專利名稱：制備因子xa抑制劑的有效方法
技術領域：
本發明一般性涉及一種制備苯并異噁唑基-吡唑的有效方法。苯并異噁唑基-吡唑類用作因子Xa抑制劑。
背景技術：
因子Xa抑制劑如下式Ia所示的那些 WO98/57951描述了式Ia的化合物的合成方法，作為其三氟乙酸鹽，如下所述
在上述方法中，偶聯吡唑羧酸和苯胺并分離出游離堿。所得產物的3-氰基-4-氟苯基隨后轉化為1-氨基苯并異噁唑。這種方法的一個問題在于酸-苯胺偶聯產物難以提純。第二個問題在于1-氨基苯并異噁唑部分的轉化需要昂貴強堿如KOt-Bu的存在。
可以看出式I化合物的制備是困難的。因此，希望發現此類化合物的有效合成方法。
發明內容
所以，本發明的一個目的是提供一種新的制備式I的化合物的方法。
本發明的另一個目的是提供用于制備式I的化合物的中間體。
本發明的再一個目的是提供新的式I的鹽、晶體和溶劑形式。
本發明的另一目的是提供含有藥學可接受載體和治療有效量的至少一種本發明的化合物或其藥學可接受鹽的藥物組合物。
本發明的又一個目的是提供一種治療血栓栓塞性疾病的方法，該方法包括給需要該治療的宿主施用治療有效量的至少一種本發明的化合物或其藥學可接受鹽。
本發明的另一目的是提供療法中使用的新的化合物。
本發明的再一個目的是提供新化合物用于制備治療血栓栓塞性疾病的藥物的用途。
優選實施方式的詳述所以，在一種實施方式中，本發明提供一種新的制備式I的化合物的方法
包括(c)使式IVa的化合物與馬來酸接觸生成式IV的化合物； (d)將式IV的化合物轉化為式V的化合物；和，(e)生成式I的化合物。
在一個優選的實施方式中，在(c)中，與馬來酸接觸是在第一溶劑乙酸乙酯的存在下進行。
在另一優選的實施方式中，在(c)中，加入第二溶劑1-氯丁烷以促進沉淀。
在另一優選的實施方式中，(d)是通過在堿和溶劑的存在下使式IV的化合物與HONHCOCH3接觸而進行的。
在另一優選實施方式中，所述的堿選自K2CO3、Na2CO3、KHCO3、NaHCO3、KF、NaOH和KOH。
在另一優選的實施方式中，所述的堿是K2CO3。
在另一優選的實施方式中，在(d)中，所述的溶劑選自DMSO、DMAC、N-甲基吡咯烷酮和DMF。
在另一優選的實施方式中，在(d)中，所述的溶劑是DMF，含有0.5-50體積％的水。
在另一優選的實施方式中，在(d)中，所述的溶劑是DMF，含有10，11，12，13，14，至15體積％的水。
在另一優選的實施方式中，在(d)中，該溶劑是DMF，含有15體積％的水。
在另一優選的實施方式中，(e)是通過式V的化合物與HCl在溶劑中接觸來進行的，該溶劑選自甲醇、乙腈、異丙醇、乙醇、丙醇、丙酮、甲基異丁基酮(MIBK)、2-丁酮和水。
在另一優選的實施方式中，(e)是通過式V的化合物與HCl在乙醇中接觸來進行的。
在另一優選的實施方式中，式I的化合物是單鹽酸鹽。
在另一優選的實施方式中，式I的化合物是晶體。
在另一優選的實施方式中，式I的化合物是選自乙醇、丙醇、異丙醇、丙酮、MIBK、2-丁酮和水的溶劑化物。
在一個更優選的實施方式中，式I的化合物是乙醇溶劑化物。
在另一實施方式中，本發明提供一種新的制備式IVa的化合物的方法 包括(b)偶聯式II和III的化合物生成式IVa的化合物。
在另一優選的實施方式中，式IVa的化合物無需純化就用于(c)。
在另一優選的實施方式中，通過式II的化合物與酸活化劑在溶劑和第一堿中接觸、隨后所得溶液與式III的化合物接觸進行(b)。
在另一優選的實施方式中，通過式II的化合物與草酰氯在乙腈和吡啶中接觸、隨后所得溶液與式III的化合物接觸來進行(b)。
在另一優選的實施方式中，在式II的化合物業已與式III的化合物接觸過之后，向該反應溶液中加入第二堿。
在另一優選的實施方式中，所述的第二堿是二異丙基乙基胺。
在另一實施方式中，本發明提供一種新的制備式II的化合物的方法 包括(a)式VI的化合物與式VII的化合物接觸生成式VIII的化合物；和，(ai)式VIII的化合物轉化為式II的化合物。
在另一實施方式中，本發明提供新的式I的化合物 其中I是單鹽酸鹽。
在另一優選的實施方式中，式I的化合物是晶體。
在另一優選的實施方式中，式I的化合物是乙醇溶劑化物。
在另一實施方式中，本發明提供新的式IV的化合物
在另一實施方式中，本發明提供新的式Va的化合物 或其藥學可接受鹽形式。
在另一實施方式中，本發明提供新的藥物組合物，含有藥學可接受載體和治療有效量的本發明的化合物或其藥學可接受鹽形式。
在另一實施方式中，本發明提供治療血栓栓塞性疾病的新方法，包括給需要該治療的患者施用治療有效量的本發明的化合物或其藥學可接受鹽形式。
在另一實施方式中，本發明提供用于治療的本發明的化合物。
在另一實施方式中，本發明提供本發明的化合物在制備治療血栓栓塞性疾病的藥物中的用途。
定義在此所用的下列術語和短語具有所給的含義。應理解，本發明的化合物可以含有不對稱取代的碳原子，并且可以分離為旋光或消旋形式。所屬領域熟知如何制備旋光形式，例如通過拆分消旋體或者由旋光起始原料合成。所有手性、非對映異構和消旋體以及結構的所有幾何異構體形式均涉及，除非具體指出特定立體化學或異構體形式。
本發明的方法是以至少多克規模、千克規模、多千克規模或工業規模實施。在此所用的多克規模優選是其中至少一種起始原料以10克或更多、優選至少50克或更多、更優選至少100克或更多存在的規模。在此所用的多千克規模是指其中至少一種起始原料使用1千克以上的規模。在此所用的工業規模是指除實驗室規模之外并足以提供足夠用于臨床試驗或使用者分配的產品的規模。
在此所用的術語″取代的″是指在指定原子上的一個或多個氫被選自指定基團的選項替代，條件是不超過該指定原子的正常化合價，并且這種取代作用得到穩定的化合物。當取代基是酮基(即，＝0)時，則該原子上的2個氫原子被置換。芳族部分上不存在酮基取代基。當環系(例如，碳環或雜環)據稱被羰基或雙鍵取代時，該羰基或雙鍵是該環的組成部分(即，在其中)。
