具有抗肺動脈高壓作用的胺衍生物及其在醫藥學中的應用的制作方法

專利名稱：具有抗肺動脈高壓作用的胺衍生物及其在醫藥學中的應用的制作方法
技術領域：
本發明涉及具有預防或治療肺動脈高壓的胺衍生物、其立體異構體、其藥用鹽，其制備方法及其在預防或治療由缺氧、慢性支氣管炎、阻塞性肺氣腫、支氣管擴張、支氣管哮喘、肺結核、塵肺、肺纖維化、多發性肺小動脈栓塞及肺小動脈炎所致的肺動脈高壓或原因不明的原發性肺動脈高壓中的應用。
肺動脈高壓是嚴重危害人類健康的重大疾病，隨著病情的不斷進展，肺動脈高壓可導致肺、心功能不全以及其它器官損害，最終出現呼吸和右心衰竭。肺動脈高壓可顯著降低病人的勞動能力，其致殘率很高，給家庭和社會帶來沉重的經濟負擔。
在現代醫學領域里，肺動脈高壓還是一個未能完全解決的問題。肺動脈高壓對患者的影響以及肺動脈高壓所表現出的臨床癥狀，多為非特異性的，因而不能引起足夠的重視。人們對于肺動脈高壓的發生發展過程及其基本機制，缺乏完善的理解。肺動脈高壓的發病機理復雜，目前尚未完全闡明，已有的病理機制包括(1)左心房血液引流不暢，使靜脈壓升高而導致肺動脈壓被動性升高；(2)伴有或不伴有酸中毒的肺泡性缺氧可引起肺血管收縮，導致肺動脈壓升高。持久的肺泡性缺氧，可致肺動脈壓力長期維持于高水平，成為肺動脈高壓。(3)肺血管床的橫斷面積縮小，肺血管阻力增大，導致肺動脈高壓。臨床上治療肺動脈高壓的藥物包括強心藥如地高辛、利尿劑如雙氫克尿塞、α受體阻斷劑酚妥拉明、鈣拮抗劑、前列環素、NO供體硝普鈉、腺苷以及抗凝劑華法林等。這些治療藥物均存在不同程度的缺陷，如有的毒性大；有的全身性不良反應多；有的無確切的臨床療效等。總之，尚未有理想的具有確切療效的公認治療肺動脈高壓的藥物。因此，研究和開發抗肺動脈高壓的新型藥物具有十分重要的意義。
本申請的通式Ia胺衍生物及通式I胺衍生物在預防或治療肺動脈高壓方面的用途尚未見報道。
本發明的目的在于尋找并開發新的預防或治療肺動脈高壓的藥物，尤其是預防或治療由缺氧、慢性支氣管炎、阻塞性肺氣腫、支氣管擴張、支氣管哮喘、肺結核、塵肺、肺纖維化、多發性肺小動脈栓塞及肺小動脈炎所致的肺動脈高壓或原因不明的原發性肺動脈高壓。
本發明人經廣泛深入研究，現已發現具有優良鉀道調節作用的式Ia或式I所示的胺衍生物，該類化合物可用于預防或治療肺動脈高壓。研究表明，式Ia或式I所示的氨衍生物具有抗肺動脈高壓的作用。進一步的合成與研究表明，本發明所包括的衍生物與適當的無機酸或有機酸形成的藥用鹽同樣具有抗肺動脈高壓的作用。本發明基于上述發現得以完成。
本發明第一方面涉及通式I所示的胺衍生物、其異構體、消旋體或光學異構體、其藥用酸加成鹽、其酰胺或其酯在制備可用于預防或治療肺動脈高壓的藥物中用途， 其中R1、R2、R3分別代表氫原子、C1-20的飽和或不飽和的直鏈或支鏈脂肪烴、C3-20的環烷烴基、取代C3-20環烷烴基、C5-20的芳香烴基、取代C5-20芳香烴基、C5-20雜環烴基、取代C5-20雜環烴基、α-羥基C2-20烷基、α-C1 -10烷羰氧C1-10烷基、C6-14α-芳羰氧基C1-10烷基、α-取代C6-14芳羰氧基C1-10烷基、α-C1-10烷氧基C1-10烷基、α-取代C5-10芳氧基C1-10烷基、α-氨基C1-20烷基、α-C1-10烷胺基C1-10烷基、α-C5-14芳胺基C1-10烷基、α-取代C5-14芳胺基C1-10烷基、α-C1-10烷酰胺基C1-10烷基、α-C6-14芳酰胺基C1-10烷基、α-取代C6-14芳酰胺基C1-10烷基；R4代表氫原子、C1-20的飽和脂肪烷基、C5-20芳香烴基、取代C5-20芳香烴基、C3-20雜環烴基、取代C3-20雜環烴基、C3-20雜環基、取代C3-20雜環基、C1-20直鏈脂肪酰基、C4-20支鏈脂肪酰基、或與R1、R2、R3形成的C3-20環烴基、C3-20雜環基，其中所述雜環指含1-3個選自N、O或S雜原子的單或稠合雜環，每個帶有取代基的基團的取代基選自鹵素，羥基，氰基，硝基，C1-6烷基，C1-6烷氧基，C1-6烷硫基，一、二或三鹵代C1-6烷基，氨基，C1-10烴胺基，C1-10烴酰氧基，C6-10芳酰氧基或C1-10酰胺基。
本發明第二方面涉及用于預防或治療肺動脈高壓的通式Ia所示的胺衍生物、其異構體、消旋體或光學異構體、藥用酸加成鹽，其酰胺或其酯， 其中(1).當R’1為異丙基，R’2、R’3為甲基時，R’4可為異丙基、正丁基、異丁基、特丁基、環丙甲基、二甲胺基乙基、烯丙基、二異丙胺基乙基；或(2).當R’1、R’2為甲基，R’3-C-NH-R’4可為下式所示的胺衍生物、其 異構體、消旋體或光學異構體，其中R與R’為C1-5烴基，n為1-8的整數；或(3).當R’1為苯基、R’2為甲基時，R’3可為甲基、乙基、異丙基、R’4可為丙基、甲氧羰甲基；或(4).當R’1為(CH3)2C(NH2)-，R’2、R’3均為CH3-時，R’4為(CH3)2CH-；或當R’1為(CH3)2C(OH)-，R’2、R’3均為CH3-時，R’4為(CH3)2CH-或者(CH3)2CH(CH3)-；或當R’1為 R’2、R’3均為CH3-或者R’2與R’3一起為-(CH2)4-或-(CH2)5-時，R’4為(CH3)2CH-；或當R’1為(CH3)2C(ONO2)-，R’2、R’3均為CH3-時，R’4為(CH3)2CH-；或當R’1為 R’2、R’3均為CH3-或者R’2與R’3一起為-(CH2)4-或-(CH2)5-時，R’4為(CH3)2CH-；或當R’1為 R’2、R’3均為CH3-時，R’4為(CH3)2CH-或者(CH3)2CH(CH3)-；或當R’1為 R’2、R’3為-(CH2)5-時，R’4為(CH3)2CCH(CH3)-；或(5).當R’1為環已基，R’2、R’3均為CH3-時，R’4為 或 或當R’1為環戊基，R’2和R’3為-CH2-CH2-時，R’4為 或 或當R’1為(CH3)2CH-，R’2、R’3均為CH3-時，R’4為 或(6).當R’1為(CH3)2CH-，R’2、R’3均為CH3-時，R’4為Val-，Trp-，Ile-，Leu-，Phe-，O2N-Arg-，Pro-，Leu-Val-，Trp-Trp-Trp-，(CH3)2CH-SO2-，或者R’4為如下基團之一 或 或當R’1為環丙基，R’2和R’3為-CH2-CH2-時，R’4為Val-；或當R’1為環已基，R’2和R’3為CH3-時，R’4為Pro-；或當R’1為環已基，R’2和R’3為-CH2-CH2-時，R’4為Pro-或者 本發明再一方面涉及用于預防或治療肺動脈高壓的通式I所示的胺生物、其異構體、消旋體或光學異構體、其藥用酸加成鹽，其酰胺或其酯 其中R1、R2、R3分別代表氫原子、C1-20的飽和或不飽和的直鏈或支鏈脂肪烴、C3-20的環烷烴基、取代C3-20環烷烴基、C5-20的芳香烴基、取代C5-20芳香烴基、C5-20雜環烴基、取代C5-20雜環烴基、α-羥基C2-20烷基、α-C1 -10烷羰氧C1-10烷基、C6-14α-芳羰氧基C1-10烷基、α-取代C6-14芳羰氧基C1-10烷基、α-C1-10烷氧基C1-10烷基、α-取代C5-10芳氧基C1-10烷基、α-氨基C1-20烷基、α-C1-10烷胺基C1-10烷基、α-C5-14芳胺基C1-10烷基、α-取代C5-14芳胺基C1-10烷基、α-C1-10烷酰胺基C1-10烷基、α-C6-14芳酰胺基C1-10烷基、α-取代C6-14芳酰胺基C1-10烷基；R4代表氫原子、C1-20的飽和脂肪烷基、C5-20芳香烴基、取代C5-20芳香烴基、C3-20雜環烴基、取代C3-20雜環烴基、C3-20雜環基、取代C3-20雜環基、C1-20直鏈脂肪酰基、C4-20支鏈脂肪酰基、或與R1、R2、R3形成的C3-20環烴基、C3-20雜環基，其中所述雜環指含1-3個選自N、O或S雜原子的單或稠合雜環，每個帶有取代基的基團的取代基選自鹵素，羥基，氰基，硝基，C1-6烷基，C1-6烷氧基，C1-6烷硫基，一、二或三鹵代C1-6烷基，氨基，C1-10烴胺基，C1-10烴酰氧基，C6-10芳酰氧基或C1-10酰胺基。
本發明再一方面涉及藥物組合物，其含有至少一種式Ia或式I胺衍生物、其異構體、消旋體或光學異構體、其藥用酸加成鹽，及藥用載體或賦形劑。
本發明還涉及預防或治療肺動脈高壓的方法，其包括對患有肺動脈高壓的患者給予治療有效量的式I或式Ia胺衍生物、其異構體、消旋體或光學異構體、其藥用酸加成鹽。
本發明還涉及制備上述式Ia合物的方法，系將伯胺R1’R2’R3’CNH2與R4’X于有機溶劑中，經加熱到50-300℃和/或加壓到0.1-20MPa進行反應，其中R1’、R2’、R3’和R4’同如上所定義，X為易離去基團如鹵素、磺酰氧基；所述反應在有催化劑作用下進行，所述的催化劑是去酸劑和/或相轉移催化劑，其中，所述的去酸劑為路易斯堿包括有機堿叔胺與無機堿，相轉移催化劑為乙二醇或聚乙二醇；所述的有機溶劑是甲苯、二甲苯、1，2-二氯乙烷、1，4-二氧六環、乙二醇二甲醚、N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷酮、N，N-二甲基苯胺或N，N-二乙基苯胺。而其中的伯胺R1’R2’R3’CNH2是將尿素同R1’R2’R3’C相應的烯或醇或二者的混合物在濃硫酸作用下在有機酸中加熱到20-200℃反應制備烴基脲；然后，水解制備的。其中，所述的有機酸選自乙酸、三氟乙酸或者甲磺酸。
本發明還提供了另一種制備所述式Ia類化合物的方法，系將伯胺R1’R2’R3’CNH2與R4’相應的醛或酮在催化劑及有/無有機溶劑存在下，經加熱到30-300℃和/或加壓到0.1-20MPa進行氫化反應，其中R1’、R2’、R3’和R4’如上所定義；反應在有催化劑下進行，其中，所述的催化劑為鈀-碳、雷尼鎳、氧化鉑或鎳-銅等，所述的有機溶劑為R4’相應的過量的醛或酮、甲苯、二甲苯、1，2-二氯乙烷、1，4-二氧六環、乙二醇二甲醚、甲醇或乙醇。
本發明還提供了一種新的制備式Ia胺化合物的方法，系將與R1’R2’CNHR4’相應的烯胺或Schiff堿或其硝酮衍生物與有機金屬試劑R3’M進行反應；或者，將與R1’R2’R3’CNHR4’相應的烯胺或Schiff堿經還原或催化氫化反應；其中，M選自Li、Na、Mg、Al和Zn組成的組。
上述方法還包括將所述的反應得到的產物經不對稱反應或進一步拆分制成同分異構體或光學異構體的步驟；還包括將反應所得到的產物與無機酸或有機酸反應，形成藥學上可接受的鹽，即無機酸如鹽酸、硫酸、磷酸和氫溴酸的鹽；或有機酸鹽，即乙酸、草酸、檸檬酸、葡萄糖酸、琥珀酸、酒石酸、對甲苯磺酸、甲磺酸、苯甲酸、乳酸和馬來酸的鹽。
