選擇性保護漿果赤霉素衍生物的方法及其在合成塔三烷中的應用的制作方法

專利名稱：選擇性保護漿果赤霉素衍生物的方法及其在合成塔三烷中的應用的制作方法
技術領域：
本發明涉及半合成塔三烷用的新型中間體及其制備方法。
塔三烷是一類天然物質，其二萜骨架一般被源于N-烷酰基-或N-芳酰基-苯基-異絲氨酸的β-氨基酸側鏈酯化，已知它們作為抗癌劑。包括幾十種由紫杉屬紫杉種分離的塔三烷，比如由下面的通式1和2表示的PACLITAXEL(R1＝Ac、R2＝Ph、R3＝R4＝H)、三尖杉寧堿、其10位上脫乙酰基的衍生物，或者漿果赤霉素(無側鏈的衍生物)。 由于擔心短葉紫彬(T.Brevifolia)的來源會很快消耗盡，法國的研究人員研究了從歐洲紫杉的可更新部分(樹葉)中分離PACLITAXEL。因此他們證實了塔三烷的可能生物遺傳前體，即10-脫乙酰基漿果赤霉素III，由于它在樹葉提取液中比較豐富，被選作半合成的跳板。
因此，塔三烷比如PACLITAXEL或DOCETAXEL(R1＝Ac、R2＝叔丁氧基、R3＝R4＝H)的半合成包括用β-氨基酸衍生物酯化漿果赤霉素或10-脫乙酰基漿果赤霉素III被保護的衍生物在13位的羥基。
在現有技術(EP-0 253 738、EP-0 336 840、EP-0 336 841、EP-0 495718、WO 92/09589、WO 94/07877、WO 94/07878、WO 94/07879、WO94/10169、WO 94/12482、EP-0 400 971、EP-0 428 376、WO 94/14787)中，敘述了PACLITAXEL和DOCETAXEL的不同半合成方法。兩部最近的著作[I.Georg、T.T.Chen、I Ojima & D.M.Vyas的《塔三烷抗癌劑，基礎科學及現狀》，見《ACS論文集叢書》583，華盛頓(1995)]以及特別是[Matthew Suffness《紫杉酚科學和應用》CRC出版社(1995)及所引用的文獻]包括了塔三烷半合成的完全文集。
至今對在7位和10位有兩個羥基的塔三烷進行選擇性的單保護只能借助于三烷基甲硅烷醚基團(EP-A-0 336 840)。這種保護具有很大的意義，因為一方面比如PACLITAXEL的直接前體漿果赤霉素III非常稀少，另一方面可以在有收益的條件下由更容易得到的同類物10-脫乙酰基漿果赤霉素III進行制造，而不用對10位進行有效的選擇性保護。
實際上，使用常用的基團比如乙酸基，或者小位阻的鹵代烷氧羰基，象傳統的三氯乙氧羰基來保護二羥基塔三烷，如10-脫乙酰基漿果赤霉素III，具有完全沒有選擇性的缺點。相反，后者至今廣泛地用來對7，10-二羥基塔三烷如10-脫乙酰基漿果赤霉素III進行解保護，以得到7，10-二(2，2，2-三氯乙氧羰氧基)-10-脫乙酰基漿果赤霉素III，這是合成DOCETAXEL的中間體(EP-A-0 336 841)。
使用三烷基甲硅烷來保護7，10-二羥基塔三烷7位的羥基，由于這些保護基團對弱酸性比較不穩定，所以具有一些重大的缺點抵消了良好的選擇性。
1/在以后進行的10位酰化(在7位預先進行的選擇性保護即為此，這將成為本發明的問題)，由于三烷基甲硅烷基化醚容易被在反應介質中存在的乙酰化基團取代，這就引起50～60％的得率，這種情況由于當7位已經被位阻基團占據時，10位就更難酯化而加劇。在很低的溫度下使用堿金屬的醇鹽作為中間體的條件下，可能避免這種次級反應，但是對于工業合成來說，會引起如申請WO-A-94/14787中所指出的新的雙倍缺點。
2/在酸性條件下烷基甲硅烷基醚的敏感性限制了在后面的合成步驟中使用酸性反應試劑的可能性，因此使這種保護基團的應用領域更窄。再有，應該注意到以下事實，即在這些條件下，更高級的同系物如叔丁基二甲基甲硅烷基醚將是更牢固的，但是由于它具有更大的空間位阻，所以用它來代替是不太可能的。
3/烷基甲硅烷基醚在含羥基溶劑如水和醇中已知的敏感性，使得不可能對于該系列化合物使用這些進行重結晶用的溶劑，但這些系統對純化該系化合物是很可貴的，這是另一個重大的缺點。
4/當使用工業色譜提純帶有甲硅烷基醚的中間體時，由于發生部分分解，實際上不可能允許使用這種提純技術，而后者從得到具有高價值的、高純度的制藥原料的角度看是可貴的。
