專利名稱:羥基四氫-萘基脲衍生物的制作方法
技術領域:
本發明涉及用作藥物制劑的活性組分的羥基-四氫-萘基脲衍生物。本發明的羥基-四氫-萘基脲衍生物具有香草酸受體(Vanilloid)(VR)拮抗活性,并可用于預防和治療與VR1活性有關的疾病,特別是用于治療急性尿失禁、膀胱活動過度(Overactive Bladder)、慢性痛、神經病性痛、術后痛、類風濕關節炎性痛、神經痛、神經病、感覺過敏、神經損傷、局部缺血、神經變性、中風、失禁和/或例如哮喘和慢性阻塞性肺病(COPD)等炎性疾病。
尿失禁(UI)是無意識的遺尿。急性尿失禁(UUI)是最常見的一類兼有壓迫性尿失禁(SUI))的UI,SUI通常由尿道關閉機制缺陷所導致。UUI通常與例如癡呆、帕金森病、多發性硬化病、中風和糖尿病等引起神經元損傷的神經病障礙或疾病有關,但是沒有這些疾病的個體患者也會患有UUI。引起UUI的常見原因之一是膀胱活動過度(OAB),OAB是指由于膀胱逼尿肌異常收縮和不穩定所引起的尿頻和尿急癥狀的醫學病癥。
現在,市場上主要有幾種尿失禁藥物可幫助治療UUI。OAB的治療主要采用影響外周神經控制機制的藥物和那些直接作用于膀胱逼尿平滑肌收縮的藥物,并且重點主要在抗膽堿能藥物的開發方面。這些藥物能抑制控制膀胱排尿的副交感神經或能直接對膀胱逼尿肌產生解痙作用。這導致膀胱內壓力下降、容量提高以及膀胱收縮的頻率降低。口服活性的抗膽堿能藥物,例如普魯本辛(ProBanthine)、酒石酸托特羅定(Detrol)和奧昔布寧(Ditropan)是最常用的處方藥。但是,它們最大的缺點在于具有無法接受的副作用,例如口干、反常視覺、便秘和中樞神經系統紊亂。這些副作用導致依從性較差。單是口干就導致奧昔布寧口70%的不順從率。現有治療的不足說明需要具有較少副作用的新型、有效、安全、口服有效的藥物。
背景技術:
香草酸(Vanilloid)化合物的特征在于具有香草基或官能等價的基團。幾種香草酸化合物或香草酸受體調節器的實例有香蘭素(4-羥基-3-甲氧基-苯甲醛)、愈創木酚(2-甲氧基-苯酚)、姜油酮(4-/4-羥基-3-甲氧基苯基/-2-丁酮)、丁子香酚(2-甲氧基4-/2-丙烯基/苯酚)和辣椒素(8-甲基-N-香草基-6-壬烯-酰胺)。
其中,辣椒素(“辣”紅椒的主要刺激性成分)是一種特殊的使C-纖維傳入神經元脫敏的神經毒素。辣椒素可與香草酸受體(VR1)相互作用,其主要在后根神經的神經節(DRG)細胞體或傳入感覺神經纖維的神經末梢(包括C-纖維神經末梢)表達[Tominaga M,Caterina MJ,Malmberg AB,Rosen TA,Gilbert H,Skinner K,Raumann BE,BasbaumAI,Julius D克隆的辣椒素受體以及產生多發性疼痛的刺激;Neuron.21531-543,1998]。最近已將VR1受體克隆[Caterina MJ,SchumacherMA,Tominaga M,Rosen TA,Levine JD,Julius DNature 389816-824,(1997)]并確證為非選擇性陽離子通道,具有6個結構上與TRP(瞬時受體電位)通道家族有關的跨膜結構域。辣椒素結合至VR1上使鈉、鈣并可能有鉀離子沿它們的濃度梯度溢出,引起初始去極化和神經末端的神經遞質的釋放。因此,VR1可被視為在病癥或疾病中產生神經元信號的化學和物理刺激的分子集合。
有大量直接或間接的證據顯示出VR1活性和例如疼痛、局部缺血和炎性疾病的疾病之間的關系(例如,WO 99/00115和00/50387)。而且,已證實轉導反射信號的VR1與脊髓反射路徑損壞或異常的患者的膀胱活動過度有關[De Groat WC膀胱活動過度的一個神經病學基礎,Urology 50(6A Suppl)36-52,1997]。已表明使用VR1激動劑例如辣椒素使神經遞質減少,從而導致傳入神經脫敏,這在治療與脊索損傷和多發性硬化病有關的膀胱機能障礙過程中獲得很有希望的結果[(Maggi CA辣椒素樣分子的治療活性-對動物和人進行研究,LifeSciences 511777-1781,1992)和(DeRidder D;Chandiramani V;DasguptaP;VanPoppel H;Baert L;Fowler CJ膀胱內辣椒素治療頑固性逼尿肌反射亢進一項兩中心長期跟蹤研究,J.Urol.1582087-2092,1997)。
可預期VR1受體的拮抗作用將阻斷神經遞質的釋放,從而預防和治療與VR1活性有關的病癥和疾病。
因此,預期VR1受體拮抗劑可用于預防和治療包括以下的病癥和疾病慢性痛、神經病性痛、術后痛、類風濕關節炎性痛、神經痛、神經病、感覺過敏、神經損傷、局部缺血、神經變性、中風、失禁、炎性疾病例如哮喘和COPD、尿失禁(UI),例如急性尿失禁(UUI)和/或膀胱活動過度。
WO 00/50387公開了以下通式表示的具有香草酸激動劑活性的化合物及其藥學上可接受的鹽 其中XP為氧原子或硫原子;AP為-NHCH2-或-CH2-;Ra為取代的或未取代的C1-4烷基,或Ra1CO-;其中Ra1為具有1-18個碳原子的烷基,具有2-18個碳原子的烯基或具有6-10個碳原子的取代的或未取代的芳基;Rb為氫原子,具有1-6個碳原子的烷基,具有1-6個碳原子的烷氧基,具有1-6個碳原子或鹵原子的鹵代烷基;Rc為氫原子,含1-4個碳原子的烷基,氨基烷基,二元酸單酯或α-烷基酸;且星號*表示手性碳原子。
WO 2000/61581公開了以下通式表示的胺衍生物,所述胺衍生物作為有效藥物用于治療糖尿病、高脂血癥、動脈硬化和癌癥 其中(R′,R″)表示(F,F)、(CF3,H)或(iPr,iPr)。
WO 00/75106公開了以下通式表示的化合物,所述化合物作為有效藥物用于治療MMP-介導的動物疾病
其中Z表示H2N-(CH2)1-6- 或 其中R90為氫,C1-12烷基,C3-8環烷基等,且R91為氨基-C1-6烷基,氨羰基-C1-6烷基或羥氨基-羰基C1-6烷基;和R90和R91獨立選自H,C1-6烷基,C1-6烷硫基,C1-6烷氧基,氟基,氯基,溴基,碘基和硝基;WO 00/55152公開了以下通式表示的化合物,所述化合物作為有效藥物用于治療炎癥、免疫相關疾病、疼痛和糖尿病 其中Ar1為雜環;
Ar2為四氫萘基(tetrahydronapthy);且L和Q在本發明說明書中定義。
但是,這些參考文獻沒有一篇公開過具有VR1拮抗活性的簡單羥基-四氫-萘基-脲衍生物。
因此,需要開發具有有效VR1拮抗活性并可用于預防和治療與VR1活性有關的疾病,特別用于治療尿失禁、急性尿失禁、膀胱活動過度以及疼痛和/或炎性疾病(例如哮喘和COPD)的化合物。
發明概述本發明提供一種式(I)的羥基-四氫-萘基脲衍生物、其互變異構體和立體異構體及它們的鹽 其中X表示 或 其中Y表示化學鍵、 或 R1、R2和R3獨立表示氫,鹵素,羥基,硝基,羧基,氨基,C1-6烷氨基,二(C1-6烷基)氨基,C3-8環烷基氨基,C1-6烷氧基羰基,苯基,芐基,氨磺酰基(sulfonamide),C1-6烷酰基,C1-6烷酰基氨基,氨基甲酰基,C1-6烷基氨基甲酰基,氰基,任選被氰基取代的C1-6烷基,C1-6烷氧基羰基或單-、二-或三-鹵素,任選被單-、二-或三-鹵素取代的C1-6烷氧基,任選被鹵素或C1-6烷基取代的苯氧基或任選被單-、二-或三-鹵素取代的C1-6烷硫基;R4、R5、R6和R7獨立表示氫,C1-6烷基或苯基;Z1表示氫或C1-6烷基;且Z2表示氫,鹵素或C1-6烷基。
式(I)的羥基-四氫-萘基脲衍生物及其互變異構體和立體異構體,以及它們的鹽出人意外的表現出優異的VR1拮抗活性。因此。它們特別適合用于預防和治療與VR1活性有關的疾病,特別用于治療急性尿失禁和/或膀胱活動過度。
優選式(I)的羥基-四氫-萘基脲衍生物為以下的那些化合物,其中X表示 或 其中Y表示化學鍵,或 R1、R2和R3獨立表示氫,鹵素,羥基,硝基,羧基,氨基,C1-6烷基氨基,二(C1-6烷基)氨基,C3-8環烷基氨基,C1-6烷氧基羰基,苯基,芐基,氨磺酰基,C1-6烷酰基,C1-6烷酰基氨基,氨基甲酰基,C1-6烷基氨基甲酰基,氰基,任選被氰基取代的C1-6烷基,C1-6烷氧基羰基或單-、二-或三-鹵素,任選被單-、二-或三-鹵素取代的C1-6烷氧基,任選被鹵素或C1-6烷基取代的苯氧基或任選被單-、二-或三-鹵素取代的C1-6烷硫基;R4和R5獨立表示氫或C1-6烷基;和Z1和Z2各自表示氫。
在另一個實施方案中,式(I)的羥基-四氫-萘基脲衍生物可為以下的那些化合物,其中X表示 或 其中Y表示化學鍵,或 R1、R2和R3獨立表示氫,鹵素,二(C1-6烷基)氨基,C3-8環烷基氨基,C1-6烷氧基羰基,任選被氰基取代的C1-6烷基,C1-6烷氧基羰基或單-、二-或三-鹵素,任選被單-、二-或三-鹵素取代的C1-6烷氧基,任選被鹵素或C1-6烷基取代的苯氧基或任選被單-、二-或三-鹵素取代的C1-6烷硫基;R4和R5各自表示氫;和Z1和Z2各自表示氫。
在另一個實施方案中,式(I)的羥基-四氫-萘基脲衍生物可為以下的那些化合物,其中X表示
其中Y表示化學鍵,或 其中R1和R2獨立表示氫,氯基,溴基,氟基,環戊基氨基,三氟甲基或三氟甲氧基;R3、R4和R5各自表示氫;和Z1和Z2各自表示氫。
在另一個實施方案中,式(I)的羥基-四氫-萘基脲衍生物可為以下的那些化合物,其中X表示 其中Y表示化學鍵,或 其中R1和R2獨立表示氫,氯基,溴基,氟基,環戊基氨基,三氟甲基或三氟甲氧基;R3、R4和R5各自表示氫;和Z1和Z2各自表示氫。
更優選所述式(I)的羥基-四氫-萘基脲衍生物選自1)N-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]-N′-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基)脲;