根據本發明，本發明中所用術語“肺動脈高壓”是指疾病狀態下例如缺氧、慢性支氣管炎、阻塞性肺氣腫、支氣管擴張、支氣管哮喘、肺結核、塵肺、肺纖維化、多發性肺小動脈栓塞及肺小動脈炎所致的肺動脈高壓或原因不明的原發性肺動脈高壓。根據本發明通式I的化合物，R1優選為叔丁基，環已基，環戊基，環丁基，環丙基，異戊基，環丁基；或者，R1為α-取代的環已基、環戊基、環丁基、環丙基、異已基、異戊基、異丁基、異丙基，其中所述的取代基為氨基、羥基、C1-10烴胺基、C1-6烴氧基、C1-10烴酰氧基、C6-10芳酰氧基、C1-10酰胺基；R2或R3優選分別為氫原子、C1-12的鏈烴基或C3-8環烴基；R4優選為氫原子、C1-20的飽和脂肪烷基、C3-20環烷基、C1-10酰基、C1 -10烴胺基C1-10烷基、C1-20亞砜基、胺基酸殘基及其組合而成的小分子多肽片段、β-硝基乙烯基、β-氰基乙烯基、取代羰亞胺基、C3-20雜環基，以及C4-20雜環酰基。
根據本發明通式I的化合物，R2、R3更優選分別為甲基、乙基、丙基，或者，R2和R3為亞丙基、亞丁基、亞戊基和亞已基。
在本發明的一個優選實施方案中，所述的R1為異丙基，R2為甲基，R3為甲基。
根據本發明，式Ia化合物可選自下面化合物組成的組中的一種N-(1-甲基乙基)-2，3-二甲基-2-丁胺；N-丙基-2，3-二甲基-2-丁胺；N-(2-甲基丙基)-2，3-二甲基-2-丁胺；N-環丙甲基-2，3-二甲基-2-丁胺；N-丙烯基-2，3-二甲基-2-丁胺；N-(2-(二-(1-甲基乙基)胺基)乙基)-2，3-二甲基-2-丁胺；N-丁基-2，3-二甲基-2-丁胺；N-丙基-α-甲基苯丙胺；N-丙基-α，β-二甲基苯丙胺；N-(3-吡啶基)甲酰基-2，3-二甲基-2-丁胺；N-纈氨酰基-2，3-二甲基-2-丁胺；N-色氨酰基-2，3-二甲基-2-丁胺；N-(N-硝基)精氨酰基-2，3-二甲基-2-丁胺；
N-苯丙氨酰基-2，3-二甲基-2-丁胺；N-亮氨酰基-2，3-二甲基-2-丁胺；N-異亮氨酰基-2，3-二甲基-2-丁胺；N-對甲苯磺酰基-2，3-二甲基-2-丁胺；N-(1-甲基乙基)-2，3-二甲基-3-羥基-2-丁胺；N-肉桂酰基-N-(1-甲基乙基)-2，3-二甲基-2-丁胺；N-(1-甲基乙基)-N-(2，4，5-三氯苯氧乙酰基)-2，3-二甲基-2-丁胺。
根據本發明，式I化合物的酸加成鹽舉例講是無機酸鹽如鹽酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽、氫溴酸鹽；或有機酸鹽如乙酸鹽、草酸鹽、檸檬鹽、葡萄糖酸鹽、琥珀酸鹽、酒石酸鹽、對甲苯磺酸鹽、甲磺酸鹽、苯甲酸鹽、乳酸鹽和馬來酸鹽；如N-(1-甲基乙基)-2，3-二甲基-2-丁胺·對甲苯磺酸鹽。
本發明進一步涉及新的用于預防或治療肺動脈高壓的通式Ia所示的胺衍生物、其異構體、消旋體或光學異構體、藥用酸加成鹽，其中 (1).當R’1為異丙基，R’2、R’3為甲基時，R’4可為異丙基、正丁基、異丁基、特丁基、環丙甲基、二甲胺基乙基、烯丙基、二異丙胺基乙基；或(2).當R’1、R’2為甲基，R’3-C-NH-R’4可為下式所示的胺衍生物、其 異構體、消旋體或光學異構體，其中R與R’為C1-5烴基，n為1-8的整數；或
(3).當R’1為苯基、R’2為甲基時，R’3可為甲基、乙基、異丙基、R’4可為丙基、甲氧羰甲基；或(4).當R’1為(CH3)2C(NH2)-，R’2、R’3均為CH3-時，R’4為(CH3)2CH-；或當R’1為(CH3)2C(OH)-，R’2、R’3均為CH3-時，R’4為(CH3)2CH-或者(CH3)2CH(CH3)-；或當R’1為 R’2、R’3均為CH3-或者R’2與R’3一起為-(CH2)4-或-(CH2)5-時，R’4為(CH3)2CH-；或當R’1為(CH3)2C(ONO2)-，R’2、R’3均為CH3-時，R’4為(CH3)2CH-；或當R’1為 R’2、R’3均為CH3-或者R’2與R’3一起為-(CH2)4-或-(CH2)5-時，R’4為(CH3)2CH-；或當R’1為 R’2、R’3均為CH3-時，R’4為(CH3)2CH-或者(CH3)2CH(CH3)-；或當R’1為 R’2、R’3為-(CH2)5-時，R’4為(CH3)2CCH(CH3)-；或(5).當R’1為環已基，R’2、R’3均為CH3-時，R’4為 或 或當R’1為環戊基，R’2和R’3為-CH2-CH2-時，R’4為 或 或當R’1為(CH3)2CH-，R’2、R’3均為CH3-時，R’4為 或(6).當R’1為(CH3)2CH-，R’2、R’3均為CH3-時，R’4為Val-，Trp-，Ile-，Leu-，Phe-，O2N-Arg-，Pro-，Leu-Val-，Trp-Trp-Trp-，(CH3)2CH-SO2-，或者R’4為如下基團之一 或 或當R’1為環丙基，R’2和R’3為-CH2-CH2-時，R’4為Val-；或當R’1為環已基，R’2和R’3為CH3-時，R’4為Pro-；或當R’1為環已基，R’2和R’3為-CH2-CH2-時，R’4為Pro-或者 根據本發明，式Ia所示的胺衍生物、其異構體、消旋體或光學異構體、藥用酸加成鹽，也具有預防或治療腦和脊髓等神經缺血缺氧損傷的作用。其中式Ia胺衍生物的酸加成鹽舉例講是無機酸鹽如鹽酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽、氫溴酸鹽；或有機酸鹽如乙酸鹽、草酸鹽、檸檬鹽、葡萄糖酸鹽、琥珀酸鹽、酒石酸鹽、對甲苯磺酸鹽、甲磺酸鹽、苯甲酸鹽、乳酸鹽、馬來酸鹽、煙酸鹽、肉桂酸鹽或3-羥基-3-甲基戊二酸鹽。優選式Ia胺衍生物的鹽酸鹽、馬來酸鹽、對甲苯磺酸鹽、肉桂酸鹽和3-羥基-3-甲基戊二酸鹽。
更具體講，本發明通式I衍生物中，R1、R2和R3可相同或不同，分別代表氫原子、C1-20的飽和或不飽和的直鏈或支鏈脂肪烴、C3-20的環烷烴基、取代C3-20環烷烴基、C5-20的芳香烴基、取代C5-20芳香烴基、C5-20雜環烴基、取代C5-20雜環烴基、α-羥基C2-20烷基、α-C1-10烷羰氧C1-10烷基、C6-14α-芳羰氧基C1-10烷基、α-取代C6-14芳羰氧基C1-10烷基、α-C1-10烷氧基C1-10烷基、α-取代C5-10芳氧基C1-10烷基、α-氨基C1-20烷基、α-C1 -10烷胺基C1-10烷基、α-C5-14芳胺基C1-10烷基、α-取代C5-14芳胺基C1-10烷基、α-C1-10烷酰胺基C1-10烷基、α-C6-14芳酰胺基C1-10烷基、α-取代C6-14芳酰胺基C1-10烷基；R4代表氫原子、甲基、乙基、正丙基、異丙基、取代環丙基、取代環丁基、取代環戊基、取代環己基、環丙基甲基、環戊基甲基、環己基甲基、α-(1-丙烯基)、2-(1-丁烯基)、3-(1-丁烯基)、環戊烯基、環己烯基；或R4為芳基和取代芳基如苯基、取代苯基、鄰硝基苯基、間硝基苯基、對硝基苯基、2，4-二硝基苯基、3，5-二硝基苯基、2，6-二硝基苯基；雜環基及取代雜環基，如4-吡啶基、3-吡啶基、3-呋喃基、3-噻吩基、3-吡咯基、咪唑啉基、噻唑啉基、吡唑啉基、二氫咪啉基、二氫噻唑啉基、二氫吡唑啉基、N-取代酰基吡唑啉基、N-取代酰基二氫咪唑啉基、N-取代酰基二氫吡咯啉基、咪唑基、取代咪唑基；α-取代芳基烷基，如α-取代芳基甲基、α-取代芳基乙基、α-取代芳基丙基、α-取代芳基丁基和α-取代芳基環烷基；或R4為天然或非天然氨基酸殘基，取代天然或非天然氨基酸殘基，如Ala、Val、Leu、Ile、Phe、Asn、Glu、Trp、Tyr、Pro、Ser、Thr、Hyp、Cys、Met、Asp、Lys、Arg、His、O2N-Arg；天然或非天然氨基酸殘基，取代天然或非天然氨基酸殘基組成的小肽片段，如Cys-Cys、Arg-Arg-Arg，Pro-Arg-Asp等；或R4為芳酰基、取代芳酰基；砜基，如烷基亞砜基、芳基亞砜基、烷基砜基、芳基砜基；取代乙烯基，如α-芳胺基-β-硝基乙烯基、α-芳基-β-氰基乙烯基；取代羰亞胺基，如N-芳基-N’-硝基-羰亞胺基，N-芳基-N’-硝基甲基-羰亞胺基；或R4為烷酰基，如丙酰基、丁酰基和異丁酰基等；雜芳酰基，如4-吡啶甲酰基、3-吡咯乙酰基等，3-吲哚甲酰基，3-吲哚基乙酰基、2-吡咯甲酰基和3-吡咯乙酰基等；取代雜芳酰基，如4-(2-硝基)-吡啶甲酰基、3-(5-硝基)吡啶甲酰基、3-(5-羥基)吲哚甲酰基、3-(5-甲氧基)吲哚乙酰基等；烷胺基烷酰基，如二甲胺基乙酰基、二甲胺基丙酰基、二乙胺乙酰基、二乙胺基丙酰基、二-(異丙基)胺基丙酰基、2-托品基甲酰基、2-托品烯甲酰基、3-托品基甲酰基、3-托品烯基甲酰基、N-哌嗪甲酰基、N-苯甲酰基-1-哌嗪甲酰基、1-四氫吡咯基甲酰基、1-四氫吡咯基乙酰基、1-四氫吡咯基丙酰基、1-六氫吡啶基甲酰基、1-六氫吡啶基乙酰基、1-四氫吡啶基丙酰、1-六氫吡啶基甲酰基、1-六氫吡啶基乙酰基、1-六氫吡啶基丙酰基、二-(環己基)胺基乙酰基、二-(環己基)胺基丙酰基，1-(4-羥基)六氫吡啶基乙酰基、1-(4-羥基)六氫吡啶基丙酰基等；烷基亞砜基，如甲基亞砜基、乙基亞砜基、異丙基亞砜基和N-嗎啉乙基亞砜基等；烷基砜基，如甲基砜基、乙基砜基、異丙基砜和N-嗎啉乙基砜基等；芳基砜基，如苯基砜基-3-吡啶砜基、4-吡啶基乙基砜基、和對甲苯基砜基等；α-芳胺基-β-硝基乙烯基，如α-(3-吡啶基)胺基-β-硝基乙烯基、α-(4-吡啶基)胺基-β-硝基乙烯基、α-(6-氨基-3-吡啶基)胺基-β-硝基乙烯基、α-(3-硝基苯)胺基-β-硝基乙烯基，α-(3-羧基苯基)胺基-β-硝基乙烯基，α-(3-氰基苯基)胺基-β-硝基乙烯基，α-(3-三氟甲基苯基)胺基-β-硝基乙烯基、α-(3，4-二鹵代苯基)胺基-β-硝基乙烯基等；α-芳胺基-β-氰基乙烯基，如α-(3-吡啶基)胺基-β-氰基乙烯基、α-(4-吡啶基)胺基-β-氰基乙烯基，α-(6-氨基-3-吡啶基)胺基-β-氰基乙烯基、α-(3-硝基苯)胺基-β-氰基乙烯基、α-(3-羧基苯基)胺基-β-氰基乙烯基、α-(3-氰基苯基)胺基-β-氰基乙烯基、α-(3-三氟甲基苯基)胺基-β-氰基乙烯基和α-(3，4-二鹵代苯基)胺基-β-氰基乙烯基等；N-芳基-N’-硝基碳單亞胺基，如N-(3-吡啶基)-N’-硝基-N’-碳單亞胺基、N-(3-硝基苯基)-N’-硝基-N’-碳單亞胺基和N-(3-鹵代苯基)-N’-硝基-N’-碳單亞胺基等；N-芳基-N’-硝基甲基-碳單亞胺基，如N-(3-吡啶基)-N’-硝基甲基-N’-碳單亞胺基等；α-芳基-β-硝基乙烯基，如α-(3-吡啶基)-β-硝基乙烯基、α-(4-吡啶基)-β-硝基乙烯基、α-(6-氨基-3-吡啶基)-β-硝基乙烯基、α-(4-硝基吡啶基)-β-硝基乙烯基、α-(3-氰基苯基)-β-硝基乙烯基、α-(3，4-二鹵代苯基)-β-硝基乙烯基等，α-芳基-β-氰基乙烯基，如α-(3-吡啶基)-β-氰基乙烯基，α-(4-吡啶基)-β-氰基乙烯基、α-(6-氨基-3-吡啶基)-β-氰基乙烯基、α-(3-硝基吡啶基)-β-氰基乙烯基、α-(3-氰基苯基)-β-氰基乙烯基、α-(3-三氟甲基苯基)-β-氰基乙烯基，以及α-(3，4-二鹵代苯基)-β-氰基乙烯基等；或R4為α-雜環取代-β-硝基乙烯取代基和α-雜環取代-β-氰基乙烯取代基，其中，雜環取代基可以為2-位為2，2-二甲基、螺環戊基或螺環已基，3，4-位為脫氫或3-羥基，6-位為吸電取代基的4-苯并吡喃基、4-吡啶并吡喃基或4-噻吩并吡喃基；其中，6-吸電取代基可為硝基、氰基、三氟甲基、五氟乙基和磺酰基等。