下面通式3a的不帶側鏈的塔三烷類似物 式中，R1、R2、R4、R5、R6、R14彼此獨立地表示一個基團Q，同時Q＝R、H、OH、OR、SH、SR、OCOR、OCOOR、HCO、X，X＝鹵素，以及R彼此獨立地表示直鏈或支鏈、飽和或不飽和的烷基、全鹵代烷基、直鏈或支鏈飽和或不飽和的雜烷基、飽和或不飽和的環烷基、飽和或不飽和的雜環烷基、芳基、芳烷基，這些基團特別可以被一個或幾個鹵素取代或不被取代，以上基團的簡單的組合、多重的結合，更一般的是含有它們的呈簡單的或重復的鏈段形的各種結合。
特別是通式2的衍生物，比如10-脫乙酰基漿果赤霉素III，它經常具有至少4個自由羥基，在1位具有明大位阻的、且只能在苛刻條件下酯化的叔羥基，在7、10和13位具有3個其它的更容易酯化的仲羥基，在其空間位阻的基礎上可以將它們分成兩組反應活性-第一組在13位，在標準反應條件下對酯化比較不活潑(按照文獻說法，這是因配置側鏈)；-第二組在7位和10位，這是本發明所感興趣的目標，根據它們對酯化或碳酸酯化的不同反應活性又可以進一步分為兩個稍微不同的層次，7位的羥基稍為更有利一些。
由我們本身的工作也得出結論，兩個羥基化的反應點具有變構象相互作用的情況在7位或10位兩者之一的位阻酯的配置改變了另一個位置的空間的可利用性。
因此，本發明涉及在上述的通式3a的7，10-二羥基塔三烷的7位上選擇性保護的新方法，該方法通過使用特定的反應條件，同時使用在2位(或β位)被取代的、比2，2，2-三氯乙氧羰基(其在我們的特定反應條件下仍然是沒有選擇性的)位阻更大的烷氧羰基，該基團能夠被β消除機理[見《保護基團》(Protecting Group)，P.J.Kocienski，Thieme Verlag Ed.，p7(1994)及所引用的文獻]除去，而且沒有任何上面所提到的三烷基甲硅烷基醚的缺點。
專利申請WO-A-94/07877敘述了一種塔三烷的合成方法，對于這種方法可以使用2-三氯甲基-2-丙氧羰基作為10-脫乙酰基漿果赤霉素III的7位和10位羥基的保護基團。由其說明書特別可以得出結論，這個基團不是被用來選擇性保護7位的羥基，而是被用來保護制備DOCETAXEL所必須的7位和10位的兩個羥基，這是在實施例中實際制備的唯一產品，只增加了唯一的使用2，2，2-三氯乙氧羰基作為保護基團的例子。因此這個專利申請書的內容傾向于不推薦本領域的技術人員使用比2，2，2-三氯乙氧羰基位阻更大的β-鹵代烷氧羰基，來由10-脫乙酰基漿果赤霉素III制備在7位保護的漿果赤霉素III。
因此本發明還涉及一種所產生的新型中間體，一種對7位被保護的塔三烷在10位上進行選擇性(相對于13位的羥基)酰化的方法、所產生的新型的7-(β-取代的烷氧羰氧基)-10-酰氧基塔三烷，及其在與塔三烷的側鏈偶合方面的應用以及由此產生的被保護的新型塔三烷中間體。
最后，本發明還描述選擇性地除去保護基團β-取代的烷氧羰基以得到最終的塔三烷，特別是DOCETAXEL。
因此本發明首先涉及如下通式3b的7-(β-取代的烷氧羰氧基)-10-羥基塔三烷衍生物的制備方法 式中
R1、R2、R4、R5、R6、R14如前面所定義，R7表示在2位(或β位)取代的、位阻比2，2，2-三氯乙氧羰基更大的、并且能夠通過β消除機理除去的烷氧羰基，該方法包括，在高于環境溫度的溫度下(這與通常實際使用的不同)，優選20～80℃，在強攪拌下，在吡啶和/或位阻取代的吡啶(如4-吡咯烷-1-基吡啶或二甲基氨基吡啶)存在下，把在適當的溶劑中稀釋的、在2位上取代的相應的烷氧羰基氯緩慢地加入到前面所定義的通式3a的7，10-二羥基塔三烷溶液中。
R7特別是如下通式的烷氧羰基 式中Z1和Z2彼此獨立地表示氫原子、如前面所定義的R或鹵素，Z3、Z4和Z5彼此獨立地表示氫原子、鹵素、基團R、OR、Si(R)3，R如前面所定義，或者Z3、Z4和Z5中的兩個組成芳環或非芳環的一部分，當在Z2、Z3或Z4中的一個表示氫原子的條件下，Z3、Z4或Z5中的至少一個表示基團Si(R)3，以及當在Z3、Z4或Z5中的一個表示鹵素的條件下，Z3、Z4和Z5中的每個都代表選自溴或碘的鹵素。
以一種優選的方式，以相對于通式3a的7-10-二羥基塔三烷1～1.5當量的氯甲酸酯進行酯化反應。
