專利名稱：2-氨基丙烷-1，3-二醇化合物、其作為醫(yī)藥的用途及其合成中間體的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥、特別是作為免疫抑制劑有用的2-氨基丙烷-1，3-二醇化合物、其作為醫(yī)藥的用途及其合成中間體。
背景技術(shù)：
在國(guó)際公開WO94/08943號(hào)公報(bào)中，公開了臟器或骨骼移植的排斥反應(yīng)的抑制劑、另外公開了作為牛皮癬、貝切特綜合病等的各種自身免疫疾病及風(fēng)濕病的治療藥上有用的含有2-氨基-2-(2-(4-辛基苯基)乙基)丙烷-1，3-二醇·鹽酸鹽的2-氨基丙烷-1，3-二醇化合物、進(jìn)而，在國(guó)際公開WO96/06068號(hào)公報(bào)中，分別公開了作為臟器或骨骼移植的排斥反應(yīng)的抑制劑、和作為牛皮癬、貝切特綜合病等的各種自身免疫疾病及風(fēng)濕病的治療藥有用的苯化合物。
另一方面，在有機(jī)化學(xué)雜志中(J.Org.Chem)、第25卷、2057～2059頁(yè)(1960年)中，記載了2-甲基氨基-2-(苯基甲基或用2-甲基、3-甲基、4-甲基、4-甲氧基或4-羥基取代的苯基甲基)丙烷-1，3-二醇。另外，美國(guó)專利第3660488號(hào)說明書記載了作為抗放射線劑的2-氨基-2-(對(duì)氯芐基)丙烷-1，3-二醇。
本發(fā)明在于提供作為臟器或骨骼移植的排斥反應(yīng)的抑制劑、和作為過敏性皮炎、牛皮癬、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、貝切特綜合病等的自身免疫疾病的治療藥、進(jìn)而，由有效且安全性高的化合物及該化合物組成的醫(yī)藥、及該化合物合成上的關(guān)鍵的化合物。
本發(fā)明以解決上述課題為目的進(jìn)行銳意研究的結(jié)果，發(fā)現(xiàn)在國(guó)際公開WO94/08943號(hào)公報(bào)中用下述通式表示的2-氨基丙烷-1，3-二醇化合物的取代基R中，在碳鏈中取代對(duì)亞苯基及在碳鏈端取代苯基、而且夾在該對(duì)亞苯基及苯基中間的碳鏈中，對(duì)苯亞基的α位碳是用羰基取代的化合物(這些化合物在該公報(bào)中沒有具體地公開)具有毒性小、安全性高的優(yōu)良免疫抑制作用，從而完成了本發(fā)明。 發(fā)明內(nèi)容即，本發(fā)明涉及(1)由通式(I)表示的2-氨基丙烷-1，3--二醇化合物(以下，稱為化合物(I))、其制藥上容許的酸加成鹽或它們的水合物、 (式中，R1、R2、R3、R4相同或不同，分別地表示氫原子或者酰基)(2)以2-氨基-2-(2-(4-(1-氧代-5-苯基戊基)苯基)乙基)丙烷-1，3-二醇(以下，稱為化合物(I-a))表示的上述(1)所述的2-氨基丙烷-1，3-二醇化合物、其制藥上容許的酸加成鹽或它們的水合物、(3)含有上述(1)或(2)所記載的2-氨基丙烷-1，3--二醇化合物、其制藥上可允許的酸加成鹽或者它們的水合物的醫(yī)藥、(4)含有由上述(1)或(2)所記載的2-氨基丙烷-1，3--二醇化合物、其制藥上可允許的酸加成鹽或者它們的水合物作為有效成分的免疫抑制劑、(5)含有由上述(1)或(2)所記載的2-氨基丙烷-1，3--二醇化合物、其制藥上可允許的酸加成鹽或者它們的水合物作為有效成分的排斥反應(yīng)抑制劑、(6)含有由上述(1)或(2)所記載的2-氨基丙烷-1，3--二醇化合物、其制藥上可允許的酸加成鹽或者它們的水合物作為有效成分的移植片對(duì)宿主病的預(yù)防或治療劑、(7)含有由上述(1)或(2)所記載的2-氨基丙烷-1，3--二醇化合物、其制藥上可允許的酸加成鹽或者它們的水合物作為有效成分的自身免疫疾病或者過敏性疾病的預(yù)防或者治療劑、(8)含有上述(1)或(2)所記載的2-氨基丙烷-1，3--二醇化合物、其制藥上可允許的酸加成鹽或者它們的水合物及制藥上可允許的載體的醫(yī)藥組合物、(9)2-氨基-2-(2-(4-(1-羥基-5-苯基戊基)苯基)乙基)丙烷-1，3-二醇(以下，稱為化合物(II))、其氨基和/或羥基被保護(hù)了的化合物或者它們的鹽、以及(10)2-氨基-2-(2-(4-甲?；交?乙基)丙烷-1，3-二醇(以下，稱為化合物(A))、其氨基和/或羥基被保護(hù)了的化合物或者它們的鹽。
本發(fā)明的化合物(I)，如下式所表示的， (式中的各記號(hào)如上所定義)，其特征是具有在2-氨基丙烷-1，3-二醇骨架的2位碳鏈上，在該碳鏈中取代有時(shí)亞苯基及在碳鏈端取代有苯基、而且夾在該對(duì)亞苯基及苯基中間的碳鏈中，對(duì)亞苯基的α位碳是用羰基取代的結(jié)構(gòu)，通過這樣的構(gòu)造特征，本發(fā)明的化合物顯示了毒性小、安全性高的優(yōu)良免疫抑制作用。另外，本發(fā)明的化合物(II)用下式表示， 本發(fā)明的化合物(A)用下式表示， 以下，對(duì)于本說明的各符號(hào)所表示的基，加以說明。
所說的R1、R2、R3、R4中的?；侵讣柞；?、乙?；?、丙?；?、丁?；?、異丁?；⑽祯；⒓乎；鹊奶紨?shù)1～6的直鏈或支鏈的烷酰基；用苯乙酰基、苯丙?；鹊谋交〈奶紨?shù)2～6的直鏈或支鏈的烷?；槐郊柞；鹊姆减；?；甲氧羰基、乙氧羰基、丙氧羰基、異丙氧羰基、丁氧羰基、異丁氧羰基、叔丁氧羰基、戊氧羰基、異戊氧羰基、叔戊氧羰基、己氧羰基等的烷氧基部分是碳數(shù)1～6的直鏈或支鏈的烷氧羰基；芐氧羰基等的芳烷氧羰基等。
作為本發(fā)明化合物(I)的制藥上可允許的酸加成鹽，可舉出鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硫酸、硝酸、磷酸等的無機(jī)酸鹽、或醋酸、馬來酸、富馬酸、苯甲酸、檸檬酸、琥珀酸、酒石酸、蘋果酸、苯乙醇酸、甲磺酸、苯磺酸、對(duì)甲苯磺酸、10-樟腦磺酸等的有機(jī)酸鹽等。另外，本發(fā)明化合物為結(jié)晶化的目的，也可以作成與草酸的鹽。另外，作為化合物(II)的鹽及化合物A的鹽，也可舉出與上述相同的酸加成鹽。
作為本發(fā)明化合物(I)的水合物，可舉出1水合物、1/2水合物、1/5水合物、2水合物、3/2水合物等，其他的溶劑化物等也包含在本發(fā)明中。
作為本發(fā)明化合物的中間體有用的化合物(II)及作為化合物A的氨基保護(hù)基可舉出，甲酰基、乙酰基、丙酰基、氯乙?；?、二氯乙?；⑷纫阴；⑷阴；⒓谆酋；?、乙磺?；鹊闹咀艴；?、鄰苯二甲?；?、苯甲?；?、對(duì)硝基苯甲?；?duì)叔丁基苯甲酰基、對(duì)叔丁基苯磺?；?、苯磺酰基、甲苯磺?；鹊姆枷阕艴；?、甲氧羰基、乙氧羰基、異丙氧羰基、叔丁氧羰基、2-氰基乙氧羰基、2，2，2-三氯乙氧羰基、芐氧羰基、對(duì)硝基芐氧羰基、對(duì)甲氧基芐氧羰基、對(duì)氯芐氧羰基、二苯基甲氧羰基、甲氧甲基氧羰基、乙?；谆豸驶⒈窖趸驶?、甲磺?；一豸驶?-三甲基甲硅烷基乙氧基等的碳酸酯、三苯甲基、二或三烷基甲硅烷基、芐基、對(duì)硝基芐基等的酰基以外的氨基保護(hù)基。
作為本發(fā)明化合物的中間體有用的化合物(II)及作為化合物A的羥基保護(hù)基可舉出，甲基、乙基、丙基、丁基、叔丁基、戊基、己基、甲氧甲基、甲氧乙氧甲基等的可以取代的低級(jí)烷基；烯丙基；芐基、對(duì)甲氧基芐基、三苯基甲基、三(對(duì)甲氧基苯基)甲基等的可以取代的芳烷基；三甲基甲硅烷基、三乙基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基、三叔丁基甲硅烷基、甲基二苯基甲硅烷基、乙基二苯基甲硅烷基、丙基二苯基甲硅烷基、叔丁基二苯基甲硅烷基等的三取代甲硅烷基；四氫吡喃基、四氫-2-噻喃基、2-噻喃基；從羧酸及磺酸衍生的脂肪族酰基、芳香族?；坝梅枷阕寤〈闹咀艴；惖孽；?。
作為脂肪族?；膳e出，甲?；?、乙酰基、丙酰基、丁酰基、戊?；?、新戊?；?、羧基乙?；?、羧基丙酰基、三氟乙酰基、氯乙?；⒓籽趸阴；?、苯氧基乙?；鹊牡图?jí)烷?；?；甲氧羰基、乙氧羰基、異丙氧羰基、叔丁氧羰基、2，2，2-三氯乙氧羰基、2，2，2-三溴乙氧羰基、對(duì)硝基苯氧羰基等的碳酸酯；甲磺?；⒁一酋；鹊幕酋；?br>
作為芳香族?；膳e出，苯甲?；⒓妆锦；?、萘酰基、硝基苯甲酰基、二硝基苯甲?；鹊姆减；?、苯磺?；?、甲苯磺酰基、萘磺?；?、氟苯磺?；?、氯苯磺?；?、溴苯磺?；⒌獗交酋；鹊幕酋；Ｓ梅枷阕寤〈说闹咀艴；?，可舉出苯基乙?；?、苯基丙酰基、苯基丁酰基等的芳烷?；取?br>
進(jìn)而，二個(gè)羥基一起也可以形成亞甲基縮醛、亞乙基縮醛、異亞丙基縮醛、亞芐基縮醛、對(duì)甲氧亞芐基縮醛、2，4-二甲氧基亞芐基縮醛等的環(huán)狀縮醛。此外，羥基和氨基一起也可形成噁唑烷、噁嗪等。
本發(fā)明中，化合物(I)也可用這些保護(hù)基進(jìn)行氨基和/或羥基的保護(hù)。這些可以作為化合物(I)的合成前體使用，另外，根據(jù)情況，其自身也可作為醫(yī)藥使用。
本發(fā)明的化合物(I)可以用以下的方法制造。(A法)在化合物(I)中，R1、R2、R3、R4是氫的化合物(I-a)可以用以下的方法制造。即，將化合物A的保護(hù)了氨基及/或羥基的化合物與用通式(III)表示的化合物(以下稱化合物(III))進(jìn)行反應(yīng)， (式中，M表示在有機(jī)合成化學(xué)領(lǐng)域中廣泛使用的金屬、例如鋰、氯化鎂、溴化鎂、碘化鎂、銅、鋰銅、鎳。)，進(jìn)而，根據(jù)需要，除去保護(hù)基，制成化合物(II)或保護(hù)了其氨基及/或羥基的化合物后，使用適當(dāng)?shù)难趸瘎?，氧化亞苯基的α位的羥基的化合物后，進(jìn)而根據(jù)需要，除去保護(hù)基，可制得化合物(I-a)。 作為用于與化合物(III)的反應(yīng)有機(jī)溶劑，例如，可舉出四氫呋喃、乙醚、乙二醇二甲醚、二甲基甲酰胺、二甲基亞砜、苯、甲苯、二甲苯、二噁烷、二氯甲烷、氯仿、二氯乙烷、乙腈。
本發(fā)明的反應(yīng)溫度，通常是-100～80℃、根據(jù)需要，可選擇其以上或其以下的溫度。
本發(fā)明的反應(yīng)時(shí)間，通常是30分鐘～2日的范圍，但根據(jù)需要，可選擇其以上或其以下的時(shí)間。
通過上述反應(yīng)條件進(jìn)行反應(yīng)后，或根據(jù)需要，除去保護(hù)基后，通過使用有機(jī)合成化學(xué)領(lǐng)域的公知的方法，例如通過使用溶劑萃取、重結(jié)晶、色譜、離子交換樹脂的方法，精制化合物(II)。
作為化合物(II)的氧化反應(yīng)中所使用的氧化劑，可舉出鉻酸-硫酸、氧化鉻(IV)-硫酸-丙酮(瓊斯(Jones)試劑)、氧化鉻(VI)-砒啶絡(luò)合物(科林(Collins)試劑)、二鉻酸鹽(二鉻酸鈉、二鉻酸鉀等)-硫酸、氯鉻酸砒啶鎓(PCC)、二氧化錳、二甲基亞砜、-親電子活性劑(二環(huán)己基碳化二亞胺、醋酸酐、五氧化磷、三氧化硫-砒啶絡(luò)合物、三氟醋酸酐、乙二酰氯、鹵素)、次氯酸鈉、次氯酸鉀、亞溴酸鈉、N-溴琥珀酰亞胺、N-氯琥珀酰亞胺、N-溴乙酰胺、2，3-二氯-5，6-二氰基-對(duì)苯醌、四氯-對(duì)苯醌、四氯-鄰苯醌、硝酸、四氧化二氮、苯亞硒酸酐、四氧化釕、二氧化釕-過碘酸鈉、雙氯雙(三苯基膦)釕-碘苯、鉍酸鈉等。
本反應(yīng)所使用的溶劑，可舉出水、醋酸、乙醚、四氫呋喃、二噁烷、丙酮、叔丁醇、二氯甲烷、氯仿、己烷、苯、甲苯或者這些的混合物。
本發(fā)明的反應(yīng)溫度，通常是0～100℃、根據(jù)需要，可選擇其以上或其以下的溫度。
本發(fā)明的反應(yīng)時(shí)間，通常是30分鐘～2日的范圍，但根據(jù)需要，可選擇其以上或其以下的時(shí)間。
通過上述反應(yīng)條件進(jìn)行反應(yīng)后，或根據(jù)需要，除去保護(hù)基后，通過使用有機(jī)合成化學(xué)領(lǐng)域的公知的方法，例如通過使用溶劑萃取、重結(jié)晶、色譜、離子交換樹脂的方法，精制化合物(I-a)。(B法)化合物(1)中，R1、R2、R3、R4是酰基的化合物可以用以下的方法制造。即，根據(jù)需要，將化合物(I-a)進(jìn)行保護(hù)后，在堿的存在下與酰鹵反應(yīng)后，必要時(shí)除去保護(hù)基，可以得到對(duì)應(yīng)的氨基和/或羥基被酰化了的化合物。另外，在本發(fā)明中，使用化合物(II)代替化合物(I-a)，進(jìn)行同樣的反應(yīng)，可制得(化合物I)的氨基和/或羥基被酰化了的化合物。另外，通過用酸或堿處理化合物(I)中R1、R2、R3、R4是?；幕衔铮梢灾圃旎衔?I-a)。
作為本發(fā)明化合物(I)的合成中間體的有用的化合物A可以用以下的方法制造。(C法)將通式(IV)表示的化合物與通式(V)表示的化合物，在堿的存在下縮合，制成通式(VI)表示的化合物后，用適當(dāng)?shù)倪€原劑還原酯、或者根據(jù)需要，通過脫保護(hù)基得到用通式(VII)(以下稱化合物(VII))后，在路易斯酸存在下與二氯甲基甲基醚反應(yīng)后，進(jìn)而，必要時(shí)通過脫保護(hù)基，可以制造化合物A或者其N-和/或0-保護(hù)體。通式(IV) (式中，Lv是有機(jī)化學(xué)中廣泛使用的離去基，例如鹵素、(氟、氯、溴、碘)、甲磺酰氧基、對(duì)甲苯磺酰氧基、三氟甲磺酰氧基)(以下稱化合物(IV))。通式(V) 〔式中，R5表示低級(jí)烷基(甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、叔丁基等)或者芳烷基(芐基、硝基芐基、甲氧基芐基、甲基芐基等)、R6是有機(jī)合成化學(xué)中廣泛使用的氨基保護(hù)基，例如，乙?；?、苯甲酰基、叔丁氧羰基、芐氧羰基等。進(jìn)而，式中，分子內(nèi)的2個(gè)R5可以連接一起形成二噁烷等的環(huán)。另外，分子中的R6和R6也可以連接一起形成噁唑烷、噁嗪等的環(huán)?！?以下稱化合物(V))。通式(VI) (式中，R5和R6如上所定義)(以下稱化合物(VI))。通式(VII) (式中，R7是有機(jī)合成化學(xué)中廣泛使用的保護(hù)基，例如，乙?；?、苯甲酰基、芐基、三甲基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基、甲氧基甲基、甲氧基乙氧基甲基、四氫吡喃基、R6如上所定義)(以下稱化合物(VII))。
