一種制備4"－取代的9－脫氧－9a－氮雜－9a－高紅霉素a衍生物的方法

專利名稱：一種制備4"－取代的9－脫氧－9a－氮雜－9a－高紅霉素a衍生物的方法
技術領域：
本發明的
背景技術：
本發明涉及可有效用于哺乳動物，包括人，以及魚類和鳥類的作為抗菌劑和抗原蟲藥的C-4″取代的9-脫氧-9a-氮雜-9a-高紅霉素A(在下文中指“氮雜物”)衍生物的制備方法。本發明還涉及在制備目標氮雜物的方法中的目標氮雜物的穩定中間體的制備方法，以及中間體的結晶鹽。本發明還涉及含有按照目標方法制成的新化合物的藥物組合物，和通過給予需要這種治療的哺乳動物，魚類和鳥類以按照目標方法制造的新化合物來治療哺乳動物，魚類和鳥類的細菌感染和原生動物感染的方法。
已知大環內酯類抗生素可有效用于治療哺乳動物，魚類和鳥類的廣譜性的細菌感染和原生動物感染。這種抗生素包括各種紅霉素A的衍生物例如可商購的阿齊紅霉素，參見美國專利4,474,768和4,517,359，其中兩者都在此整體引入作為參考。如同阿齊紅霉素及其它大環內酯類抗生素，本發明的大環內酯化合物具有如下所述的抗各種細菌感染和原生動物感染的有效的活性。
目標氮雜物在商業規模上的產生存在一些困難，包括但不限于，較低的產率和一些合成中間體的不穩定性，以及不希望的雜質的存在。
本發明概述本發明涉及一種通式1的化合物或其藥學可接受的鹽的制備方法， 包括將通式2的化合物 與式HNR8R15的胺在包含異丙醇的有機溶劑中反應；其中反應在至少約40℃的溫度下進行；其中R3為-CH2NR8R15；R8為C1-C10烷基；且R15為H或C1-C10烷基。
在本方法的一種優選實施方案中，R8為丙基且R15為H。在特別優選的實施方案中，R8為正丙基且R16為H。
在特別優選的實施方案中，有機溶劑為異丙醇。
在另一優選實施方案中，本發明涉及一種通過式2的化合物與正丙胺在包含異丙醇的有機溶劑中反應制備式1a的化合物或其藥學可接受的鹽的方法； 其中反應在至少約40℃的溫度下進行。在其特別優選的實施方案中，有機溶劑為異丙醇。
應當注意，在此使用的術語“溶液”和“混合物”，除非另有陳述，可不考慮其組分的分散狀態而互換地使用。在此使用的短語“包含異丙醇的有機溶劑”，除非另有陳述，是指一種非水溶劑或非水溶劑的混合物，其中至少一種溶劑為異丙醇。在本申請中的，術語“通式1的化合物”包括式1的化合物和式1a的化合物。對于在此申請的方法的全部實施方案和優選實施方案，通式1a的化合物為通式1的化合物的特別優選的實施方案。
在此描述的方法的一個實施方案中，溫度小于約95℃，且在上述方法的一個優選實施方案中，溫度小于約80℃。在上述方法的一個更優選實施方案中，溫度為從約50℃至約76℃。在上述方法的一個特別優選實施方案中，溫度為從約50℃至約55℃。
在此描述的方法的一個優選實施方案中，反應在大氣壓力左右進行。在本申請中，術語“大氣壓”是指在特定高度在正常氣象學的大氣壓力范圍之內的壓力，而術語“高壓”是指高于大氣壓的壓力。在此描述的方法的另一實施方案中，反應在高壓下進行。在本發明的另一實施方案中，除了異丙醇以外可能存在三乙胺。
除了申請者的優選實施方案，通式2的化合物與胺反應制造通式1的化合物的過程可以在不包含異丙醇的溶劑中成功地進行。因此，本發明還涉及一種在有機溶劑中通過通式2的化合物與通式HNR8R15的胺反應制備通式1的化合物的方法，其中溶劑選自苯甲醇，丙酮，甲基異丁基酮，DMSO，叔丁醇，正丁醇，二異丙基醚，MTBE和DMF的混合物，和它們的組合，其中反應在至少約40℃的溫度下進行。反應可能在高壓下進行，優選在大氣壓左右進行。在上述方法的另外的實施方案中，通過加入催化量的路易斯酸加速反應。在上述方法的一個實施方案中，路易斯酸為一種試劑例如溴化鎂，碘化鉀，高氯酸鋰，高氯酸鎂，四氟硼酸鋰，吡啶的鹽酸鹽，或碘化四丁銨。優選，路易斯酸為溴化鎂。
在此描述的方法的一個實施方案中，胺的摩爾量至少約為通式2的化合物的摩爾量的五倍。在此描述的方法的另一個實施方案中，異丙醇中胺的濃度至少約為5摩爾濃度。在一個特別優選的實施方案中在異丙醇中正丙胺的濃度為大約6-7摩爾濃度。