然后，通過下述的方法制備如下通式3c的7-(β-取代的烷氧羰氧基)-10-酰氧基-塔三烷
式中R1、R2、R4、R5、R6、R7和R14如前面所定義，以及R10表示式O-CO-R的酰基，R如前面所定義，該制備方法是，在環境溫度下和劇烈的攪拌下，在吡啶和/或位阻取代的吡啶(如4-吡咯烷-1-基吡啶或二甲基氨基吡啶)存在下，將在適當的溶劑中稀釋的相應的酰氯(1～1.2當量)緩慢地加入到前面得到的7-(β-取代的烷氧羰氧基)-10-羥基塔三烷中。
對于這兩個反應，適當的溶劑是非羥基溶劑，特別是烷基鹵化物，比如二氯甲烷、氯仿或二氯乙烷。
前面得到的7位被保護的塔三烷3c可以用來通過用適當的塔三烷側鏈前體對13位的羥基進行酯化，以得到通式3d的塔三烷衍生物 式中R1、R2、R4、R5、R6、R7、R10和R14如前面所定義，以及R13表示塔三烷的側鏈前體基團，然后對7位的羥基進行選擇性的解保護，必要時伴有和/或事先打開和/或轉變和/或解保護側鏈前體，以得到所需的塔三烷。
我們將特別使用在現有技術(EP-0 253 738、EP-0 336 840、EP-0 336841、EP-0 495 718、WO 92/09589、WO 94/07877、WO 94/07878、WO94/07879、WO 94/10169、WO 94/12482、EP-0 400 971、EP-0 428 376、WO 94/14787)中敘述的塔三烷側鏈前體或者在專利申請FR-95 12 735中敘述的噁唑烷酮，該文獻在此引作參考。特別涉及如下的側鏈 其中Q＝H、RCO、ROCO，W＝芐基或羥基官能團的保護基團GP，R’＝R、OR、SR、X、Si(R)3，R”和R”’＝R，R如前面所定義，它們按照在如下文獻中已知的技術與式3c的衍生物相連，以得到相應的塔三烷的直接前體，這些文獻包括EP-0 253 738、EP-0 336 840、EP-0 336841、EP-0 495 718、WO 92/09589、WO 94/07877、WO 94/07878、WO94/07879、WO 94/10169、WO 94/12482、EP-0 400 971、EP-0 428 376、WO 94/14787或FR-95 12 735。
按照一種優選的方式，我們將使用如下的塔三烷側鏈前體
其中Q、R、R’、R”、R”’和W如前面所定義，特別是其中R和R’表示芳基、Q表示芳酰基的那些。
如果涉及在專利申請書FR95 12 735中敘述的噁唑烷酮，最好是N-苯甲酰-4-苯基-噁唑烷-2-酮羧酸，特別是(4S，5R)異構體，最好通過相應的(+)()基酯的皂化而得到。
根據常用的技術[P.J.Kocienski，《保護基團》Thieme Verlag Ed。，p7(1994)及所引用的文獻]通過進行β消除反應對漿果赤霉素7位的羥基解保護。
按照一種優選的方式，羥基官能團R7的保護基團表示下式的基團 在式中Z1和Z2表示氫原子。
當Z3、Z4和Z5表示鹵素時，它們優選為溴。
按照實施本發明的另一種優選方案，Z3、Z4或Z5中至少一個表示烷基，其余Z3、Z4和Z5表示全鹵烷基。
按照實施本發明的另一種優選方案，Z3、Z4或Z5中的兩個組成芴基環的一部分。
按照一種優選的方式，R7基團選自2，2，2-三溴乙氧羰基、2-三氯甲基-2-丙氧羰基、2-三甲基甲硅烷基-乙氧羰基和芴基甲氧羰基。
對通式3a的7，10-二羥基塔三烷概括地描述本發明的方法，因為這涉及選擇性保護7位的羥基，而不管取代基R1、R2、R4、R5、R6和R14的本質如何。當然，這特別適合保護在式中R7和R10表示氫的通式2的10-脫乙酰基漿果赤霉素，這是在半合成PACLITAXEL時的一種關鍵中間體。
因此本發明還涉及PACLITAXEL的一種制備方法，這包括用PACLITAXEL側鏈的適當前體將其中R7表示如前所定義的保護基團、R10表示乙酰基的通式2的漿果赤霉素III衍生物酯化，然后按照前述的技術將7位的羥基解保護，必要時伴有和/或事先打開和/或轉變和/或解保護側鏈前體，以得到PACLITAXEL的所述側鏈前體。
所謂直鏈或支鏈烷基，按照本發明優選C1～C6的烷基，特別選自甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基及其不同支鏈異構體比如叔丁基，戊基、己基及其不同支鏈異構體。這個定義也適用于烷氧基、芳烷基或芳烷氧基中的烷基。
