專利名稱：新的α－氨基酸化合物、其制備方法和包含它們的藥物組合物的制作方法
技術領域：
本發明涉及新的α-氨基酸化合物、其制備方法和包含它們的藥物組合物以及它們作為二肽基肽酶IV(DPP IV)的抑制劑的用途。
二肽基肽酶IV是一種存在于許多人體組織并且與許多病理學有關的膜絲氨酸蛋白酶。
具體地，已經證明，DPP IV與GLP-1(胰升糖素樣肽-1)的失活有關。GLP-1是一種刺激胰腺分泌胰島素的重要試劑，因而對血液中葡萄糖的水平具有直接的有益影響。
因此，抑制DPP IV構成了一種極有前景的治療葡萄糖不耐受癥(glucose intolerance)以及與高血糖癥有關的疾病例如非胰島素依賴型糖尿病(II型糖尿病)或肥胖的方法。
文獻中已經描述了DPP IV抑制劑，例如在專利申請EP0490379和期刊Adv.Exp.Med.Biol.1997，421，157-160中描述了酰胺化合物，以及在專利申請DE19826972中描述了氨基甲酸酯化合物。
而且，在專利申請WO96/27593中描述了作為NO-合成酶抑制劑的α-氨基酸化合物—精氨酸類似物在治療中樞神經系統和周圍神經系統疾病、胃腸道系統和泌尿系統功能障礙疾病以及與心血管系統或肺支氣管系統有關的疾病中的用途。
本發明的化合物具有二肽基肽酶IV抑制性能，這使得它們特別地可用于治療葡萄糖不耐受癥以及與高血糖癥有關的疾病。
更特別地，本發明涉及式(I)的化合物、其可能存在的互變異構體、旋光異構體及其與藥學上可接受的酸形成的加成鹽 其中 代表一個任選地被氰基取代的5-元含氮雜環，Ak代表一個直鏈或支鏈的(C1-C6)亞烷基鏈，X代表一條單鍵或一個亞苯基，R1和R2可以相同或不同，各自代表氫原子或直鏈或支鏈的(C1-C6)烷基，Y代表NR4或CH-NO2，R4代表氫原子或直鏈或支鏈的(C1-C6)烷基，當Y代表CH-NO2時，R3代表一個選自直鏈或支鏈的(C1-C6)烷基、硝基和氰基的基團；或當Y代表NR4時，R3代表一個選自硝基和氰基的基團，其中不包括這樣的化合物其中 代表一個未取代的5-元含氮雜環，同時Ak代表基團-(CH2)3-，同時X代表一條單鍵，同時Y代表NH，并且R3代表硝基。
在藥學上可接受的酸中，例如可以非限定性的地提到鹽酸、氫溴酸、硫酸、磷酸、乙酸、三氟乙酸、乳酸、丙酮酸、丙二酸、琥珀酸、谷氨酸、富馬酸、酒石酸、馬來酸、檸檬酸、抗壞血酸、甲磺酸、樟腦酸、草酸等。
應當明白，“5-元含氮雜環”是指含有一、二或三個雜原子、其中一個雜原子是氮原子而其它存在的雜原子選自氧原子、氮原子和硫原子原子的5-元飽和單環基團。
優選的5-元含氮雜環是吡咯烷基和噻唑烷基。
其中R2代表氫原子的式(I)化合物以式(Ia)和(Ib)所代表的兩種互變異構體形式存在 它們都構成了本發明整體的一部分。
其中R3代表氫原子的式(I)化合物以式(Ic)和(Id)所代表的兩種互變異構體形式存在 它們都構成了本發明整體的一部分。
優選的式(I)化合物是其中 代表一個任選地被一個氰基取代的1-吡咯烷基或任選地被一個氰基取代的1，3-噻唑烷-3-基。
優選的式(I)化合物是其中酰胺官能團的α-位構型為(S)的那些化合物。
本發明的一個優選方面涉及其中Ak代表基團(CH2)4的式(I)化合物。
本發明的另一個優選方面涉及其中 代表一個任選地被一個氰基取代的1-吡咯烷基或任選地被一個氰基取代的1，3-噻唑烷-3-基并且Ak代表基團(CH2)3的式(I)化合物。
本發明的另外一個優選方面涉及其中X代表一條單鍵的式(I)化合物。
本發明的又一個優選方面涉及其中Y代表一個基團NR4(其中R4代表氫原子或直鏈的或支鏈的(C1-C6)烷基)的式(I)化合物。
本發明還有一個優選方面涉及其中R3代表硝基的式(I)化合物。
在本發明的優選化合物中，可以更具體地提到N-{(4S)-4-氨基-5-[(2S)-2-氰基-1-吡咯烷基]-5-氧代戊基}-N’-硝基胍、其互變異構體、旋光異構體及其與一種藥學上可接受的酸形成的加成鹽，N-{(5S)-5-氨基-6-[(2S)-2-氰基-1-吡咯烷基]-6-氧代己基}-N’-硝基胍、其互變異構體、旋光異構體及其與一種藥學上可接受的酸形成的加成鹽，和N-{(5S)-5-氨基-6-(1，3-噻唑烷-3-基)-6-氧代己基}-N’-硝基胍、其互變異構體、旋光異構體及其與一種藥學上可接受的酸形成的加成鹽。
