去氫駱駝蓬堿衍生物類化合物及其應用的制作方法

專利名稱：去氫駱駝蓬堿衍生物類化合物及其應用的制作方法
技術領域：
本發明屬于藥物化合物領域，更具體地說，是涉及通式(I)所示的去氫駱駝蓬堿衍生物類化合物，本發明還涉及該類化合物的應用。
背景技術：
去氫駱駝蓬堿(Harmine)是β-咔啉(β-carboline)類生物堿家族的一員，其化學名為7-甲氧基-1-甲基-9H-吡咯[3，4-b]吲哚，分子式為C13H12N2O，分子量212.25，熔點261℃，化學結構式如(II) 去氫駱駝蓬堿及其類似物廣泛分布于自然界。自首次分離到去氫駱駝蓬堿類化合物以來，人們已經從海洋生物、植物以及哺乳動物的體液和組織中分離到了多種去氫駱駝蓬堿類化合物；另外，自1928年Tatsui[G.Tatsui.，J.Pharm.Soc.，Japan 49(1929)，453]首次報道了去氫駱駝蓬堿類化合物1，2，3，4-四氫-β-咔啉的化學合成、1930年Spath等[Spath，Lederer.Ber.63B120(1930)]首次報道了去氫駱駝蓬堿的合成以來，人們開展了大量的去氫駱駝蓬堿類化合物的合成研究，據不完全統計，到目前為止，人們報道了約300個以上的去氫駱駝蓬堿類化合物，新的去氫駱駝蓬堿類化合物仍在不斷增加。
目前已經報道從生物體內分離到的具有代表性的β-咔啉類化合物主要有去氫駱駝蓬堿(Harmine)、駱駝蓬堿(Hamaline)、哈爾明(Harmane)、THBC、哈明醇(Harmalol)、諾哈明(Norharmane)等，它們的結構式如(III)所示。
氫駱駝蓬堿類化合物具有顯著的抗腫瘤活性，但也有明顯的中樞神經系統毒性。其體外抗腫瘤活性試驗結果表明，駱駝蓬堿類化合物對宮頸癌Hela、S-180體外培養細胞、肝癌BEL-7402、胃癌MGC-803、鼻咽癌CNE2、乳腺癌MA782’5S、白血病K562等多種體外培養的腫瘤細胞有明顯的抑制作用；體內抗腫瘤活性試驗結果顯示駱駝蓬總堿、駱駝蓬植物中提取的混合生物堿對小鼠S-180、網織細胞肉瘤L2、小鼠肝癌都有顯著的療效，與順鉑、阿霉素聯用有明顯協同作用；然而，駱駝蓬堿及其衍生物的毒性主要表現為神經系統毒性。急性毒性表現為神經系統先興奮(顫抖、豎尾、驚厥)、后抑制，最后死亡，未死亡的動物于給藥次日即可恢復正常。亞急性毒性試驗提示駱駝蓬總堿對造血系統、免疫系統、生殖系統并無明顯毒性，長期毒副作用也并不顯著，其毒性靶器官是腎臟。
目前的去氫駱駝蓬堿及其類似物雖然有明確的抗腫瘤活性，但也有明確的神經系統毒副作用，還不存在一種既有高的抗腫瘤活性，神經系統毒性又低的化合物可用于臨床上作為抗癌藥物。

發明內容
本發明的目的在于提供一類具有增強抗腫瘤活性并降低神經系統毒性而且制備方法簡單、得率高的去氫駱駝蓬堿衍生物類化合物；本發明的另一目的在于提供上述化合物在制備抗腫瘤藥物中的應用。
本發明的去氫駱駝蓬堿衍生物類化合物具有以下通式(I)結構 其中，R1是氫、C1-6的烷基或C6-10的芳烷基或取代芳烷基；R2是氫或C1-6的烷氧基羰基；R3是氫、羥基或C1-6的烷氧基；R4是氫、C1-6的烷基、C1-6的羥基烷基或C6-10的芳烷基或取代芳烷基；且R1、R2、R3、R4不同時是氫；當R2、R4為氫時，R1不為甲基且R3不為甲氧基；當R1為甲基時，R2、R3、R4不同時都為氫；當R1為甲基、R2為氫、R3為甲氧基時，R4不為甲基、乙基或丁基；當R1、R3為氫時，R2不為甲氧基羰基且R4不為甲基。
上述通式(I)化合物，優選R1是氫、C1-4的烷基或C6-8的芳烷基；進一步優選為R1是氫或C1-2的烷基；最優選R1是氫。
上述通式(I)化合物，優選R2是氫或C1-4的烷氧基羰基；進一步優選R2是氫或C1-2的烷氧基羰基；最優選R2是乙氧基羰基。
上述通式(I)化合物，優選R3是氫、羥基或C1-4的烷氧基；最優選R3是氫。
上述通式(I)化合物，優選R4是氫、C1-4的烷基、C1-4的羥基烷基或C6-8的芳烷基或取代芳烷基；進一步優選R4是氫、C1-2的烷基、C1-2的羥基烷基或C6-8的芳烷基或取代芳烷基；比較優選R4是乙基或卞基；最優選R4是卞基。
上述通式(I)化合物，當優選R1為氫、C1-4的烷基或C6-8芳烷基時；R2優選為氫或C1-4的烷氧基羰基；R3優選為氫、羥基或C1-4的烷氧基；R4優選為氫或C1-2的烷基、C1-2的羥基烷基、C6-8的芳烷基或取代芳烷基。
上述通式(I)化合物，當R1進一步選為氫時；R2進一步選為C1-2的烷氧基羰基；R3進一步選為氫；R4進一步選為C1-2的烷基或C6-8的芳香烷基。
上述通式(I)化合物，當R1取最優選為氫時；R2最優選為乙氧基羰基；R3最優選為氫；R4比較優選為乙基或卞基，最優選為卞基。
上述所列的通式(I)化合物的制備方法，可以直接從去氫駱駝蓬堿出發，對其7、9兩個位點分別進行結構修飾或組合進行結構修飾，合成目的化合物，如圖一所示；或者是從色氨酸及其衍生物出發，在合成過程中或在合成出去氫駱駝蓬堿的類似物后，對其1、3、9等位點分別進行結構修飾或組合進行結構修飾，合成目的化合物，如圖二所示。
本發明的通式化合物，經過體外抗腫瘤活性試驗以及體內抗腫瘤藥理藥效的研究，顯示出強的抗腫瘤活性及低神經系統毒性，并且制備方法簡便，收率高。本發明的化合物可應用于制備治療腫瘤藥物。


圖1是對去氫駱駝蓬堿7、9位結構修飾的合成路線；圖2是從色氨酸出發合成去氫駱駝蓬堿類似物的路線。
具體實施例方式
實施例一1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸的制備方法在100ml的圓底燒瓶中加入L-色氨酸(10.2g，0.05mol)，NaOH(2.0g，0.05mol)，和H2O(20ml)。攪拌至溶液澄清，然后加入甲醛(37％；5.5ml，0.06mol)，混合物室溫攪拌反應4h，加熱回流反應3h；將混合物倒入20ml冰水中，攪拌下用5NHCl調節pH至5左右，即析出白色固體，冰箱4℃放置過夜，過濾，水洗，少量甲醇洗，干燥，得白色固體9.2g，收率85％。mp.304-305℃。MSm/e(M+1)217；IR(KBr，cm-1)3100，1628.