所謂環烷基，按照本發明優選C3～C6的環烷基，特別選自環丙基、環丁基、環戊基或環己基。
所謂芳基，按照本發明優選芳香基或雜芳香基，特別選自苯基、萘基、蒽基、菲基、吡啶基、嘧啶基等。
最后，所謂鹵素，優選氯、溴或碘。對于全鹵烷基，將優選涉及全氯基團，特別是三氯甲基或五氯乙基。
通過下面的實施例，本發明方法和中間體的其他特點將更為明顯。
借助于鹵代烷氧羰基的比較研究本發明的主要目的是顯示β-取代的烷氧羰基保護基團在選擇性方面的決定性的優點，該取代基的位阻大于2，2，2-三氯乙氧羰基(Troc)，后者已經以非選擇性的方式用于在7位和10位具有至少兩個自由羥基的塔三烷的非選擇性保護(EP-A-0 336 841)，相對于它進行了比較的動力學研究。
作為一種比較和不限制本發明的范圍的方式，作為例子我們選擇了2，2，2-三氯-叔丁氧羰基(TCBoc)和三溴乙氧羰基(Tbroc)，這些保護基團的位阻明顯上大于Troc，使用10-脫乙酰基漿果赤霉素III作為基底物的例子，這是PACLITAXEL和DOCETAXEL半合成時經常使用的前體。
在動力學研究的這個實施例中使用的反應條件如下-溫度38℃-溶劑二氯甲烷-氯甲酸酯1.1～1.5摩爾當量-總研究時間16hr
-催化劑吡啶，5摩爾當量，4-吡咯烷-1-基吡啶，1.4摩爾當量-方式強力攪拌，緩慢地加入氯甲酸酯(每小時1摩爾當量)。
通過高效液相色譜進行定量分析監測。
這個比較性動力學研究的結果列于下面的表I中。
表I10-脫乙酰基漿果赤霉素III保護的比較性實施例比較表
縮寫Troc＝2，2，2-三氯乙氧羰基；TCboc＝2，2，2-三氯叔丁氧羰基；TES＝三乙基甲硅烷基；DMAP＝二甲基氨基吡啶；PP＝4-吡咯烷-1-基吡啶；DAB＝脫乙酰基漿果赤霉素。
*按照文獻是84～86％[J.-N.Denis，A.Greene， J.Am.Chem.Soc.，5917(1988)]。
此比較研究的結果毫無疑問地表明，本發明的新型保護基團用于合成7位被保護的10-脫乙酰基漿果赤霉素III時能夠以接近三乙基甲硅烷基的選擇性得到7位被保護的10-脫乙酰基漿果赤霉素III，后者是在現有技術中使用的唯一的一種基團。
當隨后進行的10位羥基的選擇性酰基化時，得到高于用7-三乙基甲硅基-10-脫乙酰基漿果赤霉素III時得到的收率。
因此由10-脫乙酰基漿果赤霉素合成7位被保護的漿果赤霉素III得到的總收率高于用現有技術中的方法所得到的收率(75～87％對57～64％)。
實驗部分實施例17-O-(2，2，2-三氯叔丁氧羰基)-10-脫乙酰基漿果赤霉素III在50分鐘內，在40℃和惰性氣氛下，向攪拌著的500mg(0.919mmol)10-脫乙酰基漿果赤霉素III和0.19g(1.29mmol)4-吡咯烷-1-基吡啶在5mL無水二氯甲烷中的溶液里加入0.26g(1.10mmol)2，2，2-三氯叔丁氧羰基氯在2mL二氯甲烷中的溶液。再反應1小時以后，降到環境溫度，用2％的鹽酸水溶液(5mL)洗滌有機溶液，再用滲透水(2×5mL)洗滌，用硫酸鎂干燥，并減壓濃縮。在硅膠(15～40μm)上色譜提純粗產品(洗脫環己烷/乙酸乙酯，60/40)后，得到白色粉末狀的7-O-(2，2，2-三氯叔丁氧羰基)-10-脫乙酰基漿果赤霉素III(得率＝89％)。
得到的產物具有如下的特性-RMN1H 400MHz(CDCl3)(δppm)8,10(2H，d，J＝7,3Hz)；7,62(1H，t，J＝7,3Hz)；7,49(2H，t，J＝7,6Hz)；5,64(1H，d，J＝6,8Hz)；5,50(1H，d)；5,39(1H，dd，J＝10,6和7,3Hz)；4,97(1H，d，J＝8,6Hz)；4,89(1H，m)；4,34和4,20(2H，2d，J＝8,4Hz)；4,09(1H，d)；4,06(1H，d)；2,60(1H，m)；2,31(3H，s)；2,29(1H，m)；2,13(3H，s)和(1H，m)；2,06(1H，m)；1,90(6H，s)；1,85(3H，s)；1,09(3H，s)；1,06(3H，s).
