專利名稱：作為胰島素樣生長因子－1受體(igf－1)調節劑的嘧啶衍生物的制作方法
技術領域：
本發明涉及嘧啶衍生物、其制備方法、含有該化合物的藥物組合物、制備該藥物組合物的方法以及它們在治療中的用途。
胰島素樣生長因子(IGF)軸由配體、受體、結合蛋白和蛋白酶組成。IGF-I和IGF-II兩種配體是通過與一種異型四聚(hetero-tetrameric)細胞表面受體，即1型胰島素樣生長因子受體(IGF-1R)的相互作用傳遞信號的促細胞分裂肽。任一配體的結合都會刺激β-鏈細胞內區酪氨酸激酶結構域的活化，使數種酪氨酸激酶殘基發生磷酸化作用，從而補充并活化各種信號分子。人們已證實細胞內結構域為細胞內有絲分裂發生、存活、轉化和分化傳送信號。Adams等人(Cellular and Molecular Life Sciences，57，1050-1093，2000)綜述了IGF-1R的結構與功能。IGF-IIR(也即是所知的6-磷酸甘露糖酯受體)沒有這種激酶結構域，并且不傳輸有絲分裂發生信號，但可以調節配體在細胞表面的有效性，抵消IGF-1R的作用。IGF結合蛋白(IGFBP)控制循環IGF的有效性，并且IGF從這些循環中的釋放可通過蛋白酶剪切進行調解。Collett-Solberg和Cohen(Endocrine，12，121-136，2000)對IGF軸的這些其它組分進行過綜述。
對IGF傳送信號與細胞轉化及腫瘤發生和發展之間的關聯有大量的證據。人們已將IGF視為防止致癌基因誘發細胞死亡的主要存活因素(Harrington等，EMBO J，13，3286-3295，1994)。已證實缺乏IGF-1R的細胞難以被幾種不同的能有效轉化相應的野生型細胞的致癌基因(包括SV40T抗原和ras)所轉化(Sell等，Mol.Cell Biol.，14，3604-12，1994)。人們已描述了IGF軸的各種組分在各種腫瘤細胞系及組織中，尤其是在乳房腫瘤(Surmacz，Journal of MammaryGland Biology & Neoplasia，5，95-105，2000)、前列腺腫瘤(Djavan等，World J.Urol.，19，225-233，2001和O’Brien等，Urology，58，1-7，2001)和結腸腫瘤(Guo等，Gastroenterology，102，1101-1108，1992)中的正調節作用。相反，IGF-IIR被指為一種腫瘤抑制劑，并在一些癌癥中缺失(DaCosta等，Journal of Mammary Gland Biology &Neoplasia，5，85-94，2000)。近年來對增加循環IGF(或增加IGF-1與IGFBP3的比例)與致癌風險之間的關聯所做的流行病學研究與日俱增(Yu和Rohan，J.Natl.Cancer Inst.，92，1472-1489，2000)。轉基因小鼠模型也揭示IGF在腫瘤細胞增殖開始時的信號傳輸作用(Lamm和Christofori，Cancer Res.，58，801-807，1998和Foster等，Cancer Metas.Rev.，17，317-324，1998及DiGiovanni等，Proc.Natl.Acad.Sci.，97，3455-3460，2000)。
一些體外和體內對策提供了以下主要證據，即對IGF-1R傳輸信號的抑制使轉化表型反向，并抑制腫瘤細胞的生長。這包括中和抗體(Kalebic等，Cancer Res.，54，5531-5534，1994)、反義寡核苷酸(Resnicoff等，Cancer Res.，54，2218-2222，1994)、三重螺旋成形寡核苷酸(Rinninsland等，Proc.Natl.Acad.Sci.，94，5854-5859，1997)、反義mRNA(Nakamura等，Cancer Res.，60，760-765，2000)和顯性失活受體(D’Ambrosio等，Cancer Res.，56，4013-4020，1996)。反義寡核苷酸顯現出對IGF-1R表達的抑制，其結果是誘導體內細胞發生編程性細胞死亡(Resnicoff等，Cancer Res，55，2463-2469，1995)，并且這些反義寡核苷酸已進入人體(Resnicoff等，Proc.Amer.Assoc.Cancer Res.，40摘要4816，1999)。然而，對于治療主要的實體瘤疾病而言，這些方法中沒有一個是特別引人注目的。
由于增加的IGF信號傳輸意味著腫瘤細胞的生長及存活，而阻斷IGF-1R功能能夠改變這個過程，因此抑制IGF-1R酪氨酸激酶結構域是一種治療癌癥的合適療法。采用各種顯性失活IGF-1R變體所進行的體外及體內研究支持了這一觀點。特別是，已被證實阻斷受體酪氨酸激酶活性的ATP結合位點上的點突變在防止腫瘤細胞生長方面有效(Kulik等，Mol.Cell.Biol.，17，1595-1606，1997)。有一些證據暗示正常細胞對由于抑制IGF信號傳輸而引起的編程性細胞死亡不那么敏感，這表明采用這種治療的治療范圍是可能的(Baserga，Trends Biotechnol.，14，150-2，1996)。
對各種選擇性IGF-1R酪氨酸激酶抑制劑的報道為數不多。Parrizas等描述了在體外及體內具有一些效力的酪氨酸磷酸化抑制劑(Parrizas等，Endocrinology，1381427-33(1997))。這些化合物的效能適中，并且對胰島素受體具有選擇性。Telik Inc.描述了對胰島素受體具有選擇性但在體外對腫瘤細胞的效能仍然一般的雜芳基-芳基脲(公開的PCT專利申請WO 00/35455號)。
本發明提供了下式(I)的化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑合物 其中R1代表包含至少一個選自氮、氧和硫的環雜原子的5或6元雜芳環，所述環任選被至少一個選自以下的取代基所取代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基(各自均可任選被至少一個選自鹵素、氨基(-NH2)、羥基和三氟甲基的取代基取代)、鹵素、硝基、氰基、-NR5R6、羧基、羥基、C2-C6烯基、C3-C6環烷基、C1-C6烷氧基羰基、C1-C6烷基羰基、C1-C6烷基羰基氨基、苯基羰基、-S(O)mC1-C6烷基、-C(O)NR7R8、-SO2NR7aR8a；和可包含至少一個選自氮、氧和硫的環雜原子的不飽和5至6元環，所述環本身任選被至少一個選自以下的取代基所取代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基(各自均可任選被至少一個選自鹵素、氨基(-NH2)、羥基和三氟甲基的取代基取代)、鹵素、硝基、氰基、-NR9R10、羧基、羥基、C2-C6烯基、C3-C6環烷基、C1-C6烷氧基羰基、C1-C6烷基羰基、C1-C6烷基羰基氨基、苯基羰基、-S(O)nC1-C6烷基、-C(O)NR11R13和-SO2NR11aR12a；m為0、1或2；n為0、1或2；R2代表任選被至少一個選自鹵素、羥基和C1-C3烷氧基的取代基取代的C1-C4烷基；R3代表氫、鹵素或三氟甲基；R4代表包含至少一個選自氮、氧和硫的環雜原子的5元雜芳環，所述環任選被至少一個選自以下的取代基所取代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基(各自均可任選被至少一個選自鹵素、氨基(-NH2)、羥基和三氟甲基的取代基取代)、鹵素、硝基、氰基、-NR13R14、羧基、羥基、C2-C6烯基、C3-C6環烷基、C1-C4烷氧基羰基、C1-C4烷基羰基、C1-C4烷基羰基氨基、苯基羰基、-S(O)pC1-C4烷基、-C(O)NR15R16和-SO2NR15aR16a；p為0、1或2；R5和R6各獨立代表氫、C1-C4烷基或C3-C6環烷基，或R5和R6與其相連接的氮原子一起形成4至6元飽和雜環；R7和R8各獨立代表氫、C1-C4烷基或C3-C6環烷基，或R7和R8與其相連接的氮原子一起形成4至6元飽和雜環；R7a和R8a各獨立代表氫、C1-C4烷基或C3-C6環烷基，或R7a和R8a與其相連接的氮原子一起形成4至6元飽和雜環；R9和R10各獨立代表氫、C1-C4烷基或C3-C6環烷基，或R9和R10與其相連接的氮原子一起形成4至6元飽和雜環；R11和R12各獨立代表氫、C1-C4烷基或C3-C6環烷基，或R11和R12與其相連接的氮原子一起形成4至6元飽和雜環；R11a和R12a各獨立代表氫、C1-C4烷基或C3-C6環烷基，或R11a和R12a與其相連接的氮原子一起形成4至6元飽和雜環；
R13和R14各獨立代表氫、C1-C4烷基或C3-C6環烷基，或R13和R14與其相連接的氮原子一起形成4至6元飽和雜環；R15和R16各獨立代表氫、C1-C4烷基或C3-C6環烷基，或R15和R16與其相連接的氮原子一起形成4至6元飽和雜環；以及R15a和R16a各獨立代表氫、C1-C4烷基或C3-C6環烷基，或R15a和R16a與其相連接的氮原子一起形成4至6元飽和雜環。
在本說明書的上下文中，除非另有說明，否則烷基取代基或取代基中的烷基部分可以是直鏈，也可以是支鏈。當R5和R6，或R7和R8，或R7a和R8a，或R9和R10，或R11和R12，或R11a和R12a，或R13和R14，或R15和R16，或R15a和R16a代表飽和的雜環時，應清楚唯一存在的雜原子是R5和R6，或R7和R8，或R7a和R8a，或R9和R10，或R11和R12，或R11a和R12a，或R13和R14，或R15和R16，或R15a和R16a連接于其上的氮原子。在R1的定義中應注意不飽和的5至6元環可以具有脂環族或芳族的各種特性。
“C1-C6烷基”和“C1-C4烷基”的例子包括甲基、乙基、異丙基和叔丁基。“C1-C6烷氧基羰基”的例子包括甲氧基羰基、乙氧基羰基、正丁氧基羰基和叔丁氧基羰基。“C1-C6烷氧基”和“C1-C3烷氧基”的例子包括甲氧基、乙氧基和丙氧基。“C1-C6烷基羰基氨基”的例子包括甲酰氨基、乙酰氨基和丙酰氨基。“S(O)mC1-C6烷基”中m為0-2的例子包括甲硫基、乙硫基、甲基亞硫酰基、乙基亞硫酰基、甲磺酰基和乙磺酰基。“C1-C6烷基羰基”的例子包括丙酰基和乙酰基。“C2-C6烯基”的例子有乙烯基、烯丙基和1-丙烯基。“C3-C6環烷基”的例子有環丙基、環戊基和環己基。
“包含至少一個選自氮、氧和硫的環雜原子的5或6元雜芳環”是完全不飽和的、含有5或6個原子的芳族單環(其中至少一個為選自氮、氧和硫的雜原子)，除非另有說明，否則可與碳或氮相連接。適宜的“包含至少一個選自氮、氧和硫的環雜原子的5或6元雜芳環”有吡啶基、咪唑基、異噁唑基、吡唑基、呋喃基、吡嗪基、噠嗪基、嘧啶基、吡咯基或噻吩基；所述吡啶基、咪唑基、異噁唑基、吡唑基、呋喃基、吡嗪基、噠嗪基、嘧啶基、吡咯基或噻吩基。
“可包含至少一個選自氮、氧和硫的環雜原子的不飽和5至6元環”是完全或部分不飽和的、含有5或6個原子(其中任選至少一個為選自氮、氧和硫的雜原子)的單環，并且除非另有說明，否則可與碳或氮相連接。適宜的“可包含至少一個選自氮、氧和硫的環雜原子的不飽和5至6元環”有苯基或吡啶基。
“包含至少一個選自氮、氧和硫的環雜原子的5元雜芳環”是完全不飽和的、含有5個原子(其中至少一個為選自氮、氧和硫的雜原子)的芳族單環，除非另有說明，否則可與碳或氮相連接。適宜的“包含至少一個選自氮、氧和硫的環雜原子的5元雜芳環”有吡唑基。
R1代表包含至少一個選自氮、氧和硫的環雜原子(如分別為1個、2個、3個或4個環雜原子)的任選取代的5或6元雜芳環。雜芳環的例子包括噻吩基(如3-噻吩基)、吡唑基(如4-吡唑基)、異噁唑基(如5-異噁唑基)、噻二唑基、吡咯基(如2-吡咯基)、呋喃基(如2-或3-呋喃基)、噻唑基、三唑基、四唑基、咪唑基(如4-咪唑基)、吡嗪基(如2-吡嗪基)、噠嗪基(如3-噠嗪基)、嘧啶基(如4-或5-嘧啶基)和吡啶基(2-、3-或4-吡啶基)。
在R1中，所述5或6元雜芳環任選被至少一個選自以下的取代基(如分別為1個、2個、3個或4個取代基)所取代C1-C6烷基、特別是C1-C4烷基(如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、正戊基或正己基)；C1-C6烷氧基、特別是C1-C4烷氧基(如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、正丁氧基、叔丁氧基、正戊氧基或正己氧基)(各C1-C6烷基和C1-C6烷氧基取代基任選被至少一個例如分別為1個、2個、3個或4個選自鹵素(如氟、氯、溴或碘)、氨基、羥基和三氟甲基的取代基所取代)；鹵素(如氟、氯、溴或碘)；硝基；氰基；-NR5R6；羧基；羥基；C2-C6烯基、特別是C2-C4烯基(如乙烯基)；C3-C6環烷基(環丙基、環丁基、環戊基和環己基)；C1-C6烷氧基羰基、特別是C1-C4烷氧基羰基(如甲氧基羰基或乙氧基羰基)；C1-C6烷基羰基、特別是C1-C4烷基羰基(如甲基羰基、乙基羰基、正丙基羰基、異丙基羰基、正丁基羰基、正戊基羰基或正己基羰基)；C1-C6烷基羰基氨基、特別是C1-C4烷基羰基氨基(如甲基羰基氨基或乙基羰基氨基)；苯基羰基；-S(O)mC1-C6烷基、特別是-S(O)mC1-C4烷基；-C(O)NR7R8；-SO2NR7aR8a；以及可包含至少一個選自氮、氧和硫的環雜原子(如分別為1個、2個、3個或4個環雜原子)的任選取代的不飽和5至6元環。