本發明還涉及一種制備式(I)化合物的方法，其特征在于使一種式(II)的化合物 其中Ak和X如式(I)所定義，P1代表一種氨基官能團的保護基，而P2代表一種不同于P1的氨基官能團的保護基，與一種式(III)的化合物在常規的肽偶聯條件下反應 其中 如式(I)所定義，脫保護后，得到一種式(IV)的化合物 其中 ，P1、Ak和X如前面所定義，然后通過常規的有機化學反應，再經過脫保護反應，把它轉變為式(I)的化合物，如果需要的話，按照常規的純化技術對該化合物進行純化，如果需要的話，按照常規的分離技術把它分離為旋光異構體，并且，如果需要的話，用一種藥學上可接受的酸把它轉變為一種加成鹽。
式(Ie)的化合物—式(I)化合物的一種特例 其中 、R1、Ak和X如式(I)所定義，也可以以式(V)的化合物為原料而制得 其中P1、Ak和X如前面所定義，使該原料與式(III)的化合物在常規的肽偶聯條件下反應，在脫保護(如果需要的話)后，得到式(Ie)的化合物，如果需要的話，按照常規的純化技術對該化合物進行純化，如果需要的話，按照常規的分離技術把它分離成它的旋光異構體，并且，如果需要的話，用一種藥學上可接受的酸把它轉變為加成鹽。
本發明的化合物除了是新穎的外，還具有很有價值的藥理活性。它們具有二肽基肽酶IV-抑制性能，使得它們可用于治療葡萄糖不耐受癥以及與高血糖癥有關的疾病例如II型糖尿病或肥胖。
本發明還涉及包含至少一種式(I)的化合物作為活性成份和一種或多種合適的惰性的無毒賦形劑的藥物組合物。在本發明的藥物組合物中，可以更特別地提到適用于口服、非腸胃給藥(靜脈注射、肌肉內注射或皮下注射)或鼻腔給藥的那些組合物、片劑或糖錠劑、適用于舌下給藥的片劑、明膠膠囊、錠劑、栓劑、可注射制劑、可飲用懸浮液等。
使用的劑量可以根據疾病的性質和嚴重程度、給藥方式和病人的年齡和體重以及任意相關的治療而進行調整。每24小時的劑量在從0.5mg至2g的范圍內變化，一次或分多次給藥。
下列實施例詳細說明本發明但是不以任何方式限制本發明。
所用的原料是已知的產物或者可以按照已知的方法制備。
實施例中所描述的化合物的結構是按照常規的光譜技術(紅外、核磁共振、質譜)進行測定的。
應當明白，術語“構型(2α)或(2β)的化合物”是指一種選自絕對構型為(2R)和(2S)的化合物中的一種化合物，應當明白，當化合物(2α)代表絕對構型為(2R)的化合物時，則化合物(2β)代表化合物(2S)。實施例1N-{(4S)-4-氨基-5-[(2S)-2-氰基-1-吡咯烷基]-5-氧代戊基}-N’-硝基胍鹽酸鹽步驟AN-{(4S)-4-[(叔丁氧基羰基)氨基]-5-[(2S)-2-氰基-1-吡咯烷基]-5-氧代戊基}-N’-硝基胍把10mmol(2S)-2-氰基-吡咯烷、10mmol 1-羥基苯并三唑和10mmol二環己基碳化二亞胺加入10mmol N2-(叔丁氧基羰基)-N5-[(亞氨基)-(硝基氨基)甲基]鳥氨酸的二甲基甲酰胺溶液中，在室溫下攪拌過夜，把生成的二環己基脲過濾出來，然后通過蒸發除去二甲基甲酰胺。通過硅膠色譜純化(洗脫劑二氯甲烷/乙醇＝95/5)所得的殘留物，得到預期的產物。
步驟BN-{(4S)-4-氨基-5-[(2S)-2-氰基-1-吡咯烷基]-5-氧代戊基}-N’-硝基胍鹽酸鹽把4N鹽酸的二噁烷溶液加入10mmol前一步驟中得到的化合物的二噁烷溶液中，在室溫下攪拌24小時后，通過蒸發除去溶劑，加入水，冷凍干燥溶液，得到預期的產物。元素微量分析C％ H％ N％ Cl％計算值 39.58 6.04 29.37 10.62測定值 40.35 6.00 29.00 10.90實施例2N-[(4S)-4-氨基-5-(1-吡咯烷基)-5-氧代戊基]-N’-氰基胍倍半鹽酸鹽步驟A1-[(S)-N5-(芐氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)鳥氨酰基]吡咯烷按照實施例1步驟A中所述的方法，以(S)-N5-(芐氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)鳥氨酸和吡咯烷為原料，制得預期的產物。
