喹唑啉衍生物的制作方法

專利名稱：喹唑啉衍生物的制作方法
技術領域：
本發明涉及一些可用于治療某些疾病(特別是增殖性疾病(proliferative disease)如癌癥)以及用于制備治療增殖性疾病用藥物的喹唑啉衍生物、新的喹唑啉化合物及其制備方法、以及含有它們作為活性成分的藥物組合物。
癌癥(以及其他增殖過多性疾病(hyperproliferativedisease))的特點是細胞不受控制地增殖。這種細胞增殖正常調節的喪失通常是由于控制細胞周期進展的細胞途徑的基因受損而致。
在真核生物中，細胞周期主要受蛋白質磷酸化的順序級聯反應控制。現已鑒定出一些在這種級聯反應中起重要作用的蛋白激酶家族。多種這些激酶在人腫瘤細胞中的活性與在正常組織中相比是增高的。這種情況可能是由蛋白表達水平的增高(例如基因擴增導致的增高)或者根據輔激活蛋白或抑制性蛋白的表達變化而引起的。
在這些細胞周期調節蛋白中，最早被鑒定出并且研究也最為廣泛的是細胞周期蛋白依賴性激酶(CDKs)。特異性CDKs在特定時期的活性對于細胞周期的啟動和協調過程是必需的。例如，CDK4蛋白通過磷酸化成視網膜細胞瘤基因產物pRb似乎能控制進入細胞周期(G0-G1-S轉變)，從而促進pRb釋放轉錄因子E2F，后者隨后增加進入S期所必需的基因轉錄。CDK4的催化活性通過與配對蛋白細胞周期蛋白D結合而被激活。最早論證癌癥與細胞周期之間直接連接關系的實驗之一就是觀察到在多種人腫瘤中細胞周期蛋白D1基因被擴增，而且細胞周期D蛋白水平增加(因此CDK4的活性增高)(Reviewed in Sherr，1996，Science 2741672-1677；Pines，1995，Seminars in CancerBiology 663-72)。其他研究(Loda等，1997，Nature Medicine 3(2)231-234；Gemma等，1996，International Journal of Cancer 68(5)605-11；Elledge等，1996，Trends in Cell Biology 6388-392)已經證明CDK功能的負性調控因子在人體腫瘤中通常被下調或者消除，從而再次導致這些激酶不適當激活。
最近已經鑒定出一些結構不同于CDK家族的蛋白激酶，它們在細胞周期的調控中起重要作用，而且在癌發生過程中也似乎是重要的。這些激酶包括最近鑒定的果蠅aurora和啤酒糖酵母(S.cerevisiae)Ip11蛋白的人類同源物。在氨基酸序列水平上具有高同源性的果蠅aurora和啤酒糖酵母Ip11編碼絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶。已知aurora和Ip11都涉及通過有絲分裂、中心體作用、有絲分裂紡錘體的形成和適當染色體分離到子代細胞內控制始于細胞周期G2期進行的轉變。這些基因的兩種人類同源物(稱為aurora1和aurora2)編碼細胞周期調節蛋白激酶。它們在G2/M界面處(aurora2)和其有絲分裂中(aurora1)顯示出表達峰和激酶活性。一些觀察結果暗示人aurora蛋白，特別是aurora2與癌癥有關。aurora2基因定位于染色體20q13，即通常在包括乳腺和結腸腫瘤在內的人腫瘤中擴增的區域。由于在大于50％的原發性人結腸直腸癌中存在aurora2 DNA擴增和aurora2 mRNA超表達，因此aurora2可能是此區域的主要靶基因。在這些腫瘤中，aurora2蛋白水平與相鄰正常組織相比顯著升高。另外，用人類aurora2轉染嚙齒動物成纖維細胞導致能帶來在軟瓊脂中生長和在裸鼠中形成腫瘤能力的轉化(Bischoff等，1998，The EMBO Journal.17(11)3052-3065)。其他工作(Zhou等，1998，Nature Genetics.20(2)189-93)已經表明人為過度表達aurora2能夠導致中心體數量增多和非整倍性的增加。
重要的是，人們還已經證明通過反義寡核苷酸處理人腫瘤細胞系消除aurora2表達與功能(WO97/22702和WO99/37788)，可以導致細胞周期停滯在細胞周期的G2期，并且在這些腫瘤細胞系中產生抗增殖作用。這表明抑制aurora2的功能將會產生抗增殖作用，從而可以用于治療人體腫瘤以及其他增殖過多性疾病。
迄今已經有多種喹唑啉衍生物被建議用于抑制各種不同的激酶。這些建議的實例包括在美國專利5646153之內。
本申請人已經發現一系列能夠抑制aurora2激酶作用的化合物，因而它們可用于治療增殖性疾病如癌癥，特別是其中已知aurora2激酶呈活性的這些疾病如結腸直腸或乳腺癌。
本發明提供了式(I)化合物或其鹽、酯、酰胺或前藥 其中X為O，或S，S(O)或S(O)2，或者為NR10，其中的R10為氫或C1-6烷基；R5為基團OR11，NR12R13或SR11，其中R11、R12和R13獨立選自任選取代的烴基或任選取代的雜環基，并且R12和R13還可以與它們所連接的氮原子一起形成任選取代的芳族或非芳族雜環，其中所述雜環還可含有其它雜原子；R6和R7獨立選自氫或烴基，特別是C1-4烷基；R8和R9獨立選自氫，鹵素，C1-4烷基，C1-4烷氧基，C1-4烷氧基甲基，二(C1-4烷氧基)甲基，C1-4鏈烷酰基，三氟甲基，氰基，氨基，C2-5鏈烯基，C2-5炔基，苯基，芐基或含有1-3個獨立選自O、S和N的雜原子的5-6-元雜環基，該雜環基可以是芳香或非芳香性的，并且可以是飽和(經環碳或氮原子連接)或不飽和的(經環碳原子連接)，而且所述苯基、芐基或雜環基可以在一個或多個環碳原子上帶有多至5個選自以下的取代基羥基，鹵素，C1-3烷基，C1-3烷氧基，C1-3鏈烷酰氧基，三氟甲基，氰基，氨基，硝基，C2-4鏈烷酰基，C1-4鏈烷酰基氨基，C1-4烷氧基羰基，C1-4烷基硫烷基(alkylsulphanyl)，C1-4烷基亞磺酰基，C1-4烷基磺酰基，氨基甲酰基，N-C1-4烷基氨基甲酰基，N，N-二(C1-4烷基)氨基甲酰基，氨基磺酰基，N-C1-4烷基氨基磺酰基，N，N-二(C1-4烷基)氨基磺酰基，C1-4烷基磺酰基氨基，以及選自嗎啉代、硫代嗎啉代、吡咯烷基、哌嗪基、哌啶基、咪唑烷基和吡唑烷基的飽和雜環基，其中飽和雜環基可以帶有1或2個選自氧代(oxo)、羥基、鹵素、C1-3烷基、C1-3烷氧基、C1-3鏈烷酰氧基、三氟甲基、氰基、氨基、硝基和C1-4烷氧基羰基的取代基，以及R1，R2，R3，R4獨立選自鹵素，氰基，硝基，C1-3烷硫基，-N(OH)R14(其中R14為氫，或C1-3烷基)，或R16X1-(其中X1代表直接鍵，-O-，-CH2-，-OC(O)-，-C(O)-，-S-，-SO-，-SO2-，-NR17C(O)-，-C(O)NR18-，-SO2NR19-，-NR20SO2-或-NR21-(其中R17，R18，R19，R20和R21各自獨立地代表氫，C1-3烷基或C1-3烷氧基C2-3烷基)，并且R16選自氫，任選取代的烴基，任選取代的雜環基或任選取代的烷氧基。
這些化合物具有作為aurora2激酶抑制劑的活性。
在本說明書中，單獨使用或者作為后綴使用的術語“烷基”包括直鏈、支鏈結構。除另有說明外，這些基團可以含有多至10個碳原子，優選多至6個碳原子，且更優選多至4個碳原子。類似地，術語“鏈烯基”和“炔基”則指含有例如2-10個碳原子，優選2-6個碳原子的直鏈或支鏈不飽和結構。環狀基團如環烷基、環烯基和環炔基的性質是相似的，但至少具有3個碳原子。正如本領域技術人員所能理解的那樣，象“烷氧基”之類的術語包含烷基。
術語“鹵素”包括氟、氯、溴和碘。芳基包括芳香性碳環基團如苯基和萘基。術語“雜環基”包括芳香性或非芳香性環，例如含有4-20個，適宜為5-8個環原子，其中至少一個環原子為雜原子，如氧、硫或氮。此類基團的實例包括呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡咯烷基、咪唑基、三唑基、噻唑基、四唑基、噁唑基、異噁唑基、吡唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、噠嗪基、三嗪基、喹啉基、異喹啉基、喹喔啉基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、苯并噻吩基或苯并呋喃基。非芳香性雜環基的實例包括嗎啉代、哌啶子基、氮雜環丁烷、四氫呋喃基、四氫吡啶基。在二環情形下，這些基團可以包括芳香性和非芳香性部分。
“雜芳基”是指上文所述的具有芳香特性的基團。術語“芳烷基”是指芳基取代的烷基基團，如芐基。
本說明書中使用的其它術語包括“烴基”，它是指含有碳和氫原子的任何結構。該基團可以是飽和或不飽和的。例如，這些基團可以為烷基、鏈烯基、炔基、芳基、芳烷基、環烷基、環烯基或環炔基，或它們的組合。
這樣的組合的實例為被芳基、芳烷基、環烷基、環烯基或環炔基取代的烷基、鏈烯基或炔基，或者為被烷基、鏈烯基、炔基或烷氧基取代的芳基、雜環基、烷氧基、芳烷基、環烷基、環烯基或環炔基，但還可以預見其它實例。
特別是，烴基包括烷基、鏈烯基、炔基、芳基、芳烷基、環烷基、環烯基或環炔基。
術語“官能團”是指活性取代基，如硝基、氰基、鹵素，氧代，＝CR78R79，C(O)xR77，OR77，S(O)yR77，NR78R79，C(O)NR78R79，OC(O)NR78R79，＝NOR77，-NR77C(O)xR78，-NR77CONR78R79，-N＝CR78R79，S(O)yNR78R79或-NR77S(O)yR78，其中R77，R78和R79獨立選自氫，任選取代的烴基，任選取代的雜環基或任選取代的烷氧基，或者R78和R79一起形成任選取代的環，該環任選含有其它雜原子，如氧、氮、S、S(O)或S(O)2，其中x為整數1或2，y為0或整數1-3。
對于烴基、雜環基或烷氧基基團R77、R78和R79以及R78和R79形成的環而言，適宜的任選取代基包括鹵素，全鹵代烷基如三氟甲基，巰基，硫代烷基(thioalkyl)，羥基，羧基，烷氧基，雜芳基，雜芳氧基，環烷基，環烯基，環炔基，鏈烯氧基，炔氧基，烷氧基烷氧基，芳氧基(其中的芳基基團可被鹵素、硝基或羥基取代)，氰基，硝基，氨基，單-或二-烷基氨基，肟基或S(O)yR90，其中y如上定義，且R90為烴基如烷基。
烴基、雜環基或烷氧基基團R77，R78和R79的任選取代基尤其包括鹵素，全鹵代烷基如三氟甲基，巰基，羥基，羧基，烷氧基，雜芳基，雜芳氧基，鏈烯氧基，炔氧基，烷氧基烷氧基，芳氧基(其中的芳基基團可被鹵素、硝基、或羥基取代)，氰基，硝基，氨基，單-或二-烷基氨基，肟基或S(O)yR90，其中y如上定義，且R90為烴基如烷基。
一些式(I)化合物可能包含手性中心，因此本發明包括其所有對映體及它們的混合物(包括外消旋混合物在內)。
在特定實施方案中，在式(I)化合物中，R1、R2、R3和R4中至少一個為基團R16X1-，其中X1如權利要求1中定義，且R16選自下列22組基團之一1)氫或C1-5烷基，該烷基可以是未取代的或者可以被一個或多個官能團所取代；2)-RaX2C(O)R22(其中X2代表-O-或-NR23-(其中R23代表氫，或被官能團任選取代的烷基)，并且R22代表C1-3烷基，-NR24R25或-OR26(其中R24，R25和R26可以相同或不同，各自代表氫，或任選被官能團取代的烷基)；3)-RbX3R27(其中X3代表-O-，-C(O)-，-S-，-SO-，-SO2-，-OC(O)-，-NR28C(O)-，-NR28C(O)O-，-C(O)NR29-，-C(O)ONR29-，-SO2NR30-，-NR31SO2-或-NR32-(其中R28，R29，R30，R31和R32各自獨立代表氫，或任選被官能團取代的烷基)，并且R27代表氫，烴基(如上定義)或飽和雜環基，其中所述烴基或雜環基可任選地被一個或多個官能團取代，并且雜環基另外還可以被烴基取代；4)-RcX4Rc′X5R35(其中X4和X5可以相同或不同，并且各自為-O-，-C(O)-，-S-，-SO-，-SO2-，-OC(O)-，-NR36C(O)-，-NR36C(O)O-，-C(O)NR37-，-C(O)ONR37-，-SO2NR38-，-NR39SO2-或-NR40-(其中R36，R37，R38，R39和R40各自獨立地代表氫或任選被官能團取代的烷基)，并且R35代表氫，或任選被官能團取代的烷基；5)R41，其中R41為C3-6環烷基或飽和雜環(經碳或氮連接)，該環烷基或雜環基團可以被一個或多個官能團取代或者被烴基或雜環基取代，所述的烴基或雜環基可任選地被1個或多個官能團取代；6)-RdR41(其中R41如上定義)；7)-ReR41(其中R41如上定義)；8)-RfR41(其中R41如上定義)；9)R42(其中R42代表吡啶酮基，芳基或含有1-3個選自O、N和S的雜原子的芳族雜環基(經碳或氮連接)，并且所述吡啶酮基、芳基或芳族雜環基可以被一個或多個官能團取代或者被任選被一個或多個官能團或雜環基取代的烴基所取代，或者被任選被一個或多個官能團或烴基取代的雜環基所取代；10)-RgR42(其中R42如上定義)；11)-RhR42(其中R42如上定義)；12)-RiR42(其中R42如上定義)；13)-RjX6R42(其中X6代表-O-，-S-，-SO-，-SO2-，-OC(O)-，-NR47C(O)-，-C(O)NR48-，-C(O)ONR48-，-SO2NR49-，-NR50SO2-或-NR51-(其中R47，R48，R49，R50和R51各自獨立代表氫，或任選被官能團取代的烷基)，并且R42如上定義)；
14)-RkX7R42(其中X7代表-O-，-C(O)-，-S-，-SO-，-SO2-，-OC(O)-，-NR52C(O)-，-C(O)NR53-，-C(O)ONR53-，-SO2NR54-，-NR55SO2-或-NR56-(其中R52，R53，R54，R55和R56各自獨立代表氫，或任選被官能團取代的烷基)，并且R42如上定義)；15)-RmX8R42(其中X8代表-O-，-C(O)-，-S-，-SO-，-SO2-，-OC(O)-，-NR57C(O)-，-C(O)NR58-，-C(O)ONR58-，-SO2NR59-，-NR60SO2-或-NR61-(其中R57，R58，R59，R60和R61各自獨立代表氫，或任選被官能團取代的烷基)，并且R42如上定義)；16)-RnX9Rn′R42(其中X9代表-O-，-C(O)-，-S-，-SO-，-SO2-，-OC(O)-，-NR62C(O)-，-C(O)NR63-，-C(O)ONR63-，-SO2NR64-，-NR65SO2-或-NR66-(其中R61，R62，R64，R65和R66各自獨立代表氫，或任選被官能團取代的烷基)，并且R42如上定義)；17)-RpX9-Rp′R41(其中X9和R41如上定義)；18)C2-5鏈烯基，它可以是未取代的或者可以被一個或多個官能團所取代；19)C2-5炔基，它可以是未取代的或者可以被一個或多個官能團所取代；20)-RtX9Rt′R41(其中X9和R41如上定義)；21)-RuX9Ru′R41(其中X9和R41如上定義)；和22)-RvR67(Rv′)q(X9)rR68(其中X9如上定義，q為0或1，r為0或1，R67為C1-3亞烷基或選自二價環烷基或雜環基的環狀基團，其中所述C1-3亞烷基可以被一個或多個官能團取代，而所述環狀基團則可以被一個或多個官能團取代，或者被任選被一個或多個官能團或雜環基取代的烴基所取代，或者被任選被一個或多個官能團或烴基取代的雜環基所取代；并且R68為氫，C1-3烷基，或選自環烷基或雜環基的環狀基團，其中所述C1-3烷基可以被一個或多個官能團取代，而所述環狀基團則可以被一個或多個官能團取代，或者被任選被一個或多個官能團或雜環基取代的烴基所取代，或者被任選被一個或多個官能團或烴基取代的雜環基所取代；以及，其中的Ra，Rb，Rc，Rc′，Rd，Rg，Rj，Rn，Rn′，Rp，Rp′，Rt′，Ru′，Rv和Rv′獨立選自任選被一個或多個官能團取代的C1-8亞烷基，Re，Rh，Rk和Rt獨立選自任選被一個或多個官能團取代的C2-8亞烯基，和Rf，Ri，Rm和Ru獨立選自任選被一個或多個官能團取代的C2-8亞炔基。
例如，R16選自下列22組基團之一1)氫或C1-5烷基，該烷基可以是未取代的或者可以被一個或多個選自羥基、環氧乙烷基、氟、氯、溴和氨基的基團所取代(包括C1-3烷基和三氟甲基)；2)-RaX2C(O)R22(其中X2代表-O-或-NR23-(其中R23代表氫，C1-3烷基或C1-3烷氧基C2-3烷基)，并且R22代表C1-3烷基，-NR24R25或-OR26(其中R24，R25和R26可以相同或不同，各自代表氫，C1-5烷基，羥基C1-5烷基或C1-3烷氧基C2-3烷基))；3)-RbX3R27(其中X3代表-O-，-C(O)-，-S-，-SO-，-SO2-，-OC(O)-，-NR28C(O)-，-NR28C(O)O-，-C(O)NR29-，-C(O)ONR29-，-SO2NR30-，-NR31SO2-或-NR32-(其中R28，R29，R30，R31和R32各自獨立地代表氫，C1-3烷基，羥基C1-4烷基或C1-3烷氧基C2-3烷基)，并且R27代表氫，C1-6烷基，C2-6鏈烯基，環丙基，環丁基，環戊基，環己基，苯基或含有1-2個獨立選自O、S和N的雜原子的5-6元飽和雜環基，其中所述C1-6烷基可以帶有1、2或3個選自氧代、羥基、鹵素、環丙基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4鏈烷酰基、二-C1-4烷基氨基、C1-4烷硫基(alkylthio)、C1-4烷氧基的取代基，并且所述環狀基團可帶有1或2個選自如下的取代基氧代、羥基、鹵素、氰基、C1-4氰基烷基、C1-4烷基、C1-4羥基烷基、C1-4烷氧基、C1-4烷氧基C1-4烷基、C1-4烷基磺酰基C1-4烷基、C1-4烷氧基羰基、C1-4氨基烷基、C1-4烷基氨基、二(C1-4烷基)氨基、C1-4烷基氨基C1-4烷基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷基、C1-4烷基氨基C1-4烷氧基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷氧基和基團-(-O-)f(Rb′)gD(其中f為0或1，g為0或1，D為選自C3-6環烷基、芳基或含有1-2個獨立選自O、S和N的雜原子的5-6元飽和或不飽和雜環基的環狀基團，且該環狀基團可以帶有1個或多個選自鹵素和C1-4烷基的取代基)；4)-RcX4Rc′X5R35(其中X4和X5可以相同或不同，各自為-O-，-C(O)-，-S-，-SO-，-SO2-，-NR36C(O)-，-NR36C(O)O-，-C(O)NR37-，-C(O)ONR37-，-SO2NR38-，-NR39SO2-或-NR40-(其中R36，R37，R38，R39和R40各自獨立地代表氫，C1-3烷基或C1-3烷氧基C2-3烷基)，并且R35代表氫，C1-3烷基，羥基C1-3烷基或C1-3烷氧基C2-3烷基；