當R1為烷基、環烷基、α-氨基烷基、α-氨基環烷基或芳基，R2和R3都為烷基或亞烷基，R4為烷基、烷胺基烷基、烯烴基、環烷基、烷酸酯或芳基烷基時，優選的式I化合物基見表1所示。
表1 優選式I化合物，其中式中各取代基為烴基化合物R1R2R3R4分子式1(CH3)2CH-CH3- CH3-(CH3)2CH-C9H21N2(CH3)2CH-CH3- CH3-H- C6H15N3(CH3)2CH-CH3- CH3-CH3- C7H17N4(CH3)2CH-CH3- CH3-C2H5-C8H19N5(CH3)2CH-CH3- CH3-CH3CH2CH2- C9H21N6(CH3)2CH-CH3- CH3-n-C4H9- C10H23N7(CH3)2CH-CH3- H- (CH3)2CH-C8H19N8H- H- H- (CH3)2CH-C4H11N9C2H5-CH3- CH3-(CH3)2CH-C6H15N10 C2H5-CH3- H- H- C4H11N11 C2H5-CH3- CH3-CH3- C6H15N12 C2H5-CH3- H- H- C4H11N13 (CH3)2CH-CH3- CH3-(CH3)2CHCH2-C10H23N14 (CH3)2CH-CH3- CH3-t-C4H9- C10H23N15 (CH3)2CH-CH3- CH3-C10H21N16 (CH3)2CH-CH3- CH3-(CH3)2NCH2CH2- C10H24N217 Ph- CH3- CH3-CH3OCOCH2- C12H17NO218 Ph- CH3- C2H5- (CH3)2NCH2CH2- C14H24N219 Ph- CH3- (CH3)2CH- (CH3)2CH-C14H23N20 Ph- CH3- CH3-CH3CH2CH2- C12H19N21 Ph- C2H5-CH3-CH3CH2CH2- C13H21N22 Ph-(CH3)2CH- CH3-CH3CH2CH2- C14H23N23 (CH3)2CH-CH3- CH3-CH3OCOCH2- C9H19NO224 (CH3)2CH-CH3- CH3-PhCH2- C13H21N25(CH3)2CH-CH3-CH3- CH2＝CH-CH2- C9H19N26(CH3)2CH-CH3-CH3- (CH3)2CH-CH2- C10H23N27(CH3)2CH-CH3-CH3- ((CH3)2CH)2NCH2CH2- C14H32N228 CH3-CH3- (CH3)2CH- C12H25N29 CH3-CH3- (CH3)2NCH2CH2- C13H28N230 CH3-CH3- PhCH2- C16H25N31 CH3-CH3- CH3OCOCH2- C12H23NO232 -CH2-CH2- (CH3)2CH-C9H17N33 -CH2-CH2- (CH3)2NCH2CH2-C10H20N234 -CH2-CH2- PhCH2-C13H17N35 -CH2-CH2- CH3OCOCH2- C9H15NO236 CH3- CH3-(CH3)2CH-C9H22N2當R1為烷基、環烷基、α-酰胺基烷基或α-酰胺基環烷基，R2和R3都為烷基和亞烷基，R4為氨基酸酰基、小分子肽鏈、磺酸酰基、芳酰基或雜環酰基時，優選的式I化合物見表2。
表2 優選式I胺衍生物，其中式中有酰基取代基化合物R1R2R3R4分子式37(CH3)2CH- CH3- CH3-Val-C11H24N2O38(CH3)2CH- CH3- CH3- C13H21N2OS39(CH3)2CH- CH3- CH3- C12H28N2O40(CH3)2CH- CH3- CH3-Trp-C17H25N3O41(CH3)2CH- CH3- CH3-Ile-C12H26N2O42(CH3)2CH- CH3- CH3-Leu-C12H26N2O43(CH3)2CH- CH3- CH3-Phe- C15H24N2O44(CH3)2CH- CH3- CH3-O2N-Arg- C12H26N6O345(CH3)2CH- CH3- CH3-Pro- C11H22N2O46(CH3)2CH- CH3- CH3-Leu-Val- C17H35N3O247-CH2-CH2-Val- C11H20N2O48(CH3)2CH- CH3- CH3-Trp-Trp-Trp- C39H45N7O349 CH3- CH3- Pro- C14H26N2O50 -CH2-CH2-Pro- C14H24N2O51(CH3)2CH- CH3- CH3- (CH3)2CHSO2-C9H21N2OS52(CH3)2CH- CH3- CH3-C13H18ClNO53(CH3)2CH- CH3- CH3-C12H24N2O254(CH3)2CH- CH3- CH3- C12H19NOS55(CH3)2CH- CH3- CH3- C16H22N2O56 -CH2-CH2- C15H20N2O57 CH3- CH3(CH3)2CH- C16H26ClN2OR2、R3和R4都為烷基或亞烷基取代，R1為α-羥基烷基、α-羥基環烷基或其相應的硝酸酯取代時，優選的取代基為醇或其酯的式I化合物見表3。
表3 取代基中有醇或其酯的式I化合物化合物 R1R2R3R4分子式58CH3- CH3-(CH3)2CH- C9H21NO59CH3- CH3- C12H27NO60 CH3-CH3-(CH3)2CH-C12H25NO61 -(CH2)5-(CH3)2CH-C15H29NO62 CH3-CH3-(CH3)2CH-C11H23NO63-(CH2)4- (CH3)2CH-C13H25NO64 CH3-CH3- (CH3)2CH-C9H20N2O365 CH3-CH3- (CH3)2CH-C12H24N2O366CH3-CH3- (CH3)2CH-C11H22N2O367 -(CH2)5-(CH3)2CH-C15H28N2O368 -(CH2)4-(CH3)2CH-C13H24N2O369 CH3-CH3- (CH3)2CH-C15H24N2O270 CH3-CH3- C18H30N2O271 -(CH2)5-C24H38N2O2當R1、R2和R3都為烷基或環烷基，R4為咪唑啉、噻唑啉或取代咪唑啉時，R4為雜環基的式I化合物見表4。
表4 R4為雜環取代基的式I化合物化合物R1R2R3R4分子式72 (CH3)2CH- CH3- CH3-C9H19N373 (CH3)2CH- CH3- CH3-C9H18N2O74(CH3)2CH- CH3- CH3- C9H18N2S75 CH3- CH3- C12H23N376CH3- CH3- C11H21N377 CH3- CH3- C12H22N2S78CH3- CH3- C11H20N2S79 CH3- CH3- C12H22N2O80CH3- CH3- C11H20N2O81 (CH3)2CH- CH3- CH3- C15H22N4O82 (CH3)2CH- CH3- CH3- C21H30N4O283 (CH3)2CH- CH3- CH3-C12H25N384 (CH3)2CH- CH3- CH3-C10H21N3進一步，R4還可與R1、R2和R3構成環狀化合物，諸如表1、表2和表3中化合物的相應環狀類似物。如2，2，3，5-四甲基四氫吡咯、2，2，3，6-四甲基哌啶和2，2，3，7-四甲基氮雜環庚烷等。
進一步，式Ia化合物還可與C1-10有機酸生成酰胺或酯等衍生物，優選的酸為煙酸、肉桂酸、馬來酸、2，4，5-三氯苯氧乙酸和3-羥基-3-甲基戊二酸。
根據本發明，式Ia化合物的制備方法1的通用條件一般為將合適的伯胺(R1’)(R2’)(R3’)CNH2同R4’X在無溶劑或于在含碳氫有機溶劑，或芳香有機溶劑或醇類溶劑，如環已烷、戊烷、己烷、庚烷、辛烷、壬烷、癸烷、十二烷等，苯、甲苯、二甲苯、硝基苯以及乙二醇、丙二醇、丙三醇等，有機溶劑中，在無催化劑或有催化劑包括各種有機堿或無機堿以及有機醇類，如KOH、NaOH、吡啶、乙二醇、丙二醇、丙三醇、低聚的乙二醇等作用下，經過加熱和或加壓進行加熱溫度范圍為50～400℃，優選的范圍是110℃～250℃。反應在高壓釜中進行，壓力隨加入溶劑的種類以及加熱溫度而定，或者充入惰性氣體，如N2、He、Ar氣等氣體，反應過程中壓力一般在0.1～20MPa，優選的壓力范圍是0.5～15MPa。目標化合物的純化方法可按一般的重結晶法，或者色譜法分離。如需要，可將通式Ia化合物與無機酸或有機酸反應形成適宜的藥用鹽。
根據本發明，式Ia化合物的制備方法2的一般條件是，將伯胺R1’R2’R3’CNH2與R4’相應的醛或酮在催化劑及有/無有機溶劑存在下，經加熱到30-300℃和/或加壓到0.1-20MPa進行氫化反應，其中R1’、R2’、R3’和R4’如上所定義；反應在有催化劑下進行，其中，所述的催化劑為鈀-碳、雷尼鎳、氧化鉑和鎳-銅，所述的有機溶劑為與R4’相應的過量的醛或酮、甲苯、二甲苯、1，2-二氯乙烷、1，4-二氧六環、乙二醇二甲醚、甲醇和乙醇。
在上述方法中伯胺的制備方法是將尿素同R1’R2’R3’C相應的烯或醇或二者的混合物在濃硫酸作用下在有機酸中加熱到20-200℃反應形成烴基脲R1’R2’R3’CNHCONH2；然后，水解該烴基脲制備的。其中，所述的有機酸選自乙酸、三氟乙酸或者甲磺酸。
在上述方法中，當通式I所代表的化合物為烷仲胺，仲酰胺，以及仲磺酰胺時，可按本領域已知的方法制備，參見M.S.Dunn，B.M.Smart.，Org.Synth.，Coll.Vol.IV，55(1963)；Houben-Weyl.，XI/2，482；J.B.Hendrickson，R.Bergeron，Tetrahedron lett，1973，3839；也可按本領域已知的先形成亞胺或Schiff堿，再經還原或催化氫化方法，制備仲胺化合物，參見D.M.Balcom，C.R.Noller，Org.Synth.，Coll Vol.IV，603(1963)；Cesare Ferri，“Reaktionen der organischen Synthese”，Stuttgart，1978，p85。仲胺化合物的制備尚有特殊的方法，如將Schiff堿或亞胺經Grignard加成反應，制備取代的仲胺，參見Klusener P.A.A，Tipl and Brandsma，Tetrahedron 1991，2041；Klusener P.A.A，J.Chem.Soc.，Chem.Commun，1985，1677。
當通式I所代表的仲胺化合物，系指α-羥基或α-氨基取代，或其取代的衍生物時，可以用環氧化合物或環丙亞胺(Aziridine)衍生物為原料，同全胺經親核開環反應制備，參見O.C.Dermer，G.E.Ham，Ethylenimine and other Aziridines，Academic Press，New York，1969；L.B.Clapp，J.Amer.Chem.Soc 70，184(1948).