2)N-(3-氯苯基)-N′-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基)脲;3)N-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基)-N′-[3-(三氟甲基)苯基]脲;4)N-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基)-N′-[4-(三氟甲基)苯基]脲;5)3-({[(7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基)氨基]羰基}氨基)苯甲酸乙酯;6)N-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基)-N′-(1-萘基(naphthyl))脲;7)N-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基)-N′-(2-萘基)脲;8)N-(3,4-二氯苯基)-N′-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基)脲;9)N-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基)-N′-(4-異丙基苯基)脲;10)N-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基)-N′-(4-苯氧基苯基)脲;11)N-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]-N′-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基]脲;12)N-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]-N′-[(7S)-7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基]脲;13)N-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]-N′-[(7R)-7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基]脲;14)N-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基)-N′-苯基脲;15)N-(4-氯苯基)-N′-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基)脲;16)N-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基)-N′-[2-(三氟甲基)苯基]脲;17)N-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基)-N′-[4-(三氟甲基)苯基]脲;18)N-(3,4-二氯苯基)-N′-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基)脲;19)N-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基)-N′-[4-(三氟甲氧基)苯基]脲;20)N-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基)-N′-[4-(三氟甲氧基)芐基]脲;21)N-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基)-N′-(2,4,6-三甲氧基芐基)脲;22)N-(2,6-二氟芐基)-N′-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基)脲;23)N-[(7R)-7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基]-N′-[4-(三氟甲基)芐基]脲;24)N-[(7S)-7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基]-N′-[4-(三氟甲基)-芐基]脲;25)N-[(7R)-7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基]-N′-[4-(三氟甲氧基)-芐基]脲;26)N-[(7S)-7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基]-N′-[4-(三氟甲氧基)-芐基]脲;27)N-[2-(4-氯苯基)乙基]-N′-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基)脲;和
28)N-[3-氟-4-(三氟甲基)芐基]-N′-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基)脲。
在本發明的上下文中,如果沒有另外指明,則所述取代基一般具有以下含義烷基本身以及在烷氧基、烷酰基、烷氨基、烷氨基-羰基、烷氨基磺酰基、烷磺酰基氨基、烷氧基羰基、烷氧羰基氨基和烷酰基氨基中的烷基表示一般含1-6個碳原子、優選含1-4個碳原子并特別優選含1-3個碳原子的直鏈烷基或支鏈烷基,示例并優選表示甲基、乙基、正丙基、異丙基、叔丁基、正戊基和正己基。
烷氧基示例并優選表示甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、叔丁氧基、正戊氧基和正己氧基。
烷酰基示例并優選表示乙酰基和丙酰基。
烷氨基表示具有一個或兩個(獨立選擇)烷基取代基的烷氨基,示例并優選表示甲氨基、乙氨基、正丙氨基、異丙氨基、叔丁氨基、正戊氨基、正己氨基、N,N-二甲基氨基、N,N-二乙基氨基、N-乙基-N-甲基氨基、N-甲基-N-正丙基氨基、N-異丙基-N-正丙基氨基、N-叔丁基-N-甲基氨基、N-乙基-N-正戊基氨基和N-正己基-N-甲基氨基。
烷氨基羰基或烷基氨基甲酰基表示含一個或多個(獨立選擇)烷基取代基的烷氨基羰基,示例并優選表示甲氨基羰基、乙氨基羰基、正丙氨基羰基、異丙氨基羰基、叔丁氨基羰基、正戊氨基羰基、正己氨基羰基、N,N-二甲基氨基羰基、N,N-二乙基氨基羰基、N-乙基-N-甲基氨基羰基、N-甲基-N-正丙基氨基羰基、N-異丙基-N-正丙基氨基羰基、N-叔丁基-N-甲基氨基羰基、N-乙基-N-正戊基氨基羰基和N-正己基-N-甲基氨基羰基。
烷氧基羰基示例并優選表示甲氧基羰基、乙氧基羰基、正丙氧基羰基、異丙氧基羰基、叔丁氧基羰基、正戊氧基羰基和正己氧基羰基。烷氧羰基氨基示例并優選表示甲氧羰基氨基、乙氧羰基氨基、正丙氧羰基氨基、異丙氧羰基氨基、叔丁氧羰基氨基、正戊氧羰基氨基和正己氧羰基氨基。
烷酰基氨基示例并優選表示乙酰氨基和丙酰氨基。
環烷基本身和在環烷基氨基和環烷基羰基中的環烷基一般表示含3-8個碳原子并優選含5-7個碳原子的環烷基,示例并優選表示環丙基、環丁基、環戊基、環己基和環庚基。
環烷基氨基表示含一個或2個(獨立選擇)環烷基取代基的環烷基氨基,示例并優選表示環丙基氨基、環丁基氨基、環戊基氨基、環己基氨基和環庚基氨基。
鹵素表示氟、氯、溴和碘。
優選本發明的藥物還包含一種或多種藥學上可接受的載體和/或賦形劑。
式(I)的羥基-四氫-萘基脲衍生物及其互變異構體和立體異構體,以及它們的鹽可有效地治療或預防選自以下與VR1活性有關的疾病急性尿失禁、膀胱活動過度、慢性痛、神經病性痛、術后痛、類風濕關節炎性痛、神經痛、神經病、感覺過敏、神經損傷、局部缺血、神經變性和/或中風以及例如哮喘和COPD等炎性疾病。
另外,所述化合物可用于治療和預防神經病性痛(一類通常與帶狀皰疹和皰疹后神經痛有關的疼痛)、痛性糖尿病性神經病、神經病性下背痛、創傷后和術后神經痛、由神經壓迫和其它神經痛引起的神經痛、幻痛、復雜的局部疼痛綜合癥、如與HIV感染有關的那些感染性或類感染性神經病、與中樞神經系統障礙有關的疼痛(例如多發性硬化病、帕金森病、脊索損傷或創傷性腦損傷)和中風后疼痛。
此外,所述化合物可用于治療肌肉骨骼痛(一類通常與骨關節炎或類風濕性關節炎或其它形式的關節炎有關的疼痛)和背痛。
另外,所述化合物可用于治療與癌癥有關的疼痛,包括與癌癥或癌癥治療有關的內臟痛或神經病性痛。
此外,所述化合物可用于治療內臟痛,例如與如膽石絞痛(colik)的空腔臟器阻塞有關的疼痛、與腸應激綜合征有關的疼痛、骨盆痛、外陰痛、睪丸痛或前列腺痛。
所述化合物也可用于治療與關節、皮膚、肌肉或神經的炎性損傷有關的疼痛。
所述化合物用于治療口頜面痛和頭痛,例如偏頭痛或壓力型(tension-type)頭痛。
發明實施方案本發明的式(I)化合物可通過但不限于以下的[A]、[B]、[C]、[D]、[E]、[F]或[G]法制備。在一些實施方案中,用作原料或中間體的化合物的一個或多個取代基,例如氨基、羧基和羥基最好用本領域技術人員熟知的保護基團進行保護。在″Protective Groups in Organic Synthesis(第三版)″(Greene and Wuts,John Wiley and Sons,New York,1999)中描述了保護基團的實例。
式(I)的化合物(其中X、Z1和Z2的定義同上)可由式(II)的化合物(其中Z1和Z2的定義同上)和異氰酸酯(III)(其中X的定義同上)的反應制備。
該反應可在以下的溶劑中進行,所述溶劑包括例如鹵代烴,例如二氯甲烷、氯仿和1,2-二氯乙烷;醚,如乙醚、異丙醚、二噁烷、四氫呋喃(THF)和1,2-二甲氧基乙烷;芳烴,如苯、甲苯和二甲苯;腈,如乙腈;酰胺,如N,N-二甲基甲酰胺(DMF)、N,N-二甲基乙酰胺(DMAC)和N-甲基吡咯烷酮(NMP);脲,如1,3-二甲基-咪唑烷酮(DMI);亞砜,如二甲亞砜(DMSO);及其他。可任選使用兩種或兩種以上的上面列舉的溶劑混合物。
該反應可在例如吡啶或三乙胺等有機堿存在下進行。
該反應的反應溫度可根據待反應的化合物而選擇設定。反應溫度通常為但不限于約室溫至100℃。該反應通常可進行30分鐘至48小時,并優選1-24小時。
式(II)的化合物和異氰酸酯(III)可以購買得到或者運用已知技術來制備。
式(I)的化合物(其中X、Z1和Z2的定義同上)可由式(II)的化合物(其中Z1和Z2的定義同上)與光氣、雙光氣、三光氣、1,1-羰基二咪唑(CDI)或1,1’-羰基二(1,2,4-三唑)(CDT)反應,然后將式(IV)的化合物(其中X的定義同上)加至反應混合物中制備。