在上述方法一個實施方案中，通式2的化合物與胺至少反應約24小時。在上述方法的一個優選實施方案中，胺的摩爾量至少約為通式2的化合物的摩爾量的五倍，且通式2的化合物與胺至少反應約24小時。在上述方法的一個更優選實施方案中，溫度為從約50℃至約80℃。在上述方法的一個更優選實施方案中，胺的摩爾量為通式2的化合物的摩爾量的大約二十倍，在異丙醇中胺的濃度為大約6摩爾濃度，且通式2的化合物與胺在約50℃至約55℃的溫度下至少反應約24小時。
在此描述的方法的另一實施方案進一步地包括通式1的化合物的結晶的游離堿形式。在一個實施方案中通式1化合物的結晶游離堿形式是從含水溶劑的混合物中結晶的。在上述方法的一個優選實施方案中，含水溶劑的混合物包括水和一種非水溶劑(選自甲醇，乙醇，異丙醇和丙酮)。在另一實施方案中通式1的化合物的游離堿形式是從有機(C6-C10)烷烴溶劑或這種有機烷烴溶劑的混合物中結晶的。在上述方法的優選實施方案中，通式1的化合物是通過將化合物與烷烴溶劑一起加熱，隨后冷卻以實現結晶的。在上述方法的優選實施方案中，有機(C6-C10)烷烴溶劑選自庚烷或辛烷，最優選庚烷。在另一實施方案中，如下所述，游離堿可以從通式1的化合物的酸加成鹽制備。應當理解在此使用的“烷烴”，除非另有陳述，包括具有直鏈，環狀或支鏈部分的飽和一價烴類，或它們的混合物。
在此描述的方法的另外的實施方案中，通式1的化合物的酸加成鹽是在與水可混溶溶劑中通過用包括一種酸的溶液處理通式1的化合物制備的。在上述方法的優選實施方案中，向包括通式1化合物和水的溶液中加入酸溶液。在上述方法的更優選實施方案中，酸為磷酸，L-酒石酸或二苯甲酰基-D-酒石酸。在其特別優選的實施方案中，酸為磷酸。在上述方法的另一更優選實施方案中，溶劑包括乙醇。在上述方法的另一優選實施方案，上述方法進一步地包含分離通式1化合物的酸加成鹽。
在一實施方案中，在此描述的方法制造一種通式1的化合物，其純度至少為90％，更優選純度至少95％，且最優選純度至少98％。特別是，本發明的方法制造的通式1的化合物具有適合于通式1化合物用于腸胃外給藥的制劑制備中的純度。腸胃外制劑的規格質量要求是本領域已知的，例如溶液中用于無菌和除去熱原質的制劑的特殊純度和微粒大小(見Remington’s Pharmaceutical Sciences，MackPublishing Company，Easton，Pa.，第十八版，Gennaro，ed.(1990)，第1545-1580頁。
在上述方法的另一更優選實施方案中，上述方法進一步地包含在水和一種非極性溶劑的混合物中用一種堿處理通式1化合物的酸加成鹽，以得到通式1化合物的游離堿形式。在上述方法的更優選實施方案中，堿為二元的碳酸鹽，且在特別優選的實施方案中，該二元碳酸鹽為碳酸鉀。在其另一更優選的實施方案中非極性溶劑為二氯甲烷。在另一優選實施方案中，該方法進一步地包括結晶如上所述的通式1化合物的游離堿形式，且其中涉及如上所述的另一實施方案。
本發明還涉及一種通式2的化合物的制備方法，包括(a)將通式3的化合物的游離堿形式 與锍甲基葉立德(sulfonium methylide)離子反應；(b)用含水弱酸終止步驟(a)的反應，并將產物分配在非水溶液中；且(c)將步驟(b)的產物去保護得到通式2的化合物；其中R4為羥基保護基。
在一實施方案中，上述方法進一步地包括通式2的化合物的分離。在上述方法的優選實施方案中，通式2的化合物以水合物的形式分離，更優選以一水合物分離。在上述方法的實施方案中，水含量通過卡爾-費希爾測定法測定。在上述方法的一個實施方案中，水合物由含有通式2的化合物與一種溶劑或選自丙酮，丙酮/水，丙酮/庚烷和MTBE/庚烷的溶劑混合物的混合物中獲得。在其它實施方案中，通式2的化合物是以其乙酸鹽，L-酒石酸鹽或二苯甲酰基-D-酒石酸鹽的形式分離的。
本發明涉及通式2化合物的一水合物。在上述方法的一個優選實施方案中，R4為芐氧羰基。
在上述方法的另一優選實施方案中，步驟(a)在約-80℃至約-45℃的溫度下進行。
在上述方法的另一實施方案中，通式3化合物的游離堿可以從通式3的化合物的酸加成鹽制備。在上述方法的一個優選實施方案中，酸加成鹽為三氟乙酸加成鹽。在上述方法的另一實施方案中，通式3化合物的酸加成鹽選自二苯甲酰基-D-酒石酸鹽，L-酒石酸鹽，或磷酸鹽。在此公開的這些化合物的酸加成鹽可以容易地通過傳統方法制備。