縮合反應(yīng)所使用的堿可以舉出氫氧化鈉、甲醇鈉、乙醇鈉、氫化鈉、氫化鉀、二異丙基酰胺鋰、丁基鋰、鋰六甲基二硅氮烷、三乙胺、二異丙基乙基胺、1，8-二氮雜雙環(huán)〔5，4，0〕十一碳-7-烯。
縮合反應(yīng)所使用的有機(jī)溶劑可以舉出，例如甲醇、乙醇、叔丁醇、四氫呋喃、乙醚、乙二醇二甲基醚、二甲基甲酰胺、二甲基亞砜、苯、甲苯、二甲苯、二噁烷、二氯甲烷、氯仿、二氯乙烷、乙腈。
縮合的反應(yīng)溫度，通常是-20～150℃、根據(jù)需要，可選擇其以上或其以下的溫度。
縮合的反應(yīng)時(shí)間，通常是30分鐘～2日的范圍，但根據(jù)需要，可選擇其以上或其以下的時(shí)間。
通過上述反應(yīng)條件進(jìn)行縮合反應(yīng)后，或根據(jù)需要，除去保護(hù)基后，通過使用有機(jī)合成化學(xué)領(lǐng)域的公知的方法，例如通過使用溶劑萃取、重結(jié)晶、色譜、離子交換樹脂的方法，精制化合物(VI)。
作為酯化反應(yīng)所使用的還原劑，可以舉出硼氫化鈉、硼氫化鋰、氫化鋁鋰等的金屬還原試劑、乙硼烷等。
作為酯化反應(yīng)所使用的溶劑，可以舉出水、甲醇、乙醇、1-丙醇、2-丙醇、叔丁醇、四氫呋喃、二噁烷、乙醚、乙二醇二甲基醚或者這些的混合物。
酯化的反應(yīng)溫度，通常是-20～80℃、根據(jù)需要，可選擇其以上或其以下的溫度。
酯化的反應(yīng)時(shí)間，通常是30分鐘～10小時(shí)的范圍，但根據(jù)需要，可選擇其以上或其以下的時(shí)間。
通過上述反應(yīng)條件進(jìn)行縮合反應(yīng)后，或根據(jù)需要，除去保護(hù)基后，通過使用有機(jī)合成化學(xué)領(lǐng)域的公知的方法，例如通過使用溶劑萃取、重結(jié)晶、色譜、離子交換樹脂的方法，進(jìn)行精制。
與二氯甲基甲基醚反應(yīng)時(shí)所使用的路易斯酸，可以舉出氯化鋁、四氯化鈦、四氯化錫、氯化銻(V)、氯化鐵(III)、三氟化硼、氯化鉍(III)、氯化鋅、氯化汞(II)等。
與二氯甲基甲基醚反應(yīng)時(shí)所使用的有機(jī)溶劑，可以舉出四氫呋喃、乙醚、乙二醇二甲基醚、二甲基甲酰胺、二甲基亞砜、二氯甲烷、氯仿、二氯乙烷、乙腈、硝基甲烷、二硫化碳等。必要時(shí)，也可在無溶劑下進(jìn)行。
與二氯甲基甲基醚反應(yīng)的反應(yīng)溫度，通常是-20～0℃、根據(jù)需要，可選擇其以上或其以下的溫度。
與二氯甲基甲基醚反應(yīng)的反應(yīng)時(shí)間，通常是30分鐘～24小時(shí)的范圍，但根據(jù)需要，可選擇其以上或其以下的時(shí)間。
通過上述反應(yīng)條件進(jìn)行與二氯甲基甲基醚的反應(yīng)后，或根據(jù)需要，除去保護(hù)基后，通過使用有機(jī)合成化學(xué)領(lǐng)域的公知的方法，例如通過使用溶劑萃取、重結(jié)晶、色譜、離子交換樹脂的方法，可以制造目的物。
此外，從化合物(VII)合成化合物A的其他方法，(1)使用N、N-二甲基甲酰胺、N-甲基甲酰苯胺、N-甲?；鶈徇蛘逳、N-二異丙基甲酰胺及磷酰氯、碳酰氯、乙二酰氯、亞硫酰氯、三苯基膦-溴或者六氯三磷氮三烯等的鹵化試劑，進(jìn)行維爾斯梅爾(Vilsmeier)反應(yīng)后，水解的方法。(2)酸催化劑(醋酸、三苯基醋酸等)的存在下，與六亞甲基四胺反應(yīng)后，水解的方法(Duff法)、(3)在氯化鋁存在下，必要時(shí)，以氯化銅(I)作為助催化劑，使用一氧化碳和氯化氫的組合或者甲酸和氯代硫酸、亞硫酰氯或者氧氯化磷的組合，進(jìn)行反應(yīng)的方法(Gattermann-Koch法)、(4)與干燥氰化氫及鹽酸反應(yīng)的方法(Gattermann法)。(D法)在(C法)中，代替(IV)使用通式(VIII)表示的化合物， (式中，Hal表示氯、溴、碘等的鹵素、Lv與上述的定義相同)(以下稱化合物VIII)，得到通式(IX)表示的化合物， (式中，R6、R7、Hal與上述的定義相同)(以下稱化合物IX)，將該化合物在鎂的存在下與甲酰化劑反應(yīng)后，水解，進(jìn)而，必要時(shí)除去保護(hù)基，可以制造化合物A或者其N-和/或O-的保護(hù)體。
作為本反應(yīng)所使用的甲?；瘎梢耘e出甲酸酯類、(原甲酸甲酯、原甲酸乙酯、甲酸乙酯或甲酸鋰等)或者甲酰胺類(N-甲基甲酰苯胺、N、N-二甲基甲酰胺、N-甲基-N-(2-吡啶基)甲酰胺、1-甲?；哙?、4-甲?；鶈徇?、或者由原甲酸乙酯和苯胺制造的乙氧亞甲基苯胺等)、氟代甲醛(FCHO)、甲酸酐((HCO)2O)、醋酸甲酸酐(HCOOCOCH3)等。
用于本反應(yīng)的有機(jī)溶劑，可以舉出四氫呋喃、乙醚、乙二醇二甲基醚、二甲基甲酰胺、二甲基亞砜、苯、甲苯、二甲苯、二噁烷、二氯甲烷、氯仿、二氯乙烷、乙腈等。
本反應(yīng)的溫度，通常是-100～80℃、根據(jù)需要，可選擇其以上或其以下的溫度。
本反應(yīng)的反應(yīng)時(shí)間，通常是30分鐘～2日的范圍，但根據(jù)需要，可選擇其以上或其以下的時(shí)間。
通過上述反應(yīng)條件進(jìn)行反應(yīng)后，或根據(jù)需要，除去保護(hù)基后，通過使用有機(jī)合成化學(xué)領(lǐng)域的公知的方法，例如通過使用溶劑萃取、重結(jié)晶、色譜、離子交換樹脂的方法，精制化合物A。(E法)將通式(X)表示的化合物與通式(XI)表示的化合物，在堿的存在下縮合，制成通式(XII)表示的化合物后，用適當(dāng)?shù)倪€原劑還原酯、或者根據(jù)需要，通過脫保護(hù)基得到化合物(A)或者其N-和/或O-保護(hù)體。通式(X) (式中，Y表示甲酰基、或者保護(hù)了的甲?；葍r(jià)體、例如二甲氧甲基、二乙氧甲基、亞乙基二氧甲基、亞丙基二氧甲基、亞乙基二硫甲基、亞丙基二硫甲基、Lv與上述定義相同)(以下稱化合物(X))；通式(XI) 〔式中，R5、R6、R7與上述定義相同〕(以下稱化合物(XI))；通式(XII) (式中，R5、R6、R7、Y與上述定義相同〕(以下稱化合物(XII))。
縮合反應(yīng)所使用的堿可以舉出氫氧化鈉、甲醇鈉、乙醇鈉、氫化鈉、氫化鉀、二異丙基酰胺鋰、丁基鋰、鋰六甲基二硅氮烷、三乙胺、二異丙基乙基胺、1，8-二氮雜雙環(huán)〔5，4，0〕十一碳-7-烯。
縮合反應(yīng)所使用的有機(jī)溶劑可以舉出，例如甲醇、乙醇、叔丁醇、四氫呋喃、乙醚、乙二醇二甲基醚、二甲基甲酰胺、二甲基亞砜、苯、甲苯、二甲苯、二噁烷、二氯甲烷、氯仿、二氯乙烷、乙腈。
縮合的反應(yīng)溫度，通常是-20～150℃、根據(jù)需要，可選擇其以上或其以下的溫度。
縮合的反應(yīng)時(shí)間，通常是30分鐘～2日的范圍，但根據(jù)需要，可選擇其以上或其以下的時(shí)間。
通過上述反應(yīng)條件進(jìn)行縮合反應(yīng)后，或根據(jù)需要，除去保護(hù)基后，通過使用有機(jī)合成化學(xué)領(lǐng)域的公知的方法，例如通過使用溶劑萃取、重結(jié)晶、色譜、離子交換樹脂的方法，精制化合物(XII)。
作為酯化反應(yīng)所使用的還原劑，可以舉出硼氫化鈉、硼氫化鋰、氫化鋁鋰等的金屬還原試劑、乙硼烷等。
作為酯化反應(yīng)所使用的溶劑，可以舉出水、甲醇、乙醇、1-丙醇、2-丙醇、叔丁醇、四氫呋喃、二噁烷、乙醚、乙二醇二甲基醚或者這些的混合物。
酯化的反應(yīng)溫度，通常是-20～80℃、根據(jù)需要，可選擇其以上或其以下的溫度。
酯化的反應(yīng)時(shí)間，通常是30分鐘～10小時(shí)的范圍，但根據(jù)需要，可選擇其以上或其以下的時(shí)間。
通過上述反應(yīng)條件進(jìn)行縮合反應(yīng)后，或根據(jù)需要，除去保護(hù)基后，通過使用有機(jī)合成化學(xué)領(lǐng)域的公知的方法，例如通過使用溶劑萃取、重結(jié)晶、色譜、離子交換樹脂的方法，進(jìn)行精制。(F法)將通式(XIII)表示的化合物與化合物(X)，在堿的存在下縮合，制成用通式(XIV)表示的化合物后，用適當(dāng)?shù)倪€原劑還原酯及疊氮、或者根據(jù)需要，通過脫保護(hù)基得到化合物(A)或者其N-和/或O-保護(hù)體。通式(XIII) (式中，R5與上述定義相同)〔以下稱化合物(XIII)〕通式(XIV) 〔式中，R5、Y與上述定義相同〕(以下稱化合物(XIV))；縮合反應(yīng)所使用的堿可以舉出氫氧化鈉、甲醇鈉、乙醇鈉、氫化鈉、氫化鉀、二異丙基酰胺鋰、丁基鋰、鋰六甲基二硅氮烷、三乙胺、二異丙基乙基胺、1，8-二氮雜雙環(huán)〔5，4，0〕十一碳-7-烯。
縮合反應(yīng)所使用的有機(jī)溶劑可以舉出，例如甲醇、乙醇、叔丁醇、四氫呋喃、乙醚、乙二醇二甲基醚、二甲基甲酰胺、二甲基亞砜、苯、甲苯、二甲苯、二噁烷、二氯甲烷、氯仿、二氯乙烷、乙腈。
縮合的反應(yīng)溫度，通常是-20～150℃、根據(jù)需要，可選擇其以上或其以下的溫度。
縮合的反應(yīng)時(shí)間，通常是30分鐘～2日的范圍，但根據(jù)需要，可選擇其以上或其以下的時(shí)間。
通過上述反應(yīng)條件進(jìn)行縮合反應(yīng)后，或根據(jù)需要，除去保護(hù)基后，通過使用有機(jī)合成化學(xué)領(lǐng)域的公知的方法，例如通過使用溶劑萃取、重結(jié)晶、色譜、離子交換樹脂的方法，精制化合物(XIV)。
作為酯化反應(yīng)所使用的還原劑，可以舉出硼氫化鈉、硼氫化鋰、氫化鋁鋰等的金屬還原試劑、乙硼烷等。
作為酯化反應(yīng)所使用的溶劑，可以舉出水、甲醇、乙醇、1-丙醇、2-丙醇、叔丁醇、四氫呋喃、二噁烷、乙醚、乙二醇二甲基醚或者這些的混合物。
酯化的反應(yīng)溫度，通常是-20～80℃、根據(jù)需要，可選擇其以上或其以下的溫度。
酯化的反應(yīng)時(shí)間，通常是30分鐘～10小時(shí)的范圍，但根據(jù)需要，可選擇其以上或其以下的時(shí)間。
用于疊氮基的還原反應(yīng)的還原劑，可舉出硼氫化鈉、硼氫化鋰、氫化鋁鋰等的金屬還原劑及三苯基膦。使用過渡金屬(鈀碳、氧化箔、阮內(nèi)鎳、銠、釕等)的接觸還原劑也是有效的。
用于疊氮基的還原反應(yīng)的溶劑，可舉出水、甲醇、乙醇、1-丙醇、2-丙醇、叔丁醇、四氫呋喃、乙醚、二噁烷、乙二醇二甲基醚、丙酮、醋酸乙酯、醋酸、苯、甲苯、二甲苯、二甲基甲酰胺、二甲基亞砜或者這些的混合物。
用于疊氮基的還原反應(yīng)的反應(yīng)溫度，通常是-20～80℃、根據(jù)需要，可選擇其以上或其以下的溫度。
通過上述反應(yīng)條件進(jìn)行還原反應(yīng)后，或根據(jù)需要，除去保護(hù)基后，通過使用有機(jī)合成化學(xué)領(lǐng)域的公知的方法，例如通過使用溶劑萃取、重結(jié)晶、色譜、離子交換樹脂的方法，精制目的物。(G法)將通式(XV)表示的化合物與化合物(X)，在堿的存在下縮合，作成用通式(XVI)表示的化合物后，用適當(dāng)?shù)倪€原劑還原硝基、進(jìn)而根據(jù)需要，通過脫保護(hù)基得到化合物(A)或者其N-和/或O-保護(hù)體。通式(XV) (式中，R7是有機(jī)化學(xué)中廣泛使用的羥基保護(hù)基，例如，乙酰基、苯甲?；⑵S基、三甲基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基、甲氧基甲基、甲氧基乙氧基甲基、四氫吡喃基。進(jìn)而，式中，2個(gè)R7可以連接一起形成二噁烷等的環(huán)表示的化合物。(以下稱化合物(XV))。通式(XVI) 〔式中，R7、Y與上述定義相同〕(以下稱化合物(XVI))。
縮合反應(yīng)所使用的堿可以舉出氫氧化鈉、甲醇鈉、乙醇鈉、氫化鈉、氫化鉀、二異丙基酰胺鋰、丁基鋰、鋰六甲基二硅氮烷、三乙胺、二異丙基乙基胺、1，8-二氮雜雙環(huán)〔5，4，0〕十一碳-7-烯。
縮合反應(yīng)所使用的有機(jī)溶劑可以舉出，例如甲醇、乙醇、叔丁醇、四氫呋喃、乙醚、乙二醇二甲基醚、二甲基甲酰胺、二甲基亞砜、苯、甲苯、二甲苯、二噁烷、二氯甲烷、氯仿、二氯乙烷、乙腈。
縮合的反應(yīng)溫度，通常是-20～150℃、根據(jù)需要，可選擇其以上或其以下的溫度。
縮合的反應(yīng)時(shí)間，通常是30分鐘～2日的范圍，但根據(jù)需要，可選擇其以上或其以下的時(shí)間。
通過上述反應(yīng)條件進(jìn)行縮合反應(yīng)后，或根據(jù)需要，除去保護(hù)基后，通過使用有機(jī)合成化學(xué)領(lǐng)域的公知的方法，例如通過使用溶劑萃取、重結(jié)晶、色譜、離子交換樹脂的方法，精制化合物(XVI)。
作為硝基化反應(yīng)所使用的還原劑，可以舉出硼氫化鈉、硼氫化鋰、氫化鋁鋰等的金屬還原劑、使用過渡金屬(鈀碳、氧化箔、阮內(nèi)鎳、銠、釕等)的接觸還原、用金屬(鐵、鋅、錫)的還原。