5)R41(其中R41為4-6元環烷基或含有1-2個獨立選自O、S和N的雜原子的飽和雜環(經碳或氮連接)，并且所述環烷基或雜環基可以帶有1或2個選自如下的取代基氧代、羥基、鹵素、氰基、C1-4烷基、羥基C1-4烷基、氰基C1-4烷基、環丙基、C1-4烷基磺酰基C1-4烷基、C1-4烷氧基羰基、酰胺基(carboxamido)、C1-4氨基烷基、C1-4烷基氨基、二(C1-4烷基)氨基、C1-4烷基氨基C1-4烷基、C1-4鏈烷酰基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷基、C1-4烷基氨基C1-4烷氧基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷氧基、硝基、氨基、C1-4烷氧基、C1-4羥基烷氧基、羧基、三氟甲基、-C(O)NR43R44、-NR45C(O)R46(其中R43、R44、R45和R46可以相同或不同，各自代表氫，C1-4烷基，羥基C1-4烷基或C1-3烷氧基C2-3烷基)和基團-(-O-)f(C1-4烷基)g環D(其中f為0或1，g為0或1，并且D為選自C3-6環烷基、芳基或含有1-2個獨立選自O、S和N的雜原子的5-6元飽和或不飽和雜環基的環狀基團，且該環狀基團可以帶有1個或多個選自鹵素和C1-4烷基的取代基)；6)-RdR41(其中R41如上定義)；7)-ReR41(其中R41如上定義)；8)-RfR41(其中R41如上定義)；9)R42(其中R42代表吡啶酮基，苯基或含有1-3個選自O、N和S的雜原子的5-6元芳族雜環基(經碳或氮連接)，并且所述吡啶酮基、苯基或芳族雜環基可以帶有多至5個選自如下的取代基羥基、硝基、鹵素、氨基、C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4羥基烷基、C1-4氨基烷基、C1-4烷基氨基、C1-4羥基烷氧基、氧代、氰基C1-4烷基、環丙基、C1-4烷基磺酰基C1-4烷基、C1-4烷氧基羰基、二(C1-4烷基)氨基、C1-4烷基氨基C1-4烷基、C1-4鏈烷酰基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷基、C1-4烷基氨基C1-4烷氧基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷氧基、羧基、酰胺基、三氟甲基、氰基、-C(O)NR69R70、-NR71C(O)R72(其中R69、R70、R71和R72可以相同或不同，各自代表氫，C1-4烷基，羥基C1-4烷基或C1-3烷氧基C2-3烷基)和基團-(-O-)f(C1-4烷基)g環D(其中f為0或1，g為0或1，并且環D為選自C3-6環烷基、芳基或含有1-2個獨立選自O、S和N的雜原子的5-6元飽和或不飽和雜環基的環狀基團，且該環狀基團可以帶有1個或多個選自鹵素和C1-4烷基的取代基)；10)-RgR42(其中R42如上定義)；
11)-RhR42(其中R42如上定義)；12)-RiR42(其中R42如上定義)；13)-RjX6R42(其中X6代表-O-，-C(O)-，-S-，-SO-，-SO2-，-OC(O)-，-NR47C(O)-，-C(O)NR48-，-C(O)ONR48-，-SO2NR49-，-NR50SO2-或-NR51-(其中R47，R48，R49，R50和R51各自獨立代表氫，C1-3烷基，羥基C1-3烷基或C1-3烷氧基C2-3烷基)，并且R42如上定義)；14)-RkX7R42(其中X7代表-O-，-C(O)-，-S-，-SO-，-SO2-，-NR73C(O)-，-C(O)NR74-，-C(O)ONR74-，-SO2NR75-，-NR76SO2-或-NR77-(其中R73，R74，R75，R76和R77各自獨立代表氫，C1-3烷基，羥基C1-3烷基或C1-3烷氧基C2-3烷基)，并且R42如上定義)；15)-RmX8R42(其中X8代表-O-，-C(O)-，-S-，-SO-，-SO2-，-NR57C(O)-，-C(O)NR58-，-C(O)ONR58-，-SO2NR59-，-NR60SO2-或-NR61-(其中R57，R58，R59，R60和R61各自獨立代表氫，C1-3烷基，羥基C1-3烷基或C1-3烷氧基C2-3烷基)，并且R42如上定義)；16)-RnX9Rn′R42(其中X9代表-O-，-C(O)-，-S-，-SO-，-SO2-，-NR62C(O)-，-C(O)NR63-，-C(O)ONR63-，-SO2NR64-，-NR65SO2-或-NR66-(其中R62，R63，R64，R65和R66各自獨立代表氫，C1-3烷基，羥基C1-3烷基或C1-3烷氧基C2-3烷基)，并且R42如上定義)；17)-RpX9-Rp′R41(其中X9和R41如上定義)；18)C2-5鏈烯基，它可以是未取代的或者可以被一個或多個選自如下的基團所取代羥基、氟、氨基、C1-4烷基氨基、N，N-二(C1-4烷基)氨基，氨基磺酰基，N-C1-4烷基氨基磺酰基和N，N-二(C1-4烷基)氨基磺酰基；19)C2-5炔基，它可以是未取代的或者可以被一個或多個選自如下的基團所取代羥基、氟、氨基、C1-4烷基氨基、N，N-二(C1-4烷基)氨基，氨基磺酰基，N-C1-4烷基氨基磺酰基和N，N-二(C1-4烷基)氨基磺酰基；20)-RtX9Rt′R41(其中X9和R41如上定義)；21)-RuX9Ru′R41(其中X9和R41如上定義)；和22)-RvR67(Rv′)q(X9)rR68(其中X9如上定義，q為0或1，r為0或1，R67為C1-3亞烷基或選自環丙基、環丁基、亞環戊基、亞環己基或含有1-2個獨立選自O、S和N的雜原子的5-6-元飽和雜環基的環狀基團，其中所述C1-3亞烷基可帶有1或2個選自氧代、羥基、鹵素和C1-4烷氧基的取代基，并且其中的環狀基團可帶有1或2個選自如下的取代基氧代、羥基、鹵素、氰基、C1-4氰基烷基、C1-4烷基、C1-4羥基烷基、C1-4烷氧基、C1-4烷氧基C1-4烷基、C1-4烷基磺酰基C1-4烷基、C1-4烷氧基羰基、C1-4氨基烷基、C1-4烷基氨基、二(C1-4烷基)氨基、C1-4烷基氨基C1-4烷基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷基、C1-4烷基氨基C1-4烷氧基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷氧基和基團-(-O-)f(C1-4烷基)g環D(其中f為0或1，g為0或1，并且環D為選自C3-6環烷基、芳基或含有1-2個獨立選自O、S和N的雜原子的5-6元飽和或不飽和雜環基的環狀基團，且該環狀基團可以帶有1個或多個選自鹵素和C1-4烷基的取代基)；并且R68為氫，C1-3烷基，或選自環丙基、環丁基、環戊基、環己基和含有1-2個獨立選自O、S和N的雜原子的5-6-元飽和雜環基的環狀基團，其中所述C1-3烷基可帶有1或2個選自氧代、羥基、鹵素和C1-4烷氧基的取代基，且所述環狀基團可帶有1或2個選自如下的取代基氧代、羥基、鹵素、氰基、C1-4氰基烷基、C1-4烷基、C1-4羥基烷基、C1-4烷氧基、C1-4烷氧基C1-4烷基、C1-4烷基磺酰基C1-4烷基、C1-4烷氧基羰基、C1-4氨基烷基、C1-4烷基氨基、二(C1-4烷基)氨基、C1-4烷基氨基C1-4烷基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷基、C1-4烷基氨基C1-4烷氧基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷氧基和基團-(-O-)f(C1-4烷基)g環D(其中f為0或1，g為0或1，并且環D為選自C3-6環烷基、芳基或含有1-2個獨立選自O、S和N的雜原子的5-6元飽和或不飽和雜環基的環狀基團，且該環狀基團可以帶有1個或多個選自鹵素和C1-4烷基的取代基)；以及，其中的Ra，Rb，Rb′，Rc，Rc′，Rd，Rg，Rj，Rn，Rn′，Rp，Rp′，Rt′，Ru′，Rv和Rv′獨立選自C1-8亞烷基，該C1-8亞烷基任選被一個或多個選自羥基、鹵素、氨基的取代基取代，Re，Rh，Rk和Rt獨立選自C2-8亞烯基，該C2-8亞烯基任選被一個或多個選自羥基、鹵素、氨基的取代基取代，另外Rt還可以為價鍵；和Rf，Ri，Rm和Ru獨立選自C2-8亞炔基，該C2-8亞炔基任選被一個或多個選自羥基、鹵素、氨基的取代基取代。
特別的式(I)化合物為式(IA)化合物或其鹽、酯或酰胺 其中X為O，或S，S(O)或S(O)2，NH或NR10，其中的R10為氫或C1-6烷基；R5為基團OR11，NR12R13或SR11，其中R11、R12和R13獨立選自任選取代的烴基或任選取代的雜環基，并且R12和R13還可以與它們所連接的氮原子一起形成可另外含有雜原子的芳族或非芳族雜環，R8和R9獨立選自氫，鹵素，C1-4烷基，C1-4烷氧基，C1-4烷氧基甲基，二(C1-4烷氧基)甲基，C1-4鏈烷酰基，三氟甲基，氰基，氨基，C2-5鏈烯基，C2-5炔基，苯基，芐基或含有1-3個獨立選自O、S和N的雜原子的5-6-元雜環基，該雜環基可以是芳香或非芳香性的，并且可以是飽和(經環碳或氮原子連接)或不飽和的(經環碳原子連接)，而且所述苯基、芐基或雜環基可以在一個或多個環碳原子上帶有多至5個選自以下的取代基羥基，鹵素，C1-3烷基，C1-3烷氧基，C1-3鏈烷酰氧基，三氟甲基，氰基，氨基，硝基，C2-4鏈烷酰基，C1-4鏈烷酰基氨基，C1-4烷氧基羰基，C1-4烷硫基，C1-4烷基亞磺酰基，C1-4烷基磺酰基，氨基甲酰基，N-C1-4烷基氨基甲酰基，N，N-二(C1-4烷基)氨基甲酰基，氨基磺酰基，N-C1-4烷基氨基磺酰基，N，N-二(C1-4烷基)氨基磺酰基，C1-4烷基磺酰基氨基，以及選自嗎啉代、硫代嗎啉代、吡咯烷基、哌嗪基、哌啶基、咪唑烷基和吡唑烷基的飽和雜環基，這種飽和雜環基可以帶有1或2個選自氧代、羥基、鹵素、C1-3烷基、C1-3烷氧基、C1-3鏈烷酰氧基、三氟甲基、氰基、氨基、硝基和C1-4烷氧基羰基的取代基，以及R1，R2，R3，R4獨立選自鹵素，氰基，硝基，三氟甲基，C1-3烷基，-NR14R15(其中R14和R15可以相同或不同，各自代表氫或C1-3烷基)，或-X1R16(其中X1代表直接鍵，-O-，-CH2-，-OCO-，羰基，-S-，-SO-，-SO2-，-NR17CO-，-CONR18-，-SO2NR19-，-NR20SO2-或-NR21-(其中R17，R18，R19，R20和R21各自獨立地代表氫，C1-3烷基或C1-3烷氧基C2-3烷基)，并且R16選自下列十八組基團之一1’)氫或C1-5烷基，該烷基可以是未取代的或者可以被一個或多個選自羥基、氟和氨基的基團所取代；2’)C1-5烷基X2COR22(其中X2代表-O-或-NR23-(其中R23代表氫，C1-3烷基或C1-3烷氧基C2-3烷基)，并且R22代表C1-3烷基，-NR24R25或-OR26(其中R24，R25和R26可以相同或不同，各自代表氫，C1-3烷基或C1-3烷氧基C2-3烷基))；3’)C1-5烷基X3R27(其中X3代表-O-，-S-，-SO-，-SO2，-OCO-，-NR28CO-，-CONR29-，-SO2NR30-，-NR31SO2-或-NR32-(其中R28，R29，R30，R31和R32各自獨立代表氫，C1-3烷基或C1-3烷氧基C2-3烷基)，并且R27代表氫，C1-3烷基，環戊基，環己基或含有1-2個獨立選自O、S和N的雜原子的5-6-元飽和雜環基，其中所述C1-3烷基可帶有1或2個選自氧代、羥基、鹵素和C1-4烷氧基的取代基，并且所述環狀基團可帶有1或2個選自氧代、羥基、鹵素、C1-4烷基、C1-4羥基烷基和C1-4烷氧基的取代基)；4’)C1-5烷基X4C1-5烷基X5R35(其中X4和X5可以相同或不同，并且各自為-O-，-S-，-SO-，-SO2，-NR36CO-，-CONR37-，-SO2NR38-，-NR39SO2-或-NR40-(其中R36，R37，R38，R39和R40各自獨立代表氫，C1-3烷基或C1-3烷氧基C2-3烷基)，并且R35代表氫或C1-3烷基)；5’)R41(其中R41為含有1-2個獨立選自O、S和N的雜原子的5-6-元飽和雜環基(經碳或氮連接)，該雜環基可以帶有1或2個選自如下的取代基氧代、羥基、鹵素、C1-4烷基、C1-4羥基烷基、C1-4烷氧基、C1-4烷氧基C1-4烷基和C1-4烷基磺酰基C1-4烷基)；6’)C1-5烷基R41(其中R41如上定義)；7’)C2-5鏈烯基R41(其中R41如上定義)；8’)C2-5炔基R41(其中R41如上定義)；9’) R42(其中R42代表吡啶酮基，苯基或含有1-3個選自O、N和S的雜原子的5-6-元芳族雜環基(經碳或氮連接)，并且所述吡啶酮基、苯基或芳族雜環基可以在碳原子上帶有多至5個選自如下的取代基羥基、鹵素、氨基、C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4羥基烷基、C1-4氨基烷基、C1-4烷基氨基、C1-4羥基烷氧基、羧基、三氟甲基、氰基、-CONR43R44和-NR45COR46(其中R43，R44，R45和R46可以相同或不同，各自代表氫，C1-4烷基或C1-3烷氧基C2-3烷基))；10’)C1-5烷基R42(其中R42如上定義)；11’)C2-5鏈烯基R42(其中R42如上定義)；12’)C2-5炔基R42(其中R42如上定義)；13’)C1-5烷基X6R42(其中X6代表-O-，-S-，-SO-，-SO2-，-NR47CO-，-CONR48-，-SO2NR49-，-NR50SO2-或-NR51-(其中R47，R48，R49，R50和R51各自獨立代表氫，C1-3烷基或C1-3烷氧基C2-3烷基)，并且R42如上定義)；14’)C2-5鏈烯基X7R42(其中X7代表-O-，-S-，-SO-，-SO2-，-NR52CO-，-CONR53-，-SO2NR54-，-NR55SO2-或-NR56-(其中R52，R53，R54，R55和R56各自獨立代表氫，C1-3烷基或C1-3烷氧基C2-3烷基)，并且R42如上定義)；15’)C2-5炔基X8R42(其中X8代表-O-，-S-，-SO-，-SO2-，-NR57CO-，-CONR58-，-SO2NR59-，-NR60SO2-或-NR61-(其中R57，R58，R59，R60和R61各自獨立代表氫，C1-3烷基或C1-3烷氧基C2-3烷基)，并且R42如上定義)；16’)C1-3烷基X9C1-3烷基R42(其中X9代表-O-，-S-，-SO-，-SO2-，-NR62CO-，-CONR63-，-SO2NR64-，-NR65SO2-或-NR66-(其中R62，R63，R64，R65和R66各自獨立代表氫，C1-3烷基或C1-3烷氧基C2-3烷基)，并且R42如上定義)；和17’)C1-3烷基X9C1-3烷基R41(其中X9和R41如上定義)。
特別是，R6和R7為氫或C1-4烷基如甲基，并且優選均為氫。
式(I)中定義的烴基基團R11，R12或R13的適當任選取代基包括官能團，而雜環基基團R11、R12和/或R13的適當任選取代基則包括官能團和烴基。
R5的特例為基團OR11，其中R11為氫或C1-4烷基，特別是C1-4烷基。
R5的其它實例為式NR12R13基團，其中R12或R13之一為氫，而另一個為任選取代的烴基，特別是任選取代的C1-6烷基，任選取代的芳基或任選取代的雜環基。
R5的特例包括式NR12R13基團，其中特別是R12或R13之一為氫，而另一個為任選被一個或多個選自羥基、三氟甲基、C1-3烷氧基如甲氧基、氰基、氨基、單-或二-C1-4烷基氨基、C1-4烷硫基如甲硫基、C3-6環烷基取代的C1-6烷基或任選被烴基取代的雜環基，如2，3-二氫化茚、呋喃、四氫呋喃、噻吩基，這些雜環基中的任何一個都可以任選地被C1-4烷基如甲基取代。
特別是，R12或R13之一為氫，而另一個為任選被三氟甲基、C1-3烷氧基如甲氧基、氰基、C1-4烷硫基如甲硫基取代的C1-6烷基，或任選被烴基取代的雜環基，如任選地被C1-4烷基如甲基取代的2，3-二氫化茚、呋喃。
在另一實施方案中，R12或R13之一為氫，而另一個為雜環基如吡啶、四氫吡啶、2，3-二氫化茚噻吩基、四氫噻吩基及其二氧化物，C3-6環烷基或苯基；這些基團中的任何一個都可任選地被例如一個或多個選自鹵素、硝基、烷基如甲基、或烷氧基如甲氧基的基團取代。
特別是，R12或R13之一為氫，而另一個為任選取代的雜環基如吡啶，或任選被例如一個或多個選自鹵素、硝基、烷基如甲基、或烷氧基如甲氧基的基團取代的苯基。
在另一實施方案中，R5為基團NR12R13，其中R12和R13與它們所連接的氮原子一起形成任選取代的雜環，特別是非芳香性環如嗎啉或哌啶。
優選R1為氫。適宜的R4為氫或小型取代基如鹵素、C1-4烷基或C1-4烷氧基如甲氧基。
優選R1和R4都為氫。
優選R2和R3獨立選自基團-X1R16，其中X1為氧且R16如上定義。特別的R16基團為上述(1)組中的基團，尤其是烷基，如甲基或鹵代烷基。
在優選實施方案中，基團R2或R3至少一個(優選為R3)包括由至少3個(優選至少4個)任選取代的碳原子或雜原子如氧、氮或硫組成的鏈。最優選的是所述鏈被有助于溶解的極性基團所取代。
在這種情況下，優選X1為氧，且R16包括直接與X1相鄰的亞甲基。當存在橋連亞烷基、亞烯基或亞炔基基團Ra，Rb，Rb′，Rc，Rc′，Rd，Rg，Rj，Rn，Rn′，Rp，Rp′，Rt′，Ru′，Rv，Rv′，Re，Rh，Rk，Rt，Rf，Ri，Rm和Ru時，優選至少一個這種基團包括取代基，特別是羥基取代基。
適宜的R3為基團XR16。在這種情形下優選X1為氧，R16選自前述式(1)，(3)，(6)或(10)的基團，且優選選自前述(1)或(10)組。特別的基團R16為前述(1)組中的基團，尤其是烷基，如甲基或鹵代烷基，或者為前述(10)組中的基團。在一個優選實施方案中，R2或R3至少一個為基團OC1-5烷基R42且R42為雜環，如N-連接的嗎啉環，例如3-嗎啉代丙氧基。
R3的其它優選基團為前述式(3)的基團，特別是其中X3為-NR32-的那些基團。
適宜的R2選自鹵素、氰基、硝基、三氟甲基、C1-3烷基、-NR14R15(其中R14和R15可以相同或不同，各自代表氫或C1-3烷基)、或基團-X1R16。對于R2而言，-X1R16的優選實例包括上面R3所列的那些基團。
R2和R3的其它實例包括甲氧基或3，3，3-三氟乙氧基。
優選X為NH或O，且最優選NH。
基團R8或R9的特別實例包括氫，鹵素，C1-4烷氧基如甲氧基、或乙氧基，氰基，三氟甲基，或苯基。優選R8和R9都為氫。
適宜的是，至少一個取代基位于苯基的4-位。因此在優選實施方案中，本發明提供了式(IB)化合物 其中所有可變基團均如式(I)或(IA)中定義。
式(I)化合物的適宜前藥是一組能增強溶解性的化合物，包括磷酸酯(鹽)和硫酸酯(鹽)，特別是磷酸酯(鹽)及其烷基、芳基或芳烷基衍生物，如二芐基磷酸酯(鹽)。前藥部分可以連接在分子的任何適當位置，例如作為羥基的衍生物，但尤為有利的是位于一個或多個基團R1、R2、R3或R4上，優選位于R2或R3上。