步驟B1-[(S)-N2-(叔丁氧基羰基)鳥氨酰基]吡咯烷在10％鈀/炭存在下，在室溫和常壓下，把10mmol前一步驟中得到的化合物的乙醇溶液氫化6小時，然后過濾反應混合物，蒸發，然后加入水后進行冷凍干燥，得到預期的產物。
步驟CN-{(4S)-4-[(叔丁氧基羰基)氨基]-5-(1-吡咯烷基)-5-氧代戊基}-N’-氰基胍按照Synthesis 1975，332中所述的方法，以前一步驟中得到的化合物和NaN(CN)2為原料，制得預期的產物。
步驟DN-[(4S)-4-氨基-5-(1-吡咯烷基)-5-氧代戊基]-N’-氰基胍倍半鹽酸鹽按照實施例1的步驟B中描述的方法，以前一步驟中得到的化合物為原料，制得預期的產物。元素微量分析C％ H％ N％ Cl％計算值 43.03 7.06 27.37 17.32測定值 43.26 7.23 26.82 16.85實施例3N-[(4S)-4-氨基-5-(1，3-噻唑烷-3-基)-5-氧代戊基]-N’-氰基胍步驟A3-{(S)-N5-(叔丁氧基羰基)-N2-[(9H-芴-9-基-甲氧基)羰基]鳥氨酰基]-1，3-噻唑烷按照實施例1步驟A中所述的方法，以(S)-N5-(叔丁氧基羰基)-N2-(9H-芴-9-基-甲氧基)羰基]鳥氨酸和1，3-噻唑烷為原料，制得預期的產物。
步驟B3-{(S)-N2-[(9H-芴-9-基-甲氧基)羰基]鳥氨酰基}-1，3-噻唑烷鹽酸鹽按照實施例1步驟B中所述的方法，以前一步驟中得到的化合物為原料，得到預期的產物。
步驟CN-[(4S)-4-氨基-5-(1，3-噻唑烷-3-基)-5-氧代戊基]-N’-氰基胍按照Synthesis 1975，332中所述的方法，以前一步驟中得到的化合物和NaN(CN)2為原料，制得預期的產物。元素微量分析C％ H％ N％ Cl％計算值 44.43 6.71 31.08 11.86測定值 44.41 6.68 30.18 10.52實施例4N-[(5S)-5-氨基-6-(1-吡咯烷基)-6-氧代己基]-N’-氰基胍鹽酸鹽按照實施例2中所述的方法，以(S)-N6-(芐氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)賴氨酸代替(S)-N5-(芐氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)鳥氨酸作為原料，制得預期的產物。實施例5N1-[(4S)-4-氨基-5-(1-吡咯烷基)-5-氧代戊基]-N2-甲基-2-硝基-1，1-乙二胺二鹽酸鹽步驟A1-[(S)-N5-(芐氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)鳥氨酰基]吡咯烷按照實施例1步驟A中所述的方法，以(S)-N5-(芐氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)鳥氨酸和吡咯烷為原料，制得預期的產物。
步驟B1-[(2S)-N2-(叔丁氧基羰基)鳥氨酰基]吡咯烷在10％鈀/炭存在下，在室溫和常壓下，把10mmol前一步驟中得到的化合物的乙醇溶液氫化6小時，然后過濾反應混合物，蒸發，然后加入水后進行冷凍干燥，得到預期的產物。
步驟CN1-{(4S)-4-[(叔丁氧基羰基)氨基]-5-(1-吡咯烷基)-5-氧代戊基}-N2-甲基-2-硝基-1，1-乙二胺按照Bioorg.Med.Chem.1997，7(23)，3045-3048中所述的方法，以前一步驟中得到的化合物和N-甲基-1-甲硫基-2-硝基-乙二胺為原料，制得預期的產物。