當通式I所代表的化合物中，R4代表各種胺基酸殘基或其組合而成的小分子多肽片段時，可按本領域所熟知的保護-縮合-脫保護或其循環法制備，參見Ming Zhao，Chinese J.Med.Chem.，1995；5(2)91，GuMingdi，Peng Shipi，Yu Xuemin，J.Chin.Pharm.Sci.，1993；2(2)102.
當通式I所代表的化合物中R4＝H時，即為伯胺原料，其制備方法通常為先經Ritter反應合成相應的酰胺，然后水解得。F.M.Furan和N.J.Somerville從相應的醇制備特戊基脲繼而合成特戊胺的方法(US1972，3673249)。本發明進而提供了一種制備伯胺原料的方法，即，先將尿素同R1R2R3C相應的烯或醇或二者的混合物在濃硫酸作用下在有機酸中加熱到20-200℃反應制備烴基脲R1R2R3CNHCONH2；其中，所述的有機酸選自乙酸、三氟乙酸或者甲磺酸等。然后，經酸或堿或其它催化劑催化下水解制得相應的伯胺。
根據本發明，式I或式Ia化合物可以立體異構體形式存在。式(I)化合物中存在的不對稱中心可具有S構型或R構型。本發明包括所有可能的立體異構體如對映體或非對映體，以及兩種或多種立體異構體的混合物，例如對映體和/或非對映體的任何所需比例的混合物。因此，本發明涉及對映體，例如以對映體純形式存在的左旋-和右旋-對映體，和不同比例存在的兩種對映體的混合物或外消旋物。如果存在順/反異構體，本發明涉及順式形式和反式形式以及這些形式的混合物。如果需要，單一立體異構體的制備可根據常規方法拆分混合物，或通過例如立體選擇合成制備。如果存在機動的氫原子，本發明也涉及式I化合物的互變異構形式。
根據本發明，式I化合物及其立體異構體在預防或治療肺動脈高壓中顯示優良效果。因此可作為預防或治療原發性肺動脈高壓或由于缺氧、慢性支氣管炎、支氣管哮喘等導致的肺動脈高壓的藥物用于動物，優選用于哺乳動物，特別是人。
本發明因此還涉及含有作為活性成份的有效劑量的至少一種式I或式Ia化合物，或其藥用鹽和/或其立體異構體以及常規藥物賦形劑或輔劑的藥物組合物。通常本發明藥物組合物含有0.1-90重量％的式I或式Ia化合物和/或其生理上可接受的鹽。藥物組合物可根據本領域已知的方法制備。用于此目的時，如果需要，可將式I或式Ia化合物和/或立體異構體與一種或多種固體或液體藥物賦形劑和/或輔劑結合，制成可作為人用的適當的施用形式或劑量形式。
本發明的式I或式Ia化合物或含有它的藥物組合物可以單位劑量形式給藥，給藥途徑可為腸道或非腸道，如口服、肌肉、皮下、鼻腔、口腔粘膜、皮膚、腹膜或直腸等。給藥劑型例如片劑、膠囊、滴丸、氣霧劑、丸劑、粉劑、溶液劑、混懸劑、乳劑、顆粒劑、脂質體、透皮劑、口含片、栓劑、凍干粉針劑等。可以是普通制劑、緩釋制劑、控釋制劑及各種微粒給藥系統。為了將單位給藥劑型制成片劑，可以廣泛使用本領域公知的各種載體。關于載體的例子是，例如稀釋劑與吸收劑，如淀粉、糊精、硫酸鈣、乳糖、甘露醇、蔗糖、氯化鈉、葡萄糖、尿素、碳酸鈣、白陶土、微晶纖維素、硅酸鋁等；濕潤劑與粘合劑，如水、甘油、聚乙二醇、乙醇、丙醇、淀粉漿、糊精、糖漿、蜂蜜、葡萄糖溶液、阿拉伯膠漿、明膠漿、羧甲基纖維素鈉、紫膠、甲基纖維素、磷酸鉀、聚乙烯吡咯烷酮等；崩解劑，例如干燥淀粉、海藻酸鹽、瓊脂粉、褐藻淀粉、碳酸氫鈉與枸櫞酸、碳酸鈣、聚氧乙烯山梨糖醇脂肪酸酯、十二烷基磺酸鈉、甲基纖維素、乙基纖維素等；崩解抑制劑，例如蔗糖、三硬脂酸甘油酯、可可脂、氫化油等；吸收促進劑，例如季銨鹽、十二烷基硫酸鈉等；潤滑劑，例如滑石粉、二氧化硅、玉米淀粉、硬脂酸鹽、硼酸、液體石蠟、聚乙二醇等。還可以將片劑進一步制成包衣片，例如糖包衣片、薄膜包衣片、腸溶包衣片，或雙層片和多層片。為了將給藥單元制成丸劑，可以廣泛使用本領域公知的各種載體。關于載體的例子是，例如稀釋劑與吸收劑，如葡萄糖、乳糖、淀粉、可可脂、氫化植物油、聚乙烯吡咯烷酮、Gelucire、高嶺土、滑石粉等；粘合劑如阿拉伯膠、黃蓍膠、明膠、乙醇、蜂蜜、液糖、米糊或面糊等；崩解劑，如瓊脂粉、干燥淀粉、海藻酸鹽、十二烷基磺酸鈉、甲基纖維素、乙基纖維素等。為了將給藥單元制成栓劑，可以廣泛使用本領域公知的各種載體。關于載體的例子是，例如聚乙二醇、卵磷脂、可可脂、高級醇、高級醇的酯、明膠、半合成甘油酯等。為了將給藥單元制成膠囊，將有效成分式I或式Ia化合物或其立體異構體與上述的各種載體混合，并將由此得到的混合物置于硬的明明膠囊或軟膠囊中。也可將有效成分式I或式Ia化合物或其立體異構體制成微囊劑，混懸于水性介質中形成混懸劑，亦可裝入硬膠囊中或制成注射劑應用。為了將給藥單元制成注射用制劑，如溶液劑、乳劑、凍干粉針劑和混懸劑，可以使用本領域常用的所有稀釋劑，例如，水、乙醇、聚乙二醇、1，3-丙二醇、乙氧基化的異硬脂醇、多氧化的異硬脂醇、聚氧乙烯山梨醇脂肪酸酯等。另外，為了制備等滲注射液，可以向注射用制劑中添加適量的氯化鈉、葡萄糖或甘油，此外，還可以添加常規的助溶劑、緩沖劑、pH調節劑等。
此外，如需要，也可以向藥物制劑中添加著色劑、防腐劑、香料、矯味劑、甜味劑或其它材料。
本發明式I或式Ia化合物，或其藥用鹽或其立體異構體的給藥劑量取決于許多因素，例如所要預防或治療疾病的性質和嚴重程度，患者或動物的性別、年齡、體重及個體反應，所用的具體化合物，給藥途徑及給藥次數等。上述劑量可以單一劑量形式或分成幾個，例如二、三或四個劑量形式給藥。
實施例1 N-(1-甲基乙基)-2，3-二甲基-2-丁胺-化合物1的制備方法一取7.6g(0.0745mol)2，3-二甲基-2-丁醇，32.4ml冰醋酸，混勻。以冰鹽浴控制使內溫達-5至-8℃，分次加入末狀固體氰化鉀7.3g(0.49mol)，攪拌均勻。慢慢滴加濃硫酸32.4ml，控制內溫在20℃以下。加畢，于20℃以下攪拌3.5小時，再于室溫攪6小時，室溫放置過夜。倒入冰水之中。用20％氫氧化鈉溶液中和至pH10，用乙醚提取4次，用無水硫酸鈉干燥過夜。次日過濾，除去干燥劑，蒸除乙醚后，減壓基漏，收集bp105-108℃/5mmHg餾份，得8.8g，產率91.6％，為N-(2-(2，3-二甲基丁基)甲酰胺。
取7.7g(0.0597mol)N-(2-(2，3-二甲基丁基)甲酰胺，與乙醇6.2ml和水51.6ml混合后，加入濃鹽酸17.4ml，油浴中回流4小時。減壓基除乙醇后，冰浴冷卻下以40％氫氧化鈉溶液堿化至pH12以上。用乙醚提取，無水碳酸鉀干燥。回收乙醚后，常壓蒸餾，收集bp97-104℃漏分，共3.75g，產率62.2％。為2，3-二甲基-2-丁胺。
取10.6g(0.15mol)2，3-二甲基-2-丁胺，6.45g(0.0524mol)溴代異內烷，3.0ml乙二醇及22.0ml甲苯，置于50.0ml高壓釜中，于170℃攪拌中熱17小時。畢，分出有機層。用6N鹽酸60.0ml分四次提取有機層，合并酸液，用甲苯洗滌一次。冰浴下用4％氫氧化鈉堿化至pH為12-13，用乙醚提取，無水碳酸鉀干燥。回收乙醚后，蒸餾，收集bp135-145℃餾份，產率68.8％。鹽酸鹽mp228-230℃(i-PrOH∶Et2O)。元素分析C9H22ClN(％)計算值C60.14，H12.34，N7.79，Cl19.73，實測值C60.14，H12.48，N7.31，Cl19.67。1H-NMR(D2O，ppm)0.98(d，J＝6.75H，6H)，1.33(S，6H)，1.37(d，J＝6.46，6H)，2.10(m，1H)，3.70(m，1H)。MS(m/z)143(M+)，100(B)。
方法二取288ml冰乙酸和412g(6.86mol)尿素混合，加入288g(3.43mol)2，3-二甲基-2-丁烯，攪拌下滴加412ml濃硫酸和412ml冰乙酸混合液，控制內溫45-50℃，滴畢，再于50-55℃攪拌5h，放置過夜，繼續于50-55℃反應7h。倒至溶有1200g(30mol)氫氧化鈉的8000ml冰水中，濾集固體，5×200ml水洗滌，干燥，得404g白色固體，mp175-176℃，為N-(2，3-二甲基-2-丁基)尿素，產率81.8％。1H-NMR(CDCl3，ppm)0.88-0.91(d，6H，2×CH3)，1.26(s，6H，2×CH3)，2.20-2.26(m，1H，CH)，4.45(br，2H)，4.65(br，1H).MS(m/z)145.0 144.0(M+)143.0，129.1，101.0，86.1，69.1，58.0(B)。元素分析C7H16N2O(％)理論值C 58.30，H11.18，N 19.42；實測值C 58.70，H 11.54，N 19.25。
