala的羧基和Glu的α-氨基構成。
18.權利要求1的結構組成中該氨基酸序列或變體中至少一個肽鍵是由β-Ala的羧基和Val的α-氨基所構成。
19.肽類化合物結構組成的氨基酸序列為X-Ser-Asp-Ala-Ala-Val-Asp-Thr-Ser-Ser-Glu-Ile-Thr-Thr-Lys-Asp-Leu-Lys-Glu-Lys-Lys-Glu-Val-Val-Glu-Glu-Ala-Glu-Asn(序列2)或序列至少有70％類似于該序列的變體，且具有E-玫瑰花活性。在序列中，①X為乙酰基或H。②該序列或變體中至少一個肽鍵是由Asp的β-羧基和Ala的α-氨基，一個肽鍵是由Asp的β-羧基和Thr的α氨基，一個肽鍵是由Asp的β-羧基和Leu的α-氨基構成，Glu的γ-羧基和Ile的α-氨基，Glu的α-羧基和Lys的ε-氨基，Glu的γ-羧基和Lys的α-氨基，Glu的γ-羧基和Lys的ε-氨基，Glu的γ-羧基和Val的α-氨基，Glu的γ-羧基和Glu的α-氨基，Glu的γ-羧基和Ala的α-氨基，Glu的γ-羧基和Asn的α-氨基，Thr的α-羧基和Lys的ε-氨基，Leu的α-羧基和Lys的ε-氨基，Lys的α-羧基和Lys的ε-氨基，β-Ala的羧基和Ala的α-氨基，β-Ala的羧基和Glu的α-氨基，β-Ala的羧基和Val的α-氨基所構成。
20.權利要求19的結構組成中在該序列或變體中，至少一個肽鍵是由Asp的β-羧基和Ala的α-氨基構成，Asp的β-羧基和Thr的α-氨基，和Aspβ-羧基與Leu的α-氨基構成。
21.權利要求19的結構組成中該氨基酸序列或變體中至少一個肽鍵是由Glu的γ-羧基與Ile的α-氨基，Glu的γ-羧基和Lys的α-氨基，Glu的γ-羧基和Lys的ε-氨基，Glu的γ-羧基與Val的α-氨基，Glu的γ-羧基與Glu的α-氨基，Glu的γ-羧基與Ala的α-氨基，Glu的γ-羧基與Asn的α-氨基形成肽鍵。
22.權利要求19的結構組成中該氨基酸序列或變體中至少一個肽鍵是由Glu的α-羧基與Lys的ε-氨基，Thr的α-羧基與Lys的ε-氨基，Leu的α-羧基與Lys的ε-氨基，Lys的α-羧基與Lys的ε-氨基形成肽鍵。
23.具有氨基酸序列如下的多肽Ser-Asp-Ala-Ala-Val-Asp-Thr-Ser-Ser-Glu-Ile-Thr-Thr-Lys-Asp-Leu-Lys-Glu-Lys-Lys-Glu-Val-Val-Glu-Glu-Ala-Glu-Asn(序列1)，或①具有至少與該序列有70％以上類似性②具有E-玫瑰花結活性的變體。在序列中，至少一個肽鍵是由Asp的β-羧基和Ala的α-氨基，一個肽鍵是由Asp的β-羧基和Thr的α氨基，一個肽鍵是由Asp的β-羧基和Leu的α-氨基構成，Glu的γ-羧基和Ile的α-氨基，Glu的α-羧基和Lys的ε-氨基，Glu的γ-羧基和Lys的α-氨基，Glu的γ-羧基和Lys的ε-氨基，Glu的γ-羧基和Val的α-氨基，Glu的γ-羧基和Glu的α-氨基，Glu的γ-羧基和Ala的α-氨基，Glu的γ-羧基和Asn的α-氨基，Thr的α-羧基和Lys的ε-氨基，Leu的α-羧基和Lys的ε-氨基，Lys的α-羧基和Lys的ε-氨基，β-Ala的羧基和Ala的α-氨基，β-Ala的羧基和Glu的α-氨基，β-Ala的羧基和Val的α-氨基所構成。
24.權利要求23中該氨基酸序列或變體中至少一個肽鍵是由Asp的β-羧基和Ala的α-氨基構成。
25.權利要求23中該氨基酸序列或變體中至少一個肽鍵是由Asp的β-羧基和Thr的α-氨基構成。
26權利要求23中該氨基酸序列或變體中至少一個肽鍵是由Asp的β-羧基和Leu的α-氨基構成。
27.權利要求23中該氨基酸序列或變體中至少一個肽鍵是由Glu的γ-羧基和Ile的α-氨基構成。
28.權利要求23中該氨基酸序列或變體中至少一個肽鍵是由Glu的α-羧基和Lys的ε-氨基構成。
29.權利要求23中該氨基酸序列或變體中至少一個肽鍵是由Glu的γ-羧基和Lys的α-氨基構成。
30.權利要求23中該氨基酸序列或變體中至少一個肽鍵是由Glu的γ-羧基和Lys的ε-氨基構成。