本發明將包括本發明化合物中存在的原子的所有同位素。同位素包括具有相同原子序數但質量數不同的那些原子。一般性但非限定實例，氫的同位素包括氚和氘。碳的同位素包括C-13和C-14。
本發明所述合成方法的反應可以優選在堿的存在下進行，所述堿是任何多樣的堿，其在反應中的存在促進所需產物的合成。
有機合成領域的技術人員可以選擇適用的堿。適用的堿包括，但不限于無機堿，包括但不限于堿金屬、堿土金屬、鉈和銨的氫氧化物、醇化物、磷酸鹽和碳酸鹽，包括但不限于，氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸鈉、碳酸鉀、碳酸銫、氫氧化鉈、碳酸鉈、四叔丁基碳酸銨和氫氧化銨。
本發明所述合成方法的反應可以在有機合成領域技術人員容易選擇的溶劑中進行，該溶劑一般是與起始原料(反應物)、中間體或產物在該反應進行的溫度下基本上不反應的任一溶劑，即，反應進行的溫度可以在溶劑的凝固溫度至溶劑的沸騰溫度的范圍內。所述的反應可以在一種溶劑或一種以上溶劑的混合物中進行。根據特定的反應步驟，可以選擇適合該特定反應的適當溶劑。
適當的醚溶劑包括二甲氧基甲烷、四氫呋喃、1，3-二噁烷、1，4-二噁烷、呋喃、乙醚、乙二醇二甲醚、乙二醇二乙醚、二乙二醇二甲醚、二乙二醇二乙醚、三乙二醇二甲醚，或叔丁基甲基醚。
適當的非質子溶劑可以包括，例如且不限于，四氫呋喃(THF)、二甲基甲酰胺(DMF)、二甲基乙酰胺(DMAC)、1，3-二甲基-3，4，5，6-四氫-2(1H)-嘧啶酮(DMPU)、1，3-二甲基-2-咪唑啉酮(DMI)、N-甲基吡咯烷酮(NMP)、甲酰胺、N-甲基乙酰胺、N-甲基甲酰胺、乙腈、二甲基亞砜、丙腈、甲酸乙酯、乙酸甲酯、六氯丙酮、丙酮、乙基甲基酮、乙酸乙酯、環丁砜、N，N-二甲基丙酰胺、四甲脲、硝基甲烷、硝基苯，或六甲基磷酰胺。
在此使用的短語″藥學可接受″是指那些，在可靠醫學判斷的范圍內，適用于接觸人體和動物的組織并且沒有過度毒性、刺激性、變應性反應或其它問題或并發癥、相應具有合理益處/危險比例的化合物、物質、組合物和/或劑型。
在此所用的″藥學可接受鹽″是指被公開化合物的衍生物，其中母體化合物通過制備其酸或堿鹽而改性。藥學可接受鹽的實例包括，但不限于，堿性基團，包括但不限于胺類的無機或有機酸鹽；和酸性基團包括但不限于羧酸的堿金屬或有機鹽。所述的藥學可接受鹽包括由無毒無機或有機酸生成的母體化合物的常規無毒鹽或季銨鹽。譬如，常規無毒鹽包括那些衍生自無機酸的鹽，無機酸包括但不限于鹽酸、氫溴酸、硫酸、氨基磺酸和硝酸；和由有機酸制備的鹽，有機酸包括但不限于乙酸、丙酸、琥珀酸、羥基乙酸、硬脂酸、乳酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、抗壞血酸、撲酸、馬來酸、羥基馬來酸、苯基乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水楊酸、對氨基苯磺酸、2-乙酰氧基苯甲酸、富馬酸、甲苯磺酸、甲磺酸、乙二磺酸、草酸和羥乙磺酸。
本發明的藥學可接受鹽可以由含有堿性或酸性部分的母體化合物通過常規化學方法合成。一般地，通過這些化合物的游離酸或堿形式與化學計量量的適當堿或酸在水中或在有機溶劑中、或在這兩者的混合物中反應制成鹽；通常，優選非水介質如醚、乙酸乙酯、乙醇、異丙醇或乙腈。適當鹽的目錄參見Remington′s PharmaceuticalSciences，17版，Mack Publishing Company，Easton，PA，1985，p.1418，其內容在此引入作為參考。
在此使用的″治療″或″療法″概括了哺乳動物、特別是人體中疾病狀態的治療，并包括(a)當該哺乳動物易患所述疾病狀態但還未確診患有該疾病時，預防哺乳動物、特別是人體出現該疾病狀態；(b)抑制該疾病狀態，即，使其不能惡化；和/或(c)減輕該疾病狀態，即，誘發疾病狀態的復原。
合成本發明的方法可以以多種路線實施，這取決于所選擇的溶劑、堿和溫度。正如有機合成領域中的普通技術人員所知，反應達到完全的時間以及收率將依賴于所有選擇變量。下列方案代表了本發明的全面程序。
式VIII的制備 VI可以通過新的肼原位捕獲法轉化為VIII。通過用HCl和NaNO2處理VI可以制備該肼中間體。優選地，將VI加入到HCl的冷卻(例如，-10至-5℃)溶液中。隨后可以加入NaNO2并優選使該溶液保持在0-10℃的溫度下。此時，向該溶液中加入AcOH。此后可以加入SnCl2·2H2O從而完成所述肼的生成。分離所得產物或就地使用。優選地，就地使用它。
此后通過將VII加入到新形成的肼中以生成VIII。上述加料優選在MeOH的存在下和35-55℃的溫度下進行。
式II的制備 VIII的氧化應得到II。通過在溶劑和選擇性緩沖劑的存在下VIII與氧化劑接觸進行該氧化反應。
所屬領域普通技術人員應理解可以使用氧化劑例如KMnO4或NaClO2。優選地，在緩沖劑的存在下用KMnO4作為氧化劑。VIII可以懸浮在醇溶劑(例如，叔丁醇)中。該混懸液優選保持在35-50℃下。隨后可以加入所屬領域技術人員已知的緩沖劑(例如，磷酸氫鈉一水合物)的水溶液。優選地，該緩沖劑是約0.5-4N。此后可以將KMnO4水溶液加入到該反應溶液中。在該反應完畢后分離II。
式IVa的制備 可以通過偶聯II和III生成IVa。該偶聯反應優選通過II與酸活化劑在溶劑中和在堿存在下接觸、隨后所得溶液與III接觸來完成。可以使用酸活化劑如亞硫酰氯或草酰氯，并且草酰氯是優選的活化劑。酸活化劑的加入優選在10-30℃的溫度下進行。
II和草酰氯的接觸可以在選自乙腈、THF和二氯甲烷的溶劑中進行，并且優選乙腈。第一堿可以選自DMAP、三乙胺、二異丙基乙基胺、N-甲基嗎啉和吡啶，并且優選吡啶。第一堿的含量基于II優選是0.2-1摩爾當量，更優選0.4摩爾當量。
需要加入的草酰氯的量應基于溶液中II的存在量和溶液中水的存在量。可以通過已知方法測定水的存在量，例如Karl Fischer滴定法。優選地，加入的草酰氯的摩爾數等于或略高于存在的II和水的摩爾數之和。