取118g(2.95mol)氫氧化鈉，溶于118ml水，稍冷，加入至196g(1.36mol)N-(2，3-二甲基-2-丁基)尿素和392ml乙二醇或三乙醇胺中，于120℃油浴中反應8h，常壓蒸餾，收集95-102℃餾份，加入75g無水碳酸鉀、40g氫氧化鈉，再蒸餾，收集99-101℃餾份，得88.5g無色液體，為2，3-二甲基-2-丁胺，產率64.3％。1H-NMR(CDCl3，ppm)0.88-0.91(d，6H，2×CH3)，1.04(s，6H，2×CH3)，1.53(m，1H，CH)。
取10.6g(0.15mol)2，3-二甲基-2-丁胺，6.45g(0.0524mol)溴代異內烷，3.0ml乙二醇及22.0ml甲苯，置于50.0ml高壓釜中，于170℃攪拌中熱17小時。畢，分出有機層。用6N鹽酸60.0ml分四次提取有機層，合并酸液，用甲苯洗滌一次。冰浴下用4％氫氧化鈉堿化至pH為12-13，用乙醚提取，無水碳酸鉀干燥。回收乙醚后，蒸餾，收集bp135-145℃餾份，產率68.8％。鹽酸鹽mp228-230℃(i-PrOH∶Et2O)。元素分析C9H22ClN(％)計算值C 60.14，H 12.34，N 7.79，Cl 19.73，實測值C 60.14，H 12.48，N 7.31，Cl 19.67。1H-NMR(D2O，ppm)0.98(d，J＝6.75H，6H)，1.33(S，6H)，1.37(d，J＝6.46，6H)，2.10(m，1H)，3.70(m，1H)。MS(m/z)143(M+)，100(B)。
方法三取0.1mol由甲基異丙基酮和異丙胺脫水制成的烯胺，溶于20ml已烷中，通N2。于低溫下將該溶液滴入至含0.1mol甲基鋰溶液中，冰浴攪拌，反應畢，將內容物倒入0.5Kg冰水中，攪拌。水層用乙醚提取二次。濃縮有機層，加入3N鹽酸，使PH值低于1，反應10分鐘，用10％氫氧化鈉堿化至pH大于11。乙醚提取三次，用無水碳酸鉀干燥。過濾，減壓蒸餾，收集bp140-145℃餾分，產率80％。
實施例2 N-丙基-2，3-二甲基-2-丁胺-化合物5的制備取丙清8.25g(0.15mol)溶于冰醋液25ml之中，于內溫38℃左右慢慢滴加濃硫酸15g，再滴加2，3-二甲基-2-丁醇5.2g(0.051mol)，內溫不超過40℃，定溫攪拌過程。倒入至冰水中，用40％氧化鈉堿化，用乙醚提取。合并醚層，用水洗滌一次，用無水硫酸鎂干燥。回收乙醚后得淺黃色液體6.2g，溶于無水乙醚80ml中。將該溶液滴加至含氫化鋁鋰3.04g(0.08mol)的無水乙醚80ml之中，再回流10小時。冰鹽冷卻下，慢慢滴加40％氫氧化鈉溶液適里，小心傾出上層醚液，用乙醚洗滌下層固體三次。合并醚液，用無水碳酸鉀干燥。過濾，外用冰浴冷卻，滴加無水乙醚氯化氫溶液至溶液為酸性。濾集固體，用異丙醇和丙酮重結晶三次，得白色片狀結晶3.33g，產率46.33％，mp183-185℃。元素分析C9H22NCl(％)計算值C 10.15，H 12.34，N 7.79；實測值C 60.20，H 13.80，N 7.85；MS(m/z)143(M+)；1H-NMR(D2O，ppm)0.98(d，6H)，1.00(t，3H)，1.24(s，6H)，1.63(m，2H)，2.05(m，1H)，2.98(t，2H).
實施例3 N-(1-甲基丙基)-2，3-二甲基-2-丁胺-化合物13的制備按實例例1的方法。取2，3-二甲基-2-丁胺與溴化異丁烷反應制備。產率17.1％，鹽酸鹽mp203-204℃。元素分析C10H14NCl(％)計算值C61.99，H1249，N7.23，實測值C62.17，H13.18，N7.27；MS(m/z)157(M+)；1H-NMR(D2O，ppm)0.90(d，6H)，1.18(t，3H)，1.26(d，3H)，1.28-3.43(m，19H).
實施例4 N-環丙甲基-2，3-二甲基-2-丁胺-化合物15的制備按實施例1的方法，取2，3-二甲基-2-丁胺與溴甲基環丙烷反應制備。產率27.6％，鹽酸鹽mp176-178℃。元素分析C10H11NCl(％)計算值C 62.64，H 11.57，N 7.31，實測值C 62.69，H 11.82，N 7.01.MS(m/z)155(M+)，112(M+-43)；1H-NMR(D2O，ppm)0.95(d，6H)，1.30-3.10(m，14H)，5.20(m，1H).
實施例5 N-烯丙基-2，3-二甲基-2-丁胺-化合物25的制備按實施例1的方法，取2，3-二甲基-2-丁胺與烯丙基溴反應制備。產率79.3％，鹽酸鹽mp173-175℃。元素分析C9H20NCl(％)計算值C 60.80，H 11.34，N 7.88，實測值C 60.68，H 11.43，N 7.94.MS(m/z)141(M+)；1H-NMR(D2O)0.98(d，6H)，1.31(s，6H)，2.20(m，1H)，3.66(d，2H)，5.87(m，2H)，5.95(m，1H).
實施例6 N-(2-(二(1-甲基乙基)胺基)乙基)-2，3-二甲基-2-丁胺-化合物27的制備按實施例1的方法，取2，3-二甲基-2-丁胺與2-(二異丙胺基)乙基溴反應制備。產率31.8％，鹽酸鹽mp176-178℃。元素分析C14H34N2Cl2(％)計算值C55.8，H 11.37，N 9.3，實測值C55.90，H11.68，N9.21。MS(m/z)229(M+)；1H-NMR(D2O，ppm)1.01(d，6H)，1.38(s，6H)，1.40(d，12H)，2.04(m，1H)，3.39-3.83(m，6H)。
實施例7 N-丁基-2，3-二甲基-2-丁胺-化合物6的制備按實施例2的方法，取正丁表腈與2，3-二甲基-2-丁醇進行Ritter反應，制備酰胺中間體，再以氫化鋰鋁還原制備，產率26.1％。鹽酸鹽mp140-142℃，元素分析C10H24NCl(％)計算值C 61.99，H 12.49，N 7.23，實測值C 62.06，H 12.73，N 5.90.MS(m/z)157(M+).1H-NMR(D2O，ppm)0.98(d，6H)，1.42(s，6H)，1.45(t，3H)，1.65(m，6H)，2.31(m，1H)。
實施例8 N-丙基-α-甲基苯丙胺-化合物21的制備按實施例2的方法，取丙腈與2-苯基-2-丁醇進行Ritter反應，先制備酰胺中間體，再以氫化鋰鋁還原。制備鹽酸鹽mp159-161℃。元素分析C13H22NCl(％)計算值C 68.55，H 9.73，N 6.15，實測值C 68.59，H 10.22，N 5.86。MS(m/z)192(M+)，133(M+-C3H8N)；1H-NMR(D2O，ppm)0.83(m，6H，2CH3)，1.58(m，2H，CH2)，1.78(s，3H，CH3)，2.05(m，1H，CH)，2.29(m，1H，CH)，2.53(m，1H，CH)，2.85(m，1H，CH)，7.54(m，5H，Ar-H)實施例9 N-丙基-α，β-二甲基苯丙胺-化合物19的制備按實施例2的方法，取丙腈與2-苯基-3-甲基-2-丁醇進行Ritter反應，先制備酰胺中間體，再以氫化鋰鋁還原。制備鹽酸鹽mp190-192℃。元素分析C14H24NCl(％)計算值C 69.54，H 10.0，N 5.79，實測值C 69.43，H 10.40，N 5.41.MS(m/z)206(M+)，147(M+-C3H8N)；1H-NMR(D2O，ppm)0.98(t，3H，CH3)，1.28(s，3H，CH3)，1.39(t，6H，2CH3)，1.63(m，2H，CH2)，3.98(m，1H，CH)，3.12-3.28(m，2H，CH2)，7.43(m，5H，Ar-H).
實施例10 N-(3-吡啶基)甲基-2，3-二甲基-2-丁胺-化合物39的制備按實施例2的方法，取3-吡啶甲腈與2，3-二甲基-2-丁烯進行Ritter反應。制備鹽酸鹽mp166-168℃，元素分析C12H19ClN2O(％)計算值C59.36，H7.89，N11.54，實測值C59.33，H7.98，N11.45。MS(m/z)207(M+)106(M+-C6H14N)；1H-NMR(D2O，ppm)0.92(d，6H，2CH3)，1.42(s，6H，2CH3)，2.42(m，1H，CH)，8.13(q，1H，ArH)，8.86(m，2H，ArH)，9.08(s，1H，ArH).