作為硝基化反應(yīng)所使用的溶劑，可以舉出水、甲醇、乙醇、叔丁醇、四氫呋喃、乙醚、二噁烷、丙酮、醋酸乙酯、醋酸、苯、甲苯、二甲苯、二甲基甲酰胺、二甲基亞砜或者這些的混合物。
硝基還原反應(yīng)的反應(yīng)溫度，通常是-20～80℃、根據(jù)需要，可選擇其以上或其以下的溫度。
通過上述反應(yīng)條件進(jìn)行還原反應(yīng)后，或根據(jù)需要，除去保護(hù)基后，通過使用有機(jī)合成化學(xué)領(lǐng)域的公知的方法，例如通過使用溶劑萃取、重結(jié)晶、色譜、離子交換樹脂的方法，精制目的物。(H法)將通式(XVII)表示的化合物與通式(XVIII)表示的化合物進(jìn)行親核加成，得到用通式(VI-a)所示化合物后，用適當(dāng)?shù)倪€原劑還原酯、進(jìn)而根據(jù)需要，通過脫保護(hù)基得到化合物(A)或者其N-和/或O-保護(hù)體。通式(XVII) (式中，M、Y與上述定義相同)(以下稱化合物(XVII))通式(XVIII) 〔式中，R8是有機(jī)化學(xué)中廣泛使用的氨基保護(hù)基，例如，乙?；?、苯甲酰基、叔丁氧羰基、芐氧羰基，R5與上述定義相同。)(以下稱化合物(XVIII))。通式(VI-a) (式中，R5、R8、Y與上述定義相同)。
加成反應(yīng)所使用的有機(jī)溶劑可以舉出，例如四氫呋喃、乙醚、乙二醇二甲基醚、二甲基甲酰胺、二甲基亞砜、苯、甲苯、二甲苯、二噁烷、二氯甲烷、氯仿、二氯乙烷、乙腈。
加成反應(yīng)的反應(yīng)溫度，通常是-100～80℃、根據(jù)需要，可選擇其以上或其以下的溫度。
加成反應(yīng)的反應(yīng)時(shí)間，通常是30分鐘～2日的范圍，但根據(jù)需要，可選擇其以上或其以下的時(shí)間。
通過上述反應(yīng)條件進(jìn)行縮合反應(yīng)后，或根據(jù)需要，除去保護(hù)基后，通過使用有機(jī)合成化學(xué)領(lǐng)域的公知的方法，例如通過使用溶劑萃取、重結(jié)晶、色譜、離子交換樹脂的方法，精制化合物(VI-a)。
作為酯化反應(yīng)所使用的還原劑，可以舉出硼氫化鈉、硼氫化鋰、氫化鋁鋰等的金屬還原劑、乙硼烷。
作為酯化反應(yīng)所使用的溶劑，可以舉出水、甲醇、乙醇、1-丙醇、2-丙醇、叔丁醇、四氫呋喃、二噁烷、乙醚、乙二醇二甲基醚或者這些的混合物。
酯化還原反應(yīng)的反應(yīng)溫度，通常是-20～80℃、根據(jù)需要，可選擇其以上或其以下的溫度。
酯化反應(yīng)的反應(yīng)時(shí)間，通常是30分鐘～10小時(shí)的范圍，但根據(jù)需要，可選擇其以上或其以下的時(shí)間。
通過上述反應(yīng)條件進(jìn)行還原反應(yīng)后，或根據(jù)需要，除去保護(hù)基后，通過使用有機(jī)合成化學(xué)領(lǐng)域的公知的方法，例如通過使用溶劑萃取、重結(jié)晶、色譜、離子交換樹脂的方法，精制目的物。(I法)化合物(XVI)可以用以下的方法制造。
將化合物(X)和用通式(XIX)表示的化合物在堿的存在下縮合，得到通式(XX)表示的化合物后，在堿的存在下與甲醛進(jìn)行縮合，進(jìn)而，根據(jù)需要，通過保護(hù)羥基制成用通式(XXI)表示的化合物后，用適當(dāng)?shù)倪€原劑還原酯、進(jìn)而根據(jù)需要，通過羥基脫保護(hù)，制造化合物(XVI)。通式(XIX) (式中，R5與上述定義相同)(以下稱化合物(XIX))；通式(XX) 〔式中，R5、Y與上述定義相同)(以下稱化合物(XX))；通式(XXI) 〔式中，R5、R7、Y與上述定義相同)(以下稱化合物(XXI))。
作為縮合反應(yīng)所使用的溶劑，可以舉出水、甲醇、乙醇、叔丁醇、四氫呋喃、乙醚、乙二醇二甲基醚、二甲基甲酰胺、二甲基亞砜、苯、甲苯、二甲苯、二噁烷、二氯甲烷、氯仿、二氯乙烷、乙腈。
縮和反應(yīng)所使用的堿可以舉出，氫氧化鈉、甲醇鈉、乙醇鈉、氫化鈉、氫化鉀、三乙胺、二異丙基乙基胺、1，8-二氮雜雙環(huán)〔5，4，0〕十一碳-7-烯。
縮合反應(yīng)的反應(yīng)溫度，通常是-20～150℃、根據(jù)需要，可選擇其以上或其以下的溫度。
縮合反應(yīng)的反應(yīng)時(shí)間，通常是30分鐘～2日的范圍，但根據(jù)需要，可選擇其以上或其以下的時(shí)間。
通過上述反應(yīng)條件進(jìn)行縮合反應(yīng)后，或根據(jù)需要，除去保護(hù)基后，通過使用有機(jī)合成化學(xué)領(lǐng)域的公知的方法，例如通過使用溶劑萃取、重結(jié)晶、色譜、離子交換樹脂的方法，精制化合物(XX)。
用于和甲醛縮合反應(yīng)所使用的溶劑，可以舉出水、甲醇、乙醇、叔丁醇、四氫呋喃、乙醚、乙二醇二甲基醚、二甲基甲酰胺、二甲基亞砜、苯、甲苯、二甲苯、二噁烷、二氯甲烷、氯仿、二氯乙烷、乙腈。
縮合反應(yīng)所使用的堿，可以舉出氫氧化鈉、甲醇鈉、乙醇鈉、氫化鈉、氫化鉀、三乙胺、二異丙基乙基胺、1，8-二氮雜雙環(huán)〔5，4，0〕十一碳-7-烯。
縮合反應(yīng)的反應(yīng)溫度，通常是-20～150℃、根據(jù)需要，可選擇其以上或其以下的溫度。
縮合反應(yīng)的反應(yīng)時(shí)間，通常是30分鐘～2日的范圍，但根據(jù)需要，可選擇其以上或其以下的時(shí)間。
通過上述反應(yīng)條件進(jìn)行還原反應(yīng)后，或根據(jù)需要，除去保護(hù)基后，通過使用有機(jī)合成化學(xué)領(lǐng)域的公知的方法，例如通過使用溶劑萃取、重結(jié)晶、色譜、離子交換樹脂的方法，精制化合物(XXI)。
作為酯化反應(yīng)所使用的還原劑，可以舉出硼氫化鈉、硼氫化鋰、氫化鋁鋰等的金屬還原劑、乙硼烷。
作為酯化反應(yīng)所使用的溶劑，可以舉出水、甲醇、乙醇、1-丙醇、2-丙醇、叔丁醇、四氫呋喃、二噁烷、乙醚、乙二醇二甲基醚或者這些的混合物。
酯化還原反應(yīng)的反應(yīng)溫度，通常是-20～80℃、根據(jù)需要，可選擇其以上或其以下的溫度。
酯化反應(yīng)的反應(yīng)時(shí)間，通常是30分鐘～10小時(shí)的范圍，但根據(jù)需要，可選擇其以上或其以下的時(shí)間。
通過上述反應(yīng)條件進(jìn)行還原反應(yīng)后，或根據(jù)需要，除去保護(hù)基后，通過使用有機(jī)合成化學(xué)領(lǐng)域的公知的方法，例如通過使用溶劑萃取、重結(jié)晶、色譜、離子交換樹脂的方法，精制化合物(XVI)。
(J法)化合物(VI-a)也可以用以下的方法制造。
將化合物(X)和用通式(XXII)表示的化合物在堿的存在下縮合，得到通式(XXIII)表示的化合物后，在堿的存在下與用通式(XXIV)H2N-Le(XXIV)(式中，Le表示2，4-二硝基苯氧基等的離去基)表示的氨基化劑作用，進(jìn)而，根據(jù)需要，通過脫保護(hù)基可以制造。通式(XXII) (式中，R5與上述定義相同)(以下稱化合物(XXII))；通式(XXIII) 〔式中，R5、Y與上述定義相同)(以下稱化合物(XXIII))。
縮合反應(yīng)所使用的堿可以舉出，氫氧化鈉、甲醇鈉、乙醇鈉、氫化鈉、氫化鉀、二異丙基酰胺鋰、丁基鋰、鋰六甲基二硅氮烷、三乙胺、二異丙基乙基胺、1，8-二氮雜雙環(huán)〔5，4，0〕十一碳-7-烯。
縮合反應(yīng)所使用的溶劑，可以舉出水、甲醇、乙醇、叔丁醇、四氫呋喃、乙醚、乙二醇二甲基醚、二甲基甲酰胺、二甲基亞砜、苯、甲苯、二甲苯、二噁烷、二氯甲烷、氯仿、二氯乙烷、乙腈。
縮合反應(yīng)的反應(yīng)溫度，通常是-20～150℃、根據(jù)需要，可選擇其以上或其以下的溫度。
縮合反應(yīng)的反應(yīng)時(shí)間，通常是30分鐘～2日的范圍，但根據(jù)需要，可選擇其以上或其以下的時(shí)間。
通過上述反應(yīng)條件進(jìn)行縮合反應(yīng)后，或根據(jù)需要，除去保護(hù)基后，通過使用有機(jī)合成化學(xué)領(lǐng)域的公知的方法，例如通過使用溶劑萃取、重結(jié)晶、色譜、離子交換樹脂的方法，精制化合物(XXIII)。
作為氨基化反應(yīng)所使用的堿，可以舉出氫氧化鈉、甲醇鈉、乙醇鈉、氫化鈉、氫化鉀、二異丙基酰胺鋰，丁基鋰、鋰六甲基二硅氮烷、三乙胺、二異丙基乙胺、1，8-二氮雜雙環(huán)〔5，4，0〕十一碳-7-烯。
作為氨基化反應(yīng)所使用的溶劑，可以舉出水、甲醇、乙醇、叔丁醇、四氫呋喃、乙醚、乙二醇二甲基醚、二甲基甲酰胺、二甲基亞砜、苯、甲苯、二甲苯、二噁烷、二氯甲烷、氯仿、二氯乙烷、乙腈。
作為氨基化反應(yīng)的反應(yīng)溫度，通常是-20～150℃、根據(jù)需要，可選擇其以上或其以下的溫度。
作為氨基化反應(yīng)的反應(yīng)時(shí)間，通常是30分鐘～2日的范圍，但根據(jù)需要，可選擇其以上或其以下的時(shí)間。
通過上述反應(yīng)條件進(jìn)行氨基化反應(yīng)后，或根據(jù)需要，除去保護(hù)基后，通過使用有機(jī)合成化學(xué)領(lǐng)域的公知的方法，例如通過使用溶劑萃取、重結(jié)晶、色譜、離子交換樹脂的方法，精制化合物(VI-a)。(K法)從(E法)到(J法)中，通過使用化合物(IV)或者化合物(VIII)代替化合物(X)分別制造化合物(VII)或者(IX)。(L法)(C法)中，通過使用化合物(X)代替化合物(IV)制造化合物(VI-a)。本發(fā)明的化合物(I-a)可用以下的方法制造。(M法)用通式(XXV) (式中，Lv與上述定義相同)表示的化合物(以下稱化合物(XXV))，在路易斯酸存在下，與二氯甲基甲基醚反應(yīng)，作成用通式(XXVI) (式中，Lv與上述定義相同)表示的化合物(以下稱化合物(XXIV))后，與化合物(III)反應(yīng)作成用通式(XXVII) (式中，Lv與上述定義相同)表示的化合物(以下稱化合物(XXVII))后，使用適當(dāng)?shù)难趸瘎⑵溲趸捎猛ㄊ?XXVIII) (式中，Lv與上述定義相同)表示的化合物(以下稱化合物(XXVIII))后，在堿的存在下，與化合物(V)縮合成用通式(XXIX) (式中，R5、R6與上述定義相同)表示的化合物(以下稱化合物(XXIX))后，將化合物(XXIX)的羰基保護(hù)后，通過還原劑的還原，得到用通式(I-b)表示的化合物(以下稱化合物(I-b))或者其氨基和/或羥基被保護(hù)的化合物后，通過脫保護(hù)來制造化合物(I-a)。通式(I-b) 〔式中，P1、P2是有機(jī)合成化學(xué)領(lǐng)域中通常使用的羰基保護(hù)基，例如低級(jí)烷氧基(甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、丁氧基等)，或者P1、P2連接一起形成亞烷基二氧基(亞乙基二氧基等)〕。
作為用于與二氯甲基甲基醚反應(yīng)所使用的路易斯酸，可以舉出氯化鋁、四氯化鈦、四氯化錫、氯化銻(V)、氯化鐵(III)、三氟化硼、氯化鉍(III)、氯化鋅、氯化汞(II)等。
作為與二氯甲基甲基醚反應(yīng)所使用的有機(jī)溶劑，可以舉出四氫呋喃、乙醚、乙二醇二甲基醚、二甲基甲酰胺、二甲基亞砜、二氯甲烷、氯仿、二氯乙烷、乙腈、硝基甲烷、二硫化碳等。另外，必要時(shí)，可以不使用溶劑。
作為與二氯甲基甲基醚反應(yīng)的反應(yīng)溫度，通常是-20～0℃、根據(jù)需要，可選擇其以上或其以下的溫度。
作為與二氯甲基甲基醚反應(yīng)的反應(yīng)的反應(yīng)時(shí)間，通常是30分鐘～24日的范圍，但根據(jù)需要，可選擇其以上或其以下的時(shí)間。
通過上述的與二氯甲基甲基醚反應(yīng)后，或根據(jù)需要，除去保護(hù)基后，通過使用有機(jī)合成化學(xué)領(lǐng)域的公知的方法，例如通過使用溶劑萃取、重結(jié)晶、色譜、離子交換樹脂的方法，可以制造目的物。
與化合物(III)反應(yīng)所使用的有機(jī)溶劑?？梢耘e出四氫呋喃、乙醚、乙二醇二甲基醚、二甲基甲酰胺、二甲基亞砜、苯、甲苯、二甲苯、二噁烷、二氯甲烷、氯仿、二氯乙烷、乙腈。
本反應(yīng)所使用的反應(yīng)溫度，通常是-100～80℃、根據(jù)需要，可選擇其以上或其以下的溫度。
本反應(yīng)的反應(yīng)時(shí)間，通常是30分鐘～2日的范圍，但根據(jù)需要，可選擇其以上或其以下的時(shí)間。
通過上述的與二氯甲基甲基醚反應(yīng)后，或根據(jù)需要，除去保護(hù)基后，通過使用有機(jī)合成化學(xué)領(lǐng)域的公知的方法，例如通過使用溶劑萃取、重結(jié)晶、色譜、離子交換樹脂的方法，可以精制化合物(XXVII)。
化合物(XXVII)的氧化反應(yīng)中所使用的氧化劑，可以舉出鉻酸-硫酸、氧化鉻(VI)-硫酸-丙酮(瓊斯(Jones)試劑)、氧化鉻(VI)-吡啶絡(luò)合物(科林(Collins)試劑)、二鉻酸鹽(二鉻酸鈉、二鉻酸鉀等)-硫酸、氯鉻酸砒啶鎓(PCC)、二氧化錳、二甲基亞砜-親電子活性試劑(二環(huán)己基碳化二亞胺、醋酸酐、五氧化磷、三氧化硫-吡啶絡(luò)合物、三氟醋酸酐、乙二酰氯、鹵素)、次氯酸鈉、次氯酸鉀、亞溴酸鈉、N-溴琥珀酰亞胺、N-氯琥珀酰亞胺、N-溴乙酰胺、2，3-二氯-5，6-二氰基-對(duì)苯醌、四氯-對(duì)苯醌、四氯-鄰苯醌、硝酸、四氧化二氮、苯亞硒酸酐、四氯化釕、二氧化釕-高碘酸鈉、雙氯雙(三苯基膦)釕-碘苯、鉍酸鈉等。
本反應(yīng)所使用的有機(jī)溶劑。可以舉出水、醋酸、乙醚、四氫呋喃、二噁烷、丙酮、叔丁醇、二氯甲烷、氯仿、己烷、苯或這些的混合物等。