實施例27-O-(2，2，2-三氯叔丁氧羰基)-漿果赤霉素III在環境溫度和惰性氣氛下，向攪拌著的260mg(0.347mmol)7-O-(2，2，2-三氯叔丁氧羰基)-10-脫乙酰基漿果赤霉素III和127.5mg(1.04mmol)4-二甲基氨基吡啶在2.5mL無水二氯甲烷中的溶液里加入50μL(0.695mmol)乙酰氯。在環境溫度下反應1小時以后，用2％的鹽酸水溶液洗滌有機相，直至得到pH＝6，用硫酸鎂干燥，并減壓濃縮。在硅膠(15～40μm)上色譜提純得到的殘渣(洗脫環己烷/乙酸乙酯，6/4)后，得到固體狀的7-O-(2，2，2-三氯叔丁氧羰基)-漿果赤霉素III(得率＝96％)。
得到的產物具有如下的特性- RMN1H 400MHz(CDCl3)(δppm)8,10(2H，d，J＝7,6Hz)；7,61(1H，t，J＝7,4Hz)；7,48(2H，t，J＝7,7Hz)；6,52(1H，s)；5,65(1H，d，J＝6,9Hz)；5,39(1H，dd，J＝10,4和7,3Hz)；4,96(1H，d，J＝8,9Hz)；4,86(1H，m)；4,32和4,17(2H，2d，J＝8,4Hz)；4,01(1H，d，J＝6,9Hz)；2,69(1H，m)；2,30(2H，m)；2,29(3H，s)；2,16(3H，s)；2,14(3H，s)；2,07(1H，d，J＝4,8)；1,97(1H，m)；1,95和1,91(6H，2s)；1,80(3H，s)；1,61(1H，s)；1,15(3H，s)；1,07(3H，s).
實施例3(比較例)7-O-三氯乙氧羰基-10-脫乙酰基漿果赤霉素III在40分鐘內，在40℃和惰性氣氛下，向攪拌著的500mg(0.919mmol)10-脫乙酰基漿果赤霉素III和0.19g(1.29mmol)4-吡咯烷-1-基吡啶在5mL無水二氯甲烷中的溶液里加入0.152mL(1.10mmol)三氯乙氧羰基氯在2mL二氯甲烷中的溶液。再反應1小時以后，降到環境溫度，用2％的鹽酸(5mL)洗滌有機溶液，再用滲透水(2×5mL)洗滌，用硫酸鎂干燥，并減壓濃縮(高效液相色譜分析，產率＝57％)。在硅膠(15～40μm)上色譜提純粗產品(洗脫環己烷/乙酸乙酯，60/40)后，得到白色粉末狀的7-O-三氯乙氧羰基-10-脫乙酰基漿果赤霉素III。
得到的產物具有如下的特性-RMN1H 400MHz(CDCl3)(δppm)8,10(2H，d，J＝7Hz)；7,62(1H，t，J＝7,4Hz)；7,49(2H，t，J＝7,6Hz)；5,65(1H，d，J＝6,9Hz)；5,44(1H，dd，J＝10,8和7,3Hz)；5,39(1H，d)；4,98(1H，d，J＝7,5Hz)；4,89(1H，m)；4,84和4,70(2H，2d，J＝11,9Hz)；4,35和4,20(2H，2d，J＝8,4Hz)；4,10(1H，d，J＝7Hz)；4,01(1H，d，J＝1,8Hz)；2,64(1H，m)；2,31(3H，s)；2,29(1H，m)；2,11(3H，d)；2,05(2H，m)；1,89(3H，s)；1,09(3H，s)；1,07(3H，s).
實施例47-O-三氯乙氧羰基漿果赤霉素III(比較例)
在環境溫度和惰性氣氛下，向攪拌著的1.70g(2.36mmol)7-O-三氯乙氧羰基-10-脫乙酰基漿果赤霉素III和0.96mL(12mmol)吡啶在17mL無水二氯甲烷中的溶液里加入0.68mL(0.695mmol)乙酰氯。在環境溫度下反應3小時以后，用水(2×20mL)洗滌有機相，用硫酸鎂干燥，并減壓濃縮。在硅膠(15～40μm)上色譜提純得到的殘渣(洗脫環己烷/乙酸乙酯，6/4)后，得到固體狀的7-O-三氯乙氧羰基-漿果赤霉素III(得率＝75％)。
得到的產物具有如下的特性-RMN1H 400MHz(CDCl3)(δppm)8,11(2H，d，J＝7,1Hz)；7,62(1H，t，J＝7,4Hz)；7,49(2H，t，J＝7,6Hz)；6,39(1H，s)；5,64(1H，d，J＝6,9Hz)；5,61(1H，dd，J＝10,7和7,2Hz)；5,04和4,65(2H，2d，J＝12Hz)；4,99(1H，d，J＝8,2Hz)；4,87(1H，m)；4,33 et 4,16(2H，2d，J＝8,4Hz)；4,02(1H，d，J＝6,9Hz)；2,64(1H，ddd，J＝14,4，9,5和7,2Hz)；2,30(3H，s)和(2H，m)；2,17(3H，s)；2,13(3H，d，J＝0,8Hz)；2,04(1H，m)；1,83(3H，s)；1,63(1H，s)；1,14(3H，s)；1,09(3H，s).