不飽和5至6元環的例子包括苯基、環戊烯基、環己烯基、噻吩基(如3-噻吩基)、吡唑基(如4-吡唑基)、異噁唑基(如5-異噁唑基)、噻二唑基、吡咯基(如2-吡咯基)、呋喃基(如2-或3-呋喃基)、噻唑基、三唑基、四唑基、咪唑基(如4-咪唑基)、吡嗪基(如2-吡嗪基)、噠嗪基(如3-噠嗪基)、嘧啶基(如4-或5-嘧啶基)和吡啶基(2-、3-或4-吡啶基)。所述環本身可任選被至少一個選自以下的取代基(如分別為1個、2個、3個或4個取代基)所取代C1-C6烷基、特別是C1-C4烷基(如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、正戊基或正己基)；C1-C6烷氧基、特別是C1-C4烷氧基(如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、正丁氧基、叔丁氧基、正戊氧基或正己氧基)(各C1-C6烷基和C1-C6烷氧基取代基任選被至少一個例如分別為1個、2個、3個或4個選自鹵素(如氟、氯、溴或碘)、氨基、羥基和三氟甲基的取代基所取代)；鹵素(如氟、氯、溴或碘)；硝基；氰基；-NR9R10；羧基；羥基；C2-C6烯基、特別是C2-C4了烯基(如乙烯基)；C3-C6環烷基(環丙基、環丁基、環戊基和環己基)；C1-C6烷氧基羰基、特別是C1-C4烷氧基羰基(如甲氧基羰基或乙氧基羰基)；C1-C6烷基羰基、特別是C1-C4烷基羰基(如甲基羰基、乙基羰基、正丙基羰基、異丙基羰基、正丁基羰基、正戊基羰基或正己基羰基)；C1-C6烷基羰基氨基、特別是C1-C4烷基羰基氨基(如甲基羰基氨基或乙基羰基氨基)；苯基羰基；-S(O)nC1-C6烷基、特別是-S(O)nC1-C4烷基；-C(O)NR11R12和-SO2NR11aR12a。
可變基團的具體數值如下。可采用與本說明書前后所定義的任何定義、權利要求或實施方案相適應的任何數值。
在本發明的一個實施方案中，R1代表包含1個或2個選自氮和氧的環雜原子的5或6元雜芳環，所述環任選被至少一個選自以下的取代基所取代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、鹵素、硝基、氰基、-NR5R6、羧基、羥基、C2-C6烯基、C3-C6環烷基、C1-C6烷氧基羰基、C1-C6烷基羰基、C1-C6烷基羰基氨基、苯基羰基、-S(O)mC1-C6烷基、-C(O)NR7R8、-SO2NR7aR8a；以及可包含1個環氮原子的不飽和6元環，所述環本身任選被至少一個選自以下的取代基所取代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、鹵素、硝基、氰基、-NR9R10、羧基、羥基、C2-C6烯基、C3-C6環烷基、C1-C6烷氧基羰基、C1-C6烷基羰基、C1-C6烷基羰基氨基、苯基羰基、-S(O)nC1-C6烷基、-C(O)NR11R12和-SO2NR11aR12a。
在本發明的另一個實施方案中，R1代表包含1個或2個選自氮和氧的環雜原子的5或6元雜芳環，所述環任選被至少一個選自以下的取代基所取代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、鹵素、苯基和吡啶基，苯基和吡啶基取代基各自本身任選被至少一個選自C1-C6烷基、C1-C6烷氧基和鹵素的取代基所取代。
在另一方面，R1代表包含至少一個選自氮、氧和硫的環雜原子的5或6元雜芳環，所述環任選被至少一個選自以下的取代基所取代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基(各自可任選被至少一個選自羥基的取代基所取代)、鹵素、-C(O)NR7R8、C1-C6烷氧基羰基；以及可包含至少一個選自氮和氧的環雜原子的不飽和5至6元環，所述環本身任選被至少一個選自以下的取代基所取代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基(各自可任選被至少一個選自鹵素的取代基所取代)、鹵素和氰基；其中R7和R8兩者均為氫或R7和R8與其所連接的氮原子一起形成4至6元飽和雜環。
在另一方面，R1代表吡啶基、咪唑基、異噁唑基、吡唑基、呋喃基、吡嗪基、噠嗪基、嘧啶基、吡咯基或噻吩基；所述吡啶基、咪唑基、異噁唑基、吡唑基、呋喃基、吡嗪基、噠嗪基、嘧啶基、吡咯基和噻吩基任選被至少一個選自甲基、異丙基、羥甲基、甲氧基、氯、溴、氨基甲酰基、甲氧基羰基、吡咯烷-1-基羰基、苯基和吡啶基的取代基所取代；所述苯基或吡啶基任選被至少一個選自甲基、三氟甲基、甲氧基、乙氧基、三氟甲氧基、氟、氯、溴和氰基的取代基所取代。
在另一方面，R1代表吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基、2-甲氧基吡啶-5-基、2-氰基吡啶-5-基、3-溴代吡啶-5-基、3-(吡啶-2-基)吡啶-5-基、4-(吡啶-2-基)吡啶-2-基、3-氯代吡啶-2-基、3-甲基吡啶-2-基、6-甲基吡啶-2-基、5，6-二甲基吡啶-2-基、咪唑-4-基、咪唑-5-基、3-甲基異噁唑-5-基、5-甲基異噁唑-3-基、3-異丙基異噁唑-5-基、3-甲氧基羰基異噁唑-5-基、3-(羥甲基)異噁唑-5-基、3-氨基甲酰基異噁唑-5-基、3-(吡咯烷-1-基羰基)異噁唑-5-基、3-苯基異噁唑-5-基、3-(吡啶-2-基)異噁唑-5-基、3-(2-甲氧基吡啶-3-基)異噁唑-5-基、3-(2-甲氧基苯基)異噁唑-5-基、3-(3-甲氧基苯基)異噁唑-5-基、3-(2-乙氧基苯基)異噁唑-5-基、3-(2-三氟甲基苯基)異噁唑-5-基、3-(2-三氟甲氧基苯基)異噁唑-5-基、3-(2-氯代苯基)異噁唑-5-基、3-(2-溴代苯基)異噁唑-5-基、3-(2-甲基苯基)異噁唑-5-基、3-(2-氟代苯基)異噁唑-5-基、3-(2-氰基苯基)異噁唑-5-基、5-甲基吡唑-4-基、呋喃-2-基、呋喃-3-基、5-甲基呋喃-2-基、吡嗪-2-基、2-甲基吡嗪-5-基、噠嗪-3-基、嘧啶-4-基、1-甲基吡咯-2-基和噻吩-3-基。
R2代表任選被至少一個選自鹵素(如氟、氯、溴或碘)、羥基和C1-C3烷氧基(如甲氧基、乙氧基和正丙氧基)的取代基(如分別為1個、2個、3個或4個取代基)所取代的C1-C4烷基(如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基或叔丁基)。
在本發明的一個實施方案中，R2代表CH2或(CH2)2。
在另一個實施方案中，R2代表C1-C4烷基。
在另一個實施方案中，R2代表甲基、乙基和丙基。
R3代表氫、鹵素(如氟、氯、溴或碘)或三氟甲基。
在本發明的一個實施方案中，R3代表氯或溴。
在另一個實施方案中，R3代表氫或鹵素。
在另一個實施方案中，R3代表氫、氯或溴。
R4代表包含至少一個選自氮、氧和硫的環雜原子(如分別為1個、2個、3個或4個環雜原子)的任選取代的5元雜芳環。所述環的例子包括噻吩基(如3-噻吩基)、吡唑基(如4-吡唑基)、異噁唑基(如5-異噁唑基)、噻二唑基、吡咯基(如2-吡咯基)、呋喃基(如2-或3-呋喃基)、噻唑基、三唑基、四唑基、咪唑基(如4-咪唑基)。
R4中的5元雜芳環任選被至少一個選自以下的取代基(如分別為1個、2個、3個或4個取代基)所取代C1-C6烷基、特別是C1-C4烷基(如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、正戊基或正己基)；C1-C6烷氧基、特別是C1-C4烷氧基(如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、正丁氧基、叔丁氧基、正戊氧基或正己氧基)(每一個C1-C6烷基和C1-C6烷氧基取代基任選被至少一個例如分別為1個、2個、3個或4個選自鹵素(如氟、氯、溴或碘)、氨基、羥基和三氟甲基的取代基所取代)；鹵素(如氟、氯、溴或碘)；硝基；氰基；-NR13R14；羧基；羥基；C2-C6烯基、特別是C2-C4烯基(如乙烯基)；C3-C6環烷基(環丙基、環丁基、環戊基和環己基)；C1-C4烷氧基羰基、特別是C1-C3烷氧基羰基(如甲氧基羰基或乙氧基羰基)；C1-C4烷基羰基、特別是C1-C3烷基羰基(如甲基羰基、乙基羰基、正丙基羰基、異丙基羰基或正丁基羰基)；C1-C4烷基羰基氨基、特別是C1-C3烷基羰基氨基(如甲基羰基氨基或乙基羰基氨基)；苯基羰基；-S(O)pC1-C4烷基、特別是-S(O)pC1-C2烷基；-C(O)NR15R16和-SO2NR15aR16a。
在本發明的一個實施方案中，R4代表包含1個或2個選自氮和氧的環雜原子的5元雜芳環，所述環任選被至少一個選自以下的取代基所取代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、鹵素、硝基、氰基、-NR13R14、羧基、羥基、C2-C6烯基、C3-C6環烷基、C1-C4烷氧基羰基、C1-C4烷基羰基、C1-C4烷基羰基氨基、苯基羰基、-S(O)pC1-C4烷基、-C(O)NR15R16和-SO2NR15aR16a。
在本發明的另一個實施方案中，R4代表包含2個環氮原子的5元雜芳環，所述環任選被至少一個選自C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、鹵素和C3-C6環烷基的取代基所取代。
在另一個實施方案中，R4代表包含至少1個選自氮的環雜原子的5元雜芳環，所述環任選被至少一個選自C1-C6烷基和C3-C6環烷基的取代基所取代。
在另一個實施方案中，R4代表吡唑基，所述環任選被至少一個選自甲基、乙基、異丙基、丙基、叔丁基和環丙基的取代基所取代。
在另一個實施方案中，R4代表5-甲基吡唑-3-基、5-乙基吡唑-3-基、5-異丙基吡唑-3-基、5-丙基吡唑-3-基、5-叔丁基吡唑-3-基和5-環丙基吡唑-3-基。
R5和R6各獨立代表氫、C1-C4烷基，特別是C1-C2烷基(如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基或叔丁基)或C3-C6環烷基(環丙基、環丁基、環戊基和環己基)；或R5和R6與其相連接的氮原子一起形成4至6元飽和雜環(如吡咯烷基或哌啶基)。
R7和R8各獨立代表氫、C1-C4烷基，特別是C1-C2烷基(如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基或叔丁基)或C3-C6環烷基(環丙基、環丁基、環戊基和環己基)；或R7和R8與其相連接的氮原子一起形成4至6元飽和雜環(如吡咯烷基或哌啶基)。
R7a和R8a各獨立代表氫、C1-C4烷基，特別是C1-C2烷基(如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基或叔丁基)或C3-C6環烷基(環丙基、環丁基、環戊基和環已基)；或R7a和R8a與其相連接的氮原子一起形成4至6元飽和雜環(如吡咯烷基或哌啶基)。
R9和R10各獨立代表氫、C1-C4烷基，特別是C1-C2烷基(如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基或叔丁基)或C3-C6環烷基(環丙基、環丁基、環戊基和環己基)；或R9和R10與其相連接的氮原子一起形成4至6元飽和雜環(如吡咯烷基或哌啶基)。
R11和R12各獨立代表氫、C1-C4烷基，特別是C1-C2烷基(如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基或叔丁基)或C3-C6環烷基(環丙基、環丁基、環戊基和環己基)；或R11和R12與其相連接的氮原子一起形成4至6元飽和雜環(如吡咯烷基或哌啶基)。
R11a和R12a各獨立代表氫、C1-C4烷基，特別是C1-C2烷基(如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基或叔丁基)或C3-C6環烷基(環丙基、環丁基、環戊基和環己基)；或R11a和R12a與其相連接的氮原子一起形成4至6元飽和雜環(如吡咯烷基或哌啶基)。
R13和R14各獨立代表氫、C1-C4烷基，特別是C1-C2烷基(如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基或叔丁基)或C3-C6環烷基(環丙基、環丁基、環戊基和環己基)；或R13和R14與其相連接的氮原子一起形成4至6元飽和雜環(如吡咯烷基或哌啶基)。