本反應(yīng)所使用的反應(yīng)溫度，通常是0～100℃、根據(jù)需要，可選擇其以上或其以下的溫度。
本反應(yīng)的反應(yīng)時(shí)間，通常是30分鐘～2日的范圍，但根據(jù)需要，可選擇其以上或其以下的時(shí)間。
用上述的反應(yīng)條件，進(jìn)行反應(yīng)后，或根據(jù)需要，除去保護(hù)基后，通過使用有機(jī)合成化學(xué)領(lǐng)域的公知的方法，例如通過使用溶劑萃取、重結(jié)晶、色譜、離子交換樹脂的方法，可以精制化合物(XXVIII)。
縮合反應(yīng)所使用的堿，可以舉出氫氧化鈉、甲醇鈉、乙醇鈉、氫化鈉、氫化鉀、異丙基酰胺鋰、丁基鋰、鋰六甲基二硅氮烷、三乙胺、二異丙基乙基胺、1，8-二氮雜雙環(huán)〔5，4，0〕十一碳-7-烯。
縮合反應(yīng)所使用的有機(jī)溶劑。可以舉出甲醇、乙醇、叔丁醇、四氫呋喃、乙醚、乙二醇二甲基醚、二甲基甲酰胺、二甲基亞砜、苯、甲苯、二甲苯、二噁烷、二氯甲烷、氯仿、二氯乙烷、乙腈等。
縮合反應(yīng)的反應(yīng)溫度，通常是-20～150℃、根據(jù)需要，可選擇其以上或其以下的溫度。
縮合反應(yīng)的反應(yīng)時(shí)間，通常是30分鐘～2日的范圍，但根據(jù)需要，可選擇其以上或其以下的時(shí)間。
通過上述反應(yīng)條件進(jìn)行的縮合反應(yīng)后，或根據(jù)需要，除去保護(hù)基后，通過使用有機(jī)合成化學(xué)領(lǐng)域的公知的方法，例如通過使用溶劑萃取、重結(jié)晶、色譜、離子交換樹脂的方法，精制化合物(XXIX)。
此外，化合物(XXVIII)中，Lv是鹵素，特別是氯或者溴時(shí)，使用碘化鈉等進(jìn)行碘化后，也可以與化合物(V)反應(yīng)。
化合物(XXIX)的羰基保護(hù)，通過有機(jī)合成化學(xué)領(lǐng)域中公知的方法進(jìn)行。例如，將化合物(XXIX)在對(duì)甲苯磺酸等催化劑存在下與乙二醇進(jìn)行處理、或者在鹽酸、硫酸等酸的存在下通過低級(jí)醇的處理，可以制造對(duì)應(yīng)的羰基保護(hù)的化合物。
作為用于還原反應(yīng)所使用的還原劑，可以舉出硼氫化鈉、硼氫化鋰、氫化鋁鋰等的金屬還原劑、乙硼烷。
作為還原反應(yīng)所使用的溶劑，可以舉出水、甲醇、乙醇、1-丙醇、2-丙醇、叔丁醇、四氫呋喃、二噁烷、乙醚、乙二醇二甲基醚或者這些的混合物。
還原反應(yīng)的反應(yīng)溫度，通常是-20～80℃、根據(jù)需要，可選擇其以上或其以下的溫度。
還原反應(yīng)的反應(yīng)時(shí)間，通常是30分鐘～10小時(shí)的范圍，但根據(jù)需要，可選擇其以上或其以下的時(shí)間。
通過上述反應(yīng)條件進(jìn)行還原反應(yīng)后，或根據(jù)需要，除去保護(hù)基后，通過使用有機(jī)合成化學(xué)領(lǐng)域的公知的方法，例如通過使用溶劑萃取、重結(jié)晶、色譜、離子交換樹脂的方法，精制目的物。
脫保護(hù)所使用的溶劑，可以舉出鹽酸、硫酸、醋酸、三氟醋酸等的酸或者氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鋰等的堿。
作為脫保護(hù)反應(yīng)所使用的溶劑，可以舉出水、甲醇、乙醇、異丙醇、叔丁醇、丙酮、四氫呋喃、乙二醇二甲基醚、二甲基甲酰胺、二甲基亞砜等。
脫保護(hù)反應(yīng)的反應(yīng)溫度，通常是-20～100℃、根據(jù)需要，可選擇其以上或其以下的溫度。
脫保護(hù)反應(yīng)的反應(yīng)時(shí)間，通常是30分鐘～5小時(shí)的范圍，但根據(jù)需要，可選擇其以上或其以下的時(shí)間。
通過上述反應(yīng)條件進(jìn)行脫保護(hù)反應(yīng)后，或根據(jù)需要，除去保護(hù)基后，通過使用有機(jī)合成化學(xué)領(lǐng)域的公知的方法，例如通過使用溶劑萃取、重結(jié)晶、色譜、離子交換樹脂的方法，精制目的物。(N法)化合物(XXVI)也可在鎂存在下，使化合物(VIII)與甲?；瘎┓磻?yīng)后，水解制得。(O法)本發(fā)明的化合物(I-a)也可以通過使化合物(XXVIII)和化合物(XI)縮合后，與(E法)相同地、或使化合物(XXVIII)和化合物(XIII)縮合后，與(F法)相同地、或使化合物(XXVIII)和化合物(XV)縮合后，與(G法)相同地、或使化合物(XXVIII)和化合物(XIX)縮合后，與(I法)相同地、或使化合物(XXVIII)和化合物(XXII)縮合后，與(J法)相同地、分別進(jìn)行反應(yīng)處理來制造。
本發(fā)明的化合物(I)必要時(shí)，在適當(dāng)?shù)娜軇?水、甲醇、乙醇、乙醚、四氫呋喃、二噁烷等)中，與酸(鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硫酸、硝酸、磷酸、醋酸、馬來酸、富馬酸、苯甲酸、檸檬酸、草酸、琥珀酸、酒石酸、蘋果酸、苦杏仁酸、甲磺酸、苯磺酸、對(duì)甲苯磺酸、10-樟腦磺酸等)進(jìn)行適當(dāng)?shù)奶幚?，可以作成加成鹽。另外，得到的本發(fā)明化合物的結(jié)晶是無水物時(shí)，通過將本發(fā)明的化合物與水、含水溶劑或其他的溶劑進(jìn)行處理可以作成(1水合物、1/2水合物、1/5水合物、2水合物、3/2水合物等)或溶劑化物。
本發(fā)明的化合物(I)、其制藥上允許的酸加成鹽或它們的水合物，可用于預(yù)防或者抑制將人、狗、貓、牛、馬、豬、猴、鼠等的哺乳動(dòng)物的臟器(肝臟、心臟、腎臟等)或骨髓等進(jìn)行同種或者異種移植時(shí)所產(chǎn)生的排斥反應(yīng)、預(yù)防或者治療各種自身免疫疾病、各種過敏性疾病等。即，本發(fā)明的化合物由于具有免疫抑制活性、抗菌活性等的藥理學(xué)活性，所以對(duì)于器官或組織的移植(例如，包括心臟、腎臟、肝臟、肺、骨髓、角膜、胰臟、小腸、四肢、肌肉、神經(jīng)、脂肪髓、十二指腸、皮膚、胰島細(xì)胞等的移植、異種移植)的抵抗或者排斥反應(yīng)、由于骨髓移植而產(chǎn)生的移植片對(duì)宿主(GvH)病、自身免疫性疾病，例如慢性關(guān)節(jié)風(fēng)溫病、全身性紅斑狼瘡、腎病綜合癥狼瘡、橋本甲狀腺腫瘤、多發(fā)性硬化癥、重癥肌無力癥、I型糖尿病、II型成人發(fā)病型糖尿病、葡萄膜炎、腎病綜合癥、膽固醇依存性及膽固醇抵抗性腎病、手掌足底膿皰癥、過敏性腦脊髓炎、腎小球性腎炎等及因病原體微生物感染癥的治療及預(yù)防上是有用的。另外，對(duì)于炎癥性、增殖性及超增殖性皮膚疾病以及免疫性媒介疾病的皮膚上的發(fā)病，例如，牛皮癬、牛皮癬類關(guān)節(jié)炎、特異性濕疹(特異性皮膚炎)、接觸性皮膚炎、進(jìn)而，濕疹性皮膚炎、脂漏性皮膚炎、扁平苔蘚、天皰瘡、水皰性類天皰瘡、表皮水泡癥、尋麻疹、脈管浮腫、脈管炎、紅斑、皮膚嗜酸性白細(xì)胞增加癥、痤瘡、斑禿、嗜酸性白細(xì)胞肌膜炎及粥狀硬化癥的治療也是有用的。本發(fā)明的化合物特定地能預(yù)防脫毛、形成毛根和/或產(chǎn)生毛發(fā)，而且使其生長(zhǎng)，所以對(duì)于女性型或男性型或者老年性脫毛癥的治療的毛發(fā)的恢復(fù)是有用的。本發(fā)明的化合物對(duì)于包括呼吸器官疾病、例如包括肉樣、瘤病、肺纖維癥、特發(fā)性間質(zhì)性肺炎及可逆的閉塞性氣道疾病，如支氣管哮喘、小兒哮喘、過敏性哮喘、內(nèi)因性哮喘、外因性哮喘、及塵埃性哮喘、特別慢性或者難治性哮喘(例如，遲發(fā)性哮喘及氣管過敏)、支氣管炎等的哮喘類癥狀的治療是有用的。本發(fā)明的化合物對(duì)于因缺血而產(chǎn)生的肝障礙的治療也是有用的。本發(fā)明的化合物進(jìn)而，對(duì)于特定的眼疾病，例如結(jié)膜炎、角膜結(jié)膜炎、角膜炎、春季粘膜炎、與貝切特綜合病有關(guān)的葡萄膜炎、皰疹性角膜炎、圓錐角膜、角膜上皮變性癥、角膜白斑、眼天皰瘡、莫倫氏潰瘍、鞏膜炎、克雷夫斯眼病、重癥眼內(nèi)炎癥等也是有效的。另外，本發(fā)明化合物對(duì)于粘膜、或血管的炎癥(例如白三烯B4媒介疾病、潰瘍病、缺血性疾病及血栓病引起的血管損傷、缺血性腸疾病、炎癥性腸疾病、(例如節(jié)段性回腸炎病及潰瘍性大腸炎)、壞死性全腸炎)、熱性熱傷有關(guān)的腸損傷的預(yù)防或治療也是有用的。本發(fā)明化合物對(duì)于間質(zhì)性腎炎、古德帕斯徹氏癥候群、溶血性尿毒癥綜合征及糖尿病性腎炎類的腎病；多發(fā)性肌肉炎、急性感染性多神經(jīng)炎綜合征、梅尼埃爾病及神經(jīng)根病中選出的神經(jīng)病；甲狀腺機(jī)能亢進(jìn)癥及巴塞多氏病類的內(nèi)分泌疾??；純粹紅血球形成不全癥、形成不全貧血、再生不良性貧血、特發(fā)性血小板減少性紫斑病、自身免疫溶血性貧血、粒細(xì)胞減少癥及紅血球生成減少類的血液??；骨質(zhì)疏松癥類的骨病、類肉瘤病、肺纖維癥及特發(fā)性間質(zhì)性肺炎類的呼吸器官疾病；皮膚肌炎、尋常性白斑、尋常性魚鱗癬、光過敏性敏感癥、及皮膚T細(xì)胞淋巴腫瘤類的皮膚?。粍?dòng)脈硬化、大動(dòng)脈炎、結(jié)節(jié)性多發(fā)動(dòng)脈炎及心肌癥類的循環(huán)疾??；硬皮病、豐格內(nèi)氏肉芽瘤及斯耶格倫氏綜合征的膠原??；脂肪??；嗜酸性肌膜炎、牙周疾?。荒I炎綜合征、溶血性尿毒癥綜合征；及肌肉營(yíng)養(yǎng)不良的治療或預(yù)防也是有用的。本發(fā)明化合物對(duì)于腸的炎癥/過敏、例如腹部病癥、直腸炎、嗜酸性白細(xì)胞性胃腸炎、肥大細(xì)胞癥、節(jié)段性回腸炎病及潰瘍性大腸炎；及與食品有關(guān)的過敏性疾病、與胃腸道無直接關(guān)系的癥狀，例如偏頭痛、鼻炎及濕疹的預(yù)防或者治療也是有效的。本發(fā)明的化合物由于具有促進(jìn)肝臟再生活性和/或肝細(xì)胞的肥大及增生的活性，所以本發(fā)明化合物對(duì)于免疫原性疾病(例如，包括自身免疫性肝炎、原發(fā)性膽汁肝硬變及硬化性膽管炎的慢性自身免疫性肝病)、部分的肝臟切除、急性肝臟壞死(例如，毒素、病毒性肝炎、因休克或者缺氧的壞死)、乙型病毒性肝炎、非甲型/非乙型肝炎及肝硬變類的肝疾病的治療及預(yù)防是有效的。另外，本發(fā)明化合物也可以作為抗菌劑使用，因此，可以用于因病原體微生物等引起的疾病的治療。進(jìn)而，本發(fā)明化合物可使用于惡性風(fēng)關(guān)節(jié)濕炎、淀粉樣變性、暴發(fā)性肝炎、Shy-Drager綜合癥、膿癥性牛皮癬、貝切特綜合癥、全身性紅斑狼瘡、內(nèi)分泌性眼障礙、進(jìn)行性全身性硬化癥、混合性結(jié)締組織病、主動(dòng)脈炎綜合征、豐格內(nèi)氏肉芽瘤、活動(dòng)性慢性肝炎、Evans綜合征、花粉癥、特發(fā)性甲狀旁腺功能下降癥、阿狄森病(自身免疫性腎上腺炎)、自身免疫性睪丸炎、自身免疫性卵巢炎、血細(xì)胞冷凝癥、發(fā)作性寒冷性血紅蛋白尿癥、惡性貧血、成人性T細(xì)胞白血病、自身免疫性萎縮性胃炎、狼瘡狀肝炎、腎小管間質(zhì)性腎炎、膜性腎炎、肌肉萎縮性側(cè)索硬化癥、風(fēng)濕熱、心肌梗塞后綜合征、交感性眼炎的預(yù)防或者治療。進(jìn)而，本發(fā)明的化合物(1)具有抗真菌作用，作為抗真菌也是有用的。
另外，本發(fā)明的化合物(1)、其制藥上可容許的酸加成鹽或者這些的水合物，根據(jù)情況也可以與其他的免疫抑制劑、甾體劑(潑尼松龍、甲基潑尼龍、地塞米松、氫化可地松等)或者非甾體抗炎癥藥等一起使用。作為其他的免疫抑制劑，特別優(yōu)選的是從硫唑嘌呤、布喹那、脫氧精胍菌素、咪唑立賓、霉酚酸2-嗎啉乙基酯、環(huán)孢菌素、雷帕酶素、他克莫司-水合物、來氟米特及OTK-3中選擇。
這樣得到的本發(fā)明的化合物(I)、作為制藥上可容許的鹽或者這些的水合物作為醫(yī)藥使用時(shí)，可將化合物(I)與其制藥上可容許的載體(賦形劑、粘合劑、崩解劑、矯味劑、矯臭劑、乳化劑稀釋劑、溶劑輔助劑等)混合后，以得到的醫(yī)藥組合物或者制劑(片劑、丸劑、膠囊劑、顆粒劑、散劑、糖漿劑、乳劑、酏劑、混懸劑、溶液劑、注射劑、點(diǎn)滴劑或者外用劑等)的形態(tài)經(jīng)口或者非經(jīng)口給藥。醫(yī)藥組合物可用通常的方法進(jìn)行制劑化。本說明書中，所說的非經(jīng)口給藥是包括了皮下注射、靜脈內(nèi)注射、肌肉內(nèi)注射、腹腔內(nèi)注射、點(diǎn)滴法或者局部給藥(經(jīng)皮給藥、經(jīng)眼給藥、經(jīng)肺。支氣管給藥、經(jīng)鼻給藥或者經(jīng)直腸給藥等)。注射用調(diào)劑例如，無菌注射用水性混懸物或者油性混懸物，可使用適當(dāng)?shù)姆稚┗驖駶?rùn)劑及懸浮化劑，用該領(lǐng)域中公知的方法進(jìn)行配制。其無菌注射用水性調(diào)劑，可以是例如水溶液等的非毒性的非經(jīng)口給藥的稀釋劑或者在溶劑中可以進(jìn)行無菌注射的溶液或者懸浮液。作為可以使用的載體或者溶劑，可以舉出水、林格氏溶液、等滲食鹽液等。進(jìn)而，作為通常溶劑或者懸浮化溶劑也可以使用無菌的不揮發(fā)油。因此，也可以使用任何不揮發(fā)油、脂肪酸，包括了天然或者合成或半合成的脂肪性油或脂肪酸、而且，天然或者合成或者半合成的一或二或者三甘油酯類。作為經(jīng)口給藥的固形給藥型可舉出粉劑、顆粒劑、片劑、丸劑、膠囊劑等。這些劑型中，作為活性成分化合物，至少可以混合下述一種添加物，如蔗糖、乳糖、纖維糖、甘露糖醇、麥芽糖、糊精、淀粉、瓊脂、藻酸酯類、殼質(zhì)類、脫乙酰殼多糖、果膠類、西黃耆膠類、阿拉伯膠類、明膠類、膠原類、酪蛋白、白蛋白、合成或半合成的聚合物類或者甘油酯類。在這樣的劑型中，可以含有通常的添加物，例如惰性稀釋劑、硬脂酸鎂等的潤(rùn)滑劑、對(duì)羥基苯甲酸酯類、山梨酸等的保存劑、抗壞血酸、α-生育酚、半胱氨酸等的抗氧化劑、崩解劑、粘合劑、增粘劑、緩沖劑、甜味付與劑、香味付與劑、芳香劑等。片劑及丸劑進(jìn)而可用腸衣包敷后制造，經(jīng)口給藥用的液劑，可舉出作為醫(yī)藥允許的乳化劑、糖漿劑、酏劑、混懸劑、溶液劑等、它們也可含有該范圍內(nèi)普通使用的惰性稀釋劑，例如水。