該反應可在以下的溶劑中進行,所述溶劑包括例如鹵代烴,如二氯甲烷、氯仿和1,2-二氯乙烷;醚,如乙醚、異丙醚、二噁烷、四氫呋喃(THF)和1,2-二甲氧基乙烷;芳烴,如苯、甲苯和二甲苯;腈,如乙腈;酰胺,如N,N-二甲基甲酰胺(DMF)、N,N-二甲基乙酰胺(DMAC)和N-甲基吡咯烷酮(NMP);脲,如1,3-二甲基-2-咪唑烷酮(DMI);及其他。可任選使用兩種或兩種以上的上面列舉的溶劑混合物。
該反應的反應溫度可根據待反應的化合物而選擇設定。反應溫度一般為但不限于約20℃-50℃。該反應一般可進行30分鐘至10小時,并優選1-24小時。
光氣、雙光氣、三光氣、CDI或CDT可購買得到,式(IV)的化合物可購買得到或者運用已知技術制備。
式(I)的化合物(其中X、Z1和Z2的定義同上)可由式(II)的化合物(其中Z1和Z2的定義同上)和式(V)的化合物(其中L1表示鹵原子,如氯原子、溴原子或碘原子)反應,然后將式(IV)的化合物(其中X的定義同上)加至反應混合物中制備。
該反應可在以下的溶劑中進行,所述溶劑包括例如鹵代烴,如二氯甲烷、氯仿和1,2-二氯乙烷;醚,如乙醚、異丙醚、二噁烷、四氫呋喃(THF)和1,2-二甲氧基乙烷;芳烴,如苯、甲苯和二甲苯;腈,如乙腈;酰胺,如N,N-二甲基甲酰胺(DMF)、N,N-二甲基乙酰胺(DMAC)和N-甲基吡咯烷酮(NMP);脲,如1,3-二甲基-2-咪唑烷酮(DMI);及其他。可任選使用兩種或兩種以上的上面列舉的溶劑混合物。
該反應的反應溫度可根據待反應的化合物而選擇設定。反應溫度一般為但不限于約30℃-120℃。該反應一般可進行1小時-48小時,并優選2-24小時。
該反應最好在堿存在下進行,所述堿包括例如有機胺,如吡啶、三乙胺、N,N-二異丙基乙胺、二甲基苯胺、二乙基苯胺、4-二甲氨基吡啶及其他。
式(V)的化合物可購買得到或者運用已知技術制備。
式(I)的化合物(其中X、Z1和Z2的定義同上)可由式(IV)的化合物(其中X的定義同上)與光氣、雙光氣、三光氣、1,1-羰基二咪唑(CDI)或1,1’-羰基二(1,2,4-三唑)(CDT)反應,然后將(II)的化合物(其中Z1和Z2的定義同上)加至反應混合物中制備。
該反應可在以下的溶劑中進行,所述溶劑包括例如鹵代烴,如二氯甲烷、氯仿和1,2-二氯乙烷;醚,如乙醚、異丙醚、二噁烷、四氫呋喃(THF)和1,2-二甲氧基乙烷;芳烴,如苯、甲苯和二甲苯;腈,如乙腈;酰胺,如N,N-二甲基甲酰胺(DMF)、N,N-二甲基乙酰胺(DMAC)和N-甲基吡咯烷酮(NMP);脲,如1,3-二甲基-2-咪唑烷酮(DMI);亞砜,如二甲亞砜(DMSO);及其他。可任選使用兩種或兩種以上的上面列舉的溶劑的混合物。
該反應的反應溫度可根據待反應的化合物而選擇設定。反應溫度一般為但不限于約30℃-100℃。
該反應一般進行30分鐘-40小時,并優選1-24小時。
式(I)的化合物(其中X、Z1和Z2的定義同上)可由式(IV)的化合物(其中X的定義同上)與式(V)的化合物(其中L1表示鹵原子,如氯原子、溴原子或碘原子)反應,然后將式(II)的化合物(其中Z1和Z2的定義同上)加至反應混合物中制備。
該反應可在以下的溶劑中進行,所述溶劑包括例如鹵代烴,如二氯甲烷、氯仿和1,2-二氯乙烷;醚,如乙醚、異丙醚、二噁烷、四氫呋喃(THF)和1,2-二甲氧基乙烷;芳烴,如苯、甲苯和二甲苯;腈,如乙腈;酰胺,如N,N-二甲基甲酰胺(DMF)、N,N-二甲基乙酰胺(DMAC)和N-甲基吡咯烷酮(NMP);脲,如1,3-二甲基-2-咪唑烷酮(DMI);及其他。可任選使用兩種或兩種以上的上面列舉的溶劑混合物。
該反應的反應溫度可根據待反應的化合物而選擇設定。反應溫度一般為但不限于約30℃-120℃。
該反應一般可進行1小時-48小時,并優選2-24小時。
該反應最好在堿存在下進行,所述堿包括例如有機胺,如吡啶、三乙胺、N,N-二異丙基乙胺、二甲基苯胺、二乙基苯胺、4-二甲氨基吡啶及其他。
式(I’)化合物(其中X和Z2的定義同上)可通過以下步驟制備在步驟F-1中,式(VII)化合物(其中X和Z2的定義同上)可采用如方法[A]、[B]、[C]、[D]或[E]所描述的用于制備式(I)化合物的類似方法制備,其中使用式(VI)化合物(其中Z2的定義同上)代替式(II)化合物。
在步驟F-2中,式(VIII)化合物(其中X和Z2的定義同上)可通過式(VII)化合物(其中X和Z2的定義同上)與酸例如鹽酸反應制備。
該反應可在以下的溶劑中進行,所述溶劑包括例如鹵代烴,如二氯甲烷、氯仿和1,2-二氯乙烷;醚,如乙醚、異丙醚、二噁烷、四氫呋喃(THF)和1,2-二甲氧基乙烷;醇,如甲醇、乙醇;水及其他。可任選使用兩種或兩種以上的上面列舉的溶劑混合物。
該反應的反應溫度可根據待反應的化合物而選擇設定。反應溫度一般為但不限于約20℃-100℃。該反應一般可進行30分鐘-10小時,并優選1-24小時。
在步驟F-3中,式(I’)化合物(其中X和Z2的定義同上)可通過式(VIII)化合物(其中X和Z2的定義同上)與還原劑例如硼氫化鈉或氫化鋁鋰反應制備。
該反應可在以下的溶劑中進行,所述溶劑包括例如醚,如乙醚、異丙醚、二噁烷、四氫呋喃(THF)和1,2-二甲氧基乙烷;脂族烴,例如正己烷、環己烷;芳烴,如苯、甲苯和二甲苯;醇,如甲醇、乙醇、異丙醇,及其他。可任選使用兩種或兩種以上的上面列舉的溶劑混合物。
該反應的反應溫度可根據待反應的化合物而選擇設定。反應溫度一般為但不限于約-20℃-50℃。該反應一般可進行30分鐘-10小時,并優選1-24小時。
式(I”)化合物(其中X和Z2的定義同上,且Z1為C1-6烷基)可通過以下方法分兩步制備在步驟F-4中,式(IX)的化合物(其中X和Z2的定義同上,且Z3為氫或C1-5烷基)可通過式(VIII)的化合物(其中X和Z2的定義同上)與三(C1-6烷基)氧代锍鹽例如碘化三甲基氧代锍鹽反應制備。
該反應可在以下的溶劑中進行,所述溶劑包括例如醚,如乙醚、異丙醚、二噁烷、四氫呋喃(THF)和1,2-二甲氧基乙烷;脂族烴,例如正己烷、環己烷;芳烴,如苯、甲苯和二甲苯;及其他。可任選使用兩種或兩種以上的上面列舉的溶劑混合物。
該反應的反應溫度可根據待反應的化合物而選擇設定。反應溫度一般為但不限于約-20℃-50℃。該反應一般可進行30分鐘-10小時,并優選1-24小時。
在步驟F-5中,式(I”)的化合物(其中X和Z2的定義同上,且Z1為C1-6烷基)可通過式(IX)的化合物(其中X和Z2的定義同上,且Z3為氫或C1-5烷基)與還原劑例如硼氫化鈉或氫化鋁鋰反應制備。
該反應可在以下的溶劑中進行,所述溶劑包括例如醚,如乙醚、異丙醚、二噁烷、四氫呋喃(THF)和1,2-二甲氧基乙烷;脂族烴,例如正己烷,環己烷;芳烴,如苯、甲苯和二甲苯;及其他。可任選使用兩種或兩種以上的上面列舉的溶劑混合物。
該反應的反應溫度可根據待反應的化合物而選擇設定。反應溫度一般為但不限于約20℃-50℃。
該反應一般可進行30分鐘-10小時,并優選1-24小時。
式(VI)化合物可購買得到或運用已知技術制備。
化合物(I)的立體異構體R型(I-a)(其中X、Z1和Z2的定義同上)可通過采用與用于制備式(I)化合物的方法[A]、[B]、[C]、[D]或[E]所描述的類似方法來制備,其中使用式(II-a)的化合物(其中Z1和Z2的定義同上)代替式(II)化合物。
化合物(I)的立體異構體S型(I-a’)(其中X、Z1和Z2的定義同上)可通過與用于制備式(I)化合物的方法[A]、[B]、[C]、[D]或[E]類似的方法來制備,其中使用式(II-a’)化合物(其中Z1和Z2的定義同上)代替式(II)化合物。
式(II-a)或(II-a’)的化合物可運用已知技術制備。
當式(I)所示化合物或其鹽的結構中具有不對稱碳時,它們的光學活性化合物及外消旋混合物也包括在本發明的范圍之內。
式(I)所示化合物的典型的鹽包括通過本發明的化合物與無機酸或有機酸、或者無機堿或有機堿的反應所制備的鹽。這些鹽分別稱為酸加成鹽和堿加成鹽。
形成酸加成鹽的酸包括無機酸,例如但不限于硫酸、磷酸、鹽酸、氫溴酸、氫碘酸等;和有機酸,例如但不限于對甲苯磺酸、甲磺酸、草酸、對溴苯磺酸、碳酸、琥珀酸、檸檬酸、苯甲酸、乙酸等。
堿加成鹽包括衍生自以下無機堿和有機堿的那些鹽,所述無機堿例如但不限于氫氧化銨、堿金屬氫氧化物、堿土金屬氫氧化物、碳酸鹽、碳酸氫鹽等;所述有機堿例如但不限于乙醇胺、三乙胺、三(羥甲基)甲胺等。無機堿的實例包括氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸鉀、碳酸鈉、碳酸氫鈉、碳酸氫鉀、氫氧化鈣、碳酸鈣等。
本發明的化合物或其鹽,根據其取代基不同可修飾成為低級烷基酯或已知的其它酯;和/或水合物或其它溶劑合物。這些酯、水合物和溶劑合物包括在本發明范圍之內。
本發明的化合物可以以下口服形式給藥,例如但不限于普通片劑和腸溶包衣片劑、膠囊劑、丸劑、散劑、顆粒劑、酏劑、酊劑、溶液劑、混懸劑、糖漿劑、固體和液體氣霧劑以及乳劑。它們也可經藥學領域普通技術人員所熟知的以下腸胃外形式給藥,例如但不限于靜脈內、腹膜內、舌下、肌內等。本發明的化合物可通過合適的鼻內介質的局部施用以鼻內形式給藥,或采用本領域普通技術人員所熟知的透皮釋放系統經皮途徑給藥。
本領域普通技術人員可根據以下多種因素選擇使用本發明化合物的給藥方案,這些因素包括但不限于年齡、體重、性別、接受者的醫學狀況、待治療病癥的嚴重性、給藥途徑、接受者的代謝水平和排泄功能、使用的劑型、使用的具體化合物及其鹽。
優選本發明化合物在給藥前與一種或多種藥學上可接受的賦形劑一起配制。賦形劑為惰性物質,例如但不限于載體、稀釋劑、矯味劑、增甜劑、潤滑劑、增溶劑、懸浮劑、粘合劑、片劑崩解劑和膠囊用材料。
本發明的還一個實施方案為藥用制劑,所述制劑包含本發明的化合物和一種或多種藥學上可接受的賦形劑,所述賦形劑與所述制劑中的其它組分相容并且不會對接受者有害。通過將治療有效量的本發明化合物與一種或多種藥學上可接受的賦形劑一起組合,可制備本發明的藥用制劑。在制備本發明組合物的過程中,活性組分可與稀釋劑混合,或裝入載體內,所述載體可為膠囊、小袋、紙或其它容器形式。所述載體可作為稀釋劑,可為固體、半固體或作為介質的液體材料,或者可為以下的形式片劑、丸狀散劑、錠劑、酏劑、混懸劑、乳劑、溶液劑、糖漿劑、氣霧劑、軟膏劑,含有例如高達10%重量的活性化合物,軟和硬明膠膠囊、栓劑、無菌注射溶液和無菌包裝散劑。