式(I)化合物的適當可藥用鹽包括酸加成鹽如甲磺酸鹽、富馬酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、檸檬酸鹽、馬來酸鹽以及與磷酸和硫酸所形成的鹽。依據荷電官能團的數目和陽離子或陰離子的價數，可以存在多于一個的陽離子或陰離子。當式(I)化合物包含酸官能團時，鹽可以是堿鹽，如堿金屬鹽(例如鈉鹽)，堿土金屬鹽(例如鈣或鎂鹽)，有機胺鹽例如與三乙胺、嗎啉、N-甲基哌啶、N-乙基哌啶、普魯卡因、二芐胺、N，N-二芐基乙胺或氨基酸，如賴氨酸形成的鹽。優選的可藥用鹽為鈉鹽。
含有羧基或羥基的式(I)化合物的體內可水解酯為，例如在人或動物體中能水解產生母體酸或醇的可藥用酯。
對于羧基而言，合適的可藥用酯包括C1-6烷基酯例如甲基或乙基酯，C1-6烷氧基甲基酯例如甲氧基甲基，C1-6烷酰氧基甲基酯例如新戊酰氧基甲基，2-苯并[c]呋喃酮基酯，C3-8環烷氧基-羰氧基C1-6烷基酯例如1-環己基羰氧基乙基；1，3-二氧雜戊環烯(dioxolen)-2-酮基甲基酯例如5-甲基-1，3-二氧雜戊環烯-2-酮基甲基；和C1-6烷氧基羰氧基乙基酯例如1-甲氧基羰氧基乙基，并且可以在本發明化合物的任何羧基基團上成酯。
包含羥基的式(I)化合物的體內可水解酯包括無機酯，如磷酸酯和(-酰氧基烷基醚以及能通過體內水解酯而產生母體羥基的有關化合物。α-酰氧基烷基醚的實例包括乙酰氧基甲氧基和2，2-二甲基丙酰氧基甲氧基。對羥基而言，可選擇的能形成體內可水解酯的基團包括鏈烷酰基，苯甲酰基，苯基乙酰基和取代的苯甲酰基與苯乙酰基，烷氧基羰基(形成碳酸烷基酯)，二烷基氨基甲酰基和N-(二烷基氨基乙基)-N-烷基氨基甲酰基(形成氨基甲酸酯)，二烷基氨基乙酰基和羧基乙酰基。
合適的酰胺衍生自含有羧基的式(I)化合物，羧基可衍生成酰胺如N-C1-6烷基和N，N-二(C1-6烷基)酰胺如N-甲基、N-乙基、N-丙基、N，N-二甲基、N-乙基-N-甲基或N，N-二乙基酰胺。
體內不能水解的酯可以用作制備式(I)化合物的中間體。式(I)化合物的特別實例列于表1。
表1
*雙鍵的幾何結構為順式(Z)而非反式(E)式(I)化合物可以用文獻中顯而易見的多種方法制備。例如，式(I)化合物的制備可通過下述方法使式(II)化合物 其中X，R8，R9如式(I)中定義，R1′，R2′，R3′，R4′分別為式(I)中定義的基團R1，R2，R3，R4，或者它們的前體；且R85為離去基團，與式(III)化合物反應 其中R6和R7如式(I)中定義，R5’為式(I)中定義的基團R5或其前體基團；隨后如果期望或者必要的話，將任何前體基團R1′，R2′，R3′，R4′或R5’相應地轉化為基團R1，R2，R3，R4或R5，或者將基團R5轉化為不同的這種基團。
對于R85，適宜的離去基團包括鹵素，如氯或碘，甲磺酸基(mesylate)和甲苯磺酸基(tosylate)。反應宜在堿如三乙胺存在下在有機溶劑如乙腈或醇(如異丙醇)中加熱進行，較方便的是在溶劑的回流溫度下進行。
式(III)化合物宜就地制備，例如在催化劑如鈀催化劑(例如乙酸鈀)存在下利用還原劑如三(鄰甲苯基)膦還原式(IV)化合物就地制備 其中R5，R6和R7如式(I)中定義。
式(II)和(IV)化合物或者為已知化合物，或者它們可以用常規方法衍生自已知化合物。
應用常規化學方法，可以很容易地將一種基團R5轉化為另一種此類基團。例如，應用已知方法，特別是在堿如碳二亞胺存在下使其中R5為羥基的式(I)化合物與式HNR12R13的胺反應，可以將其中R5為羥基的式(I)化合物轉化為酰胺(其中R5為基團NR12R13)。
前體基團R1′，R2′，R3′，R4′或R5’相應地轉化為基團R1，R2，R3，R4或R5的反應可以通過常規化學方法進行。優選R1′，R2′，R3′和R4′分別等同于基團R1，R2，R3和R4，因而無需進行轉化。
式(I)化合物為aurora 2激酶抑制劑。因此這些化合物可用于治療這些因子介導的疾病，特別是增殖性疾病。
本發明的另一方面提供了用于人或動物體治療方法中供治療用的本文所述式(I)化合物，或其鹽、酯、酰胺或前藥，特別是其可藥用鹽或體內可水解酯。尤其是，這些化合物用于治療aurora 2受正調節的增殖性疾病，如癌癥(特別是諸如結腸直腸癌和乳腺癌之類癌癥)的方法中。
本發明的再一方面提供了在需要這種治療的溫血動物(如人)體中抑制aurora 2激酶的方法，該方法包括對所述動物施用有效量的式(I)化合物，或其鹽、酯、酰胺或前藥，特別是其可藥用鹽或體內可水解酯。
本發明還提供了藥物組合物，它包括本文所定義的式(I)化合物，或其鹽、酯、酰胺或前藥，特別是其可藥用鹽或體內可水解酯，以及可藥用的載體。用于本發明組合物的優選式(I)化合物如上所述。
本發明組合物可以為適合口服給藥形式(例如片劑，錠劑，硬或軟膠囊，水性或油性懸浮液，乳液，可分散粉劑或顆粒劑，糖漿劑或酏劑)，局部施用形式(例如霜劑、軟膏劑、凝膠劑、或水性或油性溶液或懸浮液)，吸入給藥形式(例如細碎粉末或液體氣霧劑)，吹入給藥形式(例如細碎粉末)或非腸道給藥形式(例如用于靜脈內、皮下、肌內或肌內給藥的水性或油性無菌溶液，或直腸給藥的栓劑)。
本發明組合物可以按照常規方法用本領域公知的常規藥物賦形劑制得。因此，口服使用的組合物可以包含例如一種或多種著色劑、甜味劑、調味劑和/或防腐劑。
對于片劑而言，適宜的可藥用賦形劑包括例如惰性稀釋劑如乳糖、碳酸鈉、磷酸鈣或碳酸鈣，造粒和崩解劑如玉米淀粉或藻酸；粘合劑如淀粉；潤滑劑如硬脂酸鎂，硬脂酸或滑石；防腐劑如對羥基苯甲酸的乙酯或丙酯，以及抗氧劑，如抗壞血酸。片劑可以是未包衣的，或者加以包衣，以改善它們的崩解及隨后活性成分在胃腸道中的吸收，或者提高其穩定性和/或外觀，這兩種情況下都采用常規包衣劑和本領域公知的方法。
口服組合物可以為硬明膠膠囊形式，其中活性成分與惰性固體稀釋劑如碳酸鈣、磷酸鈣或高嶺土混合，或者還可以為軟明膠膠囊形式，其中的活性成分與水或油如花生油、液體石蠟或橄欖油混合。
水懸浮液通常含有細碎粉末形式的活性成分以及一種或多種懸浮劑，如羧甲基纖維素鈉，甲基纖維素，羥丙基甲基纖維素，藻酸鈉，聚乙烯吡咯烷酮，黃蓍膠和阿拉伯膠；分散劑或濕潤劑如卵磷脂或烯化氧與脂肪酸的縮合產物(例如硬脂酸聚氧化乙烯酯)，或環氧乙烷與長鏈脂肪醇的縮合產物(例如十七烷基乙烯氧鯨蠟醇(heptadecaethyleneoxycetanol))，或環氧乙烷與衍生自脂肪酸和己糖醇的偏酯的縮合產物(例如聚氧乙烯山梨糖醇單油酸酯)，或環氧乙烷與長鏈脂肪醇的縮合產物(例如十七烷基乙烯氧鯨蠟醇(heptadecaethyleneoxycetanol))，或環氧乙烷與衍生自脂肪酸和己糖醇的偏酯的縮合產物(例如聚氧乙烯山梨糖醇單油酸酯)，或環氧乙烷與脂肪酸和脫水己糖醇衍生的偏酯的縮合產物(例如聚乙烯脫水山梨糖醇單油酸酯)。水懸浮液還可以含有一種或多種防腐劑(如對羥基苯甲酸的乙酯或丙酯)、抗氧劑(如抗壞血酸)、著色劑、調味劑、和/或甜味劑(如蔗糖、糖精或天冬甜素)。
通過將活性成分懸浮于植物油(如花生油、橄欖油、芝麻油或椰子油)或礦物油(如液體石蠟)內，可以配得油懸浮液。油懸浮液還可以含有增稠劑如蜂蠟、硬石蠟或鯨蠟醇。為了獲得可口的口服制劑，可以加入甜味劑(如上文所述的那些)和調味劑。這些組合物的防腐可以通過加入抗氧劑如抗壞血酸實現。
適合于加水制備水懸浮液用的可分散粉劑和顆粒劑通常含有活性成分以及分散或濕潤劑、懸浮劑和一種或多種防腐劑。適宜的分散或濕潤劑以及懸浮劑的實例見上文所述。其中還可以存在有其它賦形劑如甜味劑、調味劑和著色劑。
本發明的藥物組合物還可以為水包油型乳劑。油相可以是植物油，如橄欖油或花生油，或為礦物油，例如液體石蠟或這些油的任何混合物。適宜的乳化劑例如可以為天然存在的樹膠如阿拉伯膠或黃蓍膠，天然存在的磷脂如大豆，卵磷脂，衍生自脂肪酸和脫水己糖醇的酯或偏酯(例如脫水山梨醇單油酸酯)和所述偏酯與環氧乙烷的縮合產物如聚氧乙烯脫水山梨糖醇單油酸酯。乳劑還可以含有甜味劑、調味劑和防腐劑。
糖漿劑和酏劑可以用甜味劑如甘油、丙二醇、山梨醇、天冬甜素或蔗糖配制，并且還可以含有緩和劑(demulcent)、防腐劑、調味劑和/或著色劑。
本發明的藥物組合物還可以為水性或油性無菌注射懸浮液，其制備可以按照已知方法利用一種或多種上文所述的適當分散劑或濕潤劑和懸浮劑來進行。無菌注射劑還可以是在非腸道可以接受的無毒稀釋劑或溶劑中的無菌注射溶液或懸浮液，例如在1，3-丁二醇中的溶液。
栓劑可以通過將活性成分與適當的非刺激性賦形劑混合制得，賦形劑在常溫下為固體，但在直腸溫度下會變為液體，因此能夠在直腸中熔化釋出藥物。適宜的賦形劑包括例如可可脂和聚乙二醇。
局部制劑，如霜劑、軟膏劑、凝膠劑以及水性或油性溶液或懸浮液，通常可以應用本領域公知的常規方法配制活性成分與局部給藥可接受的常規賦形劑或稀釋劑而制成。
通過吹入法給藥的組合物可以是含有平均直徑為例如30μ或更小顆粒的細碎粉末形式，粉末本身可以只包括活性成分，或者可以被一種或多種生理可接受的載體如乳糖稀釋。然后將吹入用粉末方便地裝入膠囊中，含例如1-50mg活性成分，與渦輪吸入器裝置一起配合使用，例如象吹入已知藥物色甘氨酸鈉用的那樣裝置。
通過吸入法給藥的組合物可以為常規的加壓氣霧劑形式，這種形式能夠使活性成分以含細碎固體的氣霧劑或液體微滴的形式給藥。可以使用常規氣霧劑推進劑如揮發性氟化烴或烴類，而且氣霧劑裝置能很方便地計量給出活性成分。
有關制劑的進一步資料，讀者可參見《綜合藥物化學》(Comprehensive Medicinal Chemistry)第5卷第25.2章節(CorwinHansch；Chairman of Editorial Board，Pergamon Press 1990)。
與一種或多種賦形劑混合制備單劑量形式的活性成分的量須隨受治療對象和具體給藥途徑而變。例如，欲用于人口服給藥的制劑通常含有例如0.5mg-2g活性物質以及與之混合的適當和常規量的賦形劑，后者的量可以為組合物總重量的大約5-大約98％。劑量單位形式通常含有約1mg-約500mg活性成分。關于給藥途徑(Routes ofAdministration)與劑量方案(Dosage Regimes)的進一步資料，讀者可參見《綜合藥物化學》(Comprehensive Medicinal Chemistry)第5卷第25.3章節(Corwin Hansch；Chairman of Editorial Board，Pergamon Press 1990)。
對于治療或預防目的而論，式I化合物的劑量大小必然隨疾病的性質與嚴重程度、動物或病人的年齡與性別以及給藥途徑按照公知的用藥原則而變。如上所述，式I化合物可用于治療完全或部分由aurora2激酶的作用而引起的疾病或醫學癥狀。
式I化合物用于治療或預防目的時，每日劑量范圍通常為例如每千克體重0.5mg-75mg，需要時可以以分劑量形式給予。一般來講，通過非腸道途徑給藥時給藥劑量較低。例如，對于靜脈給藥，通常使用的劑量例如為每千克體重0.5mg-30mg。類似地，對于吸入給藥，所用劑量范圍是例如每千克體重0.5mg-25mg。不過優選口服給藥。
本發明的再一方面包括用于制備治療增殖性疾病的藥物的上述式(I)化合物，或其鹽、酯、酰胺或前藥，特別是其可藥用鹽或體內可水解酯。
本發明在此用下列非限制性實施例加以說明，其中適當時可以使用專業化學人員公知的標準方法和這些實施例中所述的類似方法，除非另有說明
(i)蒸發是通過真空旋轉蒸發進行的，而且后處理步驟是在濾除殘留固體(如干燥劑)后進行；(ii)操作是在室溫下，即典型的是在18-25℃的溫度下于空氣中進行，但另有說明除外，或者除非是本領域技術人員另外在惰性氣氛如氬氣氛圍中進行；(iii)(快速)柱色譜和中壓液相色譜(MPLC)在購自E.Merck，Darmstadt，Germany的Merck Kieselgel硅膠(Art.9385)或MerckLichroprep RP-18(Art.9303)反相硅石上進行；鍵洗脫色譜法采用得自Varian Sample Preparation Products(California，USA)的Varian Mega Bond Elut筒(10g，序列碼1225-6034)進行；(iv)所給出的收率僅為說明性的，而且未必是所能獲得的最大收率；(v)式I最終產物的結構一般都通過核(通常為質子)磁共振(NMR)和質譜技術確認；質子磁共振化學位移值是在氘代DMSOd6(另有說明除外)中以δ值(距四甲基硅烷的ppm低磁場)測量，測量使用Varian Gemini 2000光譜儀在300MHz磁場強度下進行，或者使用Bruker DPX300光譜儀在300MHz磁場強度下進行；而且峰形表示如下s，單峰；d，雙峰；dd，雙二重峰；t，三重峰；q，四重峰；qu，五重峰；m，多峰；bs，寬單峰；質譜(MS)是在VG平臺上通過電噴射(electrospray)進行；(vi)自動合成采用Zymate XP自動儀25℃進行，溶液的加入由Zymate Master Laboratory Station完成，并且用Stem RS5000Reacto-Station攪拌；(vii)自動合成得到反應混合物按下所述進行后處理與純化使用Savant AES 2000真空蒸發；柱色譜使用Anachem Sympur MPLC或Jones Flashmaster MPLC系統在硅石上利用Varian Mega Bond Elut筒進行；最終產物結構的確認是在Micromass OpenLynx系統上利用下述條件通過LCMS進行，并且結果以保留時間(RT，分鐘)標出柱 4.6mm×3cm Hichrom RPB溶劑A5％甲醇/水+0.1％甲酸溶劑B5％甲醇/乙腈+0.1％甲酸流速 1.4ml/min運行時間 5分鐘，其中4.5分鐘為0-100％B梯度洗脫波長 254nm，帶寬10nm質量檢測器Micromass Platform LC注射體積 0.002ml(vii)非自動合成法制備的化合物的分析LCMS是在WatersAlliance HT系統上利用下述條件進行，并且結果以保留時間(RT，分鐘)標出柱2.0mm×5cm Phenomenex Max-RP 80A溶劑A 水溶劑B 乙腈溶劑C 甲醇+1％甲酸流速 1.1ml/min運行時間 5分鐘，其中4.5分鐘為0-100％B梯度+恒定5％溶劑C洗脫波長 254nm，帶寬10nm注射體積 0.005ml質量檢測器Micromass ZMD(viii)制備高效液相色譜(HPLC)采用下述條件在Gilson儀上進行，并且結果以保留時間(RT，分鐘)標出柱 21mm×10cm Hichrom RPB溶劑A 水+0.1％三氟乙酸溶劑B 乙腈+0.1％三氟乙酸流速18ml/min運行時間15分鐘，其中10分鐘為5-100％B梯度洗脫波長254nm，帶寬10nm注射體積2.0-4.0ml(ix)中間體通常沒有完全檢定，其純度根據薄層色譜(TLC)，HPLC，紅外(IR)，MS或NMR分析確定；本發明用下列實施例說明。實施例1-表1中化合物1的制備向4-(4-碘代苯氨基)-6，7-二甲氧基喹唑啉(6.00g，13.5mmol)、丙烯酸乙酯(1.35g，13.5mmol)和三(鄰甲苯基)膦(821mg，2.70mmol)在三乙胺(60ml)與乙腈(200ml)混合液中的溶液內加入乙酸鈀(II)(303mg，1.35mmol)，然后在惰性氛圍中加熱回流反應物20小時。冷卻反應物至室溫，倒入水中(600ml)，加乙酸乙酯(200ml)稀釋并且通過硅藻土過濾。分出有機層，水層進而用乙酸乙酯(2×200ml)萃取，并將合并的有機層用硫酸鎂干燥，之后真空蒸發溶劑。用硅膠快速色譜純化，以乙酸乙酯洗脫，得黃色固體4-(4-(2-乙氧基羰基)乙烯基)苯氨基)-6，7-二甲氧基喹唑啉(4.36g，85％收率)1H-NMR(DMSO d6)9.60(s，1H)，8.50(s，1H)，7.90(d，2H)，7.85(s，1H)，7.75(d，2H)，7.65(d，1H)，7.20(s，1H)，6.50(d，1H)，4.20(q，2H)，4.00(s，3H)，3.90(s，3H)，1.25(t，3H)MS(-ve ESI)378(M-H)-，MS(+ve ESI)380(M+H)+.
原料4-(4-碘代苯氨基)-6，7-二甲氧基喹唑啉的制備如下a) 190℃加熱4，5-二甲氧基鄰氨基苯甲酸(19.7g，100mmol)與甲酰胺(10ml)的混合物5小時。放冷混合物到大約80℃，加入50ml水。混合物然后在室溫下放置3小時。通過抽吸過濾收集固體物，接著用水(2×50ml)洗滌和真空干燥，從而得到白色固體6，7-二甲氧基-3，4-二氫喹唑啉-4-酮(3.65g，18％收率).1H-NMR(DMSO d6)12.10(s，1H)，7.95(s，1H)，7.42(s，1H)，7.11(s，1H)，3.88(s，3H)，3.84(s，3H)MS(-ve ESI)205(M-H)-.b)向6，7-二甲氧基-3，4-二氫喹唑啉-4-酮(10.0g，48.5mmol)的亞硫酰氯(200ml)溶液中逐滴加入二甲基甲酰胺(0.2ml)，加熱回流反應6小時。冷卻反應物，真空除去過量的亞硫酰氯，然后將殘留物與甲苯(2×50ml)一起共沸以除去最后殘余的亞硫酰氯。殘留物隨后溶于二氯甲烷(550ml)，并用i)碳酸氫鈉飽和水溶液(2×250ml)和ii)鹽水洗滌所得溶液，之后以硫酸鎂干燥有機相。真空蒸發溶劑得到白色固體4-氯-6，7-二甲氧基喹唑啉(10.7g，98％收率)1H-NMR(DMSO d6)8.86(s，1H)，7.42(s，1H)，7.37(s，1H)，4.00(s，3H)，3.98(s，3H)MS(+ve ESI)225(M-H)+.c)在異丙醇(200ml)中加熱回流4-碘苯胺(4.89g，22.3mmol)與4-氯-6，7-二甲氧基喹唑啉(5.00g，22.3mmol)3小時，隨后放冷反應物至室溫。抽吸過濾收集沉淀出的固體物，用乙醚(2×50ml)洗滌。干燥該物料得到白色固體4-(4-碘代苯氨基)-6，7-二甲氧基喹唑啉(9.38g，95％收率)1H-NMR(DMSO d6)11.33(s，1H)，8.81(s，1H)，8.30(s，1H)，7.80(s，1H)，7.55(d，2H)，7.30(s，1H)，4.02(s，3H)，3.93(s，3H)MS(-ve ESI)406(M-H)-，MS(+ve ESI)408(M+H)+.實施例2-表1中化合物2的制備向4-(4-碘苯氧基)-6，7-二甲氧基喹唑啉(205mg，0.50mmol)、丙烯酸乙酯(50mg，0.50mmol)和三(鄰甲苯基)膦(30mg，0.10mmol)在三乙胺(3ml)與乙腈(9ml)混合液中的溶液內加入乙酸鈀(II)(11mg，0.05mmol)，在惰性氛圍中加熱回流反應物16小時。冷卻反應物至室溫，倒入水中(30ml)，加乙酸乙酯(25ml)稀釋并通過硅藻土過濾。分出有機層，水層用乙酸乙酯(2×25ml)萃取，并將合并的有機層用硫酸鎂干燥，之后真空蒸發溶劑。用硅膠快速色譜純化，以乙酸乙酯/異己烷(1∶1)洗脫，得到奶油色固體4-(4-(2-乙氧基羰基)乙烯基)苯氧基)-6，7-二甲氧基喹唑啉(130g，68％收率)1H-NMR(DMSO d6)8.55(s，1H)，7.83(d，2H，J＝8Hz)，7.70(d，1H，J＝19Hz)，7.55(s，1H)，7.35(d，3H)，7.20(s，1H)，6.65(d，1H，J＝19Hz)，4.20(q，2H)，4.02(s，3H)，3.95(s，3H)，1.25(t，3H)MS(+ve ESI)381(M+H)+.