在上述方法的一個實施方案中，锍甲基葉立德為二甲基锍甲基葉立德。在上述方法的一個優選實施方案中二甲基锍甲基葉立德是通過三甲基锍鹵化物或磺酸鹽與強堿反應制備的。在上述方法的更優選實施方案中，使用三甲基锍鹵化物，優選三甲基锍溴化物。在上述方法的另一更優選實施方案中，三甲基锍鹵化物在一種惰性有機溶劑或它們的混合物中與強堿反應。在上述方法的另一特別優選實施方案中，惰性有機溶劑為醚類溶劑，最優選四氫呋喃，或四氫呋喃和二氯甲烷的混合物。
在一個實施方案中，步驟(c)包括催化氫化，其中R4為芐氧羰基。在上述方法的一個優選實施方案中，用于氫化的催化劑為鈀/碳催化劑。一個特別優選的實施方案中，鈀/碳催化劑為10％ Pd/C(Johnson-Matthey type A402028-10)。在步驟(c)的另外的實施方案中，步驟(b)的產物通過催化轉移氫化去保護，優選用甲酸銨，Pd/C的甲醇溶液。在一個另外的實施方案中，步驟(b)的產物在氫化之前用漂白土處理。用于加氫過程的適宜的溶劑為丙酮，乙酸乙酯，THF，MTBE，異丙醇，乙醇和甲醇。優選的溶劑為丙酮。
本發明還涉及2’-芐氧羰基保護的化合物II 該化合物通過省略上述方法的步驟(c)得到。
本發明涉及一種通式3的化合物的制備方法 通過氧化通式4化合物的C-4”羥基制備 其中R4為羥基保護基。
在一個實施方案中，氧化通過向包含通式4化合物和溶劑的溶液中加入二甲亞砜(“DMSO”)，冷卻該混合物至約-70℃，而后加入三氟乙酸酐，隨后加入三乙胺進行。在另外一個實施方案中，DMSO使用草酰氯(有或者沒有三甲代甲硅烷基乙酰胺存在)，多磷酸，吡啶.SO3或乙酸酐活化。在上述方法的另外的實施方案中，在加入三氟醋酸酐期間溫度保持在-70℃到-60℃之間。在上述方法的另一優選實施方案中溶劑為二氯甲烷。上述方法獨特的優點是DMSO在起反應的醇類存在下的原位活化，這樣可避免一般在活化的DMSO的氧化中所遇到的雜質的形成，這些通常包括向含有活化DMSO的溶液中引入醇類。
在一實施方案中，上述方法進一步地包含通式3化合物的酸加成鹽的分離。在一個優選實施方案中，酸加成鹽是二苯甲酰基-D-酒石酸鹽或磷酸鹽。在一個特別優選的實施方案中，本發明涉及一種制備通式3的化合物的酸加成鹽的方法，該方法包括用三氟乙酸處理通式3的化合物；結晶得到的酸加成鹽；其中R4為羥基保護基。
在上述方法的一個優選實施方案中，R4為芐氧羰基。
在上述方法的另一優選實施方案中，酸加成鹽從異丙醇中結晶。
在上述方法的另一優選實施方案中，酸加成鹽從二氯甲烷和甲基叔丁基醚的混合物中結晶。
通過本發明方法制備的三氟乙酸加成鹽不是藥學可接受的，但提供極好的提純和穩定性，在通式1化合物的工業制備中可以作為適當的起始原料貯存和運輸。
在上述方法一個實施方案中，通式4的化合物是通過保護通式5化合物的2’-羥基制備的， 在一個優選實施方案中，2’-羥基是用芐氧羰基保護的。在另一優選實施方案中，通式5的化合物與至少兩個摩爾當量的芐基甲酰氯起反應。在一個更優選的實施方案中，該反應在二氯甲烷中進行。在一個更加優選的實施方案中，二氯甲烷以相對于原料體積至少過量15倍的體積存在。本發明還涉及通式3化合物的三氟乙酸加成鹽，其中R4為芐氧羰基 在上述方法的一個優選實施方案中，該鹽具有通式3a所示的結構 其中R4為芐氧羰基。
本發明還涉及通式3化合物的二苯甲酰基-D-酒石酸鹽，其中R4為芐氧羰基在此使用的術語“羥基-保護基”，除非另有陳述，包括乙酰基，芐氧羰基，和各種為本領域技術人員所熟知的羥基-保護基，包括T.W.Greene，P.G.M.Wuts，在″Protective Groups In OrganicSynthesis，″(J.Wiley & Sons，1991)中提到的基團。優選，羥基-保護基R4為芐氧羰基(“CBZ”)。
在此使用的術語“鹵素”，除非另有陳述，包括氟，氯，或溴，且術語“鹵化物”是指相應的單價陰離子，分別為F-，Cl-，或Br-。
在此使用的“烷基”，除非另有陳述，包括具有直鏈，環狀或支鏈部分的飽和一價烴基，或它們的混合物。
