腺苷a－的制作方法

專利名稱：腺苷a－的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及腺苷A2a受體激動劑與腎上腺素β2受體激動劑的吸入組合，其藥物組合物，包括給藥裝置，以及這種組合的用途。
腺苷A2a受體激動劑與腎上腺素β2受體激動劑的組合能用于治療氣道阻塞及其他炎癥性疾病，特別是氣道阻塞疾病哮喘，慢性阻塞性肺病(COPD)及其他由于支氣管反射增強、炎癥、支氣管過度反應(yīng)性與支氣管痙攣而惡化的阻塞氣道疾病。
可以使用本發(fā)明治療的具體疾病的例子包括呼吸系統(tǒng)疾病哮喘，急性呼吸窘迫綜合征，慢性肺部炎癥疾病，支氣管炎，慢性支氣管炎，慢性阻塞性肺部(氣道)疾病以及矽肺病以及免疫系統(tǒng)疾病如過敏性鼻炎與慢性鼻竇炎。
腺苷具有廣泛的生理活性，包括免疫與炎癥反應(yīng)，為受體-介導(dǎo)的并且涉及與至少四種類型的質(zhì)膜受體的相互作用。這些受體通常是指A1，A2a，A2b與A3。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)腺苷及其類似物具有廣譜抗炎活性，涉及大量不同種類的免疫與炎性細(xì)胞，包括嗜中性粒細(xì)胞與嗜曙紅細(xì)胞。嗜中性粒細(xì)胞上A2a受體的活化抑制這些細(xì)胞產(chǎn)生反應(yīng)性氧化劑及其他炎癥介質(zhì)如彈性蛋白酶，而且減少β2-整聯(lián)蛋白的表達(dá)。
已知A2a受體存在于淋巴細(xì)胞，嗜中性粒細(xì)胞，嗜曙紅細(xì)胞，嗜堿粒細(xì)胞，單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞，上皮細(xì)胞之上，以及與其相互作用之脈管內(nèi)皮組織上。腺苷與A2a受體結(jié)合可以通過影響若干所述細(xì)胞類型的活性而減少炎癥。例如，A2a受體激動劑顯著地抑制通過生理刺激物如嗜中性化學(xué)引誘劑，細(xì)胞因子與脂質(zhì)產(chǎn)物產(chǎn)生的氧化性物種。
腺苷A2a受體的被占據(jù)激活嗜中性腺苷酸環(huán)化酶，這導(dǎo)致胞內(nèi)環(huán)化AMP的增加。反過來，增加的嗜中性環(huán)化AMP導(dǎo)致激活的嗜中性氧化活性的降低。通過對各種其他類型炎性細(xì)胞的相關(guān)作用，A2a激動劑的抗炎活性的不止表現(xiàn)為抑制嗜中性粒細(xì)胞活性。腺苷還降低內(nèi)毒素刺激的單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞TNFα釋放，并且觀察到內(nèi)源性腺苷以及腺苷類似物通過與腺苷A2a受體結(jié)合降低人單核細(xì)胞TNF-α的產(chǎn)生。
具有A2a腺苷受體不同活性的腺苷類似物能減少白介素-6(IL-6)以以及白介素-8(IL-8)的內(nèi)毒素-刺激的釋放。由于能降低單核細(xì)胞的TNF-α的內(nèi)毒素-刺激的釋放，抑制氧化活性，降低白細(xì)胞粘附分子的表達(dá)，白介素-10(IL-10)也具有抗炎活性。腺苷促進(jìn)激活的人類單核細(xì)胞產(chǎn)生IL-10；因此，在A2a受體上結(jié)合腺苷促進(jìn)消除任何可能涉及的正在發(fā)作的炎癥反應(yīng)。
活化嗜曙紅細(xì)胞遷移進(jìn)入組織，引起細(xì)胞損害，以及例如過敏性和非過敏性哮喘、過敏性鼻炎以及特異反應(yīng)性皮炎等疾病中的炎癥。通過與嗜曙紅細(xì)胞上的A2a受體結(jié)合，腺苷以及腺苷A2a受體激動劑類似物抑制反應(yīng)性氧化物種的受激釋放，這是一種與對嗜中性粒細(xì)胞上A2a受體上抑制效果平行的反應(yīng)。
進(jìn)一步的，吸入的A2a激動劑經(jīng)由在肺中的作用抑制致敏豚鼠的嗜曙紅細(xì)胞聚集到肺中(參閱WO-A-99/67263)。這一點在A2a激動劑在動物體內(nèi)松弛血管并降低血壓時是很重要的，從而A2a激動劑可通過吸入型制劑而理想地產(chǎn)生的抗炎作用，與周邊隔室相比，吸入型制劑在肺內(nèi)具有高治療指數(shù)。
腎上腺素β受體出現(xiàn)在交感神經(jīng)系統(tǒng)中。它具有至少兩個類型。腎上腺素β1受體發(fā)現(xiàn)于心臟中，并且在經(jīng)由激動劑腎上腺素與去甲腎上腺素的作用調(diào)節(jié)心率的過程中起重要作用。腎上腺素β2受體存在于肺部內(nèi)的多種類型的細(xì)胞(例如氣道平滑肌細(xì)胞，上皮細(xì)胞與各種炎性細(xì)胞)中，并且腎上腺素β2受體激動劑是有效的支氣管擴張劑，引起氣道平滑肌的松弛。交感神經(jīng)類似胺已有很長的用于治療慢性氣道疾病的歷史，這些疾病的特征在于部分可逆氣道縮小如COPD(慢性阻塞性肺病)與哮喘，并且最先以靜脈內(nèi)的腎上腺素的形式用作支氣管擴張劑。隨后，使用吸入型β腎上腺素試劑如異丙基腎上腺素，相比于β1受體，其對于β2受體是相對非選擇性的，在有效支氣管擴張劑量時引起心動過速。新近所使用的吸入型β-腎上腺素試劑如羥甲異丁腎上腺素對β2受體選擇性更好但是效力短。吸入型β腎上腺素試劑福莫特羅(formoterol)與沙美特羅(salmeterol)既是選擇性的也是長效的。
現(xiàn)在已經(jīng)令人驚訝地發(fā)現(xiàn)將特定的腺苷A2a受體激動劑與腎上腺素β2受體激動劑組合，在對阻塞性氣道及其他炎癥性疾病的治療中，相對單獨使用任一試劑以及相對于其他已知的組合，具有顯著的優(yōu)點。該組合的優(yōu)點在于通過最適合該疾病病理學(xué)的機制，即腎上腺素β2受體激動，提供氣管的最佳控制，同時有效抑制不利的炎癥。通過這種方式，通過矯正引起咳嗽、產(chǎn)生粘液與呼吸困難的不正常的氣道神經(jīng)反射來控制該疾病的癥狀。通過吸入方式同時給藥腎上腺素β2受體激動劑與A2a激動劑，得到各種顯著效果，且不產(chǎn)生不利的外周作用。進(jìn)一步的，本發(fā)明的特定組合產(chǎn)生意外的協(xié)同作用，得到比單獨使用最大耐受劑量的其中任一藥物更大的效力。