為了口服給藥,所述活性組分可與以下口服且無毒的藥學上可接受的載體、任選與崩解劑、任選與粘合劑以及任選與潤滑劑組合,其中所述載體有,例如但不限于乳糖、淀粉、蔗糖、葡萄糖、碳酸鈉、甘露糖醇、山梨醇、碳酸鈣、磷酸鈣、硫酸鈣、甲基纖維素等;所述崩解劑有,例如但不限于玉米、淀粉、甲基纖維素、瓊脂膨潤土(agarbentonite)、黃原膠、藻酸等;所述粘合劑有,例如但不限于明膠、天然糖(natural sugars)、β-乳糖、玉米增甜劑、天然和合成樹膠、阿拉伯膠、黃芪膠、藻酸鈉、羧甲基纖維素、聚乙二醇、蠟等;所述潤滑劑有,例如但不限于硬脂酸鎂、硬脂酸鈉、硬脂酸、油酸鈉、苯甲酸鈉、乙酸鈉、氯化鈉、滑石粉等。
在散劑形式中,載體可為與細粒活性組分混合的細粒固體。活性組分可以合適的比例與具有粘合特性的載體混合并壓縮成壓片所需的形狀和大小。優選散劑和片劑含有約1%重量-約99%重量的活性組分,所述活性組分為本發明的新組合物。合適的固體載體有羧甲基纖維素鎂、低熔點蠟和可可油。
無菌液體制劑包括混懸劑、乳劑、糖漿劑和酏劑。所述活性組分可溶于或懸浮在藥學上可接受的載體(例如無菌水、無菌有機溶劑、或無菌水與無菌有機溶劑的混合溶劑)中。
所述活性組分也可溶于例如含水丙二醇的合適有機溶劑中。通過將細粒活性組分分散在淀粉或羧甲基纖維素鈉水溶液或合適的油中,可制備其它組合物。
所述制劑可為單位劑型,是物理學上含有單位劑量的離散單位,適合用于人或其它哺乳動物給藥。單位劑型可為一個膠囊或片,或為多個膠囊或片片。“單位劑量”是指計算可產生所需治療效果的預先確定的本發明活性化合物的量,同時還含有一種或多種賦形劑。單位劑量中活性組分的量可根據所涉及的具體治療而在約0.1mg-約1000mg或以上范圍改變或調整。
當為達到所指定的效果時,本發明使用的一般口服劑量為約0.01mg/kg/天-約100mg/kg/天,優選0.1mg/kg/天-30mg/kg/天,并最優選約0.5mg/kg/天-約10mg/kg/天。在經腸胃外給藥的情況中,已證明一般最好給予約0.001mg/kg/天-100mg/kg/天、優選0.01mg/kg/天-1mg/kg/天的量。本發明的化合物可按日劑量1次給予,或者將日劑量按每天2次、3次或多次的分劑量給予。當釋放是經皮形式進行時,給藥當然是連續的。
實施例將以實施例形式描述本發明,但它們并無限定本發明的邊界和范圍之意。
在下面的實施例中,除非另外指明,否則所有定量數據是以%重量計。
采用電噴霧(ES)電離技術(micromass Platform LC)獲得質譜。熔點未進行校正。在Micromass Platform LC上記錄液相色譜-質譜(LC-MS)數據,Shimadzu Phenomenex ODS柱(4.6mmφ×30mm),洗脫液∶乙腈-水(9∶1至1∶9)的混合液,流速1ml/min。在預制硅膠板(Merck硅膠60F-254)上進行TLC。所有柱色譜分離均使用硅膠(WAKO-gel C-200(75-150μm))。所有化學試劑均為試劑級并購自Sigma-Aldrich、Wako pure chemical industries,Ltd.、Tokyo Kasei Kogyo co.Ltd.、Archcorporation。
所有原料可購買得到或采用文獻方法制備。
通過以下的實驗和藥理學試驗,來確定本發明的化合物的作用。
(實驗1)(1)建立人VR1-CHO luc9aeq細胞系從軸突切開的后根神經節庫中克隆人香草酸受體(hVR1)cDNA(WO 00/29577)。將克隆的hVR1 cDNA用pcDNA3載體構建并轉染至CHOluc9aeq細胞系中。所述細胞系含有水母發光蛋白和CRE-熒光素酶受體基因作為讀出信號。在選擇性培養基(用10%FCS、1.4mM丙酮酸鈉、20mM HEPES、0.15%碳酸氫鈉、100U/ml青霉素、100μg/ml鏈霉素、2mM谷氨酰胺、非必需氨基酸和2mg/ml G418補料的DMEM/F12培養基(Gibco BRL))中,通過限定稀釋法(limiting dilution)克隆該轉染子。在辣椒素-刺激的克隆體中測定Ca2+流入量。選擇高度響應的克隆并進一步用于該方案的實驗中。將人VR1-CHO luc9aeq細胞保持在選擇性培養基中,并每3-4天以1-2.5×105細胞/瓶(75mm2)的速度傳代。
(2)使用FDSS-3000測定Ca2+流入量將人VR1-CHO luc9aeq細胞懸浮在培養基中,并以1,000細胞/孔的密度接種在384-孔板(黑壁透明基質/Nalge Nunc International)上,除G418外,所述培養基與選擇性培養基相同。培養48小時后,將培養基換成2μM Fluo-3AM(分子探針)和0.02%Puronic F-127/測定緩沖液(Hank′s平衡鹽溶液(HBSS)、17mM HEPES(pH7.4)、1mM丙磺舒、0.1%BSA中),并將細胞在25℃孵育60分鐘。用測定緩沖液洗滌兩次后,將細胞與測試化合物或介質在25℃孵育20分鐘。使用10nM辣椒素刺激60秒后,通過FDSS-3000(λex=488nm,λem=540nm/HamamatsuPhotonics)測定細胞質的Ca2+活動。計算積分(Integral)R并與對照物比較。
(實驗2)(1)大鼠后根神經節神經元的制備將剛出生的Wister大鼠(5-11天)處死并剪除后根神經節(DRG)。用0.1%胰蛋白酶(Gibco BRL)/PBS(-)(Gibco BRL)在37℃孵育DRG 30分鐘,然后加入一半體積的胎牛血清(FCS),并將細胞離心沉降(spundown)。將DRG神經元細胞再懸浮在Ham F12/5%FCS/5%馬血清(Gibco BRL)中,并通過反復吸液使其分散,然后通過70μm篩目(Falcon)。將培養板在37℃孵育3小時以除去污染的Schwann細胞。回收非粘附細胞,并在50ng/ml重組大鼠NGF(Sigma)和50μm 5-氟脫氧尿苷(Sigma)的存在下,以1×104細胞/50μl/孔的密度,用涂覆層粘連蛋白的384孔板(Nunc)再培養2天。
(2)Ca2+遷移的測定用HBSS(用17mM HEPES(pH7.4)和0.1%BSA補料)洗滌DRG神經元細胞兩次。使用2μM氟-3AM(分子探針)、0.02%PF127(GibcoBRL)和1mM丙磺舒(Sigma)在37℃孵育40分鐘后,將細胞洗滌3次。將細胞與VR1拮抗劑或介質(二甲亞砜)一起孵育,然后與1μm辣椒素/FDSS-6000(λex=480nm,λem=520nm/Hamamatsu Photonics)一起孵育。在480nm處監控熒光變化2.5分鐘。計算積分R并與對照物比較。
(實驗3)用乙醚將雄性Wistar大鼠(10周)麻醉并通過頭頸易位處死。將整個膀胱切除并置于加氧改性(oxygenated modified)的Krebs-Henseleit溶液(pH7.4)中,組成如下112mM NaCl、5.9mM KCl、1.2mM MgCl2、1.2mM NaH2PO4、2mM CaCl2、2.5mM NaHCO3、12mM葡萄糖。按照先前描述的方法[Maggi CA等Br.J.Pharmacol.108801-805,1993]研究膀胱的收縮反應。記錄大鼠逼肌縱條在1g負荷下的等長張力(Isometric tension)。在每次刺激前,使膀胱條平衡60分鐘。80mM KCl下,測定再次觀察到收縮反應的時間間隔為15分鐘。將對KCl的反應作為間隔標準來評價對辣椒素的最大反應。在用1μM辣椒素(介質80%鹽水、10%EtOH和10%吐溫80)刺激前,通過將所述條與化合物一起保溫30分鐘,來研究所述化合物的作用。取從同一動物制備的這些制品的一個作為對照,而其它的用于評價化合物。計算每次辣椒素-誘導的收縮與內標(即KCl-誘導的收縮)的比值,評價所述測試化合物對辣椒素-誘導的收縮的影響。
(1)人P2X1-轉染的CHOluc9aeq細胞系的制備建立人P2X1-轉染的CHOluc9aeq細胞系并維持在Dulbecco氏改進的Eagle氏培養基(DMEM/F12)中,所述培養基用7.5%FCS、20mMHEPES-KOH(pH7.4)、1.4mM丙酮酸鈉、100U/ml青霉素、100μg/ml鏈霉素、2mM谷氨酰胺(Gibco BRL)和0.5單位/ml腺苷三磷酸雙磷酸酶(I級,Sigma)補料。以3×103/50μl孔,將懸浮的細胞接種在384-孔光學底部黑色板(Nalge Nunc International)的每個孔中。隨后將細胞培養48小時以粘附到板上。
(2)細胞內Ca2+水平的測定使用熒光Ca2+螯合染料、Fluo-3AM(分子探針)測定P2X1受體激動劑介導的胞質內Ca2+水平的提高。用洗滌緩沖液(HBSS、17mMHEPES-KOH(pH7.4)、0.1%BSA和0.5單位/ml腺苷三磷酸雙磷酸酶)洗滌粘附在板上的細胞兩次,并在黑暗處、在40μl加樣緩沖液(在洗滌緩沖液中1μM Fluo-3AM、1mM丙磺舒、1μM環孢菌素A、0.01%pluronic(分子探針))中孵育1小時。將所述板用40μl洗滌緩沖液洗滌兩次,并將35μl洗滌緩沖液與5μl測試化合物或作為對照的2′,3′-o-(2,4,6-三硝基苯基)腺苷5′-三磷酸酯(triphpsphate)(分子探針)一起加至每個孔內。在黑暗處再孵育10分鐘后,加入200nMα,β-亞甲基ATP激動劑來引發Ca2+移動。以250毫秒間隔,通過FDSS-6000(λex=410nm,λem=510nm/Hamamatsu Photonics)測定熒光強度。根據該數值計算積分比值并與對照物的積分比值比較。
(實驗4)(1)動物使用雌性Sprague-Dawley大鼠(200-250g/Charles River Japan)。
(2)導管插入經腹膜內給予1.2g/kg尿烷(Sigma)使大鼠麻醉。經中間切口打開腹腔,經穹窿將聚乙烯導管(BECTON DICKINSON,PE50)插入膀胱。同時,切開腹股溝部位,將裝有2IU/ml肝素(Novo Heparin,AventisPharma)的鹽水(Otsuka)溶液的聚乙烯導管(Hibiki,大小5)插入髂骨總動脈內。
(3)膀胱內壓測量將膀胱導管經T-管連接至一個壓力傳感器(Viggo-Spectramed PteLtd,DT-XXAD)和一個微量注射泵(TERUMO)上。室溫下將鹽水以2.4ml/h的速度輸入膀胱。在圖像繪制儀上(Yokogawa)連續記錄膀胱內壓。在給予測試化合物前,在20分鐘時間內,記錄至少3個重復排尿循環,并作為基礎值。