步驟DN1-[(4S)-4-氨基-5-(1-吡咯烷基)-5-氧代戊基]-N2-甲基-2-硝基-1，1-乙二胺二鹽酸鹽按照實施例1的步驟B中描述的方法，以前一步驟中得到的化合物為原料，制得預期的產物。元素微量分析C％ H％ N％計算值40.23 7.03 19.55測定值40.17 6.98 18.92實施例6N-[(4S)-4-氨基-5-(1-吡咯烷基)-5-氧代戊基]-N″-氰基-N’-甲基胍鹽酸鹽步驟A1-[(S)-N5-(芐氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)鳥氨酰基]吡咯烷按照實施例1步驟A中所述的方法，以(S)-N5-(芐氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)鳥氨酸和吡咯烷為原料，制得預期的產物。
步驟B1-[(2S)-N2-(叔丁氧基羰基)鳥氨酰基]吡咯烷在10％鈀/炭存在下，在室溫和常壓下，把10mmol前一步驟中得到的化合物的乙醇溶液氫化6小時，然后過濾反應混合物，蒸發，然后加入水后進行冷凍干燥，得到預期的產物。
步驟CN-{(4S)-4-[(叔丁氧基羰基)氨基]-5-(1-吡咯烷基)-5-氧代戊基}-N″-氰基-N’-甲基胍按照Chem.Pharm.Bull.1997，45(1)，53-61中所述的方法，以前一步驟中得到的化合物、N-氰基亞氨基-S，S-二甲基二硫代碳酸酯和甲胺為原料，制得預期的產物。
步驟DN-[(4S)-4-氨基-5-(1-吡咯烷基)-5-氧代戊基]-N″-氰基-N’-甲基胍鹽酸鹽按照實施例1的步驟B中描述的方法，以前一步驟中得到的化合物為原料，制得預期的產物。質譜[M+H]+＝267；[M+C1]+＝301；[M-H]-＝265實施例7N-{(4S)-4-氨基-5-[(4R)-4-氰基-1，3-噻唑烷-3-基]-5-氧代戊基}-N’-硝基胍鹽酸鹽按照實施例1中描述的方法，以(4R)-4-氰基-1，3-噻唑烷代替(2S)-2-氰基吡咯烷，制得預期的產物。元素微量分析C％ H％ N％ S％ Cl％計算值 34.14 5.16 27.87 9.11 10.08測定值 34.32 5.11 27.70 9.23 10.44實施例8N-{(4S)-4-氨基-5-[(2α)-2-氰基-1，3-噻唑烷-3-基]-5-氧代戊基}-N’-硝基胍鹽酸鹽步驟AN-{(4S)-4-[(叔丁氧基羰基)氨基]-5-[2-氨基甲酰基-1，3-噻唑烷-3-基]-5-氧代戊基}-N’-硝基胍鹽酸鹽按照實施例1步驟A中所述的方法，以(±)-1，3-噻唑烷-2-甲酰胺(carboxamide)代替(2S)-2-氰基吡咯烷，制得預期的產物。
步驟BN-{(4S)-4-[(叔丁氧基羰基)氨基]-5-[(2α)-2-氨基甲酰基-1，3-噻唑烷-3-基]-5-氧代戊基}-N’-硝基胍鹽酸鹽通過硅膠色譜分離前一步驟A中得到的非對映異構體的混合物(洗脫劑二氯甲烷/甲醇/氫氧化銨＝90/10/0.5)。預期的產物是以此方式從非對映異構體中分離出的第一個組份。
步驟CN-{(4S)-4-[(叔丁氧基羰基)氨基]-5-[(2α)-2-氰基-1，3-噻唑烷-3-基]-5-氧代戊基}-N’-硝基胍把20mmol咪唑加入10mmol前一步驟中得到的化合物的吡啶溶液中，然后把反應混合物冷卻到-30℃，滴加40mmol POCl3，然后用1小時的時間把溫度調節到-20℃。通過蒸發除去吡啶，把殘留物溶于乙酸乙酯中。洗滌溶液，干燥，濃縮，殘留物通過硅膠色譜純化(洗脫劑二氯甲烷/甲醇/氫氧化銨＝95/5/0.5)，得到預期的產物。
步驟DN-{(4S)-4-氨基-5-[(2α)-2-氰基-1，3-噻唑烷-3-基]-5-氧代戊基}-N’-硝基胍鹽酸鹽按照實施例1的步驟B中描述的方法，以前一步驟C中得到的化合物為原料，制得預期的產物。元素微量分析C％H％ N％S％ Cl％計算值 34.145.1627.879.1110.08測定值 34.414.9327.679.359.71實施例9N-{(4S)-4-氨基-5-[(2β)-2-氰基-1，3-噻唑烷-3-基]-5-氧代戊基}-N’-硝基胍鹽酸鹽按照實施例8的步驟C和D中描述的方法，以實施例8的步驟B中分離出來的非對映異構體的第二個組份為原料，制得預期的產物。質譜LC/ESI/HR和MS/MS[M+H]+＝316。