使用在此的短語“藥學可接受的鹽”，除非另有陳述，包括在本發明化合物的酸性或堿性的基團的鹽。通過本發明方法制備的化合物實質上是堿性的，尤其例如通式1化合物的游離堿形式能夠與各種無機和有機酸形成各種各樣的鹽。可以用于制備本發明的這種堿性化合物的藥學可接受的酸加成鹽的酸為那些可形成無毒的酸加成鹽的酸，即含有藥理學可接受的陰離子的鹽，例如鹽酸鹽，氫溴酸鹽，氫碘酸鹽，硝酸鹽，硫酸鹽，硫酸氫鹽，磷酸鹽，酸式磷酸鹽，異煙酸鹽，乙酸鹽，乳酸鹽，水楊酸鹽，檸檬酸鹽，酸性檸檬酸鹽，酒石酸鹽，泛酸鹽，酒石酸氫鹽，抗壞血酸，琥珀酸酯，馬來酸酯，龍膽酸鹽，富馬酸鹽，葡糖酸鹽，葡萄糖二酸鹽，蔗糖鹽，甲酸鹽，苯甲酸鹽，谷氨酸鹽，甲磺酸鹽，乙磺酸鹽，苯磺酸鹽，對-甲苯磺酸鹽和雙羥萘酸鹽[即，1，1’-亞甲基-雙-(2-羥基-3-萘甲酸鹽)]。通過本發明方法制備的化合物包括氨基部分，可以與除了如上所述的酸外的各種氨基酸形成藥學可接受的鹽。
在此使用的術語“治療”，除非另有陳述，包括本發明方法所提供的細菌感染或原生動物感染的治療或預防。
本發明包括本發明的化合物和它們的藥學可接受的鹽，其中它們的一個或多個氫原子，碳原子，氮原子或其它原子可被它們的同位素替代。這樣的化合物可以作為研究和診斷工具用于藥代動力學研究和用于結合測定。
發明的詳細說明本發明的方法可以按照以下的反應路線1-4和隨后的說明進行。在下面的反應路線中，除非另有陳述，取代基R3，R4，R8和R15如上所定義。
反應路線1
反應路線2
反應路線3
用作本發明方法的原料的通式4的化合物可以容易地從其中R4為氫的化合物5制備，見WO 98/56802，和美國專利4,328,334，4,474,768和4,517,359，所有這些以整體引入在此作為參考。
以上給出的反應路線僅僅是說明性的，且在下文中和在下文的實施例中進一步詳述。在反應路線1中，通式2的環氧化物轉變為通式1的胺，其中R3為-CH2NR15R8，其中R15和R8如以上所定義。在本發明最優選的實施方案中，胺為正丙胺，即，R8為正丙基且R15為H。
為制備通式1的化合物，優選在適當的溶劑例如異丙醇，或包含異丙醇的有機溶劑的混合物存在下，優選在約40℃至約95℃的溫度下，將通式2的化合物用通式HNR15R8的化合物處理，其中R15和R8如以上所定義。進行該反應的最適宜溫度為從約50℃至約55℃，但是也可以使用較高的溫度，例如，76℃。進行反應的最優選壓力為在約大氣壓下；然而，反應也可以在高壓下進行。
在一種以前的打開通式2環氧化物方法中(見WO 98/56802，實施例48，50，51和70)，2’-羥基的保護和通式1化合物的產生(或通式1a，分別地)需要同時水解保護基和胺化環氧化物。此方法是不可取的，因為在環氧化物開環步驟期間進行水解效率低，且由于未水解的保護基及其它雜質的存在而使通式1化合物的分離更加困難。在另一個先前的的方法中，通式2的化合物(其中2’-羥基是未保護的)，與純的烷基胺起反應，即沒有有機溶劑存在。在這種情況下，反應在正丙胺的正常沸點溫度(約48℃)遲緩地進行。因此，為了產生提高的溫度，反應須在高壓下進行，這是在工業規模上更不可取的特征。(見WO98/56802，實施例8(制備2)，產率11％)。另外，在反應使用一種催化劑。申請人發現正丙胺和異丙醇的混合物在實驗室大氣壓下具有76℃的沸點，可使反應在約50℃至55℃的溫度下，不用加壓反應容器或催化劑，高產率地進行(高于85％)。申請人的方法提供了比以前的方法更高的產率(85％)和較好的純度，且可使用各種結晶方法用于游離堿形式和通式1化合物的酸性鹽，以得到通式1化合物的高純形式，例如可用于所希望的腸胃外給藥的制劑。
在反應路線2中，通式2的化合物可以通過在從約-80℃至約-45℃的溫度下，用锍甲基葉立德處理通式3的化合物，隨后通過常規方法除去2’-保護基制備，以提供通式2的化合物。用于反應路線2方法的原料優選為通式3化合物的三氟乙酸加成鹽，它們首先轉變為游離堿形式，冷卻至低溫，約-70℃，而后與硫甲基化物的低溫溶液起反應。硫甲基化物優選為二甲基锍甲基葉立德，例如，(CH3)2S+CH2-，通過常規方法制備，例如，在醚類溶劑中，例如THF，或在CH2CI2，DMF，或DMSO，或上述溶劑的兩個或多個混合物中，通過用活性劑例如氫氧化鉀，叔丁醇鉀，叔丁醇鈉，乙醇鉀，乙醇鈉，六甲基二硅胺化鉀(KHMDS)或甲醇鈉，優選叔丁醇鉀，處理三甲基锍鹽，例如，(CH3)3SX，其中X為鹵素，優選溴，或磺酸鹽，更優選三甲基锍溴化物。保護基通過常規方法除去，例如當R4為CBZ時通過催化氫化除去。