一旦II被活化，可與III接觸。優選地，在與III接觸之前將該反應混合物冷卻至0-10℃。III與該反應混合物接觸之后，優選加入第二堿。第二堿可以選自二異丙基乙基胺、吡啶、DMAP、三乙胺和N-甲基嗎啉，優選二異丙基乙基胺。第二堿的存在量基于II的存在量計優選是約1-3摩爾當量，更優選約2.2摩爾當量。
式IV的制備
IV可以由IVa生成并且IVa可以純化或者可以不純化。優選地，IV由沒有純化的IVa生成。IVa經分離后通常是油性物質。IVa優選溶于第一溶劑并加入馬來酸。向該溶液中可以加入第二溶劑以增強或加快IV的沉淀作用。基于II的存在量優選0.9-1.1摩爾當量的馬來酸存在，更優選約0.95摩爾當量。第一溶劑可以選自丙酮、氯仿、乙酸乙酯MIBK、乙酸異丙酯、異丙醇和THF，并且優選乙酸乙酯。第二溶劑可以選自1-氯丁烷、庚烷、己烷、二氯甲烷和TBME，并且優選1-氯丁烷。優選地，該反應在大約室溫下進行。
式V的制備 V可以通過IV與HONHCOCH3在堿和溶劑的存在下接觸來制成。優選地，所述的堿選自K2CO3、Na2CO3、KHCO3、NaHCO3、KF、NaOH和KOH，并且K2CO3是一種較優選的堿。所述溶劑可以選自DMSO、二甲基甲酰胺(DMF)、二甲基乙酰胺(DMAC)、1，3-二甲基-3，4，5，6-四氫2(1H)-嘧啶酮(DMPU)、1，3-二甲基-2-咪唑啉酮(DMI)和N-甲基吡咯烷酮(NMP)。一種優選溶劑是DMF。優選DMF含有0.5-50體積％的水，更優選，含有0.5，1，2，3，4，5，6，7，8，9，10，11，12，13，14，至15體積％的水，尤其更優選含有10，11，12，13，14，至15體積％的水，并且仍然更優選15體積％的水。
優選地，將HONHCOCH3、DMF和K2CO3混合在一起，隨后與水接觸。這種反應混合物優選保持在約20-30℃下。當該反應混合物接觸IV時，適宜在大約室溫下攪拌該反應。
式I的制備 通過V溶解在溶劑中并將該溶液與HCl接觸可以由V形成I。優選地，該溶劑選自甲醇、乙腈、異丙醇、乙醇、丙醇、丙酮、甲基異丁基酮(MIBK)、2-丁酮和水，并且乙醇是一種較優選的溶劑。V優選在60-80℃的溫度下溶于溶劑(例如，乙醇)中。HCl優選與該溶液在20-40℃的溫度下接觸。優選地，該HCl存在于醇溶液中。該醇溶液優選是異丙醇。
I優選沉淀自該反應混合物。通過冷卻該混合物至約0-10℃的溫度可以促進這種沉淀作用。優選地I是晶體單鹽酸鹽。更優選地，I是選自乙醇、丙醇、異丙醇、丙酮、MIBK、2-丁酮和水的溶劑化物。尤其更優選，I是乙醇溶劑化物。
本發明的其它特征在下列舉例實施方式的描述中更加清晰，這些實施方式舉例說明而不限定本發明。
實施例實施例1VIII的制備向40L的安裝有頂部空氣攪拌器、溫差電偶、冷凝器和氮進口的哈斯特洛伊耐蝕鎳基合金″C″反應釜中加入濃HCl(5.5L)。使反應釜冷卻至-5至-10℃。在12分鐘內加入VI(黃褐色固體，726g，5.3mol)同時保持內溫在-5至-7℃。加入另外500mL的濃HCl用于沖洗懸掛在該反應釜側壁上的所有VI。所得黃褐色漿液在-5℃下保持10分鐘，并且制備亞硝酸鈉(450g，6.5mol)在3.1L純水中的溶液。在20分鐘內加入第一個1500mL的亞硝酸鈉溶液，期間內溫升高至10℃。停止加料30分鐘使內溫冷卻下來并平衡在2-3℃。再次加入亞硝酸鈉溶液并在30分鐘內加入剩余的1.7L，同時保持在5-7℃的溫度。在6℃下繼續攪拌該批料30分鐘。集中一次加入乙酸(1.8L)而內溫沒有明顯改變(6℃)。在1.9L H2O和1.9L濃HCl中制備SnCl2.2 H2O(2.8kg，12.2mol)的溶液并在55分鐘內加入該溶液，同時保持溫度在6-10℃。將所得白色″搖乳狀″漿液繼續攪拌30分鐘。
將甲醇(10L)集中一次加入反應釜并將該反應混合物加熱至40℃。在3.1LMeOH中制備4，4，4-三氟-2-呋喃基-1，3-丁二酮(VII，830mL，1.2kg，5.6mol)的溶液，將其在35分鐘內加入并保持內溫在41-43℃。加料完畢之后，該批料在45-50℃下繼續保持1.5小時，至此關閉加熱并使所得的橙色漿液冷卻至室溫在氮氣氛下過夜(16小時)。次日早晨，使該批料進一步冷卻有助于促進VIII的沉淀。使該批料冷卻至0℃且在0℃下保持1小時，之后將該漿液滴加在32cm平底漏斗中的Dacron濾布上。過濾需要1小時且濾餅深度測定為3.5cm。該濾餅用3L的冷(0-5℃)50/50異丙醇/水漂洗，隨后用2.9L的水漂洗。在45℃和22mm Hg的真空烘箱中干燥濕濾餅(3.4kg)至恒定重量，得到1.3Kg的VIII，其為黃色固體(1.3Kg，94.5重量％，71.7％校正的收率)。
實施例2II的制備向安裝有頂部空氣攪拌器、溫差電偶、加液漏斗、冷凝器和氮進口的50L哈斯特洛伊耐蝕鎳基合金C反應釜加入融化的叔丁醇(10L)，隨后加入固體VIII(1160g)。用附加量的叔丁醇(4.5L)來漂洗原容器并加入到反應釜中。該混懸液升溫至38℃-45℃直至得到均勻溶液。將磷酸氫鈉一水合物(1245g存在于5.2L的純水中)的水溶液在約15分鐘內35℃-45℃間加入到混合物中。在38℃-45℃內將Celite545(3.2Kg)加入反應釜并持續攪拌以使固體分散。在約2.5小時內把市售的40％高錳酸鈉水溶液(5.76L)緩慢加入，內溫保持在42℃-50℃。將該反應混合物冷卻至室溫并保持過夜同時持續攪拌。
次日早晨，將該混合物重新加熱至45℃-50℃且加入叔丁基甲基醚(6.0L)，隨后加入固體Celite545(3.2Kg)和中性氧化鋁(4.15Kg)。將該混合物攪拌約15分鐘，過濾，并且該濾餅用叔丁基甲基醚(6L總的漂洗體積)漂洗。合并全部得到的濾液并通過蒸餾除去溶劑。當停止蒸餾時，加入純水(5L)，隨后第二次蒸餾。澄清、均勻的殘余物用水稀釋得到18L的全部溶液。加入n-氯丁烷(8L)，將該兩相混合物緩慢攪拌15分鐘，并且分離上層且棄去。將弱堿性水層冷卻至3℃-7℃并加入30％檸檬酸水溶液(3.3L)，由此沉淀粗II。通過過濾收集固體且該濾餅用純水(5.0L全部漂洗體積)漂洗。取出濕的黃色II并在70℃真空烘箱內干燥至恒定重量，得到干燥的II(815.1g；98.8重量％，75％收率)。
