專利名稱：一種提取白樺脂酸的方法
技術領域：
本發明涉及提取植物有效成份的方法，更具體地說是從酸棗仁提取白樺脂酸的方法。
背景技術：
1995年(National Medicine，1(10)，NO.96/20968)人們首次發現滇刺棗樹皮提取物能選擇性抑制腫瘤的細胞增長，認為其中白樺脂酸是主要活性成份。關于白樺脂酸的制備方法有一些報道在Current Science(1965，P344)中，利用石油醚等提取大棗皮，經與氫氧化鈉溶液反應分離出白樺脂酸鈉，然后酸化得到白樺脂酸。提取分離過程中有嚴重的乳化現象，限制了工藝工業化進程，而且收率很低。曾路等人(植物學報，1986，28(5)∶517)將粉碎的配棗仁，在沙氏提取器中進行石油醚脫脂，藥渣用CH2CL2萃取，蒸除溶劑得膏狀物，提取物用石油醚冷溶后得不溶物，用CH2CL2-甲醇(5∶3)反復重結晶，得到白樺脂酸針狀晶體。操作工藝復雜，收率低，產品純度不高。
發明內容
本發明的目的是克服已有技術的缺點，提出一種工藝簡便，產品純度高且適合于工業化生產從酸棗仁中提取白樺脂酸的方法。
本發明的方法包括以下步驟1.將酸棗仁原料粉碎至不小于20目的粗粉，置于連續提取器中，用酸棗仁重量的2.0-4.0倍的60-90℃石油醚脫脂5～10小時，藥渣用酸棗仁重量的2.0-3.0倍的二氯甲烷回流提取10～15小時，提取液回收二氯甲烷至干，得到淺棕色粘性稠膏；2.步驟(1)的稠膏，用5倍量的70℃的熱乙醇溶解，再加入稠膏重量的50％-80％的異丙醇鋁，攪拌1小時，趁熱過濾，濾液棄之。
3.步驟(2)過濾后的濾渣采用下述任一方法提取不同純度的白樺脂酸(1)濾渣用等量的40℃熱乙醇洗滌，后用2％HCl酸化解絡合至酸化液中無鋁離子檢出，用乙醚萃取，濃縮乙醚層，殘留物用乙醇反復重結晶，得白樺脂酸結晶物，純度90％。
(2)濾渣用等量的40℃熱乙醇洗滌，后用2％HCl酸化，用己烷、己烷∶乙醚＝1∶1混合物分別萃取2次，濃縮物色譜柱分離，得到純度為95％的白樺脂酸；(3)濾渣用等量的40℃熱乙醇洗滌，后用2％HCl酸化，用己烷、己烷∶乙醚＝1∶1的混合物分別萃取2次，濃縮物用Py/Ac2O(吡啶/醋酸酐)處理得乙酰化物，用5％氫氧化鈉水-醇(50∶50)溶液處理得到純度為98％的白樺脂酸。
本發明所述的柱分離用的填料為硅膠樹脂、聚酰胺樹脂、硅膠H、離子交換樹脂或大孔吸附樹脂。使用的溶劑和洗脫用溶媒除石油醚、二氯甲烷外，還包括乙醇、甲醇、丙酮、乙酸乙酯、乙醚、己烷。。
本發明的優點和效果本發明與現有技術相比，工藝簡便、節省原材料、安全性好、回收率高、純度高，適合于工業化生產，是目前從酸棗仁中提取抗腫瘤活性成分-白樺脂酸的最先進的方法。
具體實施例方式
下面通過實施例進一步說明本發明的特點實例1以酸棗仁1000g為原料，粉碎為12目左右的粗粉，置于連續提取器中，用3000ml石油醚(沸程60-90℃)脫脂8小時，濃縮石油醚提取物，得到亮黃色的酸棗仁油。藥渣晾干后，用2000ml二氯甲烷連續回流提取12小時，濃縮二氯甲烷提取液至干，得淺棕色粘性稠膏。取稠膏10g用50ml 70℃的熱乙醇溶解，加入6g異丙醇鋁攪拌機攪拌1小時，趁熱過濾，濾渣用40℃熱乙醇洗滌，后用2％HCl酸化解絡合至酸化液中無鋁離子檢出，用乙醚萃取，濃縮乙醚層，殘留物用乙醇反復重結晶，得白樺脂酸結晶物，純度90％左右。