實施例10N-[(5S)-5-氨基-6-(1-吡咯烷基)-6-氧代己基]-N’-硝基胍鹽酸鹽按照實施例1中所述的方法，以N2-(叔丁氧基羰基)-N6-[(亞氨基)-(硝基氨基)甲基]賴氨酸和吡咯烷為原料，制得預期的產物。實施例11N-{(5S)-5-氨基-6-[(2S)-2-氰基-1-吡咯烷基]-6-氧代己基}-N’-硝基胍鹽酸鹽按照實施例1中所述的方法，以N2-(叔丁氧基羰基)-N6-[(亞氨基)-(硝基氨基)甲基]賴氨酸和(2S)-2-氰基吡咯烷為原料，制得預期的產物。元素微量分析C％ H％ N％ Cl％計算值41.44 6.38 28.19 10.19測定值41.66 6.31 27.78 10.18實施例12N-[(5S)-5-氨基-6-(1，3-噻唑烷-3-基)-6-氧代己基]-N’-硝基胍鹽酸鹽按照實施例1中所述的方法，以N2-(叔丁氧基羰基)-N6-[(亞氨基)-(硝基氨基)甲基]賴氨酸和1，3-噻唑烷為原料，制得預期的產物。質譜[M+H]+＝305，[M-H]-＝303實施例13N-{(5S)-5-氨基-6-[(4R)-4-氰基-1，3-噻唑烷-3-基]-6-氧代己基}-N’-硝基胍鹽酸鹽按照實施例1中所述的方法，以N2-(叔丁氧基羰基)-N6-[(亞氨基)-(硝基氨基)甲基]賴氨酸和(4R)-4-氰基-1，3-噻唑烷為原料，制得預期的產物。元素微量分析C％H％ N％S％ Cl％計算值 36.115.5126.808.769.69測定值 36.365.4926.688.8110.04實施例14N-{(5S)-5-氨基-6-[(2α)-2-氰基-1，3-噻唑烷-3-基]-6-氧代己基}-N’-硝基胍鹽酸鹽步驟AN-{(5S)-5-[(叔丁氧基羰基)氨基]-6-[2-氨基甲酰基-1，3-噻唑烷-3-基]-6-氧代己基}-N’-硝基胍鹽酸鹽按照實施例1步驟A中所述的方法，以N2-(叔丁氧基羰基)-N6-[(亞氨基)-(硝基氨基)甲基]賴氨酸和(±)-1，3-噻唑烷-2-甲酰胺為原料，制得預期的產物。
步驟BN-{(5S)-5-[(叔丁氧基羰基)氨基]-6-[(2α)-2-氨基甲酰基-1，3-噻唑烷-3-基]-6-氧代己基}-N’-硝基胍鹽酸鹽通過硅膠色譜分離前一步驟A中得到的非對映異構體的混合物(洗脫劑二氯甲烷/甲醇/氫氧化銨＝90/10/0.5)。預期的產物是以此方式從非對映異構體中分離出的第一個組份。
步驟CN-{(5S)-5-氨基-6-[(2α)-2-氰基-1，3-噻唑烷-3-基]-6-氧代己基}-N’-硝基胍鹽酸鹽按照實施例8的步驟C和D中描述的方法，以前一步驟中得到的化合物為原料，制得預期的產物。元素微量分析C％ H％ N％S％ Cl％計算值 36.11 5.5126.808.769.69測定值 36.52 5.4926.859.269.51實施例15N-{(5S)-5-氨基-6-[(2β)-2-氰基-1，3-噻唑烷-3-基]-6-氧代己基}-N’-硝基胍鹽酸鹽按照實施例8的步驟C和D中描述的方法，以實施例14的步驟B中分離出來的非對映異構體的第二個組份為原料，制得預期的產物。元素微量分析C％H％ N％S％ Cl％計算值 36.115.5126.808.769.69測定值 36.505.4926.009.669.66實施例16N-{(4S)-4-氨基-5-[(2S)-2-氰基-1-吡咯烷基]-5-氧代戊基}-N’-氰基胍倍半鹽酸鹽按照實施例2中所述的方法，以(S)-N5-(芐氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)鳥氨酸和(2S)-2-氰基-吡咯烷為原料，制得預期的產物。元素微量分析C％ H％N％ Cl％計算值43.03 7.06 27.37 17.32測定值43.26 7.23 26.82 16.85實施例17N-[(5S)-5-氨基-6-[(2S)-2-氰基-1-吡咯烷基]-6-氧代己基]-N’-氰基胍鹽酸鹽按照實施例2中所述的方法，以(S)-N6-(芐氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)賴氨酸和(2S)-2-氰基-吡咯烷為原料，制得預期的產物。