本發(fā)明化合物(I)、其制藥上可允許的酸加成鹽或它們的水合物所適用外用劑，可舉出軟膏劑、糊劑、擦劑、洗劑、硬膏劑(石膏劑)、泥敷劑、滴眼劑、眼軟膏劑、栓劑、濕布劑、吸入劑、噴霧劑、氣霧劑、涂敷劑、滴鼻劑、乳劑、膠帶劑、貼劑等。
本發(fā)明的外用劑，在與有機(jī)或無機(jī)載體或賦形劑混合的狀態(tài)下，含有本發(fā)明化合物。例如可以在固體、半固體或液體狀制劑的形式下使用。
本發(fā)明化合物，為了得到外用劑的組合劑，可與通常使用的非毒性的醫(yī)藥上允許的載體調(diào)和。可使用的載體是水、葡萄糖、乳糖、阿拉伯膠、明膠、甘露醇、淀粉糊、三硅酸鎂、滑石、玉米淀粉、甲蛋白、膠體硅、土豆淀粉、尿素及形成其它的固體、半固體或液體狀的組合物的適當(dāng)載體、此外，也可以加入輔助劑、穩(wěn)定劑、增粘劑、著色劑及香料。
構(gòu)成醫(yī)藥組合物的有效成分的本發(fā)明化合物，要根據(jù)疾病的過程或者狀態(tài)，使用充分的量，以便達(dá)到所期待的效果。對(duì)于治療起因于免疫異常的癥狀及疾病時(shí)，以含有一般醫(yī)藥上可容許的非毒性載體、輔助基及賦形劑的給藥單位組合物的形式，通過局部給藥、吸入噴射或者直腸給予來給藥本發(fā)明的化合物。對(duì)于可逆性閉塞性氣管疾病的治療，本發(fā)明化合物優(yōu)選的是在粉末或者溶液的形式下，通過吸入給藥到肺中。
與載體組合的本發(fā)明化合物的含量，根據(jù)所治療的宿主和特定的給藥形態(tài)可以變化。但是對(duì)于特定患者的的特定用量，要根據(jù)包括年齡、體重、整體的健康狀態(tài)、性別、食欲、給藥時(shí)間、給藥方法、排泄率、藥劑的組合及治療中的特定疾病的程度等的各種因素來決定。
本發(fā)明化合物作為軟膏劑使用時(shí)，本發(fā)明化合物在軟膏中的含量是0.01～10w/w％。作為可以使用的軟膏劑有油脂性基劑(白蠟、巴西棕櫚蠟等的天然蠟、固體石蠟、微晶石蠟等的天然石油蠟、液體石蠟、白色凡士林、黃色凡士林等的烴類、聚乙烯復(fù)合軟膏，zelen 50W、硅酮、植物油、豬脂、牛脂、單軟膏、單鉛軟膏等)、乳劑性基劑(親水軟膏、雪花膏等的油包水型(O/W型)基劑；親水凡士林、精制羊毛脂、阿夸弗爾、優(yōu)塞林、neoselin、吸水軟膏、加氫羊毛脂、冷膏、親水聚乙烯復(fù)合軟膏等的水包油型(W/O型)基劑)、水溶性基劑(聚乙二醇軟膏、溶膠基等)、懸浮性基劑(無脂肪性軟膏、凝膠基、洗劑等的水凝膠劑；PAPG基劑(將硬脂醇、十六烷醇等的脂肪醇的微粒懸浮在丙二醇中的)等リオ凝膠基劑)。此外，這些軟膏基劑可以1種或者2種以上適當(dāng)組合使用。
進(jìn)而，本發(fā)明化合物作為軟膏劑使用時(shí)，先溶解在溶解。吸收促進(jìn)劑中后，再配合到上述軟膏劑中。可以使用的溶解。吸收促進(jìn)劑至少要能溶解本發(fā)明化合物0.01W/W％以上的濃度，而且，作為軟膏劑，在制劑化時(shí)，是意味著可以促進(jìn)本發(fā)明化合物從皮膚吸收，可以舉出低級(jí)烷基二醇類(乙二醇、丙二醇、丁二醇等)、碳酸低級(jí)亞烷基酯類(碳酸亞丙基酯、碳酸亞乙基酯等)、烷基二羧酸酯類(二甲基己二酸酯、二乙基己二酸酯、二異丙基己二酸酯、二乙基庚二酸酯、二乙基癸二酸酯、二丙基癸二酸酯等)、高級(jí)鏈烷酸甘油酯類(單月桂酸酯、二單月桂酸酯、三月桂酸酯等)、高級(jí)鏈烯酸甘油酯類(單油酸酯、二油酸酯、三油酸酯等)、高級(jí)烷酸烷基酯類(十四烷基酸異丙基酯、十四烷基酸乙基酯等)、高級(jí)不飽和醇類(香葉醇、油醇等)及氮雜環(huán)烷烴類(1-十二烷基氮雜環(huán)庚烷-2-酮等)。這些溶解。吸收促進(jìn)劑可以使用1種或者2種以上的混合物。至少要使用能充分溶解本發(fā)明化合物的量。該使用量，對(duì)于本發(fā)明化合物的1重量要使用2重量份～200重量份。其上限是要限制在不阻礙軟膏所期望的特性范圍。
含有本發(fā)明化合物的軟膏劑，除了上述的軟膏基劑之外，也可配合聚氧乙烯硬化蓖麻油、單硬脂酸甘油酯、倍半油酸山梨糖醇酐酯、Lauromacrogol等的乳化劑；聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、羧甲基纖維素鈉等的懸浮化劑；酚類或醌類等的抗氧化劑；對(duì)羥基苯甲酸酯類等的保存劑；甘油、D-山梨糖醇、丙二醇等的保溫劑；香料；著色劑、防腐劑；高級(jí)烯酸(例如，油酸等)等的其他添加劑、進(jìn)而，也可配合對(duì)于其他的皮膚疾病有效的藥劑。將本發(fā)明化合物作為軟膏劑用時(shí)，通常，將含有本發(fā)明化合物的溶液，配合在軟膏基劑中，用公知的方法制劑化。此時(shí)，也可將1種以上的上述輔助劑、添加劑等，同時(shí)加入到軟膏基劑中。另外，將本發(fā)明化合物溶解到溶解、吸收促進(jìn)劑中，將得到的混合物加熱攪拌，接著通過冷卻也可以制造軟膏劑。
含有本發(fā)明化合物的軟膏劑，每日1～數(shù)次、例如1～4次涂敷在皮膚的患部，進(jìn)行使用。
含有本發(fā)明化合物的糊劑或者擦劑，是用與上述軟膏劑相同的基劑通過配制方法來制造。
含有本發(fā)明化合物的洗劑，是將有效成分化合物微細(xì)均等地分散在液體介質(zhì)中，或根據(jù)情況，作成一部分溶解的制劑，而配制成的適宜乳化劑。
本發(fā)明的化合物作為洗劑使用時(shí)，其含量在洗劑中是0.01～10w/w％。
用于含有本發(fā)明化合物洗劑的液體介質(zhì)是指水、低級(jí)醇、二醇類、甘油或這些的混合物。其中的作為低級(jí)烷醇，只要不分解有效成分化合物，而且對(duì)于皮膚沒有刺激的條件下，可以使用所有的低級(jí)醇，例如可舉出甲醇、乙醇、異丙醇、丙醇、丁醇。作為二醇類，可以舉出乙二醇、丙二醇、丁二醇或者這些的單低級(jí)烷基酯類。這些液體介質(zhì)中，由于水、低級(jí)醇或這些的混合物可以提高有效化合物成分向皮膚側(cè)的吸收性，所以特別地優(yōu)選。這些液體介質(zhì)的使用量，對(duì)于1重量份的本發(fā)明化合物，使用5重量份～1000重量份是適當(dāng)?shù)摹?br>
含有本發(fā)明化合物的洗劑中也可以使用溶解。吸收促進(jìn)劑，該溶解。吸收促進(jìn)劑至少具有可溶解有效化合物0.01w/w％以上的濃度，而且，在制劑成洗劑時(shí)，意味著可以促進(jìn)有效成分化合物向皮膚的吸收，具體的可舉出烷二羧酸酯類(二甲基己二酸酯、二乙基己二酸酯、二異丙基己二酸酯、二乙基庚二酸酯、二乙基癸二酸酯、二丙基基癸二酸酯等)及高級(jí)烷酸烷基酯類(十四烷基酸異丙基酯、十四烷基酸乙基酯)等。這些溶解。吸收促進(jìn)劑，也可以使用1種或2種以上的混合物，其使用量，對(duì)于1重量份的本發(fā)明化合物，使用5重量份～5000重量份是適當(dāng)?shù)?。另外，溶解。吸收促進(jìn)劑在洗劑中的含量最好是1～30w/w％。
用于含有本發(fā)明化合物的洗劑的乳化劑，一般地是為了將不溶性醫(yī)藥品微細(xì)均等地分散在水溶液中，而且是對(duì)人體無害的乳化劑，所以優(yōu)選的是使用醫(yī)藥上使用的天然乳化劑或合成乳化劑。作為天然乳化劑可以使用來自動(dòng)物或者植物的各種乳化劑，可舉出蛋黃卵磷酯、大卵磷酯或這些的加氫物、磷脂酰膽堿、鞘磷脂、阿拉伯膠、明膠等。另外，作為合成乳化劑可以使用陽(yáng)離性、陰離性、非離子性的表面活性劑，例如可以舉出，從長(zhǎng)期保存觀點(diǎn)看的蓖麻油系的表面活性劑、特別優(yōu)選的是HCO(聚氧化乙烯硬化蓖麻油)，如HCO-60、HCO-50、HCO-40等。除了上述以外也可以使用聚山梨酸酯80等的聚氧乙烯山梨糖醇酐脂肪酸酯衍生物、甘油單辛酸酯等的甘油脂肪酸酯衍生物、聚氧乙烯40單硬脂酸酯等的脂肪酸酯、中鏈脂肪酸單(或二)甘油酯類(辛酸二甘油酯、辛酸單甘油酯、己酸二甘油酯等的碳原子數(shù)6～12的脂肪酸單(或二)甘油酯類)、聚氧乙基化油酸甘油酯等的聚氧乙基化油酸甘油酯等。
另外，上述乳化劑是作為第1次乳化劑而使用的，必要時(shí)也可以使用輔助乳化劑。作為輔助乳化劑是使用一般的輔助乳化劑，而且是對(duì)于人體無害的，例如可以舉出膽固醇、瓊脂、氫氧化鎂、甲基纖維素、果膠等。這些第1次乳化劑及輔助乳化劑分別可使用1種或2種以上的混合物。
含有本發(fā)明化合物的洗劑中，乳化劑的添加量是以可以乳化本發(fā)明化合物以及配合的添加劑的量為基準(zhǔn)，通常，其使用量，對(duì)于1重量份的本發(fā)明化合物，使用0.1重量份～10重量份是適當(dāng)?shù)摹?br>
含有本發(fā)明化合物的洗劑中，也包括了含有為提高粘度的粘稠化劑。作為可使用的粘稠化劑，可使用本領(lǐng)域中一般對(duì)液體富于粘性的物質(zhì)、而且是對(duì)人體無害的，例如可舉出聚亞甲基羧基酯。在為了得到粘性高的洗劑時(shí)，才使用粘稠化劑。在使用粘稠劑時(shí)，洗劑中的粘稠劑的含量是根據(jù)所使用的洗劑要求的粘度而適宜的選擇，一般是0.01～5w/w％為適宜。
在含有本發(fā)明化合物的洗劑中，為了使有效成分化合物在水溶液中穩(wěn)定也可以含有穩(wěn)定劑。進(jìn)而，根據(jù)需要也可含有香料、著色劑、防腐劑、高級(jí)烯酸(油酸等)能使用在洗劑中的其他添加劑和對(duì)皮膚疾病有效的藥劑。
含有本發(fā)明化合物的洗劑的制造方法，可用本領(lǐng)域公知的方法進(jìn)行。含有本發(fā)明化合物的洗劑，在皮膚的患部上1日1～數(shù)次、例如1～4次涂敷使用。另外，含有本發(fā)明化合物的洗劑是低粘性時(shí)，也可以放在噴射容器中直接對(duì)皮膚的患部進(jìn)行噴射。
本發(fā)明化合物作為滴眼劑或者滴鼻劑使用時(shí)，可以使用的溶劑有殺菌蒸餾水、特別是注射蒸餾水。有效成分化合物的濃度通常是以0.01～2.0w/w為基準(zhǔn)，根據(jù)使用的目的可以適宜的增減。
含有本發(fā)明化合物的滴眼劑或者滴鼻劑中，進(jìn)而，也可以添加緩沖劑、等滲劑、溶解輔助劑、保存劑、粘稠劑、螯合劑、pH調(diào)節(jié)劑、芳香劑等的各種添加劑。
作為緩沖劑可以舉出如磷酸鹽緩沖劑(磷酸二氫鈉-磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀-氫化鉀)、硼酸緩沖劑(硼酸-硼砂)、檸檬酸鹽緩沖劑(檸檬酸鈉-氫氧化鈉)、酒石酸鹽緩沖劑(酒石酸-酒石酸鈉)、醋酸緩沖劑(醋酸-醋酸鈉)、碳酸鹽緩沖劑(碳酸鈉-檸檬酸鹽、碳酸鈉-硼酸)、氨基酸(谷氨酸鈉、ε-氨基己酸)等。
作為等滲劑，可以舉出山梨糖醇、葡萄糖、甘露糖醇等的糖類、甘油、丙二醇等的多元醇類、氯化鈉、硼砂等的鹽類、硼酸等。
作為溶解輔助劑，可以舉出聚氧乙烯山梨糖醇單油酸酯(聚山梨醇酯80)、聚氧乙烯單硬脂酸酯、聚乙二醇、聚氧化乙烯硬化蓖麻油等的非離子性表面活性劑等。作為保存劑，可舉出苯扎氯銨、氯化芐甲乙氧銨、 氯化十六烷基吡啶鎓等的季銨鹽、對(duì)羥基苯甲酸甲酯、對(duì)羥基苯甲酸乙酯、對(duì)羥基苯甲酸丙酯、對(duì)羥基苯甲酸丁酯等的對(duì)羥基苯甲酸酯類、芐醇、苯乙醇、山梨糖酸及他們的鹽、硫柳撒、氯丁醇、脫氫醋酸鈉等。
作為粘稠劑，例如可舉出聚乙烯吡咯烷酮、羥乙基纖維素、羥丙基纖維素、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、羧酸甲基纖維素及它們的鹽等。作為螯合劑，可舉出乙二胺四乙酸鈉、檸檬酸等。
作為PH調(diào)節(jié)劑，可舉出鹽酸、檸檬酸、磷酸、醋酸、酒石酸、氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸鈉及碳酸氫鈉等。作為芳香劑，可舉出1-薄荷醇、冰片、樟腦(d1-樟腦等)、桉葉油等。
本發(fā)明化合物作為點(diǎn)眼劑使用時(shí)，PH通常調(diào)節(jié)到約4.0～8.5，另外，作為點(diǎn)鼻劑用時(shí)，PH通常調(diào)節(jié)到約4.0～8.5。
含有本發(fā)明化合物的滴眼劑或滴鼻劑的制法，根據(jù)各劑的種類而不同，但可采用各劑自身的公知方法。
本發(fā)明化合物作為點(diǎn)眼劑使用時(shí)，有效成分的點(diǎn)眼量，只要對(duì)于眼炎癥有效地消炎的充分量就可以，根據(jù)癥狀、炎癥的種類等可適宜地增減，但一般地，1次是5.0～1000μg左右。給藥次數(shù)1日1～數(shù)次，例如可適宜地選擇1～4次。
含有本發(fā)明化合物的氣霧劑，是指通過充填到同一容器或者其他容器的液化氣或壓縮氣體的壓力在使用時(shí)能將有機(jī)化合物的溶液、懸浮液等噴出的溶劑。該氣霧劑是用以下方法制造的，即將本發(fā)明化合物溶解在蒸餾水等中，必要時(shí)與上述同樣地加入溶解。吸收促進(jìn)劑進(jìn)行溶解(或懸浮)、進(jìn)而必要時(shí)加入上述的pH調(diào)節(jié)劑、防腐劑等的添加劑后加上閥門、密封，在壓入噴射劑后而得到的。