R15和R16各獨立代表氫、C1-C4烷基，特別是C1-C2烷基(如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基或叔丁基)或C3-C6環烷基(環丙基、環丁基、環戊基和環己基)；或R15和R16與其相連接的氮原子一起形成4至6元飽和雜環(如吡咯烷基或哌啶基)。
R15a和R16a各獨立代表氫、C1-C4烷基，特別是C1-C2烷基(如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基或叔丁基)或C3-C6環烷基(環丙基、環丁基、環戊基和環己基)；或R15a和R16a與其相連接的氮原子一起形成4至6元飽和雜環(如吡咯烷基或哌啶基)。
本發明的一個實施方案提供了式(I)的化合物及其藥學上可接受的鹽和溶劑合物的子集，其中
R1代表包含1個或2個選自氮和氧的環雜原子的5或6元雜芳環，所述環任選被至少一個選自C1-C3烷基、吡啶基和任選被甲氧基取代的苯基的取代基所取代；R2代表C1-C2烷基；R3代表氯或溴；和R4代表被至少一個選自C1-C4烷基和環丙基的取代基所取代的吡唑基。
本發明的另一方面提供了式(I)(如上所述)的化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R1代表包含至少一個選自氮、氧和硫的環雜原子的5或6元雜芳環，所述環任選被至少一個選自以下的取代基所取代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基(各自可任選被至少一個選自羥基的取代基所取代)、鹵素、-C(O)NR7R8、C1-C6烷氧基羰基；以及可包含至少一個選自氮和氧的環雜原子的不飽和5至6元環，所述環本身任選被至少一個選自以下的取代基所取代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基(各自可任選被至少一個選自鹵素的取代基所取代)、鹵素和氰基；其中R7和R8兩者均為氫或R7和R8與其所連接的氮原子一起形成4至6元飽和雜環；R2代表C1-C4烷基；R3代表氫或鹵素；和R4代表包含至少一個選自氮的環雜原子的5元雜芳環，所述環任選被至少一個選自C1-C6烷基和C3-C6環烷基的取代基所取代。
本發明的另一方面提供了式(I)(如上所述)的化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R1代表吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基、2-甲氧基吡啶-5-基、2-氰基吡啶-5-基、3-溴代吡啶-5-基、3-(吡啶-2-基)吡啶-5-基、4-(吡啶-2-基)吡啶-2-基、3-氯代吡啶-2-基、3-甲基吡啶-2-基、6-甲基吡啶-2-基、5，6-二甲基吡啶-2-基、咪唑-4-基、咪唑-5-基、3-甲基異噁唑-5-基、5-甲基異噁唑-3-基、3-異丙基異噁唑-5-基、3-甲氧基羰基異噁唑-5-基、3-(羥甲基)異噁唑-5-基、3-氨基甲酰基異噁唑-5-基、3-(吡咯烷-1-基羰基)異噁唑-5-基、3-苯基異噁唑-5-基、3-(吡啶-2-基)異噁唑-5-基、3-(2-甲氧基吡啶-3-基)異噁唑-5-基、3-(2-甲氧基苯基)異噁唑-5-基、3-(3-甲氧基苯基)異噁唑-5-基、3-(2-乙氧基苯基)異噁唑-5-基、3-(2-三氟甲基苯基)異噁唑-5-基、3-(2-三氟甲氧基苯基)異噁唑-5-基、3-(2-氯代苯基)異噁唑-5-基、3-(2-溴代苯基)異噁唑-5-基、3-(2-甲基苯基)異噁唑-5-基、3-(2-氟代苯基)異噁唑-5-基、3-(2-氰基苯基)異噁唑-5-基、5-甲基吡唑-4-基、呋喃-2-基、呋喃-3-基、5-甲基呋喃-2-基、吡嗪-2-基、2-甲基吡嗪-5-基、噠嗪-3-基、嘧啶-4-基、1-甲基吡咯-2-基和噻吩-3-基；R2代表甲基、乙基和丙基；R3代表氫、氯或溴；和R4代表5-甲基吡唑-3-基、5-乙基吡唑-3-基、5-異丙基吡唑-3-基、5-丙基吡唑-3-基、5-叔丁基吡唑-3-基和5-環丙基吡唑-3-基。
本發明化合物的例子包括5-溴-2-(3-甲基異噁唑-5-基甲基氨基)-4-(5-甲基-1H-吡唑-3-基氨基)嘧啶；5-氯-2-(3-甲基異噁唑-5-基甲基氨基)-4-(5-甲基-1H-吡唑-3-基氨基)嘧啶；5-溴-2-(3-甲基異噁唑-5-基甲基氨基)-4-(5-環丙基-1H-吡唑-3-基氨基)嘧啶；5-氯-2-(3-異丙基異噁唑-5-基甲基氨基)-4-(5-甲基-1H-吡唑-3-基氨基)嘧啶；5-氯-2-(3-苯基異噁唑-5-基甲基氨基)-4-(5-甲基-1H-吡唑-3-基氨基)嘧啶；5-溴-2-[3-(2-甲氧基苯基)異噁唑-5-基甲基氨基]-4-(5-甲基-1H-吡唑-3-基氨基)嘧啶；5-氯-2-[3-(2-甲氧基苯基)異噁唑-5-基甲基氨基]-4-(5-甲基-1H-吡唑-3-基氨基)嘧啶；5-氯-2-(3-吡啶-2-基異噁唑-5-基甲基氨基)-4-(5-甲基-1H-吡唑-3-基氨基)嘧啶；5-溴-2-(3-吡啶-2-基異噁唑-5-基甲基氨基)-4-(5-甲基-1H-吡唑-3-基氨基)嘧啶；5-溴-2-(3-甲基異噁唑-5-基甲基氨基)-4-(5-叔丁基-1H-吡唑-3-基氨基)嘧啶；5-氯-2-(3-甲基異噁唑-5-基甲基氨基)-4-(5-叔丁基-1H-吡唑-3-基氨基)嘧啶；5-溴-2-(3-甲基異噁唑-5-基甲基氨基)-4-(5-乙基-1H-吡唑-3-基氨基)嘧啶；5-溴-2-(2-呋喃-2-基乙基氨基)-4-(5-甲基-1H-吡唑-3-基氨基)嘧啶；5-溴-2-(吡啶-3-基甲基氨基)-4-(5-叔丁基-1H-吡唑-3-基氨基)嘧啶；5-氯-2-(吡啶-3-基甲基氨基)-4-(5-叔丁基-1H-吡唑-3-基氨基)嘧啶；5-氯-2-(吡啶-2-基甲基氨基)-4-(5-叔丁基-1H-吡唑-3-基氨基)嘧啶；5-溴-2-(吡啶-3-基甲基氨基)-4-(5-甲基-1H-吡唑-3-基氨基)嘧啶；5-溴-2-[2-(咪唑-4-基乙基)氨基]-4-(5-甲基-1H-吡唑-3-基氨基)嘧啶；5-溴-2-(吡啶-2-基甲基氨基)-4-(5-甲基-1H-吡唑-3-基氨基)嘧啶；5-氯-2-[2-(吡啶-2-基)乙基氨基]-4-(5-甲基-1H-吡唑-3-基氨基)嘧啶；5-溴-2-[2-(吡啶-3-基)乙基氨基]-4-(5-甲基-1H-吡唑-3-基氨基)嘧啶；5-溴-2-(5-甲基吡嗪-2-基甲基氨基)-4-(5-甲基-1H-吡唑-3-基氨基)嘧啶；5-溴-2-(吡啶-3-基甲基氨基)-4-(5-環丙基-1H-吡唑-3-基氨基)嘧啶；以及任何上述化合物的藥學上可接受的鹽和溶劑合物。
在本發明的另一方面中，本發明的具體化合物為實施例3、5、8、9、11、12、34、39、40、41、47、48、68、70和79中的任何一種化合物或其藥學上可接受的鹽和溶劑合物。
在本發明的另一方面中，本發明的具體化合物為各實施例中的任何一種化合物或其藥學上可接受的鹽和溶劑合物。
本發明還提供一種制備如上所定義的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑合物的方法，所述方法包括(i)使下式的化合物 [其中L1代表離去基團(例如鹵素或磺酰氧基，如甲磺酰氧基或甲苯-4-磺酰氧基)，R3和R4如式(I)所定義]與式(III)H2N-R2-R1[其中R1和R2如式(I)所定義]的化合物進行反應；或(ii)使下式的化合物 [其中L2代表離去基團(例如鹵素或磺酰氧基，如甲磺酰氧基或甲苯-4-磺酰氧基)，R1、R2和R3如式(I)所定義]與式(V)H2N-R4[其中R4如式(I)所定義]的化合物進行反應；或
(iii)使下式的化合物 [其中R1和R2如式(I)所定義]與下式的化合物進行反應 [其中X代表氧原子，q為1，或者X代表氮原子，q為2，每一個R20各自代表C1-C6烷基，R3和R4如式(I)所定義]；或(iv)當R4代表取代的吡唑基時，使下式的化合物 [其中R21代表C1-C6烷基或C3-C6環烷基，R1、R2和R3如式(I)所定義]與肼進行反應；并且任選在(i)、(ii)、(iii)或(iv)之后進行以下步驟的一個或多個●將所得的化合物轉化為本發明的其它化合物●形成所述化合物的藥學上可接受的鹽或溶劑合物。
可方便地如下進行方法(i)和(ii)a)在適宜的溶劑，例如丙酮等酮或者乙醇或丁醇等醇或者甲苯或N-甲基吡咯烷-2-酮等芳烴存在下，任選在適宜的酸例如鹽酸或硫酸等無機酸或者乙酸或甲酸等有機酸(或適合的路易斯酸)存在下，并且在0℃至回流，特別是回流的溫度范圍內；或b)在標準Buchwald條件下(例如參見J.Am.Chem.Soc.，118，7215；J.Am.Chem.Soc.，119，8451；J.Org.Chem.，62，1568和6066)，例如在乙酸鈀的存在下，在具有適宜的堿如碳酸銫等無機堿或叔丁醇鉀等有機堿的適宜溶劑例如甲苯、苯或二甲苯等芳族溶劑中，在適宜的配體如2，2’-雙(二苯膦基)-1，1’-聯萘存在下以及在25-80℃的溫度范圍內。
方法(iii)可方便地在適宜的溶劑如N-甲基吡咯烷酮或丁醇中，在100-200℃、特別是150-170℃的溫度范圍內進行。反應優選在適宜的堿如甲醇鈉或碳酸鉀的存在下進行。
方法(iv)可在適宜的溶劑例如乙醇或丁醇等醇中，在50-120℃、特別是70-100℃的溫度范圍內進行。
式(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)、(VII)和(VIII)的化合物可以是市場上買得到的，在文獻中已知的，也可以采用已知的技術進行制備。
采用標準方法可將式(I)的化合物轉化為式(I)的其它化合物。可采用的轉化反應類型的例子包括通過芳族取代反應引入取代基、取代基的還原反應、取代基的烷基化反應和取代基的氧化反應。這些方法的試劑和反應條件在化學領域中是眾所周知的。芳族取代反應的具體例子包括采用濃硝酸引入硝基；在弗瑞德-克來福特條件下采用例如酰鹵和路易斯酸(如三氯化鋁)引入酰基；在弗瑞德-克來福特條件下采用烷基鹵和路易斯酸(如三氯化鋁)引入烷基；以及引入鹵代基團。還原反應的具體例子包括通過采用鎳催化劑進行催化氫化或在鹽酸存在和加熱條件下用鐵進行處理將硝基還原為氨基；氧化反應的具體例子包括將烷硫基氧化為烷基亞硫酰基或烷基磺酰基。
本領域的技術人員將意識到在本發明的方法中，原料試劑或中間化合物中的一些官能團如羥基或氨基需要得到保護基的保護。因此，式(I)化合物的制備在不同的階段中將包括一個或多個保護基的添加和去除。
有關官能團的保護與脫保護見述于“Protective Groups in OrganicChemistry”，J.W.F.McOmie編輯，Plenum Press(1973)和“ProtectiveGroups in Organic Synthesis”，第二版，T.W.Greene和P.G.M.Wuts，Wiley-Interscience(1991)。
可將上述式(I)化合物轉化為其藥學上可接受的鹽或溶劑合物，優選為酸加成鹽，如氫氯酸鹽、氫溴酸鹽、磷酸鹽、乙酸鹽、延胡索酸鹽、馬來酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸鹽、草酸鹽、甲磺酸鹽或對甲苯磺酸鹽；或堿金屬鹽，如鈉鹽或鉀鹽。
某些式(I)化合物能夠以立體異構體的形式存在。應認識到本發明包括式(I)化合物及其混合物(包括外消旋物)的所有幾何異構體和旋光異構體(包括阻轉異構體)的用途。互變異構體及其混合物的用途也構成了本發明的一個方面。例如，當R4為吡唑基時，吡唑基-5-基和吡唑基-3-基是同一化合物的互變異構體。
式(I)化合物具有作為藥物的活性，特別是作為胰島素樣生長因子-1受體(IGF-1R)活性調節劑或抑制劑，可用于治療各種增殖和超增殖疾病/癥狀，其例子包括以下癌癥(1)各種惡性腫瘤，包括膀胱癌、腦癌、乳腺癌、結腸癌、腎癌、肝癌、肺癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、胃癌、子宮頸癌、結腸癌、甲狀腺癌和皮膚癌；(2)淋巴系統的各種造血腫瘤，包括急性淋巴細胞白血病、B細胞淋巴瘤和伯基特氏淋巴瘤；(3)骨髓系統的各種造血腫瘤，包括急性與慢性骨髓性白血病和前骨髓細胞白血病；(4)間充質原點的各種腫瘤，包括纖維肉瘤和橫紋肌肉瘤；和
(5)其它腫瘤，包括黑瘤、精原細胞瘤、tetratocarcinoma、神經母細胞瘤和神經膠質瘤。
本發明化合物特別可用于治療乳房和前列腺的腫瘤。
因此，本發明提供了如此前所定義的用于治療的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑合物。
本發明在另一方面提供了如前所定義的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑合物在生產用于治療的藥物中的用途。
在本說明書的上下文中，除非具體指明有相反意思，否則術語“治療”也包括“預防”。相應地，術語“治療的”和“治療地”情況也一樣。
本發明也提供了一種治療癌癥的方法，該方法包括給予有此需要的患者治療有效量的如前所定義的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑合物。