質譜[M+H]+＝292，[M-H]-＝290實施例18N-[(5S)-5-氨基-6-(1，3-噻唑烷-3-基)-6-氧代己基]-N’-氰基胍鹽酸鹽按照實施例2中所述的方法，以(S)-N6-(芐氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)賴氨酸和1，3-噻唑烷為原料，制得預期的產物。實施例19N1-[(4S)-4-氨基-5-(1，3-噻唑烷-3-基)-5-氧代戊基]-N2-甲基-2-硝基-1，1-乙二胺二鹽酸鹽按照實施例5中所述的方法，以(S)-N5-(芐氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)鳥氨酸和1，3-噻唑烷為原料，制得預期的產物。元素微量分析C％ H％ N％S％ Cl％計算值 35.11 6.1618.618.5218.84測定值 35.54 5.9918.048.6119.51實施例20N1-[(5S)-5-氨基-6-(1-吡咯烷基)-6-氧代己基]-N2-甲基-2-硝基-1，1-乙二胺二鹽酸鹽按照實施例5中所述的方法，以(S)-N6-(芐氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)賴氨酸和吡咯烷為原料，制得預期的產物。元素微量分析C％ H％N％ Cl％計算值41.94 7.31 18.81 19.05測定值41.87 7.26 18.34 19.75實施例21N1-[(5S)-5-氨基-6-[(2S)-2-氰基吡咯烷基]-6-氧代己基]-N2-甲基-2-硝基-1，1-乙二胺二鹽酸鹽按照實施例5中所述的方法，以(S)-N6-(芐氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)賴氨酸和(2S)-2-氰基吡咯烷為原料，制得預期的產物。質譜ESI/FIA/HR和MS/MS[M+H]+＝325；[M+Na]+＝347。實施例22N1-[(5S)-5-氨基-6-(1，3-噻唑烷-3-基)-6-氧代己基]-N2-甲基-2-硝基-1，1-乙二胺二鹽酸鹽按照實施例5中所述的方法，以(S)-N6-(芐氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)賴氨酸和1，3-噻唑烷為原料，制得預期的產物。元素微量分析C％H％ N％S％ Cl％計算值 36.936.4617.948.2218.17測定值 37.086.4917.178.1118.63實施例23N-{(4S)-4-氨基-5-[(2S)-2-氰基-1-吡咯烷基]-5-氧代戊基}-N”-氰基-N’-甲基胍二鹽酸鹽按照實施例6中所述的方法，以(S)-N5-(芐氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)鳥氨酸和(2S)-2-氰基-吡咯烷為原料，制得預期的產物。實施例24N-[(4S)-4-氨基-5-(1，3-噻唑烷-3-基)-5-氧代戊基]-N”-氰基-N’-甲基胍鹽酸鹽按照實施例6中所述的方法，以(S)-N5-(芐氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)鳥氨酸和1，3-噻唑烷為原料，制得預期的產物。實施例25N-[(5S)-5-氨基-6-(1-吡咯烷基)-6-氧代己基]-N”-氰基-N’-甲基胍鹽酸鹽按照實施例6中所述的方法，以(S)-N6-(芐氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)賴氨酸和吡咯烷為原料，制得預期的產物。實施例26N-{(5S)-5-氨基-6-[(2S)-2-氰基-1-吡咯烷基]-6-氧代己基}-N”-氰基-N’-甲基胍鹽酸鹽按照實施例6中所述的方法，以(S)-N6-(芐氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)賴氨酸和(2S)-2-氰基吡咯烷為原料，制得預期的產物。