實施例二1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸甲酯(H-03-01)的制備方法在500ml的圓底燒瓶中加入1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸(92g，12mol)，甲醇250ml，混合物用冰水冷卻，攪拌下通入干燥的氯化氫氣體直至溶液透明，室溫攪拌20min，加熱回流2h，減壓蒸除甲醇，固體過濾，丙酮洗滌，得灰白色固體。將上述固體溶于100ml冷水，飽和碳酸氫鈉溶液調節pH至9，乙酸乙酯萃取(3×300ml)，合并乙酸乙酯萃取液，水洗，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮，乙酸乙酯重結晶得白色固體5.6g，收率57％。mp.191-193℃；MSm/e(M+1)231；IR(KBr，cm-1)3100，1628.
實施例三β-咔啉-3-羧酸甲酯(H-03-03)的制備方法在100ml的圓底燒瓶中加入1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸甲酯(2.3g，10mmol)、冰乙酸(40ml)，混合物冷卻至5℃左右，攪拌下加入Pb(OAc)4(8.9g，20mmol)，5℃反應30min，室溫攪拌反應3hr，然后將混合物倒入100ml冰水中，用飽和碳酸氫鈉溶液調節pH至8，乙酸乙酯萃取(3×300ml)，合并乙酸乙酯萃取液，水洗，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮，得淡黃色固體，丙酮重結晶，得白色固體1.8g，收率80％。mp.258-260℃。MSm/e(M+1)227；IR(KBr，cm- 1)3100，1628實施例四9-甲基-β-咔啉-3-羧酸甲酯(H-03-05)的制備方法在100ml圓底燒瓶中分別加入實施例三的β-咔啉-3-羧酸甲酯(2.26g，10mmol)，20ml二甲基甲酰胺，50ml四氫呋喃，室溫攪拌至溶液澄清，然后加入0.72g(30mmol)NaH，攪拌至無氣泡產生，滴加3.5ml CH3I，室溫攪拌1h。減壓蒸除四氫呋喃，剩余物倒入100ml冰水，乙酸乙酯萃取(150ml×3)，合并乙酸乙酯萃取液，水洗(100ml×2)，飽和鹽水洗(50ml)，無水Na2SO4干燥，過濾，減壓濃縮至干，10ml無水乙醇溶解，加1ml濃HCl，減壓濃縮至干，丙酮重結晶，得灰白色固體2.2g，收率79％。
mp.212-214℃。
MSm/e(M+1)241IR(KBr，cm-1)1730，16311H-NMR(CDCl3)δ8.94(s，1H，Ar-H)，8.88(s，1H，Ar-H)，8.20-8.21(d，1H，J＝7.5Hz，Ar-H)，7.657.68(t，1H，J＝7.5Hz，Ar-H)，7.50-7.52(d，1H，J＝8Hz，Ar-H)，7.36-7.39(t，1H，J＝8Hz，Ar-H)，4.06(s，3H，CH3O)，4.00(s，3H，CH3-N)實施例五9-乙基-β-咔啉-3-羧酸甲酯(H-03-06)的制備方法在100ml圓底燒瓶中分別加入實施例三的β-咔啉-3-羧酸甲酯(2.26g，10mmol)，20ml二甲基甲酰胺，30ml四氫呋喃，室溫攪拌至溶液澄清，然后加入0.72g(30mmol)NaH，攪拌至無氣泡產生，滴加4ml CH3CH2I，室溫攪拌反應3h，減壓蒸除四氫呋喃，剩余物倒入150ml冰水，乙酸乙酯萃取(150ml×3)，合并乙酸乙酯萃取液，水洗(100ml×2)，飽和鹽水洗(100ml)，無水Na2SO4干燥，過濾，減壓濃縮至干，50ml無水乙醇溶解，加5ml濃HCl，減壓濃縮至干，丙酮重結晶，得灰白色固體2.2g，收率69％。
mp205-207℃。
MSm/e(M+1)255IR(KBr，cm-1)1724，16321H-NMR(CDCl3)δ8.90-9.00(m，2H，Ar-H)，8.21-8.23(d，1H，J＝8Hz，Ar-H)，7.65-7.68(t，1H，J＝7.5Hz，Ar-H)，7.52-7.54(d，1H，J＝8Hz，Ar-H)，7.36-7.39(t，1H，J＝7Hz，Ar-H)，4.51(s，2H，-CH2-)4.07(s，3H，CH3O-)，1.52(s，3H，CH3-)實施例六9-丁基-β-咔啉-3-羧酸甲酯的制備方法在100ml圓底燒瓶中分別加入實施例三的β-咔啉-3-羧酸甲酯(2.26g，10mmol)，20ml二甲基甲酰胺，50ml四氫呋喃，室溫攪拌至溶液澄清，然后加入0.72g(30mmol)NaH，攪拌至無氣泡產生，滴加5ml n-C4H9I(1-碘代正丁烷)，然后攪拌加熱回流5h。反應完畢，減壓蒸除四氫呋喃，剩余物倒入150ml冰水，乙酸乙酯萃取(150ml×3)，合并乙酸乙酯萃取液，水洗(100ml×2)，飽和鹽水洗(100ml)，無水Na2SO4干燥，過濾，減壓濃縮至干，10ml無水乙醇溶解，加5ml濃HCl，減壓濃縮至干，丙酮重結晶，得灰白色固體2.4g，收率75％。
mp.194-195℃。
MSm/e(M+1)283IR(KBr，cm-1)1727，1629實施例七9-苯甲基-β-咔啉-3-羧酸甲酯的制備方法在100ml圓底燒瓶中分別加入實施例三的β-咔啉-3-羧酸甲酯(2.26g，10mmol)，20ml二甲基甲酰胺，50ml四氫呋喃，室溫攪拌至溶液澄清，然后加入0.72g(30mmol)NaH，攪拌至無氣泡產生，滴加15ml C6H5CH2I(1-碘代甲基苯)，然后攪拌加熱回流8h。反應完畢，減壓蒸除四氫呋喃，加入200ml 2N鹽酸水溶液，甲苯萃取(100ml×2)。水相用飽和NaHCO3溶液中和(pH8)，然后乙酸乙酯萃取(300ml×3)，合并乙酸乙酯萃取液，水洗(200ml×2)，飽和鹽水洗(200ml×2)，無水Na2SO4干燥，過濾，減壓濃縮至干，100ml無水乙醇溶解，加5ml濃HCl，減壓濃縮至干，丙酮重結晶，得灰白色固體2.6g，收率74％。
mp.196-198℃。
MSm/e(M+1)317IR(KBr，cm-1)1725，1626實施例八β-咔啉-3-羧酸的(H-03-04)制備方法在50ml的圓底燒瓶中加入實施例三的β-咔啉-3-羧酸甲酯(1.13g，5mmol)、氫氧化鈉(0.8g，20mmol)、乙醇(10ml)，H2O(20ml)，混合物加熱回流1h，然后減壓蒸除乙醇，混合物用5N HCl調節pH至5，過濾，水洗，甲醇洗，無水乙醇重結晶，得白色固體0.96g，收率90％。
mp307-309℃。