在反應路線3中，4”酮是在單一容器中用連續方法從通式5的化合物制備。在該方法的第一步中，2’羥基通過常規方法被選擇性的保護，優選用芐基甲酰氯的二氯甲烷溶液處理其中R4為氫的通式5化合物的2’-羥基，得到其中R4為芐氧羰基(“CBZ”)的通式4的化合物。優選使用至少2摩爾當量的芐基甲酰氯，以確保2’-羥基基團完全轉化至其保護的形式。優選用二氯甲烷作為溶劑，以使用相對于原料體積至少15體積的二氯甲烷在其中進行反應，從而最小化雙-CBZ雜質的形成。通式4的化合物，其中R4為CBZ，是以其二苯甲酰基-D-酒石酸鹽的形式分離的，這種方法可清除潛在的雙芐氧羰基雜質。然而，由于由通式4化合物通過芐基氯化物(由芐基甲酰氯的分解形成)的胺烷基化而形成的芐胺的存在，使分離的產物不穩定，因此通式4的化合物的水抽提處理是不優選的。因此，在反應混合物的保護步驟之后優選不分離通式4的化合物直接轉至第二步。第二步，可以在與第一步相同的容器中進行，包含4”-羥基基團的氧化以得到通式3的4″-酮。氧化優選為如上所述的活化的-DMSO氧化，即，在降低溫度下進行，例如-60至-70℃，且包括向冷卻的化合物的DMSO溶液中加入三氟乙酸酐，隨后加入三乙胺而進行的DMSO的原位活化。然后向反應混合物中加入水并逐漸升溫到室溫。優選在水中洗滌混合物得到通式3化合物的溶液。
通式3的化合物的三氟乙酸鹽可以通過用水洗滌氧化步驟的反應混合物，隨后加入三氟乙酸，而后加入適合于該鹽結晶的溶劑，例如異丙醇或二氯甲烷和甲基叔丁基醚(“MTBE”)的混合物來制備。還可以以常規的方式制備其它酸性加成鹽，例如二苯甲酰基-D-酒石酸鹽和磷酸鹽。二苯甲酰基-D-酒石酸鹽和磷酸鹽可有效用于本發明的方法，但不及三氟乙酸優選。
如反應路線4所示，總而言之本發明涉及一種分兩步驟制備通式1化合物的方法在第一步中，為在一個單獨的容器中制備通式3的化合物的方法，包括通式5的化合物的2’-羥基的芐氧羰基保護，得到通式4的化合物，接著直接進行通式4的4″-羥基的氧化得到通式3的酮，優選以其三氟乙酸加成鹽加以分離。在第二步中，將通式3的化合物的游離堿形式(優選從其三氟乙酸鹽制備得到)轉變為通式2的4″-環氧化物，除去2’-保護基以恢復2’-羥基，該環氧化物用一種胺通過在含有異丙醇的混合物中加熱開環，得到通式1的化合物。
反應路線4
通過本發明方法制備的化合物實質上是堿性的，能夠與各種無機和有機酸形成各種各樣不同的鹽。盡管這樣的鹽必須為哺乳動物給藥所藥學可接受的鹽，但實際上經常最初分離出一種通過本發明的方法從反應混合物中制備的藥學上不能接受的鹽的化合物，而后將后者通過用堿性試劑處理簡單地轉化為游離堿化合物，用于隨后的反應，或用于制備藥學可接受的酸加成鹽。通過本發明方法制備堿性化合物的酸加成鹽可以容易地通過在含水溶劑介質或一種適宜的有機溶劑中用基本上等當量的所選定的無機或有機酸處理堿性化合物制備。小心地蒸發溶劑可容易地得到需要的固體鹽。所需要的鹽還可以從游離堿的有機溶劑溶液中通過向溶液中加入適當的無機或有機酸而沉淀出來。通過本發明制備的通式1的化合物和它們的藥學可接受的鹽(在下文中指“活性化合物”)，在治療細菌和原生動物感染中可以通過口服給藥，腸胃外給藥，局部給藥，或直腸途徑給藥。
通常活性化合物優選以劑量范圍從約每kg體重每天0.2毫克(mg/kg/天)至約200mg/kg/天，以單劑量或分開的劑量(即，從1至4劑量每天)給藥，盡管這些將隨物種，體重和要治療的受試者情況和所選擇的特定的給藥途徑必然地發生改變。然而，最優選使用約4mg/kg/天至約50mg/kg/天的劑量水平。然而可視被治療的哺乳動物，魚類或鳥類的種類，和其個體對于所述藥劑的響應，以及所選擇的藥物制劑的種類，和這樣的給藥所進行的時間周期和間隔而定發生改變。在有些情況下，劑量水平低于上述的范圍的下限就足夠了，而在其它情況下盡管使用大的劑量也不會導致任何有害的副作用，條件是這樣大的劑量在一整天中首先分成一些小劑量給藥。
活性化合物可以單獨或與藥學可接受的載體或稀釋劑結合通過先前所述的途徑給藥，且這種給藥可以以單或多劑量進行。更特別地，活性化合物可以以各種各樣不同的劑型給藥，即，它們可以同各種藥學可接受的惰性載體相結合以片劑，膠囊，錠劑，糖錠，硬膠囊，粉末，噴霧劑，乳劑，油膏劑，栓劑，膠狀物，凝膠劑，膏劑，藥水，油膏，水懸浮液，血管注射劑溶液，酏劑，糖漿劑，等等的形式給藥。這種載體包括固體稀釋劑或填料，無菌水媒質和各種無毒有機溶劑等等。而且，口服的藥物組合物可以適當地加糖和/或加香料。通常，存在于這種劑型中活性化合物在按重量計算從約5.0％至約70％的濃度范圍。