實施例27N-[(5S)-5-氨基-6-(1，3-噻唑烷-3-基)-6-氧代己基]-N”-氰基-N’-甲基胍鹽酸鹽按照實施例6中所述的方法，以(S)-N6-(芐氧基羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)賴氨酸和1，3-噻唑烷為原料，制得預期的產物。實施例28N-{4-[(2S)-2-氨基-3-((2S)-2-氰基-1-吡咯烷基)-3-氧代丙基]苯基}-N”-氰基-N’-甲基胍鹽酸鹽按照實施例6中所述的方法，以(S)-4-[(芐氧基羰基)氨基]-N2-(叔丁氧基羰基)苯丙氨酸和(2S)-2-氰基吡咯烷為原料，制得預期的產物。實施例29N-{4-[(2S)-2-氨基-3-氧代-3-(1-吡咯烷基)丙基]苯基}-N’-硝基胍鹽酸鹽步驟A4-[(2S)-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-3-氧代-3-(1-吡咯烷基)丙基]苯胺按照實施例1步驟A中所述的方法，以(2S)-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-3-(4-氨基苯基)-丙酸和吡咯烷為原料，制得預期的產物。
步驟BN-{4-[(2S)-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-3-氧代-3-(1-吡咯烷基)丙基]苯基}-N’-硝基胍按照J.Am.Chem.Soc.1949，71，1968-1970中所述的方法，使前一步驟中得到的化合物與N-甲基-N’-2-二氧代肼甲酰亞氨基酰肼-2-氧化物反應，得到預期的產物。
步驟CN-{4-[(2S)-2-氨基-3-氧代-3-(1-吡咯烷基)丙基]苯基}-N’-硝基胍鹽酸鹽按照實施例1步驟B中所述的方法，以前一步驟B中得到的化合物為原料，制得預期的產物。元素微量分析C％ H％ N％ Cl％計算值47.13 5.93 23.55 9.94測定值48.06 5.77 23.60 10.00實施例30N-[(6S)-6-氨基-7-(1，3-噻唑烷-3-基)-7-氧代庚基]-N’-硝基胍二鹽酸鹽按照實施例29中所述的方法，以(2S)-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-7-氨基庚酸和1，3-噻唑烷為原料，制得預期的產物。元素微量分析C％H％ N％S％ Cl％計算值 34.736.2822.098.4315.84測定值 34.786.1921.248.5815.56實施例31N-[(6S)-6-氨基-7-[(2S)-2-氰基-1-吡咯烷基]-7-氧代庚基]-N’-硝基胍鹽酸鹽按照實施例29中所述的方法，以(2S)-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-7-氨基庚酸和(2S)-2-氰基吡咯烷為原料，制得預期的產物。元素微量分析C％H％ N％Cl％計算值 43.156.6927.109.80測定值 43.756.5926.939.94實施例32N-{4-[(2S)-2-氨基-3-氧代-3-[(2S)-2-氰基-1-吡咯烷基]丙基]苯基}-N’-硝基胍鹽酸鹽按照實施例29中所述的方法，以(2S)-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-3-(4-氨基苯基)丙酸和(2S)-2-氰基吡咯烷為原料，制得預期的產物。
本發明化合物的藥理學研究實施例33在體外對二肽基肽酶IV的抑制作用按照如下方式評價了化合物在體外對DPPIV酶活性的影響。使用一種產色素的底物—能水解釋放對硝基苯胺(在405nm處有吸收)的甘氨酰基-脯氨酰基-對硝基苯胺(glycyl-prolyl-p-nitroanilide)(1.4mM)，對來自豬腎臟的酶進行分析。通過在不同濃度的待評價化合物的存在下(大多數為10-4-10-9M)的吸光值來測定酶的活性。根據得到的數據可以確定能抑制50％的對照活性時的有效劑量(IC50)，本發明化合物的IC50為1nM-10μM。