可以使用的噴射劑，可以舉出二甲醚、液化天然氣、二氧化碳、氮?dú)?、替代氟利昂等通常使用的噴射劑?br>
此外，含有本發(fā)明化合物的氣霧劑中也可以添加1-薄荷醇、樟腦、水楊酸甲酯使其具有清涼感。
含有本發(fā)明化合物的吸入劑、噴霧劑可以通過與上述霧膠劑相同的制法來制造，對(duì)于吸入劑情況可以使用吸入器(噴霧器、吸入器)；噴霧劑情況可以使用噴霧器。
本發(fā)明化合物作為栓劑使用時(shí)，可用一般使用的栓劑用基劑按照常規(guī)方法配制本發(fā)明的化合物，其有效成分化合物的含量，只要是能顯示出藥效的量即可，可根據(jù)患者的年齡、癥狀適宜的調(diào)節(jié)，通常在0.1～60mg的范圍。
作為用于本發(fā)明栓劑的基劑，可以使用通常的基劑，動(dòng)植物性油脂類，例如橄欖油、玉米油、蓖麻油、棉籽油、小麥胚芽油、可可油、牛脂、豬脂、羊毛脂、海龜脂、角鯊?fù)椤⒂不偷?；礦物性油脂，例如凡士林、白色凡士林、固體石蠟、液體石蠟、脫水羊毛脂、有機(jī)硅油等；臘類，例如西蒙得木油、巴西棕櫚臘、蜜蠟、羊毛脂等；部分合成或者全部合成甘油脂肪酸酯，例如月桂酸、十四烷酸、十六烷酸、硬脂酸等的直鏈飽和脂肪酸、油酸、亞油酸、亞麻酸等的直鏈不飽和脂肪酸等的中級(jí)或高級(jí)脂肪酸的單、二或三甘油酯。作為這些市售品的例子有Witepsol(Dynamitnobel社制這些是碳原子數(shù)12～18的飽和脂肪酸單，二、三甘油酯的混合物。詳細(xì)的是Witepsol H系列，例如Witepsol H5、H12、H15、H19、H32、H35、H37、H39、H42、H175、H185等)，Witepsol W系列(例如Witepsol W25、W31、W35、W45等)，Witepsol E系列(例如Witepsol E75、E76、E79、E85等)、Witepsol S系列(例如，Witepsol S52、S55、S58等))、Pharmasol(日本油脂社制)、Isocacao(花王社制)、SB(鐘淵化學(xué)社制及太陽(yáng)油脂社制這些是碳原子數(shù)12～18的飽和脂肪酸單，二、三甘油酯的混合物。詳細(xì)的是SB-H、SB-E、SB-AM等。)、Nopata(Henkel社制)、Sapoyer(Gattfords社制這些是碳原子數(shù)10～18的飽和脂肪酸單，二、三甘油酯的混合物。詳細(xì)的是SapoyerNA、SapoyerOS SapoyerAS、SapoyerBS、SapoyerBM、SapoyerDM等)、Masaesthalinum(Dynamitnobel社制這些是碳原子數(shù)10～18的飽和脂肪酸單，二、三甘油酯的混合物。詳細(xì)地，MasaesthalinumA、AB、B、BB、BC、BCF、C、D、E、BD及Masaesthalinum299等)、Migriol 810及Migriol 812(Dynamitnobel社制這些是碳原子數(shù)8～12的飽和脂肪酸單，二、三甘油酯的混合物。詳細(xì)地在配合上述部分合成或者全部合成甘油脂肪酸酯時(shí)，根據(jù)需要加入1種或以上的這些物質(zhì)。)等。作為其他的合成品可舉出聚乙二醇、聚氧乙烯醇類。這些基劑的配合量是制劑全量的25～99.9重量％。
另外，含有本發(fā)明化合物的栓劑中，根據(jù)需要也可以加入保存劑、穩(wěn)定劑、表面活性劑、芳香劑、著色劑、pH調(diào)節(jié)劑、蒸餾水等。
含有本發(fā)明化合物的栓劑所使用的劑型，可以使用常溫下是固體、用體溫可以熔融的肛門栓劑、可溶解或分散在液狀基劑中的軟膏或者洗腸狀的物質(zhì)，例如投入直腸的軟膠囊、直腸投與注射器等。
含有本發(fā)明化合物栓劑的制造方法，可用本領(lǐng)域公知的方法進(jìn)行。
給藥量是根據(jù)年齡、體重、一般的健康狀態(tài)、性別、食欲、給藥時(shí)間、給藥方法、排泄速度、藥物的組合、患者治療時(shí)的病狀程度以及考慮其他的因素后來確定。本發(fā)明的化合物、其制藥上可容許的酸加成鹽或者它們的鹽，可在低毒性下安全地使用、每日的給藥量是依患者的狀態(tài)、體重、化合物的種類、給藥方式而不同，例如非經(jīng)口給藥時(shí)，可在靜脈、肌肉、經(jīng)皮的、經(jīng)眼的、經(jīng)肺。支氣管、經(jīng)鼻或者直腸內(nèi)，給藥約0.01～50mg/人/日、優(yōu)選的是0.01～20mg/人/日，另外，經(jīng)口時(shí)，有效的是給藥量約0.01～150mg/人/日、優(yōu)選的是0.1～100mg/人/日。
進(jìn)而，作為本發(fā)明化合物(I)的合成中間體有用的化合物A，包含本發(fā)明化合物(I)的通式(II-a)表示的化合物的合成中間體、及化合物(II-a)作為用適當(dāng)?shù)难趸瘎┭趸圃斓挠猛ㄊ?I-c)表示的化合物的合成中間體是有用的，如在化合物(I-c)所述的，2-氨基-1，3-丙二醇骨架的2位碳鏈上，該碳鏈中取代有對(duì)亞苯基及碳鏈端上取代有苯基、而且，該對(duì)亞苯基及苯基所夾碳鏈中，對(duì)亞苯基的α位碳用羰基取代的化合物，與本發(fā)明化合物(I)同樣地具有毒性小、作為安全性高的優(yōu)良免疫抑制劑是有用的。此外，化合物(II-a)作為化合物(I-c)的合成中間體是有用的、另外，與化合物(I-c)同樣地毒性小，作為安全性高的優(yōu)良免疫抑制劑也是有用的。
通式(II-a) 〔式中，m表示0～9，優(yōu)選的是4；R1a、R2a、R3a、R4a相同或不同地分別表示氫、?；?甲酰基、乙?；?、丙酰基、丁?；惗□；?、戊?；⒓乎；?、庚?；?、辛酰基、壬酰基、癸?；?、十一碳酰基、十二碳?；?、十三碳酰基、十四碳?；?、十五碳?；⑹减；⑹咛减；?、十八碳?；?、十九碳酰基、二十碳?；鹊奶荚訑?shù)1～20個(gè)的直鏈或者支鏈的鏈烷酰基；苯基乙?；?、苯基丙?；鹊目捎帽交〈奶荚訑?shù)2～20個(gè)的直鏈或者支鏈的烷酰基；苯甲酰等的芳酰基；甲氧基羰基、乙氧基羰基、丙氧基羰基、異丙氧基羰基、丁氧基羰基、異丁氧基羰基、叔丁氧基羰基、戊氧基羰基、異戊氧基羰基、叔戊氧基羰基、己氧基羰基、庚氧基羰基、辛氧基羰基、壬氧基羰基、癸氧基羰基、十一碳氧基羰基、十二碳氧基羰基、十三碳氧基羰基、十四碳氧基羰基、十五碳氧基羰基、十六碳氧基羰基、十七碳氧基羰基、十八碳氧基羰基、十九碳氧基羰基、二十碳氧基羰基等的烷氧部分是碳原子數(shù)1～20個(gè)的直鏈或者支鏈的烷氧羰基；芐氧羰基等的芳烷氧羰基等)或者烷基(甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、叔丁基、戊基、己基、庚基、辛基、壬基、癸基、十一碳基、十二碳基、十三碳基、十四碳基、十五碳基、十六碳基、十七碳基、十八碳基、十九碳基、二十碳基等的碳原子數(shù)1～20個(gè)的直鏈或者支鏈的烷基)；R3a、R4a可通過可用碳原子數(shù)1～4的烷基(與上述定義相同)、芳基(苯基等)或者芳烷基(芐基等)取代的亞烷基鏈進(jìn)行結(jié)合。Y1、Y2相同或不同分別表示氫、碳原子數(shù)1～4的烷基(與上述定義相同)、碳原子數(shù)1～4的烷氧基(甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、丁氧基、異丁氧基、叔丁氧基等)、鹵素(氟、氯、溴、碘)或者羥基(以下稱化合物(II-a))。通式(I-c) (式中，R1a、R2a、R3a、R4a、Y1、Y2與上述定義相同)(以下稱化合物(I-c))。
這些化合物(II-a)及化合物(I-c)可通過在(A)法中，使用用通式(XXX)表示的化合物代替化合物(III)， (式中，M、m、Y1、Y2與上述定義相同)(以下稱化合物(XXX))與化合物A的氨基和/或羥基被保護(hù)了的化合物，按照(A法)、(B法)的方法基準(zhǔn)進(jìn)行反應(yīng)處理來制造的。另外在(B法)中，使用鹵代烷基代替酰鹵進(jìn)行同樣的反應(yīng)處理可以制造對(duì)應(yīng)的氨基和/或羥基被烷基化了的化合物。進(jìn)而，在(M法)中，使用化合物(XXX)代替化合物(III)進(jìn)行同樣的反應(yīng)處理也可以制造化合物(I-c)。
這樣得到的化合物(II-a)及化合物(I-c)與上述同樣地可以分別作成酸加成鹽、水合物。
此外，化合物(II-a)中優(yōu)選的是用通式(II-b)表示的化合物， (式中，R1、R2、R3、R4與上述定義相同)。以下稱化合物(II-b))，特別優(yōu)選的是2-氨基-2-(2-(4-(1-羥基-5-苯基戊基)苯基)乙基)丙烷-1，3-二醇。
此外，化合物(I-c)中優(yōu)選的是化合物(I)， (式中，R1、R2、R3、R4與上述定義相同)。特別優(yōu)選的是2-氨基-2-(2-(4-(1-氧代-5-苯基戊基)苯基)乙基)丙烷-1，3-二醇。進(jìn)而，代替化合物(XXX)，使用通式(XXXI)表示的化合物，M-(CH2)nCH3(XXXI)(n是從0～12的整數(shù)，優(yōu)選的是6、M與上述定義相同)(以下稱化合物(XXXI))與化合物A的氨基和/或羥基被保護(hù)了的化合物，按照(A法)、(B法)進(jìn)行反應(yīng)處理〔(B法)中，也包括使用鹵代烷代替酰鹵進(jìn)行同樣處理的方法〕，或者(M法)中使用化合物(XXXI)代替化合物(III)進(jìn)行同樣的反應(yīng)處理可以制造用通式(XXXII)、(XXXIII)表示的化合物， 或 (式中，R1a、R2a、R3a、R4a、n與上述定義相同)(以下稱化合物(XXXII)、化合物(XXXIII))。此外，這樣得到的化合物(XXXII)、化合物(XXXIII)與本發(fā)明化合物(I)同樣地作為毒性小、安全性高的優(yōu)良免疫抑制劑是有用的。
圖2表示試驗(yàn)例13的結(jié)果的圖。-O-表示對(duì)照、-●-表示比較化合物1(10mg/kg)、-Δ-表示比較化合物2(10mg/kg)、-■-表示本發(fā)明的化合物(I-a)(10mg/kg)的結(jié)果。
化合物(I) 1mg乳糖90mg結(jié)晶纖維素 25mg硬脂酸鎂4mg(2)軟膠囊劑(1膠囊中)化合物(I) 30mg聚乙二醇300 300mg聚山梨醇酯8020mg制造方法在本發(fā)明的化合物中加入聚乙二醇300及聚山梨醇酯80，充填到軟膠囊中而配制的。(3)注射劑(1安瓶 10ml中)化合物(I) 0.3％聚乙二醇300 20％乙醇 60％用注射蒸餾水作成全量10ml制造方法在本發(fā)明的化合物中加入乙醇及聚乙二醇300后，使其溶解，加入注射蒸餾水，使全溶解，并作成全容量。
得到在1個(gè)10ml的安瓶中含有本發(fā)明化合物30mg的注射劑。(4)5％軟膏本發(fā)明的化合物 1g親水凡士林 19g制造方法將本發(fā)明的化合物1g加溫溶解在親水凡士林19g中，在60℃下加溫溶解，攪拌冷卻后，配制本發(fā)明化合物的5％軟膏。(5)5％軟膏本發(fā)明的化合物 1g聚乙烯復(fù)合軟膏(Plastibase) 19g制造方法將本發(fā)明的化合物1g與聚乙烯復(fù)合軟膏(凝膠烴)19g一起在乳缽中，在30分鐘內(nèi)充分混合，配制本發(fā)明化合物的5％軟膏。(6)栓劑本發(fā)明的化合物 30mgWitepsol H15 72.47mg制造方法將72.47g的Witepsol H15在40℃下熔融，加入本發(fā)明的化合物30mg，攪拌、使其分散。將均勻混合的、以一個(gè)725mg地充填在容器中，得到在725mg中含有本發(fā)明的化合物0.3mg的栓劑。(7)滴眼劑本發(fā)明的化合物 0.2g聚乙烯醇0.2g聚氧化乙烯硬化蓖麻油60 0.1g磷酸氫二鈉 0.5g磷酸二氫鈉 0.1g氯化鈉 0.8g氯化芐甲乙氧銨 0.007g加入滅菌蒸餾水使全量為100ml。
制造方法在滅菌蒸餾水70ml中，加入聚乙烯醇0.2g，邊攪拌，邊加溫到70℃，使其溶解。在此溶液中，混合0.1g的聚氧化乙烯硬化蓖麻油60，均勻分散后，將此混合液冷卻到室溫。在此溶液中溶解本發(fā)明化合物0.2g、磷酸氫二鈉0.5g、磷酸二氫鈉0.1g、氯化鈉0.8g及氯化芐乙氧銨0.007g，在此溶液中加入殺菌蒸餾水使全量為100ml，得到本發(fā)明的滴眼劑。(8)滴鼻劑本發(fā)明的化合物 0.4g檸檬酸鈉 0.2g聚山梨醇酯80 0.1g甘油 2.6g氯化芐甲乙氧銨 0.007g加入滅菌蒸餾水使全量為100ml。
制造方法在滅菌蒸餾水70ml中，加入本發(fā)明化合物0.4g、檸檬酸鈉0.2g、0.1g的聚山梨醇酯80、甘油2.6g及氯化芐甲乙氧銨0.007g溶解后，在此溶液中，加入滅菌蒸餾水使全量為100ml。得到本發(fā)明的滴鼻劑。(9)2％洗劑本發(fā)明的化合物 100mg異丙基十四烷酸酯 1ml乙醇 4ml制造方法室溫下，在本發(fā)明化合物100mg中加入異丙基十四烷酸酯1ml及乙醇4ml，使其溶解，得到含有本發(fā)明化合物2％的洗劑。
以下通過實(shí)驗(yàn)例進(jìn)一步詳細(xì)說明本發(fā)明的作用及效果。
作為免疫抑制活性的測(cè)定方法，有使用小鼠、大白鼠或者人的淋巴細(xì)胞測(cè)定各種免疫的方法。例如，通過使用小鼠、大白鼠、人的同種淋巴細(xì)胞混合反應(yīng)(同種MLR)測(cè)定各種免疫的方法，可以靈敏地測(cè)定免疫抑制活性。
所說的同種MLR是指將同種而且來自2個(gè)不同個(gè)體的主要組織適合性抗原的淋巴細(xì)胞，例如脾細(xì)胞、淋巴節(jié)細(xì)胞、末梢血淋巴細(xì)胞等進(jìn)行混合培養(yǎng)，衍生出的淋巴細(xì)胞的胚細(xì)胞樣轉(zhuǎn)化反應(yīng)。另外，同種MLR反映了淋巴細(xì)胞供與者間的主要組織適合性抗原的不同，而被衍生出的現(xiàn)象、用一卵性雙生兒的淋巴細(xì)胞的混合培養(yǎng)，看不到胚細(xì)胞樣轉(zhuǎn)化現(xiàn)象。同種MLR也有廣泛地應(yīng)用在臟器移植中的供給體-接受體的選擇的方法。