本發明還提供了一種調節胰島素樣生長因子-1受體(IGF-1R)活性的方法，該方法包括給予有此需要的患者治療有效量的如前所定義的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑合物。
式(I)化合物及其藥學上可接受的鹽和溶劑合物可單獨使用，但通常以藥物組合物的形式給藥，其中式(I)化合物/鹽/溶劑合物(活性成分)與藥學上可接受的佐劑、稀釋劑或載體結合。根據給藥的模式，所述藥物組合物優選包含0.05-99％w(重量百分數)、更優選0.05-80％w、還更優選0.10-70％w，甚至更優選0.10-50％w的活性成分，所有的重量百分數均基于總的組合物重量計。
本發明還提供了一種藥物組合物，該組合物包含如前所定義的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑合物，以及包含藥學上可接受的佐劑、稀釋劑或載體。
本發明還提供了一種制備本發明藥物組合物的方法，該方法包括將如前所定義的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑合物與藥學上可接受的佐劑、稀釋劑或載體進行混合。
所述藥物組合物可以如下形式給予以例如乳膏劑、溶液、混懸劑、七氟烷烴氣霧劑和干粉制劑的形式進行局部給藥(如施用于皮膚或肺部和/或氣管)；例如通過以片劑、膠囊劑、糖漿劑、散劑或顆粒劑的形式經口服進行全身給藥；或以溶液或混懸劑的形式進行胃腸外給藥；或進行皮下給藥；或以栓劑的形式進行直腸給藥；或進行透皮給藥。
本發明組合物可以采用本領域眾所周知的各種常見藥物賦形劑通過常規方法得到。因此，用于口服的組合物可以含有例如一種或多種著色劑、甜味劑、矯味劑和/或防腐劑。
用于片劑的適宜的藥學上可接受的各種賦形劑包括例如各種惰性稀釋劑如乳糖、碳酸鈉、磷酸鈣或碳酸鈣、成粒劑和崩解劑如玉米淀粉或algenic酸；粘合劑如淀粉；潤滑劑如硬脂酸鎂、硬脂酸或滑石；防腐劑如對羥基苯甲酸乙酯或丙酯和抗氧化劑如抗壞血酸。片劑可以不進行包衣或包衣以便改善其崩解及其后活性成分在胃腸道內的吸收，或改進其穩定性和/或外觀，各種情況下均采用本領域眾所周知的常見包衣材料及方法。
用于口服的組合物可以是硬明膠膠囊的形式，其中活性成分與惰性固體稀釋劑如碳酸鈣、磷酸鈣或高嶺土混合；或為軟明膠膠囊的形式，其中活性成分與水或油如花生油、液體石蠟或橄欖油混合。
含水混懸劑一般可含有細粉狀活性成分及一種或多種懸浮劑如羧基甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥丙甲基纖維素、藻酸鈉、聚乙烯吡咯烷酮、黃蓍樹膠和阿拉伯樹膠；分散劑或濕潤劑如卵磷脂或烯化氧與脂肪酸的縮合產物(如聚氧乙烯硬脂酸酯)或環氧乙烷與長鏈脂族醇的縮合產物(如十七乙烯氧基鯨蠟醇)或環氧乙烷與衍生自脂肪酸和己糖醇的偏酯的縮合產物(如聚氧乙烯山梨糖醇一油酸酯)或環氧乙烷與長鏈脂族醇的縮合產物(如十七乙烯氧基鯨蠟醇)或環氧乙烷與衍生自脂肪酸和己糖醇的偏酯的縮合產物(如聚氧乙烯山梨糖醇一油酸酯)或環氧乙烷與衍生自脂肪酸和己糖醇酐的偏酯的縮合產物(如聚乙烯脫水山梨醇一油酸酯)。含水懸混劑還可含有一種或多種防腐劑(如對羥基苯甲酸乙酯或丙酯)、抗氧化劑(如抗壞血酸)、著色劑、矯味劑和/或甜味劑(如蔗糖、糖精或天冬甜精)。
油性懸混劑可通過將活性成分懸浮于植物油(如花生油、橄欖油、芝麻油或椰子油)或礦物油(如液體石蠟)進行配制。油性懸混劑也可含有增稠劑，如蜂蠟、硬石蠟或鯨蠟醇。可加入如上所述的甜味劑和矯味劑以得到可口的口服制劑。可通過加入抗氧化劑如抗壞血酸保存這些組合物。
適用于通過加入水制備含水懸混劑的可分散粉末及顆粒一般含有活性成分和分散劑或濕潤劑、懸浮劑及一種或多種防腐劑。適宜的分散劑或濕潤劑及懸浮劑為上述已列舉的那些。還可存在其它的賦形劑如甜味劑、矯味劑和著色劑。
本發明的藥物組合物也可以是水包油型乳液。油相可以是例如橄欖油或花生油等植物油或例如液體石蠟等礦物油或其混合物。適宜的乳化劑可以是例如各種天然形成的樹膠，如阿拉伯樹膠或黃蓍樹膠；各種天然形成的磷脂，如大豆、卵磷脂、衍生自脂肪酸和己糖醇酐的酯或偏酯(如失水山梨糖醇單油酸酯)和所述偏酯與環氧乙烷的縮合產物(如聚氧乙烯失水山梨糖醇單油酸酯)。乳劑也可含有甜味劑、矯味劑和防腐劑。
糖漿劑和酏劑可用各種甜味劑(如甘油、丙二醇、山梨糖醇、天冬甜精或蔗糖)進行配制，它們也可含有緩和劑、防腐劑、矯味劑和/或著色劑。
根據已知方法，采用上述一種或多種適當的分散劑或濕潤劑和懸浮劑可將藥物組合物配制成無菌可注射水性或油性混懸劑的形式。無菌可注射制劑也可以是無毒的胃腸外可接受的稀釋劑或溶劑中的無菌可注射溶液或混懸劑，例如在1，3-丁二醇中的溶液。
通過將活性成分與適宜的沒有刺激性的賦形劑一起混合可制備栓劑制劑，所述適宜的賦形劑在常溫下為固體但在直腸溫度下為液體因此可以在直腸內熔化從而釋放出藥物。適宜的賦形劑包括例如可可油和聚乙二醇。
局部用制劑如乳膏劑、軟膏劑、凝膠劑和水性或油性溶液或混懸劑一般可采用本領域眾所周知的常用方法，通過使活性成分與常見的可局部施用的載體或稀釋劑進行配制而獲得。
通過吹入給藥的組合物可以是含有平均粒徑為例如30μ或更小的顆粒的微細粉碎粉末的形式，粉末本身可單獨包含活性成分，也可被一種或多種生理學可接受的載體如乳糖所稀釋。然后將用于吹入的粉末方便地保留在裝有例如1-50mg活性成分的膠囊內，與渦輪吹入器裝置，例如用于吹入已知藥劑色甘酸鈉的裝置一起使用。
通過吸入給藥的組合物可以是常見加壓氣霧劑的形式，以含有微細固體或液滴的氣霧劑的形式分配活性成分。可使用常規的氣溶膠推進劑，如揮發性的氟化烴或烴，并且適宜地安排氣霧劑裝置以便分配計量的活性成分。
有關制劑方面的進一步信息，建議讀者參見ComprehensiveMedicinal Chemistry，第5卷，25.2章(Corwin Hansch；編輯委員會主席)，Pergamon Press 1990。
根據眾所周知的藥理，用于治療目的的本發明化合物的劑量大小自然隨癥狀的性質和嚴重程度、動物或患者的年齡和性別以及給藥途徑的不同而異。
一般而言，如果需要以分劑量給藥，則給予本發明化合物應使每日劑量范圍達到例如0.5-75mg活性成分/kg體重。當采用胃腸外途徑時，通常給予較低的劑量。因此，例如對靜脈給藥而言，通常采用0.5-30mg活性成分/kg體重的劑量范圍。類似地，對吸入給藥而言，通常采用0.5-25mg活性成分/kg體重的劑量范圍。然而，優選經口給藥。例如，用于人類經口給藥的制劑通常含有例如0.5mg-2g的活性成分。
有關給藥途徑及劑量方案方面的進一步信息，建議讀者參見Comprehensive Medicinal Chemistry，第5卷，25.3章(Corwin Hansch；編輯委員會主席)，Pergamon Press 1990。
實施例本發明現將參照以下示例性的實施例進行進一步的描述，在實施例中，除非另有說明，否則(i)溫度為攝氏度(℃)；操作在室溫或環境溫度下，即18-25℃的溫度下進行；(ii)有機溶液用無水硫酸鎂進行干燥；溶劑的蒸發采用旋轉式汽化器，在減壓(600-4000帕；4.5-30mmHg)和最高達60℃的浴溫下進行；(iii)層析指的是在硅膠上進行的快速層析；薄層色譜(TLC)在硅膠板上進行；(iv)一般來說，反應過程后進行TCL，且給出的反應時間僅作為舉例說明之用；(v)最終的產物具有令人滿意的質子核磁共振(NMR)譜和/或質譜數據；(vi)給出的收率僅作為舉例說明之用，而且不一定是通過努力開發工藝才能獲得的那些收率；如需要多種材料，可重復制備過程；(vii)除非另有說明，否則給出的NMR數據是在300MHz、DMSO-d6+CD3COOD中測得的主要鑒定質子的δ值，為相對于內標四甲基硅烷(TMS)的百萬分率(ppm)；(viii)各化學符號具有其通常的意義；使用SI單位及符號；(ix)給出的溶劑比為體積∶體積(v∶v)；和(x)采用70電子伏特的電子能量，以化學電離(CI)模式，采用直接曝光探頭進行質譜分析；其中所述電離受電子碰撞(EI)、快速原子轟擊(FAB)或電霧化(ESP)的影響；給出了m/z值；一般情況下僅記錄表示起始質量(parent mass)的離子；并且除非另有說明，否則所列出的質量離子為(MH)+；(xii)使用了以下各縮寫THF四氫呋喃DMFN，N-二甲基甲酰胺EtOAc 乙酸乙酯DCM二氯甲烷；和DMSO 二甲基亞砜實施例15-溴-2-(3-甲基異噁唑-5-基甲基氨基)-4-(5-甲基-1H-吡唑-3-基氨基)嘧啶在120℃下，將5-氨基甲基-3-甲基異噁唑鹽酸鹽(890mg，6.0毫摩爾)、5-溴-2-氯-4-(5-甲基-1H-吡唑-3-基氨基)嘧啶(方法1；578mg，2.0毫摩爾)和N，N-二異丙基乙胺(1.4ml，8.0毫摩爾)在1-丁醇(10ml)中的混合物加熱18小時。將混合物冷卻至環境溫度并通過蒸發去除揮發物。剩余物用醚研制，過濾收集產物，得到標題化合物(225mg，31％)。1H NMR(DMSO)δ2.15(s，3H)，2.2(s，3H)，4.5(m，2H)，6.1(br s，2H)，7.6(br s，1H)，8.0(br s，2H)，12.05(br s，1H)；MSm/z 366。
實施例2-12根據與實施例1類似的方法，用適宜的嘧啶(SM1)和胺(SM2)替代后合成以下的各種化合物(在DMSO-d6中記錄NMR)。未標明原材料之處，該化合物為可從市面購得的商品。
1需要進行含水后處理2通過用DCM/甲醇(95∶5)洗脫的硅膠柱層析進行純化實施例135-溴-2-(2-呋喃-2-基乙基氨基)-4-(5-甲基-1H-吡唑-3-基氨基)嘧啶在120℃下，將5-溴-2-氯-4-(5-甲基-1H-吡唑-3-基氨基)嘧啶(方法1；290mg，1.0毫摩爾)、2-(2-氨基乙基)呋喃(330mg，3.0毫摩爾)和1-丁醇(5ml)的混合物加熱5小時。將混合物冷卻至環境溫度并通過蒸發去除揮發物。將剩余物溶解于DCM中，用水及鹽水洗滌。分離出有機物，干燥(MgSO4)，并通過蒸發去除溶劑。剩余物用醚研制，收集固體產物，并通過硅膠柱層析進行純化，用DCM/甲醇(95∶5)洗脫，得到標題化合物(80mg，22％)。1H NMR(DMSO)δ2.1(s，3H)，2.85(m，2H)，3.45(m，2H)，6.10(m，1H)，6.35(m，1H)，6.4(brs，1H)，7.15(br s，1H)，7.5(s，1H)，8.0(br s，2H)，12.05(br s，1H)；MSm/z 363。
實施例14-106根據與實施例13類似的方法，用適宜的嘧啶(SM1)和胺(SM2)原材料替代后合成以下的各種化合物。未標明原材料之處，該化合物為可從市面購得的商品。
1加熱12小時。
2加熱24小時。
3用2M NH3/MeOH將反應液處理至pH9。過濾沉淀物并用蒸餾水及二乙醚洗滌。
4不進行含水后處理，從DCM中沉淀出產物。
5不必進行色譜分析。
6500MHz(393K)。
7不采用d4乙酸進行NMR。
8在373K/400MHz處進行NMR。
9在343K時不采用d4乙酸進行NMR。
10NMR使用三氟氘化的乙酸-d1代替乙酸-d4。
11在CD3OD中進行NMR。
12通過本文中所述方法可制備出化合物。
13采用色譜分析中所用的甲醇進行酯交換。
實施例1075-溴-2-(3-氨基甲酰基異噁唑-5-基甲基氨基)-4-(5-甲基-1H-吡唑-3-基氨基)嘧啶將5-溴-2-[3-(甲氧基羰基)異噁唑-5-基甲基氨基]-4-(5-甲基-1H-吡唑-3-基氨基)嘧啶(實施例10450mg，0.11毫摩爾)懸浮于7N的甲醇氨(5ml)中，并在環境溫度下攪拌18小時。通過蒸發去除揮發物，剩余物用DCM/二乙醚(50∶50)研制，過濾收集產物得到標題化合物(35mg，76％)。NMR(DMSO)2.18(s，3H)，4.57(d，2H)，6.28(br s，1H)，6.50(s，1H)，7.72(s，2H)，8.01(s，1H)，8.05(s，1H)，12.06(s，1H)；m/z 393(MH)+。
原材料的制備用于上述各實施例中的各種原材料可以是從市面上購得的商品，也可以通過標準方法從已知的材料容易地制備得到。例如，以下的反應是用于上述反應中的部分原材料的非限制性的例證。
方法15-溴-2-氯-4-(5-甲基-1H-吡唑-3-基氨基)嘧啶將5-溴-2，4-二氯嘧啶(10.0g，44毫摩爾)、3-氨基-5-甲基-1H-吡唑(6.0g，62毫摩爾)和N，N-二異丙基乙胺(9.20ml，53毫摩爾)的1-丁醇(80ml)溶液在85℃加熱12小時。使混合物冷卻至環境溫度，過濾收集所得沉淀物。用乙醇洗滌固體產物并進行干燥，得到小標題化合物(10.8g，85％)。1H NMR(DMSO)δ2.23(s，3H)，6.23(s，1H)，8.39(s，1H)，9.21(s，1H)，12.27(s，1H)；MSm/z 290(MH)+。