(4)給予測試化合物并用辣椒素刺激膀胱在給予化合物前停止鹽水輸入。將測試化合物溶于乙醇、吐溫80(ICN Biomedicals Inc.)和鹽水的混合物(1∶1∶8,體積比)中,然后以10mg/kg經動脈內給予。給予所述化合物2分鐘后,將10μg溶于乙醇的辣椒素(Nacalai Tesque)經動脈內給予。
(5)分析膀胱內壓測量參數從膀胱內壓測量數據可分析出辣椒素-誘導的膀胱內壓相對升高。將辣椒素-誘導的膀胱壓力與無辣椒素刺激時排尿期間的最大膀胱壓力比較。采用Student的t-檢驗評價測試化合物介導的對膀胱壓力升高的抑制。小于5%的概率水平為顯著性差異。
(實驗5)(1)動物采用雌性Sprague-Dawley大鼠(180-250g/Charles River Japan)。在實驗前48小時,將溶于鹽水的環磷酰胺(CYP)以150mg/kg經腹膜內給予大鼠。
(2)導管插入經腹膜內給予1.25g/kg尿烷(Sigma)使大鼠麻醉。經中間切口打開腹腔,經穹窿將聚乙烯導管(BECTON DICKINSON,PE50)插入膀胱。同時切開腹股溝部位,將裝有鹽水(Otsuka)的聚乙烯導管(BECTONDICKINSON,PE50)插入股靜脈內。膀胱排空后,將大鼠放置1小時,使其從手術中恢復。
(3)膀胱內壓測量將膀胱導管經T-管連接至一個壓力傳感器(Viggo-Spectramed PteLtd,DT-XXAD)和一個微量注射泵(TERUMO)上。室溫下,將鹽水以3.6ml/hr的速度輸入膀胱20分鐘。在圖像繪制儀(Yokogawa)上連續記錄膀胱內壓。在給予測試化合物前,在20分鐘時間內,記錄至少3個重復的排尿循環。
(4)給予測試化合物將測試化合物溶于乙醇、吐溫80(ICN Biomedicals Inc.)和鹽水的混合物(1∶1∶8,V/V/V)中,然后以0.05mg/kg、0.5mg/kg或5mg/kg經靜脈內給予。給予所述化合物3分鐘后,室溫下將鹽水(Nacalai Tesque)以3.6ml/hr的速度輸入膀胱。
(5)分析膀胱內壓測量參數按先前描述的方法分析膀胱內壓測量參數[Lecci A等Eur.J.Pharmacol.259129-135,1994]。根據膀胱內壓測量數據分析排尿頻率和膀胱容量,排尿頻率從排尿間隔計算,而膀胱容量根據第一次排尿以前輸入的鹽水體積計算。采用未配對的Student的t-檢驗評價測試化合物介導的對排尿頻率的抑制和測試化合物介導的膀胱容量增加。小于5%的概率水平為顯著性差異。以平均值±SEM分析來自4-7只大鼠的數據。
大鼠的劇烈疼痛主要在熱板上測定。使用兩種熱板實驗法在經典方法中,將動物放在熱表面(52℃-56℃)上,測定至動物表示出受到傷害的行為(例如跨步(stepping)或舔足)前的潛伏時間;另一種方法是逐漸升溫的熱板法,將實驗動物放在自然溫度的熱板表面上;隨后將該表面緩慢但連續加熱,直至所述動物開始舔后爪;開始舔后爪時所達到的溫度為疼痛閾值。
以用介質處理的對照組為對照測試化合物。在進行疼痛實驗前,物質施用在不同的時間點經不同的施用途徑(i.v.、i.p.、p.o.、i.t.、i.c.v.、s.c、真皮內、透皮)進行。
運用福爾馬林或辣椒素實驗測定持續疼痛,主要測定大鼠的持續疼痛。將1%-5%福爾馬林溶液或10-100μg辣椒素注射至實驗動物的一只后爪內。福爾馬林或辣椒素施用后,所述動物顯示出傷害反應,如退縮(flinching)、舔或咬受感染的爪。在90分鐘內傷害反應的次數為疼痛強度的量度。
以用介質處理的對照組為對照測試化合物。在給予福爾馬林或辣椒素前,物質在不同的時間點經不同的施用途徑(i.v.、i.p.、p.o.、i.t.、i.c.v.、s.c.、真皮內、透皮)進行施用。
大鼠的神經病性痛主要由不同的單側坐骨神經損傷所誘導。該手術在麻醉下進行。第一種坐骨神經損傷是通過環繞坐骨總神經進行寬松的結扎產生(Bennett and Xie,Pain 33(1988)87-107)。第二種是將坐骨總神經緊緊結扎至其直徑的約一半(Seltzer等,Pain 43(1990)205-218)。在下一種方法中,使用一組模型,其中對L5和L6脊神經或只對L5脊神經進行緊緊結扎或切斷(KIM SH;CHUNG JM,通過結扎大鼠的部分脊神經制備外周神經病實驗模型,PAIN 50(3)(1992)355-363)。第四種方法涉及三條坐骨神經的末端分支中的兩條(脛骨神經和腓骨總神經)的軸突切開,只剩下腓腸神經是完整的。而最后一種只包括脛骨分支的軸突切開,而腓腸神經和總神經均未受到損害。對照動物用假手術處理。
術后,這些神經損傷的動物會發展成慢性機械性異常性疼痛(mechanical allodynia)、冷性異常性疼痛(cold allodynioa)以及熱性痛覺過敏。通過壓力傳感器(electronic von Frey Anesthesiometer,IITC Inc.-Life Science Instruments,Woodland Hills,SA,USA;Electronic von FreySystem,Somedic Sales AB,Hrby,Sweden)測定機械性異常性疼痛。熱性痛覺過敏通過放射性熱源(Plantar Test,Ugo Basile,Comerio,Italy)測定,或通過5-10℃的冷板測定,記錄受感染后爪的傷害反應次數作為疼痛強度的度量。用于冷誘導疼痛的進一步實驗是記錄傷害反應的次數,或者紀錄在受感染的后肢的腳底給予丙酮后傷害反應的持續時間。慢性痛一般通過記錄活動的近似晝夜節律(circadanian rhytms)(Surjo and Amdt,Universitt zu Kln,Cologne,Germany)和不同步態的記分(foot print patterns;FOOTPRINTS program,Klapdor等,1997,一種分析腳印圖案的低成本方法,J.Neurosci.Methods 75,49-54)來評價。
以用假手術和介質處理的對照組為對照測試化合物。在進行疼痛試驗前,物質在不同的時間點經不同的施用途徑(i.v.、i.p.、p.o.、i.t.、i.c.v.、s.c.、真皮內、透皮)進行施用。
大鼠炎性疼痛主要通過注射0.75mg角叉菜膠或Freund氏完全佐劑至一只后爪中而誘導。這些動物會發展成兼有機械性異常性疼痛和熱性痛覺過敏的水腫。通過壓力傳感器(electronic von FreyAnesthesiometer,IITC Inc.-Life Science Instruments,Woodland Hills,SA,USA)測定機械性異常性疼痛。通過放射性熱源(Plantar Test,Ugo Basile,Comerio,Italy,Paw thermal stimulator,G..Ozaki,University of California,USA)測定熱性痛覺過敏。對于水腫,可使用兩種方法測定。在第一種方法中,將動物處死并將受感染的后爪分段、稱量。第二種方法包括爪體積差別,通過使用器官充滿度測量器(Ugo Basile,Comerio,Italy)測定滲水體積確定。
以未發炎并用介質處理的對照組為對照測試化合物。在進行疼痛試驗前,物質在不同的時間點經不同的施用途徑(i.v、i.p.、p.o.、i.t.、i.c.v、s.c.、真皮內、透皮)進行施用。
用單劑量的50-80mg/kg鏈脲霉素經腹膜內注射處理大鼠,在1-3周內,大鼠會發展成深度高血糖和機械性異常性疼痛。通過壓力傳感器(electronic von Frey Anesthesiometer,IITC Inc.-Life ScienceInstruments,Woodland Hills,SA,USA)測定機械性異常性疼痛。
以糖尿病性和非糖尿病性介質處理的對照組動物為對照測試化合物。在進行疼痛試驗前,物質在不同的時間點經不同的施用途徑(i.v.、i.p.、p.o.、i.t.、i.c.v.、s.c、真皮內、透皮)進行施用。
在人VR1-轉染的CHO細胞系中,辣椒素-誘導Ca2+流入的IC50結果如實施例所示并列入以下實施例的表格中。這些數據與通過固相合成得到的化合物一致,因此約為40%-90%的純度水平。出于實踐上的原因,將所述化合物活性歸于以下四類IC50=A(<或=)0.1μM<B(<或=)0.5μM<C(<或=)1μM<D在上述(2)-(5)的其它實驗中,本發明化合物也顯示出優異的選擇性和很強的活性。
原料化合物的制備方法[原料化合物A] 向攪拌下的8-氨基-2-萘酚(50.0g,314mmol)的四氫呋喃(1000mL)溶液中加入二碳酸二叔丁酯(68.6g,314mmol)。將該混合物在70℃攪拌18小時。將該混合物冷卻至室溫后,減壓除去溶劑。向殘余物中加入乙酸乙酯,并用飽和碳酸鈉水溶液洗滌,然后用水洗滌。將萃取的有機層用Na2SO4干燥,過濾并減壓濃縮。向得到的殘余物中加入異丙醚,然后將沉淀過濾并干燥,得到N-叔丁氧基羰基-8-氨基-2-萘酚(64.2g,79%收率)。
MS(ESI)m/z 259[M]+1H NMR(DMSO-d6)δ1.48(s,9H),7.07(dd,J=2.2Hz and 8.85Hz,1H),7.20(t,J=7.9Hz,1H),7.24(d,J=2.2Hz,1H),7.36(d,J=7.25Hz,1H),7.60(d,J=8.2Hz,1H),7.75(d,J=8.8Hz,1H),8.92(s,1H).
接著,在室溫下將碘乙烷(42.3g,272mmol)加至N-叔丁氧基羰基-8-氨基-2-萘酚(64.0g,247mmol)和碳酸銫(161g,493mmol)在300mL無水DMF中的混合物中。在60℃下攪拌該混合物2小時。將水加至該混合物中,并用乙酸乙酯萃取產物。將有機層用水和鹽水洗滌,Na2SO4干燥,過濾并減壓濃縮。向得到的殘余物中加入異丙醚,然后收集沉淀并干燥,得到(7-乙氧基-萘-1-基)-氨基甲酸-叔丁酯(47.9g,67.5%收率)。
MS(ESI)m/z 287[M]+1H NMR(DMSO-d6)δ1.41(t,J=6.95Hz,3H),1.50(s,9H),4.16(q,J=6.95Hz,2H),7.15(dd,J=2.55 and 8.8Hz,1H),7.28(t,J=8.8Hz,1H),7.36(d,J=2.2Hz,1H),7.54(d,J=7.25Hz,1H),7.61(d,J=8.2Hz,1H),7.80(d ,J=8.85Hz,1H),9.12(s,1H).