MSm/e(M+1)213IR(KBr，cm-1)3100，1625實施例九1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸乙酯的制備方法在500ml的圓底燒瓶中加入實施例一的1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸(105g)，乙醇300ml，混合物用冰水冷卻，攪拌下通入干燥的氯化氫氣體直至溶液透明，室溫攪拌20min，加熱回流2h，減壓蒸除乙醇，得白色固體。將上述固體溶于300ml冷水，加乙酸乙酯300ml，飽和碳酸氫鈉溶液調節水相pH至9，分出乙酸乙酯層，水相乙酸乙酯萃取(300ml×2)，合并乙酸乙酯萃取液，水洗，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮至約150ml，冷至室溫后，放入冰箱重結晶，過濾，少量乙醚洗，得白色固體7.5g，收率63％。
mp.149-150℃。
MSm/e(M+1)245IR(KBr，cm-1)1719，1626實施例十β-咔啉-3-羧酸乙酯(H-03-08)的制備方法在250ml的圓底燒瓶中加入1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸乙酯(4.8g，20mmol)、冰乙酸(80ml)，混合物冷卻至5℃左右，攪拌下加入Pb(OAc)4(17.8g，40mmol)，5℃反應1h，室溫攪拌反應3h，然后將混合物倒入100ml冰水中，用飽和碳酸氫鈉溶液調節pH至8，乙酸乙酯萃取(3×500ml)，合并乙酸乙酯萃取液，水洗，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮至約150ml，冷卻至室溫后，放入冰箱重結晶，過濾，得白色固體4.1g，收率85％。
mp.228-230℃。
MSm/e(M+1)241IR(KBr，cm-1)1719，1620實施例十一9-甲基-β-咔啉-3-羧酸乙酯的制備方法在100ml圓底燒瓶中分別加入實施例十的β-咔啉-3-羧酸乙酯(2.4g，10mmol)，20ml二甲基甲酰胺，50ml四氫呋喃，室溫攪拌至溶液澄清，然后加入0.72g(30mmol)NaH，攪拌至無氣泡產生，滴加3.5ml CH3I，室溫攪拌1h。減壓蒸除四氫呋喃，剩余物倒入100ml冰水，乙酸乙酯萃取(150ml×3)，合并乙酸乙酯萃取液，水洗(100ml×2)，飽和鹽水洗(50ml)，無水Na2SO4干燥，過濾，減壓濃縮至干，10ml無水乙醇溶解，加1ml濃HCl，減壓濃縮至干，丙酮重結晶，得白色固體2.2g，收率76％。
mp.228-230℃。
MSm/e(M+1)255IR(KBr，cm-1)1723，16221H-NMR(CDCl3)δ8.94(s，1H，ArH)，8.86(s，1H，Ar-H)，8.19-8.20(d，1H，J＝7.5Hz，Ar-H)，7.63-7.66(t，1H，J＝7Hz，Ar-H)，7.49-7.51(d，1H J＝10.5Hz，Ar-H)，7.35-7.37(t，1H，J＝7Hz，Ar-H)，4.52-4.56(m，2H，-CH2-)，3.98(s，3H，CH3-N)，1.48-1.51(t，3H，J＝7Hz)實施例十二9-乙基-β-咔啉-3-羧酸乙酯(H-03-09)的制備方法在100ml圓底燒瓶中分別加入實施例十的β-咔啉-3-羧酸乙酯(2.4g，10mmol)，20ml二甲基甲酰胺，50ml四氫呋喃，室溫攪拌至溶液澄清，然后加入0.72g(30mmol)NaH，攪拌至無氣泡產生，滴加5ml CH3CH2I，室溫攪拌3hr。TLC檢查，減壓蒸除四氫呋喃，剩余物倒入100ml冰水，乙酸乙酯萃取(150ml×3)，合并乙酸乙酯萃取液，水洗(100ml×2)，飽和鹽水洗(50ml)，無水Na2SO4干燥，過濾，減壓濃縮至干，10ml無水乙醇溶解，加5ml濃HCl，減壓濃縮至干，丙酮重結晶，得白色固體2.0g，收率65％。
mp.186-187℃。
MSm/e(M+1)269IR(cm-1)1724，16321H-NMR(CDCl3)δ8.93(s，1H，Ar-H))，8.86(s，1H，Ar-H)，8.18-8.20(d，1H，J＝8Hz，Ar-H)，7.62-7.64(t，1H，J＝7.5Hz，Ar-H)，7.48-7.50(d，1H，J＝8Hz，Ar-H)，7.33-7.36(t，1H，J＝7.5Hz，Ar-H)，4.42-4.56(m，4H，-CH2-)，1.46-1.52(m，6H，CH3-)實施例十三9-丁基-β-咔啉-3-羧酸乙酯的制備方法在100ml圓底燒瓶中分別加入實施例十的β-咔啉-3-羧酸乙酯(2.4g，10mmol)，20ml二甲基甲酰胺，50ml四氫呋喃，室溫攪拌至溶液澄清，然后加入0.72g(30mmol)NaH，攪拌至無氣泡產生，滴加6ml CH3CH2I，加熱回流4h。TLC檢查，減壓蒸除四氫呋喃，剩余物倒入150ml冰水，乙酸乙酯萃取(150ml×3)，合并乙酸乙酯萃取液，水洗(100ml×2)，飽和鹽水洗(100ml)，無水Na2SO4干燥，過濾，減壓濃縮至干，30ml無水乙醇溶解，加5ml濃HCl，減壓濃縮至干，丙酮重結晶，得白色固體2.6g，收率78％。
mp.228-230℃。
MSm/e(M+1)297IR(KBr，cm-1)1725，1629實施例十四9-苯甲基-β-咔啉-3-羧酸乙酯(H-03-07)的制備方法在100ml圓底燒瓶中分別加入實施例十的β-咔啉-3-羧酸乙酯(1.2g，5mmol)，10ml二甲基甲酰胺，30ml四氫呋喃，室溫攪拌至溶液澄清，然后加入0.36g(30mmol)NaH，攪拌至無氣泡產生，加8ml C6H5CH2I，加熱回流8h。TLC檢查，減壓蒸除四氫呋喃，剩余物中加入2N鹽酸150ml，甲苯萃取，甲苯層用50ml 2N鹽酸洗滌，合并水相，甲苯萃取，水相用碳酸氫鈉調pH至9，乙酸乙酯萃取(150ml×3)，合并乙酸乙酯萃取液，水洗(100ml×2)，飽和鹽水洗(100ml)，無水Na2SO4干燥，過濾，減壓濃縮至干，丙酮重結晶，得白色固體1.2g，收率66％。
mp.186-188℃。