對于口服給藥，含有各種賦形劑例如微晶纖維素，檸檬酸鈉，碳酸鈣，磷酸二鈣和甘氨酸的片劑，可以與各種崩解劑例如淀粉(且優選玉米，馬鈴薯或木薯淀粉)，海藻酸和某些復合硅酸鹽一起，與粒化粘合劑例如聚乙烯吡咯烷酮，蔗糖，凝膠和阿拉伯膠一起使用。另外，潤滑劑例如硬脂酸鎂，十二烷基硫酸鈉和滑石粉，經常對壓片十分有用。同樣類型的固體組合物可以作為填料用在膠囊中；關于這一點優選的材料還包括乳糖或奶糖以及高分子量聚乙二醇。當水懸浮液和/或酏劑是希望用于口服的時，活性化合物可以與各種甜味劑或增香劑，色素或染料，和如果需要，乳化劑和/或懸浮劑相結合，與稀釋劑例如水，乙醇，丙二醇，甘油和它們的各種的相似組合一起相結合。
對于腸胃外給藥，活性化合物的溶液既可以使用芝麻或花生油也可以使用丙二醇水溶液。如有必要水溶液應該適當地緩沖，且液體稀釋劑首先給予等滲補償。這些水溶液適合于靜脈注射目的。含油的溶液適合于關節內，肌肉內和皮下注射目的。所有這些溶液在無菌條件下的制備可通過為本領域技術人員所知的標準的藥物技術容易地完成。
另外，本發明的活性化合物還可以局部地給藥，這可根據標準藥物操作規程通過乳劑，膠狀物，凝膠劑，膏劑，貼片，油膏等等的途徑進行。
對于除了人類的動物的給藥，例如牛或家畜，活性化合物可以一種動物飼料或獸用頓服藥組合物以口服的方式給藥。
活性化合物還可以以脂質體，例如小單層脂質體，大單層脂質體和多層脂質體傳送體系的形式給藥。脂質體可以由各種磷脂，例如膽固醇，十八烷胺硬脂胺或磷脂酰膽堿組成。
活性化合物還可以與作為目標藥物載體的可溶性聚合物結合。這種聚合物可以包括聚乙烯基吡咯烷酮，吡喃共聚物，聚羥丙基甲基丙烯酰胺苯基，聚羥乙基天冬酰胺-苯酚，或棕櫚酰殘基取代的聚氧化乙烯-聚賴氨酸。此外，活性化合物可以與有效用于實現藥物的控制釋放的可生物降解的聚合物種類，例如，聚孔酸，聚乙二醇酸，聚孔酸和聚乙二醇酸的共聚物，聚ε己內酯(polyepsilon caprolactone)，聚羥基丁酸，聚原酸酯，聚乙縮醛，聚二氫吡喃，聚氰基丙烯酸酯和交聯的或水凝膠的兩性分子團封閉的共聚物一起使用。
以下實施例更進一步舉例說明本發明的方法和中間體。應該理解本發明不局限于以下實施例所提供的具體細節。
實施例1(2R，3S，4R，5R，8R，10R，11R，12S，13S，14R)-13-[(2，6-二脫氧-3-C-甲基-3-O-甲基-α-L-己吡喃核糖基)氧基]-2-乙基-3，4，10-三氫基-3，5，8，10，12，14-六甲基-11-[[3，4，6-三脫氧-3-(二甲基氨基)-2-O-[(苯基甲氧基)羰基]-β-D-己吡喃木糖基]氧基]-1-氧雜-6-氮雜環十五烷-15-酮的制備以保持溫度在5℃以下的速度向冷卻至0-5℃的25kg(2R，3S，4R，5R，8R，10R，11R，12S，13S，14R)-13-[(2，6-二脫氧-3-C-甲基-3-O-甲基-α-L-己吡喃核糖基)氧基]-2-乙基-3，4，10-三羥基-3，5，8，10，12，14-六甲基-11-[3，4，6-三脫氧-3-(二甲基氨基)-β-D-己吡喃木糖基]氧基]-1-氧雜-6-氮雜環十五烷-15-酮的425升二氯甲烷溶液中加入13.7kg芐基甲酰氯的25升二氯甲烷溶液。得到的混合物在此溫度下攪拌三個小時，而后濃縮至148升得到含有大約26.6kg(90％)產物的干燥溶液(通過HPLC-Waters Symmetry C8，15cm×3.9mm內徑柱，25mM磷酸鉀緩沖液(pH值7.5)∶乙腈∶甲醇(35∶50∶15)流動相，2.0ml/mm流速，電化學檢測，保留時間＝8.2分鐘)。該混合物直接用于實施例2中。