實施例3III的制備III可以根據共同待決U.S.臨時專利申請60/220932(2000年7月26日提交)所述方法制備，其內容在此引入作為參考。下面是制備III的一個實施例。
將存在于THF中的二甲胺(7.2L的2.0M溶液，14.3mol)加入到5加侖Parr氫化器中。此后加入2-甲酰基-咪唑基(1.25kg，13.0mol)和甲醇(2.4L)。在壓力測試之后向該體系加入氮、Pd/C(10％)(125g，含有約50重量％水)。夾套冷卻設定在25℃。隨后該批料用氫加壓并使壓力保持在50-60psig的范圍內。該反應的第一個20分鐘內溫升高至35℃并且非常快速地攝取氫。2小時后，解除氫壓，內溫為30-31℃。HPLC分析表明完全轉化為2-(N，N-二甲基氨基甲基)咪唑(殘留2-甲酰基-咪唑基A％＜2％而2-(N，N-二甲基氨基甲基)咪唑＞98％)。該批料經0.5微米筒式過濾器過濾，隨后經0.45微米微型過濾器過濾除去Pd/C。用1/1v/v MeOH/THF(5L)的溶液洗滌該反應釜和內襯并且經筒式過濾器注入含有剩余濾液的小口玻璃瓶中。合并的濾液經旋轉蒸發器濃縮至2.3kg溶液(含有1.6Kg的2-(N，N-二甲基氨基甲基)咪唑)，其此后直接用于下個步驟。
向兩個帶有頂部空氣攪拌器、溫差電偶和具有氮氣帽的蒸餾裝置的22L五頸圓底燒瓶分別加入粗2-(N，N-二甲基氨基甲基)咪唑的溶液(4.86kg的由上述方法制備的溶液，含有3.0Kg的2-(N，N-二甲基氨基甲基)咪唑)。分別向兩個反應釜引入無水DMSO(10.0L)得到深琥珀色澄清溶液。隨后在50-60℃真空中蒸餾除去這兩個反應釜中各自粗2-(N，N-二甲基氨基甲基)咪唑中的殘留MeOH和THF，在40-45℃下隨后向這兩個反應釜中分別加入1-氨基-2-氟-4-碘苯(2.15Kg，9.05mole)和粉狀K2CO3(2.5Kg，18.1mole，2.0當量)。兩個反應釜分別用真空/氮循環用氮結束來脫氣3次，之后加入粉狀CuI(260g，1.35mole，0.15當量)。所得反應混合物在這兩個反應釜中分別再用真空/氮氣循環用氮氣結束來脫氣3次，之后升溫至125-130℃。
當該反應在125-130℃經過16小時后完全(1-氨基-2-氟-4-碘代苯＜5％在254nm下，經HPLC分析)時，將在兩個反應釜中的各個該反應混合物分別冷卻至40-50℃。向這兩個反應釜中分別加入4.0L的飽和NH4Cl水溶液，并且所得混合物在20-25℃下攪拌1小時。該混合物此后經Celite床過濾，并且這兩個反應釜各自用1.0L的飽和NH4Cl水溶液和8.5L的乙酸乙酯洗滌。將合并濾液的一半和洗滌溶液依次傾入40L反應釜，并且在20-25℃下攪拌該混合物0.5小時，之后分離兩層。合并的水層再傾回40L反應釜并用乙酸乙酯萃取(4×15L)。在有機溶劑萃取的過程中，通過經Celite床過濾該混合物消除乳液膠體，之后分離兩層。合并的有機提取物此后用6.0L的飽和NH4Cl水溶液洗滌，用MgSO4(2.0Kg)干燥，并且在兩個獨立22L反應釜中用活性炭(木炭，500g)在20-25℃下脫色1小時。該混合物經Celite床過濾，并且各反應釜用乙酸乙酯(2L)洗滌。合并的有機濾液隨后傾入40L反應釜中，并且在真空中45-50℃下連續蒸餾除去共68L的乙酸乙酯。粗III在9.0L乙酸乙酯中的剩余漿液隨后轉移到22L反應釜內，并且將該混合物升溫回流(77-78℃)得到褐色至黑色溶液。此后將庚烷(6.0L)在70℃下加入該溶液，并且將該溶液冷卻至45-50℃，之后用活性炭(木炭，400g)處理。將該混合物再次升溫至回流1小時，之后經Celite床在50-55℃過濾。Celite床用2.0L的乙酸乙酯洗滌，并且將合并的濾液和洗滌溶液傾入干凈的22L反應釜中。在45-50℃下真空蒸餾除去共5.0L的乙酸乙酯，并且將附加5.0L的庚烷在50℃下加入到反應釜中。該混合物逐漸冷卻至20-25℃并且在20-25℃下攪拌1小時，之后冷卻至5-10℃2小時沉淀III。通過在27cm內襯有Dacron布的瓷制漏斗過濾收集固體并用20％(v/v)的TBME/庚烷(2×2.5L)洗滌。該固體在真空氮氣體中40-45℃下干燥至恒定重量。得到第一批的III(1.749Kg，4.235Kg理論值，41.3％)，其為淺黃色晶體。
合并的母液和洗滌溶液隨后在真空中濃縮得到第二批的III(500g，4.235kg理論值，11.8％；53.1％總收率)，其為淺黃色晶體。
實施例4IVa和IV的制備將II(781g，2.61mol)與乙腈(11.3L)合并。利用Karl Fischer滴定法測定該溶液中水的存在量。通過將II的摩爾數加上測定出的存在的水的摩爾數得到草酰氯的摩爾數，計算出要加入的草酰氯體積。加入吡啶(81mL，1.0mol)，隨后加入草酰氯(227mL，2.60mol)。使該反應升至55-60℃且在該溫度下保持1小時。該反應的處理之后取樣并在NH4OH中終止。一旦認為該反應完全，進行真空蒸餾除去12％(v/v)的溶劑。蒸餾之后，將新的乙腈再次加入該反應以代替被蒸餾掉的體積。
將該反應混合物冷卻至5℃，隨后加入III(598g，2.55mol)。加料時伴隨12℃的放熱曲線。令該溶液回復至5℃后，將二異丙基乙基胺(975mL，5.60mol)在60分鐘內經加液漏斗加入到該反應。加料之后，撤去冷卻浴并使該反應回復至室溫。在加入堿2小時之后該反應達到完全。該反應用EtOAc(12L)稀釋并用水(2×8L)洗滌。合并水洗滌液并用EtOAc萃取(1×8L)。合并有機餾分且用MgSO4干燥，過濾且濃縮生成褐色油IVa。
該油用EtOAc(11.3L)重構且轉移至40L釜中。取馬來酸(290g，2.50mol)加入該EtOAc溶液中，隨后在室溫下攪拌60分鐘。加入馬來酸約15分鐘后，得到的鹽IV開始從該溶液中沉淀出來。在60-90分鐘內加入1-氯丁烷(24L)以保證沉淀完全。加入1-氯丁烷之后，該IV溶液在室溫下攪拌3小時。通過過濾分離該鹽并用1-氯丁烷(6L)洗滌。固體在75℃真空烘箱中干燥至恒定重量得到1.49Kg(100.7重量％，94.1％收率)的IV。