MSm/e(M+1)331IR(KBr，cm-1)1723.16211H-NMR(CDCl3)δ8.91(s，2H，Ar-H)，8.23-8.25(d，1H，J＝8Hz，Ar-H)，7.59-7.62(m，1H，Ar-H)，7.49-7.50(d，1H，J＝8Hz，Ar-H)，7.36-7.39(m，1H，Ar-H)，7.25-7.27(m，3H，Ar-H)，7.14-7.16(m，2H，Ar-H)，5.62(S，2H，Ar-H)，4.51-4.55(m，2H，-CH2-)，1.47-1.50(t，3H，J＝7Hz)實施例十五7-甲氧基-1，9-二甲基-吡咯[3，4-b]吲哚鹽酸鹽(H-09-05)的制備方法在250ml圓底燒瓶中分別加入2.1g(10mmol)駱駝蓬堿，30ml二甲基甲酰胺，50ml四氫呋喃，室溫攪拌至溶液澄清，然后加入0.72g(30mmol)NaH，攪拌至無氣泡產生，滴加3.5ml CH3I(碘甲烷)，室溫攪拌反應2h。減壓蒸除四氫呋喃，剩余物倒入100ml冰水，乙酸乙酯萃取(150ml×3)，合并乙酸乙酯萃取液，水洗(300ml×2)，飽和鹽水洗(300ml×2)，無水Na2SO4干燥，過濾，減壓濃縮至干，乙醚重結晶，得白色針狀晶體1.8g，收率80％。取白色固體1.0g，用30ml無水乙醇溶解，加5ml濃HCl，減壓濃縮至干，丙酮重結晶，得灰白色固體，為產品的鹽酸鹽。
mp.121-123℃。
MSm/e(M+1)226IR(KBr，cm-1)1628實施例十六7-甲氧基-1-甲基-9-乙基-吡咯[3，4-b]吲哚鹽酸鹽(H-09-01)的制備方法在250ml圓底燒瓶中分別加入2.1g(10mmol)去氫駱駝蓬堿，30ml二甲基甲酰胺，50ml四氫呋喃，室溫攪拌至溶液澄清，然后加入0.72g(30mol)NaH，攪拌至無氣泡產生，滴加4ml CH3CH2I(碘乙烷)，室溫攪拌反應4h。減壓蒸除四氫呋喃，剩余物倒入100ml冰水，乙酸乙酯萃取(150ml×3)，合并乙酸乙酯萃取液，水洗(300ml×2)，飽和鹽水洗(300ml×2)，無水Na2SO4干燥，過濾，減壓濃縮至干，乙醚重結晶，得白色針狀固體2.0g，收率83％。取固體1.0g，30ml無水乙醇溶解，加5ml濃HCl，減壓濃縮至干，丙酮重結晶，得灰白色針狀晶體，為產品鹽酸鹽。
mp.97-101℃。
MSm/e(M+1)241
IR(KBr，cm-1)16221H-NMR(CDCl3)δ6.86-8.27(5H，m，Ar-H)，4.53-4.57(2H，m，J＝7.5Hz，-CH2-)，3.95(3H，s，CH3O-)，3.05(3H，s，CH3-)，1.43-1.46(3H，t，J＝2.5Hz，CH3[CH2]-)實施例十七7-甲氧基-1-甲基-9-丁基-吡咯[3，4-b]吲哚鹽酸鹽(H-09-02)的制備方法在250ml圓底燒瓶中分別加入2.1g(10mmol)去氫駱駝蓬堿，30ml二甲基甲酰胺，50ml四氫呋喃，室溫攪拌至溶液澄清，然后加入0.72g(30mol)NaH，攪拌至無氣泡產生，滴加5ml n-C4H9I(1-碘代正丁烷)，加熱攪拌反應5hr。減壓蒸除四氫呋喃，剩余物倒入100ml冰水，乙酸乙酯萃取(150ml×3)，合并乙酸乙酯萃取液，水洗(300ml×2)，飽和鹽水洗(300ml×2)，無水Na2SO4干燥，過濾，減壓濃縮，乙酸乙酯重結晶，過濾，得白色固體2.1g，收率78％。取固體1.0g，30ml無水乙醇溶解，加5ml濃HCl，減壓濃縮至干，丙酮重結晶，得灰白色針狀晶體，為產品鹽酸鹽。
mp.104-105℃。
MSm/e(M+1)269IR(KBr，cm-1)16211H-NMR(CDCl3)δ0.97-1.00(t，3H，J＝7.5Hz，CH3-[CH2]-)，1.41-1.48(m，2H，-CH2-)，1.78-1.84(m，2H，-CH2-)，3.01(s，3H，CH3-Ar)，3.94(s，3H，CH3O-)，4.43-4.46(t，2H，J＝8Hz，-CH2-)，6.85-6.88(m，2H，Ar-H)，7.71-7.72(d，1H，J＝5Hz，Ar-H)，7.95-7.97(d，1H，J＝9Hz，Ar-H)，8.26-8.28(d，1H，J＝5.5Hz，Ar-H)實施例十八7-甲氧基-1-甲基-9-羥乙基-吡咯[3，4-b]吲哚鹽酸鹽(H-09-04)的制備方法在250ml圓底燒瓶中分別加入1.05g(5mmol)去氫駱駝蓬堿，15ml二甲基甲酰胺，25ml四氫呋喃，室溫攪拌至溶液澄清，然后加入0.72g(30mol)NaH，攪拌至無氣泡產生，滴加3ml HOCH2CH2I(2-碘乙醇)，加熱回流10h。減壓蒸除四氫呋喃，剩余物倒入100ml冰水，乙酸乙酯萃取(100ml×3)，合并乙酸乙酯萃取液，水洗(100ml×2)，飽和鹽水洗(100ml×2)，無水Na2SO4干燥，過濾，減壓濃縮至干，乙醇重結晶，得白色固體0.8g，收率62％。取固體0.5g，15ml無水乙醇溶解，加3ml濃HCl，減壓濃縮至干，丙酮重結晶，得灰色晶體，為產品鹽酸鹽。
mp.204-206℃。
MSm/e(M+1)257IR(KBr，cm-1)3294，16291H-NMR(CDCl3)δ8.15-8.16(d，1H，J＝4Hz，Ar-H)，7.93-7.94(d，1H，J＝3.5Hz，Ar-H)，7.63-7.64(d，1H，J＝5Hz，Ar-H)，6.88-6.95(m，2H，Ar-H)，4.66-4.71(t，2H，J＝5.5Hz，-CH2-)，4.06-4.08(t，2H，J＝4.5Hz，-CH2-)，3.94(s，3H，CH3O-)，2.99(s，3H，CH3-Ar)實施例十九7-甲氧基-1-甲基-9-苯甲基-吡咯[3，4-b]吲哚鹽酸鹽(H-09-03)的制備方法在250ml圓底燒瓶中，分別加入去氫駱駝蓬堿(2.1g，10mmol)，二甲基甲酰胺(50ml)，四氫呋喃(50ml)，室溫攪拌至溶液澄清，然后加入0.72g(30mol)NaH，攪拌至無氣泡產生，滴加8ml C6H5CH2I(碘代甲基苯)，加熱回流18h。減壓蒸除四氫呋喃，剩余物倒入100ml冰水，濃HCl調節pH3，乙醚萃取(100ml×2)。水相用飽和NaHCO3溶液中和(pH8)，然后乙酸乙酯萃取，合并乙酸乙酯萃取液，水洗(200ml×2)，飽和鹽水洗(200ml×2)，無水Na2SO4干燥，過濾，減壓濃縮至干，乙酸乙酯重結晶，得白色固體2.6g，收率86％。取白色固體1.0g，用30ml無水乙醇溶解，加5ml濃HCl，減壓濃縮至干，丙酮重結晶，得灰白色固體，為產品的鹽酸鹽。
mp.131-133℃。
MSm/e(M+1)303IR(KBr，cm-1)16201H-NMR(CDCl3)δ6.76-8.30(m，10H，Ar-H)，5.75(s，2H，-CH2-)，3.85(s，3H，CH3O-)，2.88(s，3H，CH3)實施例二十1-甲基-1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸的合成在250ml的圓底燒瓶中分別加入色氨酸(5.10g，25mmol)、0.005N H2SO430ml、40％乙醛9ml，室溫攪拌反應24h，然后加濃氨水10ml，加熱回流1h，冷卻，5N鹽酸調pH至6，冰箱4℃放置4h，過濾，水洗，干燥，得白色固體4.0g，收率69％。mp.255-257℃。MSm/e(M+1)231；IR(KBr，cm-1)3150，1628.