原料4-(4-碘苯氧基)-6，7-二甲氧基喹唑啉的制備如下110℃加熱4-氯-6，7-二甲氧基喹唑啉(224mg，1.00mmol)、碳酸鉀(152mg，1.10mmol)和4-碘苯酚(244mg，1.10mmol)在二甲基甲酰胺(4ml)中的溶液2小時，之后放冷反應物到室溫。將反應物倒入水中，抽吸過濾收集沉淀出的固體物，用乙醚(10ml)、乙酸乙酯(10ml)和異己烷(10ml)的混合液洗滌。干燥此物料，得到白色固體4-(4-碘苯氧基)-6，7-二甲氧基喹唑啉(340mg，83％收率)1H-NMR(DMSO d6)8.55(s，1H)，7.80(d，2H，J＝8Hz)，7.50(s，1H)，7.35(s，1H)，7.15(d，2H，J＝8Hz)，3.95(s，3H)，3.90(s，3H)MS(+ve ESI)409(M-H)+.實施例3-表1中化合物3的制備室溫攪拌4-(4-(2-羧基)乙烯基)苯氨基)-6，7-二甲氧基喹唑啉(150mg，0.39mmol)、4-(二甲氨基)吡啶(104mg，0.85mmol)、苯胺(39mg，0.43mmol)與1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDCI)(81mg，0.43mmol)在二甲基乙酰胺(3.0ml)中的混合物共計16小時，然后在100℃加熱4小時。冷卻反應物，加2.0N鹽酸(7.0ml，14.0mmol)進行酸化，抽吸過濾收集沉淀固體。真空干燥后得到白色固體標題化合物(144mg，87％收率)1H-NMR(DMSO d6)11.42(s，1H)，11.30(s，1H)，8.85(s，1H)，8.30(s，1H)，7.80(d，2H)，7.70(dd，4H)，7.60(d，1H)，7.3(t，3H)，7.05(t，1H)，6.9(d，1H)，4.05(s，3H)，3.95(s，3H)MS(-ve ESI)425(M-H)-，MS(+ve ESI)427(M+H)+.原料4-(4-(2-羧基)乙烯基)苯氨基)-6，7-二甲氧基喹唑啉制備如下a)向4-(4-碘代苯氨基)-6，7-二甲氧基喹唑啉(見實施例1c)(6.00g，13.5mmol)、丙烯酸乙酯(1.35g，13.5mmol)和三(鄰甲苯基)膦(821mg，2.70mmol)在三乙胺(60ml)與乙腈(200ml)混合液中的溶液內加入乙酸鈀(II)(303mg，1.35mmol)，在惰性氣氛下加熱回流反應物20小時。冷卻反應物到室溫，倒入水(600ml)中，加乙酸乙酯(200ml)稀釋并通過硅藻土過濾。分離有機層，水層進一步用乙酸乙酯(2×200ml)萃取，并將合并的有機層用硫酸鎂干燥，然后真空蒸發溶劑。硅膠快速色譜純化(乙酸乙酯洗脫)得黃色固體4-(4-(2-乙氧基羰基)乙烯基)苯氨基)-6，7-二甲氧基喹唑啉(4.36g，85％收率)1H-NMR(DMSO d6)9.6(s，1H)，8.5(s，1H)，7.9(d，2H)，7.85(s，1H)，7.75(d，2H)，7.65(d，1H)，7.2(s，1H)，6.5(d，1H)，4.2(q，2H)，4.0(s，3H)，3.9(s，3H)，1.25(t，3H)MS(-ve ESI)378(M-H)-，MS(+ve ESI)380(M+H)+.b)向4-(4-(2-乙氧基羰基)乙烯基)苯氨基)-6，7-二甲氧基喹唑啉(8.38g，22.1mmol)的乙醇(200ml)溶液中加入氫氧化鈉水溶液(3.3N，20.0ml，66.3mmol)，加熱回流反應16小時。放冷反應物至室溫，加入乙醚(200ml)，通過抽吸過濾收集固體物。將固體物溶于乙醇(200ml)，加入1.0N鹽酸(100ml，100mmol)酸化，并且通過抽吸過濾收集產生的固體物。真空干燥得黃色固體4-(4-(2-羧基)乙烯基)苯氨基)-6，7-二甲氧基喹唑啉(8.25g，97％收率)1H-NMR(DMSO d6)10.73(s，1H)，8.65(s，1H)，8.25(s，1H)，7.95(d，2H)，7.70(d，2H)，7.55(d，1H)，7.30(s，1H)，7.30(s，1H)，6.45(d，1H)，4.00(s，3H)，3.90(s，3H)MS(-ve ESI)350(M-H)-，MS(+ve ESI)352(M+H)+.c)作為另一種可供選擇的方法加熱回流4-氨基肉桂酸(199mg，1.00mmol)和4-氯-6，7-二甲氧基喹唑啉(224mg，1.00mmol)在異丙醇(200ml)中的溶液3小時，然后放冷反應物至室溫。通過抽吸過濾收集沉淀出的固體物，并用乙醚(2×50ml)洗滌。干燥該物料得到黃色固體4-(4-(2-羧基)乙烯基)苯氨基)-6，7-二甲氧基喹唑啉(350mg，90％收率).實施例4-表1中化合物4的制備類似實施例3所述反應，但以乙胺鹽酸鹽(35mg，0.43mmol)為原料(替代苯胺)，制得淺黃色固體標題化合物(109mg，74％收率)1H-NMR(DMSO d6)9.50(s，1H)，8.50(s，1H)，7.91-8.00(m，3H)，7.85(s，1H)，7.50-7.60(m，2H)，7.40(d，1H)，7.20(s，1H)，6.50(d，1H)，4.00(s，3H)，3.98(s，3H)，3.50-3.80(m，8H)，3.30(m，2H)，1.05(m，3H)MS(-ve ESI)377(M-H)-，MS(+ve ESI)379(M+H)+.實施例5-表1中化合物5的制備類似實施例3所述反應，但以嗎啉(37mg，0.43mmol)為原料，制得白色固體標題化合物(125mg，77％收率)1H-NMR(DMSO d6)11.17(s，1H)，8.80(s，1H)，8.25(s，1H)，7.80(s，4H)，7.50(d，1H)，7.30(s，1H)，7.20(s，1H)，4.00(s，3H)，3.95(s，3H)，3.50-3.80(m，8H)MS(-ve ESI)419(M-H)-.實施例6-表1中化合物6的制備向4-甲基苯胺(35mg，0.33mmol)和4-(4-(2-羧基)乙烯基)苯氨基)-6，7-二甲氧基喹唑啉(116mg，0.30mmol)中加入1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDCI)(63mg，0.33mmol)與4-(二甲氨基)吡啶(73mg，0.60mmol)在二甲基乙酰胺(3.0ml)中的溶液。室溫攪拌反應48小時，然后100℃加熱4小時，之后冷卻到室溫。加入鹽水(10ml)，靜置反應物16小時，隨后通過抽吸過濾收集固體(不產生固體沉淀物的類似反應是用二氯甲烷(2×5ml)萃取，進而真空蒸發二氯甲烷層得到固體產物)。真空干燥得到白色固體標題化合物(77.4mg，59％收率)1H-NMR(DMSO d6)10.10(s，1H)，9.65(s，1H)，8.65(s，1H)，8.00(d，2H)，7.90(s，1H)，7.70(d，2H)，7.65(d，2H)，7.55(d，1H)；7.25(s，1H)，7.15(d，2H)，6.80(d，1H)，4.02(s，3H)，3.95(s，3H)，2.30(s，3H)MS(+ve ESI)441(M+H)+.實施例7-表1中化合物7的制備類似實施例6所述反應，但以1，3-二甲基丁胺(33mg，0.33mmol)為原料，從而制得白色固體標題化合物(97.2mg，75％收率)1H-NMR(DMSO d6)9.65(s，1H)，8.65(s，1H)，7.90-7.95(m，3H)，7.85(d，1H)，7.60(d，2H)，7.40(d，1H)，7.25(s，1H)，6.55(d，1H)，4.02(s，4H)，3.95(s，3H)，1.60-1.70(m，1H)，1.40-1.50(m，1H)，1.20-1.30(m，1H)，1.10(d，3H)，0.85-0.90(m，6H)MS(+ve ESI)435(M+H)+.實施例8-表1中化合物8的制備類似實施例6所述反應，但以2-氯芐胺(47mg，0.33mmol)為原料，從而制得白色固體標題化合物(97.1mg，68％收率)1H-NMR(DMSO d6)9.70(s，1H)，8.60-8.65(m，1H)，8.55(s，1H)，7.95(d，2H)，7.90(s，1H)，7.60(d，2H)，7.45-7.50(m，2H)，7.30-7.42(m，3H)，7.25(s，1H)，6.70(d，1H)，4.50(d，2H)，4.02(s，3H)，3.95(s，3H)MS(+ve ESI)475(M+H)+.實施例9-表1中化合物9的制備類似實施例6所述反應，但以3-氨基-1，2-丙二醇(30mg，0.33mmol)為原料，從而制得白色固體標題化合物(72.7mg，57％收率)1H-NMR(DMSO d6)9.62(s，1H)，8.55(s，1H)，8.10-8.05(m，1H)，7.95(d，2H)，7.90(s，1H)，7.60(d，2H)，7.45(d，2H)，7.25(s，1H)，6.70(d，1H)，4.85(d，1H)，4.60(t，1H)，4.02(s，3H)，3.95(s，3H)，3.40-3.30(m，4H)MS(+ve ESI)425(M+H)+.實施例10-表1中化合物10的制備類似實施例6所述反應，但以異丁胺(24mg，0.33mmol)為原料，從而制得白色固體標題化合物(87.5mg，72％收率)1H-NMR(DMSO d6)9.62(s，1H)，8.55(s.1H)，8.05-8.10(m，1H)，7.95(d，2H)，7.90(s.1H)，7.60(d，2H)，7.45(d，1H)，7.25(s，1H)，6.65(d，1H)，4.02(s，3H)，3.95(s，3H)，3.00-3.10(m，2H)，1.70-1.80(m，1H)，0.92(s，3H)，0.88(s，3H)MS(+ve ESI)407(M+H)+.實施例11-表1中化合物11的制備類似實施例6所述反應，但以2-甲基-1-戊胺(33mg，0.33mmol)為原料，從而制得白色固體標題化合物(88.4mg，75％收率)1H-NMR(DMSO d6)9.65(s，1H)，8.55(s，1H)，8.00-8.05(m，1H)，7.97(d，2H)，7.95(s，1H)，7.60(d，2H)，7.45(d，1H)，7.25(s，1H)，6.65(d，1H)，4.00(s，3H)，3.95(s，3H)，3.10-3.20(m，1H)，2.95-3.07(m，1H)，1.60-1.70(m，1H)，1.20-1.40(m，3H)，1.05-1.15(m，1H)，0.85-0.90(m，6H)MS(+ve ESI)435(M+H)+.實施例12-表1中化合物12的制備類似實施例6所述反應，但以2-甲氧基乙胺(25mg，0.33mmol)為原料，從而制得白色固體標題化合物(87mg，71％收率)1H-NMR(DMSO d6)9.68(s，1H)，8.55(s，1H)，8.10-8.20(m，1H)，7.95(d，2H)，7.90(s，1H)，7.60(d，2H)，7.45(d，1H)，7.25(s，1H)，6.65(d，1H)，4.00(s，3H)，3.95(s，3H)，3.35-3.50(m，4H)，3.30(s，3H)MS(+ve ESI)409(M+H)+.實施例13-表1中化合物13的制備類似實施例6所述反應，但以炔丙胺(18mg，0.33mmol)為原料，從而制得白色固體標題化合物(8.4mg，7％收率)1H-NMR(DMSO d6)9.60(s，1H)，8.52(s，1H)，8.45-8.50(m，1H)，7.95(d，2H)，7.90(s，1H)，7.62(d，2H)，7.50(d，1H)，7.25(s，1H)，6.70(d，1H)，4.00-4.05(m，2H)，3.98(s，3H)，3.95(s，3H)，3.15(s，1H)MS(+ve ESI)389(M+H)+.實施例14-表1中化合物14的制備類似實施例6所述反應，但以3-(二甲氨基)正丙胺(34mg，0.33mmol)為原料，從而制得白色固體標題化合物(58.7mg，45％收率)1H-NMR(DMSO d6)9.60(s，1H)，8.55(s，1H)，8.05(t，1H)，7.96(d，2H)，7.88(s，1H)，7.60(d，2H)，7.40(d，1H)，7.25(s，1H)，6.70(d，1H)，4.00(s，3H)，3.95(s，3H)，3.20-3.25(m，2H)，2.20-2.30(m，2H)，2.15(s，6H)，1.55-1.65(m，2H)MS(+ve ESI)436(M+H)+.實施例15-表1中化合物15的制備類似實施例6所述反應，但以正丁胺(24mg，0.33mmol)為原料，從而制得白色固體標題化合物(96.4mg，79％收率)1H-NMR(DMSO d6)9.65(s，1H)，8.52(s，1H)，8.05(t，1H)，7.95(s，1H)，7.92(d，2H)，7.60(d，2H)，7.42(d，1H)，7.23(s，1H)，6.70(d，1H)，4.00(s，3H)，3.95(s，3H)，3.15-3.25(m，2H)，1.42-1.52(m，2H)，1.30-1.38(m，2H)，0.90-0.95(m，3H)MS(+ve ESI)407(M+H)+.實施例16-表1中化合物16的制備類似實施例6所述反應，但以2-氨基-1-甲氧基丙烷(29mg，0.33mmol)為原料，從而制得白色固體標題化合物(52.6mg，42％收率)1H-NMR(DMSO d6)9.70(s，1H)，8.55(s，1H)，8.00-7.95(m，3H)，7.95(s，1H)，7.60(d，2H)，7.40(d，1H)，7.21(s，1H)，6.70(d，1H)，4.02-4.12(m，1H)，4.00(s，3H)，3.98(s，3H)，3.22-3.40(m，5H)，1.11(d，3H)MS(+ve ESI)423(M+H)+.實施例17-表1中化合物17的制備類似實施例6所述反應，但以3-甲基苯胺(35mg，0.33mmol)為原料，從而制得白色固體標題化合物(88.8mg，67％收率)1H-NMR(DMSO d6)10.10(s，1H)，9.65(s，1H)，8.55(s，1H)，8.00(d，2H)，7.90(s，1H)，7.67(d，2H)，7.60(s，1H)，7.50-7.55(m，2H)，7.20-7.30(m，2H)，6.90-6.95(m，1H)，6.80(d，1H)，4.02(s，3H)，3.95(s，3H)，2.35(s，3H)MS(+ve ESI)441(M+H)+.實施例18-表1中化合物18的制備類似實施例6所述反應，但以3-甲基環己胺(37mg，0.33mmol)為原料，從而制得白色固體標題化合物(111mg，83％收率)1H-NMR(DMSO d6)9.60(s，1H)，8.51(s，1H)，7.84-7.96(m，4H)，7.57(d，2H，J＝8Hz)，7.40(d，1H，J＝16Hz)，7.21(s，1H)，6.55(d，1H，J＝16Hz)，4.00(s，3H)，3.96(s，3H)，3.65(m，1H)，1.40-1.84(m，7H)，1.20-1.37(m，1H)，1.00-1.15(m，1H)，0.93(d，3H，J＝7Hz)，0.77-0.91(m，1H)MS(+ve ESI)447(M+H)+.實施例19-表1中化合物19的制備類似實施例6所述反應，但以2-氨基-2，3-二氫化茚鹽酸鹽(44mg，0.33mmol)為原料，從而制得白色固體標題化合物(117.8mg，84％收率)1H-NMR(DMSO d6)9.75(s，1H)，8.50(s，1H)，8.40(d，1H)，7.90-8.00(m，3H)，7.60(d，2H)，7.45(d，1H)，7.25-7.30(m，2H)，7.20(s，1H)，7.10-7.15(m，2H)，6.60(d，1H)，4.65-4.75(m，1H)，4.02(s，3H)，3.95(s，3H)，3.20-3.30(m，2H)，2.80-2.90(m，2H)MS(+ve ESI)467(M+H)+.實施例20-表1中化合物20的制備類似實施例6所述反應，但以4-氯四氫-3-噻吩胺-1，1-二氧化物鹽酸鹽(55mg，0.33mmol)為原料，從而制得白色固體標題化合物(88.2mg，58％收率)1H-NMR(DMSO d6)9.61(s，1H)，8.77(d，1H，J＝6Hz)，8.52(s，1H)，7.94(d，2H，J＝8Hz)，7.87(s，1H)，7.62(d，2H，J＝8Hz)，7.50(d，1H，J＝16Hz)，7.21-7.28(m，2H)，7.25(s，1H)，6.91(m，1H)，6.57(d，1H，J＝16Hz)，5.27-5.33(m，1H)，4.00(s，3H)，3.97(s，3H)，3.78(dd，1H，J＝5，8Hz)，3.11(dd，1H，J＝5，8Hz)MS(+ve ESI)504(M+H)+.實施例21-表1中化合物21的制備類似實施例6所述反應，但以5-甲基-2-(氨基甲基)呋喃(37mg，0.33mmol)為原料，從而制得白色固體標題化合物(99.2mg，74％收率)1H-NMR(DMSO d6)9.60(s，1H)，8.55(s，1H)，8.55(t，1H)，7.90(d，2H)，7.88(s，1H)，7.60(d，2H)，7.45(d，1H)，7.25(s，1H)，6.63(d，1H)，6.20(d，1H)，6.00(d，1H)，4.35(d，2H)，4.02(s，3H)，3.95(s，3H)，2.25(s，3H)MS(+ve ESI)445(M+H)+.實施例22-表1中化合物22的制備類似實施例6所述反應，但以環丙胺(18mg，0.33mmol)為原料，從而制得白色固體標題化合物(79.4mg，68％收率)1H-NMR(DMSO d6)9.60(s，1H)，8.55(s，1H)，8.15(d，1H)，7.95(d，2H)，7.90(s，1H)，7.60(d，2H)，7.40(d，1H)，7.22(s，1H)，6.55(d，1H)，4.02(s，3H)，3.95(s，3H)，2.80-2.90(m，1H)，0.70-0.75(m，2H)，0.50-0.55(m，2H)MS(+ve ESI)391(M+H)+實施例23-表1中化合物23的制備類似實施例6所述反應，但以環丁胺(23mg，0.33mmol)為原料，從而制得白色固體標題化合物(81.6mg，67％收率)1H-NMR(DMSO d6)9.58(s，1H)，8.50(s，1H)，8.30(d，1H)，7.95(d，2H)，7.90(s，1H)，7.60(d，2H)，7.40(d，1H)，7.22(s，1H)，6.55(d，1H)，4.30-4.40(m，1H)，4.02(s，3H)，3.95(s，3H)，2.20-2.30(m，2H)，1.90-2.00(m，2H)，1.65-1.75(m，2H)MS(+ve ESI)405(M+H)+.實施例24-表1中化合物24的制備類似實施例6所述反應，但以環戊胺(28mg，0.33mmol)為原料，從而制得白色固體標題化合物(81.6mg，65％收率)1H-NMR(DMSO d6)9.60(s，1H)，8.55(s，1H)，8.00(d，1H)，7.92(d，2H)，7.90(s，1H)，7.60(d，2H)，7.40(d，1H)，7.22(s，1H)，6.55(d，1H)，4.10-4.20(m，1H)，4.02(s，3H)，3.95(s，3H)，1.85-1.95(m，2H)，1.75-1.85(m，2H)，1.50-1.60(m，2H)，1.40-1.50(m，2H)MS(+ve ESI)419(M+H)+.實施例25-表1中化合物25的制備類似實施例6所述反應，但以環己胺(36mg，0.33mmol)為原料，從而制得白色固體標題化合物(94.7mg，73％收率)1H-NMR(DMSO d6)9.60(s，1H)，8.55(s，1H)，7.93(m，3H)，7.90(s，1H)，7.60(d，2H)，7.40(d，1H)，7.22(s，1H)，6.60(d，1H)，4.02(s，3H)，3.95(s，3H)，3.55-3.70(m，1H)，1.78-1.85(m，2H)，1.65-1.75(m，2H)，1.50-1.60(m，1H)，1.15-1.40(m，5H)MS(+ve ESI)433(M+H)+.實施例26-表1中化合物26的制備類似實施例6所述反應，但以哌啶(28mg，0.33mmol)為原料，從而制得白色固體標題化合物(89.9mg，72％收率)1H-NMR(DMSO d6)9.55(s，1H)，8.50(s，1H)，7.90(d，2H)，7.85(s，1H)，7.70(d，2H)，7.45(d，1H，J＝16Hz)，7.20(s，1H)，7.15(d，1H，J＝16Hz)，3.98(s，3H)，3.93(s，3H)，3.65(m，2H)，3.55(m，2H)，1.63(m，2H)，1.50(m，4H)MS(+ve ESI)419(M+H)+.實施例27-表1中化合物27的制備類似實施例6所述反應，但以3-氨基吡啶(31mg，0.33mmol)為原料，從而制得白色固體標題化合物(41.5mg，32％收率)1H-NMR(DMSO d6)10.39(s，1H)，9.60(s，1H)，8.85(m，1H)，8.55(s，1H)，8.30(m，1H)，8.15(m，1H)，8.00(d，2H)，7.88(s，1H)，7.7(d，2H)，7.65(d，1H，J＝16Hz)，7.40(m，1H)，7.25(s，1H)，6.80(d，1H J＝16Hz)，3.99(s，3H)，3.95(s，3H)MS(+ve ESI)428(M+H)+.實施例28-表1中化合物28的制備類似實施例6所述反應，但以2-甲氧基苯胺(41mg，0.33mmol)為原料，從而制得白色固體標題化合物(36.9mg，27％收率)1H-NMR(DMSO d6)9.65(s，1H)，9.28(s，1H)，8.55(s，1H)，8.20(m，1H)，7.95(d，2H)，7.90(s，1H)，7.65(d，2H)，7.55(d，1H，J＝16Hz)，7.23(s，1H)，7.13(d，1H，J＝16Hz)，7.08(m，2H)，6.95(m，1H)，4.0(s，3H)，3.98(s，3H)，3.9(s，3H)MS(+ve ESI)457(M+H)+.實施例29-表1中化合物29的制備類似實施例6所述反應，但以2-甲基苯胺(35mg，0.33mmol)為原料，從而制得白色固體標題化合物(90.2mg，68％收率)1H-NMR(DMSO d6)9.65(s，1H)，9.50(s，1H)，8.55(s，1H)，7.95(d，2H)，7.88(s，1H)，7.68(d，2H)，7.60(m，1H)，7.55(d，1H，J＝16Hz)，7.20(m，3H)，7.10(m，1H)，6.95(d，1H，J＝16Hz)，4.00(s，3H)，3.95(s，3H)，2.30(s，3H)MS(+ve ESI)441(M+H)+.實施例30-表1中化合物30的制備類似實施例6所述反應，但以3-甲氧基苯胺(41mg，0.33mmol)為原料，從而制得白色固體標題化合物(75.1mg，55％收率)1H-NMR(DMSO d6)10.15(s，1H)，9.65(s，1H)，8.55(s，1H)，7.95(d，2H)，7.90(s，1H)，7.65(d，2H)，7.60(d，1H，J＝16Hz)，7.43(s，1H)，7.20(m，3H)，6.78(d，1H，J＝16Hz)，6.65(m，1H)，4.00(s，3H)，3.98(s，3H)，3.78(s，3H)MS(+ve ESI)457(M+H)+.實施例31-表1中化合物31的制備類似實施例6所述反應，但以4-氯苯胺(42mg，0.33mmol)為原料，從而制得白色固體標題化合物(76.7mg，56％收率)1H-NMR(DMSO d6)10.35(s，1H)，9.70(s，1H)，8.55(s，1H)，8.00(d，2H)，7.90(s，1H)，7.75(d，2H)，7.65(d，2H)，7.60(d，1H，J＝16Hz)，7.40(d，2H)，7.25(s，1H)，6.80(d，1H，J＝16Hz)，4.00(s，3H)，3.95(s，3H)MS(+ve ESI)461(M+H)+.實施例32-表1中化合物32的制備加熱回流4-氯-6-甲氧基-7-(3-嗎啉代丙氧基)喹唑啉(6.90g，20.0mmol)與4-氨基肉桂酸鹽酸鹽(4.16g，20.8mmol)在異丙醇(100ml)中的溶液3小時，隨后放冷至室溫。通過抽吸過濾收集沉淀出的固體物，以乙醚(2×50ml)洗滌。干燥該產物得到白色固體標題化合物(7.28g，68％收率)1H-NMR(DMSO d6)11.58(s，1H)，11.14(s，1H)，8.85(s，1H)，8.45(s，1H)，7.80(dd，4H)，7.60(d，1H，J＝16Hz)，7.45(s，1H)，6.55(d，1H，J＝16Hz)，4.30(t，2H)，4.05(s，3H)，3.95(m，2H)，3.80(m，2H)，3.50(m，2H)，3.30(m，2H)，3.10(m，2H)，2.30(m，2H)MS(+ve ESI)465(M+H)+.