實施例2(2R，3S，4R，5R，8R，10R，11R，12S，13S，14R)-13-[(2，6-二脫氧-3-C-甲基-3-O-甲基-α-L-己吡喃核糖基)氧基]-2-乙基-3，4，10-三羥基-3，5，8，10，12，14-六甲基-11-[[3，4，6-三脫氧-3-(二甲基氨基)-2-O-[(苯基甲氧基)羰基]-β-D-己吡喃木糖基]氧基]-1-氧雜-6-氮雜環十五烷-15-酮雙三氟乙酸鹽的制備向實施例1中得到溶液中加入58.6kg二甲亞砜(“DMSO”)，隨后冷卻至-70℃。保持溫度在-70至-60℃之間，加入16kg三氟乙酸酐，然后攪拌混合物30分鐘，然后加入17.2kg三乙胺，再攪拌得到的混合物30分鐘。將反應混合物加入到175升水中，逐漸升溫至環境溫度之后分層。將有機層用170升水洗滌兩次，然后濃縮至大約100升。接下來，加入7.8kg三氟乙酸，繼之加236升異丙醇，然后濃縮該混合物以使29.5kg(87.9％)產物(通過HPLC測定純度98％)從中結晶出來。
分析數據mp＝187-192℃。元素分析(C49H76F6N2O18理論值C，53.74；H，6.99；F，10.41；N，2.56；實測值C，53.87；H，6.99；F，10.12；N，2.59。HPLC系統與實施例1相同；保留時間＝9.5分鐘.X-射線粉末衍射(d space)6.3，8.3，8.8，9.4，10.8，11.8，12.6，13.0，14.3，15.4，15.9，16.4，17.1，17.4，17.8，18.1，19.1，19.8，20.4，21.1，21.5，21.7，22.8，23.4，24.0。
實施例3(2R，3S，4R，5R，8R，10R，11R，12S，13S，14R)-2-乙基-3，4，10-三羥基-13-[[(3S，4S，6R，8R)-8-甲氧基-4，8-二甲基-1，5-二氧雜螺[2.5]辛-6-基]氧基]3，5，8，10，12，14-六甲基-11-[[3，4，6-三脫氧-3-(二甲基氨基)-2-O-[(苯基甲氧基)羰基]-β-D-己吡喃木糖基]氧基]-1-氧雜-6-氮雜環十五烷-15-酮的制備(a)用27.5kg碳酸鉀的327升水溶液處理109kg實施例2的產物的327升二氯甲烷溶液。分層，用327升二氯甲烷洗滌水層，干燥合并的有機層并將其蒸發至約327升，冷卻至-70℃。
(b)在另一容器中，將29.7kg三甲基锍溴化物的436升四氫呋喃(“THF”)懸浮液蒸發至大約170升，冷卻至-12℃，并在-10至-15℃用36.8kg叔丁醇鉀處理75分鐘。然后將該混合物于約30分鐘內加入到步驟(a)的二氯甲烷溶液中，保持溫度在-70至-80℃，然后將得到的混合物升溫至-65℃并攪拌至少1小時。然后將此混合物加入到55.4kg氯化銨的469升水溶液中。在15-25℃下攪拌混合物15分鐘后，分層，用360升二氯甲烷洗滌水層，然后將合并的有機層蒸發至大約227升。向得到的混合物中加入750升丙酮。最后蒸發混合物至227升含有大約70.1kg(80％)標題產物的溶液(用HPLC-HPLC體系MetaSil AQ C18柱(來源于MetaChem，批號0520-250X046)，50mM磷酸鉀緩沖液(pH值8.0)∶乙腈∶甲醇(30∶60∶10)流動相，1.0ml/min流速，電化學檢測。保留時間＝31.1分鐘)。該混合物直接用于實施例4中。
實施例4(2R，3S，4R，5R，8R，10R，11R，12S，13S，14R)-2-乙基-3，4，10-三羥基-13-[[(3S，4S，6R，8R)-8-甲氧基-4，8-二甲基-1，5-二氧雜螺[2.5]辛-6-基]氧基]3，5，8，10，12，14-六甲基-11-[[3，4，6-三脫氧-3-(二甲基氨基)-β-D-己吡喃木糖基]氧基]-1-氧雜-6-氮雜環十五烷-15-酮的制備含有實施例3產物的溶液與11kg活性碳，17.5kg10％鈀碳(Johnson-Matthey type A402028-10)和637升丙酮混合。在20-25℃，50psi的壓力下用氫處理得到的混合物，直至反應完成，而后過濾。濃縮濾液至大約350升，而后于90分鐘內加入1055升水。過濾收集結晶的產物，用132升水和45升丙酮的混合物洗滌，并干燥，得到57.5kg(94.4％)標題環氧化物的一水合物(水含量通過卡-菲二氏法測定)。
分析數據HPLC體系與實施例3相同；保留時間＝13.3分鐘。X射線粉末衍射(d space)6.0，8.5，9.4，11.9，12.7，13.4，15.2，16.9，17.5，18.0，18.9，19.4，19.9，20.7，21.2，21.6，22.8.