實施例513-O-[[(4S，5R)-2，4-二苯基-4，5-二氫噁唑-5-基]羰基]-7-O-(2，2，2-三氯叔丁氧羰基)-漿果赤霉素III在環境溫度和惰性氣氛下，向攪拌著的3.38g(12.7mmol)(4S，5R)-2，4-二苯基-4，5-二氫噁唑-5-基羧酸在60mL無水甲苯中的溶液里加入2.61g(12.7mmol)二環己基碳化二亞胺。攪拌5小時后，加入5g(6.33mmol)7-O-(2，2，2-三氯叔丁氧羰基)-漿果赤霉素III和0.77g(6.33mmol)4-二甲基氨基吡啶。在環境溫度下攪拌混合物15分鐘。過濾除去不溶物之后，減壓濃縮有機相。在硅膠(15～40μm)上色譜提純得到的殘渣(洗脫環己烷/乙酸乙酯，9/1)。
如此得到6.2g白色固體狀的標題化合物(收率＝94％)，得到的產物具有如下的特性-RMN1H 400MHz(CDCl3)(δppm)8,18(2H，d，J＝7,2Hz)；8,07(2H，d，J＝7,6Hz)；7,64(1H，t，J＝7,4Hz)；7,60(1H，t，J＝7,3Hz)；7,52(4H，m)；7,39(5H，m)；6,47(1H，s)；6,24(1H，t，J＝8,4Hz)；5,70(1H，d，J＝7Hz)；5,59(1H，d，J＝7,3Hz)；5,35(1H，dd，J＝10,4和7,2)；4,93(2H，d，J＝7,3Hz)；4,29和4,17(2H，2d，J＝8,5Hz)；3,96(1H，d，J＝6,9Hz)；2,71(1H，m)；2,37(1H，dd，J＝15,1和9,2Hz)；2,28(1H，dd，J＝15,1和8,8Hz)；2,13(3H，s)；2,01(6H，s)；1,95和1,93(6H，2s)；1,80(3H，s)；1,72(1H，s)；1,23(3H，s)；1,18(3H，s).
實施例613-O-[(2R，3S)-O-苯甲酰基-3-苯基異絲氨酸-1-基]-7-O-(2，2，2-三氯叔丁氧羰基)-漿果赤霉素III在環境溫度和惰性氣氛下，向攪拌著的100mg(0.0963mmol)13-O-[[(4S，5R)-2，4-二苯基-4，5-二氫噁唑-5-基]-羰基]-7-O-(2，2，2-三氯叔丁氧羰基)-漿果赤霉素III在四氫呋喃(1mL)和甲醇(1mL)中的溶液里加入0.2mL(0.2mmol)1M的鹽酸水溶液，在環境溫度下攪拌反應混合物14小時30分鐘。在加入15mg(0.2mmol)固體碳酸氫鈉后，再攪拌10分鐘，用乙酸乙酯(2×2mL)萃取反應介質，用水洗滌有機相，用硫酸鎂干燥，減壓濃縮。
如此得到102mg的標題化合物(粗收率＝定量)，就地用于下一步，它具有如下的特性-RMN1H 400MHz(DMSO-d6)(δppm)8,15(2H，d，J＝7,9Hz)；7,97(2H，d，J＝7,7Hz)；7,75(2H，t，J＝7,4Hz)；7,64(1H，t，J＝7,7Hz)；7,59(1H，t，J＝7,7Hz)；7,48(2H，d，J＝7,3Hz)；7,42(2H，t，J＝7,5Hz)；7,42(2H，t，J＝7,5Hz)；7,19(1H，t，J＝7Hz)；6,34(1H，s)；5,89(1H，t，J＝8,9Hz)；5,47(1H，d，J＝7Hz)；5,28(1H，dd，J＝10,5和7,3)；5,16(1H，d，J＝6,8Hz)；4,98(1H，d，J＝9,5Hz)；4,80(1H，s)；4,41(1H，d，J＝6,8)；4,06(2H，s寬)；3,72(1H，d，J＝7Hz)；2,26(3H，s)；2,07(3H，s)；2,0至1,6(4H，m)；1,86(6H，s)；1,83(3H，s)；1,64(3H，s)；1,05(3H，s)；1,01(3H，s).