原料4-氯-6-甲氧基-7-(3-嗎啉代丙氧基)喹唑啉制備如下a)室溫攪拌嗎啉(261ml，3.00mol)與1-溴-3-氯丙烷(148ml，1.50mol)在甲苯(900ml)中的混合物18小時。加入另一份1-溴-3-氯丙烷(25ml，0.25mol)，進一步攪拌反應1小時，然后濾除沉淀固體，真空濃縮濾液。蒸餾油狀粗品得到N-(3-氯丙基)-嗎啉(119.3g，49％收率)餾分，沸點70-80℃/2.6mmHg。1H-NMR(DMSO d6)3.65(t，2H)，3.55(m，4H)，2.40(t，2H)，2.39(m，4H)，1.85(m，2H)MS(+ve ESI)164(M+H)+.b)80℃下用30分鐘以上時間向香草酸乙酯(98g，0.50mol)與碳酸鉀粉末(104mg，0.75mol)在二甲基甲酰胺(300ml)中的溶液內逐滴加入N-(3-氯丙基)嗎啉(90g，0.55mol)。80℃加熱反應90分鐘，冷卻到室溫，過濾并且真空濃縮濾液。粗產物中加入乙醚(1000ml)，過濾并且用水(2×200ml)和鹽水(200ml)洗滌。真空蒸發溶劑得到淺黃色油狀物3-甲氧基-4-(3-嗎啉代丙氧基)苯甲酸乙酯(161.5g，100％收率)，隨后靜置結晶得到一淺黃色固體1H-NMR(DMSO d6)7.55(dd，1H)，7.40(d，1H)，7.05(d，1H)，4.30(q，2H)，4.05(t，2H)，3.80(s，3H)，3.55(m，4H)，2.40(t，2H)，2.35(m，4H)，1.90(m，2H)，1.30(t，3H)MS(-ve ESI)324(M-H)-，c)用50分鐘以上時間，于5℃下向3-甲氧基-4-(3-嗎啉代丙氧基)苯甲酸乙酯(76.5g，0.237mol)在二氯甲烷(600ml)、乙酸(300ml)和水(70ml)中的攪拌溶液構成的兩相體系內小心加入濃硫酸(110ml)和濃硝酸(19.0ml，0.289mol)。用18小時以上時間溫熱反應液至室溫，分出水相，并通過加40％氫氧化鈉水溶液(775ml)調節水相的pH至9。用二氯甲烷(3×600ml)萃取水相，隨后真空蒸發溶劑，得到黃色膠狀物3-甲氧基-4-(3-嗎啉代丙氧基)-6-硝基苯甲酸乙酯(141.3g，86％收率)1H-NMR(CDCl3)7.50(s，1H)，7.10(s，1H)，4.40(q，2H)，4.20(t，2H)，4.00(s，3H)，3.70(m，4H)，2.50(t，2H)，2.45(m，4H)，2.05(m，2H)，1.40(t，3H)MS(+ve ESI)369(M+H)+.d)在氫氣氛中攪拌3-甲氧基-4-(3-嗎啉代丙氧基)-6-硝基苯甲酸乙酯(132.2g，359mmol)和10％鈀-碳(3.0g)在乙醇(200ml)與乙酸乙酯(2000ml)混合液中形成的懸浮液共計18小時。濾除催化劑，進而真空蒸發溶劑，從而得到棕色油狀物3-甲氧基-4-(3-嗎啉代丙氧基)-6-氨基苯甲酸乙酯(122g，100％收率)1H-NMR(DMSO d6)7.15(s，1H)，6.40(s，2H)，6.35(s，1H)，4.20(q，2H)，3.95(t，2H)，3.65(s，3H)，3.55(m，4H)，2.40(t，2H)，2.35(m，4H)，1.85(m，2H)，1.25(t，3H)MS(-ve ESI)337(M-H)-，MS(+ve ESI)339(M+H)+.e)180℃加熱3-甲氧基-4-(3-嗎啉代丙氧基)-6-氨基苯甲酸乙酯(130g，384mmol)的甲酰胺(280ml)溶液3小時，期間從反應物中餾出少量(25ml)液體。冷卻反應到125℃，真空蒸發過量的甲酰胺。殘留固體用異丙醇(100ml)研制，之后真空干燥，得到淺棕色固體物6-甲氧基-7-(3-嗎啉代丙氧基)-3，4-二氫喹唑啉-4-酮(83.0g，68％收率)1H-NMR(DMSO d6)12.0(s，1H)，7.95(s，1H)，7.45(s，1H)，7.10(s，1H)，4.15(t，2H)，3.85(s，3H)，3.60(m，4H)，2.45(t，2H)，2.35(m，4H)，1.90(m，2H)MS(-ve ESI)318(M-H)-，MS(+ve ESI)320(M+H)+.f)向6-甲氧基-7-(3-嗎啉代丙氧基)-3，4-二氫-喹唑啉-4-酮(83.0g，261mmol)的亞硫酰氯(700ml)溶液內逐滴加入二甲基甲酰胺(2.0ml)，加熱回流反應3.5小時。冷卻反應物，真空除去過量的亞硫酰氯，向殘留物加入水(500ml)，進而加碳酸氫鈉飽和水溶液(300ml)調節此水溶液的pH至9。水相用二氯甲烷(2×400ml)萃取，用鹽水(400ml)洗滌有機溶液，然后真空除去溶劑。用乙酸乙酯(150ml)研制固體殘留物，之后真空干燥，得到淺棕色固體4-氯-6-甲氧基-7-(3-嗎啉代丙氧基)喹唑啉(53g，60％收率)1H-NMR(CDCl3)8.85(s，1H)，7.39(s，1H)，7.38(s，1H)，4.30(t，2H)，4.05(s，3H)，3.70(m，4H)，2.60(t，2H)，2.50(m，4H)，2.10(m，2H)MS(+ve ESI)338(M+H)+.實施例33-表1中化合物33的制備向4-(4-(2-羧基乙烯基)苯氨基)-6-甲氧基-7-(3-嗎啉代丙氧基)喹唑啉(232mg，0.50mmol)在二甲基甲酰胺(4.5ml)中的懸浮液內加入六氟磷酸0-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲鎓鹽(HATU)(192mg，0.50mmol)。5分鐘后，加入環己基甲胺(56.9g，0.50mmol)，并于50℃加熱反應16小時。冷卻反應物，倒入水(10ml)中，加入乙醚(5ml)。通過抽吸過濾收集沉淀出的固體物，并用水(10ml)和乙醚(10ml)洗滌。真空干燥固體物得到白色固體標題化合物(149.9mg，59％收率)1H-NMR(DMSO d6)9.55(s，1H)，8.45(s，1H)，8.00(t，1H)，7.90(d，2H)，7.85(s，1H)，7.65(d，2H)，7.40(d，1H，J＝16Hz)，7.20(s，1H)，6.60(d，1H，J＝16Hz)，4.20(t，2H)，4.00(s，3H)，3.60(m，4H)，3.05(t，2H)，2.45(t，2H)，2.40(m，4H)，1.95(t，2H)，1.70(m，4H)，1.20(m，4H)，0.90(m，2H)MS(+ve ESI)560(M+H)+.實施例34-表1中化合物34的制備類似實施例33所述反應，但以5-氨基-2-氯吡啶(64.6mg，0.50mmol)為原料，從而制得白色固體標題化合物(188.2mg，72％收率)1H-NMR(DMSO d6)10.51(s，1H)，9.60(s，1H)，8.70(d，1H)，8.80(s，1H)，8.20(dd，1H)，7.95(d，2H)，7.85(s，1H)，7.65(d，2H)，7.65(d，1H，J＝16Hz)，7.50(d，1H)，7.20(s，1H)，6.75(d，1H，J＝16Hz)，4.20(t，2H)，3.99(s，3H)，3.60(m，4H)，2.45(t，2H)，2.40(m，4H)，1.95(m，2H)MS(+ve ESI)575(M+H)+.實施例35-表1中化合物35的制備類似實施例33所述反應，但以糠胺(48.8mg，0.50mmol)為原料，從而制得白色固體標題化合物(200mg，81％收率)1H-NMR(DMSO d6)9.55(s，1H)，8.45(m，2H)，7.9(d，2H)，7.85(s，1H)，7.60(m，3H)，7.45(d，1H，J＝16Hz)，7.20(s，1H)，6.60(d，1H，J＝16Hz)，6.40(m，1H)，6.25(m，1H)，4.40(d，2H)，4.20(t，2H)，3.99(s，3H)，3.60(m，4H)，2.45(t，2H)，2.40(m，4H)，1.95(m，2H)MS(+ve ESI)544(M+H)+.實施例36-表1中化合物36的制備類似實施例33所述反應，但以四氫糠胺(50.8mg，0.50mmol)為原料，從而制得白色固體標題化合物(61.6mg，25％收率)1H-NMR(DMSO d6)9.60(s，1H)，8.50(s，1H)，8.05(t，1H)，7.90(d，2H)，8.85(s，1H)，7.59(d，2H)，7.40(d，1H，J＝16Hz)，7.20(s，1H)，6.60(d，1H，J＝16Hz)，4.20(t，2H)，3.99(s，3H)，3.90(m，1H)，3.80(m，1H)，3.60(m，1H)，3.59(m，4H)，3.25(m，2H)，2.45(t，2H)，2.40(m，4H)，1.95(m，2H)，1.80(m，2H)，1.60(m，2H)MS(+ve ESI)548(M+H)+.實施例37-表1中化合物37的制備類似實施例33所述反應，但以2-氨基吡啶(47.3mg，0.50mmol)為原料，從而制得白色固體標題化合物(42.4mg，17％收率)1H-NMR(DMSO d6)10.60(s，1H)，9.60(s，1H)，8.50(s，1H)，8.30(m，1H)，8.25(d，1H)，7.95(d，2H)，7.80(m，2H)，7.60(m，3H)，7.20(s，1H)，7.10(m，1H)，6.99(d，1H，J＝16Hz)，4.20(t，2H)，3.99(s，3H)，3.60(m，4H)，2.45(t，2H)，2.40(m，4H)，1.99(m，2H)MS(+ve ESI)541(M+H)+.實施例38-表1中化合物38的制備類似實施例33所述反應，但以3-氨基吡啶(47.3mg，0.50mmol)為原料，從而制得白色固體標題化合物(138.9mg，57％收率)1H-NMR(DMSO d6)10.35(s，1H)，9.60(s，1H)，8.85(m，1H)，8.50(s，1H)，8.25(d，1H)，8.15(dd，1H)，7.99(d，2H)，7.85(s，1H)，7.65(d，2H)，7.60(d，1H，J＝16Hz)，7.40(m，1H)，6.80(d，1H，J＝16Hz)，4.20(t，2H)，3.99(s，3H)，3.60(m，4H)，2.45(t，2H)，2.40(m，4H)，1.99(m，2H)MS(+ve ESI)541(M+H)+.實施例39-表1中化合物39的制備類似實施例33所述反應，但以2-氨基甲苯(53.9mg，0.50mmol)為原料，從而制得白色固體標題化合物(239mg，95％收率)1H-NMR(DMSO d6)9.60(s，1H)，9.40(s，1H)，8.50(s，1H)，8.95(d，2H)，8.85(s，1H)，7.60(m，4H)，7.20(m，3H)，7.05(m，1H)，6.90(d，1H，J＝16Hz)，4.20(t，2H)，3.99(s，3H)，3.60(m，4H)，2.45(t，2H)，2.40(m，4H)，2.25(s，3H)，1.99(m，2H)MS(+ve ESI)554(M+H)+.實施例40-表1中化合物40的制備類似實施例33所述反應，但以1，3-二甲基丁胺(50.9mg，0.50mmol)為原料，從而制得白色固體標題化合物(61.8mg，25％收率)1H-NMR(DMSO d6)9.55(s，1H)，8.50(s，1H)，7.90(d，2H)，7.85(s，1H)，7.80(m，1H)，7.59(d，2H)，7.40(d，1H，J＝16Hz)，7.20(s，1H)，6.50(d，1H，J＝16Hz)，4.20(t，2H)，3.99(s，3H)，3.99(m，1H)，3.60(m，4H)，2.45(t，2H)，2.40(m，4H)，1.95(m，2H)，1.60(m，1H)，1.40(m，1H)，1.20(m，1H)，1.05(d，3H)，0.85(d，6H)MS(+ve ESI)548(M+H)+.實施例41-表1中化合物41的制備類似實施例33所述反應，但以2，2，2-三氟乙胺鹽酸鹽(67.8mg，0.50mmol)為原料，從而制得白色固體標題化合物(7.8mg，3％收率)1H-NMR(DMSO d6)9.59(s，1H)，8.65(t，1H)，8.50(s，1H)，7.90(d，2H)，7.85(s，1H)，7.60(d，2H)，7.50(d，1H，J＝16Hz)，7.20(s，1H)，6.60(d，1H，J＝16Hz)，4.20(t，2H)，4.05(m，2H)，3.99(s，3H)，3.60(m，4H)，2.45(t，2H)，2.40(m，4H)，1.99(m，2H)MS(+ve ESI)546(M+H)+.實施例42-表1中化合物42的制備類似實施例33所述反應，但以異丁胺(36.8mg，0.50mmol)為原料，從而制得白色固體標題化合物(39.1mg，17％收率)1H-NMR(DMSO d6)9.52(s，1H)，8.50(s，1H)，7.95(m，1H)，7.90(d，2H)，7.85(s，1H)，7.58(d，2H)，7.38(d，1H，J＝16Hz)，7.20(s，1H)，6.60(d，1H，J＝16Hz)，4.18(t，2H)，3.97(s，3H)，3.58(m，4H)，3.00(t，2H)，2.48(t，2H)，2.35(m，4H)，1.95(m，2H)，1.75(m，1H)，0.89(d，6H)MS(+ve ESI)520(M+H)+.實施例43-表1中化合物43的制備類似實施例33所述反應，但以2-甲基戊胺(50.9mg，0.50mmol)為原料，從而制得白色固體標題化合物(33.5mg，13％收率)1H-NMR(DMSO d6)9.54(s，1H)，8.49(s，1H)，7.98(t，1H)，7.90(d，2H)，7.84(s，1H)，7.56(d，2H)，7.39(d，1H)，7.19(s，1H)，6.59(d，1H)，4.18(t，2H)，3.96(s，3H)3.53-3.61(m，4H)，2.93-3.16(m，2H)，2.45(t，2H)，2.32-2.41(m，4H)，1.87-2.02(m，2H)，0.95-1.68(m，5H)，0.85(t，3H)，0.84(d，3H)MS(+ve ESI)548(M+H)+.實施例44-表1中化合物44的制備類似實施例33c所述反應，但以4-氯-6-甲氧基-7-芐氧基喹唑啉(150mg，0.50mmol)和4-氨基肉桂酸乙酯(96mg，0.50mmol)為原料，從而制得灰白色固體標題化合物(226mg，92％收率)1H-NMR(DMSO d6)11.25(s，1H)，8.83(s，1H)，8.28(s，1H)，7.81(m，4H)，7.66(d，1H，J＝15Hz)，7.5(d，2H)，7.38-7.45(m，4H)，6.63(d，1H，J＝16Hz)，5.34(s，2H)，4.21(q，2H)，4.02(s，3H)，1.26(t，3H)MS(+ve ESI)456(M+H)+.原料4-氯-6-甲氧基-7-芐氧基喹唑啉的制備如下a)攪拌下，加熱回流2-氨基-4-芐氧基-5-甲氧基苯甲酰胺(10g，0.04mol)[按照J.Med.Chem.1977，20，146-149所述制得]與Gold氏試劑(7.4g，0.05mol)在二噁烷(100ml)中的混合物24小時。向反應混合物中加入乙酸鈉(3.02g，0.037mol)和乙酸(1.65ml，0.029mol)，進一步加熱3小時。蒸發除去揮發物，向殘留物中加入水，過濾收集固體物，水洗并且干燥。以乙酸重結晶得到白色固體7-芐氧基-6-甲氧基-3，4-二氫喹唑啉-4-酮(8.7g，84％收率).b)向6-甲氧基-7-芐氧基-3，4-二氫喹唑啉-4-酮(5.00g，17.9mmol)的亞硫酰氯(100ml)溶液中逐滴加入二甲基甲酰胺(0.2ml)，加熱回流反應1小時。冷卻反應物，真空除去過量的亞硫酰氯，進而將殘留物與甲苯(3×50ml)共沸以除去最后殘余的亞硫酰氯。將殘留物溶于二氯甲烷(550ml)，所得溶液用碳酸氫鈉飽和水溶液(100ml)和水(100ml)洗滌，并用硫酸鎂干燥有機相。真空蒸發溶劑得到淺棕色固體4-氯-6-甲氧基-7-芐氧基喹唑啉(4.80g，90％收率)1H-NMR(DMSO d6)8.85(s，1H)，7.58(s，1H)，7.50(d，2H)，7.40(m，4H)，5.35(s，2H)，4.00(s，3H)MS(+ve ESI)301(M+H)+.實施例45-表1中化合物45的制備類似實施例33所述反應，但以2-氨基-2，3-二氫化茚(66.9mg，0.50mmol)為原料，從而制得白色固體標題化合物(189mg，72％收率)1H-NMR(DMSO d6)9.54(s，1H)，8.47(s，1H)，8.33(d，1H)，7.89(d，2H)，7.83(s，1H)，7.55(d，2H)，7.42(d，1H)，7.10-7.27(m，5H)，6.55(d，1H)，4.51-4.63(m，1H)，4.18(t，2H)，3.96(s，3H)，3.53-3.60(m，4H)，3.15-3.25(m，2H)，2.75-2.87(m，2H)，2.44(t，2H)，2.33-2.40(m，4H)，1.87-2.01(m，2H)MS(+ve ESI)580(M+H)+.