方法22-氧代丁腈在環境溫度下，將乙腈(13.7ml，260毫摩爾)加入到氫化鈉(10.4g在礦物油中的60％懸浮液，260毫摩爾)在丙酸乙酯(22.3g，220毫摩爾)中的懸浮液和無水1，4-二噁烷(200ml)中。在100℃下加熱混合物12小時，然后冷卻。加入水，用濃鹽酸將混合物的pH調節至2.0，并用DCM進行萃取。將萃取液合并干燥(MgSO4)，通過蒸發去除揮發物。通過硅膠柱層析，用DCM洗脫純化剩余物，得到油狀的標題化合物(20g，94％)。NMR(CDCl3)1.10(t，3H)，2.65(q，2H)，3.50(s，2H)。
方法3-5通過方法2的方法，采用適當的原材料制備以下各種化合物。
方法63-氨基-5-乙基-1H-吡唑將一水合肼(11.3g，230毫摩爾)加入到3-氧代丁腈(方法2；20.0g，210毫摩爾)的乙醇(50ml)溶液中，將混合物在70℃下加熱12小時。蒸發去除揮發物，通過硅膠柱層析，用DCM/甲醇(90∶10)洗脫純化剩余物，得到油狀的標題化合物(10.2g，44％)。NMR(DMSO)1.10(t，3H)，2.40(q，2H)，5.15(s，1H)；m/z 112(MH)+。
方法7-9通過方法6的方法，采用適當的原材料制備以下各種化合物。
方法102，5-二氯-4-(5-甲基-1H-吡唑-3-基氨基)嘧啶將2，4，5-三氯嘧啶(6.0g，32.6毫摩爾)、3-氨基-5-甲基-1H-吡唑(3.18g，32.7毫摩爾)和N，N-二異丙基乙胺(6.30ml，36.2毫摩爾)的1-丁醇(50ml)溶液在100℃加熱2小時。蒸發去除揮發物，剩余物用DCM研制，得到白色固體狀的標題化合物(5.7g，72％)。NMR(DMSO)2.23(s，3H)，6.23(s，1H)，8.39(s，1H)，9.21(s，1H)，12.27(s，1H)；m/z 290(MH)+。
方法11-21通過方法10的方法，采用適當的原材料制備以下各種化合物。
方法22α-氯苯甲醛肟分次將N-氯代琥珀酰亞胺(5.50g，41.3毫摩爾)加入到苯甲醛肟(5.0g，41.3毫摩爾)的DMF(34ml)溶液中，使溫度不超過35℃。環境溫度下攪拌混合物2小時，然后用冰浴冷卻。加入水，用醚萃取含水混合物。合并有機物，用水及鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，蒸發去除溶劑，得到油狀的標題化合物(6.43g，100％)。NMR(CDCl3)7.4(m，3H)，7.8(d，2H)，8.9(bs，1H)。
方法23-33通過方法22的方法，采用適當的原材料制備以下各種化合物。
方法34根據在Tetrahedron 2000，56，1057-1064中所述的方法制備α-氯-吡啶-3-基甲醛肟。
方法353-甲氧基苯甲醛肟將鹽酸羥胺(10g，0.144摩爾)的蒸餾水(20ml)溶液加入到20％(w/v)的氫氧化鈉水溶液(28ml)中。一次性加入3-甲氧基苯甲醛(14ml，0.12摩爾)，將混合物在0-5℃下攪拌2小時。將混合物調節至pH7，并用二氯甲烷萃取。合并萃取液，干燥(MgSO4)，蒸發去除溶劑，得到無色油狀的標題化合物(18.7g，100％)。NMR(CDCl3)3.8(s，3H)，6.9(m，1H)，7.1(m，2H)，7.15(m，1H)，8.1(s，1H)，8.6(br s，1H)。
方法36-42通過方法35的方法，采用適當的原材料制備以下各種化合物。
方法435-(叔丁氧基羰基氨基甲基)-3-苯基異噁唑將α-氯代苯甲醛肟(方法22；1g，6.4毫摩爾)的THF(13ml)溶液滴加到周冰浴冷卻的N-叔丁氧基羰基-炔丙胺(0.5g，3.2毫摩爾)和三乙胺(0.9ml，6.4毫摩爾)的THF(25ml)溶液中。使混合物加熱至環境溫度，并攪拌2天。蒸發去除揮發物，將剩余物溶解于DCM中。用水及鹽水洗滌溶液，干燥(MgSO4)，蒸發去除溶劑。剩余物用異己烷/乙醚(9∶1)研制并通過過濾進行收集，得到標題化合物(473mg，54％)。NMR(CDCl3)1.45(s，9H)，4.45(d，2H)，5.10(bs，1H)，6.5(s，1H)，7.42(m，3H)，7.8(m，2H)。
方法44-55通過方法43的方法，采用適當的原材料制備以下各種化合物。
方法565-氨基甲基-3-苯基異噁唑將三氟乙酸(1.7ml，2.6毫摩爾)滴加到在冰浴中冷卻的5-(叔丁氧基羰基氨基甲基)-3-苯基異噁唑(方法43；473mg，1.73毫摩爾)的DCM(8ml)溶液中。使混合物加熱至環境溫度，并攪拌18小時，蒸發去除揮發物。剩余物用乙醚研制，得到標題化合物(427mg，86％)。NMR(DMSO)4.33(s，2H)，7.1(s，1H)，7.5(m，3H)，7.8(m，2H)，8.6(br s，3H)。
方法57-68通過方法56的方法，采用適當的原材料制備以下各種化合物。
方法695-(叔丁氧基羰基氨基甲基)-3-(吡啶-2-基)異噁唑將次氯酸鈉(16ml的14％w/v水溶液，29.5毫摩爾)滴加至在冰浴中冷卻的2-吡啶醛肟(2g，16.4毫摩爾)和N-叔丁氧基羰基-炔丙胺(5.6g，36.1毫摩爾)的DCM(30ml)溶液中。劇烈攪拌混合物，加熱至環境溫度，并攪拌18小時。分離出水層并用DCM萃取。合并有機萃取液，干燥(MgSO4)，蒸發去除溶劑。通過硅膠柱層析，用二乙醚/異己烷(1∶1)洗脫純化剩余物，得到標題化合物(1.93g，43％)。NMR(CDCl3)1.45(s，9H)，4.5(m，2H)，5.03(bs，1H)，6.8(s，1H)，7.35(m，1H)，7.8(m，1H)，8.05(d，1H)，8.67(m，1H)。
方法705-氨基甲基-3-(吡啶-2-基)異噁唑如方法56所述處理5-(叔丁氧基羰基氨基甲基)-3-(吡啶-2-基)異噁唑(方法69)，得到5-氨基甲基-3-(2-吡啶基)異噁唑。NMR(DMSO)4.38(s，2H)，7.1(s，1H)，7.5(m，1H)，7.95(m，2H)，8.65(brs，3H)，8.7(m，1H)。
方法713-甲基-5-(1-鄰苯二酰氨基乙基)異噁唑在環境溫度下，將三乙胺(0.35ml，2.5毫摩爾)的甲苯(15ml)溶液滴加至異氰酸苯酯(5.43ml，50毫摩爾)、硝基乙烷(2.15ml，30毫摩爾)和N-(丁-1-炔-3-基)鄰苯二酰胺(5.0g，25毫摩爾)的甲苯(65ml)溶液中。將混合物攪拌18小時，過濾并蒸發去除揮發物。用乙醚研制剩余物，過濾收集產物得到標題化合物(5.35g，89％)。NMR(CDCl3)1.88(d，3H)，2.27(s，3H)，5.60(q，H)，6.11(s，H)，7.69-7.75(m，2H)，7.79-7.85(m，2H)；m/z 257(MH)+。
方法725-(1-氨基乙基)-3-甲基異噁唑將3-甲基-5-(1-鄰苯二酰氨基乙基)異噁唑(方法71；3.55g，13.9毫摩爾)、一水合肼(0.75ml，15.3毫摩爾)和乙醇(50ml)的混合物在回流下加熱4小時。使混合物冷卻至環境溫度，加入冰醋酸(8.8ml，153毫摩爾)，然后將混合物在回流下加熱2小時。使混合物冷卻至環境溫度，用50％的氫氧化鈉水溶液中和混合物，用水稀釋并用DCM萃取，用水及鹽水洗滌合并的萃取液。分離出有機物，干燥(MgSO4)，蒸發去除溶劑。將剩余物溶解于乙醇中，用過量的1N含醚氯化氫進行處理，蒸發去除揮發物，得到標題化合物(1.52g，87％)。NMR(DMSO)1.46(dd，3H)，2.20(m，3H)，4.39(q，H)，6.38(s，1H)，6.60(br s，3H)；m/z 127(MH)+。
方法733-乙氧基羰基-5-[N-(叔丁氧基羰基)氨基甲基]異噁唑在3小時內將氯代肟基乙酸乙酯(10g，66毫摩爾)的THF(200ml)溶液滴加至N-(叔丁氧基羰基)炔丙胺(20.5g，131毫摩爾)和三乙胺(11.2ml，80毫摩爾)的四氫呋喃(100ml)溶液混合物中。在環境溫度下攪拌混合物18小時，然后蒸發去除揮發物。將剩余物溶解于DCM中，并用水及鹽水洗滌。分離出有機物，干燥(MgSO4)，蒸發去除溶劑。通過硅膠柱層析，用異己烷/乙醚(先用80∶20，再用50∶50)洗脫純化剩余物，得到標題化合物(10.6g，60％)。NMR(DMSO)1.3(t，3H)，1.38(s，9H)，4.35(m，2H)，6.62(s，1H)，7.55(s，1H)；m/z 269(M-H)-。
方法743-乙氧基羰基-5-氨基甲基異噁唑將三氟乙酸(2.1ml，29毫摩爾)加入到3-乙氧基羰基-5-[N-(叔丁氧基羰基)氨基甲基]異噁唑(方法73；790mg，2.9毫摩爾)的DCM(15ml)溶液中。將混合物在環境溫度下攪拌4小時，然后蒸發去除揮發物。剩余物用二乙醚研制得到標題化合物(763g，93％)。NMR(DMSO)1.31(t，3H)，4.37(m，2H)，6.97(s，1H)，8.64(s，3H)；m/z171(MH)+。
方法753-羥基甲基-5-[N-(叔丁氧基羰基)氨基甲基]異噁唑在0℃及氮氣氛下，將氫硼化鈉(610mg，16毫摩爾)分次加入到3-乙氧基羰基-5-[N-(叔丁氧基羰基)氨基甲基]異噁唑(方法73；1.62g，6毫摩爾)的乙醇(15ml)溶液中。將混合物在環境溫度下攪拌4小時，然后用飽和的碳酸氫鈉水溶液驟冷。將混合物用EtOAc萃取，有機物用鹽水洗滌，然后進行干燥(MgSO4)。蒸發去除溶劑得到標題化合物(1.25g，91％)。NMR(DMSO)1.38(s，9H)，4.21(d，2H)，4.44(s，2H)，5.40(br s，1H)，6.21(s，1H)，7.49(br s，1H)；m/z229(MH)+。
方法763-羥基甲基-5-氨基甲基異噁唑將三氟乙酸(4ml，54毫摩爾)加入到3-羥基甲基-5-[N-(叔丁氧基羰基)氨基甲基]異噁唑(方法75；1.25g，5.4毫摩爾)的DCM(40ml)溶液中。將混合物在環境溫度下攪拌18小時，然后蒸發去除揮發物。通過在SCX-2柱(50g)上進行層析，先用甲醇，再用7N氨的甲醇溶液洗脫純化剩余物，得到標題化合物(676mg，96％)。NMR(DMSO)1.97(br s，2H)，3.76(s，2H)，4.44(s，2H)，5.38(s，1H)，6.26(s，1H)。
方法773-(吡咯烷-1-基羰基)-5-[N-(叔丁氧基羰基)氨基甲基]異噁唑將3-乙氧基羰基-5-[N-(叔丁氧基羰基)氨基甲基]異噁唑(方法73；500mg，1.85毫摩爾)溶解于吡咯烷(4ml)中，將混合物在85℃下加熱3小時。蒸發去除揮發物，剩余物用二乙醚研制，得到白色固體狀的標題化合物(432mg，79％)。NMR(DMSO)1.38(s，9H)，1.85(m，4H)，3.50(t，2H)，3.62(t，2H)，4.29(d，2H)，6.47(1H)，7.53(s，1H)；m/z 240(M-C4H8)+。
方法783-(吡咯烷-1-基羰基)-5-氨基甲基]異噁唑如方法74所述使3-(吡咯烷-1-基羰基)-5-[N-(叔丁氧基羰基)氨基甲基]異噁唑(方法77)脫保護，得到其三氟乙酸鹽形式的標題化合物(428mg，95％)。NMR(DMSO)1.88(m，4H)，3.49(t，2H)，3.63(t，2H)，4.35(s，2H)，6.83(s，1H)，8.58(s，3H)；m/z 196(MH)+。
方法795-[N-(叔丁氧基羰基)氨基甲基]-3-(2-碘苯基)異噁唑如方法22和43所述處理2-碘代苯甲醛肟(方法42)，得到標題化合物。
方法805-[N-(叔丁氧基羰基)氨基甲基]-3-(2-氰基苯基)異噁唑在氮氣下將氰化銅(I)(2.49g，27.8毫摩爾)、氰化四正丁基銨(1.87g，6.95毫摩爾)、三(二亞芐基丙酮)合二鈀(O)(0.247g，0.28毫摩爾)和二苯膦基二茂鐵(0.619g，1.12毫摩爾)加入到5-[N-(叔丁氧基羰基)氨基甲基]-3-(2-碘苯基)異噁唑(方法79；2.78g，6.95毫摩爾)的1，4-二噁烷(35ml)脫氣溶液中。將混合物在回流下加熱3小時，冷卻至環境溫度，用EtOAc稀釋并經硅藻土過濾。濾液用飽和的碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，蒸發去除溶劑。通過硅膠柱層析，用EtOAc/異己烷(極性從15∶85增加至25∶75)洗脫純化剩余物，得到標題化合物(1.29g，62％)。NMR(CDCl3)1.49(s，9H)，4.52(d，2H)，5.09(br s，H)，6.81(s，H)，7.55(t，H)，7.70(t，H)，7.79(d，H)，7.95(d，H)；m/z 300(MH)+。
方法815-氨基甲基-3-(2-氰基苯基)異噁唑如方法56所述處理5-[N-(叔丁氧基羰基)氨基甲基]-3-(2-氰基苯基)異噁唑(方法80；1.28g，4.28毫摩爾)，得到標題化合物(1.34g，100％)。NMR(DMSO)4.45(s，2H)，7.17(s，H)，7.73(dd，H)，7.85-7.95(m，2H)，8.62(br s，3H)；m/z 200(MH)+。
方法82