因此本發(fā)明提供一種(a)如下通式的腺苷A2a受體激動劑 或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物與(b)腎上腺素β2受體激動劑的吸入型組合，其中通式I中R1為H，C1-C6烷基或芴基，所述C1-C6烷基任選地被1個或2個獨立地選自苯基和萘基的取代基所取代，所述苯基和萘基任選地被C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、鹵素或氰基取代；(A)R2為H或C1-C6烷基，R15為H或C1-C6烷基，X是(i)任選地被C1-C6烷基或C3-C8環(huán)烷基取代的無支鏈的C2-C3亞烷基，或(ii)具有如下通式結(jié)構(gòu)的基團(tuán)-(CH2)n-W-(CH2)p-其中W為C5-C7環(huán)亞烷基，任選地被C1-C6烷基取代，n為0或1，并且p為0或1，或(B)R15為H或C1-C6烷基，R2和X，和與其連接的氮原子一起表示各自任選地被C1-C6烷基取代的氮雜環(huán)丁-3-基、吡咯烷-3-基、哌啶-3-基、哌啶-4-基、高哌啶-3-基或高哌啶-4-基，或(C)R2為H或C1-C6烷基，R15和X，和與它們連接的氮原子一起表示各自任選地被C1-C6烷基取代的氮雜環(huán)丁-3-基、吡咯烷-3-基、哌啶-3-基、哌啶-4-基、高哌啶-3-基或高哌啶-4-基；或，R3和R4，和與它們連接的氮原子一起表示氮雜環(huán)丁基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、高哌啶基或高哌嗪基，各自任選地在環(huán)氮或碳原子上被C1-C6烷基或C3-C8環(huán)烷基取代，并且在不與環(huán)氮原子相鄰的環(huán)碳原子上任選地被NR6R7取代，或，R3為H、C1-C6烷基、C3-C8環(huán)烷基或苯甲基，以及R4為(a)氮雜環(huán)丁-3-基，吡咯烷-3-基，哌啶-3-基，哌啶-4-基，高哌啶-3-基或高哌啶-4-基，各自任選地被C1-C6烷基、C3-C8環(huán)烷基、苯基、苯甲基或het取代，或(b)-(C2-C6亞烷基)-R8，(c)-(C1-C6亞烷基)-R13，或(d)C1-C6烷基或C3-C8環(huán)烷基；R5為CH2OH或CONR14R14；R6和R7各自獨立地為H或C1-C6烷基或，和與它們連接的氮原子一起表示氮雜環(huán)丁基、吡咯烷基或哌啶基，其中所述氮雜環(huán)丁基、吡咯烷基與哌啶基任選地被C1-C6烷基取代；R8為(i)氮雜環(huán)丁-1-基、吡咯烷-1-基、哌啶-1-基、嗎啉-4-基、哌嗪-1-基、高哌啶-1-基、高哌嗪-1-基或四氫異喹啉-1-基，其各自任選地在環(huán)碳原子上被如下取代基所取代C1-C6烷基、C3-C8環(huán)烷基、苯基、C1-C6烷氧基-(C1-C6)-烷基、R9R9N-(C1-C6)-烷基、氟代-(C1-C6)-烷基、-CONR9R9、-COOR9或C2-C5烷?；?，在不與環(huán)氮原子相鄰的環(huán)碳原子上任選地被如下取代基所取代氟代-(C1-C6)-烷氧基、鹵素、-OR9、氰基、-S(O)mR10、-NR9R9、-SO2NR9R9、-NR9COR10或-NR9SO2R10，以及所述的哌嗪-1-基與高哌嗪-1-基在其不與C2-C6亞烷基連接的環(huán)氮原子上被C1-C6烷基、苯基、C1-C6烷氧基-(C2-C6)-烷基、R9R9N-(C2-C6)-烷基、氟代-(C1-C6)-烷基、C2-C5烷酰基、-COOR10、C3-C8環(huán)烷基、-SO2R10、-SO2NR9R9或-CONR9R9取代，或(ii)NR11R12；R9為H，C1-C6烷基，C3-C8環(huán)烷基或苯基；R10為C1-C6烷基、C3-C8環(huán)烷基或苯基；R11為H、C1-C6烷基、C3-C8環(huán)烷基或苯甲基；R12為H、C1-C6烷基、C3-C8環(huán)烷基、苯基、苯甲基、氟代-(C1-C6)-烷基、-CONR9R9、-COOR10、C2-C5烷?；?SO2NR9R9；R13為(a)苯基、吡啶-2-基、吡啶-3-基或吡啶-4-基，各自任選地被C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、-(C1-C3亞烷基)-(C1-C6烷氧基)、鹵素、氰基、-(C1-C3亞烷基)-CN、-CO2H、-(C1-C3亞烷基)-CO2H、-CO2(C1-C6烷基)、-(C1-C3亞烷基)-CO2(C1-C6烷基)、-(C1-C3亞烷基)-NR14R14、-CONR14R14或-(C1-C3亞烷基)-CONR14R14，或(b)氮雜環(huán)丁-2-基、氮雜環(huán)丁-3-基、吡咯烷-2-基、吡咯烷-3-基、哌啶-2-基、哌啶-3-基、哌啶-4-基、高哌啶-2-基、高哌啶-3-基或高哌啶-4-基，各自任選地被C1-C6烷基，C3-C8環(huán)烷基、苯基、苯甲基或het取代；R14為H或任選地被環(huán)丙基取代的C1-C6烷基；m為0，1或2；Y為CO、CS、SO2或C＝N(CN)；和在R4和R13定義中所使用的“het”是一個C-連接的，4-至6-員雜環(huán)，具有1至4個環(huán)氮雜原子，或具有1或2個氮環(huán)雜原子，以及1個氧或1個硫環(huán)雜原子，任選地被C1-C6烷基、C3-C8-環(huán)烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8環(huán)烷氧基、羥基、氧代或鹵素取代。
進(jìn)一步地，本發(fā)明提供一種用作藥物的吸入組合，包含(a)一種具有如上定義的通式(I)的腺苷A2a受體激動劑以及(b)一種腎上腺素β2受體激動劑。
進(jìn)一步地，本發(fā)明提一種組合，包含(a)一種如上定義的通式(I)的腺苷受體激動劑以及(b)一種腎上腺素β2受體激動劑，用于在氣道阻塞或其他炎性疾病的治療中通過吸入方式同時，依次或分別給藥。
進(jìn)一步地，本發(fā)明提供一種藥物組合物，其包含具有如上定義的通式(I)的腺苷A2a受體激動劑，腎上腺素β2受體激動劑以及藥學(xué)上可接受的賦形劑、稀釋劑或載體，用于在治療氣道阻塞或其他炎性疾病中通過吸入方式給藥。
進(jìn)一步地，本發(fā)明提供具有如上定義的通式(I)的腺苷A2a受體激動劑，或腎上腺素β2受體激動劑，在制備用于氣道阻塞或其他炎癥疾病的治療的藥物中的用途，該藥物通過吸入方式同時、依次或分別給藥。
進(jìn)一步地，本發(fā)明提供一種治療氣道阻塞或其他炎癥疾病的方法，包括向需要上述治療的哺乳動物通過吸入方式同時、依次或分別地給藥有效量的具有如上定義通式(I)的腺苷A2a受體激動劑以及腎上腺素β2受體激動劑。