實施例77-O-(2，2，2-三氯叔丁氧羰基)-紫杉酚在環境溫度和惰性氣氛下，向攪拌著的90mg(0.0852mmol)13-O-[(2R，3S)-O-苯甲酰基-3-苯基-異絲氨酸-1-基]-7-O-(2，2，2-三氯叔丁氧羰基)-漿果赤霉素III在四氫呋喃(4mL)和甲醇(4mL)混合物中的溶液里加入0.25mL飽和碳酸氫鈉水溶液，在環境溫度下攪拌反應混合物48小時。在用乙酸乙酯(2×5mL)萃取反應介質后，用水(5mL)洗滌分離的有機相，用硫酸鎂干燥，減壓濃縮。在硅膠(15～40μm)上色譜提純得到的殘渣(洗脫環己烷/乙酸乙酯，6/4)。
如此得到63mg白色固體的標題化合物(收率＝70％)，它具有如下的特性-RMN1H 400MHz(CDCl3)(δppm)8,12(2H，d，J＝7,4Hz)；7,75(2H，d，J＝7,3Hz)；7,61(1H，t，J＝7,4Hz)；7,50(5H，m)；7,38(5H，m)；7,19(1H，d，J＝9Hz)；6,47(1H，s)；6,18(1H，t，J＝8,6Hz)；5,79(1H，dd，J＝8,9和2,2Hz)；5,70(1H，d，J＝6,8Hz)；5,33(1H，dd，J＝10,3和7,2)；4,93(1H，d，J＝9Hz)；4,80(1H，d，J＝2,4Hz)；4,31和4,21(2H，2d，J＝8,5Hz)；3,91(1H，d，J＝6,8Hz)；2,66(1H，m)；2,38(3H，s)；2,33(2H，m)；2,13(3H，s)；1,99(1H，m)；1,94(3H，s)；1,90(6H，s)；1,81(3H，s)；1,19(3H，s)；1,18(3H，s).
實施例813-O-[[(4S，5R)-2，4-二苯基-4，5-二氫噁唑-5-基]羰基]-漿果赤霉素III在環境溫度和惰性氣氛下，向攪拌著的390mg(0.376mmol)13-O-[[(4S，5R)-2，4-二苯基-4，5-二氫噁唑-5-基]-羰基]-7-O-(2，2，2-三氯叔丁氧羰基)-漿果赤霉素III在10mL乙酸乙酯中的溶液里加入300μL(5.26mmol)乙酸和221mg(3.38mmol)鋅粉。在30℃下攪拌1小時15分鐘以后，用TLC監控，過濾后的有機相用滲透水(5mL)洗滌，再用飽和的碳酸氫鈉水溶液洗滌(2×5mL)，再重新用水(2×5mL)洗滌，用硫酸鎂干燥，減壓濃縮。
如此得到314mg標題化合物(粗產率＝定量)，將其直接用于下一步，它具有如下的特性-RMN1H 400MHz(CDCl3)(δppm)8,18(2H，d，J＝7,3Hz)；8,07(2H，d，J＝7,4Hz)；7,64(1H，t，J＝7,4Hz)；7,60(1H，t，J＝7,3Hz)；7,52(2H，t，J＝8,1Hz)；7,50(2H，t，J＝7,8Hz)；7,39(5H，m)；6,27(1H，s)；6,24(1H，t，J＝8,5Hz)；5,67(1H，d，J＝7,1Hz)；5,59(1H，d，J＝6,9Hz)；4,96(1H，d)；4,95(1H，d，J＝6,9Hz)；4,29和4,15(2H，2d，J＝8,4Hz)；3,82(1H，d，J＝7Hz)；2,57(1H，ddd，J＝15,9，6和6,8Hz)；2,48(1H，d，J＝4Hz)；2,38(1H，dd，J＝15,3和9Hz)；2,27(1H，dd，J＝15,3和8,7Hz)；2,24(3H，s)；2,04(3H，s)；1,89(3H，s)；1,88(1H，m)；1,75(1H，s)；1,67(3H，s)；1,26(3H，s)；1,15(3H，s).
實施例9制備PACLITAXEL
a)由13-O-[[(4S，5R)-2，4-二苯基-4，5-二氫噁唑-5-基]羰基]-7-O-(2，2，2-三氯叔丁氧羰基)-1-漿果赤霉素III在環境溫度和惰性氣氛下，向攪拌著的15mg(0.0148mmol)13-O-[[(4S，5R)-2，4-二苯基-4，5-二氫噁唑-5-基]-羰基]-7-O-(2，2，2-三氯叔丁氧羰基)-漿果赤霉素III在四氫呋喃(0.18mL)和甲醇(0.18mL)混合物中的溶液里加入90μL(0.09mmol)1M的鹽酸水溶液，在環境溫度下攪拌反應混合物8小時。在加入0.6mL的飽和碳酸氫鈉水溶液之后，加入1mL四氫呋喃和1mL水保持溶液的均勻性，再攪拌反應介質1小時30分鐘。在加入2.5mL乙酸乙酯和2.5mL滲透水后，用乙酸乙酯(2.5mL)萃取殘留的水相。用硫酸鎂干燥合并的有機相，減壓濃縮。