3-甲基-5-{2-[二-(N-叔丁氧基羰基)氨基]乙基}異噁唑如方法71所述處理如在J.Am.Chem.Soc.1987(109)，2765中合成的二-N-叔丁氧基羰基-3-丁炔(2.2g，8.2毫摩爾)，得到標題化合物(0.59g，22％)。NMR(CDCl3)1.49(s，18H)，2.24(s，3H)，3.00(t，2H)，3.88(t，2H)，5.85(s，H)。
方法833-甲基-5-(2-氨基乙基)異噁唑將三氟乙酸(2.5ml，3.8毫摩爾)滴加到在0℃下冷卻的3-甲基-5-{2-[二-(N-叔丁氧基羰基)氨基]乙基}異噁唑(方法82；0.589g，1.8毫摩爾)的DCM(10ml)溶液中。將混合物加熱至環境溫度，并攪拌48小時。蒸發去除揮發物，通過在SCX-2離子交換柱上進行層析，先用甲醇，再用7N氨的甲醇溶液洗脫純化。純化后的產物用過量的1.0M含醚氯化氫(3.5ml)進行處理，得到其鹽酸鹽形式的標題化合物(0.24g，82％)。NMR(DMSO)游離堿2.18(s，3H)，2.71-2.79(m，2H)，2.80-2.88(m，2H)，6.10(s，H)。
方法843-疊氮甲基-5-甲基異噁唑在60℃下，將3-氯甲基-5-甲基異噁唑(500mg，3.8毫摩爾)和疊氮化鈉(494mg，7.6毫摩爾)在DCM(10ml)中加熱6小時。反應混合物用水稀釋，然后用EtOAc萃取。干燥(MgSO4)有機萃取液并蒸發去除揮發物，得到油狀的標題化合物(387mg，73％)。NMR(DMSO)2.40(s，3H)，4.48(s，2H)，6.28(s，1H)。
方法853-氨基甲基-5-甲基異噁唑將3-疊氮甲基-5-甲基異噁唑(方法84；384mg，2.8毫摩爾)和聚苯乙烯聚合物載體上的三苯基膦(4.2g，4.2毫摩爾)一起在THF(17ml)和蒸餾水(0.58ml)的混合物中攪拌24小時。過濾反應混合物，先用二乙醚，再用DCM洗滌樹脂。蒸發合并的濾液，在SCX-2柱上先用甲醇，再用7N氨的甲醇溶液洗脫純化剩余物，得到油狀的標題化合物(211mg，67％)。NMR(DMSO)1.93(br s，2H)，2.34(s，3H)，3.63(s，2H)，6.17(s，1H)。
方法86α-甲基-吡啶-3-基甲醛肟將鹽酸羥胺(9.46g，136.2毫摩爾)加入到3-乙酰基吡啶(11.02g，90.7毫摩爾)的甲醇(100ml)溶液中，將反應混合物在回流下加熱30分鐘。蒸發去除揮發物，將剩余物溶解于水中。將溶液冷卻至0℃，用2N的氫氧化鈉水溶液堿化至pH12，然后混合物用EtOAc萃取。合并萃取液，用飽和的鹽水洗滌并干燥(硫酸鈉)。蒸發去除溶劑，得到固態的標題產物(11.6g，94％)。NMR(DMSO)2.20(s，3H)，7.40(m，1H)，8.00(m，1H)，8.55(d，1H)，8.85(s，1H)，11.43(s，1H)。m/z 137(MH)+。
方法87-89通過方法86的方法，采用適當的原材料制備以下各種化合物。
方法903-(1-氨基乙基)吡啶將阮內鎳在水(1.1g)中的50％懸浮液加入到α-甲基-吡啶-3-基甲醛肟(方法86；10.6g，77.9毫摩爾)和20％乙醇銨(500ml)的溶液中，將反應混合物用氫氣在40psi和40℃下進行氫化，直至消耗理論體積的氣體為止。經硅藻土層過濾反應混合物，用水和乙醇洗滌過濾墊。蒸發去除濾液得到油狀標題產物(8.05g，85％)。NMR(DMSO)1.28(d，3H)，4.05(m，1H)，7.33(t，1H)，7.75(d，1H)，8.40(d，1H)，8.55(s，1H)。m/z123(MH)+。
方法91-93通過方法90的方法，采用適當的原材料制備以下各種化合物。
方法942-氨基甲基-6-氯代吡啶在-5℃及氮氣氛下，將1M氫化鋰鋁的THF(2.88ml，2.88毫摩爾)溶液滴加至6-氯-2-氰基吡啶(532mg，3.84毫摩爾)的THF(10ml)溶液中。將混合物在-5℃下攪拌2小時，小心按順序加入水(0.1ml)、15％的氫氧化鈉水溶液(0.1ml)和水(0.3ml)使反應猝滅。將混合物在0℃下攪拌1小時，過濾去除不溶物，用甲醇徹底洗滌過濾墊。蒸發所得溶液，通過硅膠柱層析，用DCM/甲醇/氨(極性從95∶5∶0增加至90∶10∶1)洗脫純化剩余物，得到油狀的標題化合物(215mg，40％)。NMR(DMSO)2.10(br s，2H)，3.75(s，2H)，7.30(d，1H)，7.55(d，1H)，7.80(t，1H)。
方法95-97通過方法94的方法，采用適當的原材料制備以下各種化合物。
1SM Bioorg.Med.Chem.Lett.1998，453-8方法982-(N-氧代吡啶-4-基)吡啶在0℃下將3-氯代過苯甲酸(活性濃度57％-86％)(7.5g，43毫摩爾)分次加入到2-(吡啶-4-基)吡啶(4.78g，30.6毫摩爾)的DCM(50ml)溶液中。攪拌2小時后，分次加入焦亞硫酸鈉直至消滅所有過量的過氧化物。過濾去除固體，濾液用碳酸鉀固體堿化。過濾混合物，蒸發濾液，通過硅膠柱層析，用甲醇/丙酮(10∶90)洗脫純化剩余物，得到白色固態的標題化合物(4.2g，80％)。NMR(DMSO)7.41(t，1H)，7.92(t，1H)，8.10(m，3H)，8.30(d，2H)，8.70(d，1H)；m/z173(MH)+。
方法992-(2-氰基吡啶-4-基)吡啶將氰化三甲基硅烷(1.9ml，14.5毫摩爾)滴加到2-(N-氧代吡啶-4-基)吡啶(方法98；1g，5.8毫摩爾)和三乙胺(1.2ml，8.7毫摩爾)的乙腈(5ml)懸浮液中。將混合物在110℃下加熱18小時，冷卻至環境溫度后用飽和的碳酸氫鈉水溶液稀釋。用DCM萃取混合物，干燥(MgSO4)萃取液，蒸發去除揮發物。將剩余物預先吸附到二氧化硅上，并通過硅膠柱層析，用己烷∶EtOAc(1∶1)洗脫純化。純化后的產物用二乙醚研制，得到白色固態的標題化合物(627mg，60％)。NMR(DMSO)7.54(t，1H)，8.01(t，1H)，8.25(d，1H)，8.40(d，1H)，8.66(s，1H)，8.77(d，1H)，8.87(d，1H)。
方法1002-(2-氨基甲基吡啶-4-基)吡啶在氮氣氛下將2-(2-氰基吡啶-4-基)吡啶(方法99；563mg，3.11毫摩爾)溶解于無水THF(10ml)中，并冷卻至0℃。滴加LiAlH4(2.3ml的THF 1M溶液，2.3毫摩爾)，將反應混合物在0℃下攪拌3小時。用水(0.1ml)、15％的氫氧化鈉溶液(0.1ml)和水(0.3ml)使反應猝滅。過濾混合物，用甲醇洗滌過濾墊。通過蒸發將揮發物從濾液中除去，得到樹膠狀的標題化合物(570mg，99％)。M/z186(MH)+。
方法1012-(3-氰基吡啶-5-基)吡啶在氮氣氛下，將2-(3-溴代吡啶-5-基)吡啶(2g，10.9毫摩爾)的THF(10ml)溶液滴加至2-吡啶基溴化鋅(22ml的THF 0.5M溶液，11毫摩爾)的THF(10ml)溶液中。加入四(三苯基膦)合鈀(O)(630mg，0.54毫摩爾)，將反應混合物在環境溫度下攪拌18小時。用飽和的氯化銨水溶液使反應猝滅，然后蒸發去除揮發物。將剩余物懸浮于水中，然后用DCM萃取。合并有機萃取液，用水洗滌，然后經相分離紙過濾，蒸發去除揮發物。通過硅膠柱層析，用己烷∶EtOAc(2∶1)洗脫純化剩余物。純化后的產物用二乙醚研制，得到白色固態的標題化合物(0.98g，50％)。NMR(DMSO)7.47(t，1H)，7.97(t，1H)，8.15(d，1H)，8.75(d，1H)，8.90(d，1H)，9.07(s，1H)，9.53(s，1H)；m/z182(MH)+。
方法1022-(3-氨基甲基吡啶-5-基)吡啶將2-(3-氰基吡啶-5-基)吡啶(方法101；0.98g，5.4毫摩爾)溶解于乙醇(45ml)和甲醇(30ml)的混合物中。加入濃鹽酸(1.2ml)和10％的披鈀碳催化劑(575mg)，將混合物在氫氣氛下攪拌4小時。混合物經硅藻土過濾，用乙醇洗滌過濾墊，通過蒸發將揮發物從濾液中除去。將粗制固體懸浮于少量甲醇中并過濾，得到橙色固態的標題化合物(794mg，66％)。NMR(DMSO)4.31(m，2H)，7.58(t，1H)，8.09(t，1H)，8.24(d，1H)，8.78(d，1H)，8.89(bs，2H)，9.03(s，1H)，9.26(s，1H)，9.43(s，1H)；m/z 186(MH)+。
藥理學分析用于檢測Igf-1r激酶活性的抑制和下游信號傳輸以及對胰島素受體激酶和Egfr信號傳輸的選擇性的方法所采用的縮寫PBS(PBS/T)為磷酸緩沖鹽水，pH7.4(具有0.05％的吐溫20)HEPES為N-[2-羥基乙基]哌嗪-N’-[2-乙磺酸]DTT為二硫蘇糖醇TMB為N-四甲基聯苯胺DMSO為二甲基亞砜BSA為牛血清白蛋白ATP為腺苷三磷酸DMEM為Dulbecco改進的Eagle培養基FBS/FCS為胎牛/小牛血清HBSS為Hanks平衡鹽溶液HRP為辣根過氧化物酶SDS為十二烷基硫酸鈉IGF-I(IGF-1R)為胰島素樣生長因子-I(IGF-1受體)EGF為表皮生長因子IGF-1R激酶分析a)蛋白質的克隆、表達和純化采用標準分子生物技術(Molecular Cloning-A LaboratoryManual，1989年第2版；Sambrook，Fritsch和Maniatis；Cold SpringHarbour Laboratory Press)構建編碼含有谷胱甘肽-S-轉移酶(GST)、凝血酶切割位點和IGF-1R細胞內結構域(氨基酸930-1367)(此后稱之為GST-IGFR)的融合蛋白質的DNA分子并克隆到pFastBac 1中(Life Technologies Ltd，UK)。
按照制造商方案進行重組病毒的生產。簡言之，將含有GST-IGFR的pFastBac-1載體轉化到含有桿狀病毒基因組(桿粒DNA)的大腸桿菌DH10Bac細胞中，并經由細胞中的轉座事件，將一個含有慶大霉素抗性基因和GST-IGFR表達盒的pFastBac載體的區域直接轉座進桿粒DNA中，所述GST-IGFR表達盒包括桿狀病毒多角體蛋白啟動子。通過選擇慶大霉素、卡那霉素、四環素和X-半乳糖，所得的白色集落應含有編碼GST-IGFR的重組桿粒DNA。按照制造商的說明，從幾種BH10Bac白色集落的小規模培養物中提取桿粒DNA，并采用CellFECTIN試劑(Life Technologies Ltd，UK)將其轉染進在含有10％血清的TC100培養基(Life Technologies Ltd，UK)中生長的草地夜蛾Sf21細胞中。轉染72小時后通過收集細胞培養基收獲病毒顆粒。用0.5ml培養基感染含有1×107個細胞/ml的100ml Sf21懸浮培養物。感染48小時后收獲細胞培養液并采用標準空斑測定方法確定病毒效價。采用病毒原種以3的感染復數(MOI)感染Sf9和“高5”細胞以便確定重組GST-IGFR的表達。
通過在谷胱甘肽-瓊脂糖凝膠上進行親合層析，接著用谷胱甘肽洗脫來純化GST-IGFR蛋白質。簡言之，將細胞溶解于50mM的HEPES pH7.5(Sigma，H3375)、200mM的NaCl(Sigma，S7653)、完全蛋白酶抑制劑混合物(Roche，1 873 580)和1mM的DTT(Sigma，D9779)中，這種溶液此后稱之為溶胞緩沖液。使澄清后的溶胞產物上清液通過裝有谷胱甘肽-瓊脂糖凝膠的層析柱(Amersham PharmaciaBiotech UK Ltd.)。用溶胞緩沖液將各種污染物從基質中洗出直至在280nm處的UV吸光度返回到基線為止。采用含有20mM還原谷胱甘肽(Sigma，D2804)的溶胞緩沖液進行洗脫，匯集含有GST融合蛋白質的部分并透析至含有甘油的緩沖液中，該緩沖液包含pH7.5的50mM HEPES、200mM NaCl、10％甘油(v/v)、3mM還原谷胱甘肽和1mM的DTT。
b)激酶活性分析采用96孔格式的ELISA檢測系統，通過合成聚合GluAlaTyr(EAY)6∶3∶1肽(Sigma-Aldrich Company Ltd，UK，P3899)的磷酸化作用測定純化后的酶的活性。
b.i)所用的試劑母液200mM HEPES，Ph7.4 在4℃下儲存 (Sigma，H3375)1MDTT 在-20℃下儲存 (Sigma，D9779)100mM Na3VO4在4℃下儲存 (Sigma，S6508)1MMnCl2在4℃下儲存 (Sigma，M3634)1mM ATP 在-20℃下儲存 (Sigma，A3377)純凈 Triton X-100 在室溫下儲存(Sigma，T9284)10mg/ml BSA 在4℃下儲存 (Sigma，A7888)酶溶液新鮮制備的75ng/ml的在pH7.4的100mM HEPES、5mM DTT、0.25mM Na3VO4、0.25％ Triton X-100、0.25mg/ml BSA中的GST-IGF-1R融合蛋白質。