實施例46-表1中化合物46的制備類似實施例33所述反應，但以2-噻吩乙胺(63.9mg，0.50mmol)為原料，從而制得白色固體標題化合物(272mg，100％收率)1H-NMR(DMSO d6)9.55(s，1H)，8.48(s，1H)，8.18(t，1H)，7.90(d，2H)，7.84(s，1H)，7.57(d，2H)，7.41(d，1H)，7.30-7.34(m，1H)，7.19(s，1H)，6.87-6.97(m，2H)，6.55(d，1H)，4.19(t，2H)，3.96(s，3H)，3.53-3.62(m，4H)，3.38-3.47(m，2H)，3.00(t，2H)，2.46(t，2H)，2.33-2.42(m，4H)，1.89-2.01(m，2H)MS(+ve ESI)574(M+H)+.實施例47-表1中化合物47的制備類似實施例33所述反應，但以5-甲基-2-(氨基甲基)呋喃(55.9mg，0.50mmol)為原料，從而制得白色固體標題化合物(191mg，76％收率)1H-NMR(300MHz，DMSO d6)9.54(s，1H)，8.48(s，1H)，8.43(t，1H)，7.90(d，2H)，7.84(s，1H)，7.56(d，2H)，7.43(d，1H)，7.20(s，1H)，6.59(d，1H)，6.13(d，1H)，5.98(d，1H)，4.33(d，2H)，4.19(t，2H)，3.97(s，3H)，3.52-3.61(m，4H)，2.45(t，2H)，2.31-2.41(m，4H)，2.23(s，3H)，1.88-2.02(m，2H)MS(+ve ESI)558(M+H)+.實施例48-表1中化合物48的制備類似實施例33所述反應，但以3-氨基四氫噻吩-1，1’-二氧化物二鹽酸鹽(104.5mg，0.50mmol)為原料，從而制得白色固體標題化合物(253mg，96％收率)1H-NMR(DMSO d6)9.55(s，1H)，8.50(s，1H)，8.49(d，1H)，7.92(d，2H)，7.84(s，1H)，7.59(d，2H)，7.45(d，1H)，7.18(s，1H)，6.52(d，1H)，4.50-4.65(m，1H)，4.19(t，2H)，3.96(s，3H)，3.53-3.61(m，4H)，3.40-3.50(m，1H)，3.10-3.35(m，2H)，2.89-2.98(m，1H)，2.32-2.53(m，1H)，2.45(t，2H)，2.32-2.41(m，4H)，2.01-2.18(m，1H)，1.88-2.01(m，2H)MS(+ve ESI)582(M+H)+.實施例49-表1中化合物49的制備類似實施例33所述反應，但以2-(甲硫基)乙胺(45.8mg，0.50mmol)為原料，從而制得白色固體標題化合物(166.6mg，68％收率)1H-NMR(DMSO d6)9.56(s，1H)，8.49(s，1H)，7.89(d，2H，J＝8Hz)，7.85(s，1H)，7.59(d，2H，J＝8Hz)，7.41(d，1H，J＝16Hz)，7.19(s，1H)，6.56(d，1H，J＝16Hz)，4.19(t，2H，J＝7Hz)，3.97(s，3H)，3.53-3.61(m，4H)，3.31-3.40(m，2H)，2.59(t，2H，J＝7Hz)，2.45(t，2H，J＝7Hz)，2.32-2.41(m，4H)，2.09(s，3H)，1.88-2.01(m，2H)MS(+ve ESI)538(M+H)+.實施例50-表1中化合物50的制備向4-氨基肉桂酸乙酯(96mg，0.50mmol)和4-氯-6-甲氧基-7-(3-嗎啉代丙氧基)喹唑啉(168mg，0.50mmol)在異丙醇(5.0ml)中的溶液內加入1.0N氫氯酸/乙醚溶液(0.50ml，0.50mmol)。40℃加熱反應30分鐘，然后再于83℃反應12小時。放冷反應物到室溫，抽吸過濾收集沉淀出的固體物，并用乙醚(2×10ml)洗滌。干燥該產物得到白色固體標題化合物(248mg，94％收率)1H-NMR(DMSO d6)11.55(s，1H)，11.10(s，1H)，8.88(s，1H)，8.50(s，1H)7.85(m，4H)，7.68(d，1H，J＝16Hz)，7.45(s，1H)，6.63(d，1H，J＝16Hz)，4.30(t，2H)，4.20(q，2H)，4.05(s，3H)，3.98(m，2H)，3.82(m，2H)，3.45(m，2H)，3.30(m，2H)，3.10(m，2H)，2.35(m，2H)，1.25(t，3H)MS(+ve ESI)493(M+H)+.實施例51-表1中化合物51的制備向4-(二甲氨基)吡啶(98mg，0.8mmol)和1-(3-二甲氨基-丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(84mg，0.44mmol)在二甲基乙酰胺(5ml)中的溶液內加入4-(4-(2-羧基)乙烯基)苯氨基)-6-甲氧基-7-(2，2，2-三氟乙氧基)喹唑啉鹽酸鹽(132mg，0.40mmol)和2-(甲硫基)乙胺(40mg，0.44mmol)。室溫攪拌反應24小時，之后再于70℃反應2小時。冷卻反應物，加入水(10ml)，并且靜置反應物過夜。抽吸過濾沉淀固體，進而通過閃式硅膠色譜純化，以0-10％甲醇/二氯甲烷洗脫。真空蒸發溶劑，得到灰白色固體標題化合物(84mg，43％)HPLC/LCMS(RT)2.18minMS(+ve ESI)493(M+H)+.原料4-(4-(2-羧基)乙烯基)苯氨基)-6-甲氧基-7-(2，2，2-三氟乙氧基)喹唑啉鹽酸鹽制備如下a)向4-羥基-3-甲氧基苯甲酸乙酯(58.9g，300mmol)的二甲基甲酰胺(400ml)溶液中加入碳酸鉀(62.2g，450mmol)，加熱反應物至120℃。用15分鐘以上時間加入甲磺酸2，2，2-三氟乙酯(63.4g，360mmol)，之后于120℃加熱反應15小時。冷卻反應物至室溫，加入乙醚(400ml)，過濾反應物。真空蒸發濾液，將殘留物溶于乙醚(375ml)與異己烷(375ml)混合液。真空濃縮有機層至250ml總體積，然后抽吸過濾收集結晶出的固體物。真空干燥此固體物得到白色結晶固體4-(2，2，2-三氟乙氧基)-3-甲氧基苯甲酸乙酯(43.0g，52％收率)1H-NMR(DMSO d6)7.57(dd，1H，J＝2，8Hz)，7.49(d，lH，J＝2Hz)，7.18(d，1H，J＝8Hz)，5.81(q，2H，J＝7Hz)，5.29(q，2H，J＝7Hz)，3.82(s，3H)，1.30(t，3H，J＝7Hz)MS(+ve ESI)279(M+H)+.b)用1小時以上時間，于5℃向4-(2，2，2-三氟乙氧基)-3-甲氧基苯甲酸乙酯(35.3g，0.127mol)在二氯甲烷(340ml)、乙酸(173ml)和水(40ml)中的攪拌溶液構成的兩相體系內小心加入濃硫酸(64ml)和濃硝酸(10.0ml，0.152mol)。用60小時以上時間溫熱反應至室溫(期間進行劇烈的機械攪拌)，分出水相，將有機相用水(6×250ml)洗滌。濃縮有機相至～200ml總體積，加入異己烷(150ml)，將沉淀出的固體物通過抽吸過濾加以收集。真空干燥此固體物得到黃色固體3-甲氧基-4-(2，2，2-三氟乙氧基)-6-硝基苯甲酸乙酯(21.7g，52％收率)。母液含有產物(28％)與原料(72％)的混合物，于是再循環到后面的反應中1H-NMR(DMSO d6)7.80(s，1H)，7.42(s，1H)，4.90(q，2H，J＝7Hz)，4.20-4.35(m，2H)，4.00(s，3H)，1.32(t，3H，J＝7Hz)MS(+ve ESI)324(M+H)+.c)在氫氣氛中攪拌3-甲氧基-4-(2，2，2-三氟乙氧基)-6-硝基苯甲酸乙酯(24.0g，74.3mmol)和10％鈀-碳(3.0g)在乙醇(100ml)與乙酸乙酯(750ml)混合液中形成的懸浮液共計18小時。濾除催化劑，接著真空蒸發溶劑，從而得到淺棕色固體3-甲氧基-4-(2，2，2-三氟乙氧基)-6-氨基苯甲酸乙酯(20.2g，93％收率)1H-NMR(DMSO d6)7.20(s，1H)，6.45(s，1H)，6.40(s，2H)，5.70(q，2H，J＝7Hz)，4.20(q，2H，J＝7Hz)，3.65(s，3H)，1.32(t，3H，J＝7Hz)MS(-ve ESI)292(M-H)-，MS(+ve ESI)294(M+H)+.d)175℃加熱2-氨基-4-(2，2，2-三氟乙氧基)-5-甲氧基-苯甲酸乙酯(20.2g，69.1mmol)和甲酰胺(50ml)混合物6小時，放冷混合物到室溫，加入乙醇(150ml)，接著靜置反應物18小時。抽吸過濾收集沉淀出的固體，進而用乙醇(2×50ml)洗滌，并在真空下加以干燥，從而得到淺棕色結晶固體6-甲氧基-7-(2，2，2-三氟乙氧基)-3，4-二氫喹唑啉-4-酮(15.8g，84％收率)1H-NMR(DMSO d6)12.10(s，1H)，8.00(s，1H)，7.5 1(s，1H)，7.30(s，1H)，4.90(q，2H，J＝7Hz)，3.90(s，3H)MS(-ve ESI)273(M-H)-，MS(+ve ESI)275(M+H)+.e)向6-甲氧基-7-(2，2，2-三氟乙氧基)-3，4-二氫-喹唑啉-4-酮(15.8g，57.7mmol)的亞硫酰氯(200ml)溶液內逐滴加入二甲基甲酰胺(0.1ml)，加熱回流反應6小時。冷卻反應物，真空除去過量的亞硫酰氯，殘留物與甲苯(2×50ml)一起共沸以除去最后殘余的亞硫酰氯。然后將殘留物溶于二氯甲烷(550ml)，用碳酸氫鈉飽和水溶液(2×250ml)洗滌所得溶液，并將有機相用硫酸鎂干燥。真空蒸發溶劑得到奶油色固體4-氯-6-甲氧基-7-(2，2，2-三氟乙氧基)喹唑啉(16.3g，97％收率)1H-NMR(DMSO d6)8.95(s，1H)，7.65(s，1H)，7.25(s，1H)，5.05(q，2H，J＝7Hz)，4.00(s，3H)MS(+ve ESI)293，295(M+H)+.f)類似實施例3c所述反應，但以4-氯-6-甲氧基-7-(2，2，2-三氟乙氧基)喹唑啉(4.50g，15.4mmol)和4-氨基肉桂酸鹽酸鹽(3.07g，15.4mmol)為原料，從而制得白色固體4-(4-(2-羧基)乙烯基)苯氨基)-6-甲氧基-7-(2，2，2-三氟乙氧基)喹唑啉鹽酸鹽(5.17g，74％收率)1H-NMR(DMSO d6)11.42(s，1H)，8.85(s，1H)，8.40(s，1H)，7.75-7.85(m，4H)，7.60(d，1H)，7.40(s，1H)，6.55(d，1H)，5.00-5.15(m，2H)，4.05(s，3H)MS(+ve ESI)293，295(M+H)+，MS(-ve ESI)293，295(M-H)-.實施例52-表1中化合物52的制備類似實施例51所述反應，但以環戊胺(37mg，0.44mmol)為原料，從而制得灰白色固體標題化合物(39mg，20％收率)HPLC/LCMS(RT)2.32minMS(+ve ESI)487(M+H)+.實施例53-表1中化合物53的制備類似實施例51所述反應，但以環己胺(44mg，0.44mmol)為原料，從而制得灰白色固體標題化合物(90mg，45％收率)HPLC/LCMS(RT)2.45minMS(+ve ESI)501(M+H)+.實施例54-表1中化合物54的制備類似實施例51所述反應，但以氨甲基環己烷(50mg，0.44mmol)為原料，從而制得灰白色固體標題化合物(137mg，67％收率)HPLC/LCMS(RT)2.62minMS(+ve ESI)515(M+H)+.實施例55-表1中化合物55的制備類似實施例51所述反應，但以5-氨基-2-氯吡啶(56mg，0.44mmol)為原料，從而制得灰白色固體標題化合物(40mg，19％收率)HPLC/LCMS(RT)2.47minMS(+ve ESI)530(M+H)+.實施例56-表1中化合物56的制備類似實施例51所述反應，但以糠胺(43mg，0.44mmol)為原料，從而制得灰白色固體標題化合物(43mg，22％收率)HPLC/LCMS(RT)2.31minMS(+ve ESI)499(M+H)+.實施例57-表1中化合物57的制備類似實施例51所述反應，但以四氫糠胺(44mg，0.44mmol)為原料，從而制得灰白色固體標題化合物(138mg，69％收率)HPLC/LCMS(RT)2.11minMS(+ve ESI)503(M+H)+.實施例58-表1中化合物58的制備類似實施例51所述反應，但以3-氨基吡啶(41mg，0.44mmol)為原料，從而制得灰白色固體標題化合物(172mg，87％收率)HPLC/LCMS(RT)1.87minMS(+ve ESI)496(M+H)+.實施例59-表1中化合物59的制備類似實施例51所述反應，但以鄰-甲苯胺(47mg，0.44mmol)為原料，從而制得灰白色固體標題化合物(188mg，93％收率)HPLC/LCMS(RT)2.61minMS(+ve ESI)509(M+H)+.實施例60-表1中化合物60的制備類似實施例51所述反應，但以2，2，2-三氟乙胺(44mg，0.44mmol)為原料，從而制得灰白色固體標題化合物(181mg，91％收率)HPLC/LCMS(RT)2.61minMS(+ve ESI)501(M+H)+.實施例61-表1中化合物61的制備類似實施例51所述反應，但以3-氨基-1，2-丙二醇(40mg，0.44mmol)為原料，從而制得灰白色固體標題化合物(171mg，87％收率)HPLC/LCMS(RT)2.61minMS(+ve ESI)493(M+H)+.實施例62-表1中化合物62的制備類似實施例51所述反應，但以2-甲基-1-戊胺(44mg，0.44mmol)為原料，從而制得灰白色固體標題化合物(83mg，41％收率)HPLC/LCMS(RT)2.61minMS(+ve ESI)503(M+H)+.實施例63-表1中化合物63的制備類似實施例51所述反應，但以3-甲基環己胺(50mg，0.44mmol)為原料，從而制得灰白色固體標題化合物(128mg，62％收率)HPLC/LCMS(RT)2.66minMS(+ve ESI)515(M+H)+.實施例64-表1中化合物64的制備類似實施例51所述反應，但以2-氨基-2，3-二氫化茚(59mg，0.44mmol)為原料，從而制得灰白色固體標題化合物(104mg，49％收率)HPLC/LCMS(RT)2.56minMS(+ve ESI)535(M+H)+.實施例65-表1中化合物65的制備類似實施例51所述反應，但以2-噻吩乙胺(56mg，0.44mmol)為原料，從而制得灰白色固體標題化合物(113mg，54％收率)HPLC/LCMS(RT)2.44minMS(+ve ESI)529(M+H)+.實施例66-表1中化合物66的制備類似實施例51所述反應，但以3-氨基四氫噻吩-1，1’-二氧化物(59mg，0.44mmol)為原料，從而制得灰白色固體標題化合物(162mg，76％收率)HPLC/LCMS(RT)2.09minMS(+ve ESI)537(M+H)+.實施例67-表1中化合物67的制備類似實施例51所述反應，但以芐胺(47mg，0.44mmol)為原料，從而制得灰白色固體標題化合物(137mg，67％收率)1H-NMR(DMSO d6)9.65(s，1H)，8.55(t，1H，J＝7Hz)，8.50(t，1H，J＝7Hz)，7.95(m，2H)，7.90(s，1H)，7.68(d，1H，J＝16Hz)，7.45(s，1H)，7.40(s，1H)，7.22-7.35(m，5H)，6.63(d，1H，J＝16Hz)，4.95(q，2H，J＝7Hz)，4.40(d，2H，J＝7Hz)，3.99(s，3H)MS(+ve ESI)509(M+H)+.實施例68-表1中化合物68的制備類似實施例3c所述反應，但以4-氯-6，7-二甲氧基喹唑啉(30mg，0.13mmol)和順式-4-氨基肉桂酸乙酯(50mg，0.26mmol)為原料，并且使用乙醇作為溶劑(2ml)，從而制得黃色固體標題化合物(36mg，65％收率)1H-NMR(DMSO d6)11.35(s，1H)，8.83(s，1H)，8.32(s，1H)，7.71-7.83(m，4H)，7.35(s，1H)，7.03(d，1H，J＝12.6Hz)，6.01(d，1H，J＝12.6Hz)，4.15(q，2H，J＝7Hz)，4.05(s，3H)，4.00(s，3H)，1.20(t，3H，J＝7Hz)MS(+ve ESI)380(M+H)+.