實施例5V的制備向22L反應燒瓶中加入DMF(8L)、碳酸鉀(1576g，11.4mol)和醋羥胺酸(428g，5.7mol)并在室溫下攪拌。緩慢加入水(1.2L，注意對于批料1，首先加入0.8L的水并且在室溫下攪拌27小時之后再加入另外0.4L的水)同時保持該反應溫度在20-30℃。該反應混合物在20-30℃下攪拌30分鐘之后，加入IV(1200g，1.9mol)。該反應混合物在室溫下攪拌4-20小時。將反應混合物加入到含12L水的40L反應釜中終止并且劇烈攪拌。所得漿液在室溫下攪拌2小時且隨后在2-10℃下繼續攪拌1小時。固體用Dacron濾布過濾。該濾餅用冷水(8L)洗滌且隨后用冷乙腈(2L)洗滌，在真空烘箱內干燥至恒定重量得到粗產物(1012g)。將粗產物在65-80℃下溶解在12.5L的乙腈中。溶液冷卻至25-37℃之后，在2小時內加入水(2L)并使反應罐冷卻至室溫。生成的漿液在室溫下攪拌1小時。冷卻至2-10℃下后，用Dacron濾布過濾該固體。該濾餅用冷乙腈(4-6L)洗滌并在真空烘箱中干燥至恒定重量得到產物V(92.3g，89％)。HRMSC24H21F4O2N8(M+H)+計算值529.1724，實測值529.1722.1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)2.09(6H)，3.29(2H)，6.54(2H)，6.96(1H)，7.41-7.75(7H)，8.06(1H)，10.65(1H).19F-NMR-119.632(1F)，-61.257(3F)。
實施例6I的制備向帶有頂部攪拌器、水冷凝器和溫度探針的22L反應燒瓶中加入乙醇(10L)和V(一水合物形式，850g，1.56mol)。將該反應混合物加熱至65-80℃得到澄清溶液。冷卻至約55℃之后，經筒式過濾器過濾該熱溶液。將濾液轉移回干凈的22L反應釜并且冷卻該溶液至20-37℃，經加液漏斗加入存在于IPA中的4.6N HCl溶液(355mL，1.63mol)。生成漿液之后，在室溫下攪拌該混合物1小時，并且隨后在2-8℃下繼續攪拌1小時。在平底漏斗中用Dacron濾布收集固體。該濾餅用冷乙醇(2L)洗滌且隨后用叔丁基甲基醚(6L)洗滌，在真空烘箱中50℃下干燥得到產物I(858g，98％).M.p.258℃(分解).1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)1.02(乙醇)，2.74(6H)，3.40(乙醇)，4.35(2H)，6.59(2H)，7.18(1H)，7.34-7.80(7H)，8.09(1H)，10.99(1H).19F-NMR-118.174(IF)，-61.229(3F)。
實施例7Va的制備室溫下向V(5.06g)在氯仿(40mL)和甲醇(120mL)中的溶液加入35％H2O2(20mL)。該反應混合物在室溫下攪拌66小時。隨后將水(180mL)加入到該反應混合物中并且所得漿液在室溫下攪拌30分鐘。通過過濾收集固體并且在真空中氮氣氛下干燥至恒定重量(3.97g)。
實用性本發明的新化合物在治療或預防哺乳動物中的血栓栓塞性疾病中用作抗凝劑。在此使用的術語″血栓栓塞性疾病″包括動脈或靜脈心血管或腦血管血栓栓塞性疾病，包括，例如，不穩定型心絞痛、首次或復發性心肌梗塞、局部缺血性猝死、暫時性局部缺血發作、中風、動脈粥樣硬化、靜脈血栓形成、深靜脈血栓形成、血栓靜脈炎、動脈栓塞、冠狀和腦動脈血栓形成、腦栓塞、腎栓塞和肺栓塞。本發明的化合物的抗凝作用確信歸因于對因子Xa或凝血酶的抑制作用。
本發明的化合物作為因子Xa的抑制劑的有效性是用純化的人因子Xa和合成底物測定的。在本發明的化合物存在或不存在下測定顯色底物S2222(Kabi Pharmacia，Franklin，OH)的因子Xa水解作用率。底物的水解導致pNA的釋放，其是通過分光光度法測量在405nm下吸光度的增加來監測的。抑制劑存在下在405nm下吸光度變化率的減小是酶抑制的指標。這種試驗的結果表示為抑制常數Ki。
因子Xa測定是在0.10M磷酸鈉緩沖液，pH7.5中進行，其中含有0.20M NaCl和0.5％PEG 8000。底物水解的米氏常數Km是在25℃下用Lineweaver&Burk的方法測定。使0.2-0.5nM人因子Xa(Enzyme Research Laboratories，South Bend，IN)與底物(0.20mM-1mM)在抑制劑的存在下反應測定Ki的值。該反應進行30分鐘且速度(吸光度變化相對于時間的比率)是在25-30分鐘的時間內測量。下面的關系用于計算Ki值(vo-vs)/vs＝I/(Ki(1+S/Km))其中vo是在抑制劑不存在下對照的速度；vs是抑制劑存在下的速度；I是抑制劑的濃度；Ki是酶抑制劑復合物的離解常數；S是底物的濃度；Km是米氏常數。
在上述試驗中試驗的化合物如果它們表現Ki≤10μM則被認為具有活性。本發明的優選化合物具有≤1μM的Ki′。本發明的更優選化合物具有≤0.1μM的Ki’。本發明的尤其優選的化合物具有≤0.01μM的Ki′。本發明的非常優選的化合物具有≤0.001μM的Ki′。利用上述方法，發現許多本發明的化合物表現出≤10μM的Ki，由此證實本發明的化合物作為有效的Xa抑制劑的可利用性。
本發明的化合物的抗血栓形成作用可以在兔動脈-靜脈(AV)分流血栓形成模型中測定。在這種模型中，使用體重2-3kg的用賽拉嗪(10mg/kg體重)和氯胺酮(50mg/kg體重)的混合物麻醉的兔子。將鹽水填充的AV分流裝置連接在大腿動脈和大腿靜脈插管之間。該AV分流裝置由一片6cm tygon管組成，該管包含一根絲線。血液從大腿動脈經AV-分流流入大腿靜脈。流動血液暴露在絲線上將導致顯著血栓的形成。40分鐘后，脫開該分流器并且稱重覆蓋有血栓的絲線。在斷開AV分流器之前給予試驗藥物或賦形劑(i.v.，i.p.，s.c.，或口服)。測定各處理組血栓形成的百分抑制率。通過線性回歸評估ID50值(產生50％血栓形成抑制率的劑量)。