實施例二十一1-甲基-1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸乙酯(H-03-02)的合成
將1-甲基-1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸(4.0g，17mmol)、無水乙醇150ml加入250ml圓底燒瓶中，小心加入重蒸二氯亞砜4ml，加熱回流3h，然后減壓蒸除乙醇，得白色固體。加水100ml使白色固體溶解，無水碳酸氫鈉飽和溶液調pH至9，乙酸乙酯萃取(200ml×3)，合并萃取液，水洗，飽和鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮，乙酸乙酯重結晶，得白色固體3.2g，收率71％。mp.223-225℃。MSm/e(M+1)259；IR(KBr，cm-1)1718，1627.
實施例二十二1-甲基-β-咔啉-3-羧酸乙酯的合成在100ml圓底燒瓶中分別加入1-乙基-1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸乙酯(3.2g，12mmol)、硫(1.0g，31mmol)、二甲苯50ml，加熱回流24hr，冷卻至室溫，加入2N的稀鹽酸100ml，充分攪拌，分出水層，有機層用30ml 2N的稀鹽酸洗，合并水相，甲苯萃取(100ml×2)，水相用飽和碳酸氫鈉溶液調pH至9，乙酸乙酯萃取(200ml×3)，合并萃取液，水洗，飽和鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮，乙酸乙酯重結晶，得白色固體1.5g，收率48％。mp.214-216℃。MSm/e(M+1)254；IR(KBr，cm-1)1722，1623.
實施例二十三1-丙基-1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸的合成在250ml的圓底燒瓶中分別加入色氨酸(5.10g，25mmol)、0.005N H2SO430ml、正丁醛ml，室溫攪拌反應24hr，過濾，水洗，干燥，得白色固體3.75g，收率58％。mp.248-251℃。MSm/e(M+1)259；IR(KBr，cm-1)3100，1615.
實施例二十四1-丙基-1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸乙酯的合成將1-丙基-1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸(3.75g，14mmol)、無水乙醇150ml加入250ml圓底燒瓶中，小心加入重蒸二氯亞砜4ml，加熱回流3hr，然后減壓蒸除乙醇，得白色固體。加水100ml使白色固體溶解，無水碳酸氫鈉飽和溶液調pH至9，乙酸乙酯萃取(200ml×3)，合并萃取液，水洗，飽和鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮，乙酸乙酯重結晶，得白色固體3.5g，收率84％。mp.231-233℃。MSm/e(M/+1)287；IR(KBr，cm-1)1726，1630.
實施例二十五1-丙基-β-咔啉-3-羧酸乙酯的合成在100ml圓底燒瓶中分別加入1-丙基-1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸乙酯(3.5g，12mmol)、硫(0.8g，30mmol)、二甲苯80ml，加熱回流24hr，冷卻至室溫，加入2N的稀鹽酸200ml，充分攪拌，分出水層，有機層用50ml 2N的稀鹽酸洗，合并水相，甲苯萃取(100ml×2)，水相用飽和碳酸氫鈉溶液調pH至9，乙酸乙酯萃取(200ml×3)，合并萃取液，水洗，飽和鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮，乙酸乙酯重結晶，得白色固體2.0g，收率58％。mp.193-194℃。MSm/e(M+1)283；IR(KBr，cm-1)1719，1625.
實施例二十六1-苯基-1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸的制備在250ml的圓底燒瓶中分別加入L-色氨酸(5.1g，25mmol)、苯甲醛(3.5ml)、1N H2SO4(30ml)、H2O(70ml)和乙醇(30ml)，加熱回流5hr，然后加濃氨水(40ml)，繼續回流30min，減壓蒸除乙醇，剩余液冷卻，乙醚萃取(100ml×2)，水相濃縮至50ml，5N HCl中和(pH 5)，析出白色固體，過濾，水洗，干燥得白色固體7.2g，收率98％。mp.304-305℃。MSm/e(M+1)217；IR(KBr，cm-1)3100，1628.
實施例二十七1-苯基-1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸甲酯的合成在500ml的圓底燒瓶中分別加入1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸(7.2g，25mmol)、甲醇(200ml)，混合物用冰水冷卻，攪拌下通入干燥的氯化氫氣體直至溶液透明，室溫攪拌20min，加熱回流2hr，減壓蒸除甲醇，固體過濾，丙酮洗滌，得灰白色固體。將上述固體溶于100ml冷水，飽和碳酸氫鈉溶液調節pH至9，即析出灰白色固體，過濾，水洗，干燥，乙酸乙酯重結晶得白色固體7.2g，收率95％。mp.263-265℃。MSm/e(M+1)307；IR(KBr，cm-1)1726，1617.
實施例二十八1-苯基-β-咔啉-3-羧酸甲酯(H-01-01)的合成在100ml的圓底燒瓶中加入β-咔啉-3-羧酸甲酯(3.07g，10mmol)、冰乙酸(40ml)，混合物冷卻至5℃左右，攪拌下加入Pb(OAc)4(8.9g，20mmol)，5℃反應30min，室溫攪拌反應12hr，然后將混合物倒入100ml冰水中，用飽和碳酸氫鈉溶液調節pH至8，乙酸乙酯萃取(3×300ml)，合并乙酸乙酯萃取液，水洗，加入濃鹽酸調節pH至3，減壓蒸除乙酸乙酯，剩余物水(100ml)溶解，飽和碳酸氫鈉溶液調節pH至9，即析出白色固體，冷卻，過濾，水洗，干燥，得灰白色固體2.1g，收率69％。mp.257-258℃。MSm/e(M+1)303；IR(KBr，cm-1)1722，16231H-NMR(CDC3)δ8.91(s，1H，Ar-H)，8.86(s，1H，Ar-H)，8.20-8.21(d，1H，J＝8Hz，Ar-H)，7.90-7.91(m，2H，Ar-H)，7.58-7.60(m，2H，Ar-H)，7.54-7.57(m，2H，Ar-H)，7.41-7.44(m，1H，Ar-H)，7.35-7.37(m，1H，Ar-H)，4.04(s，3H，CH3O-)
實施例二十九1-(4-甲氧基苯基)-1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸的制備在250ml的圓底燒瓶中分別加入L-色氨酸(5.1g，25mmol)、4-甲氧基苯甲醛(4.6ml)、1N H2SO4(30ml)、H2O(70ml)和乙醇(30ml)，加熱回流12hr，然后加濃氨水(40ml)，繼續回流30min，減壓蒸除乙醇，剩余液冷卻，乙醚萃取(100ml×2)，水相濃縮至50ml，5N HCl中和(pH5)，析出白色固體，過濾，水洗，干燥得白色固體6.6g，收率82％。mp.258-261℃。MSm/e(M+1)323；IR(KBr，cm-1)3100，1628.