實施例5(2R，3S，4R，5R，8R，10R，11R，12S，13S，14R)-13-[(2，6-二脫氧-3-C-甲基-3-O-甲基-4-C-[(丙基氨基)甲基]α-L-己吡喃核糖基)氧基]-2-乙基-3，4，10-三羥基-3，5，8，10，12，14-六甲基-11-[[3，4，6-三脫氧-3-(二甲基氨基)-β-D-己吡喃木糖基]氧基]-1-氧雜-6-氮雜環十五烷-15-酮雙磷酸鹽的制備將56kg實施例4的環氧化物一水合物與280升異丙醇和108.2kg正丙胺混合。將混合物在50-55℃下加熱三十小時，而后在真空下濃縮至大約112升。向此濃縮物中加入560升乙醇和44.8升水。于約兩個小時的時間內向得到的混合物中加入16.8kg磷酸的252升乙醇溶液，結晶得到產物。攪拌得到的懸浮液18小時后，過濾混合物，用28升乙醇洗滌固體，干燥產物，得到64.6kg(88％)標題化合物(通過HPLC-HPLC體系YMC-Pack Pro C18(YMC Inc.Part#_AS-12S03-1546WT)，50mM磷酸氫二鉀緩沖液(pH值8.0)∶乙腈∶甲醇61∶21∶18流動相，1.0ml/mm流速，電化學檢測。保留時間＝26.4分鐘)。
實施例6(2R，3S，4R，5R，8R，10R，11R，12S，13S，14R)-13-[(2，6-二脫氧-3-C-甲基-3-O-甲基-4-C-[(丙基氨基)甲基]-α-L-己吡喃核糖基)氧基-2-乙基-3，4，10-三羥基-3，5，8，10，12，14-六甲基-11-[[3，4，6-三脫氧-3-(二甲基氨基)-β-D-己吡喃木糖基]氧基]-1-氧雜-6-氮雜環十五烷-15-酮游離堿的制備將64.6kg實施例5的產物與433升二氯甲烷，433升水和27.6kg碳酸鉀混合。攪拌此混合物三十分鐘后，分層，用32升二氯甲烷洗滌水層。通過過濾合并的有機層得到澄清，然后蒸發至大約155升。向此濃縮物中加入386升庚烷，蒸發溶液至約155升，然后冷卻至20-25℃以便結晶。攪拌得到的懸浮液六小時后，通過過濾收集固體，用110升庚烷洗滌并干燥，得到40.3kg(77％)標題化合物(通過HPLC；與實施例5相同的HPLC體系；保留時間26.4分鐘)。
權利要求
1.一種制備通式1的化合物或其藥學可接受的鹽的方法，包括 將通式2的化合物 與式HNR8R15的胺在包含異丙醇的有機溶劑中反應；其中反應在至少約40℃的溫度下進行；其中R3為-CH2NR8R15；R8為C1-C10烷基；且R15為H或C1-C10烷基。
2.權利要求1的方法，其中有機溶劑為異丙醇。
3.權利要求1的方法，其中R8為丙基且R15為H。
4.權利要求1的方法，其中包括制備通式1a化合物或其藥學可接受的鹽， 將通式2的化合物與正丙胺在包含異丙醇的有機溶劑中反應；其中反應在至少約40℃的溫度下進行。
5.權利要求1的方法，其中溫度低于約95℃。
6.權利要求5的方法，其中溫度為從約50℃到約76℃。
7.權利要求1的方法，其中反應在約大氣壓下進行。
8.權利要求1的方法，其中胺的摩爾量約為通式1化合物摩爾量的至少5倍。
9.權利要求1的方法，其中進一步包括結晶通式1化合物的游離堿形式。
10.一種制備通式2的化合物的方法， 包括(a)將通式3的化合物的游離堿形式 與锍甲基葉立德離子反應；(b)用含水弱酸終止步驟(a)的反應，并將產物分配在非水溶液中；且(c)將步驟(b)的產物去保護得到通式2的化合物；其中R4為羥基保護基。
11.權利要求10的方法，其中R4為芐氧羰基。
12.權利要求10的方法，其中通式3化合物的游離堿形式是從通式3化合物的酸加成鹽制備的。
13.權利要求12的方法，其中通式3化合物的酸加成鹽為三氟乙酸加成鹽。
14.權利要求11的方法，其中步驟(c)包含催化氫化。
15.一種通式2的化合物 為一水合物。
全文摘要
本發明涉及制備通式1的化合物和它們的藥學可接受的鹽,以及這種方法的有用的中間體的方法。其中R
文檔編號C07H17/00GK1384108SQ0211843
公開日2002年12月11日 申請日期2002年4月25日 優先權日2001年4月27日
發明者C·斯卡拉沃諾斯, J·L·圖克爾, L·魏, K·P·小瑪洪, P·D·哈曼, J·T·尼格里, R·S·萊納 申請人:輝瑞產品公司