進(jìn)一步地，本發(fā)明提供一種吸入裝置，用于在氣道阻塞或其他炎癥疾病的治療中同時、依次或分別地給藥具有如上定義的通式(I)的腺苷A2a受體激動劑以及腎上腺素β2受體激動劑。
通式(I)化合物的制備如申請?zhí)朠CT/IB01/00973，公開號為WO-A-01/94368的國際專利申請所述。
用于本發(fā)明的優(yōu)選的腺苷A2a受體激動劑包括6-[(2，2-二苯基乙基)氨基]-9-{(2R，3R，4S，5S)-5-[(乙氨基)羰基]-3，4-二羥基四氫-2-呋喃基}-N-{2-[({[1-(2-吡啶基)-4-哌啶基]氨基}羰基)氨基]乙基}-9H-嘌呤-2-酰胺(WO-A-01/94368的實施例8和35)及其藥學(xué)上可接受的鹽和溶劑化合物。
優(yōu)選，用于本發(fā)明組合的腎上腺素β2受體激動劑為選擇性的腎上腺素β2受體激動劑，即，它與腎上腺素β2受體的親合力比與所有其他已知的腎上腺素β受體的親合力更大。優(yōu)選，這種選擇性腎上腺素β2受體激動劑與腎上腺素β2受體的親合力大于它與其他的腎上腺素β受體的親合力至少100倍。
優(yōu)選的用于本發(fā)明的腎上腺素β2受體激動劑包括沙美特羅(salmeterol)，福莫特羅(formoterol)及其藥學(xué)上可接受的鹽及其溶劑化物。
用于本發(fā)明的特別優(yōu)選的腺苷A2a受體激動劑以及腎上腺素β2受體激動劑的組合包括6-[(2，2-二苯基乙基)氨基]-9-{(2R，3R，4S，5S)-5-[(乙基氨基)羰基]-3，4-二羥基四氫-2-呋喃基}-N-{2-[({[1-(2-吡啶基)-4-哌啶基]氨基}羰基)氨基]乙基}-9H-嘌呤-2-酰胺，或其藥學(xué)上可接受的鹽或其溶劑化物，以及沙美特羅(salmeterol)，或其藥學(xué)上可接受的鹽或其溶劑化物；和6-[(2，2-二苯基乙基)氨基]-9-{(2R，3R，4S，5S)-5-[(乙基氨基)羰基]-3，4-二羥基四氫-2-呋喃基}-N-{2-[({(1-(2-吡啶基)-4-哌啶基]氨基}羰基)氨基]乙基}-9H-嘌呤-2-酰胺，或其藥學(xué)上可接受的鹽或其溶劑化物，以及福莫特羅(formoterol)，或其藥學(xué)上可接受的鹽或其溶劑化物。
用于本發(fā)明的腺苷A2a受體激動劑或腎上腺素β2受體激動劑可任選地以其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物的形式使用。該鹽可以是酸加成鹽或堿鹽。
合適的酸加成鹽是從形成無毒性鹽的酸形成的，其例子是鹽酸鹽，氫溴酸鹽，氫碘酸鹽，硫酸鹽，硫酸氫鹽，硝酸鹽，磷酸鹽，磷酸氫鹽，醋酸鹽，馬來酸鹽，反丁烯二酸鹽，乳酸鹽，酒石酸鹽，檸檬酸鹽，葡萄糖酸鹽，琥珀酸鹽，糖酸鹽，苯甲酸鹽，甲磺酸鹽，乙磺酸鹽，苯磺酸鹽，對甲苯磺酸鹽以及雙羥萘酸鹽。
合適的堿鹽是從形成無毒性鹽的堿形成的，其例子是鈉，鉀，鋁，鈣，鎂，鋅以及二乙醇胺鹽。
關(guān)于合適的鹽的綜述參見Berge等J.Pharm.Sci.，66，1-19，1977。
用于本發(fā)明的腺苷A2a受體激動劑與腎上腺素β2受體激動劑的藥學(xué)上可接受的溶劑化物，或其鹽，包括其水合物。
本發(fā)明的腺苷A2a受體激動劑與腎上腺素β2受體激動劑可以以一種或多種多晶型形式存在。
本發(fā)明的腺苷A2a受體激動劑與腎上腺素β2受體激動劑可以包含一個或多個不對稱碳原子，并且因此存在兩個或更多立體異構(gòu)體形式(例如，R，R′福莫特羅(formoterol)是一個優(yōu)選的具體實施例)。當(dāng)該激動劑含有烯基或烯烴基團(tuán)，也會出現(xiàn)順式/反式(或Z/E)的異構(gòu)體。本發(fā)明化合物包括這些化合物單獨立體異構(gòu)體，以及合適時，其單獨的互變異構(gòu)體及其混合物。
可通過常規(guī)方法分離非對映異構(gòu)體或順式和反式異構(gòu)體，例如通過分步結(jié)晶，色譜或H.P.L.C.分離本發(fā)明化合物或其合適的鹽或其衍生物的的立體異構(gòu)體的混合物。根據(jù)需要，本發(fā)明化合物的單獨的對映體還可以通過相應(yīng)的光學(xué)純中間體制備或者通過拆分制備，例如使用合適的手性載體通過H.P.L.C分離相應(yīng)的外消旋化合物，或者分步結(jié)晶非對映異構(gòu)體，該非對映異構(gòu)體是通過相應(yīng)的外消旋化合物與合適的光學(xué)活性酸或堿反應(yīng)形成的。
本發(fā)明還包括所述化合物或藥學(xué)上可接受的鹽的所有的同位素形式。所述同位素形式定義為其中至少一個原子被一個具有相同原子序數(shù)但不同于自然界中通常發(fā)現(xiàn)的原子質(zhì)量的原子所替換?？梢园诒景l(fā)明化合物以及其藥學(xué)上可接受鹽中的同位素的例子包括氫，碳，氮，氧，磷，硫，氟和氯的同位素，例如分別為2H，3H，13C，14C，15N，17O，18O，31P，32P，35S，18F以及36Cl。本發(fā)明化合物以及其藥學(xué)上可接受的鹽的某些同位素形式，例如，其中包含放射性同位素如3H或14C的，能用于藥物和/或培養(yǎng)基組織分布研究。由于容易制備和檢測，氚化的，即，3H，和碳14，即14C，同位素特別優(yōu)選。進(jìn)一步地，同位素比如氘的替代，即2H，由于具有更大的代謝穩(wěn)定性，例如增加體內(nèi)半衰期或減少必要劑量，可以提供一定的治療優(yōu)勢，因此在一些情況下是優(yōu)選的。
可以使用本發(fā)明化合物治療的疾病種類包括但不限于哮喘、慢性的或急性的支氣管收縮、慢性支氣管炎、小氣道阻塞、肺氣腫、慢性阻塞性肺病(COPD)、具有與之相關(guān)的慢性支氣管炎、肺氣腫或的呼吸困難的COPD，以及特征為不可逆、漸進(jìn)性慢性阻塞性肺病的COPD。
哮喘可使用本發(fā)明藥物組合治療的一個最重要的呼吸疾病是哮喘。哮喘是一種慢性的日益常見的世界性疾病，其特征在于間歇性可逆氣道阻塞、氣道過度反應(yīng)和炎癥。哮喘的誘因還有待確定，但哮喘最常見的病理的表現(xiàn)是氣道炎癥，這在即便只是輕度哮喘患者的氣道中也可能是明顯的。該炎癥引起氣道反射，導(dǎo)致血漿蛋白滲出、呼吸困難和支氣管收縮。根據(jù)支氣管活體檢查以及灌洗研究，已經(jīng)清楚地顯示哮喘涉及肥大細(xì)胞、嗜曙紅細(xì)胞和T-淋巴細(xì)胞浸潤患者氣道。在特異反應(yīng)性哮喘中支氣管肺泡灌洗(BAL)顯示白介素(IL)-3，(IL)-4，(IL)-5以及粒細(xì)胞/巨噬細(xì)胞菌落刺激因子(GM-CSF)的活化，這表明存在T-輔助2(Th-2)類似T細(xì)胞群。