如此得到14mg7-O-(2，2，2-三氯叔丁氧羰基)紫杉酚粗品(收率＝70％)，不經另外的提純就將其用于下一步。
在環境溫度和惰性氣氛下，向攪拌著的13mg(0.0128mmol)7-O-(2，2，2-三氯叔丁氧羰基)-紫杉酚在2mL乙酸乙酯中的溶液里加入30μL(0.525mmol)乙酸和22.5mg(0.344mmol)鋅粉。在環境溫度下攪拌2小時30分鐘并用TCL監控，以及在用3mL乙酸乙酯稀釋反應介質后，先后用滲透水(1mL)、飽和碳酸氫鈉水溶液(1mL)和水洗滌有機相。用硫酸鎂干燥合，減壓濃縮。
在硅膠(15～40μm)上色譜提純粗產物(洗脫環己烷/乙酸乙酯，6/4)。如此分離出9.5mg結晶狀態的PACLITAXEL(收率＝89％)。
b)由13-O-[[(4S，5R)-2，4-二苯基-4，5-二氫噁唑-5-基]羰基]-漿果赤霉素III在環境溫度和惰性氣氛下，向攪拌著的290mg(0.347mmol)13-O-[[(4S，5R)-2，4-二苯基-4，5-二氫噁唑-5-基]-羰基]-漿果赤霉素III在四氫呋喃(4mL)和甲醇(4mL)混合物中的溶液里加入0.7mL(0.7mmol)1M的鹽酸，在環境溫度下攪拌反應混合物4小時。在加入6mL的飽和碳酸氫鈉水溶液之后，加入10mL水保持溶液的均勻性，再攪拌反應介質3小時30分鐘。在加入20mL乙酸乙酯和10mL滲透水后，用乙酸乙酯(20mL)萃取殘留的水相。用硫酸鎂干燥合并的有機相并減壓濃縮。
在硅膠(15～40μm)上色譜提純粗產物(洗脫環己烷/乙酸乙酯，5/5)。如此分離出270mg結晶狀態的PACLITAXEL(收率＝93％)。
權利要求
1.如下通式3d的塔三烷衍生物的制備方法 式中R1、R2、R4、R5、R6和R14彼此獨立地表示基團Q，其中Q＝H、OH、R、OR、SH、SR、OCOR、OCOOR、HCO、X，并且X＝鹵素，R彼此獨立地表示直鏈或支鏈飽和或不飽和烷基、全鹵代烷基、直鏈或支鏈飽和或不飽和雜烷基、飽和或不飽和環烷基、飽和或不飽和雜環烷基、芳基、芳烷基，這些基團可以被一個或幾個鹵素取代，R7選自2，2，2-三溴乙氧羰基、2-三氯甲基-2-丙氧羰基、2-三甲基甲硅烷基-乙氧羰基和芴基甲氧羰基；R10表示式O-CO-R的酰基，R如上所述，以及R13表示塔三烷的側鏈前體基團，該方法包括通式3c的塔三烷通過采用適當的塔三烷側鏈前體將13位的羥基酯化來用于半合成塔三烷，然后對7位的羥基進行選擇性解保護，必要時同時進行和/或預先進行打開和/或轉變和/或解保護側鏈前體，以得到所需的塔三烷 R1、R2、R4、R5、R6、R7、R10和R14如前面所定義。
2.權利要求1的方法，其特征在于R7表示如下通式的烷氧羰基 式中Z1和Z2彼此獨立地表示氫原子、上述基團R或鹵素，Z3、Z4和Z5彼此獨立地表示氫原子、鹵素，基團R、OR、Si(R)3，R如上定義，或者Z3、Z4和Z5中的兩個組成芳環或非芳環的一部分，條件是當Z2、Z3或Z4中的一個表示氫原子時，Z3、Z4或Z5中的至少一個表示基團Si(R)3，或者Z3、Z4和Z5中的兩個組成芳環或非芳環的一部分，以及條件是當Z3、Z4或Z5中的一個表示鹵素以及Z1和Z2各自表示氫原子時，Z3、Z4和Z5每個都表示選自溴或碘的鹵素。
3.權利要求2的方法，其特征在于Z1和Z2表示氫原子或烷基。
4.權利要求2的方法，其特征在于Z3、Z4和Z5都表示溴。
5.權利要求2的方法，其特征在于Z1和Z2每個都表示烷基，Z3、Z4和Z5每個都表示鹵素。
6.權利要求2的方法，其特征在于Z3、Z4和Z5中的兩個組成芴基環的一部分。
7.權利要求1的方法，其特征在于R13是PACLITAXEL的側鏈前體。
8.權利要求1的方法，其特征在于7位羥基的解保護通過β消除機理進行。
9.如下通式3d的衍生物 式中R1、R2、R4、R5、R6、R7、R10、R13和R14如權利要求1～7中任一項所定義。
全文摘要
本發明涉及用比Troc位阻大的取代烷氧羰基基團選擇性地保護漿果赤霉素衍生物7位羥基的方法,得到的中間體及其制備用作藥物的塔三烷方面的應用。
文檔編號C07F7/18GK1356325SQ01140998
公開日2002年7月3日 申請日期1996年12月27日 優先權日1995年12月27日
發明者L·查恩泰勞普, B·查維尤, C·科賓, R·德哈爾, S·利古恩, A·拉米, A·萊茲, J·P·羅賓 申請人:藥學工程研究協會