31.權利要求23中該氨基酸序列或變體中至少一個肽鍵是由Glu的γ-羧基和Val的α-氨基構成。
32.權利要求23中該氨基酸序列或變體中至少一個肽鍵是由Glu的γ-羧基和Glu的α-氨基構成。
33.權利要求23中該氨基酸序列或變體中至少一個肽鍵是由Glu的γ-羧基和Ala的α-氨基構成。
34.權利要求23中該氨基酸序列或變體中至少一個肽鍵是由Glu的γ-羧基和Asn的α-氨基構成。
35.權利要求23中該氨基酸序列或變體中至少一個肽鍵是由Thr的α-羧基和Lys的ε-氨基構成。
36.權利要求23中該氨基酸序列或變體中至少一個肽鍵是由Leu的α-羧基和Lys的ε-氨基構成。
37.權利要求23中該氨基酸序列或變體中至少一個肽鍵是由Lys的α-羧基和Lys的ε-氨基構成。
38.權利要求23中該氨基酸序列或變體中至少一個肽鍵是由β-Ala的羧基和Ala的α-氨基構成。
39.權利要求23中該氨基酸序列或變體中至少一個肽鍵是由β-Ala的羧基和Glu的α-氨基構成。
40.權利要求23中該氨基酸序列或變體中至少一個肽鍵是由β-Ala的羧基和Val的α-氨基構成。
41.構成多肽的氨基酸序列如下Ac-Ser-Asp-Ala-Ala-Val-Asp-Thr-Ser-Ser-Glu-Ile-Thr-Thr-Lys-Asp-Leu-Lys-Glu-Lys-Lys-Glu-Val-Val-Glu-Glu-Ala-Glu-Asn(序列3)此處一個肽鍵是由Asp的β-羧基和Ala的α-氨基，一個肽鍵是由Asp的β-羧基和Thr的α-氨基，一個肽鍵是由Asp的β-羧基和Leu的α-氨基構成。
42.構成多肽的氨基酸序列如下Ac-Ser-Asp-Ala-Ala-Val-Asp-Thr-Ser-Ser-Glu-Ile-Thr-Thr-Lys-Asp-Leu-Lys-Glu-Lys-Lys-Glu-Val-Val-Glu-Glu-Ala-Glu-Asn(序列3)此處一個肽鍵是由Asp的β-羧基和Ala的α-氨基形成。
43.構成多肽的氨基酸序列如下Ac-Ser-Asp-Ala-Ala-Val-Asp-Thr-Ser-Ser-Glu-Ile-Thr-Thr-Lys-Asp-Leu-Lys-Glu-Lys-Lys-Glu-Val-Val-Glu-Glu-Ala-Glu-Asn(序列3)此處一個肽鍵是由Asp的β-羧基和Thr的α-氨基形成。
44.構成多肽的氨基酸序列如下Ac-Ser-Asp-Ala-Ala-Val-Asp-Thr-Ser-Ser-Glu-Ile-Thr-Thr-Lys-Asp-Leu-Lys-Glu-Lys-Lys-Glu-Val-Val-Glu-Glu-Ala-Glu-Asn(序列3)此處一個肽鍵是由Asp的β-羧基和Leu的α-氨基形成。
45.構成多肽的氨基酸序列如下Ac-Ser-Asp-Ala-Ala-Val-Asp-Thr-Ser-Ser-Glu-Ile-Thr-Thr-Lys-Asp-Leu-Lys-Glu-Lys-Lys-Glu-Val-Val-Glu-Glu-Ala-Glu-Asn(序列3)此處一個肽鍵是由Asp的β-羧基和Ala的α-氨基，一個肽鍵是由Asp的β-羧基和Thr的α-氨基形成。
46.構成多肽的氨基酸序列如下Ac-Ser-Asp-Ala-Ala-Val-Asp-Thr-Ser-Ser-Glu-Ile-Thr-Thr-Lys-Asp-Leu-Lys-Glu-Lys-Lys-Glu-Val-Val-Glu-Glu-Ala-Glu-Asn(序列3)此處一個肽鍵是由Asp的β-羧基和Leu的α-氨基形成。
47.構成多肽的氨基酸序列如下Ac-Ser-Asp-Ala-Ala-Val-Asp-Thr-Ser-Ser-Glu-Ile-Thr-Thr-Lys-Asp-Leu-Lys-Glu-Lys-Lys-Glu-Val-Val-Glu-Glu-Ala-Glu-Asn(序列3)此處一個肽鍵是由Asp的β-羧基和Thr的α-氨基，一個肽鍵是由Asp的β-羧基和Leu的α-氨基形成。