輔因子溶液pH7.4的100mM的HEPES、60mM的MnCl2、5mM的ATP聚合EAY底物Sigma底物聚合(Glu，Ala，Tyr)6∶3∶1(P3899)制成1mg/ml PBS溶液的形式并在-20℃下儲存檢測板Nunc Maxisorp 96孔免疫板(Life Technologies Ltd，UK)抗體美國紐約Upstate Biotechnology公司的單克隆的抗磷酸酪氨酸抗體(UBI 05-321)。每個檢測板上將3μl稀釋于11ml的PBS/T+0.5％的BSA中。
Amersham Pharmacia Biotech UK Ltd.的綿羊-抗小鼠IgG HRP-接合二級抗體(NXA931)。每個檢測板上將20μl的母液稀釋于11ml的PBS/T+0.5％的BSA中。
TMB溶液在室溫下、1小時內、于黑暗中，將1mg的TMB片(Sigma，T5525)溶解于1ml的DMSO(Sigma，D8779)中。將該溶液加入到9ml新鮮制備的50mM磷酸鹽-檸檬酸鹽緩沖液pH5.0+0.03％過硼酸鈉中[1個緩沖液膠囊(Sigma P4922)/100ml蒸餾水]。
終止溶液為1M的H2SO4(Fisher Scientific UK.目錄號S/9200/PB08)。
測試化合物溶解于DMSO至10mM，然后稀釋在蒸餾水中，得到檢測孔中在1-2％ DMSO中的200-0.0026μM的最終濃度范圍。
b.ii)分析方案將聚合EAY底物在PBS中稀釋至1μg/ml，然后以100μl/孔的量分配于96孔板中。將板密封并在4℃下培養過夜。廢棄過量的聚合EAY溶液，將板洗滌(2×PBS/T；250μl PBS/孔)，洗滌之間進行吸干。然后再次洗滌板(1×50mM的HEPES，pH7.4；250μl/孔)并吸干(為了除去磷酸鹽的本底含量，這一點很重要)。向各孔中加入10μl的試驗化合物溶液及40μl的激酶溶液。然后再向各孔中加入50μl的輔因子溶液，板在室溫下培養60分鐘。
將板清空(即廢棄其內容物)并用PBS/T洗滌2次(250μl/孔)，各次洗滌之間進行吸干。每個孔加入100μl的稀釋抗磷酸酪氨酸抗體，將板在室溫下培養60分鐘。
再次將板清空并用PBS/T洗滌2次(250μl/孔)，各次洗滌之間進行吸干。每個孔加入100μl的稀釋綿羊-抗小鼠IgG抗體，將板在室溫下培養60分鐘。廢棄其內容物，將板用PBS/T洗滌2次(250μl/孔)，各次洗滌之間進行吸干。每個孔中加入100μl TMB溶液，將板在室溫下培養5-10分鐘(在辣根過氧化物酶的存在下溶液變藍)。
每個孔用50μl的H2SO4終止反應(溶液由藍變黃)，在450nm用Versamax板式讀數器(Molecular Devices Corporation，CA，USA)或類似的裝置對板進行讀數。
我們發現各實施例的化合物在上述試驗中的IC50均小于100μM。
對IGF-受激細胞增殖的抑制Lammers等(EMBO J，8，1369-1375，1989)描述了鼠成纖維細胞(NIH3T3)過量表達人類IGF-1受體的結構。這些細胞對IGF-I顯示出增殖響應，可通過BrdU結合進新合成的DNA加以測量。在以下測試中確定使IGF-受激增殖得到抑制的化合物效能a.i)所用的試劑細胞增殖ELISA，BrdU(比色法)[Boehringer Mannheim(Diagnostics and Biochemicals)Ltd，UK.目錄號1 647 229]。
DMEM、FCS、谷氨酰胺、HBSS(均來自Life Technologies Ltd，UK)。
木炭/葡聚糖氣提的FBS(HyClone SH30068.02，Perbio Science UKLtd)。
BSA(Sigma，A7888)。
人類重組體IGF-1動物/培養基級(GroPep Limited ABN 78 008176 298，澳大利亞，目錄號IU 100)。
IGF的制備及儲存將100μg的凍干IGF在100μl的10mM HCl中進行重新構建。
加入400μl的1mg/ml BSA的PBS溶液25μl等分試樣@200μg/ml IGF-1在-20℃下儲存用于分析10μl原液IGF+12.5ml生長培養基得到160ng/ml的8X原液。
完全生長培養基DMEM、10％的FCS、2mM的谷氨酰胺饑餓培養基DMEM、1％的木炭/葡聚糖氣提的FCS、2mM的谷氨酰胺測試化合物先將化合物溶解于DMSO至10mM，然后稀釋于DMEM+1％的FCS+谷氨酰胺中，得到分析孔中在1-0.00045％DMSO中為100-0.0.45μM的最終濃度范圍。
a.ii)測試方案第一天收獲正以指數生長的NIH3T3/IGFR細胞，并以100μl的體積按照1.2×104個細胞/孔在完全生長培養基中接種至平底的96孔組織培養等級板(Costar 3525)中。
第二天采用多道移液器小心將生長培養基從每個孔中取出。用200μlHBSS仔細將孔漂洗3次。將100μl饑餓培養基加入到每個孔中，將板再培養24小時。
第三天將50μl 4X濃度的試驗化合物加入到適當的孔內。在添加IGF之前單獨用化合物將細胞培養30分鐘。對于經IGF處理的細胞，則加入適當體積(即25μl)的饑餓培養基使每個孔中的最終體積最多達到200μl，接著以160ng/ml加入25μl的IGF-1(使最終的濃度為20ng/ml)。未采用IGF刺激的對照細胞也添加適當體積(即50μl)的饑餓培養基，使每個孔的最終體積達到最多200μl。將板再次培養20小時。
第四天根據制造商方案，采用BrdU細胞增殖酶聯免疫吸附測定評估BrdU在細胞中的摻入情況(摻入4小時后)。
我們發現各實施例的化合物在上述試驗中的IC50小于50μM。
作用機理分析通過測量響應MCF-7細胞(ATCC No.HTB-22)的IGF-I刺激所導致的IGF-IR、Akt和MAPK(ERK 1和2)磷酸化作用的變化來確定對IGF-IR媒介信號轉導的抑制情況。通過相同細胞系中響應EGF的對MAPK磷酸化作用的影響測量選擇性。
a.i)所用的試劑RPMI 1640培養基、沒有酚紅的RPMI 1640培養基、FCS、谷氨酰胺(均來自Life Technologies Ltd.，UK)
木炭/葡聚糖氣提的FBS(HyClone SH30068.02，Perbio Science UKLtd)SDS(Sigma，L4390)2-巰基乙醇(Sigma，M6250)溴酚藍(Sigma，B5525)麗春紅S(Sigma，P3504)Tris base(TRIZMATM堿，Sigma，T1503)甘氨酸(Sigma，G7403)甲醇(Fisher Scientific UK.目錄號M/3950/21)干奶粉(MarvelTM，Premier Brands UK Ltd.)人重組體IGF-1動物/培養基等級(GroPep Limited ABN 78 008176 298，澳大利亞。目錄號IU 100)人重組體EGF(Promega Corporation，WI，USA.目錄號G5021)完全生長培養基RPMI 1640、10％的FCS、2mM的谷氨酰胺饑餓培養基沒有酚紅的RPMI 1640培養基、1％的木炭/葡聚糖氣提的FCS、2mM的谷氨酰胺測試化合物先將化合物溶解于DMSO至10mM，然后稀釋在沒有酚紅的RPMI 1640+1％的FCS+2mM的谷氨酰胺中，得到分析孔內在1-0.00045％DMSO中為100-0.0.45μM的最終濃度范圍。
Western轉移緩沖液50mM的Tris base、40mM的甘氨酸、0.04％的SDS、20％的甲醇
Laemmli緩沖液x2100mM Tris-HCl pH6.8，20％的甘油、4％的SDS樣品緩沖液x4在蒸餾水中的200mM的2-巰基乙醇、0.2％的溴酚藍初級抗體兔抗人IGF-1Rβ(Santa Cruz Biotechnology Inc.，美國，目錄號sc-713)兔抗胰島素/IGF-1R[pYpY1162/1163]Dual Phosphospecific(BioSourceInternational Inc.，CA，美國。Cat No.44-8041)小鼠抗PKBα/Akt(Transduction Laboratories，KY，美國。目錄號P67220)兔抗Phospho-Akt(Ser473)(Cell Signalling Technology Inc.，MA，美國。目錄號#9271)兔抗-p44/p42 MAP激酶(Cell Signalling Technology Inc.，MA，美國。目錄號#9102)兔抗-Phospho p44/p42 MAP激酶(Cell Signalling TechnologyInc.，MA，美國。目錄號#9101)小鼠抗肌動蛋白克隆AC-40(Sigma-Aldrich Company Ltd，UK，A4700)抗體稀度
二級抗體山羊抗兔，HRP連接(Cell Signalling Technology Inc.，MA，美國。目錄號#7074)綿羊-抗小鼠IgG HRP-結合(Amersham Pharmacia Biotech UK Ltd.目錄號NXA931)在PBST+5％的牛奶中將抗兔稀釋至1∶2000在PBST+5％的牛奶中將抗小鼠稀釋至1∶5000a.ii)分析方案細胞處理將MCF-7細胞在1ml完全生長培養基中以1×105個細胞/孔接種于24孔板上。將板培養24小時以使細胞沉降。取出培養基，用PBS2ml/孔輕柔地洗滌板3次。每個孔加入1ml的饑餓培養基，將板培養24小時，使細胞缺乏血清。
然后加入25μl各化合物的稀釋液，使細胞和化合物在37℃下培養30分鐘。化合物培養30分鐘后，每個孔適當加入25μl的IGF(最終濃度為20ng/ml)或EGF(最終濃度為0.1ng/ml)，將細胞和IGF或EGF在37℃下培養5分鐘。取出培養基(通過移液)，然后加入100μl的2x Laemmli緩沖液。將板在4℃下儲存直至細胞收獲為止(應在將Laemmli緩沖液加入到細胞后的2小時內進行收獲)。
為收獲細胞，采用移液管重復地吸上和排出Laemmli緩沖液/細胞混合物并將其轉移至1.5ml的微量離心管內。使用前將所收獲的細胞溶胞產物保存在-20℃下。采用DC蛋白質分析試劑盒(Bio-RadLaboratories，美國，按照生產商的說明書)可確定每一種溶胞產物的蛋白質濃度。
蛋白質印跡技術用4x樣品緩沖液制作細胞樣品，用21號針注射并煮沸5分鐘。將樣品以相同的體積及分子量梯度置于4-12％的Bis-Tris凝膠(Invitrogen BV，The Netherlands)上，采用所提供的溶液并按照廠商的說明書使這些凝膠在Xcell SureLockTMMini-Cell裝置(Invitrogen)上進行試驗。采用Western轉移緩沖液，在XcellSureLockTMMini-Cell裝置中以30伏特使凝膠滲開在Hybond C ExtraTM膜(Amersham Pharmacia Biotech UK Ltd.)上1小時。被遮蔽的膜用0.1％的麗春紅S染色以顯影轉移的蛋白質，然后水平切割成帶狀物根據分子量標準進行多種抗體培養。采用單獨的帶狀物檢測IGF-1R、Akt、MAPK和肌動蛋白對照品。
室溫下將膜在PBST+5％牛奶溶液中封閉1小時。然后將膜置于4孔板內的3ml初級抗體溶液內，將板在4℃下培養過夜。將膜在5ml的PBST中洗滌3次，每次洗滌5分鐘。制備HRP-結合的二級抗體溶液，每個膜加入5ml。在室溫及攪拌下將膜培養1小時。將膜在5ml的PBST中洗滌3次，每次洗滌5分鐘。制備ECL溶液(SuperSignalECL，Pierce，Perbio Science UK Ltd)并與膜一起培養1分鐘(按照生產商的說明書)，然后暴露于光敏薄膜上并進行顯影。
我們發現各實施例的化合物在上述試驗中的IC50小于20μM。
權利要求