通常，進(jìn)行同種MLR時(shí)，通過用X線照射或者絲裂霉素C的處理，在阻止分裂增殖的狀態(tài)下作為刺激細(xì)胞使用，測(cè)定其他淋巴細(xì)胞(反應(yīng)細(xì)胞)的胚細(xì)胞樣轉(zhuǎn)化反應(yīng)的方法(one way-MLR)。
進(jìn)而，免疫抑制活性，在同種MLR時(shí)，也可作為抑制具有被衍生的主要組織適合性抗原約束性的細(xì)胞毒素毒素T細(xì)胞的衍生的活性測(cè)定。
另外，免疫抑制活性，在同種MLR外，也可以作為以下的活性加以評(píng)價(jià)，即，抑制由各種的細(xì)胞分裂素(伴刀豆球蛋白A、植物血凝素、商陸分裂素等)的刺激而誘導(dǎo)的淋巴細(xì)胞的胚細(xì)胞樣轉(zhuǎn)化反應(yīng)活性、或者抑制由具有增強(qiáng)T細(xì)胞、B細(xì)胞的淋巴細(xì)胞分裂增殖或促進(jìn)分化活性的細(xì)胞活素(白細(xì)胞介素1，2，3，4，5，6等)誘導(dǎo)的淋巴細(xì)胞的分裂增殖反應(yīng)或者功能表達(dá)的活性。進(jìn)而，作為抑制這些細(xì)胞活素的T細(xì)胞、巨嗜細(xì)胞等產(chǎn)生的活性加以評(píng)價(jià)也是可能的。
進(jìn)而，也可以作為以下的活性加以評(píng)價(jià)，即通過腹腔、經(jīng)口、靜脈、皮內(nèi)、皮下、或者肌肉內(nèi)給藥，將化合物投予小鼠等，例如，抑制用同種細(xì)胞等預(yù)先免疫了的小鼠脾細(xì)胞中誘導(dǎo)出的同種細(xì)胞特異性的細(xì)胞毒素T細(xì)胞誘導(dǎo)的活性以及抑制用同種細(xì)胞等預(yù)先免疫了的產(chǎn)生在小鼠血清中的同種細(xì)胞特異性抗體產(chǎn)生的活性。另外，通過將化合物給藥于大鼠、狗等，作為活性可以評(píng)價(jià)，抑制在同種間移植這些試驗(yàn)動(dòng)物的皮膚、心臟、肝臟、腎臟等的臟器時(shí)所引起的排斥反應(yīng)、或者移植片對(duì)宿主反應(yīng)(GvHR)及宿主對(duì)移植片反應(yīng)(HvGR)的活性。進(jìn)而，通過將化合物給藥于小鼠、大鼠等，可以評(píng)價(jià)抑制、遲延型過敏癥反應(yīng)、佐劑關(guān)節(jié)炎、試驗(yàn)的過敏性腦脊髓炎、實(shí)驗(yàn)的自身免疫性葡萄膜炎的活性。
進(jìn)而，通過向自身免疫疾病的自然發(fā)病模型動(dòng)物等的MRL/Ipr小鼠、NZB/WF1小鼠、BXSB小鼠、NOD小鼠等給與化合物，作為活性可以評(píng)價(jià)DNA抗體的產(chǎn)生、風(fēng)濕因子的產(chǎn)生、腎炎、淋巴細(xì)胞增殖異常、尿蛋白等的抑制活性或者延長(zhǎng)生命效果。實(shí)驗(yàn)例1(對(duì)于大鼠同種淋巴細(xì)胞混合反應(yīng)的抑制作用)大鼠同種淋巴細(xì)胞混合反應(yīng)(以下稱大鼠同種MLR)，作為反應(yīng)細(xì)胞使用F344大鼠的尼龍毛非附著性細(xì)胞、作為刺激細(xì)胞使用用絲裂酶素C處理的WKAH大鼠脾細(xì)胞，兩者以等比進(jìn)行混合培養(yǎng)。
作為反應(yīng)細(xì)胞的配制方法，用以下的方法進(jìn)行。摘除4～10周齡的F344大鼠的脾臟，使用添加5％熱不活化牛胎兒血清(以下稱FCS)的RPMI 1640培養(yǎng)基(含有硫酸卡那霉素60μg/ml、青霉素G鉀100單位/ml、N-2-羥乙基-哌嗪-N’-2-乙磺酸酯10mM、0.1％碳酸氫鈉、L-谷氨酰胺2mM)，得到脾細(xì)胞的單細(xì)胞浮游液。溶血處理后，將脾細(xì)胞通到尼龍毛柱，回收非粘著性細(xì)胞。用含有10-4M的2-巰基乙醇及10％FCS的RPMI 1640培養(yǎng)基將尼龍非附著性細(xì)胞調(diào)制成107個(gè)/ml，作為反應(yīng)細(xì)胞懸浮液使用。
刺激細(xì)胞用以下的方法調(diào)制。摘除4～10周齡的WKAH大鼠的脾臟，使用RPMI1460培養(yǎng)基，得到脾細(xì)胞的單細(xì)胞浮游液。溶血處理后，在37℃下，用絲裂霉素進(jìn)行60分鐘的處理。洗滌三次后，用含有10-4M的2-巰基乙醇及10％FCS的RPMI 1640培養(yǎng)基調(diào)制成107個(gè)/ml，作為反應(yīng)細(xì)胞懸浮液使用。
使用含有用上述方法調(diào)制的反應(yīng)細(xì)胞懸浮液50μl和刺激細(xì)胞懸浮液50μl及10％FCS的RPMI 1640培養(yǎng)基而調(diào)制的被檢體100μl，將其加入到96平底微孔試驗(yàn)板中，在37℃、5％碳酸95％空氣的條件下，進(jìn)行4天的培養(yǎng)。
大鼠同種MLR中的淋巴細(xì)胞的胚細(xì)胞樣轉(zhuǎn)化反應(yīng)的測(cè)定方法，可以使用3H-胸腺嘧啶核苷的攝取作為指標(biāo)的方法。即，培養(yǎng)結(jié)束后，添加3H-胸腺嘧啶核苷18.5KBq/孔，4小時(shí)培養(yǎng)后，用細(xì)胞收集器收集細(xì)胞，用液體閃爍計(jì)數(shù)器測(cè)定進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的放射活性，作為大鼠同種MLR中的淋巴細(xì)胞的胚細(xì)胞樣轉(zhuǎn)化指標(biāo)。大鼠同種MLR的抑制活性，可用下式計(jì)算抑制率，進(jìn)行評(píng)價(jià)。 本發(fā)明的化合物對(duì)于大鼠同種的淋巴細(xì)胞混合反應(yīng)，顯示約1～約50nM的IC50值(抑制50％的濃度)。
實(shí)驗(yàn)例2(對(duì)用白細(xì)胞介素2(IL-2)誘導(dǎo)的IL-2依賴性小鼠T細(xì)胞株CTLL-2的增殖抑制作用)將含有IL-2依賴性白鼠T細(xì)胞株CTLL-2，用含有10％FCS的RPMI1640培養(yǎng)基而調(diào)制成2×105個(gè)/ml。使用此細(xì)胞浮游液50μl和、50μl重組體人IL-2(rh-IL-2)40U/ml及含有10％FCS的RPMI 1640培養(yǎng)基調(diào)制的被檢體100μl加入到96孔平底微試驗(yàn)板中，在37℃、5％碳酸氣95％空氣的條件下，進(jìn)行68小時(shí)的培養(yǎng)。培養(yǎng)結(jié)束后，除去各孔的上清液100μl，將5mg/ml的MTT(3-(4，5-二甲基噻唑-2-基)-2，5-二苯基四唑鎓溴)溶液以20μl添加在各孔中，在37℃下培養(yǎng)4小時(shí)。而后，加入含有10％十二烷基硫酸鈉的0.01N鹽酸溶液100μl，培養(yǎng)一夜，使形成的紫色的甲瓚結(jié)晶消失，使用微孔板吸光光度計(jì)測(cè)定570nm的吸光度，將IL-2依存性的CTLL-2細(xì)胞的增殖作為指標(biāo)。IL-2依存性增殖的抑制率(％)用下式計(jì)算。 本發(fā)明的化合物，對(duì)于小鼠T細(xì)胞的CTLL-2的IL-2依存性增殖，顯示大約1～50nM的IC50值(抑制50％的濃度)。實(shí)驗(yàn)例3(對(duì)小鼠延遲型過敏癥反應(yīng)的抑制作用)在5周令的雌性BALB/c小鼠背部皮下注射0.25％的甲基化人血清白蛋白(以下稱MeHSA)溶液0.1ml，進(jìn)行致敏作用。致敏后，第4天，用足容積測(cè)定裝置(TK-102Neuroscience株式會(huì)社)測(cè)定小鼠的右后肢的足容積后，向小鼠的右后肢足掌注射0.25％的MeHSA溶液25μl，引起延遲型過敏癥反應(yīng)(以下稱DTH反應(yīng))，24小時(shí)后，即致敏后的第5天再次測(cè)定右后肢的容積。從第5天的右后肢容積減去第4天的容積，即右后肢的腫脹作為DTH的反應(yīng)指標(biāo)，進(jìn)行被驗(yàn)化合物的評(píng)價(jià)。此時(shí)，小鼠的體重、胸腺及脾臟的濕重量及末梢白血球數(shù)也一起測(cè)定。被驗(yàn)化合物從致敏開始后的5天內(nèi)連續(xù)經(jīng)口給藥。
本發(fā)明的化合物，通過0.1～10mg/kg的給藥，顯示了統(tǒng)計(jì)學(xué)上的明顯的DTH反應(yīng)的抑制作用。實(shí)驗(yàn)例4(大鼠宿主對(duì)移植片反應(yīng)的抑制作用)從4-5周齡雄性WKAH大鼠摘除脾臟，使用RPMI 1640培養(yǎng)基(含有硫酸卡那霉素60μg/ml、青霉素G鉀100單位/ml、N-2-羥基乙基哌嗪-N’-乙烷磺酸酯10mM、0.1％碳酸氫鈉、L-谷氨酰氨2Mm)，得到脾細(xì)胞的單細(xì)胞懸浮液。溶血處理后，使用RPMI 1640培養(yǎng)基洗滌3次，用注射生理鹽水調(diào)制到5×107個(gè)/ml。通過將此脾細(xì)胞懸浮液100μl注射到4周齡雄性LEW大鼠右后肢足掌，誘發(fā)宿主對(duì)移植片的反應(yīng)(以下稱為HvG反應(yīng))。細(xì)胞移植后的第4天，摘除左右膝關(guān)節(jié)窩的淋巴結(jié)，測(cè)定重量。將從右膝關(guān)節(jié)窩的淋巴結(jié)重量減去左膝關(guān)節(jié)窩的淋巴結(jié)重量的值作為HvG反應(yīng)指標(biāo)，進(jìn)行被驗(yàn)化合物的評(píng)價(jià)。另外在細(xì)胞移植后的第4天從大鼠的尾部靜脈采血，使用動(dòng)物用自動(dòng)血球計(jì)數(shù)器(MEK-5158日本光電工業(yè)株式會(huì)社)測(cè)定末稍白血球數(shù)。從細(xì)胞移入日起連續(xù)4天內(nèi)向靜脈內(nèi)投入被驗(yàn)化合物。實(shí)驗(yàn)例5(大鼠移植片對(duì)宿主反應(yīng)的抑制作用)移植片對(duì)宿主反應(yīng)(以下稱以下稱為GvH反應(yīng))時(shí)，分為全身性GvH反應(yīng)和局部性GvH反應(yīng)二類。全身性GvH反應(yīng)是將150ml/kg的環(huán)磷酰胺從靜脈投入到5周令的雌性(LEWxBN)F1白鼠內(nèi)，第二天，將5周齡雌性LEW大鼠的脾細(xì)胞的5×107個(gè)從靜脈注入誘發(fā)上述反應(yīng)。通過求出誘發(fā)全身性GvH反應(yīng)后的生存天數(shù)，對(duì)被驗(yàn)化合物進(jìn)行評(píng)價(jià)。局部性的GvH反應(yīng)，是將5周齡雄性LEW大鼠的脾細(xì)胞的2×107個(gè)移入到5周齡的雌性(LEWxBN)F1大鼠的右后肢足掌下，第7天，摘除膝窩的淋巴結(jié)，測(cè)定重量。均是從細(xì)胞移入日起連續(xù)地向靜脈內(nèi)投入被驗(yàn)化合物，全身性GvV反應(yīng)是30天，局部性GvV反應(yīng)是7天。實(shí)驗(yàn)例6(對(duì)于大鼠內(nèi)抵抗羊紅血球的抗體產(chǎn)生的抑制作用)對(duì)于4～6周齡的雄性F344大鼠的靜脈內(nèi)，注射1×108個(gè)羊紅血球進(jìn)行免疫。免疫后第4天，摘除脾臟，通過用羊紅血球和豚鼠補(bǔ)體的直接溶血斑形成法測(cè)定脾臟中的抗羊紅血球抗體的產(chǎn)生細(xì)胞數(shù)。此時(shí)，也一同測(cè)定大鼠的體重、胸腺及脾臟的濕重量、脾臟細(xì)胞數(shù)。此外，從免疫日起連續(xù)4天內(nèi)向靜脈內(nèi)連日投入被驗(yàn)化合物。實(shí)驗(yàn)例7(對(duì)于大鼠佐劑關(guān)節(jié)炎的抑制作用)作為佐劑，是將結(jié)核死菌(R35Hv-I株)0.5mg懸浮在0.1ml的液體石蠟中，接種在8周齡雄性LEW大鼠的尾根部皮下。佐劑接種后的21天前觀察有無關(guān)節(jié)炎的發(fā)癥，求出關(guān)節(jié)炎的發(fā)癥日及發(fā)癥率。另外，使用足容積測(cè)定裝置(TK-102Neuroscience株式會(huì)社)經(jīng)時(shí)測(cè)定右后肢足掌的腫脹。進(jìn)而，第21日對(duì)大鼠的后肢進(jìn)行X線的照相，判斷關(guān)節(jié)的破壞的程度。被驗(yàn)化合物，從佐劑接種日開始，連續(xù)地21天內(nèi)經(jīng)口或者靜脈給藥。
在未給與被驗(yàn)化合物時(shí)，由于接種佐劑，在7例的全例中都看到了關(guān)節(jié)炎的發(fā)癥，發(fā)癥日的平均數(shù)是9.6±0.5日。另外，也看到了后肢足掌的腫脹及關(guān)節(jié)的破壞。
將本發(fā)明的化合物0.1～10mg/kg投入時(shí)，從統(tǒng)計(jì)學(xué)看明顯地延遲了佐劑關(guān)節(jié)炎的發(fā)癥日，在減少發(fā)癥率的同時(shí)，明顯地控制了后肢足掌的腫脹及關(guān)節(jié)的破壞。實(shí)驗(yàn)例8(對(duì)于大鼠膠原關(guān)節(jié)炎的抑制作用)在7～8周齡的雄性Sprague-Dawley大鼠的皮內(nèi)5處，分割地注射1ml乳化液，上述的乳化液是將含有牛II型膠原2mg/ml的0.1N醋酸溶液和Freund的不完全佐劑以容積比1∶1混合后制成的。7日后，將同樣制作的膠原乳化液0.2ml注射到尾根部皮內(nèi)，進(jìn)行追加免疫。使用足容積測(cè)定裝置(TK-102；Neuroscience株式會(huì)社)經(jīng)時(shí)測(cè)定右后肢足掌的腫脹。