實施例11 N-纈氨酰基-2，3-二甲基-2-丁胺-化合物37的制備取Val-Boc 0.434g(2mmol)，溶于無水四氫呋喃2.5ml之中，加入2，3-二甲基-2-丁胺0.200g(2mmol)，HOBt 0.135g(1mmol)，攪拌至固體全溶。冰浴冷卻下，將DCC 0.412g(2mmol)溶于四氫呋喃2.5ml的溶液，滴加至上述攪拌液之中，攪拌4h，放置過夜。減壓抽干溶劑，得白色固體，加入乙酸乙酯7.5ml，使固體全溶。依次用飽和碳酸氫酸鈉水溶液和飽和檸檬的酸水溶液洗滌二次，再用水洗滌二次至中性，以無水硫酸鎂干燥。過濾，用乙酸乙酯7ml洗滌二次，滴加氯化氫的無水乙醚溶液約5ml，搖勻后于室溫放置5h，其間振搖4次。于室溫抽去乙醚，再以溫水浴減壓蒸除乙酸乙酯，得白色片狀固體，加入無水乙醚10ml，攪拌，再減壓蒸除乙醚，得0.324g固體。用無水乙醇和醋酸乙酯重結晶，干燥后得0.165g，產率35％，鹽酸鹽mp240-241℃。元素分析C11H25ClN2O(％)計算值C55.80，H10.64，N11.83，實例值C55.85，H10.71，N11.63；MS(m/z) 201.0(M+)。
實施例12 N-色氨酰基-2，3-二甲-2-丁胺-化合物40的制備按實施便11的方法，取Trp-Boc在DCC作用下與2，3-二甲基-2-丁胺縮合制備。產率17.5％，鹽酸鹽mp135-137℃(無水乙醇/乙酸乙酯/無水乙醚)。MS(m/z)287(M+)。
實施例13 N-(N-硝基精氨酰基)-2，3-二甲基-2-丁胺-化合物44的制備按實施例11的方法，取Arg(NO2)-Boc在DCC存在下，與2，3-二甲基-2-丁胺方合制備。產率36.4％，鹽酸鹽mp175(d)(無水乙醇/乙酸乙酯)；MS(m/z)302(M+)。
實施例14 N-苯丙氨酰基-2，3-二甲基-2-丁胺-化合物43的制備按實施例11的方法，取Pha-Boc在DCC存在下，與2，3-二甲基-2-丁胺縮合制備。產率21.8％，鹽酸鹽mp232-233℃(無水乙醇/無水乙醚)。MS(m/z)248(M+)。
實施例15 N-亮氨酰基-2，3-二甲基-2-丁胺-化合物42的制備按實施例11的方法，取Leu-Boc在DCC存在下，與2，3-二甲基-2-丁胺縮合制備。鹽酸鹽mp250-252℃(無水乙醇/無水乙醚)。MS(m/z)214(M+)。
實施例16 N-異亮氨酰基-2，3-二甲基-2-丁胺-化合物41的制備按實施例11的方法，取Ile-Boc在DCC存在下，與2，3-二甲基-2-丁胺縮合制備。鹽酸鹽mp246-248℃(無水乙醇/無水乙醚)。MS(m/z)214(M+)。
實施例17 N-對甲苯磺酰基-2，3-二甲基-2-丁胺-化合物38的制備將2，3-二甲基-2-丁胺1.2克(0.012mol)，及20ml吡啶置于反應瓶中，冰水浴冷卻下，慢慢滴加入1.9克(0.01mol)對甲苯磺酰氯的20ml吡啶溶液，反應液即成黃色，冰水攪拌3h，室溫攪拌反應1小時，加熱，于95～100℃外溫下攪拌反應2h，反應液仍為棕黃色透明狀，減壓蒸除溶劑，加入甲苯，減壓蒸干溶劑，加入適量水，能全部溶解，甲苯提取4次，用水反提苯液一次，無水MgSO4干燥苯液，過濾，蒸除溶劑，于異丙醇中重結晶，得無色柱狀結晶1.1克，mp80-89℃，再于異丙醇中重結晶，得白色結晶狀固體0.8克、mp88-89℃。元素分析C13H21NO2S(％)理論值C61.14，H8.29，N5.48，實驗值C61.11，H8.37，N5.55；MS(m/z)255(M+)，172(B)；1H-NMR(CDCl3，ppm)0.91(d，J＝6.8Hz，6H，2CH3)，1.17(S，6H，2CH3)，1.82(M，1H，CH)，2.47(S，3H，CH3)，7.32(d，J＝8.0，2H，2Ar-H)，7.82(d，J＝8.0，2H，2Ar-H’)。
實施例18 N-(1-甲基乙基)-2，3-二甲基-3-羥基-2-丁胺-化合物58的制備取2，3-二甲基-2，3-環氧乙烷41.8g(0.418mol)，2-丙胺20.0g(0.33mol)和甲苯50ml，置于高壓釜中，于170℃加熱攪拌48小時。冷至室溫后，打開釜。用6N鹽酸溶液100ml，分三次提取。合并酸液，用甲苯適量洗滌，再以40％氯氧化鈉堿化至pH為12。有油浮于液面。用乙醚150ml，分三次提取。合并醚液，用無水碳酸鉀干燥。過濾，回收乙醚至于。減壓蒸餾，收集bp60-65/10mm Hg餾分，得2-(N-2-甲基乙基)-3-羥基-2，3-二甲基丁胺。鹽酸鹽mp156-158℃(無水乙醇/無水乙醚)。元素分析C9H22ClNO(％)計算值C55.23，H11.33，N7.16，實測值C55.23，H11.65，N6.95；MS(m/z)160(M+)；1H-NMR(CDCl3，ppm)，1.33(s，6H，2CH3)，1.41(d，6H，2CH3)，1.42(s，6H，2CH3)，3.81(m，1H，CH)。
實施例19 N-(1-甲基乙基)-2，3-甲基-2-丁胺·對甲苯磺酸鹽的制備無水對甲苯磺酸取含結晶水的對甲苯磺酸，于110℃加熱熔化，同時將水蒸出，加熱至無水蒸出為止，于干燥器中冷卻放置備用。
取0.60g(3.5mmol)無水對甲苯磺酸，溶于盡量少的無水乙醇，在攪拌下滴入溶有0.55g(0.38mmol)N-(1-甲基乙基)-2，3-二甲基-2-丁胺的10mL無水乙醚溶液，滴畢，放置過夜；然后，蒸去溶劑，固體以無水乙醇充分洗滌，得無色固體1.07g，mp119-120℃。1H-NMR(D2O，ppm)0.96(d，6H，2CH3)，1.303(s，6H，2CH3)，1.36(d，6H，2CH3)，2.02-2.15(m，1H，CH)，2.401(s，3H，CH3)，3.62-3.73(m，1H，CH)，7.38(d，2H，2Ar-H)，7.70(d，2H，2Ar-H’)。
實施例20 N-(1-甲基乙基)-2，3-甲基-2-丁胺·鹽酸鹽的制備稱取N-(1-甲基乙基)-2，3-二甲基-2-丁胺100.0g，溶于200mL乙醇，冰水冷卻及搖動下加入100mL鹽酸，然后減壓蒸去溶劑至干，補加乙醇，再減壓蒸干，繼而以1∶1異丙醇-環已烷重結晶，得無色固體130.5g(95.5％)，mp228-230℃(i-PrOH∶Et2O)。元素分析C9H22ClN(％)計算值C60.14，H12.34，N7.79，Cl19.73，實測值C60.14，H12.48，N7.31，Cl19.67。1H-NMR(D2O，ppm)0.98(d，J＝6.75H，6H)，1.33(S，6H)，1.37(d，J＝6.46，6H)，2.10(m，1H)，3.70(m，1H)。MS(m/z)143(M+)，100(B)。
實施例21 N-(1-甲基乙基)-N-(2，4，5-三氯苯氧乙酰基)-2，3-二甲基-2-丁胺的制備2，4，5-三氯苯氧乙酰氯2，4，5-三氯苯氧乙酸51.3g與氯化亞砜18mL，攪拌回流反應2.5h，加入少量干燥苯，將回流裝置改為蒸餾裝置，減壓蒸除過量的氯化亞砜和苯，冷卻即析出固體，放置備用。
反應瓶中加入N-(1-甲基乙基)-2，3-甲基-2-丁胺·鹽酸鹽1.81g、三乙胺3.30g、催化量的4-二甲胺基吡啶與甲苯50mL，在攪拌下滴入溶有2，4，5-三氯苯氧乙酰氯5.50g的20mL甲苯溶液，滴畢，于80℃油浴中加熱攪拌反應14h，然后冷卻，過濾，甲苯洗滌固體，合并甲苯溶液，依次以水50mL、1N NaOH(50mL×2)、水50mL、1N HCl(50mL×2)與水50mL洗滌，無水硫酸鈉干燥，得棕色稠狀物，硅膠柱層析，得淺黃色半固體3.30g(86.8％)。1H-NMR(CDCl3，ppm)0.865(d，J＝6.75Hz，6H)，1.401(S，6H)，1.448(d，J＝6.75Hz，6H)，2.85(m，1H)，3.98(m，1H)，4.740(s，2H)，6.928(s，1H)，7.441(s，1H)。MS(m/z) EI+338/336(1∶1，(M-i-Pr)+)，298/296(M-thexyl)+/294，84(B，C6H12+.)；FAB+378.2/380.2(M+H)+/382.2，336.2/338.2(1∶1，(M-i-Pr)+)，296.1/298.1(B，M+H-C6H12)，100.1(thexylamine)+，85.1(C6H13+).下面的生物活性實驗用來進一步說明本發明。
生物效應實驗實施例1本發明式I代表性化合物1對內皮素-1引起SD大鼠肺動脈壓高壓的影響如表1所示，SD大鼠經肺動脈注入內皮素-11.5μg/kg可以誘發肺動脈高壓，給藥后5-30min，平均肺動脈壓(mPAP)顯著高于給藥前水平；與生理鹽水組比較，化合物10.5和1.0mg/kg對正常肺動脈壓無明顯影響(P＞0.05)。表明化合物1對正常肺動脈壓無影響。
表1.化合物1對正常肺動脈平均壓(mPAP)的影響藥物 n給藥前 給藥后不同時間(min)的mPAP(mmHg)(mg/kg) 5 10203060生理鹽水組 720.6±1.8 20.1±1.6 20.3±1.5 20.4±1.1 20.6±1.7 21.0±2.1內皮素-1組 13 21.4±2.6 26.2±3.9**26.1±4.2**25.8±4.3**24.8±3.6**22.0±2.5化合物1 0.5 720.9±1.1 20.7±1.2##20.6±2.2##19.9±1.6##20.3±1.1##20.9±1.1化合物1 1.0 820.0±2.4 20.0±2.9##20.4±2.4##20.0±1.8##20.4±2.6##19.6.±1.7#與生理鹽水組比較，**P＜0.01；與內皮素-1組比較，#P＜0.05，##P＜0.01.
如表2所示，SD大鼠經肺動脈先注入化合物10.5或1.0mg/kg，然后注入1.5μg/kg內皮素-1，觀察藥物對內皮素-1引起肺動脈高壓的預防作用。化合物10.5和1.0mg/kg可預防內皮素-1誘發的肺動脈高壓，在用化合物11.0mg/kg后5，10，15，30和60分鐘的mPAP均顯著低于內皮素-1組而接近于生理鹽水組的水平；化合物10.5mg/kg僅對7，8，9，15，25和35分鐘肺動脈壓增高有預防作用。提示化合物1具有顯著的抗內皮素-1引起的肺動脈高壓的作用。
表2.化合物1對內皮素-1(ET)引起肺動脈高壓的預防作用藥物 n給藥前 給藥后不同時間(min)的mPAP(mmHg)(mg/kg) 510203060生理鹽水組 7 20.6±1.8 20.1±1.6 20.3±1.5 20.4±1.1 20.6±1.721.0±2.1內皮素-1組 13 21.4±2.6 26.2±3.9**26.1±4.2**25.8±4.3**24.8±3.6**22.0±2.5化合物1 0.5+ET 7 18.0±2.6 20.8±5.3 20.1±4.2 20.1±4.3 19.5±3.319.3±2.3化合物1 1.0+ET 7 19.1±1.5 20.9±2.4##21.2±2.3##20.6±2.6##19.9±1.7##18.7±1.5##與生理鹽水組比較，**P＜0.01；與內皮素-1組比較，#P＜0.05，##P＜0.01.