鋁離子檢查將洗液最后部分先加一滴二甲酚橙指示劑，后加幾滴0.01mol/L EDTA溶液，若溶液顏色不變化則表示己酸化解絡合完全。
實例2取實例1中的濾渣用40℃熱乙醇洗滌，后用2％HCl酸化解絡合至酸化液中無鋁離子檢出，用己烷、己烷∶乙醚＝1∶1混合物分別萃取2次，合并萃取層，濃縮至干，用sio2柱進行分離，洗脫劑為甲醇-二氯甲烷(1∶9)，將白樺脂酸部分濃縮，得到純度為95％的白樺脂酸。
鋁離子檢查同實例1。
實例3取實例1中的濾渣用等量的40℃左右熱乙醇洗滌，后用2％HCl酸化，用己烷、己烷∶乙醚＝1∶1的混合物分別萃取2次，合并萃取層，濃縮至干，濃縮物5克置于50ml三口瓶中，加入數滴吡啶和30ml二氯甲烷，用10克的醋酸酐做乙酰化劑，加熱回流2小時，蒸出溶劑，殘留物用水洗(3×30ml)，得純3β-白樺脂酸乙酸鹽，用5％水-醇(1∶1)氫氧化鈉溶液處理得到白樺脂酸，純度98％。
權利要求
1.一種提取白樺脂酸的方法，其特征在于制備過程包括以下步驟(1)將酸棗仁原料粉碎至大于20目的粗粉，用原料重量的2.0-4.0倍量的60-90℃石油醚脫脂5～10小時，然后用原料重量的2.0-3.0倍的二氯甲烷回流提取10～15小時，提取液回收二氯甲烷至干，得到淺棕色粘性稠膏；(2)步驟(1)的稠膏，用5倍量的70℃的熱乙醇溶解，再加入稠膏重量的50％-80％的異丙醇鋁，攪拌1小時，趁熱過濾，濾液棄之。(3)步驟(2)過濾后的濾渣采用下述任一方法提取不同純度的白樺脂酸①濾渣用等量的40℃熱乙醇洗滌，后用2％HCl酸化，用乙醚萃取，濃縮，濃縮物用乙醇反復重結晶得到純度為90％的白樺脂酸；②濾渣用等量的40℃熱乙醇洗滌，后用2％HCl酸化，用己烷、己烷∶乙醚＝1∶1混合物分別萃取2次，濃縮物色譜柱分離，得到純度為95％的白樺脂酸；③濾渣用等量的40℃熱乙醇洗滌，后用2％HCl酸化，用己烷、己烷∶乙醚＝1∶1的混合物分別萃取2次，濃縮物用吡啶/醋酸酐處理得乙酰化物，用5％氫氧化鈉水-醇(50∶50)溶液處理得到純度為98％的白樺脂酸。
2.按照權利要求1所述的方法，其特征在于使用的提取溶劑和洗脫用的溶媒除石油醚、二氯甲烷外，還包括乙醇、甲醇、丙酮、乙酸乙酯、乙醚、己烷。
3.按照權利要求1所述的方法，其特征在于柱分離用的填料為硅膠樹脂、聚酰胺樹脂、硅膠H、離子交換樹脂或大孔吸附樹脂。
全文摘要
本發明是一種提取白樺脂酸的方法，其特點是以酸棗仁為原料，粉碎為粗粉，用石油醚除去油脂，回收石油醚，得到酸棗仁油。藥渣再用二氯甲烷回流提取，回收溶劑，得淺棕色粘性稠膏，所得的稠膏經絡合、解絡合、重結晶、柱分離等步驟，得到不同純度白樺脂酸。本發明的方法工藝簡單，產品純度高，適合于工業化生產，是目前從酸棗仁提取抗腫瘤活性成分——白樺脂酸的較先進的方法。
文檔編號C07J53/00GK1548448SQ03131059
公開日2004年11月24日 申請日期2003年5月15日 優先權日2003年5月15日
發明者王振國, 陳力群, 馬莉, 羅永明, 周小靜 申請人:北京群子源生物技術開發有限公司