另外，用膠原初次免疫后的第10日及第21日采取血液，使用ELISA法測(cè)定血清中的抗II型膠原抗體值。被驗(yàn)化合物，從初次免疫日開始，連續(xù)地21天內(nèi)經(jīng)口或者靜脈給藥。實(shí)驗(yàn)例9(對(duì)于大鼠實(shí)驗(yàn)的過敏性腦脊髓炎的抑制作用)將含有從豚鼠的脊髓分離精制的髓磷脂基礎(chǔ)蛋白(myelin basicprotein)(MBP)的100μg和結(jié)核桿菌(Mycobacteriumtuberculosis H37 RA)100μg的Freund的完全佐劑乳化液的0.1ml注射到8周齡的雌性LEW大鼠的右后肢足掌皮內(nèi)，進(jìn)行免疫，用以下6個(gè)階段評(píng)價(jià)免疫后身體癥狀的經(jīng)時(shí)變化。評(píng)分0無癥狀1尾部功能減弱2后肢功能減弱
3一個(gè)后肢麻痹4二個(gè)后肢麻痹5失禁或者死亡另外，用MBP法免疫后的第20日，摘除大鼠的脊髓制作組織切片，用蘇木精-曙紅染色后，研究其病理象。被驗(yàn)化合物，從免疫日開始，連續(xù)地20天內(nèi)經(jīng)口給藥。實(shí)驗(yàn)例10(對(duì)于大鼠實(shí)驗(yàn)的自身免疫性葡萄膜炎的抑制作用)將含有從牛視網(wǎng)膜分離精制的可溶性抗原(s-antigen)30μg和結(jié)核桿菌(Mycobacterium tuberculosis H37 RA)100μg的Freund的完全佐劑乳化液的0.1ml注射到8周齡的雌性LEW大鼠的右后肢足掌皮內(nèi)，進(jìn)行免疫，經(jīng)時(shí)地觀察免疫后葡萄膜炎的發(fā)癥和重癥度。此外葡萄膜炎的重癥度的判斷，可用以下的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行。評(píng)分0無炎癥1輕度(虹膜的充血和在眼前房中出現(xiàn)滲出物)2中程度(小的眼前房蓄膿)3強(qiáng)度(顯著的眼前房蓄膿和眼球突出)另外，用s-antigen免疫后的第15日，摘除眼球制作組織切片，用蘇木精-曙紅染色后，用以下的標(biāo)準(zhǔn)研究其病理象。評(píng)分0無炎癥性細(xì)胞的浸潤(rùn)1很少的細(xì)胞浸潤(rùn)2輕度的細(xì)胞浸潤(rùn)3中程度的細(xì)胞浸潤(rùn)及視覺細(xì)胞層的部分破壞4顯著的細(xì)胞浸潤(rùn)及視覺細(xì)胞的完全破壞此外，被驗(yàn)化合物從免疫日起，連續(xù)15天經(jīng)口給藥。實(shí)驗(yàn)例11(對(duì)于全身性紅斑狼瘡自然發(fā)癥模型MRL/Ipr小鼠的延命效果)將被驗(yàn)化合物經(jīng)口給藥雄性MRL/Ipr小鼠。評(píng)價(jià)預(yù)防效果時(shí)，從8周齡至45周齡每日給藥；評(píng)價(jià)治療效果時(shí)，從16周齡至20周齡每日給藥。記錄給藥期間的生存率的同時(shí)，并經(jīng)時(shí)地采血及采尿，測(cè)定血漿中的抗核抗體值、風(fēng)濕因子及尿中的蛋白含量。實(shí)驗(yàn)例12(對(duì)于大鼠同種皮膚移植上的移植片存活的延長(zhǎng)效果)將4周令的雄性WKAH大鼠或者4周齡的雄性LEW大鼠的全層皮膚移植片(1.5×1.5cm)縫合在4周齡的雄性F344大鼠的背部移植床上，進(jìn)行移植，用無菌的紗布包扎好。移植后的第5日除去繃帶，每日進(jìn)行觀察直至移植片被排異為止。皮膚移植片的排異是通過移植片的上皮的90％以上產(chǎn)生壞死成為褐色時(shí)來判斷的。被驗(yàn)化合物從移植日起每日一次連續(xù)14日從腹腔內(nèi)、靜脈內(nèi)或者經(jīng)口給藥。
對(duì)于只是給與介質(zhì)的對(duì)照組，將WKAH大鼠的皮膚移植到F344大鼠時(shí)的平均存活天數(shù)是7.0±0.0日。將本發(fā)明的化合物(I-a)以1mg/kg及10mg/kg的用量經(jīng)口給藥時(shí)的結(jié)果如
圖1所示。此外，比較化合物1是指國(guó)際公開WO94/08943號(hào)公報(bào)所記載的2-氨基-2-(4-(4-苯基丁氧基)苯基)乙基)丙烷-1，3-二醇；比較化合物2是指國(guó)際公開WO96/06068號(hào)公報(bào)所記載的2-氨基-2-甲基-2-(2-4-(4-苯基丁氧基)苯基)丁醇。
如圖1所示，將WKAH大鼠的皮膚移植到F344大鼠時(shí)，給藥本發(fā)明化合物時(shí)的平均存活日是16.6±1.2日，另外，比較化合物1及比較化合物2的平均存活日分別是11.9±0.7日、15.6±1.4日。即，本發(fā)明化合物與對(duì)照組及比較化合物1給藥組比較，有著統(tǒng)計(jì)學(xué)上明顯的延長(zhǎng)移植片的存活日數(shù)。另外，對(duì)于比較化合物2顯示了同等的存活延長(zhǎng)效果。
另一方面，將LEW大鼠的皮膚移植到F344白鼠時(shí)的平均存活日數(shù)是8.2±0.4日，而本發(fā)明的化合物(I-a)給藥時(shí)的平均存活日數(shù)是20日以上、與只是投入介質(zhì)的對(duì)照組比較顯示了統(tǒng)計(jì)學(xué)上明顯的延長(zhǎng)存活效果。實(shí)驗(yàn)例13(大鼠同種皮膚移植中的體重變化)測(cè)定實(shí)驗(yàn)例12的大鼠同種皮膚移植試驗(yàn)中，從移植日開始，13日間反復(fù)經(jīng)口給藥被驗(yàn)化合物10mg/kg時(shí)的體重變化，其結(jié)果表示在圖2中。
如圖2所示，本發(fā)明化合物的給藥組，與對(duì)照組同樣地看到了自然體重增加，與此相反，對(duì)于比較化合物1及2給藥組發(fā)現(xiàn)了有抑制體重增加的作用。作為其原因，暗示了對(duì)于消化系統(tǒng)的障礙和攝食量的減少。因此，擔(dān)心隨著給藥量的加大或者長(zhǎng)期連續(xù)地給藥會(huì)帶來營(yíng)養(yǎng)攝取障礙進(jìn)而直至死亡的嚴(yán)重副作用。但是對(duì)于本發(fā)明化合物給藥組，與對(duì)照組同樣地看到了體重增加，所以判明了本發(fā)明化合物是沒有上述副作用的、毒性小、安全性高的免疫抑制劑。實(shí)驗(yàn)例14(大鼠同種心移植片的存活延長(zhǎng)效果)將10～14周齡的雄性WKAN大鼠的心臟通過血管吻合異位移植到10～14周齡的雄性ACI/N大鼠的頸部皮下。當(dāng)脈動(dòng)停止時(shí)，判定移植心臟是被排異了，求出存活日數(shù)。被驗(yàn)化合物，從移植日起14天內(nèi)反復(fù)經(jīng)口給藥。實(shí)驗(yàn)例15(狗同種腎移植時(shí)的移植片的存活延長(zhǎng)效果)以Mongrel狗作為供體、Beagle狗作為受體，進(jìn)行腎臟移植手術(shù)，研究移植腎臟的存活延長(zhǎng)效果。移植后，經(jīng)時(shí)地進(jìn)行采血，測(cè)定血清中的肌酸酐值及BUN(血中的尿素氮；blood urea nitrogen)值。實(shí)驗(yàn)例16(對(duì)于伴刀豆球蛋白A的刺激而誘發(fā)的大鼠脾細(xì)胞胚細(xì)胞樣轉(zhuǎn)化反應(yīng)的抑制效果)對(duì)于伴刀豆球蛋白A的刺激而誘發(fā)的大鼠脾細(xì)胞胚細(xì)胞樣轉(zhuǎn)化反應(yīng)的抑制效果的試驗(yàn)用以下的方法進(jìn)行。
從4～10周齡的雄性F344大鼠摘除脾臟。用剪刀切開摘除的脾臟，通過不銹鋼篩網(wǎng)過濾到添加了10％FCS的RPMI 1460培養(yǎng)基中，調(diào)制脾細(xì)胞的單細(xì)胞懸浮液。溶血處理后，使脾細(xì)胞通過尼龍羊毛柱回收非粘著性細(xì)胞?；厥盏哪猃埛钦持约?xì)胞(5×106個(gè)/ml)在含有5μg/ml的伴刀豆球蛋白A、5×10-5M的2-巰基乙醇及10％FCS的RPMI1460培養(yǎng)基中、37℃下、5％二氧化碳?xì)狻?5％空氣的條件下培養(yǎng)72小時(shí)。以18.5KBq/孔添加3H-胸苷，進(jìn)而培養(yǎng)4小時(shí)。用細(xì)胞回收器收集細(xì)胞，使用液體閃爍計(jì)數(shù)器測(cè)定進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的放射活性，作為脾細(xì)胞胚細(xì)胞樣轉(zhuǎn)化的指標(biāo)。
本發(fā)明的化合物對(duì)于伴刀豆球蛋白A的刺激而誘發(fā)的大鼠脾細(xì)胞胚細(xì)胞樣轉(zhuǎn)化反應(yīng)，顯示了大約1～50nM的IC50值(抑制50％的濃度)。
產(chǎn)業(yè)上的可利用性從上述的含有藥理實(shí)驗(yàn)及毒性試驗(yàn)很明顯地看出，本發(fā)明化合物(I)、其制藥上可容許的酸加成鹽或者這些水合物，顯示了沒有抑制體重增加的嚴(yán)重副作用、具有優(yōu)良的免疫抑制作用，所以，作為毒性小、安全性高的優(yōu)良免疫抑制劑是有效的。進(jìn)而，本發(fā)明的化合物(II)及化合物A可以作為免疫抑制劑有用化合物(I)的合成中間體是很有用的。
本申請(qǐng)是以平成9年專利申請(qǐng)第86255號(hào)為基礎(chǔ)的，其內(nèi)容均包括在本發(fā)明的說明書中。
權(quán)利要求
1.通式如下的2-氨基丙烷-1，3-二醇化合物，其制藥上可容許的酸加成鹽或其水合物， 其中m是0至9，R1a、R2a、R3a和R4a相同或不同，各自是氫或?；?，條件是m不是4。
2.權(quán)利要求1的化合物，其制藥上可容許的酸加成鹽或其水合物，其中該酰基選自1至20個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷?；?，苯基取代的2至20個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷?；减；檠趸糠钟?至20個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷氧基羰基，和芳烷氧基羰基。
3.權(quán)利要求1的化合物，其制藥上可容許的酸加成鹽或其水合物，其中a1a、R2a、R3a和R4a各自為氫。
4.權(quán)利要求1至3任-權(quán)利要求的化合物，其制藥上可容許的酸加成鹽或其水合物，其中m是5或6。
5.權(quán)利要求4的化合物，其制藥上可容許的酸加成鹽或其水合物，其是2-氨基-2-(2-(4-(1-氧代-6-苯基己基)苯基)乙基)丙烷-1，3-二醇。
6.權(quán)利要求4的化合物，其制藥上可容許的酸加成鹽或其水合物，其是2-氨基-2-(2-(4-(1-氧代-7-苯基庚基)苯基)乙基)丙烷-1，3-二醇。
7.一種免疫抑制劑，其活性組分是權(quán)利要求1-6任一項(xiàng)的2-氨基丙烷-1，3-二醇化合物，其制藥上可容許的酸加成鹽或其水合物。
8.一種藥物組合物，其含有權(quán)利要求1-6任一項(xiàng)的2-氨基丙烷-1，3-二醇，其制藥上可容許的酸加成鹽或水合物，和制藥上可容許的載體。
9.通式如下的2-氨基丙烷-1，3-二醇化合物，其酸加成鹽或其水合物， 其中m是0-9，R1a、R2a、R3a和R4a相同或不同，各自是氫或酰基，條件是m不是4。
10.權(quán)利要求9的化合物，其酸加成鹽或其水合物，其中酰基選自1至20個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷?；?，苯基取代的有2-20個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷?；?，芳?；?，烷氧基部分有1至20個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷氧基羰基，和芳烷氧基羰基。
11.權(quán)利要求9或10的化合物，其酸加成鹽或其水合物，其中m是5或6。12.2-氨基丙烷-1，3-二醇化合物，其選自2-乙酰氨基-1，3-雙(叔丁基二甲基甲硅氧基)-2-(2-(4-(1-羥基-6-苯基己基)苯基)乙基)丙烷，2-乙酰氨基-1，3-雙(叔丁基二甲基甲硅氧基)-2-(2-(4-(1-羥基-7-苯基庚基)苯基)乙基)丙烷，2-乙酰氨基-1，3-雙(叔丁基二甲基甲硅氧基)-2-(2-(4-(1-氧代-6-苯基己基)苯基)乙基)丙烷，和2-乙酰氨基-1，3-雙(叔丁基二甲基甲硅氧基)-2-(2-(4-(1-氧代-7-苯基庚基)苯基)乙基)丙烷。
全文摘要
本發(fā)明涉及用通式(I)表示的2－氨基丙烷－1，3－二醇化合物、其制藥上可容許的酸加成鹽或者它們的水合物，由含有該化合物的醫(yī)藥、含有該化合物和制藥上容許的載體的藥物組合物以及作為合成中間體有用的2－氨基－2－(2－(4－(1－羥基－5－苯基戊基)苯基)乙基)丙烷－1，3－二醇或者2－氨基－2－(2－(4－甲?；交?乙基)丙烷－1，3－二醇、其氨基和/或羥基被保護(hù)了的化合物或者它們的鹽。(式中，R
文檔編號(hào)C07F7/18GK1480450SQ0313689
公開日2004年3月10日 申請(qǐng)日期1998年4月3日 優(yōu)先權(quán)日1997年4月4日
發(fā)明者安達(dá)邦知, 花野篤志, 青木吉行, 手島浩慈, 星野幸夫, 藤多哲朗, 夫, 志, 慈, 朗, 行 申請(qǐng)人:三菱制藥株式會(huì)社