實施例三十1-(4-甲氧基苯基)-1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸甲酯的合成在500ml的圓底燒瓶中分別加入1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸甲酯(6.46g，20mmol)、甲醇(200ml)，混合物用冰水冷卻，攪拌下通入干燥的氯化氫氣體直至溶液透明，室溫攪拌20min，加熱回流2hr，減壓蒸除甲醇，固體過濾，丙酮洗滌，得灰白色固體。將上述固體溶于100ml冷水，飽和碳酸氫鈉溶液調節pH至9，即析出灰白色固體，過濾，水洗，干燥，乙酸乙酯重結晶得白色固體6.2g，收率90％。mp.237-238℃。MSm/e(M+1)337；IR(KBr，cm-1)1720，1615.
實施例三十一1-(4-甲氧基苯基)-β-咔啉-3-羧酸甲酯(H-01-03)的合成在100ml的圓底燒瓶中加入β-咔啉-3-羧酸甲酯(3.36g，10mmol)、冰乙酸(40ml)，混合物冷卻至5℃左右，攪拌下加入Pb(OAc)4(8.9g，20mmol)，5℃反應30min，室溫攪拌反應12hr，然后將混合物倒入100ml冰水中，用飽和碳酸氫鈉溶液調節pH至8，乙酸乙酯萃取(3×300ml)，合并乙酸乙酯萃取液，水洗，加入濃鹽酸調節pH至3，減壓蒸除乙酸乙酯，剩余物水(100ml)溶解，飽和碳酸氫鈉溶液調節pH至9，即析出白色固體，冷卻，過濾，水洗，干燥，得灰白色固體2.1g，收率63％。mp.229-230℃。MSm/e(M+1)333；IR(KBr，cm-1)1714，1611.
實施例三十二1-(4-硝基苯基)-1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸的制備在250ml的圓底燒瓶中分別加入L-色氨酸(5.1g，25mmol)、4-硝基苯甲醛(3.5ml)、1N H2SO4(30ml)、H2O(70ml)和乙醇(30ml)，加熱回流12hr，然后加濃氨水(40ml)，繼續回流30min，減壓蒸除乙醇，剩余液冷卻，乙醚萃取(100ml×2)，水相濃縮至50ml，5N HCl中和(pH5)，析出黃色固體，過濾，水洗，干燥得黃色固體7.5g，收率89％。mp.262-264℃。MSm/e(M+1)338；
實施例三十三1-(4-硝基苯基)-1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸甲酯的合成在500ml的圓底燒瓶中分別加入1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸甲酯(7.5g，20mmol)、甲醇(200ml)，混合物用冰水冷卻，攪拌下通入干燥的氯化氫氣體直至溶液透明，室溫攪拌20min，加熱回流2hr，減壓蒸除甲醇，固體過濾，丙酮洗滌，得灰白色固體。將上述固體溶于100ml冷水，飽和碳酸氫鈉溶液調節pH至9，即析出黃色固體，過濾，水洗，干燥，乙酸乙酯重結晶得黃色固體4.2g，收率54％。mp.243-245℃。MSm/e(M+1)352；實施例三十四1-(4-硝基苯基)-β-咔啉-3-羧酸甲酯(H-01-04)的合成在100ml的圓底燒瓶中加入β-咔啉-3-羧酸甲酯(3.51g，10mmol)、冰乙酸(40ml)，混合物冷卻至5℃左右，攪拌下加入Pb(OAc)4(8.9g，20mmol)，5℃反應30min，室溫攪拌反應12hr，然后將混合物倒入100ml冰水中，用飽和碳酸氫鈉溶液調節pH至8，乙酸乙酯萃取(3×300ml)，合并乙酸乙酯萃取液，水洗，加入濃鹽酸調節pH至3，減壓蒸除乙酸乙酯，剩余物水(100ml)溶解，飽和碳酸氫鈉溶液調節pH至9，即析出白色固體，冷卻，過濾，水洗，干燥，得灰白色固體1.3g，收率37％。mp.235-237℃。MSm/e(M+1)348；實施例三十五1-(4-基苯基)-1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸的制備在250ml的圓底燒瓶中分別加入L-色氨酸(5.1g，25mmol)、4-羥基苯甲醛(3.5ml)、1N H2SO4(30ml)、H2O(70ml)和乙醇(30ml)，加熱回流12hr，然后加濃氨水(40ml)，繼續回流30min，減壓蒸除乙醇，剩余液冷卻，乙醚萃取(100ml×2)，水相濃縮至50ml，5N HCl中和(pH5)，析出黃色固體，過濾，水洗，干燥得黃色固體7.2g，收率94％。mp.281-283℃。MSm/e(M+1)309；實施例三十六1-(4-羥基苯基)-1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸甲酯的合成在500ml的圓底燒瓶中分別加入1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸甲酯(7.2g，24mmol)、甲醇(200ml)，混合物用冰水冷卻，攪拌下通入干燥的氯化氫氣體直至溶液透明，室溫攪拌20min，加熱回流2hr，減壓蒸除甲醇，固體過濾，丙酮洗滌，得灰白色固體。將上述固體溶于100ml冷水，飽和碳酸氫鈉溶液調節pH至9，即析出灰白色固體，過濾，水洗，干燥，乙酸乙酯重結晶得白色固體6.4g，收率85％。mp.258-260℃。MSm/e(M+1)323；實施例三十七1-(4-羥基苯基)-β-咔啉-3-羧酸甲酯(H-01-02)的合成
在100ml的圓底燒瓶中加入2(3.22g，10mmol)、冰乙酸(40ml)，混合物冷卻至5℃左右，攪拌下加入Pb(OAc)4(8.9g，20mmol)，5℃反應30min，室溫攪拌反應12hr，然后將混合物倒入100ml冰水中，用飽和碳酸氫鈉溶液調節pH至8，乙酸乙酯萃取(3×300ml)，合并乙酸乙酯萃取液，水洗，加入濃鹽酸調節pH至3，減壓蒸除乙酸乙酯，剩余物水(100ml)溶解，飽和碳酸氫鈉溶液調節pH至9，即析出白色固體，冷卻，過濾，水洗，干燥，得灰白色固體1.8g，收率56％。mp.267-269℃。MSm/e(M+1)319。