式(I)的化合物也可以用作絲氨酸蛋白酶的抑制劑，特別是人凝血酶、血漿血管舒緩素和纖溶酶。由于其抑制作用，這些化合物顯示出適于預防或治療通過上述種類的酶催化下的生理反應、凝血和炎癥。具體而言，這些化合物具有作為治療由于凝血酶活性升高而導致的疾病(例如心肌梗塞)的藥物，和用作將血液處理為診斷和其它商業目的血漿抗凝劑的實用性。
通過在純化體系中其抑制小分子底物在凝血酶作用下的裂解的性能證明本發明的一些化合物是絲氨酸蛋白酶凝血酶的直接作用抑制劑。通過Kettner等在J.Biol.Chem.265，18289-18297(1990)中所述的方法可以測定體外抑制常數，該文獻在此引入作為參考。在這些試驗中，凝血酶介導的顯色底物S2238(Helena Laboratories，Beaumont，TX)的水解通過分光光度法測定。向試驗混合物中加入抑制劑導致吸光度減小且是凝血酶抑制的指示。人凝血酶(EnzymeResearch Laboratories，Inc.，South Bend，IN)以在0.10M磷酸鈉緩沖液，pH7.5、0.20M NaCl和0.5％PEG 6000中0.2nM的濃度與0.20-0.02mM范圍內的多種底物濃度一起溫育。溫育25-30分鐘之后，通過監測在405nm下吸光度的增加率測試凝血酶活性，吸光度的增加歸因于底物水解。抑制常數利用Lineweaver和Burk的標準方法由反應速度的相對曲線獲得，其是底物濃度的函數。利用上述方法，本發明的一些化合物經過評估并發現Ki小于15μm，因此證實本發明的化合物作為有效Xa抑制劑的實用性。
本發明的化合物可以單獨給藥或與一種或多種其它治療劑聯合給藥。這些包括其它抗凝劑或凝血抑制劑、抗血小板或血小板抑制劑、凝血酶抑制劑，或血栓溶解劑或纖維蛋白溶解劑。
所述的化合物以治療有效量施用給哺乳動物。所謂″治療有效量″是指式I的化合物，在單獨或與其它附加治療劑施用給哺乳動物時，有效預防或緩減血栓栓塞性疾病癥狀或該疾病的進程的量。
所謂″聯合給藥″或″聯合療法″是指式I的化合物與一種或多種附加治療劑并行施用給被治療哺乳動物。當聯合給藥時各成分可以同時或者在不同時間點以任一順序依次給藥。因此，各成分可以單獨給藥但時間上足夠接近從而提供所需治療效果。可以與本發明的化合物聯合使用的其它抗凝劑(或凝血抑制劑)包括華法令和肝素，以及其它因子Xa抑制劑，例如在本發明背景技術中所述文獻描述的那些。
在此使用的術語抗血小板劑(或血小板抑制劑)代表抑制血小板功能的試劑，例如抑制血小板的聚集、附著或顆粒分泌。此類試劑包括，但不限于，多種已知的非甾類抗炎藥(NSAIDS)，例如阿斯匹林、布洛芬、萘普生、舒林酸、消炎痛、甲滅酸鹽、昔康、雙氯芬酸、磺吡酮和吡羅昔康，包括其藥學可接受鹽或前藥。在NSAIDS中，優選阿斯匹林(乙酰水楊酸或ASA)和昔康。其它適當的抗血小板劑包括噻氯匹定，包括其藥學可接受鹽或前藥。噻氯匹定也是優選的化合物，因為已知它在使用中對胃腸道作用輕微。其它適當的血小板抑制劑包括IIb/IIIa拮抗劑、血栓烷-A2-受體拮抗劑和血栓烷-A2-合成酶抑制劑，以及它們的藥學可接受鹽或前藥。
在此所用的術語凝血酶抑制劑(或抗凝血酶劑)代表絲氨酸蛋白酶凝血酶的抑制劑。通過抑制凝血酶，多種凝血酶介導的過程，例如凝血酶介導的血小板活化(也就是，例如，血小板的聚集，和/或血纖維蛋白溶酶原激活劑和/或5-羥色胺的顆粒分泌)和/或纖維蛋白形成被瓦解。所屬領域技術人員了解多種凝血酶抑制劑并且這些抑制劑可以考慮與本發明化合物聯合。此類抑制劑包括，但不限于，硼酸精氨酸(boroarginine)衍生物、硼酸肽(boropeptide)、肝素類、水蛭素和阿加曲班(argatroban)，及其藥學可接受鹽和前藥。
硼酸精氨酸衍生物和硼酸肽包括硼酸的N-乙酰基和肽衍生物，例如賴氨酸、鳥氨酸、精氨酸、高精氨酸和其相應異硫代脲同系物(isothiouronium)的C-末端α-氨基硼酸衍生物。此處使用的術語水蛭素包括水蛭素的適宜衍生物或類似物，在此是指hirulogs，例如二硫酸水蛭素(disulfatohirudin)。硼酸肽凝血酶抑制劑包括Kettner等在U.S.專利號5,187,157和歐洲專利申請公開號293881 A2中所述的化合物，其內容在此引入作為參考。其它適當硼酸精氨酸衍生物和硼酸肽凝血酶抑制劑包括PCT申請公開號92/07869和歐洲專利申請公開號471,651 A2中所述的那些，其內容在此引入作為參考。
在此使用的術語溶血栓(或纖維蛋白溶解)劑(或血栓溶解或纖維蛋白溶解劑)代表溶解血凝塊(血栓)的藥物。此類藥物包括組織纖維蛋白酶原激活質、anistreplase、尿激酶或鏈激酶，包括它們的藥學可接受鹽或前藥。在此使用的術語anistreplase是指茴香酰纖溶酶原鏈激酶激活質復合物，如歐洲專利申請號028,489所述，其內容引入作為參考。在此使用的術語尿激酶代表雙鏈和單鏈尿激酶，后者也是本發明優選的前尿激酶。
本發明的式I的化合物與上述附加治療劑的聯合給藥，可以產生單獨使用這些化合物和試劑所沒有的效果優越性，并且可以同時降低各自的使用劑量。更低的劑量使副作用的可能性最小，由此提供更高的安全范圍。
本發明的化合物也可以在涉及因子Xa的抑制的試驗或研究中用作標準或參照化合物，例如作為定性標準或對照物。上述化合物可以以市售試劑盒提供，譬如，用于涉及因子Xa的藥學研究中。例如，本發明的化合物在試驗中可以用作參照物來比較其已知活性與活性未知的化合物。這能夠保證該試驗可以適當進行并且提供比較的基礎，尤其是如果試驗化合物是該參照化合物的衍生物時。當開發新試驗或方案時，本發明的化合物可以用來測試其有效性。
本發明的化合物也用于涉及因子Xa的診斷試驗中。譬如，因子Xa在未知樣本中的存在可以通過將顯色底物S2222加入到一系列的含有試驗樣本和選擇性含有一種本發明化合物的溶液中來測定。如果在含有試驗樣本但沒有本發明化合物的溶液中觀察到pNA的產生，則可以推斷因子Xa存在。