本發(fā)明的藥物組合用于治療特異性和非特異性哮喘。術(shù)語“特異性”是指一種朝著對普通環(huán)境抗原I型(立即的)超敏性反應(yīng)演變的遺傳傾向性。最普通臨床表現(xiàn)為過敏性鼻炎，而支氣管氣喘，特異反應(yīng)性皮炎以及食物過敏發(fā)生頻率稍低。因此，此處所使用的表述“特異性哮喘”是“過敏性哮喘”的同義詞，即在過敏人體中的過敏表現(xiàn)的支氣管哮喘。此處所使用的術(shù)語“非特異性哮喘”是指所有的其他的哮喘，特別是基本的或“真實的”哮喘，其受到各種因素誘發(fā)，包括劇烈運動，刺激性顆粒，心理壓力，等。
慢性阻塞性肺病(COPD)本發(fā)明的藥物組合還可用于治療COPD或COAD，包括與之關(guān)聯(lián)的慢性支氣管炎，肺氣腫或呼吸困難。COPD的特征為微弱可逆、漸進(jìn)性氣道阻塞。慢性支氣管炎與大軟骨氣道中粘膜下層的粘液分泌腺的增生與肥大有關(guān)。在末端和呼吸道細(xì)支氣管中都發(fā)現(xiàn)了杯狀細(xì)胞增生，粘膜與粘膜下層的炎性細(xì)胞浸潤，浮腫，纖維化，粘液栓，以及平滑肌增加。已知小氣道是氣道阻塞的主要的部位。肺氣腫的特征為肺泡壁受損以及肺彈性損失。已經(jīng)證實許多危險因素與COPD的發(fā)生有關(guān)。已經(jīng)證實吸煙與COPD之間存在聯(lián)系。其他的危險因素包括曝露于煤粉中以及各種遺傳因素。參見Sandford等“Genetic risk factors for chronic obstructive pulmonary disease”，Eur.Respir.J.10 1380-1391，1997。COPD的發(fā)病率在不斷上升并且成為工業(yè)化國家人群的重要的經(jīng)濟負(fù)擔(dān)。COPD在臨床上具有各式各樣的形式，從并未喪失功能的簡單慢性支氣管炎到處于嚴(yán)重的喪失功能慢性呼吸衰竭狀態(tài)患者。
慢性阻塞性肺病的特征為氣道炎癥，這點和哮喘一樣，但已在支氣管肺泡的灌洗流體以及患者的痰液中發(fā)現(xiàn)的炎性細(xì)胞是嗜中性粒細(xì)胞以及巨噬細(xì)胞而不是嗜曙紅細(xì)胞。還發(fā)現(xiàn)COPD患者中炎性介質(zhì)的水平增高，包括IL-8，LTB4，和TNF-α，并且已經(jīng)發(fā)現(xiàn)所述患者的支氣管表面上皮以及上皮下層被T淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞浸潤。可以通過使用β-激動劑以及抗膽堿生理活性的支氣管擴張藥減輕COPD患者的癥狀，但不能改變疾病的發(fā)展。已經(jīng)使用茶堿治療COPD，但并未取得太大成功，這部分是因為它可能產(chǎn)生副作用。類固醇也不能滿意地用作治療COPD的藥劑，因為它們作為抗炎藥物相對無效。
因此，使用本發(fā)明的藥物組合治療COPD及其相關(guān)疾病，以及包括氣道阻塞的疾病，這是本領(lǐng)域的一個顯著進(jìn)步。本發(fā)明不局限于任何特定的作用方式或任何關(guān)于使用方法的假設(shè)，其中通過利用本發(fā)明的藥物組合已經(jīng)獲得了所要求的治療目的。
支氣管炎以及支氣管擴張如上所述，本發(fā)明藥物組合具有上述的特定的和不同的抑制活性，因此它們用于治療任何類型、病因或發(fā)病機理的支氣管炎，包括，例如，具有短暫而嚴(yán)重過程的急性支氣管炎，由受涼、吸入刺激性物質(zhì)，或急性感染引起的；卡他性支氣管炎(catarrhal bronchitis)，急性支氣管炎的一種，表現(xiàn)為大量的膿性粘液的釋放；慢性支氣管炎，支氣管炎的一種長期持續(xù)的形式，或多或少伴有在間歇階段后復(fù)發(fā)傾向，歸因于急性或慢性的一般疾病反復(fù)發(fā)作，其特征為咳嗽發(fā)作、咳痰缺乏或過多、以及肺部組織的繼發(fā)性變化；干燥性支氣管炎，特征為粘痰分泌缺乏；傳染性哮喘性支氣管炎，為一種綜合癥，特征為在哮喘患者中呼吸道感染之后的支氣管痙攣的癥狀進(jìn)一步發(fā)展；增生性支氣管炎，是一種與排痰性咳嗽相關(guān)的支氣管炎。
可以通過利用一些本領(lǐng)域已知的抑制氣道反射的不同模型，包括如下所述的血漿滲出和支氣管痙攣模型，證實和說明本發(fā)明的藥物組合在治療特異反應(yīng)性哮喘或非特異反應(yīng)性哮喘，COPD，或其他的慢性炎性氣道疾病的用途。
支氣管擴張藥活性-cAMP不僅涉及平滑肌松弛，而且對氣道平滑肌增生具有全面的抑制作用，這兩者都可能由于通過本發(fā)明的組分活化A2a受體而導(dǎo)致?？梢酝ㄟ^cAMP調(diào)節(jié)氣道平滑肌肥大和增生，而這些情況是慢性哮喘的常見形態(tài)特征。
可以通過利用一些如下所述的本領(lǐng)域不同已知模型證實和說明本發(fā)明的藥物組合在治療特異反應(yīng)性哮喘或非特異反應(yīng)性哮喘、COPD或其他慢性炎性氣道疾病中的用途。
體外支氣管痙攣活性-下述測試過程顯示本發(fā)明的藥物組合引起豚鼠氣管平滑肌松弛的能力。使用硫噴妥鈉(100mg/kgi.p.)將豚鼠(350-500克)處死。解剖出氣管并切成2-3cm的片段。在交替軟骨板上，從橫剖面橫切氣管以得到厚度為3-5mm的組織環(huán)。棄去近端和遠(yuǎn)端的環(huán)。將各個環(huán)垂直地固定在不銹鋼支架上，其中一個固定在器官浴的基座上，而另一個與一個等長傳感器連接。在37℃將環(huán)浸泡在Krebs溶液中(組合物μMNaHCO325；NaCl113；KCl4.7；MgSO4·7H2O1.2；KH2PO41.2；CaCl22.5；葡萄糖11.7)并通入O2/CO2(95∶5，v/v)氣體。通過域刺激收縮用所述方式制備的環(huán)。為確定解痙活性，將用于測試的本發(fā)明的藥物組合溶解于生理鹽水中，并每間隔5分鐘，向器官浴中量遞增地加入該組合，以提供一個累積濃度效應(yīng)曲線。
