專利名稱：促進喜樹種子芽內10－羥基喜樹堿生成的方法
技術領域：
本發明涉及一種利用環境因子影響次生代謝產物的方法，特別涉及提供一種利用超聲促進喜樹種子芽內轉化10-羥基喜樹堿的方法。
背景技術：
目前，由于天然10-羥基喜樹堿在喜樹種子中含量很低，10-羥基喜樹堿主要是通過人工合成的途徑獲得。中國知識產權局專利局1986年8月13日公開了《用生物轉化法生產10-羥基喜樹堿的方法(CN 851 00520 A)》，利用無菌黃霉素將喜樹堿轉化為10-羥基喜樹堿，轉化率為50％。人工合成10-羥基喜樹堿的缺點是毒副作用大，而利用無菌黃霉素將喜樹堿轉化為10-羥基喜樹堿的工藝復雜，成本高。
發明內容
本發明的目的在于克服上述不足之處，利用超聲促進喜樹種子發芽過程中10-羥基喜樹堿的轉化，進而得到高含量、高得率的10-羥基喜樹堿的提取液。
為了達到上述目的，本發明采用的技術方案是將喜樹種子在常溫下水培192-720小時，使其發芽，將發芽的喜樹種子置于超聲裝置中，再加水，使其浸沒種芽，在頻率20-40KHz，溫度20-35℃條件下超聲輻射10-30分鐘后，將輻射后的喜樹種芽置于預先加入70-95％乙醇的勻漿機中進行種芽組織的破碎、勻漿處理并過濾，得到含10-羥基喜樹堿的濾液。
本發明工藝簡單易操作、成本低，所得提取液中10-羥基喜樹堿的含量相當于1.5-2‰的投料量的干燥喜樹種子，10-羥基喜樹堿的含量比干燥的喜樹種子增加了20-25倍。
具體實施例方式
下面對本發明的實施例作進一步詳細描述，本發明將喜樹種子在常溫下水培192-720小時，使其發芽，將發芽的喜樹種子置于超聲裝置中，再加水，使其浸沒種芽，在頻率20-40KHz，溫度20-35℃條件下超聲輻射10-30分鐘后，將輻射后的喜樹種芽置于預先加入70-95％乙醇的勻漿機中進行種芽組織的破碎、勻漿處理并過濾，得到含10-羥基喜樹堿的濾液。
將10公斤喜樹種子在常溫下水培750小時，使其發芽，將發芽的喜樹種子置于超聲裝置中，再加水25公斤，使其浸沒種芽，在頻率40KHz，溫度20℃條件下超聲輻射30分鐘后，將輻射后的喜樹種芽置于預先加入25升85％乙醇的勻漿機中進行種芽組織的破碎、勻漿處理并過濾，得到含10-羥基喜樹堿的濾液。濾液離心，取上清液，經高效液相測定，濾液中10-羥基喜樹堿的含量為26.39mg/l，10-羥基喜樹堿的含量比干燥的喜樹種子增加了25倍。
權利要求
1.促進喜樹種子芽內10-羥基喜樹堿生成的方法，其特征在于將喜樹種子在常溫下水培192-720小時，使其發芽，將發芽的喜樹種子置于超聲裝置中，再加水，使其浸沒種芽，在頻率20-40KHz，溫度20-35℃條件下超聲輻射10-30分鐘后，將輻射后的喜樹種芽置于預先加入70-95％乙醇的勻漿機中進行種芽組織的破碎、勻漿處理并過濾，得到含10-羥基喜樹堿濾液。
全文摘要
本發明涉及一種促進喜樹種子芽內10－羥基喜樹堿生成的方法，其工藝流程是將喜樹種子水培，使其發芽，將發芽的喜樹種子置于加水的超聲裝置中，進行超聲輻射，然后，將輻射后的喜樹種芽置于加有乙醇的勻漿機中進行種芽組織的破碎、勻漿處理并過濾，得到含10－羥基喜樹堿的濾液。本發明具有合成成本低、10－羥基喜樹堿得率高的特點。
文檔編號C07D491/22GK1482129SQ0213292
公開日2004年3月17日 申請日期2002年9月11日 優先權日2002年9月11日
發明者祖元剛, 史權, 趙春建, 祖柏實, 唐中華, 付玉杰, 張寶友 申請人:東北林業大學, 祖元剛