如表3所示，SD大鼠經肺動脈先注入1.5μg/kg內皮素-1，然后注入化合物10.5或1.0mg/kg，觀察藥物對內皮素-1引起肺動脈高壓的治療作用。化合物10.5和1.0mg/kg對內皮素-1誘發的肺動脈高壓治療作用較差。
表3.化合物1對內皮素-1(ET)引起肺動脈高壓的治療作用藥物 n給藥前 給藥后不同時間(min)的mPAP(mmHg)(mg/kg)510 2030 60生理鹽水組 720.6±1.8 20.1±1.620.3±1.520.4±1.1 20.6±1.721.0±2.1內皮素-1組 13 21.4±2.6 26.2±3.9**26.1±4.2**25.8±4.3**24.8±3.6**22.0±2.5ET+化合物1 0.5 722.4±1.4 24.3±4.4*24.3±3.8*25.7±4.7*25.3±4.2*23.4±3.4ET+化合物1 1.0 722.0±2.1 23.4±2.7*22.1±2.021.7±1.5 22.3±1.822.3±1.2與生理鹽水組比較，*P＜0.05，**P＜0.01.
以上生物效應實驗實施例1提示經肺動脈注入內皮素-1可以誘發肺動脈高壓，化合物10.5和1.0mg/kg對正常肺動脈壓無明顯影響，但可預防內皮素-1誘發的肺動脈高壓，而對內皮素-1誘發的肺動脈高壓治療作用較差。
生物效應實驗實施例1的研究方法SD大鼠280-320g，♂。經20％烏拉坦腹腔內注射麻醉，經右側頸外靜脈插入充盈肝素溶液的微導管達肺動脈，接壓力換能器，以四道生理記錄儀記錄大鼠平均肺動脈壓(mPAP)，同時記錄心率，并通過股動脈記錄體循環壓，穩定30分鐘后測定記錄基礎血流動力學指標。經肺動脈注入化合物10.5和1.0mg/kg，觀察藥物對正常肺動脈平均壓(mPAP)影響；經肺動脈先注入化合物10.5或1.0mg/kg，然后注入1.5μg/kg內皮素-1，觀察藥物對內皮素-1引起肺動脈高壓的預防作用；經肺動脈先注入1.5μg/kg內皮素-1，然后注入化合物10.5和1.0mg/kg，觀察藥物對內皮素-1引起肺動脈高壓的治療作用。
實驗方法詳見參考文獻關戰軍等。慢性缺氧大鼠肺動脈高壓和右心肥大與多巴胺含量的關系。中華醫學雜志1990；70(10)582
生物效應實驗實施例2本發明式I代表性化合物1對內皮素-1引起的主動脈收縮作用的影響如圖1所示，在含鈣營養液中，化合物10.5-100μmol/L可部分對抗內皮素-1的縮血管作用，化合物1100μmol/L的最大舒張率為65.4±14.6％(n＝6)，其舒血管作用的EC50±L95為5.5±4.0μmol/L，b±Sb為0.29±0.05，r＝0.94(P＜0.05)。在無鈣營養液中，化合物10.5-100μmol/L對抗內皮素-1縮血管作用的效應較在含鈣營養液中明顯減弱，化合物1100μmol/L的最大舒張率僅為36.4±11.0％(n＝6)。提示化合物1對抗內皮素-1縮血管作用與其阻止細胞外鈣內流有關。
生物效應實驗實施例2的研究方法將雄性Wistar大鼠斷頭處死，迅速開胸取出胸主動脈降枝，置于冷的(4℃)血管營養液中，營養液的組成(mmol/L)NaCl 117，KCl 5，CaCl21.5，NaH2PO41.0，NaHCO325，MgSO4·7H2O 1.2，葡萄糖11.5，用雙蒸水配制，pH7.4。仔細剝去血管周圍脂肪組織，洗去血塊，剪成3mm長的血管環，懸掛于裝有10ml營養液的浴槽內，通以95％O2和CO25％混合氣，血管環一端固定，另一端連于張力換能器，通過自動平衡記錄儀記錄血管的張力變化。靜止張力0.5g，恒溫37℃。標本在一定張力下平衡45min(每10min換一次營養液)后開始給藥。先分別在含鈣和無鈣營養液(前者組成同上，后者將組成中的CaCl2換成5mmol/L EGTA)中以1nmol/L內皮素-1預收縮主動脈環，然后觀察化合物10.5～100μmol/L的舒血管作用。
實驗方法詳見參考文獻何華美，汪海，肖文彬。吡那地爾和硝苯地平對內皮素縮血管作用的影響。中國藥理學通報1997；13(6)502-505。
生物效應實驗實施例3 本發明式I代表性化合物1對慢性缺氧所致肺動脈高壓和右心室重構的影響如表4所示，慢性缺氧可使SD大鼠平均肺動脈壓(MPAP)顯著增高，右心室重量(RV)與左心室和室間隔重量之和(LV+S)之比顯著增大，與正常組相比，P＜0.01。表明慢性缺氧可使肺動脈壓增高，右心室發生重構。治療組大鼠每天缺氧前30分鐘，通過灌胃給予化合物10.75mg/kg或1.5mg/kg，可明顯抑制低氧所致的MPAP升高，使之維持在正常水平。但化合物1對RV/(LV+S)無明顯影響。
以上生物效應實驗實施例3提示性缺氧可使肺動脈壓增高，右心室發生重構。缺氧前30分鐘灌胃給予SD大鼠化合物10.75mg/kg或1.5mg/kg可明顯抑制低氧所致的MPAP升高，但對右心室重構無明顯影響。表4.化合物1對慢性缺氧引起肺動脈高壓的預防作用藥物(mg/kg)nMPAP(mmHg) RV/(LV+S)正常組 720.29±0.76 0.26±0.06慢性缺氧組 744.29±7.61**0.39±0.07**化合物1 0.75 920.24±2.40##0.37±0.07**化合物1 1.5720.57±1.90##0.38±0.07**與正常組比較，**P＜0.01；與慢性缺氧組比較，##P＜0.01.
生物效應實驗實施例3的研究方法雄性SD大鼠30只，購于校實驗動物中心，鼠齡2～3個月，體重200～220g，分籠飼養，自由飲水。隨機分為4組正常對照組7只；低氧模型組7只；0.75mg/kg治療組(低氧+化合物1)9只；1.5mg/kg治療組(低氧+化合物1)7只。治療組每天缺氧前30分鐘，通過灌胃給予化合物10.75mg/kg或1.5mg/kg。將低氧各組大鼠放置于常壓低氧艙內，低氧開始時，先向艙內注入氮氣，降低艙內氧氣濃度，用測氧儀及電磁閥反饋裝置，使艙內氧濃度穩定于10±0.5％，低氧艙有小孔與外界大氣相通，使艙內大氣壓與外界保持一致。艙內CO2和水蒸氣分別用鈉石灰及無水氯化鈣吸收。進行間斷缺氧，每天6小時，每周6天，第7天不缺氧，共4周。大鼠肺血流動力學檢測大鼠用20％的烏拉坦腹腔內麻醉。以微型導管經頸外靜脈插管至肺動脈，采用四道生理記錄儀(RM-6200C，成都儀器廠)記錄平均肺動脈壓(mPAP)及心率。心室重量測定經以上測定后立剖胸，取出大鼠心臟置于10％中性甲醛溶液中固定1周，剪去心房組織，分離右心室(RV)和左心室+室間隔(LV+S)，用濾紙吸干水分后分別稱RV和LV+S的重量，然后計算RV/(LV+S)反映右心室重量的變化，以確定有無右心室肥厚。
實驗方法詳見參考文獻關戰軍等。慢性缺氧大鼠肺動脈高壓和右心肥大與多巴胺含量的關系。中華醫學雜志1990；70(10)582。


圖1為化合物1對內皮素-1引起的大鼠離體主動脈血管的作用
權利要求
1.預防或治療由缺氧、慢性支氣管炎、阻塞性肺氣腫、支氣管擴張、支氣管哮喘、肺結核、塵肺、肺纖維化、多發性肺小動脈栓塞及肺小動脈炎所致的肺動脈高壓或原因不明的原發性肺動脈高壓的通式Ia所示的胺衍生物、其異構體、消旋體或光學異構體、藥用酸加成鹽、其酰胺或其酯， 其中(1).當R’1為異丙基，R’2、R’3為甲基時，R’4可為異丙基、正丁基、異丁基、特丁基、環丙甲基、二甲胺基乙基、烯丙基、二異丙胺基乙基；或(2).當R’1、R’2為甲基，R’3-C-NH-R’4可為下式所示的胺衍生物、其 異構體、消旋體或光學異構體，其中R與R’為C1-5烴基，n為1-8的整數；或(3).當R’1為苯基、R’2為甲基時，R’3可為甲基、乙基、異丙基、R’4可為丙基、甲氧羰甲基；或(4).當R’1為(CH3)2C(NH2)-，R’2、R’3均為CH3-時，R’4為(CH3)2CH-；或當R’1為(CH3)2C(OH)-，R’2、R’3均為CH3-時，R’4為(CH3)2CH-或者(CH3)2CH(CH3)-；或當R’1為 R’2、R’3均為CH3-或者R’2與R’3一起為-(CH2)4-或-(CH2)5-時，R’4為(CH3)2CH-；或當R’1為(CH3)2C(ONO2)-，R’2、R’3均為CH3-時，R’4為(CH3)2CH-；或當R’1為 R’2、R’3均為CH3-或者R’2與R’3一起為-(CH2)4-或-(CH2)5-時，R’4為(CH3)2CH-；或當R’1為 R’2、R’3均為CH3-時，R’4為(CH3)2CH-或者(CH3)2CH(CH3)-；或當R’1為 R’2、R’3為-(CH2)5-時，R’4為(CH3)2CCH(CH3)-；或(5).當R’1為環已基，R’2、R’3均為CH3-時，R’4為 或 或當R’1為環戊基，R’2和R’3為-CH2-CH2-時，R’4為 或 或當R’1為(CH3)2CH-，R’2、R’3均為CH3-時，R’4為 或(6).當R’1為(CH3)2CH-，R’2、R’3均為CH3-時，R’4為Val-，Trp-，Ile-，Leu-，Phe-，O2N-Arg-，Pro-，Leu-Val-，Trp-Trp-Trp-，(CH3)2CH-SO2-，或者R’4為如下基團之一 或 或當R’1為環丙基，R’2和R’3為-CH2-CH2-時，R’4為Val-；或當R’1為環已基，R’2和R’3為CH3-時，R’4為Pro-；或當R’1為環已基，R’2和R’3為-CH2-CH2-時，R’4為Pro-或者
2.權利要求1的胺衍生物，其中，所述化合物選自如下化合物組成的組中的一種N-(1-甲基乙基)-2，3-二甲基-2-丁胺；N-丙基-2，3-二甲基-2-丁胺；N-(2-甲基丙基)-2，3-二甲基-2-丁胺；N-環丙甲基-2，3-二甲基-2-丁胺；N-丙烯基-2，3-二甲基-2-丁胺；N-(2-(二-(1-甲基乙基)胺基)乙基)-2，3-二甲基-2-丁胺；N-丁基-2，3-二甲基-2-丁胺；N-丙基-α-甲基苯丙胺；N-丙基-α，β-二甲基苯丙胺；N-(3-吡啶基)甲酰基-2，3-二甲基-2-丁胺；N-纈氨酰基-2，3-二甲基-2-丁胺；N-色氨酰基-2，3-二甲基-2-丁胺；N-(N-硝基)精氨酰基-2，3-二甲基-2-丁胺；N-苯丙氨酰基-2，3-二甲基-2-丁胺；N-亮氨酰基-2，3-二甲基-2-丁胺；N-異亮氨酰基-2，3-二甲基-2-丁胺；N-對甲苯磺酰基-2，3-二甲基-2-丁胺；N-(1-甲基乙基)-2，3-二甲基-3-羥基-2-丁胺；N-肉桂酰基-N-(1-甲基乙基)-2，3-二甲基-2-丁胺；N-(1-甲基乙基)-N-(2，4，5-三氯苯氧乙酰基)-2，3-二甲基-2-丁胺。