在上述試驗?zāi)Ｐ椭?，本發(fā)明的藥物組合一般地在濃度0.001到1.0μM的濃度范圍內(nèi)抑制豚鼠氣管環(huán)制成品的域刺激收縮。
人類支氣管的松弛-在腫瘤外科手術(shù)期間切除且在取出后3天內(nèi)得到人類肺的樣品。切除小支氣管(內(nèi)徑≈2至5毫米)，將其切成片斷并放入2ml充滿胎牛血清(FCS)的液氮貯存安瓿中，該胎牛血清含有1.8M二甲亞砜(DMSO)以及0.1M蔗糖作為防冷凍試劑。將該安瓿放入聚苯乙烯箱(11×11×22cm)中，并在保持在-70℃的冷凍機中以大約0.6℃/m的平均冷卻速率緩慢冷凍。3-15小時之后，將該安瓿轉(zhuǎn)移到液氮(-196℃)中，并在其中保存直至使用。在使用前將該組織置于-70℃30-60分鐘，然后通過將其置于37℃水浴中2.5分鐘解凍。而后在37℃將該支氣管片斷放入一個含有Krebs-Henseleit溶液的盤中漂洗(μMNaCl118，KCl4.7，MgSO41.2，CaCl21.2，KH2PO41.2，NaHCO325，葡萄糖11，EDTA0.03)，切成環(huán)并將其懸浮于10ml器官浴(organbath)中，以便在大約1g的預(yù)加載負(fù)荷之下記錄等長張力。施加域刺激使張力進(jìn)一步增加，已知域刺激引起氣道樣品中的神經(jīng)活化，以及通過乙酰膽堿及其他神經(jīng)源介質(zhì)的釋放產(chǎn)生張力。通過累積加入制得濃度反應(yīng)曲線，當(dāng)先前濃度已產(chǎn)生最大效果時增加濃度。在濃度反應(yīng)曲線的末端加入罌粟堿(300μM)以引起該支氣管軟骨環(huán)的完全松弛。該效果被記錄為100％松弛。
在上述試驗?zāi)Ｐ椭?，本發(fā)明藥物組合在人類支氣管環(huán)制成品上產(chǎn)生濃度相關(guān)松弛的濃度范圍內(nèi)通常為0.001至1.0μM，優(yōu)選的具體實施方式
為在5.0nM到500nM的濃度范圍內(nèi)。
對辣椒素誘發(fā)的支氣管收縮的抑制-使用苯巴比妥鈉(100mg/kg，i.p.[腹內(nèi)])將實驗前可自由攝取食物和水的雄性Dunkin-Hartley豚鼠(400-800g)進(jìn)行麻醉。經(jīng)由一個氣管套管(大約8mL/kg 1Hz)使用空氣氧氣混合物(45∶55 v/v)給動物通氣，該動物用加熱墊保持溫度為37℃，并使用肛門溫度計進(jìn)行控制。通過呼吸速率計在氣管上監(jiān)視通氣，該呼吸速率計連接到壓差傳感器其與呼吸泵成一直線。直接經(jīng)由一個胸腔插管，使用壓差傳感器監(jiān)視胸腔內(nèi)部的壓力變化，以便測量和顯示胸腔與氣管之間的壓力差別。通過這些對氣流和肺與肺內(nèi)腔(transpulmonary)之間的壓力測量，使用數(shù)字電子呼吸分析器計算每個呼吸循環(huán)的氣道阻力(R1cmH2O/l/s)與一致性(Cddyn)。使用壓力傳感器從頸動脈記錄血壓和心率。
當(dāng)基礎(chǔ)阻力和一致性穩(wěn)定時，通過靜脈內(nèi)推注辣椒素誘發(fā)急性支氣管收縮。辣椒素溶于100％乙醇，并用磷酸鹽緩沖鹽水稀釋。在10分鐘間隔內(nèi)給藥2-3次后測量反應(yīng)，當(dāng)對辣椒素的反應(yīng)穩(wěn)定時，施用用于測試的本發(fā)明的藥物組合。氣管內(nèi)(i.t.)或十二指腸滴注或者靜脈內(nèi)推注后，1-8小時測量支氣管收縮逆轉(zhuǎn)。支氣管痙攣活性表示為注入辣椒素后對初始、最大阻力(RD)的％抑制。ED50值表示50％減少由辣椒素誘發(fā)的阻力增加的劑量。作用持續(xù)時間定義為50％或更多地減少支氣管收縮的以分鐘為單位的時間。ED20值表征對血壓(BP)和心率(HR)的影響，即在給藥5分鐘后測量20％減少BP或HR的劑量。
在上述試驗?zāi)Ｐ椭校景l(fā)明的藥物組合一般地在0.001-0.1mg/kgi.t.[氣管內(nèi)部]范圍內(nèi)顯示支氣管擴張活性。此外，輸送到氣管內(nèi)(i.t.)的組合在支氣管痙攣上至少顯示附加抑制效果，各單獨組分能抑制超過50％的觀察到的控制反應(yīng)。
LPS-誘發(fā)肺部中性粒細(xì)胞增多癥-肺部嗜中性粒細(xì)胞聚集和活化被認(rèn)為是COPD和嚴(yán)重哮喘的一個重要的病理學(xué)特征。因此，在動物中對全部或任一所述端點的抑制提供了本發(fā)明實用性的支持性證據(jù)。
在簡單全身麻醉下，通過吸入法或氣管內(nèi)(i.t.)滴注法單獨或組合使用該測試產(chǎn)品預(yù)處理雄性Wistar-Albino大鼠(150-250g)或雄性Dunkin-Hartley豚鼠(400-600g)。在給藥該化合物1-24小時之后，使用細(xì)菌脂多糖(liopolysaccharide，LPS)的吸入氣溶膠刺激動物，該氣溶膠足以誘發(fā)接下來的1-24小時內(nèi)明顯的肺中性粒細(xì)胞增多癥。通過在支氣管沖洗液細(xì)胞計數(shù)或通過測定在肺沖洗液或組織中的中性粒細(xì)胞產(chǎn)物檢測中性粒細(xì)胞增多癥。在該測試系統(tǒng)中，本發(fā)明的藥物一般地在0.0001到0.1mg/kg i.t.劑量范圍內(nèi)顯示抗炎活性。出乎意料地，盡管各組分單獨不發(fā)揮明顯的抗炎效果，該組合輸送到氣管內(nèi)(i.t.)對炎癥至少具有附加效果。另外，可以觀察到如本發(fā)明中組合使用，則使用較低劑量的抗炎效果，與使用高劑量的一個單獨組分的抗炎效果相同，因此全身副作用降至最小化。
豚鼠過敏性試驗-使用Dunkin-Hartley豚鼠(400-600g體重)評價本發(fā)明藥物組合對呼吸困難和支氣管痙攣癥狀，即呼吸困難或艱難和肺阻力增加，以及對炎癥癥狀，即肺中性粒細(xì)胞增多和嗜酸細(xì)胞增多的治療效果的試驗。
用于該測試的卵白蛋白(EA)，等級V，結(jié)晶并且凍干，氫氧化鋁和馬來酸美吡拉敏(mepyramine maleate)市場上可買到。在一個內(nèi)部尺寸為10×6×4英寸的透明塑膠箱中進(jìn)行刺激以及隨后的呼吸讀數(shù)。該箱頭端和軀干部分是可分離的。在使用中這兩個通過夾子牢固地保持在一起，并且在兩室之間通過軟橡皮墊圈保持氣密。通過該箱頭端的中心，經(jīng)過一個氣密墊嵌入噴霧器，并且箱的每端還具有出口。將呼吸速率計插入到箱的一端并且與一個容量壓力傳感器聯(lián)結(jié)，然后該壓力傳感器通過合適的連接器連接到一個dynograph上。霧化該抗原，打開出口并且將呼吸速率計與箱隔離。然后關(guān)閉出口，在記錄呼吸模式期間呼吸速率計與箱是連接的。將2ml的3％抗原的鹽水溶液放入各個噴霧器中，并且與一個小型隔膜泵中的10psi，流速為8l/m的空氣一起產(chǎn)生氣溶膠，用于刺激。