劑量和制劑本發明的化合物可以以口服劑型例如片劑、膠囊(其分別包括緩釋或定時釋放制劑)、丸劑、散劑、顆粒劑、酏劑、酊劑、混懸劑、糖漿劑和乳液給藥。它們也可以以靜脈內(快速濃注或輸注)、腹膜內、皮下或肌肉內形式給藥，全部采用藥學領域普通技術人員熟知的劑型。它們可以單獨給藥，但通常與藥學載體一起給藥，藥學載體在給藥途徑和標準藥學實踐的基礎上進行選擇。
顯然，本發明的化合物的劑量應依賴于已知因素而改變，例如具體藥物及其給藥方式和途徑的藥效學特性；接受者的種類、年齡、性別、臨床狀況和體重；癥狀的本質和程度；并行治療的類型；治療的頻率；給藥的途徑、患者的肝和腎功能，和預期效果。主治醫師或獸醫可以決定和規定預防、對抗和阻止該血栓栓塞性疾病進程所需藥物的有效量。
一般性的指導，當用于指定作用時，各活性成分的日口服劑量應在約0.001-1000mg/kg體重，優選約0.01-100mg/kg體重/天，并且首選在約1.0-20mg/kg/天的范圍內。通過靜脈內，在恒定速率輸注中首選劑量在約1-約10mg/kg/分鐘的范圍內。本發明的化合物可以每天給藥一次，或全部日劑量可以分為每天2、3或4次的劑量。
本發明的化合物可以以鼻內形式經局部使用適當鼻內賦形劑給藥，或者經透皮途徑，利用透皮貼劑給藥。當以透皮給藥體系的形式給藥時，顯然，在整個給藥方案中劑量施用應連續而不是間歇的。
所述的化合物通常與根據給藥形式適當選擇的藥學稀釋劑、賦形劑或載體(在此總稱為藥學載體)混合在一起給藥，也就是說，口服片劑、膠囊、酏劑、糖漿劑等，并且與常規藥學實踐一致。
例如，為了以片劑或膠囊的形式口服給藥，活性藥物成分可以與口服、無毒、藥學可接受、惰性載體結合，例如乳糖、淀粉、蔗糖、葡萄糖、甲基纖維素、硬脂酸鎂、磷酸二鈣、硫酸鈣、甘露糖醇、山梨糖醇等；為了以液體形式口服給藥，口服藥物成分可以與任何口服、無毒、藥學可接受惰性載體結合，例如乙醇、甘油、水等。此外，當需要或必須時，也可以將適當粘合劑、潤滑劑、崩解劑和著色劑摻混在混合物中。適當的粘合劑包括淀粉、明膠、天然糖(如葡萄糖或β-乳糖)、玉米甜味劑、天然和合成樹膠(例如阿拉伯膠、黃芪膠或藻酸鈉)、羧甲基纖維素、聚乙二醇、蠟等。這些劑型中使用的潤滑劑包括油酸鈉、硬脂酸鈉、硬脂酸鎂、苯甲酸鈉、乙酸鈉、氯化鈉等。崩解劑包括，但不限于，淀粉、甲基纖維素、瓊脂、膨潤土、黃原膠等。
本發明的化合物也可以以脂質體給藥體系給藥，例如小單室囊泡、大單室囊泡和多室囊泡。脂質體可以由多種磷脂形成，例如膽固醇、硬脂基胺或磷脂酰膽堿。
本發明的化合物還可以與作為可靶向藥物載體的可溶性聚合物偶聯。所述聚合物可以包括聚乙烯吡咯烷酮、吡喃共聚物、聚羥丙基甲基丙烯酰胺-酚、聚羥乙基門冬酰胺酚或被棕櫚酰殘基取代的聚氧化乙烯-聚賴氨酸。
而且，本發明的化合物可以偶聯于一類生物可降解聚合物以有效獲得藥物的控釋，例如，聚乳酸、聚乙醇酸、聚乳酸和聚乙醇酸的共聚物、聚ε-己內酯、聚羥基丁酸、聚原酸酯、聚縮醛、聚二氫吡喃、聚氰基丙烯酸酯，和水凝膠的交聯或兩親性嵌段共聚物。
適合給藥的劑型(藥物組合物)可以在每個劑量單位中含有約1mg-約100mg的活性成分。在這些藥物組合物中活性成分通常是以基于該組合物的總重量約0.5-95重量％的量存在。
明膠膠囊可以含有活性成分和粉狀載體，例如乳糖、淀粉、纖維素衍生物、硬脂酸鎂、硬脂酸等。可以使用類似稀釋劑制備壓縮片劑。片劑和膠囊兩者可以制備成緩釋產品以在數小時期間提供藥物的連續釋放。壓縮片劑可以是糖包衣或薄膜包衣以掩蓋任何不適味道并保護片劑免于大氣環境，或者腸溶包衣以在胃腸道內選擇性崩解。
口服給藥的液體劑型可以含有著色和交聯劑以提高患者的認同性。
通常，水、適當的油、鹽水、右旋糖(葡萄糖)水溶液和有關糖溶液和二醇類(例如丙二醇或聚乙二醇)是適合非腸道溶液的載體。非腸道給藥的溶液優選含有活性成分的水溶性鹽，適當的穩定劑，并且如果必要，緩沖物質。抗氧劑例如亞硫酸氫鈉，亞硫酸鈉或抗壞血酸，單用或合用，是適合的穩定劑。
也可以使用檸檬酸及其鹽和EDTA鈉。此外，非腸道溶液可以含有防腐劑，例如潔爾滅、對羥基苯甲酸甲酯-或丙酯，和氯丁醇。
適當藥學載體公開在該領域中的一篇標準參考書Remington′sPharmaceutical Sciences，Mack Publishing Company，。
用于本發明化合物給藥的藥物劑型的代表可以舉例如下膠囊大量的單元膠囊可以通過以下方法制備，將100mg的粉狀活性成分、150mg的乳糖、50mg的纖維素和6mg的硬脂酸鎂分別填充在標準兩片式硬明膠膠囊中。
軟明膠膠囊可以制備活性成分在可消化油(例如大豆油、棉籽油或橄欖油)中的混合物并且通過主動置換的方式注射泵入明膠形成含100mg活性成分的軟明膠膠囊。沖洗該膠囊并干燥。
片劑片劑可以通過常規方法制備，使劑量單位是100mg的活性成分、0.2mg的膠體二氧化硅、5mg的硬脂酸鎂、275mg的微晶纖維素、11mg的淀粉和98.8mg的乳糖。可以涂覆適當的包衣以提高可口性或延遲吸收作用。
可注射劑適合注射的非腸道用組合物可以用下面方法制備，在10體積％丙二醇和水中攪拌1.5重量％的活性成分。應用氯化鈉使該溶液等滲并滅菌。
混懸劑可以制備用于口服給藥的含水混懸劑，使其各5mL中含有100mg的精細活性成分、200mg的羧甲基纖維素鈉、5mg的苯甲酸鈉、1.0g的山梨糖醇溶液U.S.P.，和0.025mL的香草醛。
當本發明的化合物與其它抗凝劑合用時，例如，日劑量可以是每kg的患者體重約0.1-100mg的式I化合物和約1-7.5mg的第二抗凝劑。對于片劑劑型，本發明的化合物通常可以以約5-10mg/劑量單位的量存在，并且第二抗凝劑以約1-5mg/劑量單位的量存在。
當式I的化合物與抗血小板劑聯合給藥時，指導性地，通常日劑量可以是每kg的患者體重約0.01-25mg的式I化合物和約50-150mg的抗血小板劑，優選約0.1-1mg的式I化合物和約1-3mg的抗血小板劑。