3.權利要求1的胺衍生物，其中，所述的藥用酸加成的鹽選自鹽酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽、氫溴酸鹽；或者是乙酸鹽、草酸鹽、檸檬鹽、葡萄糖酸鹽、琥珀酸鹽、酒石酸鹽、對甲苯磺酸鹽、甲磺酸鹽、苯甲酸鹽、乳酸鹽或馬來酸鹽。
4.權利要求1的胺衍生物，其中，所述的化合物是N-(1-甲基乙基)-2，3-二甲基-2-丁胺·對甲苯磺酸鹽。
5.一種制備如權利要求1所定義的式Ia胺類化合物的方法，其包括將伯胺R1’R2’R3’CNH2與R4’X于有機溶劑中，經加熱到50-300℃和/或加壓到0.1-20MPa進行反應，其中R1’、R2’、R3’和R4’如權利要求1所述，X為易離去基團；其特征在于，所述的伯胺R1’R2’R3’CNH2是通過如下方法制備的首先，將尿素同R1’R2’R3’C相應的烯或醇或二者的混合物在濃硫酸作用下在有機酸中加熱到20-200℃反應制備式R1’R2’R3’CNHCONH2烴基脲；然后，水解該烴基脲制備相應的伯胺。其中，所述的有機酸選自乙酸、三氟乙酸或者甲磺酸。
6.權利要求5所述的方法，其中，所述的伯胺與R4’X反應在有催化劑作用下進行，所述的催化劑是去酸劑和/或相轉移催化劑。
7.權利要求6所述的方法，其中，所述的去酸劑為路易斯堿，相轉移催化劑為乙二醇或聚乙二醇。
8.權利要求5所述的方法，其中，所述的有機溶劑是甲苯、二甲苯、1，2-二氯乙烷、1，4-二氧六環、乙二醇二甲醚、N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷酮、N，N-二甲基苯胺或N，N-二乙基苯胺。
9.一種制備如權利要求1所述的Ia胺類化合物的方法，其包括將伯胺R1’R2’R3’CNH2與R4’相應的醛或酮在催化劑及有/無有機溶劑存在下，經加熱到30-300℃和/或加壓到0.1-20MPa進行氫化反應，其中R1’、R2’、R3’和R4’如權利要求1所述；其特征在于，所述的伯胺R1’R2’R3’CNH2的制備方法如權利要求2所述。
10.權利要求9所述的方法，其中，所述的催化劑為鈀-碳、雷尼鎳、氧化鉑或鎳-銅等。
11.權利要求9所述的方法，其中，所述的有機溶劑為相應的過量的醛或酮、甲苯、二甲苯、1，2-二氯乙烷、1，4-二氧六環、乙二醇二甲醚、甲醇或乙醇。
12.通式I所示的胺衍生物、其異構體、消旋體或光學異構體、其藥用酸加成鹽、其酰胺或其酯在制備可用于預防或治療由缺氧、慢性支氣管炎、阻塞性肺氣腫、支氣管擴張、支氣管哮喘、肺結核、塵肺、肺纖維化、多發性肺小動脈栓塞及肺小動脈炎所致的肺動脈高壓或原因不明的原發性肺動脈高壓的藥物中的應用， 其中R1、R2、R3分別代表氫原子、C1-20的飽和或不飽和的直鏈或支鏈脂肪烴、C3-20的環烷烴基、取代C3-20環烷烴基、C5-20的芳香烴基、取代C5-20芳香烴基、C5-20雜環烴基、取代C5-20雜環烴基、α-羥基C2-20烷基、α-C1 -10烷羰氧C1-10烷基、C6-14α-芳羰氧基C1-10烷基、α-取代C6-14芳羰氧基C1-10烷基、α-C1-10烷氧基C1-10烷基、α-取代C5-10芳氧基C1-10烷基、α-氨基C1-20烷基、α-C1-10烷胺基C1-10烷基、α-C5-14芳胺基C1-10烷基、α-取代C5-14芳胺基C1-10烷基、α-C1-10烷酰胺基C1-10烷基、α-C6-14芳酰胺基C1-10烷基、α-取代C6-14芳酰胺基C1-10烷基；R4代表氫原子、C1-20的飽和脂肪烷基、C5-20芳香烴基、取代C5-20芳香烴基、C3-20雜環烴基、取代C3-20雜環烴基、C3-20雜環基、取代C3-20雜環基、C1-20直鏈脂肪酰基、C4-20支鏈脂肪酰基、或與R1、R2、R3形成的C3-20環烴基、C3-20雜環基，其中所述雜環指含1-3個選自N、O或S雜原子的單或稠合雜環，每個帶有取代基的基團的取代基選自鹵素，羥基，氰基，硝基，C1-6烷基，C1-6烷氧基，C1-6烷硫基，一、二或三鹵代C1-6烷基，氨基，C1-10烴胺基，C1-10烴酰氧基，C6-10芳酰氧基或C1-10酰胺基。
13.如權利要求12的應用，其中所述的R1為叔丁基，環己基，環戊基，環丁基，環丙基，異戊基，環丁基；或者，R1為α-取代的環已基、環戊基、環丁基、環丙基、異己基、異戊基、異丁基、異丙基，其中所述的取代基為氨基、羥基、C1-10烴胺基、C1-6烴氧基、C1-10烴酰氧基、C6-10芳酰氧基、C1-10酰胺基；所述的R2或R3分別為氫原子、C1-12的鏈烴基或C3-20環烴基；R4為氫原子、C1-20的飽和脂肪烷基、C3-20環烷基、C1-20酰基、C1-10烴胺基C1-10烷基、C1-20亞砜基、氨基酸殘基及其組合而成的小分子多肽片段、β-硝基乙烯基、β-氰基乙烯基、取代羰亞胺基、C3-20雜環基，以及C4-20雜環酰基取代基。
14.權利要求12的應用，其中，所述的R2、R3分別為甲基、乙基、丙基，或者，R2和R3為亞丙基、亞丁基、亞戊基和亞己基。
15.權利要求12或13的應用，其中，所述的R1為異丙基，R2為甲基，R3為甲基。
16.如權利要求12的應用，其中，所述的的化合物選自如下化合物組成的組中的一種N-(1-甲基乙基)-2，3-二甲基-2-丁胺；N-丙基-2，3-二甲基-2-丁胺；N-(2-甲基丙基)-2，3-二甲基-2-丁胺；N-環丙甲基-2，3-二甲基-2-丁胺；N-丙烯基-2，3-二甲基-2-丁胺；N-(2-(二-(1-甲基乙基)胺基)乙基)-2，3-二甲基-2-丁胺；N-丁基-2，3-二甲基-2-丁胺；N-丙基-α-甲基苯丙胺；N-丙基-α，β-二甲基苯丙胺；N-(3-吡啶基)甲酰基-2，3-二甲基-2-丁胺；N-纈氨酰基-2，3-二甲基-2-丁胺；N-色氨酰基-2，3-二甲基-2-丁胺；N-(N-硝基)精氨酰基-2，3-二甲基-2-丁胺；N-苯丙氨酰基-2，3-二甲基-2-丁胺；N-亮氨酰基-2，3-二甲基-2-丁胺；N-異亮氨酰基-2，3-二甲基-2-丁胺；N-對甲苯磺酰基-2，3-二甲基-2-丁胺；N-(1-甲基乙基)-2，3-二甲基-3-羥基-2-丁胺；N-肉桂酰基-N-(1-甲基乙基)-2，3-二甲基-2-丁胺；N-(1-甲基乙基)-N-(2，4，5-三氯苯氧乙酰基)-2，3-二甲基-2-丁胺。
17.如權利要求12的應用，其中，所述的藥用酸加成的鹽選自鹽酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽、氫溴酸鹽；或者是乙酸鹽、草酸鹽、檸檬鹽、葡萄糖酸鹽、琥珀酸鹽、酒石酸鹽、對甲苯磺酸鹽、甲磺酸鹽、苯甲酸鹽、乳酸鹽或馬來酸鹽。
18.如權利要求16的應用，其中，所述的化合物是N-(1-甲基乙基)-2，3-二甲基-2-丁胺·對甲苯磺酸鹽。
19.如權利要求12的應用，其中，所述的應用是指在制備預防或治療肺動脈高壓的藥物，尤其是預防或治療由缺氧、慢性支氣管炎、阻塞性肺氣腫、支氣管擴張、支氣管哮喘、肺結核、塵肺、肺纖維化、多發性肺小動脈栓塞及肺小動脈炎所致的肺動脈高壓或原因不明的原發性肺動脈高壓的藥物中的應用。
20.用于預防或治療肺動脈高壓的藥物，尤其是預防或治療由缺氧、慢性支氣管炎、阻塞性肺氣腫、支氣管擴張、支氣管哮喘、肺結核、塵肺、肺纖維化、多發性肺小動脈栓塞及肺小動脈炎所致的肺動脈高壓或原因不明的原發性肺動脈高壓的的通式I所示的胺衍生物、其異構體、消旋體或光學異構體、其藥用酸加成鹽、其酰胺或其酯， 其中R1、R2、R3分別代表氫原子、C1-20的飽和或不飽和的直鏈或支鏈脂肪烴、C3-20的環烷烴基、取代C3-20環烷烴基、C5-20的芳香烴基、取代C5-20芳香烴基、C5-20雜環烴基、取代C5-20雜環烴基、α-羥基C2-20烷基、α-C1 -10烷羰氧C1-10烷基、C6-14α-芳羰氧基C1-10烷基、α-取代C6-14芳羰氧基C1-10烷基、α-C1-10烷氧基C1-10烷基、α-取代C5-10芳氧基C1-10烷基、α-氨基C1-20烷基、α-C1-10烷胺基C1-10烷基、α-C5-14芳胺基C1-10烷基、α-取代C5-14芳胺基C1-10烷基、α-C1-10烷酰胺基C1-10烷基、α-C6-14芳酰胺基C1-10烷基、α-取代C6-14芳酰胺基C1-10烷基；R4代表氫原子、C1-20的飽和脂肪烷基、C5-20芳香烴基、取代C5-20芳香烴基、C3-20雜環烴基、取代C3-20雜環烴基、C3-20雜環基、取代C3-20雜環基、C1-20直鏈脂肪酰基、C4-20支鏈脂肪酰基、或與R1、R2、R3形成的C3-20環烴基、C3-20雜環基，其中所述雜環指含1-3個選自N、O或S雜原子的單或稠合雜環，每個帶有取代基的基團的取代基選自鹵素，羥基，氰基，硝基，C1-6烷基，C1-6烷氧基，C1-6烷硫基，一、二或三鹵代C1-6烷基，氨基，C1-10烴胺基，C1-10烴酰氧基，C6-10芳酰氧基或C1-10酰胺基。
21.藥物組合物，其含有至少一種權利要求1-4任一要求的或權利要求20要求的式Ia或式I胺衍生物、其異構體、消旋體或光學異構體、其藥用酸加成鹽，酰胺或其酯及藥用載體或賦形劑。
全文摘要
本發明提供了通式I所表示的具有抗肺動脈高壓作用的胺衍生物、其異構體、消旋體或光學異構體、藥用鹽，其酰胺或其酯，含它們的藥物組合物、其制備方法，以及所述的化合物在制備用于預防或治療由缺氧、慢性支氣管炎、阻塞性肺氣腫、支氣管擴張、支氣管哮喘、肺結核、塵肺、肺纖維化、多發性肺小動脈栓塞及肺小動脈炎所致的肺動脈高壓或原因不明的原發性肺動脈高壓。
文檔編號C07C237/00GK1415596SQ0113727
公開日2003年5月7日 申請日期2001年11月2日 優先權日2001年11月2日
發明者汪海, 楊日芳, 胡剛, 惲榴紅, 王虹, 王林, 解衛平, 高企秀, 龍超良, 李福林, 崔文玉, 何華美, 劉立軍, 張雁芳, 閻遠 申請人:中國人民解放軍軍事醫學科學院毒物藥物研究所