實施例三十八體外抗腫瘤活性實驗(MTT法)將細胞以約105個/ml的密度接種于96孔板上，每孔100μl，培養至對數生長期。按預設的濃度梯度加入待測樣品，每一梯度設3個重復。對照組加入等體積的溶解樣品用的溶媒。繼續培養48小時后，每孔加入5mg/ml的MTT20μl，繼續置于37℃溫育4小時。小心除去上清后，每孔加入100μl的DMSO(二甲基亞砜)，振蕩約10min溶解沉淀。立即在酶標儀上檢測O.D.(吸光度)值，波長570nm。以下式求出每一樣品濃度下的細胞存活率存活率％＝樣品組平均O.D.值/對照組平均O.D.值×100％以細胞存活率對藥物濃度作圖，按作圖法求出IC50(半數抑制濃度)值，結果如下表1，試驗所用的樣品為如下代號的樣品H1(去氫駱駝蓬堿)、H-01-01、H-01-02、H-01-03、H-01-04、H-03-01、H-03-02、H-03-03、H-03-04、H-03-05、H-03-06、H-03-07、H-03-08、H-03-09、H-09-01、H-09-02、H-09-03、H-09-04、H-09-05。細胞株編號分別為1PLA-801(非小細胞肺癌)295-D(高轉移肺癌)3HepG2(肝細胞癌)4Bel-7402(肝細胞癌)5BGC-823(胃癌)6SGC-7901(胃癌)7Hela(宮頸癌)8Lovo(結腸癌)9NIH3T3(小鼠成纖維細胞)10Chang’s liver(人正常肝細胞)
表1體外抗腫瘤活性(IC50值，μg/ml)
實施例三十九急性毒性實驗(1)實驗材料受試化合物H-03-04、H-03-05、H-03-06、H-03-07、H-09-01、H-09-02、H-09-03、H-09-05。
實驗動物昆明種小鼠(中科院上海實驗動物中心提供，合格證號滬動合證字第107號)，體重19-20克，雌雄各半。每20只小鼠一組。
溶劑生理鹽水、0.5％CMC-Na溶液(2)實驗方法1)劑量設置根據預試，各樣品設計五檔劑量，如表2。
表2劑量設置劑量(mg/kg)1H 464 21510046.4 21.5H-03-04200 160128102.4 81.92H-03-05100 80 64 51.2 40.96H-03-06150 12096 76.8 61.44H-03-07 500(因樣品數量有限，只做最大耐受劑量)H-09-0140 32 25.6 20.48 16.38H-09-0250 40 32 25.6 20.48H-09-03200 1601281024 81.92H-09-0540 32 25.6 20.48 16.382)藥物配制H1、H-03-05、H-03-06、H-09-01、H-09-02為水溶性，用生理鹽水溶解即可。H-03-04、H-03-07、H-09-03、H-09-05水難溶，實驗時加少量吐溫80濕潤助溶，逐漸加入0.5％CMC-Na溶液至所需濃度即可。
3)給藥方式單次靜脈或腹腔給藥。靜脈注射速度為1ml/min。
H1、H-03-05、H-03-06、H-09-01、H-09-02靜脈給藥，H-03-04、H-03-07、H-09-03、H-09-05腹腔給藥。
4)急性毒性試驗取昆明種小鼠，按性別隨機分組，各組按劑量設置分別給藥，觀察小鼠給藥后的即時反應。死亡動物進行解剖觀察，存活動物繼續觀察二周，并記錄二周內動物死亡情況。二周后將存活動物進行解剖，觀察實質性臟器的病變，具有實質性病變的臟器作病理檢查。根據各組動物的死亡數，以Bliss方法計算藥物的LD50值。
5)結果見表3表3 LD50值LD50(mg/kg)(95％CL)雄 雌 雌雄各半H1 62.5(56.20-121.00) 56.2(31.30-101.00) 59.00(43.50-110.00)H-03-04139.68(120.64-161.72)130.91(112.5-152.32)135.22(121.62-150.34)H-03-0573.07(64.44-82.85) 68.43(59.65-78.50) 70.61(64.17-77.70)H-03-0698.26(85.89-112.42) 91.96(80.46-105.10) 95.06(96.40-104.60)H-03-07最大耐受劑量＞500mg/kgH-09-0125.10(22.14-28.45) 23.39(20.86-26.22) 24.25(22.24-26.44)H-9-02 27.33(23.75-31.44) 25.60(22.17-29.56) 26.45(23.91-29.26)H-09-03153.46(130.16-180.94)142.49(123.38-164.56) 147.82(132.55-164.85)H-09-0530.65(26.82-35.03) 27.25(24.12-30.79) 28.92(36-45-31.61)實施例四十藥效學實驗1實驗材料受試化合物H1、H-03-04、H-03-05、H-03-06、H-03-07、H-09-01、H-09-02、H-09-03、H-09-05。陽性對照品為注射用環磷酰胺(CTX)(上海化聯制藥集團產品)。
實驗動物C57BL/6小鼠及昆明種小鼠(中科院上海實驗動物中心提供，合格證號滬動合證字第107號)，體重均為18-20克，雌雄皆可，每批實驗使用同一性別。抗腫瘤實驗C57BL/6小鼠及昆明種小鼠8-10只小鼠一組，陰性對照各為兩組。
瘤源小鼠Lewis肺癌、S180肉瘤，由上海醫藥工業研究院藥理室傳代維持；小鼠肝癌HepA，由中山大學腫瘤研究所提供。
溶劑生理鹽水、0.5％CMC-Na溶液2實驗方法1)劑量設置受試藥物設高、中、低三個劑量組，分別取該藥物靜脈或腹腔單次給藥LD50的1/5、1/10和1/20。H-03-06和H-03-07由于樣品量不足，只設兩個劑量組，H-03-07由于毒性較低，采用100mg/kg和50mg/kg兩個劑量。各受試藥物及陽性對照所用的劑量如表4。
表4給藥劑量劑量(mg/kg)高中低CTX 303030H1 105 2.5H-03-04 2713.5 6.75H-03-05 147 3.5H-03-06 20- 10H-03-07 100 - 50H-09-01 5 2.5 1.25H-09-02 532.65 1.325H-09-03 30157.5H-09-05 5.8 2.9 1.452)藥物配制H1、H-03-05、H-03-06、H-09-01、H-09-02為水溶性，用生理鹽水溶解即可。H-03-04、H-03-07、H-09-03、H-09-05水難溶，實驗時加少量吐溫80濕潤助溶，逐漸加入0.5％CMC-Na溶液至所需濃度即可。
3)給藥方案