通過皮下及腹膜內(nèi)注射1ml含1毫克EA與200mg氫氧化鋁鹽水溶液的懸浮液致敏豚鼠。在致敏12至24天后使用所述豚鼠。為了除去反應(yīng)的組胺組分，在進(jìn)行氣溶膠刺激30分鐘前，對豚鼠腹膜內(nèi)用2mg/kg的美吡拉敏(mepyarmine)預(yù)處理。然后將豚鼠暴露于3％EA鹽水溶液的氣溶膠中精確的1分鐘時間，然后在接下來30分鐘中記錄呼吸狀況圖。隨后在死后1-48小時測定肺部炎癥。從呼吸記錄計算連續(xù)呼吸困難的持續(xù)時間。
在刺激前0.5-4小時，一般通過氣管內(nèi)(i.t.)給藥或通過氣溶膠施用測試的本發(fā)明的藥物組合。該化合物組合溶于鹽水或者溶于生物相容性溶劑中。通過與用賦形劑處理的對照組比較，以它們減少呼吸困難與支氣管痙攣癥狀的幅度以及持續(xù)時間和/或肺部炎癥的幅度為基礎(chǔ)測定該化合物的活性。通過一系列劑量評價本發(fā)明藥物組合的測試，得到ED50，ED50被定義為50％抑制癥狀持續(xù)時間的劑量(mg/kg)。
抗炎活性-通過對嗜曙紅細(xì)胞或嗜中性粒細(xì)胞活化的抑制表明本發(fā)明的藥物組合的抗炎活性。在該實驗中，從非特異反應(yīng)性的志愿者收集試驗血樣(50ml)，其嗜曙紅細(xì)胞數(shù)值范圍在0.06與0.47×109L-1之間。將靜脈血收集到含有5ml枸櫞酸鈉(3.8％，pH 7.4)的離心管中。
使用磷酸緩沖鹽水(PBS，不含鈣也不含鎂)稀釋(1∶1，v∶v)抗凝血，并在一個50ml離心管中將其鋪展于15ml等滲Percoll(密度1.082-1.085g/ml，pH7.4)。離心(30分鐘，1000×g，20℃)后，小心地吸出位于血漿/Percoll分界面的單核細(xì)胞，并棄去。
將中性粒細(xì)胞/嗜曙紅細(xì)胞/紅血球(體積大約5ml)輕輕地再懸浮于35ml的等滲氯化銨溶液(NH4Cl，155mM；KHCO3，10mM；EDTA.0.1mM；0-4℃)。15分鐘后，將細(xì)胞在含胎牛血清(2％，F(xiàn)CS)的PBS中漂洗兩次(10分鐘，400×g，4℃)。
使用磁性細(xì)胞分離系統(tǒng)以分離嗜曙紅細(xì)胞與嗜中性粒細(xì)胞。該系統(tǒng)能按照表面標(biāo)記在懸浮液中分離細(xì)胞，其包含一個永磁體，其中放有一個包括可磁化的鋼基體的柱。在使用之前，使用PBS/FCS使該柱平衡1小時然后在倒轉(zhuǎn)的基礎(chǔ)上通過一個20ml注射器用冰冷卻的PBS/FCS沖洗。將一個21G皮下注射針連接到該柱的基座上，并且可以使1-2ml冰冷卻的緩沖液流過該針。
粒細(xì)胞離心后，吸取上清液，并且輕輕地將細(xì)胞再懸浮于100μl磁性顆粒(抗-CD16單克隆抗體，與超順磁顆粒偶合)中。在冰上培養(yǎng)該嗜曙紅細(xì)胞/中性粒細(xì)胞/抗CD16磁性顆?；旌衔?0分鐘，然后用冰冷卻的PBS/FCS稀釋至5ml。將細(xì)胞懸浮液慢慢地引入柱的頂端，并且打開旋塞使細(xì)胞緩慢地進(jìn)入到鋼基體中。然后使用PBS/FCS(35ml)沖洗該柱，沖洗時，PBS/FCS被小心地加入到柱的頂端，以免破壞已經(jīng)截留在鋼基體中的磁性標(biāo)記嗜中性粒細(xì)胞。將非標(biāo)記嗜曙紅細(xì)胞收集到一個50ml離心管中并洗滌(10分鐘，400×g，4℃)。將所得的顆粒再懸浮于5ml Hank′s平衡鹽溶液(HBSS)中，以便可以在使用之前檢測細(xì)胞數(shù)目與純度。從磁鐵上撤除所述分離柱，并且洗脫中性粒細(xì)胞級分。然后用PBS(50ml)與乙醇(絕對純的)沖洗該柱，并在4℃保存。
使用一個微細(xì)胞計數(shù)器計算總的細(xì)胞。向樣品中加入一滴溶源性溶液，30秒后再次計數(shù)以測定紅血球的污染。在一個Shandon Cytospin 2細(xì)胞離心涂片儀(100μl樣品，3分鐘，500rpm)上制備細(xì)胞離心涂片。將該制品染色，并且通過光學(xué)顯微鏡進(jìn)行不同細(xì)胞計數(shù)，至少檢驗500個細(xì)胞。通過排除錐蟲藍(lán)評價細(xì)胞成活力。
在HBSS中稀釋嗜曙紅細(xì)胞或嗜中性粒細(xì)胞，并且用移液管以1-10×103細(xì)胞/孔將其放入96孔微量滴定板(MTP)中。每個孔包含200μl樣品，包括100μl細(xì)胞懸浮液；50μl HBSS；10μl光澤精；20μl活化刺激物，以及20μl測試化合物。
加入活化刺激物fMLP(1-10μM)或C5a(1-100nM)之前，將樣品和測試化合物或賦形劑一起培養(yǎng)10分鐘，該活化刺激物溶于二甲亞砜，并隨后在緩沖液中稀釋，使所使用的最高溶劑濃度為1％(100μM測試化合物)。振搖MTPs以促進(jìn)細(xì)胞與介質(zhì)的混合，并將MTP放入光度計中。在20分鐘同時測量每個孔的總的化學(xué)發(fā)光與時間相關(guān)圖譜，并且結(jié)果以任意單位表示，或者以在不存在測試化合物的條件下fMLP誘導(dǎo)的化學(xué)發(fā)光的百分?jǐn)?shù)表示。結(jié)果通過Hill方程擬合并且自動計算IC50值。
在上述試驗方法中，本發(fā)明的藥物組合一般在0.0001μM至0.5μM的濃度范圍內(nèi)有效，在優(yōu)選的具體實施方案，在0.1nM到100nM的濃度范圍內(nèi)有效。
本發(fā)明的藥物組合的抗炎活性還能通過抑制血漿滲出到大鼠氣道來證實。在該試驗中，取出氣管組織并且測定血漿滲出程度。該試驗同樣地與其他慢性氣管炎癥疾病相關(guān)，所述疾病包括但不限于COPD，所以在該部分不作重復(fù)敘述。
使用戊巴比妥鈉麻醉Wistar白鼠(150-200g)或Dunkin-Hartley豚鼠(450-600g)，安裝靜脈和動脈套管。靜脈內(nèi)注射(i.v.)(30mg/kg)Evans Blue染料以結(jié)合血漿蛋白。10分鐘后氣管內(nèi)(i.t.)給藥測試藥物，10分鐘后靜脈內(nèi)注射辣椒素(3μg/kg)。30分鐘后，除去氣管組織，過夜提取至甲酰胺中，并且在620nm處讀取吸收。在一些實驗中，劑量的順序被顛倒，因此在EvansBlue和炎癥刺激物之前給藥該化合物。