1.一種下式(I)的化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑合物 其中R1代表包含至少一個選自氮、氧和硫的環雜原子的5或6元雜芳環，所述環任選被至少一個選自以下的取代基所取代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基(這些基團各自可任選被至少一個選自鹵素、氨基、羥基和三氟甲基的取代基取代)、鹵素、硝基、氰基、-NR5R6、羧基、羥基、C2-C6烯基、C3-C6環烷基、C1-C6烷氧基羰基、C1-C6烷基羰基、C1-C6烷基羰基氨基、苯基羰基、-S(O)mC1-C6烷基、-C(O)NR7R8、-SO2NR7aR8a；和可包含至少一個選自氮、氧和硫的環雜原子的不飽和5至6元環，所述環本身任選被至少一個選自以下的取代基所取代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基(這些基團各自可任選被至少一個選自鹵素、氨基、羥基和三氟甲基的取代基取代)、鹵素、硝基、氰基、-NR9R10、羧基、羥基、C2-C6烯基、C3-C6環烷基、C1-C6烷氧基羰基、C1-C6烷基羰基、C1-C6烷基羰基氨基、苯基羰基、-S(O)nC1-C6烷基、-C(O)NR11R12和-SO2NR11aR12a；m為0、1或2；n為0、1或2；R2代表任選被至少一個選自鹵素、羥基和C1-C3烷氧基的取代基取代的C1-C4烷基；R3代表氫、鹵素或三氟甲基；R4代表包含至少一個選自氮、氧和硫的環雜原子的5元雜芳環，所述環任選被至少一個選自以下的取代基所取代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基(這些基團各自可任選被至少一個選自鹵素、氨基、羥基和三氟甲基的取代基取代)、鹵素、硝基、氰基、-NR13R14、羧基、羥基、C2-C6烯基、C3-C6環烷基、C1-C4烷氧基羰基、C1-C4烷基羰基、C1-C4烷基羰基氨基、苯基羰基、-S(O)pC1-C4烷基、-C(O)NR15R16和-SO2NR15aR16a；p為0、1或2；R5和R6各獨立代表氫、C1-C4烷基或C3-C6環烷基，或R5和R6與其相連接的氮原子一起形成4至6元飽和雜環；R7和R8各獨立代表氫、C1-C4烷基或C3-C6環烷基，或R7和R8與其相連接的氮原子一起形成4至6元飽和雜環；R7a和R8a各獨立代表氫、C1-C4烷基或C3-C6環烷基，或R7a和R8a與其相連接的氮原子一起形成4至6元飽和雜環；R9和R10各獨立代表氫、C1-C4烷基或C3-C6環烷基，或R9和R10與其相連接的氮原子一起形成4至6元飽和雜環；R11和R12各獨立代表氫、C1-C4烷基或C3-C6環烷基，或R11和R12與其相連接的氮原子一起形成4至6元飽和雜環；R11a和R12a各獨立代表氫、C1-C4烷基或C3-C6環烷基，或R11a和R12a與其相連接的氮原子一起形成4至6元飽和雜環；R13和R14各獨立代表氫、C1-C4烷基或C3-C6環烷基，或R13和R14與其相連接的氮原子一起形成4至6元飽和雜環；R15和R16各獨立代表氫、C1-C4烷基或C3-C6環烷基，或R15和R16與其相連接的氮原子一起形成4至6元飽和雜環；和R15a和R16a各獨立代表氫、C1-C4烷基或C3-C6環烷基，或R15a和R16a與其相連接的氮原子一起形成4至6元飽和雜環。
2.根據權利要求1的化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R1代表包含至少一個選自氮、氧和硫的環雜原子的5或6元雜芳環，所述環任選被至少一個選自以下的取代基所取代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基(這些基團各自可任選被至少一個選自羥基的取代基所取代)、鹵素、-C(O)NR7R8、C1-C6烷氧基羰基；以及可包含至少一個選自氮和氧的環雜原子的不飽和5至6元環，所述環本身任選被至少一個選自以下的取代基所取代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基(這些基團各自可任選被至少一個選自鹵素的取代基所取代)、鹵素和氰基；其中R7和R8兩者均為氫或R7和R8與其所連接的氮原子一起形成4至6元飽和雜環。
3.根據權利要求1或2的化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑合物，R1代表吡啶基、咪唑基、異噁唑基、吡唑基、呋喃基、吡嗪基、噠嗪基、嘧啶基、吡咯基或噻吩基；所述吡啶基、咪唑基、異噁唑基、吡唑基、呋喃基、吡嗪基、噠嗪基、嘧啶基、吡咯基和噻吩基任選被至少一個選自甲基、異丙基、羥甲基、甲氧基、氯、溴、氨基甲酰基、甲氧基羰基、吡咯烷-1-基羰基、苯基和吡啶基的取代基所取代；所述苯基或吡啶基任選被至少一個選自甲基、三氟甲基、甲氧基、乙氧基、三氟甲氧基、氟、氯、溴和氰基的取代基所取代。
4.根據權利要求1-3中任一項的化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R2代表C1-C4烷基。
5.根據權利要求1-4中任一項的化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R3代表氫或鹵素。
6.根據權利要求1-5中任一項的化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R4代表包含至少1個選自氮的環雜原子的5元雜芳環，所述環任選被至少一個選自C1-C6烷基和C3-C6環烷基的取代基所取代。
7.根據權利要求6的化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中，R4中的5元雜芳環為吡唑基，所述環任選被至少一個選自以下的取代基所取代甲基、乙基、異丙基、丙基、叔丁基和環丙基。
8.根據權利要求1的化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R1代表吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基、2-甲氧基吡啶-5-基、2-氰基吡啶-5-基、3-溴代吡啶-5-基、3-(吡啶-2-基)吡啶-5-基、4-(吡啶-2-基)吡啶-2-基、3-氯代吡啶-2-基、3-甲基吡啶-2-基、6-甲基吡啶-2-基、5，6-二甲基吡啶-2-基、咪唑-4-基、咪唑-5-基、3-甲基異噁唑-5-基、5-甲基異噁唑-3-基、3-異丙基異噁唑-5-基、3-甲氧基羰基異噁唑-5-基、3-(羥甲基)異噁唑-5-基、3-氨基甲酰基異噁唑-5-基、3-(吡咯烷-1-基羰基)異噁唑-5-基、3-苯基異噁唑-5-基、3-(吡啶-2-基)異噁唑-5-基、3-(2-甲氧基吡啶-3-基)異噁唑-5-基、3-(2-甲氧基苯基)異噁唑-5-基、3-(3-甲氧基苯基)異噁唑-5-基、3-(2-乙氧基苯基)異噁唑-5-基、3-(2-三氟甲基苯基)異噁唑-5-基、3-(2-三氟甲氧基苯基)異噁唑-5-基、3-(2-氯代苯基)異噁唑-5-基、3-(2-溴代苯基)異噁唑-5-基、3-(2-甲基苯基)異噁唑-5-基、3-(2-氟代苯基)異噁唑-5-基、3-(2-氰基苯基)異噁唑-5-基、5-甲基吡唑-4-基、呋喃-2-基、呋喃-3-基、5-甲基呋喃-2-基、吡嗪-2-基、2-甲基吡嗪-5-基、噠嗪-3-基、嘧啶-4-基、1-甲基吡咯-2-基和噻吩-3-基；R2代表甲基、乙基和丙基；R3代表氫、氯或溴；和R4代表5-甲基吡唑-3-基、5-乙基吡唑-3-基、5-異丙基吡唑-3-基、5-丙基吡唑-3-基、5-叔丁基吡唑-3-基和5-環丙基吡唑-3-基。
9.一種選自下列的化合物5-溴-2-(3-甲基異噁唑-5-基甲基氨基)-4-(5-環丙基-1H-吡唑-3-基氨基)嘧啶；5-氯-2-(3-苯基異噁唑-5-基甲基氨基)-4-(5-甲基-1H-吡唑-3-基氨基)嘧啶；5-氯-2-(3-吡啶-2-基異噁唑-5-基甲基氨基)-4-(5-甲基-1H-吡唑-3-基氨基)嘧啶；5-溴-2-(3-吡啶-2-基異噁唑-5-基甲基氨基)-4-(5-甲基-1H-吡唑-3-基氨基)嘧啶；5-氯-2-(3-甲基異噁唑-5-基甲基氨基)-4-(5-叔丁基-1H-吡唑-3-基氨基)嘧啶；5-溴-2-(3-甲基異噁唑-5-基甲基氨基)-4-(5-乙基-1H-吡唑-3-基氨基)嘧啶；5-氯-2-[3-(2-氟代苯基)異噁唑-5-基甲基氨基]-4-(5-甲基-1H-吡唑-3-基氨基)嘧啶；5-溴-2-[3-(2-氟代苯基)異噁唑-5-基甲基氨基]-4-(5-甲基-1H-吡唑-3-基氨基)嘧啶；5-氯-2-[3-(2-氟代苯基)異噁唑-5-基甲基氨基]-4-(5-叔丁基-1H-吡唑-3-基氨基)嘧啶；5-溴-4-(5-異丙基-1H-吡唑-3-基氨基)-2-(吡啶-2-基甲基氨基)嘧啶；5-溴-2-(3-甲基異噁唑-5-基甲基氨基)-4-(5-丙基-1H-吡唑-3-基氨基)嘧啶；5-溴-2-(3-甲基異噁唑-5-基甲基氨基)-4-(5-異丙基-1H-吡唑-3-基氨基)嘧啶；5-氯-2-[3-(吡啶-2-基)異噁唑-5-基甲基氨基]-4-(5-叔丁基-1H-吡唑-3-基氨基)嘧啶；5-溴-2-[3-(吡啶-2-基)異噁唑-5-基甲基氨基]-4-(5-叔丁基-1H-吡唑-3-基氨基)嘧啶；和5-溴-2-(3-溴代吡啶-5-基甲基氨基)-4-(5-叔丁基-1H-吡唑-3-基氨基)嘧啶；及以上任何一種化合物的藥學上可接受的鹽和溶劑合物。
10.一種制備權利要求1的化合物的方法，該方法包括(i)使下式(II)的化合物與其中R1和R2如式(I)所定義的式(III)H2N-R2-R1化合物進行反應 其中L1代表離去基團，R3和R4如式(I)所定義；或(ii)使下式(IV)的化合物與其中R4如式(I)所定義的式(V)H2N-R4化合物進行反應 其中L2代表離去基團，R1、R2和R3如式(I)所定義；或(iii)使下式(VI)的化合物與下式(VII)的化合物進行反應 其中R1和R2如式(I)所定義， 其中X代表氧原子，q為1，或者X代表氮原子，q為2，每一個R20各自代表C1-C6烷基，R3和R4如式(I)所定義；或(iv)當R4代表被取代的吡唑基時，使下式(VIII)的化合物與肼進行反應 其中R21代表C1-C6烷基或C3-C6環烷基，R1、R2和R3如式(I)所定義；并且任選在(i)、(ii)、(iii)或(iv)之后進行以下步驟的一個或多個·將所得的化合物轉化為權利要求1的其它化合物·形成所述化合物的藥學上可接受的鹽或溶劑合物。
11.一種藥物組合物，該組合物包含權利要求1-9中任一項的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑合物，以及藥學上可接受的佐劑、稀釋劑或載體。
12.一種制備權利要求11的藥物組合物的方法，該方法包括將權利要求1-9中任一項所定義的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑合物與藥學上可接受的佐劑、稀釋劑或載體進行混合。
13.用于治療的權利要求1-9中任一項的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑合物。
14.權利要求1-9中任一項的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑合物在制備用于治療癌癥的藥物中的用途。
15.權利要求1-9中任一項的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑合物在制備用于調節胰島素樣生長因子-1受體活性的藥物中的用途。
16.一種治療癌癥的方法，該方法包括給予患者治療有效量的權利要求1-9中任一項的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑合物。
17.一種調節胰島素樣生長因子-1受體活性的方法，該方法包括給予有此需要的患者治療有效量的權利要求1-9中任一項的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑合物。
18.根據權利要求1的化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R1中的5或6元雜芳環選自噻吩基、吡唑基、異噁唑基、噻二唑基、吡咯基、呋喃基、噻唑基、三唑基、四唑基、咪唑基、吡嗪基、噠嗪基、嘧啶基和吡啶基。
19.根據權利要求1的化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R1中的5或6元雜芳環選自噻吩基、吡唑基、異噁唑基、噻二唑基、吡咯基、呋喃基、噻唑基、三唑基、四唑基、咪唑基、吡嗪基和吡啶基。
20.根據權利要求1的化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R1中的不飽和5至6元環選自苯基、環戊烯基、環己烯基、噻吩基、吡唑基、異噁唑基、噻二唑基、吡咯基、呋喃基、噻唑基、三唑基、四唑基、咪唑基、吡嗪基、噠嗪基、嘧啶基和吡啶基。
21.根據權利要求1的化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R1中的不飽和5至6元環選自苯基、環戊烯基、環己烯基、噻吩基、吡唑基、異噁唑基、噻二唑基、吡咯基、呋喃基、噻唑基、三唑基、四唑基、咪唑基、吡嗪基和吡啶基。
22.根據權利要求1的化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R3代表鹵素原子。
23.根據權利要求1的化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R4中的5元雜芳環選自噻吩基、吡唑基、異噁唑基、噻二唑基、吡咯基、呋喃基、噻唑基、三唑基、四唑基和咪唑基。
24.根據權利要求1的化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R4中的5元雜芳環為吡唑基。
全文摘要
本發明提供了其中R
文檔編號C07D239/48GK1617858SQ02827802
公開日2005年5月18日 申請日期2002年12月3日 優先權日2001年12月7日
發明者B·巴拉姆, A·帕佩, A·托馬斯 申請人:阿斯特拉曾尼卡有限公司