權利要求
1.式(I)的化合物、其可能存在的互變異構體、旋光異構體及其與藥學上可接受的酸形成的加成鹽 其中 代表一個任選地被氰基取代的5-元含氮雜環，Ak代表一個直鏈或支鏈的(C1-C6)亞烷基鏈，X代表一條單鍵或一個亞苯基，R1和R2可以相同或不同，各自代表氫原子或直鏈或支鏈的(C1-C6)烷基，Y代表NR4或CH-NO2，R4代表氫原子或直鏈或支鏈的(C1-C6)烷基，當Y代表CH-NO2時，R3代表一個選自直鏈或支鏈的(C1-C6)烷基、硝基和氰基的基團；或當Y代表NR4時，R3代表一個選自硝基和氰基的基團，其中不包括這樣的化合物其中 代表一個未取代的5-元含氮雜環，同時Ak代表基團-(CH2)3-，同時X代表一條單鍵，同時Y代表NH，并且R3代表硝基。應當明白，“5-元含氮雜環”是指含有一、二或三個雜原子，其中一個雜原子是氮原子、而其它存在的雜原子選自氧原子、氮原子和硫原子原子的5-元飽和單環基團。
2.權利要求1的式(I)化合物，其中 代表一個任選地被一個氰基取代的1-吡咯烷基或任選地被一個氰基取代的1，3-噻唑烷-3-基。
3.權利要求1或2的式(I)化合物，其中酰胺官能團的α-位構型為(S)。
4.權利要求1-3的任意一項的式(I)化合物，其中Ak代表基團(CH2)4。
5.權利要求1-3的任意一項的式(I)化合物，其中 代表一個被一個氰基取代的1-吡咯烷基或一個被一個氰基取代的1，3-噻唑烷-3-基，并且Ak代表基團(CH2)3。
6.權利要求1-5的任意一項的式(I)化合物，其中X代表一條單鍵。
7.權利要求1-6的任意一項的式(I)化合物，其中Y代表基團NR4，其中R4代表氫原子或直鏈或支鏈的(C1-C6)烷基。
8.權利要求1-7的任意一項的式(I)化合物，其中R3代表硝基。
9.權利要求1的式(I)化合物，它是N-{(4S)-4-氨基-5-[(2S)-2-氰基-1-吡咯烷基]-5-氧代戊基}-N’-硝基胍、其旋光異構體、互變異構體及其與一種藥學上可接受的酸形成的加成鹽。
10.權利要求1的式(I)化合物，它是N-{(5S)-5-氨基-6-[(2S)-2-氰基-1-吡咯烷基]-6-氧代己基}-N’-硝基胍、其旋光異構體、互變異構體及其與一種藥學上可接受的酸形成的加成鹽。
11.權利要求1的式(I)化合物，它是N-{(5S)-5-氨基-6-(1，3-噻唑烷-3-基)-6-氧代己基}-N’-硝基胍、其旋光異構體、互變異構體及其與一種藥學上可接受的酸形成的加成鹽。
12.合成權利要求1的式(I)化合物的方法，其特征在于使式(II)的化合物 其中Ak和X如式(I)所定義，P1代表一種氨基官能團的保護基，并且P2代表一種不同于P1的氨基官能團的保護基，與一種式(III)的化合物在常規的肽偶聯條件下反應 其中 如式(I)所定義，脫保護后，得到一種式(IV)的化合物 其中 P1、Ak和X如前面所定義，然后通過常規的有機化學反應，再經過脫保護反應，把它轉變為式(I)的化合物，如果需要的話，按照常規的純化技術對該化合物進行純化，如果需要的話，按照常規的分離技術把它分離為其旋光異構體，并且，如果需要的話，用一種藥學上可接受的酸把它轉變為一種加成鹽。
13.藥物組合物，其中包含權利要求1-11的任意一項的化合物作為活性組份以及一種或多種惰性的無毒的藥學上可接受的載體。
14.權利要求13的藥物組合物作為二肽基肽酶IV抑制劑在治療葡萄糖不耐受癥以及與高血糖癥有關的疾病例如II型糖尿病或肥胖中的用途。
15.權利要求14的藥物組合物作為抗糖尿病藥物的用途。
全文摘要
作為藥物的式(I)的化合物、其可能存在的互變異構體、旋光異構體及其與藥學上可接受的酸形成的加成鹽，其中:(a)代表一個任選取代的5－元含氮雜環,Ak代表一個亞烷基鏈,X代表一條單鍵或一個亞苯基,R
文檔編號C07D277/04GK1385421SQ0211990
公開日2002年12月18日 申請日期2002年5月15日 優先權日2001年5月15日
發明者G·德南圖爾, B·波特文, A·本諾斯特, N·里文斯, O·諾斯簡, B·哈森－羅伯特, M·鮑蘭格 申請人:瑟維爾實驗室