一般地，在上述試驗?zāi)Ｐ椭斜景l(fā)明的藥物組合在0.001至0.1mg/kg i.t劑量范圍內(nèi)顯示出抗炎活性。
從上可知本發(fā)明的藥物組合可用于炎性或阻塞性氣道疾病或其他涉及氣道阻塞的疾病的治療。特別是用于支氣管哮喘的治療。
由于其抗炎活性以及對氣道過度反應(yīng)的作用，本發(fā)明的藥物組合可用于阻塞性或炎性氣道疾病的治療，特別是預(yù)防性治療。因此，在持續(xù)時間內(nèi)連續(xù)和有規(guī)律地給藥本發(fā)明化合物的組合，能對阻塞性或炎性氣道疾病隨之引起的支氣管收縮或其他癥狀的復(fù)發(fā)提供事先保護(hù)。本發(fā)明化合物的組合還用于控制、改善或逆轉(zhuǎn)這些疾病的基本狀態(tài)。
由于其支氣管擴張活性，本發(fā)明的藥物組合能在例如慢性或急性支氣管收縮的治療中用作支氣管擴張藥，以及用于阻塞性或炎性氣道疾病的癥狀治療。
本發(fā)明所涉及的阻塞性或炎性氣道疾病包括哮喘；塵肺病；慢性嗜酸細(xì)胞性肺炎；慢性阻塞性氣道或肺部疾病(COAD或COPD)；以及成人呼吸窘迫綜合癥(ARDS)，以及由其他藥物治療例如阿司匹林或β-激動劑治療所引起的氣道過度反應(yīng)的惡化。
本發(fā)明的腺苷A2a受體激動劑與腎上腺素β2受體激動劑可以單獨給藥或以組合形式給藥，但一般以包含適宜的藥物賦形劑、稀釋劑或載體的混合物形式給藥。
本發(fā)明的腺苷A2a受體激動劑以及腎上腺素β2受體激動劑優(yōu)選通過吸入方式給藥，并且方便地從干粉吸入器以干粉形式(單獨或作為混合物，例如含乳糖的混合物)給藥，或者從一個加壓容器、泵、噴霧器、霧化器(優(yōu)選使用產(chǎn)生細(xì)小霧滴的電液壓動力噴霧器)或者噴霧裝置，以噴射氣霧劑的形式給藥，其中可使用或者不使用適宜的推進(jìn)劑，推進(jìn)劑的例子是二氯二氟甲烷，三氯氟甲烷，二氯四氟乙烷，氫氟烷如1，1，1，2-四氟乙烷(HFA 134A[商標(biāo)])或1，1，1，2，3，3，3-七氟丙烷(HFA 227EA[商標(biāo)])，二氧化碳，以及全氟取代烴例如潘氟隆(Perflubron，商標(biāo))或其他合適的氣體。在加壓氣霧劑的情況下，可以通過一個閥確定劑量單元來進(jìn)行計量給藥。該加壓容器，泵，噴霧器，霧化器或噴霧裝置可以包含該活性化合物的溶液或懸浮液，例如使用乙醇(任選地，含水乙醇)或適宜用于分散、溶解和膨脹釋放(extending release)的試劑與推進(jìn)劑的混合物作為溶劑，其可進(jìn)一步包含潤滑劑，例如脫水山梨糖醇三油酸酯(sorbitan trioleate)?？芍苽溆糜谖肫骰虼等肫?insuffiator)中的膠囊劑，發(fā)泡劑與藥筒(從例如白明膠或HPMC制備)，包含本發(fā)明的化合物、適宜的粉末基質(zhì)如乳糖或淀粉、以及性能調(diào)節(jié)劑，如1-白氨酸、甘露醇或硬脂酸鎂的粉末混合物。
在以干粉制劑或懸浮液制劑吸入本發(fā)明的化合物之前，將其微粉化至適合于通過吸入釋放的尺寸(一般被認(rèn)為是小于5微米)?？梢酝ㄟ^各種方法實施微粉化，例如螺旋噴流研磨、流化床噴流研磨或使用超臨界流體結(jié)晶。
在用于產(chǎn)生精細(xì)霧滴的電液壓動力霧化器中所使用的適宜的溶液制劑中，每次動作包含1μg到10mg本發(fā)明化合物，并且體積可在1到100μl。一個典型的制劑可以包含本發(fā)明的化合物、丙二醇、無菌水、乙醇與氯化鈉?？梢允褂闷渌娜軇├绺视突蚓垡叶即姹?。
優(yōu)選使用的氣霧劑或干粉制劑其每次計量劑量或“噴”中含有1至4000μg施用于患者的本發(fā)明化合物。氣霧劑每天總的劑量在1μg到20毫克的范圍內(nèi)，其可以以單個一劑，或者更常見地，以全天分開多次的形式給藥。
按重量計(w/w)，所使用的腺苷A2a受體激動劑腎上腺素β2受體激動劑優(yōu)選的比例取決于所測試的特定的組合。這是由于各個化合物的效力的不同。醫(yī)生將決定最適合各個具體患者的各個化合物的準(zhǔn)確劑量，并且這隨特定患者的年齡、體重和反應(yīng)而改變。
應(yīng)理解此處所有引用的治療包括治愈、緩解和預(yù)防。
權(quán)利要求
1.一種(a)如下通式的腺苷A2a受體激動劑 或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物與(b)腎上腺素β2受體激動劑的吸入型組合，其中通式I中R1為H，C1-C6烷基或芴基，所述C1-C6烷基任選地被1個或2個獨立地選自苯基和萘基的取代基所取代，所述苯基和萘基任選地被C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、鹵素或氰基取代；(A)R2為H或C1-C6烷基，R15為H或C1-C6烷基，X是(i)任選地被C1-C6烷基或C3-C8環(huán)烷基取代的無支鏈的C2-C3亞烷基，或(ii)具有如下通式結(jié)構(gòu)的基團(tuán)-(CH2)n-W-(CH2)p-其中W為C5-C7環(huán)亞烷基，任選地被C1-C6烷基取代，n為0或1，并且p為0或1，或(B)R15為H或C1-C6烷基，R2和X，和與其連接的氮原子一起表示各自任選地被C1-C6烷基取代的氮雜環(huán)丁-3-基、吡咯烷-3-基、哌啶-3-基、哌啶-4-基、高哌啶-3-基或高哌啶-4-基，或(C)R2為H或C1-C6烷基，R15和X，和與它們連接的氮原子一起表示各自任選地被C1-C6烷基取代的氮雜環(huán)丁-3-基、吡咯烷-3-基、哌啶-3-基、哌啶-4-基、高哌啶-3-基或高哌啶-4-基；或，R3和R4，和與它們連接的氮原子一起表示氮雜環(huán)丁基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、高哌啶基或高哌嗪基，各自任選地在環(huán)氮或碳原子上被C1-C6烷基或C3-C8環(huán)烷基取代，并且在不與環(huán)氮原子相鄰的環(huán)碳原子上任選地被NR6R7取代，或，R3為H、C1-C6烷基、C3-C8環(huán)烷基或苯甲基，以及R4為(a)氮雜環(huán)丁-3-基，吡咯烷-3-基，哌啶-3-基，哌啶-4-基，高哌啶-3-基或高哌啶-4-基，各自任選地被C1-C6烷基、C3-C8環(huán)烷基、苯基、苯甲基或het取代，或(b)-(C2-C6亞烷基)-R8，(c)-(C1-C6亞烷基)-R13，或(d)C1-C6烷基或C3-C8環(huán)烷基；R5為CH2OH或CONR14R14；R6和R7各自獨立地為H或C1-C6烷基或，和與它們連接的氮原子一起表示氮雜環(huán)丁基、吡咯烷基或哌啶基，其中所述氮雜環(huán)丁基、吡咯烷基與哌啶基任選地被C1-C6烷基取代；R8為(i)氮雜環(huán)丁-1-基、吡咯烷-1-基、哌啶-1-基、嗎啉-4-基、哌嗪-1-基、高哌啶-1-基、高哌嗪-1-基或四氫異喹啉-1-基，其各自任選地在環(huán)碳原子上被如下取代基所取代C1-C6烷基、C3-C8環(huán)烷基、苯基、C1-C6烷氧基-(C1-C6)-烷基、R9R9N-(C1-C6)-烷基、氟代-(C1-C6)-烷基、-CONR9R9、-COOR9或C2-C5烷?