48.在哺乳動物中重組免疫功能的一種方法，該方法包括施藥給動物有效劑量產生免疫促進活性的化合物，該化合物的氨基酸序列如下X-Ser-Asp-Ala-Ala-Val-Asp-Thr-Ser-Ser-Glu-Ile-Thr-Thr-Lys-Asp-Leu-Lys-Glu-Lys-Lys-Glu-Val-Val-Glu-Glu-Ala-Glu-Asn(序列2)，或①至少有70％以上類似于該序列。②具有E玫瑰花結形成活性的氨基酸序列變體。此處①X為乙酰基或氫，②在該氨基酸序列或變體中一個肽鍵是由Asp的β-羧基和Ala的α-氨基，Asp的β-羧基和Thr的α-氨基，Asp的β-羧基和Leu的α-氨基，Glu的γ-羧基和Ile的α-氨基，Glu的α-羧基和Lys的ε-氨基，Glu的γ-羧基和Lys的α-氨基，Glu的γ-羧基和Lys的ε-氨基，Glu的γ-羧基和Val的α-氨基，Glu的γ-羧基和Glu的α-氨基，Glu的γ-羧基和Ala的α-氨基，Glu的γ-羧基和Asn的α-氨基，Thr的α-羧基和Lys的ε-氨基，Leu的α-羧基和Lys的ε-氨基，Lys的α-羧基和Lys的ε-氨基，β-Ala的羧基和Ala的α-氨基，β-Ala的羧基和Glu的α-氨基，β-Ala的羧基和Val的α-氨基所構成。
49.具有下列結構式的一種化合物Ac-Ser-Asp-Ala-Ala-Val-Asp-Thr-Ser-Ser-Glu-Ile-Thr-Thr-Lys-Asp-Leu-Lys-Glu-Lys-Lys-Glu-Val-Val-Glu-Glu-Ala-Glu-Asn(序列3)此處一個肽鍵是由Asp的β-羧基和Ala的α-氨基，一個肽鍵是由Asp的β-羧基和Thr的α-氨基，一個肽鍵是由Asp的β-羧基和Leu的α-氨基形成。
50.具有下列結構式的一種化合物Ac-Ala-Ala-Val-Asp-Thr-Ser-Ser-Glu-Ile-Thr-Thr-Lys-Asp-Leu-Lys-Glu-Lys-Lys-Glu-Val-Val-Glu-Glu-Ala-Glu-Asn(序列3)此處一個肽鍵是由Asp的β-羧基和Ala的α-氨基形成。
51.具有下列結構式的一種化合物Ac-Ala-Ala-Val-Asp-Thr-Ser-Ser-Glu-Ile-Thr-Thr-Lys-Asp-Leu-Lys-Glu-Lys-Lys-Glu-Val-Val-Glu-Glu-Ala-Glu-Asn(序列3)此處一個肽鍵是Asp的β-羧基和Thr的α-氨基形成。
52.具有下列結構式的一種化合物Ac-Ala-Ala-Val-Asp-Thr-Ser-Ser-Glu-Ile-Thr-Thr-Lys-Asp-Leu-Lys-Glu-Lys-Lys-Glu-Val-Val-Glu-Glu-Ala-Glu-Asn(序列3)此處一個肽鍵是Asp的β-羧基和Leu的α-氨基形成。
53.具有下列結構式的一種化合物Ac-Ala-Ala-Val-Asp-Thr-Ser-Ser-Glu-Ile-Thr-Thr-Lys-Asp-Leu-Lys-Glu-Lys-Lys-Glu-Val-Val-Glu-Glu-Ala-Glu-Asn(序列3)此處一個肽鍵是由Asp的β-羧基和Ala的α-氨基，一個肽鍵是由Asp的β-羧基和Thr的α-氨基形成。
54.具有下列結構式的一種化合物Ac-Ala-Ala-Val-Asp-Thr-Ser-Ser-Glu-Ile-Thr-Thr-Lys-Asp-Leu-Lys-Glu-Lys-Lys-Glu-Val-Val-Glu-Glu-Ala-Glu-Asn(序列3)此處一個肽鍵是由Asp的β-羧基和Ala的α-氨基，一個肽鍵是由Asp的β-羧基和Leu的α-氨基形成。
55.具有下列結構式的一種化合物Ac-Ala-Ala-Val-Asp-Thr-Ser-Ser-Glu-Ile-Thr-Thr-Lys-Asp-Leu-Lys-Glu-Lys-Lys-Glu-Val-Val-Glu-Glu-Ala-Glu-Asn(序列3)此處一個肽鍵是由Asp的β-羧基和Thr的α-氨基，一個肽鍵是由Asp的β-羧基和Leu的α-氨基形成。
全文摘要
本發明提供了免疫調節化合物和一個相關方法。
文檔編號C07K14/475GK1819839SQ03826203
公開日2006年8月16日 申請日期2003年1月29日 優先權日2003年1月29日
發明者李惟, 郭莉莉, 羅杰·W·羅斯克 申請人:李惟, 郭莉莉