H1、H-03-05、H-03-06、H-09-01、H-09-02靜脈給藥，H-03-04、H-03-07、H-09-03、H-09-05腹腔給藥。每天一次，連續給藥7天，共給藥7次。
陰性對照以等體積的相應溶劑，均為靜脈給藥，每天1次，連續7天。陽性對照CTX按30mg/kg的劑量，靜脈給藥，每天一次，連續7天。
4)抗腫瘤藥效試驗采用體內抗腫瘤腋皮下接種模型無菌條件下取生長旺盛的瘤源，以勻漿法制備成約1×107/ml的細胞懸液，于相應宿主腋皮下接種0.2ml/鼠，次日按實驗設計方案給藥，三周左右處死各組動物，剖取腫瘤稱重，按下式計算抑瘤率抑瘤率％＝[(陰性對照組平均瘤重-給藥組平均瘤重)/陰性對照組平均瘤重]×100％，結果見表5。
表5抑瘤率結果

實施例四十一體內神經毒性觀察(劑量同急性毒性試驗)H1給藥后各組動物即時出現不同程度的震顫、跳躍、抽搐、強直、仰臥；高劑量組動物即時出現抽搐后死亡，低劑量各組動物震顫持續15-20min后逐漸緩和，次日均恢復正常。反應一般在半小時左右逐漸消失。死亡高峰出現在給藥后1個小時內。死亡動物進行解剖，大體觀察未見明顯的臟器異常。
H-03-04給藥后約2分鐘各組動物均出現不同程度的少動、松毛、綣縮、行走不穩、閉眼、昏沉，但未見動物有節律性震顫現象。高劑量組動物死亡出現在10分鐘后，死亡高峰出現在給藥后1個小時內。死亡動物進行解剖，大體觀察未見明顯的臟器異常。
H-03-05給藥后小鼠即時出現跳躍、伏臥不動、呼吸加快、震顫。高劑量組動物死亡出現在10分鐘后，死亡高峰出現在給藥后1個小時內。死亡動物進行解剖，大體觀察未見明顯的臟器異常。
H-03-06靜脈給藥后即時各組動物均出現不同程度的跳躍、蹦竄，繼而伏臥不動，出現腹式呼吸主，個別動物小便失禁，動物死亡出現在3min后。低劑量組各動物10-15min后逐漸緩和，次日均恢復正常。反應一般在半小時左右逐漸消失，死亡高峰出現在給藥后1小時之內。死亡動物進行解剖，大體觀察未見明顯的臟器異常。
H-03-07給藥后，除注射局部出現收縮、扭歪、拉伸等刺激性反應外，未出現震顫等神經毒癥狀。
H-09-01和H-09-02給藥后約2分鐘各組動物均出現不同程度的尖叫、震顫、跳躍、抽搐、強直、仰臥；高劑量組動物即時出現抽搐后死亡，低劑量各組動物逐漸緩和，次日均恢復正常。反應一般在半小時左右逐漸消失。死亡高峰出現在給藥后1個小時內。死亡動物進行解剖，大體觀察未見明顯的臟器異常。
H-09-03給藥后約2分鐘各組動物均出現不同程度的尖叫、跳躍；高劑量組動物抽搐、強直、仰臥直至死亡，低劑量各組動物節律性震顫，數小時后恢復正常。死亡高峰出現在給藥后1個小時內。死亡動物進行解剖，大體觀察未見明顯的臟器異常。
H-09-05給藥后小鼠即時出現嘴咬、舔腹部進針部位，并出現尖叫、跳躍、收腹、抽搐、翻滾、震顫、強直；高劑量組動物死亡出現在2分鐘之后，低劑量各組動物出現不同程度的松毛、綣縮、震顫，持續約30分鐘，次日恢復正常。死亡高峰出現在給藥后1個小時內。死亡動物進行解剖，大體觀察未見明顯的臟器異常。
H-03-04及H-03-07毒性低，且在急性毒性試驗時未出現震顫等神經毒現象，宜結合療效作進一步的觀察和分析；H-09-03的LD50值較大，毒性也較低，但仍然有明顯的神經毒性；H-03-05和H-03-06毒性較H-03-04為高，但在低劑量時神經毒性不甚嚴重。H-09-01、H-09-02、H-09-05對昆明種小鼠仍然有明顯的神經毒性，與去氫駱駝蓬堿相似。
權利要求
1.下述通式(I)化合物 其中，R1是氫、C1-6的烷基或C6-10的芳烷基或取代芳烷基；R2是氫或C1-6的烷氧基羰基；R3是氫、羥基或C1-6的烷氧基；R4是氫、C1-6的烷基、C1-6的羥基烷基或C6-10的芳烷基或取代芳烷基；且R1、R2、R3、R4不同時是氫；當R2、R4為氫時，R1不為甲基且R3不為甲氧基；當R1為甲基時，R2、R3、R4不同時都為氫；當R1為甲基、R2為氫、R3為甲氧基時，R4不為甲基、乙基或丁基；當R1、R3為氫時，R2不為甲氧基羰基且R4不為甲基。
2.權利要求1所述的化合物，其特征在于R1是氫或C1-4的烷基或C6-8的芳烷基。
3.權利要求2所述的化合物，其特征在于R1是氫或C1-2的烷基。
4.權利要求3所述的化合物，其特征在于R1是氫。
5.權利要求1所述的化合物，其特征在于R2是氫或C1-4的烷氧基羰基。
6.權利要求5所述的化合物，其特征在于R2是氫或C1-2的烷氧基羰基。
7.權利要求6所述的化合物，其特征在于R2是乙氧基羰基。
8.權利要求1所述的化合物，其特征在于R3是氫、羥基或C1-4的烷氧基。
9.權利要求8所述的化合物，其特征在于R3是氫。
10.權利要求1所述的化合物，其特征在于R4是氫、C1-4的烷基、C1-4的羥基烷基或C6-8的芳烷基或取代芳烷基。
11.權利要求10所述的化合物，其特征在于R4是氫、C1-2的烷基、C1-2的羥基烷基或C6-8的芳烷基或取代芳烷基。
12.權利要求11所述的化合物，其特征在于R4是乙基或卞基。
13.權利要求12所述的化合物，其特征在于R4是卞基。
14.權利要求1所述的化合物，其特征在于R1為氫、C1-4的烷基或C6-8芳烷基；R2為氫或C1-4的烷氧基羰基；R3為氫、羥基或C1-4的烷氧基；R4為氫或C1-2的烷基、C1-2的羥基烷基、C6-8的芳烷基或取代芳烷基。
15.權利要求14所述的化合物，其中R1為氫；R2為C1-2的烷氧基羰基；R3為氫；R4為C1-2的烷基或C6-8的芳香烷基或取代芳烷基。
16.權利要求15所述的化合物，其中R1為氫；R2為乙氧基羰基；R3為氫；R4為乙基或卞基。
17.權利要求16所述的化合物，其中R1為氫；R2為乙氧基羰基；R3為氫；R4為卞基。
18.權利要求1～17中任何一項的化合物在制備治療腫瘤藥物中的應用。
全文摘要
本發明屬于藥物化合物領域，涉及通式(I)的化合物；本發明通過對去氫駱駝蓬堿的β－咔啉母核的1，3，7，9位點進行結構修飾，生成具有增強抗腫瘤活性并降低神經系統毒性的新的去氫駱駝蓬堿衍生物類化合物；本發明的化合物制備方法簡便，得率高；可用于制備治療各種腫瘤疾病的藥物。
文檔編號C07D471/04GK1552711SQ0313640
公開日2004年12月8日 申請日期2003年6月2日 優先權日2003年6月2日
發明者武嘉林, 陳琪, 曹日暉, 于富生, 王子厚, 彭文烈 申請人:新疆華世丹藥物研究有限責任公司