原料順式-4-氨基肉桂酸乙酯的制備如下a)向4-碘-硝基苯(2.49g，10.0mmol)和丙炔酸乙酯(3.92g，40mmol)在四氫呋喃(30ml)中的溶液內加入二氯化雙(三苯膦)合鈀(II)(140mg，0.20mmol)、碘化銅(I)(76mg，0.40mmol)和碳酸鉀(2.8g，20mmol)，并在惰性氛圍中加熱回流反應16小時。冷卻反應物到室溫，倒入水(150ml)中，加乙酸乙酯(75ml)稀釋，進而通過硅藻土過濾。分出有機層，水層用乙酸乙酯(2×100ml)萃取，并將合并的有機層用硫酸鎂干燥，然后真空蒸除溶劑。用硅膠快速色譜純化，以25％乙酸乙酯/異己烷洗脫，從而得到黃色固體2-(4-硝基苯基)丙炔酸乙酯(1.55g，71％收率)1H-NMR(DMSO d6)8.25-8.30(m，2H)，7.90-7.95(m，2H)，4.25(q，2H，J＝7Hz)，1.25(t，3H)MS(+ve ESI)219(M+H)+.b)向2-(4-硝基苯基)丙炔酸乙酯(110mg，0.50mmol)在水(5ml)與乙醇(5ml)混合液中的溶液內加入鐵粉(276mg，5.0mmol)和氯化銨(266mg，5.0mmol)，并且在惰性氣氛中加熱回流反應5小時。反應物通過硅藻土過濾，真空濃縮濾液并將殘留物分配到水與乙酸乙酯之中。分離有機層并用硫酸鎂干燥。用硅膠快速色譜純化，以33％乙酸乙酯/異己烷洗脫，從而得到棕色油狀物順式-4-氨基肉桂酸乙酯(50g，53％收率)MS(-ev ESI)190(M-H)-，MS(+ev ESI)192(M+H)+.生物學數據本發明化合物能夠抑制aurora 2激酶的絲氨酸/蘇氨酸激酶活性，因而可以抑制細胞周期和細胞增殖。這些性能例如可以用一種或多種下述方法測定。(a)體外aurora 2激酶抑制試驗本試驗測定受試化合物抑制絲氨酸/蘇氨酸激酶活性的能力。編碼aurora 2的DNA可以采用全基因合成法或克隆技術制備。這種DNA然后在合適的表達體系中表達以獲得具有絲氨酸/蘇氨酸激酶活性的多肽。就aurora 2來說，其編碼序列是通過聚合酶鏈反應(PCR)由cDNA分離得到，并被克隆到桿狀病毒表達載體pFastBac HTc(GibcoBRL/Life technologies)的BamH1和Not1限制性內切核酸酶位點上。5′PCR引物包含屬于aurora 2編碼序列的限制性內切核酸酶BamH1 5′的識別序列。從而允許在具有6個組氨酸殘基、間隔區和pFastBac HTc載體編碼的rTEV蛋白酶切割位點的框架內插入aurora2基因。3′PCR引物用后面連有終止密碼子和限制性內切核酸酶Not1的識別序列的附加的編碼序列替換aurora 2終止密碼子。這種附加的編碼序列(5′TAC CCA TAC GAT GTT CCA GAT TAC GCT TCT TAA 3′)編碼多肽序列YPYDVPDYAS。這種衍生自流感血凝蛋白的序列通常用作標記表位序列，后者可以使用特異性單克隆抗體鑒定。重組pFastBac載體因此編碼N-端標記的6his，C端流感血凝表位標記的aurora 2蛋白。組裝重組DNA分子的方法詳見標準教科書，例如Sambrook等，1989，Molecular Cloning-A Laboratory Manual，第二版，ColdSpring Harbor Laboratory Press和Ausubel等，1999，CurrentProtocols in Molecular Biology，John Wiley and Sons Inc.
重組病毒的生產可以按照GibcoBRL廠家說明書進行。簡言之，是將攜有aurora 2基因的pFastBac-1載體轉入含有桿狀病毒基因組(桿粒DNA)的大腸桿菌DH10Bac細胞中，并且通過細胞中的轉座活動，使含有慶大霉素抗性基因和aurora 2基因(包含桿狀病毒多角體蛋白啟動子)的pFastBac載體區域直接轉座到桿粒DNA內。通過對慶大霉素、卡那霉素、四環素和X-gal的選擇，所產生的白色集落應當含有編碼aurora 2的重組桿粒DNA。從一些BH10Bac白色集落的小規模培養物中提取出桿粒DNA，進而使用CellFECTIN試劑(GibcoBRL)按照廠商說明轉染到在含10％血清的TC100培養基(GibcoBRL)中生長的草地夜蛾(Spodoptera frugiperda)Sf21細胞中。轉染72小時后通過收集細胞培養液收獲病毒顆粒。使用0.5ml培養液感染含有1×107細胞/ml的100ml Sf21懸浮培養液。感染后48小時收獲細胞培養物，應用標準噬斑測定方法測定病毒效價。使用病毒原種以3的感染復數(MOI)感染Sf9和“High5”細胞，以確定重組aurora 2蛋白的表達。
對于aurora 2激酶活性的大規模表達，使用Wheaton滾筒設備，在補加有10％胎牛血清(Viralex)和0.2％ F68 Pluronic(Sigma)的TC100培養基中培養Sf21昆蟲細胞(28℃，3r.p.m.)。待細胞密度達到1.2×106細胞ml-1后，將它們用噬斑純aurora 2重組病毒以1的感染復數感染，48小時后收獲。所有后續純化步驟都在4℃下進行。解凍含有2.0×108細胞總數的冷凍昆蟲細胞沉淀，用裂解緩沖液(25mMHEPES(N-[2-羥基乙基]哌嗪-N’-[2-乙烷磺酸])pH7.4(4℃)，100mMKCl，25mM NaF，1mM Na3VO4，1mM PMSF(苯甲基磺酰氟)，2mM 2-巰基乙醇，2mM咪唑，1μg/ml抑蛋白酶肽，1μg/ml胃酶抑制劑，1μg/ml亮抑蛋白酶肽)稀釋，每3×107細胞使用1.0ml。裂解利用dounce勻漿器完成，之后以41,000g離心裂解液35分鐘。將吸出的上清液泵入到含有500μl Ni NTA(次氮基三乙酸)瓊脂糖(Qiagen，產品編號30250)的5mm直徑色譜柱上，色譜柱預先用裂解緩沖液平衡。色譜柱在依次用12ml裂解緩沖液和7ml洗滌緩沖液(25mM HEPES pH7.4(4℃)，100mM KCl，20mM咪唑，2mM 2-巰基乙醇)洗滌后，洗出液的UV吸收達到基線水平。使用洗脫緩沖液(25mM HEPES pH7.4(4℃)，100mM KCl，400mM咪唑，2mM 2-巰基乙醇)從柱內洗出結合aurora 2蛋白。收集對應于UV吸收峰的洗出部分(2.5ml)。將含有活性aurora 2激酶的洗出部分用透析緩沖液(25mM HEPES pH7.4(4℃)，45％甘油(v/v)，100mM KCl，0.25％ Nonidet P40(v/v)，1mM二硫蘇糖醇)徹底透析。
在試驗中，每一批新制的aurora2酶都通過用酶稀釋劑(25mMTris-HCl pH7.5，12.5mM KCl，0.6mM DTT)稀釋滴定。對于典型的一批，酶貯存物以1/666比例用酶稀釋劑稀釋，并且每一測定孔使用20μl稀釋酶。試驗化合物(10mM二甲亞砜(DMSO)溶液)用水稀釋，并取10μl稀釋化合物轉入到測定板孔內。“總”和“空白”對照孔含有2.5％DMSO來代替化合物。除“空白”孔外，向所有孔中加入20μl新制稀釋酶。向“空白”孔中加入20μl酶稀釋物。然后向所有試驗孔中都加入20μl含有0.2μCi[γ33P]ATP(Amersham Pharmacia，比活性≥2500Ci/mmol)的反應混合物(25mM Tris-HCl，78.4mM KCl，2.5mMNaF，0.6mM二硫蘇糖醇，6.25mM MnCl2，6.25mM ATP，7.5μM肽底物[生物素-LRRWSLGLRRWSLGLRRWSLGLRRWSLG])啟動反應。將板在室溫下培養60分鐘。為了終止反應，向各孔中加入100μl 20％v/v正磷酸。應用96孔板收獲器(TomTeK)，將肽底物捕獲到陽性硝化纖維素P30濾墊(Whatman)上，然后用β-平板計數器測定33P的摻入量。“空白”(無酶)和“總”(無化合物)對照組值用于測定受試化合物產生50％的酶活性抑制需要的稀釋范圍。
在本試驗中，表1中化合物18在0.117μM濃度下能產生50％的酶活性抑制率。(b)體外細胞增值試驗這些以及其他試驗可用于測定試驗化合物抑制哺乳動物貼壁細胞系(例如人類腫瘤細胞系MCF7)生長的能力。試驗1典型的是以1×103細胞/孔(外圍孔除外)的濃度將MCF-7(ATCCHTB-22)或其他貼壁細胞接種于組織培養物處理過的96孔透明板(Costar)中的DMEM(Sigma Aldrich)[無酚紅]+10％胎牛血清+1％L-谷氨酰胺+1％青霉素/鏈霉素之內。次日(第1天)，除去未處理對照板中的培養基，將板貯存于-80℃。剩余的板計量給予化合物(用DMEM(無酚紅，10％FCS，1％L-谷氨酰胺，1％青霉素/鏈霉素)稀釋其10mM的DMSO貯存液)。每一板都包含有未處理對照孔。在有/無化合物存在3天后(第4天)，除去培養基，將板-80℃貯存。24小時后，將板在室溫下解凍，利用CyQYUANT細胞增殖分析試劑盒(c-7026/c-7027Molecular Probes Inc.)按照廠家說明測定細胞密度。簡要地說，是向各孔中加入200μl細胞裂解/染料混合物(10μl 20X細胞裂解緩沖液B，190μl無菌水，0.25μl CYQUANT GR染料)，在室溫下黑暗處溫育各板5分鐘。然后使用熒光微板讀取器測量各孔的熒光強度(使用CytoFluor板讀數器(PerSeptive Biosystems Inc.)，1個周期增加70，每孔讀取2次，激發485nm，發射530nm)。使用第1天和第4天(化合物處理組)的值以及未處理細胞組的值測定受試化合物產生50％的細胞增殖抑制需要的稀釋范圍。在本試驗中，表1中的化合物18在6.38μM濃度下是有效的。
這些值還可以用于計算細胞密度下降到低于第1天對照值需要的受試化合物稀釋范圍。這樣可以說明化合物的細胞毒性。試驗2本試驗測定受試化合物抑制胸苷類似物5’-溴-2’-脫氧-尿苷(BrdU)摻入到細胞DNA中的能力。典型的是以0.8×104細胞/孔的濃度將MCF-7或其他貼壁細胞接種于組織培養物處理過的96孔板(Costar)中的DMEM(Sigma Aldrich)[無酚紅]+10％胎牛血清+1％L-谷氨酰胺+1％青霉素/鏈霉素(50μl/孔)之內，并且貼壁過夜。第二天對細胞計量給予化合物(用DMEM(無酚紅，10％FCS，1％L-谷氨酰胺，1％青霉素/鏈霉素)稀釋其10mM的DMSO貯存液)。每板都含有未處理對照孔和含有已知能產生100％BrdU摻入抑制率的化合物的孔。在有/無試驗化合物存在48小時后，利用Boehringer(Roche)細胞增殖BrdUELISA試劑盒(cat.No.1 647 229)按照廠家說明測定2小時以上標記期細胞摻入BrdU的能力。簡言之，是向各孔中加入15μl BrdU標記試劑(在培養基中以1∶100稀釋，培養基為DMEM((無酚紅)+10％FCS，1％L-谷氨酰胺，1％青霉素/鏈霉素)，并將板返回到潮濕(+5％CO2)的37℃溫箱中2小時。2小時后，通過潷析和在紙巾上輕叩培養板除去標記試劑。加入FixDenat溶液(50μl/孔)，在振蕩下室溫溫育板45分鐘。通過潷析和在紙巾上輕扣倒置板除去FixDenat溶液。然后將板用磷酸鹽緩沖鹽溶液(PBS)洗滌一次，加入100μl/孔Anti-BrdU-POD抗體溶液(以1∶100比例用抗體緩沖溶液稀釋)。之后將板在振蕩下室溫溫育90分鐘。在印跡干燥之前通過潷析和用PBS洗滌板5次除去未結合的Anti-BrdU-POD抗體。加入TMB底物溶液(100μl/孔)，在振蕩下室溫溫育大約10分鐘，直至出現顏色改變。使用Titertek Multiscan平板讀數器測定690nm波長處各孔的光密度。使用化合物處理組、未處理組和100％抑制對照組的值測定試驗化合物產生50％的BrdU摻入抑制需要的稀釋范圍。在本試驗中表1中的化合物18在2.47μM下是有效的。(c)體外細胞周期分析試驗本試驗測定試驗化合物在細胞周期的特定時期停滯細胞的能力。多種不同的哺乳動物細胞系都可以用于本試驗，包括舉例的MCF7。以3×105細胞/T25瓶(Costar)將MCF-7細胞接種于5ml DMEM(無酚紅，10％FCS，1％L-谷氨酰胺，1％青霉素/鏈霉素)。然后將瓶在潮濕的37℃(5％ CO2)溫箱中溫育過夜。第二天向培養瓶中加入1ml含有溶于DMSO中的適當濃度試驗化合物的DMEM(無酚紅10％FCS，1％L-谷氨酰胺1％青霉素/鏈霉素)。同樣還包括無化合物對照處理組(0.5％DMSO)。然后將細胞與化合物一起溫育一定時間(通常為24小時)。此后從細胞中吸出培養基，將它們用5ml預溫熱(37℃)無菌PBSA洗滌，隨后通過與胰蛋白酶一起短暫溫育從培養瓶內分離出，接著再懸浮于10ml 1％牛血清白蛋白(BSA，Sigma-Aldrich Co.)的無菌PBSA中。然后以2200rpm離心液樣10分鐘。吸出上清液，將細胞沉淀物再懸浮于200μl 0.1％(w/v)檸檬酸三鈉，0.0564％(w/v)NaCl，0.03％(v/v)Nonidet NP40，[pH7.6]。加碘化丙錠(Propridium Iodide)(Sigma Aldrich Co.)至40μg/ml和RNA酶A(Sigma Aldrich Co.)至100μg/ml。然后37℃溫育細胞30分鐘。以2200rpm離心樣品10分鐘，移去上清液，將剩余的沉淀物(細胞核)再懸浮于200μl無菌PBSA中。每一樣品然后利用21規針洗滌10次。樣品然后轉入LPS管內，使用FACScan流式細胞儀(Becton Dickinson)通過熒光激活細胞分選法(FACS)分析各細胞中的DNA含量。通常計數25000次信號，并且應用CellQuest v1.1軟件(Verity Software)進行記錄。群體的細胞周期分布應用Modfit軟件(Verity Software)計算，并且用細胞周期中G0/G1，S和G2/M期的細胞百分數表示。用12.76μM表1中化合物18處理MCF7細胞24小時，細胞周期分布產生下列變化
權利要求
1.式(I)化合物或其鹽、酯、酰胺或前藥 其中X為O，或S，S(O)或S(O)2，或者為NR10，其中的R10為氫或C1-6烷基；R5為基團OR11，NR12R13或SR11，其中R11、R12和R13獨立選自任選取代的烴基或任選取代的雜環基，并且R12和R13還可以與它們所連接的氮原子一起形成任選取代的芳族或非芳族雜環，其中所述雜環還可以含有其它雜原子。R6和R7獨立選自氫或烴基；R8和R9獨立選自氫，鹵素，C1-4烷基，C1-4烷氧基，C1-4烷氧基甲基，二(C1-4烷氧基)甲基，C1-4鏈烷酰基，三氟甲基，氰基，氨基，C2-5鏈烯基，C2-5炔基，苯基，芐基或含有1-3個獨立選自O、S和N的雜原子的5-6-元雜環基，該雜環基可以是芳香或非芳香性的，并且可以是飽和(經環碳或氮原子連接)或不飽和的(經環碳原子連接)，而且其中所述苯基、芐基或雜環基可以在一個或多個環碳原子上帶有多至5個選自以下的取代基羥基，鹵素，C1-3烷基，C1-3烷氧基，C1-3鏈烷酰氧基，三氟甲基，氰基，氨基，硝基，C2-4鏈烷酰基，C1-4鏈烷酰基氨基，C1-4烷氧基羰基，C1-4烷基硫烷基，C1-4烷基亞磺酰基，C1-4烷基磺酰基，氨基甲酰基，N-C1-4烷基氨基甲酰基，N，N-二(C1-4烷基)氨基甲酰基，氨基磺酰基，N-C1-4烷基氨基磺酰基，N，N-二(C1-4烷基)氨基磺酰基，C1-4烷基磺酰基氨基，以及選自嗎啉代、硫代嗎啉代、吡咯烷基、哌嗪基、哌啶基、咪唑烷基和吡唑烷基的飽和雜環基，并且該飽和雜環基可以帶有1或2個選自氧代、羥基、鹵素、C1-3烷基、C1-3烷氧基、C1-3鏈烷酰氧基、三氟甲基、氰基、氨基、硝基和C1-4烷氧基羰基的取代基，以及R1，R2，R3，R4獨立選自鹵素，氰基，硝基，C1-3烷基硫烷基，-N(OH)R14(其中R14為氫，或C1-3烷基)，或R16X1-(其中X1代表直接鍵，-O-，-CH2-，-OC(O)-，-C(O)-，-S-，-SO-，-SO2-，-NR17C(O)-，-C(O)NR18-，-SO2NR19-，-NR20SO2-或-NR21-(其中R17，R18，R19，R20和R21各自獨立地代表氫，C1-3烷基或C1-3烷氧基C2-3烷基)，且R16選自氫，任選取代的烴基，任選取代的雜環基或任選取代的烷氧基。
2.根據權利要求1的化合物，其中至少一個基團R1，R2，R3，R4為基團R16X1-，且R16為氫，任選取代的烴基，該烴基選自烷基、鏈烯基、炔基、芳基、芳烷基、環烷基、環烯基或環炔基、或其組合；或為任選取代的含4-20個環原子的雜環基，其中至少一個環原子為雜原子如氧、硫或氮，而且其中的任選取代基包括至少一個選自如下的官能團硝基、氰基、鹵素、氧代、＝CR78R79、C(O)xR77、OR77、S(O)yR77、NR78R79、C(O)NR78R79、OC(O)NR78R79、＝NOR77、-NR77C(O)xR78、-NR77CONR78R79、-N＝CR78R79、S(O)yNR78R79或-NR77S(O)yR78，其中R77，R78和R79獨立選自氫，任選取代的烴基，任選取代的雜環基或任選取代的烷氧基，或者R78和R79一起形成任選取代的環，該環任選另外含有雜原子，其中x為整數1或2，y為0或整數1-3。
3.根據權利要求2的化合物，其中烴基、雜環基或烷氧基基團R77、R78和R79以及R78和R79形成的環任選被鹵素，全鹵代烷基，巰基，烷硫基，羥基，羧基，烷氧基，雜芳基，雜芳氧基，環烷基，環烯基，環炔基，鏈烯氧基，炔氧基，烷氧基烷氧基，芳氧基(其中的芳基基團可以被鹵素、硝基、或羥基取代)，氰基，硝基，氨基，單-或二-烷基氨基，肟基或S(O)yR90取代，其中y如權利要求2中定義，且R90為烷基。
4.根據前述任一項權利要求的化合物，其中至少一個基團R1，R2，R3，R4為基團R16X1-，且R16為氫或任選被一個或多個選自權利要求2或權利要求3中定義的官能團的基團取代的烷基，或為鏈烯基、炔基、芳基、雜環基、環烷基、環烯基或環炔基，它們中的任一個都可以被權利要求2或權利要求3中定義的官能團取代，并且其中的任何芳基、雜環基、環烷基、環烯基、環炔基都還可以任選地被烴基如烷基、鏈烯基或炔基取代。