接著,向(7-乙氧基-萘-1-基)-氨基甲酸-叔丁酯(47.9g,167mmol)在100mL無水1,4-二噁烷中的溶液中加入4N HCl的1,4-二噁烷(100mL)溶液。在室溫下攪拌該混合物2小時。將異丙醚加至該反應混合物中,然后過濾沉淀。向得到的固體中加入飽和碳酸氫鈉溶液,并用乙酸乙酯萃取產物。將有機層用Na2SO4干燥,過濾并減壓濃縮,得到7-乙氧基-萘-1-基-胺(27.0g,86.3%收率)。
MS(ESI)m/z 187[M]+1H NMR(DMSO-d6)δ1.39(t,J=11.3Hz,3H),4.15(q,J=11.3Hz,2H),5.52(s(br),2H),6.64(dd,J=3.75 and 10.05Hz,1H),7.01-7.07(m,3H),7.39(d,J=3.8Hz,1H),7.63(d,J=14.45Hz,1H).
接著,-78℃下向裝有7-乙氧基-萘-1-基-胺(1.80g,9.61mmol)和叔丁醇(2.13g,28.8mmol)在四氫呋喃(20ml)中的混合物的燒瓶中加入液氨(300mL)。30分鐘內將鋰(0.200g,28.8mmol)加至該混合物中并在-78℃下攪拌1小時。加入甲醇和水,并在室溫下攪拌該混合物16小時以使氨蒸發。向得到的殘余物中加入乙酸乙酯。將有機層用水洗滌,Na2SO4干燥,過濾并減壓濃縮,得到7-乙氧基-5,8-二氫萘-1-基-胺(1.37g,76%收率)。
向攪拌下的7-乙氧基-5,8-二氫萘-1-基-胺(1.07g,5.65mmol)在四氫呋喃(30mL)中的溶液中加入2N HCl(10mL)水溶液,并在40℃下攪拌1小時。加入碳酸氫鈉中和該混合物,并用乙酸乙酯萃取產物。將有機層用水洗滌,Na2SO4干燥,過濾并減壓濃縮,得到8-氨基-3,4-二氫-1H-萘-2-酮(0.71g,78%收率)。
MS(ESI)m/z 162[M+H]+1H NMR(CDCl3)δ2.62-2.65(m,2H),3.07(t,J=7.25Hz,2H),3.34(s,2H),6.65(d,J=7.85,1H),6.70(d,J=7.25Hz,1H),7.07(t,J=7.55Hz,1H).
接著,0℃下將硼氫化鈉(0.030g,0.175mmol)加至8-氨基-3,4-二氫-1H-萘-2-酮(0.050g,0.318mmol)/甲醇(10mL)中,并攪拌該混合物1小時。將該混合物倒入水中,并用乙酸乙酯萃取產物。將有機層用Na2SO4干燥,過濾并減壓濃縮,得到8-氨基-1,2,3,4-四氫-萘-2-醇(0.037g,71%收率)。
MS(ES)m/z 163[M]+1H NMR(DMSO-d6)δ1.53-1.57(m,1H),1.81-1.85(m,1H),2.16(dd,J=7.7 and16.4Hz,1H),2.61-2.74(m,3H),3.89-3.90(m,1H),4.65(s,2H),4.72(d,J=4.1Hz,1H),6.28(d,J=7.45Hz,1H),6.28(d,J=7.45Hz,1H),6.41(d,J=7.7Hz,1H),6.76(t,J=7.55Hz,1H). 在氬氣保護下,將攪拌下的氯化苯基釕(II)(benzenethenium(II)chloride)二聚體(3.10mg,0.006mmol)和(1S,2R)-(-)-順式-1-氨基-2-茚滿醇(3.7mg,0.025mmol)在脫氣的異丙醇中的溶液在80℃加熱20分鐘。室溫下將該混合物加至8-氨基-3,4-二氫-1H-萘-2-酮(50mg,0.310mmol)在異丙醇(3mL)中的溶液內。加入氫氧化鉀(3.48mg,0.062mmol)的異丙醇(1mL)溶液,并在45℃攪拌該混合物1小時。將該混合物通過硅膠并用乙酸乙酯洗滌。減壓下濃縮濾液,得到手性8-氨基-1,2,3,4-四氫-萘-2-醇對映體(33.0mg,65%收率)。
MS(ESI)m/z 163[M]+1H NMR(DMSO-d6)δ1.53-1.57(m,1H),1.81-1.85(m,1H),2.16(dd,J=7.7 and16.4Hz,1H),2.61-2.74(m,3H),3.89-3.90(m,1H),4.65(s,2H),4.72(d,J=4.1Hz,1H),6.28(d,J=7.45Hz,1H),6.28(d,J=7.45Hz,1H),6.41(d,J=7.7Hz,1H),6.76(t,J=7.55Hz,1H). 在氬氣保護下,將攪拌下的氯化苯基釕(II)(benzenethenium(II)chloride)二聚體(1.55g)和(1S,2R)-(-)-順式-1-氨基-2-茚滿醇(1.85g)在脫氣的異丙醇(500ml)中的溶液在80℃加熱20分鐘,然后冷卻至室溫。室溫下將該混合物加至8-氨基-3,4-二氫-1H-萘-2-酮(25.0g)的異丙醇(700mL)溶液中,然后加入已制備的氫氧化鉀(1.74g)的異丙醇(300mL)溶液(預先制備,45℃溶解然后冷卻至室溫)。在45℃攪拌30分鐘后,將該混合物冷卻至室溫,通過硅膠墊并用乙酸乙酯洗滌。減壓下濃縮濾液,并將得到的固體溶于二氯甲烷中,然后用活性碳處理10分鐘。通過硅膠墊過濾后,將該混合物減壓濃縮。將得到的產物用二氯甲烷重結晶,得到(R)-8-氨基-1,2,3,4-四氫-萘-2-醇(14g,56%收率),呈紅色結晶。
MS(ESI)m/z 163[M]+1H NMR(DMSO-d6)δ1.53-1.57(m,1H),1.81-1.85(m,1H),2.16(dd,J=7.7 and16.4Hz,1H),2.61-2.74(m,3H),3.89-3.90(m,1H),4.65(s,2H),4.72(d,J=4.1Hz,1H),6.28(d,J=7.45Hz,1H),6.28(d,J=7.45Hz,1H),6.41(d,J=7.7Hz,1H),6.76(t,J=7.55Hz,1H).
使用(1R,2S)-(+)-順式-1-氨基-2-茚滿醇生成(S)-8-氨基-1,2,3,4-四氫-萘-2-醇。
接著,向0℃冷卻下的(R)-8-氨基-1,2,3,4-四氫-萘-2-醇(36.2g)和吡啶(18.8mL)在THF(850mL)中的溶液內加入氯甲酸苯酯(28.8ml)。室溫下攪拌該混合物3小時,然后倒入乙酸乙酯中。用NH4Cl水溶液洗滌該混合物,然后用水洗滌,將有機層用Na2SO4干燥,過濾并減壓濃縮。向得到的殘余物中加入乙睛,將沉淀收集并用乙睛和異丙醚(2∶3)的混合溶劑洗滌,得到{(R)-7-羥基-5,6,7,8-四氫-萘-1-基}-氨基甲酸苯酯(33.0g)。
MS(ESI)m/z 284[M+H]+1H NMR(DMSO-d6)δ1.59-1.64(m,1H),1.83-1.89(m,1H),2.68-2.99(m,4H),3.90-3.92(m,1H),4.84(dd,J=3.8Hz and 29.9Hz,1H),6.75(d,J=7.9Hz,1H),7.07-7.25(m,6H),7.42(t,J=7.85Hz,1H),9.29(s,1H).
實施例1-1N-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]N′-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基)脲 該實施例按照通用方法F進行。
向攪拌下的7-乙氧基-5,8-二氫萘-1-基胺(0.16g,0.84mmol)的四氫呋喃(15mL)溶液中加入異氰酸4-氯-3-三氟甲基-苯酯(0.22g,1.0mmol)。將該混合物在室溫下攪拌1.5小時,然后倒入水中。用乙酸乙酯萃取產物,將有機層用Na2SO4干燥,過濾并減壓濃縮,得到N-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-N’-(7-乙氧基-5,8-二氫-萘-1-基)脲(0.31g,89%收率)。接著,向N-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-N’-(7-乙氧基-5,8-二氫-萘-1-基)脲(0.21g,0.51mmol)的四氫呋喃(20mL)溶液中加入1N鹽酸水溶液(5mL),并在40℃攪拌該混合物45分鐘。加入10%的碳酸氫鈉水溶液中和該混合物,并用乙酸乙酯萃取。將有機層用Na2SO4干燥,過濾并減壓濃縮,得到N-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-N’-(7-氧代-5,6,7,8-四氫-萘-1-基)脲(0.16g,85%收率)。接著,0℃下向N-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-N’-(7-氧代-5,6,7,8-四氫-萘-1-基)脲(0.07g,0.18mmol)/甲醇(10mL)中加入硼氫化鈉(0.04g,0.09mmol),并攪拌該混合物30分鐘。然后將該混合物倒入水中,用乙酸乙酯萃取產物。將有機層用Na2SO4干燥,過濾并減壓濃縮,然后將得到的產物用乙酸乙酯/己烷(1/2)溶液重結晶,得到N-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]N′-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基)脲(41mg,59%收率)。
1H NMR(DMSO-d6)δ1.57-1.58(m,1H),1.87-1.90(m,1H),2.36-2.42(m,1H),2.63-2.76(m,1H),2.83-2.87(m,2H),3.91-3.96(m,1H),4.87(d,J=4.1Hz,1H),6.82(d,J=7.6Hz,1H),7.06(t,J=7.6Hz,1H),7.58(d,J=7.6Hz,1H),7.61-7.62(m,2H),7.93(s,1H),8.09(s,1H),9.47(s,1H).