當式I的化合物與血栓溶解劑聯合給藥時，通常日劑量可以是每kg的患者體重約0.1-1mg的式I的化合物，并且在血栓溶解劑的情況中，當與式I的化合物一起給藥時該血栓溶解劑的常規劑量比該血栓溶解劑單獨使用時減少了約70-80％。
當兩種或多種上述第二治療劑與式I的化合物一起給藥時，一般地各組分在典型日劑量和典型劑型中的量可以相對于這些藥物單獨給藥時的日常劑量有所減少，考慮到治療劑聯合給藥時的加和或協同作用。
特別當作為單一劑量單位提供時，可能存在聯合活性成分之間的化學相互作用。因此，當式I的化合物和第二治療劑在單一劑量單位中聯合時，它們配制為使活性成分盡管在單一劑量單位中混合，但活性成分之間的物理接觸最小(也就是減少)。譬如，一種活性成分可以被腸溶包衣。提供在該活性成分的腸溶包衣，不但可以減少結合活性成分之間的接觸，而且可以控制這些成分中的一種在胃腸道中的釋放，使這些成分之一在胃中不釋放而釋放在腸道內。活性成分之一也可以用一種材料包衣，其在整個胃腸道中有效緩釋并且還發揮減少結合的活性成分之間的物理接觸的作用。此外，緩釋成分可以被附加地腸溶包衣，使這種成分的釋放僅僅發生在腸道內。另一途徑將包括聯合產品的制劑，其中一種成分用緩釋和/或腸溶釋放聚合物包衣，并且其它成分也用聚合物例如低粘度級的羥丙基甲基纖維素(HPMC)或其它所屬領域已知的適當物質包衣，從而進一步分開活性成分。聚合物包衣起對其它成分之間的相互作用形成附加屏障的作用。
對于所屬領域的技術人員來說，借助于本發明的內容，這些以及其它減少本發明的聯合產物的組分之間接觸的方式將是顯而易見的，無論在單一劑型中給藥或是在分開劑型中但以相同方式同時給藥。
在上述教導的指引下本發明可以有許多改進和變化。因此應理解在所附權利要求書的范圍內，除具體所述的本發明可以實施。
權利要求
1.一種制備式I的化合物的方法 包括(c)式IVa的化合物與馬來酸接觸生成式IV的化合物； (d)式IV的化合物轉化為式V的化合物；和，(e)生成式I的化合物。
2.權利要求1所述的方法，其中在(c)中，與馬來酸接觸是在第一溶劑乙酸乙酯的存在下進行的。
3.權利要求2所述的方法，其中在(c)中，加入第二溶劑1-氯丁烷以促進沉淀。
4.權利要求1所述的方法，其中(d)是通過式IV的化合物與HONHCOCH3在堿和溶劑的存在下接觸來進行的。
5.權利要求4所述的方法，其中所述的堿選自K2CO3、Na2CO3、KHCO3、NaHCO3、KF、NaOH和KOH。
6.權利要求5所述的方法，其中所述的堿是K2CO3。
7.權利要求4所述的方法，其中在(d)中，所述的溶劑選自DMSO、DMAC、N-甲基吡咯烷酮和DMF。
8.權利要求7所述的方法，其中在(d)中，所述的溶劑是DMF，含有0.5-50體積％的水。
9.權利要求7所述的方法，其中在(d)中，所述的溶劑是DMF，含有10，11，12，13，14，至15體積％的水。
10.權利要求7所述的方法，其中在(d)中，所述的溶劑是DMF，含有15體積％的水。
11.權利要求1所述的方法，其中(e)是通過式V的化合物與HCl在選自甲醇、乙腈、異丙醇、乙醇、丙醇、丙酮、甲基異丁基酮(MIBK)、2-丁酮和水的溶劑中接觸來進行的。
12.權利要求11所述的方法，其中(e)是通過式V的化合物與HCl在乙醇中接觸來進行的。
13.權利要求1所述的方法，其中該式I的化合物是單鹽酸鹽。
14.權利要求1所述的方法，其中該式I的化合物是晶體。
15.權利要求1所述的方法，其中該式I的化合物是選自乙醇、丙醇、異丙醇、丙酮、MIBK、2-丁酮和水的溶劑化物。
16.權利要求15所述的方法，其中該式I的化合物是乙醇溶劑化物。
17.權利要求1所述的方法，其中該式IVa的化合物是通過包括下列的方法制備 (b)偶聯式II和III的化合物生成式IVa的化合物。
18.權利要求17所述的方法，其中該式IVa的化合物無需純化就用于(c)。
19.權利要求17所述的方法，其中(b)是通過式II的化合物與酸活化劑在溶劑和第一堿中接觸、隨后所得溶液與式III的化合物接觸來進行的。
20.權利要求19所述的方法，其中(b)是通過式II的化合物與草酰氯在乙腈和吡啶中接觸、隨后所得溶液與式III的化合物接觸來進行的。
21.權利要求20所述的方法，其中當式II的化合物已經與式III的化合物接觸之后，將第二堿加入到所述反應溶液中。
22.權利要求21所述的方法，其中第二堿是二異丙基乙基胺。
23.一種制備式II的化合物的方法 包括(a)式VI的化合物與式VII的化合物接觸生成式VIII的化合物；和，(a1)式VIII的化合物轉化為式II的化合物。
24.式I的化合物 其中I是單鹽酸鹽。
25.權利要求24所述的化合物，其中該式I的化合物是晶體。
26.權利要求24所述的化合物，其中該式I的化合物是選自乙醇、丙醇、異丙醇、丙酮、MIBK、2-丁酮和水的溶劑化物。
27.權利要求26所述的化合物，其中該式I的化合物是乙醇溶劑化物。
28.式IV的化合物
29.式Va的化合物 或其藥學可接受鹽形式。
30.一種藥物組合物，含有藥學可接受載體和治療有效量的權利要求24、25、26、27、28或29之一所述的化合物或其藥學可接受鹽。
31.一種治療血栓栓塞性疾病的方法，包括給需要其的患者施用治療有效量的化權利要求24、25、26、27、28或29所述的化合物或其藥學可接受鹽。
32.權利要求24、25、26、27、28或29之一所述的化合物用于治療中。
33.權利要求24、25、26、27、28或29之一所述的化合物在制備用于治療血栓栓塞性疾病的藥物中的用途。
全文摘要
本發明涉及一種由其相應3－氰基－4－氟苯基－吡唑制備式(I)的化合物的方法和其中使用的中間體。
文檔編號C07C51/41GK1610679SQ01819306
公開日2005年4月27日 申請日期2001年9月12日 優先權日2000年9月22日
發明者L·安扎隆, F·金, D·J·麥隆尼, J－H·孫, C·A·特利哈, J·C·周, T·E·斯米沙, H-Y·李 申請人:布里斯托爾-邁爾斯斯奎布藥品公司