；诓慌c環(huán)氮原子相鄰的環(huán)碳原子上任選地被如下取代基所取代氟代-(C1-C6)-烷氧基、鹵素、-OR9、氰基、-S(O)mR10、-NR9R9、-SO2NR9R9、-NR9COR10或-NR9SO2R10，以及所述的哌嗪-1-基與高哌嗪-1-基在其不與C2-C6亞烷基連接的環(huán)氮原子上被C1-C6烷基、苯基、C1-C6烷氧基-(C2-C6)-烷基、R9R9N-(C2-C6)-烷基、氟代-(C1-C6)-烷基、C2-C5烷酰基、-COOR10、C3-C8環(huán)烷基、-SO2R10、-SO2NR9R9或-CONR9R9取代，或(ii)NR11R12；R9為H，C1-C6烷基，C3-C8環(huán)烷基或苯基；R10為C1-C6烷基、C3-C8環(huán)烷基或苯基；R11為H、C1-C6烷基、C3-C8環(huán)烷基或苯甲基；R12為H、C1-C6烷基、C3-C8環(huán)烷基、苯基、苯甲基、氟代-(C1-C6)-烷基、-CONR9R9、-COOR10、C2-C5烷?；?SO2NR9R9；R13為(a)苯基、吡啶-2-基、吡啶-3-基或吡啶-4-基，各自任選地被C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、-(C1-C3-亞烷基)-(C1-C6烷氧基)、鹵素、氰基、-(C1-C3亞烷基)-CN、-CO2H、-(C1-C3亞烷基)-CO2H、-CO2(C1-C6烷基)、-(C1-C3亞烷基)-CO2(C1-C6烷基)、-(C1-C3亞烷基)-NR14R14、-CONR14R14或-(C1-C3亞烷基)-CONR14R14，或(b)氮雜環(huán)丁-2-基、氮雜環(huán)丁-3-基、吡咯烷-2-基、吡咯烷-3-基、哌啶-2-基、哌啶-3-基、哌啶-4-基、高哌啶-2-基、高哌啶-3-基或高哌啶-4-基，各自任選地被C1-C6烷基，C3-C8環(huán)烷基、苯基、苯甲基或het取代；R14為H或任選地被環(huán)丙基取代的C1-C6烷基；m為0，1或2；Y為CO、CS、SO2或C＝N(CN)；和在R4和R13定義中所使用的“het”是一個C-連接的，4-至6-員雜環(huán)，具有1至4個環(huán)氮雜原子，或具有1或2個氮環(huán)雜原子，以及1個氧或1個硫環(huán)雜原子，任選地被C1-C6烷基、C3-C8-環(huán)烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8環(huán)烷氧基、羥基、氧代或鹵素取代。
2.如權(quán)利要求1所述的組合，其中通式(I)結(jié)構(gòu)的腺苷A2a受體激動劑為6-[(2，2-二苯基乙基)氨基]-9-{(2R，3R，4S，5S)-5-[(乙基氨基)羰基]-3，4-二羥基四氫-2-呋喃基}-N-{2-[({[1-(2-吡啶基)4-哌啶基]氨基}羰基)氨基]乙基}-9H-嘌呤-2-酰胺或其藥學(xué)上可接受的鹽或其溶劑化物。
3.如權(quán)利要求1或2所述的組合，其中腎上腺素β2受體激動劑為沙美特羅或其藥學(xué)上可接受的鹽或其溶劑化物。
4.如權(quán)利要求1或2所述的組合，其中腎上腺素β2受體激動劑為福莫特羅或其藥學(xué)上可接受的鹽或其溶劑化物。
5.如前述任一項權(quán)利要求所述的組合，其用作藥物。
6.如權(quán)利要求1至4中任一項所述的組合，其用于在阻塞性氣道和其他炎癥疾病的治療中同時、依次或分別給藥。
7.一種藥物組合物，包含如權(quán)利要求1所定義的通式(I)的腺苷A2a受體激動劑，腎上腺素β2受體激動劑以及藥學(xué)上可接受的賦形劑、稀釋劑或載體，用于在阻塞性氣道和其他炎癥疾病的治療中通過吸入方式給藥。
8.如權(quán)利要求7所述的藥物組合物，其中通式(I)的腺苷A2a受體激動劑以及腎上腺素β2受體激動劑如權(quán)利要求2至4任意一項所定義。
9.如權(quán)利要求1所定義的通式(I)的腺苷A2a受體激動劑或腎上腺β2受體激動劑在制備用于在阻塞性氣道和其他炎癥疾病的治療中的藥物中的用途，該藥物是同時、依次或分別地通過吸入方式給藥兩種活性成分。
10.如權(quán)利要求9所述的用途，其中通式(I)的腺苷A2a受體激動劑以及腎上腺素β2受體激動劑如權(quán)利要求2至4任一項所定義。
11.一種治療阻塞性氣道和其他炎癥疾病的方法，包括給需要這種治療的哺乳動物通過吸入方式同時、依次或分別給藥有效量的如權(quán)利要求1定義的通式(I)腺苷A2a受體激動劑和腎上腺素β2受體激動劑。
12.如權(quán)利要求11所述的方法，其中通式(I)的腺苷A2a受體激動劑和腎上腺素β2受體激動劑如權(quán)利要求2至4任一項所定義。
13.一種吸入裝置，用于在阻塞性氣道和其他炎癥疾病的治療中，同時、依次或分別給藥如權(quán)利要求1定義的通式(I)腺苷A2a受體激動劑和腎上腺素β2受體激動劑。
14.如權(quán)利要求13所定義的裝置，其中通式(I)的腺苷A2a受體激動劑和腎上腺素β2受體激動劑如權(quán)利要求2至4任一項所定義。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種組合，包含(a)如文中定義的腎上腺素A
文檔編號C07H19/16GK1856314SQ02824416
公開日2006年11月1日 申請日期2002年11月28日 優(yōu)先權(quán)日2001年12月6日
發(fā)明者邁克爾·耶登 申請人:美國輝瑞有限公司