分子量384.8MS(M+H)384mp227-228℃體外活性分類A實施例1-2N-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]-N′-{(R)-7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基}脲 采用手性HPLC(Daicel OD柱,正己烷∶2-丙醇=98∶2),從N-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]-N′-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基)脲(30.0mg)的外消旋混合物分離出相應的R-異構體(8.3mg)。手性HPLC(Chiral Cel OD0.49cm×25cm柱,正己烷/乙醇=97/3,流速1.5mL/min),在20.1分鐘檢測到R-異構體。
分子量384.8MS(M+H)384實施例1-3N-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]-N′-{(S)-7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基}脲 采用手性HPLC(Daicel OD柱,正己烷∶2-丙醇=98∶2),從N-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]-N′-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基)脲(30.0mg)的外消旋混合物中分離出相應的S-異構體(2.2mg)。手性HPLC(Chiral CelOD 0.49cm×25cm柱,正己烷/乙醇=97/3,流速1.5mL/min),在17.6分鐘檢測到S-異構體。
分子量384.8MS(M+H)384實施例2-1N-苯基-N′-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基)脲 該實施例按照通用方法A進行。
在室溫下,向8-氨基-1,2,3,4-四氫-萘-2-醇(20.0mg,0.123mmol)的1,4-二噁烷(1.0mL)溶液中加入異氰酸苯酯(14.6mg,0.123mmol)。攪拌該混合物16小時,然后加入異丙醚和己烷。將沉淀過濾并干燥,得到N-苯基-N′-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基)脲(17.8mg,51%收率)。
分子量282.3MS(M+H)283mp198-199℃活性分類C使用原料B并按照類似于以上實施例2-1的方法,合成并測試實施例2-2至2-41的化合物。
表1
實施例3-1N-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)-N′-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基)脲手性對映體該實施例按照通用方法G進行。
在室溫下,向8-氨基-1,2,3,4-四氫-萘-2-醇對映體(33.0mg,0.202mmol)的1,4-二噁烷(3.0mL)溶液中加入異氰酸(4-氯-3-三氟甲基-苯基)酯(44.8mg,0.202mmol)。攪拌該混合物16小時,然后加入異丙醚和己烷。將沉淀過濾并干燥,得到手性N-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)-N′-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基)脲(54.0mg,69%收率)。采用Chiral Cel OD柱(15%異丙醇/己烷為洗脫液,流速為1ml/min)測定對映體過量(%ee)。
分子量384.8MS(M+H)384mp227-228℃體外活性分類A
實施例4-1N-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-萘-1-基)-N′-(4-三氟甲氧基-芐基)-脲 該實施例按照通用方法C進行。
在100℃下,攪拌7-羥基-5,6,7,8-四氫-萘-1-基)-氨基甲酸苯酯(30.0mg,0.11mmol)和4-三氟甲氧基-芐胺(21.3mg,0.11mmol)在DMSO(1.0ml)中的混合物17小時。冷卻該反應混合物至室溫,并加入水。將沉淀過濾,用水洗滌,然后用乙睛洗滌,得到N-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-萘-1-基)-N′-(4-三氟甲氧基-芐基)-脲(6.70mg,17%收率)。
1H NMR(DMSO-d6)δ1.54-1.65(m,1H),1.81-1.92(m,1H),2.25-2.38(m,1H),2.68-2.88(m,3H),3.86-3.98(m,1H),4.32(d,J=6.0Hz,2H),4.85(d,J=4.1Hz,1H),6.72(d,J=7.5Hz,1H),6.98(t,J=7.5Hz,1H),7.06(t,J=6.0Hz,1H),7.34(d,J=8.3Hz,2H),7.43(d,J=8.3Hz,2H),7.63(d,J=7.5Hz,1H),7.5(s,1H).
分子量380.36MS(M+H)381mp213℃體外活性分類A實施例4-2N-{(R)-7-羥基-5,6,7,8-四氫-萘-1-基}-N′-(4-三氟甲氧基-芐基)-脲
該實施例按照通用方法C進行。
在150℃下,攪拌(R)-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-萘-1-基)-氨基甲酸苯酯(147.3mg,0.52mmol)和4-三氟甲氧基-芐胺(99.4mg,0.52mmol)在DMSO(1.5ml)中的混合物1.5小時。將該反應混合物冷卻至室溫,并加入乙酸乙酯和水。將萃取的有機層用水洗滌,然后用鹽水洗滌,用Na2SO4干燥,過濾并減壓濃縮。所得的殘余物與二氯甲烷和己烷一起研磨,得到N-{(R)-7-羥基-5,6,7,8-四氫-萘-1-基}-N′-(4-三氟甲氧基-芐基)-脲(168.0mg,85%收率)。
1H NMR(DMSO-d6)δ1.54-1.65(m,1H),1.81-1.92(m,1H),2.25-2.38(m,1H),2.68-2.88(m,3H),3.86-3.98(m,1H),4.32(d,J=6.0Hz,2H),4.85(d,J=4.1Hz,1H),6.72(d,J=7.5Hz,1H),6.98(t,J=7.5Hz,1H),7.06(t,J=6.0Hz,1H),7.34(d,J=8.3Hz,2H),7.43(d,J=8.3Hz,2H),7.63(d,J=7.5Hz,1H),7.5(s,1H).
分子量380.36MS(M+H)381體外活性分類A手性HPLC(ChiralCel AD 0.49cm×25cm柱,正己烷/乙醇=90/10,流速1.5mL/min),在17.7分鐘檢測到R-異構體。
實施例4-3N-{(S)-7-羥基-5,6,7,8-四氫-萘-1-基}-N′-(4-三氟甲氧基-芐基)-脲 該實施例按照通用方法C進行。
在150℃下,攪拌(S)-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-萘-1-基)-氨基甲酸苯酯(85.0mg,0.30mmol)和4-三氟甲氧基-芐胺(57.4mg,0.30mmol)在DMSO(1.0ml)中的混合物1.5小時。將該反應混合物冷卻至室溫,并加入乙酸乙酯和水。將萃取的有機層用水洗滌,然后用鹽水洗滌,用Na2SO4干燥,過濾并減壓濃縮。所得的殘余物在二氯甲烷和己烷中研磨,得到N-{(S)-7-羥基-5,6,7,8-四氫-萘-1-基}-N′-(4-三氟甲氧基-芐基)-脲(95.0mg,83%收率)。
1H NMR(DMSO-d6)δ1.54-1.65(m,1H),1.81-1.92(m,1H),2.25-2.38(m,1H),2.68-2.88(m,3H),3.86-3.98(m,1H),4.32(d,J=6.0Hz,2H),4.85(d,J=4.1Hz,1H),6.72(d,J=7.5Hz,1H),6.98(t,J=7.5Hz,1H),7.06(t,J=6.0Hz,1H),7.34(d,J=8.3Hz,2H),7.43(d,J=8.3Hz,2H),7.63(d,J=7.5Hz,1H),7.5(s,1H).
分子量380.36MS(M+H)381體外活性分類A手性HPLC(ChiralCel AD 0.49cm×25cm柱,正己烷/乙醇=90/10,流速1.5mL/min),在13.2分鐘檢測到S-異構體。
實施例4-4N-{(R)-7-羥基-5,6,7,8-四氫-萘-1-基}-N′-(4-三氟甲基-芐基)-脲 該實施例按照通用方法C進行。
在100℃下,攪拌(R)-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-萘-1-基)-氨基甲酸苯酯(150.0mg,0.53mmol)和4-三氟甲基-芐胺(92.7mg,0.53mmol)在DMSO(2.0ml)中的混合物1.5小時。將該反應混合物冷卻至室溫,并加入乙酸乙酯和水。將萃取的有機層用水洗滌,然后用鹽水洗滌,用Na2SO4干燥,過濾并減壓濃縮。所得的殘余物在二氯甲烷和己烷中研磨,得到N-{(R)-7-羥基-5,6,7,8-四氫-萘-1-基}-N′-(4-三氟甲基-芐基)-脲(156mg,81%收率)。
1H NMR(DMSO-d6)δ1.58-1.59(m,1H),1.85-1.86(m,1H),2.33-2.85(m,4H),3.91-3.92(m,1H),4.39(d,J=5.7Hz,2H),4.84(d,J=4.1Hz,1H),6.72(d,J=7.25Hz,1H),6.98(t,J=7.9Hz,1H),7.12(t,J=6.0Hz,1H),7.51-7.71(m,6H).
分子量364.37MS(M+H)366mp204.3℃體外活性分類A手性HPLC(ChiralCel AD 0.49cm×25cm柱,正己烷/乙醇=90/10,流速1.5mL/min),在16.2分鐘檢測到R-異構體。
實施例4-5N-{(S)-7-羥基-5,6,7,8-四氫-萘-1-基}N′-(4-三氟甲基-芐基)-脲 該實施例按照通用方法C進行。
在100℃下,攪拌(S)-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-萘-1-基)-氨基甲酸苯酯(100.0mg,0.35mmol)和4-三氟甲基-芐胺(61.8mg,0.35mmol)在DMSO(1.5ml)中的混合物1.5小時。將該反應混合物冷卻至室溫,并加入乙酸乙酯和水。將萃取的有機層用水洗滌,然后用鹽水洗滌,用Na2SO4干燥,過濾并減壓濃縮。所得的殘余物在二氯甲烷和異丙醚中研磨,得到N-{(S)-7-羥基-5,6,7,8-四氫-萘-1-基}-N′-(4-三氟甲基-芐基)-脲(109mg,85%收率)。
1H NMR(DMSO-d6)δ1.58-1.59(m,1H),1.85-1.86(m,1H),2.33-2.85(m,4H),3.91-3.92(m,1H),4.39(d,J=5.7Hz,2H),4.84(d,J=4.1Hz,1H),6.72(d,J=7.25Hz,1H),6.98(t,J=7.9Hz,1H),7.12(t,J=6.0Hz,1H),7.51-7.71(m,6H).
分子量364.37
MS(M+H)366體外活性分類A手性HPLC(ChiralCel AD 0.49cm×25cm柱,正己烷/乙醇=90/10,流速1.5mL/min),在11.7分鐘檢測到R-異構體。
按照類似于上面實施例4-1、4-2、4-3、4-4和4-5的方法,合成實施例4-6至4-54的化合物。
表2
實施例4-48N-[(7R)-7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基]-N′-{2-[4-(三氟甲基)苯基]-乙基}脲 該實施例按照通用方法C進行。
在60℃下,攪拌(7-羥基-5,6,7,8-四氫-萘-1-基)-氨基甲酸苯酯(100.0mg,0.35mmol)和2-(4-三氟甲基-苯基)乙胺(66.7mg,0.35mmol)在DMSO(1.0ml)中的混合物3小時。將該反應混合物冷卻至室溫,并在水和乙酸乙酯之間分配。將有機層用Na2SO4干燥并蒸發至干。用乙醚攪拌粗產物,將沉淀過濾并真空干燥,得到N-[(7R)-7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基]-N′-{2-[4-(三氟甲基)苯基]乙基}脲(125mg,94%收率)。
1H NMR(DMSO-d6)δ1.45-1.68(m,1H),1.78-1.93(m,1H),2.29(dd,1H),2.65-2.93(m,5H),3.39(dt,2H),3.80-4.00(m,1H),4.88(d,1H),6.57(t,1H),6.70(d,1H),6.98(t,1H),7.42-7.75(m,6H).
分子量378.39MS(M+H)379
實施例4-49N-[(7R)-7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基]-N′-{2-[4-(三氟甲氧基)苯基]-乙基}脲 該實施例按照通用方法C進行。
在60℃下,攪拌(7-羥基-5,6,7,8-四氫-萘-1-基)-氨基甲酸苯酯(100mg,0.35mmol)和2-(4-三氟甲氧基-苯基)乙胺(72.4mg,0.35mmol)在DMSO(1.0ml)中的混合物2.5小時。將該反應混合物冷卻至室溫,并在水和乙酸乙酯之間分配。將有機層用Na2SO4干燥并蒸發至干。將粗產物與乙醚一起攪拌,將沉淀過濾并真空干燥,得到N-[(7R)-7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基]-N′-{2-[4-(三氟甲氧基)苯基]乙基}脲(109mg,94%收率)。
1H NMR(DMSO-d6)δ1.50-1.65(m,1H),1.80-1.91(m,1H),2.30(dd,1H),2.60-2.88(m,5H),3.34(dt,2H),3.85-3.97(m,1H),4.81(d,1H),6.55(t,1H),6.70(d,1H),6.98(t,1H),7.30(d,2H),7.38(d,2H),7.50(s,1H),7.59(d,1H).
分子量394.39MS(M+H)395
表3
實施例5-1N-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-萘-1-基)-N′-(4-三氟甲氧基-苯基)-脲 該實施例按照通用方法E進行。
在100℃下,攪拌8-氨基-1,2,3,4-四氫-萘-2-醇(32.6mg,0.20mmol)和(4-三氟甲氧基-苯基)-氨基甲酸苯酯(59.5mg,0.20mmol)在DMSO(1.0ml)中的混合物1.5小時。將該混合物減壓濃縮,然后經制備型HPLC純化,得到N-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-萘-1-基)-N′-(4-三氟甲氧基-苯基)-脲(15.5mg,21%收率)。
1H NMR(DMSO-d6)δ1.61(m,1H),1.87(m,1H),2.40(m,1H),2.85(m,2H),3.96(m,1H)4.88(d,J=4.2Hz,1H),6.80(d,J=7.2Hz,1H),7.05(t,J=7.2Hz,1H),7.28(d,J=8.7Hz,2H),7.55(d,J=9.3Hz,2H),7.63(d,J=7.2Hz,1H),7.85(s,1H),9.24(s,1H).
分子量366.34MS(M+H)367mp198-200℃體外活性分類A按照類似于上面實施例5-1的方法,合成實施例5-2至5-24的化合物。
權利要求
1.一種式(I)的羥基-四氫-萘基脲衍生物、其互變異構體或立體異構體、或它們的鹽 其中X表示C1-6烷基、 或 其中Y表示化學鍵、 或 R1、R2和R3獨立表示氫,鹵素,羥基,硝基,羧基,氨基,C1-6烷基氨基,二(C1-6烷基)氨基,C3-8環烷基氨基,C1-6烷氧基羰基,苯基,芐基,氨磺酰基,C1-6烷酰基,C1-6烷酰基氨基,氨基甲酰基,C1-6烷基氨基甲酰基,氰基,任選被氰基取代的C1-6烷基,C1-6烷氧基羰基或單-、二-或三-鹵素,任選被單-、二-或三-鹵素取代的C1-6烷氧基,任選被鹵素或C1-6烷基取代的苯氧基或任選被單-、二-或三-鹵素取代的C1-6烷硫基;R4、R5、R6和R7獨立表示氫,C1-6烷基或苯基;Z1表示氫或C1-6烷基;且Z2表示氫、鹵素或C1-6烷基。
2.權利要求1的式(I)的羥基-四氫-萘基脲衍生物、其互變異構體或立體異構體、或它們的鹽,其中X表示 或 其中Y表示化學鍵,或 R1、R2和R3獨立表示氫,鹵素,羥基,硝基,羧基,氨基,C1-6烷基氨基,二(C1-6烷基)氨基,C3-8環烷基氨基,C1-6烷氧基羰基,苯基,芐基,氨磺酰基,C1-6烷酰基,C1-6烷酰基氨基,氨基甲酰基,C1-6烷基氨基甲酰基,氰基,任選被氰基取代的C1-6烷基,C1-6烷氧基羰基或單-、二-或三-鹵素,任選被單-、二-或三-鹵素取代的C1-6烷氧基,任選被鹵素或C1-6烷基取代的苯氧基或任選被單-、二-或三-鹵素取代的C1-6烷硫基;R4和R5獨立表示氫或C1-6烷基;和Z1和Z2各自表示氫。
3.權利要求1的式(I)的羥基-四氫-萘基脲衍生物、其互變異構體或立體異構體、或它們的鹽,其中X表示 或 其中Y表示化學鍵,或 R1、R2和R3獨立表示氫,鹵素,二(C1-6烷基)氨基,C3-8環烷基氨基,C1-6烷氧基羰基,任選被氰基取代的C1-6烷基,C1-6烷氧基羰基或單-、二-或三-鹵素,任選被單-、二-或三-鹵素取代的C1-6烷氧基,任選被鹵素或C1-6烷基取代的苯氧基或任選被單-、二-或三-鹵素取代的C1-6烷硫基;R4和R5各自表示氫;和Z1和Z2各自表示氫。
4.權利要求1的式(I)的羥基-四氫-萘基脲衍生物、其互變異構體或立體異構體或它們的鹽,其中X表示 其中Y表示化學鍵或 其中R1和R2獨立表示氫,氯基,溴基,氟基,環戊基氨基,三氟甲基或三氟甲氧基;R3、R4和R5各自表示氫;和Z1和Z2各自表示氫。
5.權利要求1的式(I)的羥基-四氫-萘基脲衍生物、其互變異構體或立體異構體、或它們的鹽,其中X表示 其中Y表示化學鍵,或 其中R1和R2獨立表示氫,氯基,溴基,氟基,環戊基氨基,三氟甲基或三氟甲氧基;R3、R4和R5各自表示氫;和Z1和Z2各自表示氫。
6.權利要求1的式(I)的羥基-四氫-萘基脲衍生物、其互變異構體或立體異構體、或它們的鹽,其中所述式(I)的羥基-四氫-萘基脲衍生物選自以下的化合物1)N-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]-N′-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基)脲;2)N-(3-氯苯基)-N′-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基)脲;3)N-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基)-N′-[3-(三氟甲基)苯基]脲;4)N-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基)-N′-[4-(三氟甲基)苯基]脲;5)3-({[(7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基)氨基]羰基}氨基)苯甲酸乙酯;6)N-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基)-N′-(1-萘基)脲;7)N-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基)-N′-(2-萘基)脲;8)N-(3,4-二氯苯基)-N′-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基)脲;9)N-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基)-N′-(4-異丙基苯基)脲;10)N-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基)-N′-(4-苯氧基苯基)脲;11)N-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]-N′-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基)脲;12)N-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基)-N′-苯基脲;13)N-(4-氯苯基)-N′-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基)脲;14)N-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基)-N′-[2-(三氟甲基)苯基]脲;15)N-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基)-N′-[4-(三氟甲基)苯基]脲;16)N-(3,4-二氯苯基)-N′-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基)脲;17)N-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基)-N′-[4-(三氟甲氧基)苯基]脲;18)N-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基)-N′-[4-(三氟甲氧基)芐基]脲;19)N-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基)-N′-(2,4,6-三甲氧基芐基)脲;20)N-(2,6-二氟芐基)-N′-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基)脲;21)N-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基)-N′-[4-(三氟甲基)芐基]脲;22)N-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基)-N′-[4-(三氟甲氧基)芐基]脲;23)N-[2-(4-氯苯基)乙基]-N′-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基)脲;和24)N-[3-氟-4-(三氟甲基)芐基]-N′-(7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基)脲。
7.一種式(I)的羥基-四氫-萘基脲衍生物,其中所述式(I)的羥基-四氫-萘基脲衍生物選自以下的化合物1)N-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]-N′-[(7S)-7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基]脲;2)N-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]-N′-[(7R)-7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基]脲;3)N-[(7R)-7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基]-N′-[4-(三氟甲基)芐基]脲;4)N-[(7S)-7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基]-N′-[4-(三氟甲基)芐基]脲;5)N-[(7R)-7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基]-N′-[4-(三氟甲氧基)芐基]脲;和6)N-[(7S)-7-羥基-5,6,7,8-四氫-1-萘基]-N′-[4-(三氟甲氧基)芐基]脲。
8.一種藥物,所述藥物包含權利要求1的式(I)的羥基-四氫-萘基脲衍生物、其互變異構體或立體異構體、或它們的生理學上可接受的鹽作為活性成分。
9.權利要求8的藥物,所述藥物還包含一種或多種藥學上可接受的賦形劑。
10.權利要求8的藥物,其中所述式(I)的羥基-四氫-萘基脲衍生物、其互變異構體或立體異構體、或它們的生理學上可接受的鹽為VR1拮抗劑。
11.權利要求8的藥物,所述藥物用于治療和/或預防泌尿系統障礙或疾病。
12.權利要求11的藥物,其中所述泌尿系統障礙或疾病為急性尿失禁或膀胱活動過度。
13.權利要求8的藥物,所述藥物用于治療和/或預防疼痛。
14.權利要求13的藥物,其中所述疼痛為慢性痛、神經病性痛、術后痛或類風濕關節炎性痛。
15.權利要求8的藥物,所述藥物用于治療和/或預防涉及疼痛的障礙或疾病。
16.權利要求15的藥物,其中所述涉及疼痛的障礙或疾病為神經痛、神經病、感覺過敏、神經損傷、局部缺血、神經變性或中風。
17.權利要求8的藥物,所述藥物用于治療和/或預防炎性障礙或疾病。
18.權利要求17的藥物,其中所述炎性障礙或疾病為哮喘或COPD。
19.權利要求1的化合物在制備用于治療和/或預防泌尿系統障礙或疾病的藥物中的用途。
20.權利要求1的化合物在制備用于治療和/或預防疼痛的藥物中的用途。
21.權利要求1的化合物在制備用于治療和/或預防炎性障礙或疾病的藥物中的用途。
22.一種控制人和動物泌尿系統障礙或疾病的方法,所述方法包括給予人和動物VR1-拮抗有效量的至少一種權利要求1的化合物。
23.一種控制人和動物疼痛的方法,所述方法包括給予人和動物VR1-拮抗有效量的至少一種權利要求1的化合物。
24.一種控制人和動物炎性障礙或疾病的方法,所述方法包括給予人和動物VR1-拮抗有效量的至少一種權利要求1的化合物。
全文摘要
本發明涉及用作藥物制劑的活性組分的四氫化萘衍生物及其鹽。本發明的四氫化萘衍生物具有優異的VR1拮抗劑活性并用于預防和治療與VR1活性有關的疾病,特別是用于治療急性尿失禁、膀胱活動過度、慢性痛、神經病性痛、術后痛、類風濕關節炎性痛、神經痛、神經病、感覺過敏、神經損傷、局部缺血、神經變性、中風、失禁、例如哮喘和COPD等炎性疾病。
文檔編號C07C323/44GK1665778SQ03815988
公開日2005年9月7日 申請日期2003年4月28日 優先權日2002年5月8日
發明者由良毅, 茂木宗人, K·烏爾巴恩斯, 藤島浩, 桝田努, 森脅俊哉, 吉田長弘, 小久保利雄, 城尾昌宏, 多治見政臣, 月見泰博, 山本倫行 申請人:拜耳醫藥保健股份公司