5.根據權利要求1或2的化合物，其中R1，R2，R3和R4中至少一個為基團R16X1-，其中X1如權利要求1中定義，且R16選自下列22組基團之一1)氫或C1-5烷基，該烷基可以是未取代的或者可以被一個或多個官能團所取代；2)-RaX2C(O)R22(其中X2代表-O-或-NR23-(其中R23代表氫，或任選被官能團取代的烷基)，且R22代表C1-3烷基，-NR24R25或-OR26(其中R24，R25和R26可以相同或不同，各自代表氫，或任選被官能團取代的烷基)；3)-RbX3R27(其中X3代表-O-，-C(O)-，-S-，-SO-，-SO2，-OC(O)-，-NR28C(O)-，-NR28C(O)O-，-C(O)NR29-，-C(O)ONR29-，-SO2NR30-，-NR31SO2-或-NR32-(其中R28，R29，R30，R31和R32各自獨立代表氫，或任選被官能團取代的烷基)，且R27代表氫，烴基(如這里所定義)或飽和雜環基，其中所述烴基或雜環基可任選地被一個或多個官能團取代，并且雜環基還可以被烴基取代；4)-RcX4Rc′X5R35(其中X4和X5可以相同或不同，并且各自為-O-，-C(O)-，-S-，-SO-，-SO2-，-OC(O)-，-NR36C(O)-，-NR36C(O)O-，-C(O)NR37-，-C(O)ONR37-，-SO2NR38-，-NR39SO2-或-NR40-(其中R36，R37，R38，R39和R40各自獨立地代表氫或任選被官能團取代的烷基)，且R35代表氫，或任選被官能團取代的烷基；5)R41，其中R41為C3-6環烷基或飽和雜環(經碳或氮連接)，該環烷基或雜環基可以被一個或多個官能團取代或者被烴基或雜環基取代，其中后面所述的烴基或雜環基可任選地被一個或多個官能團取代；6)-RdR41(其中R41如上定義)；7)-ReR41(其中R41如上定義)；8)-RfR41(其中R41如上定義)；9)R42，其中R42代表吡啶酮基，芳基或含有1-3個選自O、N和S的雜原子的芳族雜環基(經碳或氮連接)，并且所述吡啶酮基、芳基或芳族雜環基可以被一個或多個官能團取代或者被任選被一個或多個官能團或雜環基取代的烴基所取代，或者被任選被一個或多個官能團或烴基取代的雜環基所取代；10)-RgR42(其中R42如上定義)；11)-RhR42(其中R42如上定義)；12)-RiR42(其中R42如上定義)；13)-RjX6R42(其中X6代表-O-，-S-，-SO-，-SO2-，-OC(O)-，-NR47C(O)-，-C(O)NR48-，-C(O)ONR48-，-SO2NR49-，-NR50S2-或-NR51-(其中R47，R48，R49，R50和R51各自獨立代表氫，或任選被官能團取代的烷基)，并且R42如上定義)；14)-RkX7R42(其中X7代表-O-，-C(O)-，-S-，-SO-，-SO2-，-OC(O)-，-NR52C(O)-，-C(O)NR53-，-C(O)ONR53-，-SO2NR54-，-NR55SO2-或-NR56-(其中R52，R53，R54，R55和R56各自獨立代表氫，或任選被官能團取代的烷基)，并且R42如上定義)；15)-RmX8R42(其中X8代表-O-，-C(O)-，-S-，-SO-，-SO2-，-OC(O)-，-NR57C(O)-，-C(O)NR58-，-C(O)ONR58-，-SO2NR59-，-NR60SO2-或-NR61-(其中R57，R58，R59，R60和R61各自獨立代表氫，或任選被官能團取代的烷基)，并且R42如上定義)；16)-RnX9Rn′R42(其中X9代表-O-，-C(O)-，-S-，-SO-，-SO2-，-OC(O)-，-NR62C(O)-，-C(O)NR63-，-C(O)ONR63-，-SO2NR64-，-NR65SO2-或-NR66-(其中R62，R63，R64，R65和R66各自獨立代表氫，或任選被官能團取代的烷基)，并且R42如上定義)；17)-RpX9-Rp′R41(其中X9和R41如上定義)；18)C2-5鏈烯基，它可以是未取代的或者可以被一個或多個官能團所取代；19)C2-5炔基，它可以是未取代的或者可以被一個或多個官能團所取代；20)-RtX9Rt′R41(其中X9和R41如上定義)；21)-RuX9Ru′R41(其中X9和R41如上定義)；和22)-RvR67(Rv′)q(X9)rR68(其中X9如上定義，q為0或1，r為0或1，且R67為C1-3亞烷基或選自二價環烷基或雜環基的環狀基團，其中所述C1-3亞烷基可以被一個或多個官能團取代，而所述環狀基團則可以被一個或多個官能團取代，或者被任選被一個或多個官能團或雜環基取代的烴基所取代，或者被任選被一個或多個官能團或烴基取代的雜環基所取代；并且R68為氫，C1-3烷基，或選自環烷基或雜環基的環狀基團，其中所述C1-3亞烷基可以被一個或多個官能團取代，而所述環狀基團則可以被一個或多個官能團取代，或者被任選被一個或多個官能團或雜環基取代的烴基所取代，或者被任選被一個或多個官能團或烴基取代的雜環基所取代；以及，其中的Ra，Rb，Rc，Rc′，Rd，Rg，Rj，Rn，Rn′，Rp，Rp′，Rt′，Ru′，Rv和Rv′獨立選自任選被一個或多個官能團取代的C1-8亞烷基，Re，Rh，Rk和Rt獨立選自任選被一個或多個官能團取代的C2-8亞烯基，和Rf，Ri，Rm和Ru獨立選自任選被一個或多個官能團取代的C2-8亞炔基。
6.根據權利要求5的化合物，其中R16選自下列22組基團之一1)氫或C1-5烷基，該烷基可以是未取代的或者可以被一個或多個選自羥基、環氧乙烷基、氟、氯、溴和氨基的基團所取代；2)-RaX2C(O)R22(其中X2代表-O-或-NR23-(其中R23代表氫，C1-3烷基或C1-3烷氧基C2-3烷基)，并且R22代表C1-3烷基，-NR24R25或-OR26(其中R24，R25和R26可以相同或不同，各自代表氫，C1-5烷基，羥基C1-5烷基或或C1-3烷氧基C2-3烷基))；3)-RbX3R27(其中X3代表-O-，-C(O)-，-S-，-SO-，-SO2-，-OC(O)-，-NR28C(O)-，-NR28C(O)O-，-C(O)NR29-，-C(O)ONR29-，-SO2NR30-，-NR31SO2-或-NR32-(其中R28，R29，R30，R31和R32各自獨立地代表氫，C1-3烷基，羥基C1-4烷基或C1-3烷氧基C2-3烷基)，并且R27代表氫，C1-6烷基，C2-6鏈烯基，環丙基，環丁基，環戊基，環己基，苯基或含有1-2個獨立選自O、S和N的雜原子的5-6元飽和雜環基，其中所述C1-6烷基可以帶有1、2或3個選自氧代、羥基、鹵素、環丙基、氨基、C1-4烷基氨基、C1-4鏈烷酰基、二-C1-4烷基氨基、C1-4烷硫基、C1-4烷氧基的取代基，并且所述環狀基團可以帶有1或2個選自如下的取代基氧代、羥基、鹵素、氰基、C1-4氰基烷基、C1-4烷基、C1-4羥基烷基、C1-4烷氧基、C1-4烷氧基C1-4烷基、C1-4烷基磺酰基C1-4烷基、C1-4烷氧基羰基、C1-4氨基烷基、C1-4烷基氨基、二(C1-4烷基)氨基、C1-4烷基氨基C1-4烷基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷基、C1-4烷基氨基C1-4烷氧基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷氧基和基團-(-O-)f(Rb′)gD(其中f為0或1，g為0或1，D為選自C3-6環烷基、芳基或含有1-2個獨立選自O、S和N的雜原子的5-6元飽和或不飽和雜環基的環狀基團，且該環狀基團可以帶有1個或多個選自鹵素和C1-4烷基的取代基)；4)-RcX4Rc′X5R35(其中X4和X5可以相同或不同，各自為-O-，-C(O)-，-S-，-SO-，-SO2-，-NR36C(O)-，-NR36C(O)O-，-C(O)NR37-，-C(O)ONR37-，-SO2NR38-，-NR39SO2-或-NR40-(其中R36，R37，R38，R39和R40各自獨立地代表氫，C1-3烷基或C1-3烷氧基C2-3烷基)，并且R35代表氫，C1-3烷基，羥基C1-3烷基或C1-3烷氧基C2-3烷基)；5)R41(其中R41為4-6元環烷基或含有1-2個獨立選自O、S和N的雜原子的飽和雜環(經碳或氮連接)，并且所述環烷基或雜環基可以帶有1或2個選自如下的取代基氧代、羥基、鹵素、氰基、C1-4烷基、羥基C1-4烷基、氰基C1-4烷基、環丙基、C1-4烷基磺酰基C1-4烷基、C1-4烷氧基羰基、酰胺基、C1-4氨基烷基、C1-4烷基氨基、二(C1-4烷基)氨基、C1-4烷基氨基C1-4烷基、C1-4鏈烷酰基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷基、C1-4烷基氨基C1-4烷氧基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷氧基、硝基、氨基、C1-4烷氧基、C1-4羥基烷氧基、羧基、三氟甲基、-C(O)NR43R44、-NR45C(O)R46(其中R43、R44、R45和R46可以相同或不同，各自代表氫，C1-4烷基，羥基C1-4烷基或C1-3烷氧基C2-3烷基)和基團-(-O-)f(C1-4烷基)g環D(其中f為0或1，g為0或1，并且D為選自C3-6環烷基、芳基或含有1-2個獨立選自O、S和N的雜原子的5-6元飽和或不飽和雜環基的環狀基團，且該環狀基團可以帶有1個或多個選自鹵素和C1-4烷基的取代基)；6)-RdR41(其中R41如上定義)；7)-ReR41(其中R41如上定義)；8)-RfR41(其中R41如上定義)；9)R42(其中R42代表吡啶酮基，苯基或含有1-3個選自O、N和S的雜原子的5-6元芳族雜環基(經碳或氮連接)，并且所述吡啶酮基、苯基或芳族雜環基可以帶有至多5個選自如下的取代基羥基、硝基、鹵素、氨基、C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4羥基烷基、C1-4氨基烷基、C1-4烷基氨基、C1-4羥基烷氧基、氧代、氰基C1-4烷基、環丙基、C1-4烷基磺酰基C1-4烷基、C1-4烷氧基羰基、二(C1-4烷基)氨基、C1-4烷基氨基C1-4烷基、C1-4鏈烷酰基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷基、C1-4烷基氨基C1-4烷氧基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷氧基、羧基、酰胺基、三氟甲基、氰基、-C(O)NR69R70、-NR71C(O)R72(其中R69、R70、R71和R72可以相同或不同，各自代表氫，C1-4烷基，羥基C1-4烷基或C1-3烷氧基C2-3烷基)和基團-(-O-)f(C1-4烷基)g環D(其中f為0或1，g為0或1，并且環D為選自C3-6環烷基、芳基或含有1-2個獨立選自O、S和N的雜原子的5-6元飽和或不飽和雜環基的環狀基團，且該環狀基團可以帶有1個或多個選自鹵素和C1-4烷基的取代基)；10)-RgR42(其中R42如上定義)；11)-RhR42(其中R42如上定義)；12)-RiR42(其中R42如上定義)；13)-RjX6R42(其中X6代表-O-，-C(O)-，-S-，-SO-，-SO2，-OC(O)-，-NR47C(O)-，-C(O)NR48-，-C(O)ONR48-，-SO2NR49-，-NR50SO2-或-NR51-(其中R47，R48，R49，R50和R51各自獨立代表氫，C1-3烷基，羥基C1-3烷基或C1-3烷氧基C2-3烷基)，并且R42如上定義)；14)-RkX7R42(其中X7代表-O-，-C(O)-，-S-，-SO-，-SO2-，-NR73C(O)-，-C(O)NR74-，-C(O)ONR74-，-SO2NR75-，-NR76SO2-或-NR77-(其中R73，R74，R75，R76和R77各自獨立代表氫，C1-3烷基，羥基C1-3烷基或C1-3烷氧基C2-3烷基)，并且R42如上定義)；15)-RmX8R42(其中X8代表-O-，-C(O)-，-S-，-SO-，-SO2-，-NR57C(O)-，-C(O)NR58-，-SO2NR59-，-NR60SO2-或-NR61-(其中R57，R58，R59，R60和R61各自獨立代表氫，C1-3烷基，羥基C1-3烷基或C1-3烷氧基C2-3烷基)，并且R42如上定義)；16)-RnX9Rn′R42(其中X9代表-O-，-C(O)-，-S-，-SO-，-SO2-，-NR62C(O)-，-C(O)NR63-，-C(O)ONR63-，-SO2NR64-，-NR65SO2-或-NR66-(其中R62，R63，R64，R65和R66各自獨立代表氫，C1-3烷基，羥基C1-3烷基或C1-3烷氧基C2-3烷基)，并且R42如上定義)；17)-RpX9-Rp′R41(其中X9和R41如上定義)；18)C2-5鏈烯基，它可以是未取代的或者可以被一個或多個選自如下的基團所取代羥基、氟、氨基、C1-4烷基氨基、N，N-二(C1-4烷基)氨基，氨基磺酰基，N-C1-4烷基氨基磺酰基和N，N-二(C1-4烷基)氨基磺酰基；19)C2-5炔基，它可以是未取代的或者可以被一個或多個選自如下的基團所取代羥基、氟、氨基、C1-4烷基氨基、N，N-二(C1-4烷基)氨基，氨基磺酰基，N-C1-4烷基氨基磺酰基和N，N-二(C1-4烷基)氨基磺酰基；20)-RtX9Rt′R41(其中X9和R41如上定義)；21)-RuX9Ru′R41(其中X9和R41如上定義)；和22)-RvR67(Rv′)q(X9)rR68(其中X9如上定義，q為0或1，r為0或1，R67為C1-3亞烷基或選自環丙基、環丁基、亞環戊基、亞環己基或含有1-2個獨立選自O、S和N的雜原子的5-6-元飽和雜環基的環狀基團，其中所述C1-3亞烷基可以帶有1或2個選自氧代、羥基、鹵素和C1-4烷氧基的取代基，并且其中的環狀基團可以帶有1或2個選自如下的取代基氧代、羥基、鹵素、氰基、C1-4氰基烷基、C1-4烷基、C1-4羥基烷基、C1-4烷氧基、C1-4烷氧基C1-4烷基、C1-4烷基磺酰基C1-4烷基、C1-4烷氧基羰基、C1-4氨基烷基、C1-4烷基氨基、二(C1-4烷基)氨基、C1-4烷基氨基C1-4烷基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷基、C1-4烷基氨基C1-4烷氧基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷氧基和基團-(-O-)f(C1-4烷基)g環D(其中f為0或1，g為0或1，并且環D為選自C3-6環烷基、芳基或含有1-2個獨立選自O、S和N的雜原子的5-6元飽和或不飽和雜環基的環狀基團，且該環狀基團可以帶有1個或多個選自鹵素和C1-4烷基的取代基)；并且R68為氫，C1-3烷基，或選自環丙基、環丁基、環戊基、環己基和含有1-2個獨立選自O、S和N的雜原子的5-6-元飽和雜環基的環狀基團，其中所述C1-3烷基可帶有1或2個選自氧代、羥基、鹵素、C1-4烷氧基的取代基，且所述環狀基團可帶有1或2個選自如下的取代基氧代、羥基、鹵素、氰基、C1-4氰基烷基、C1-4烷基、C1-4羥基烷基、C1-4烷氧基、C1-4烷氧基C1-4烷基、C1-4烷基磺酰基C1-4烷基、C1-4烷氧基羰基、C1-4氨基烷基、C1-4烷基氨基、二(C1-4烷基)氨基、C1-4烷基氨基C1-4烷基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷基、C1-4烷基氨基C1-4烷氧基、二(C1-4烷基)氨基C1-4烷氧基和基團-(-O-)f(C1-4烷基)g環D(其中f為0或1，g為0或1，并且環D為選自C3-6環烷基、芳基或含有1-2個獨立選自O、S和N的雜原子的5-6元飽和或不飽和雜環基的環狀基團，且該環狀基團可以帶有1個或多個選自鹵素和C1-4烷基的取代基)；以及其中的Ra，Rb，Rb′，Rc，Rc′，Rd，Rg，Rj，Rn，Rn′，Rp，Rp′，Rt′，Ru′，Rv和Rv′獨立選自C1-8亞烷基，該C1-8亞烷基任選被一個或多個選自羥基、鹵素、氨基的取代基取代，Re，Rh，Rk和Rt獨立選自C2-8亞烯基，該C2-8亞烯基任選被一個或多個選自羥基、鹵素、氨基的取代基取代，另外Rt還可以為價鍵；和Rf，Ri，Rm和Ru獨立選自C2-8亞炔基，該C2-8亞炔基任選被一個或多個選自羥基、鹵素、氨基的取代基取代。
7.式(IA)化合物或其鹽、酯或酰胺 其中X為O，或S，S(O)或S(O)2，NH或NR10，其中的R10為氫或C1-6烷基；R5為基團OR11，NR12R13或SR11，其中R11、R12和R13獨立選自任選取代的烴基或任選取代的雜環基，并且R12和R13還可以與它們所連接的氮原子一起形成可另外含有雜原子的芳族或非芳族雜環，R8和R9獨立選自氫，鹵素，C1-4烷基，C1-4烷氧基，C1-4烷氧基甲基，二(C1-4烷氧基)甲基，C1-4鏈烷酰基，三氟甲基，氰基，氨基，C2-5鏈烯基，C2-5炔基，苯基，芐基或含有1-3個獨立選自O、S和N的雜原子的5-6-元雜環基，該雜環基可以是芳香或非芳香性的，并且可以是飽和(經環碳或氮原子連接)或不飽和的(經環碳原子連接)，而且所述苯基、芐基或雜環基可以在一個或多個環碳原子上帶有多至5個選自以下的取代基羥基，鹵素，C1-3烷基，C1-3烷氧基，C1-3鏈烷酰氧基，三氟甲基，氰基，氨基，硝基，C2-4鏈烷酰基，C1-4鏈烷酰基氨基，C1-4烷氧基羰基，C1-4烷基硫烷基，C1-4烷基亞磺酰基，C1-4烷基磺酰基，氨基甲酰基，N-C1-4烷基氨基甲酰基，N，N-二(C1-4烷基)氨基甲酰基，氨基磺酰基，N-C1-4烷基氨基磺酰基，N，N-二(C1-4烷基)氨基磺酰基，C1- 4烷基磺酰基氨基，以及選自嗎啉代、硫代嗎啉代、吡咯烷基、哌嗪基、哌啶基、咪唑烷基和吡唑烷基的飽和雜環基，這種飽和雜環基可以帶有1或2個選自氧代、羥基、鹵素、C1-3烷基、C1-3烷氧基、C1-3鏈烷酰氧基、三氟甲基、氰基、氨基、硝基和C1-4烷氧基羰基的取代基，以及R1，R2，R3，R4獨立選自鹵素，氰基，硝基，三氟甲基，C1-3烷基，-NR14R15(其中R14和R15可以相同或不同，各自代表氫或C1-3烷基)，或-X1R16(其中X1代表直接鍵，-O-，-CH2-，-OCO-，羰基，-S-，-SO-，-SO2-，-NR17CO-，-CONR18-，-SO2NR19-，-NR20SO2-或-NR21-(其中R17，R18，R19，R20和R21各自獨立地代表氫，C1-3烷基或C1-3烷氧基C2-3烷基)，并且R16選自下列十八組基團之一1’)氫或C1-5烷基，該烷基可以是未取代的或者可以被一個或多個選自羥基、氟和氨基的基團所取代；2’)C1-5烷基X2COR22(其中X2代表-O-或-NR23-(其中R23代表氫，C1-3烷基或C1-3烷氧基C2-3烷基)，并且R22代表C1-3烷基，-NR24R25或-OR26(其中R24，R25和R26可以相同或不同，各自代表氫，C1-3烷基或C1-3烷氧基C2-3烷基))；3’)C1-5烷基X3R27(其中X3代表-O-，-S-，-SO-，-SO2-，-OCO-，-NR28CO-，-CONR29-，-SO2NR30-，-NR31SO2-或-NR32-(其中R28，R29，R30，R31和R32各自獨立代表氫，C1-3烷基或C1-3烷氧基C2-3烷基)，并且R27代表氫，C1-3烷基，環戊基，環己基或含有1-2個獨立選自O、S和N的雜原子的5-6-元飽和雜環基，其中所述C1-3烷基可帶有1或2個選自氧代、羥基、鹵素和C1-4烷氧基的取代基，并且所述環狀基團可帶有1或2個選自氧代、羥基、鹵素、C1-4烷基、C1-4羥基烷基和C1-4烷氧基的取代基)；4’)C1-5烷基X4C1-5烷基X5R35(其中X4和X5可以相同或不同，并且各自為-O-，-S-，-SO-，-SO2-，-NR36CO-，-CONR37-，-SO2NR38-，-NR39SO2-或-NR40-(其中R36，R37，R38，R39和R40各自獨立代表氫，C1-3烷基或C1-3烷氧基C2-3烷基)，并且R35代表氫或C1-3烷基)；5’)R41(其中R41為含有1-2個獨立選自O、S和N的雜原子的5-6-元飽和雜環基(經碳或氮連接)，該雜環基可以帶有1或2個選自如下的取代基氧代、羥基、鹵素、C1-4烷基、C1-4羥基烷基、C1-4烷氧基、C1-4烷氧基C1-4烷基和C1-4烷基磺酰基C1-4烷基)；6’)C1-5烷基R41(其中R41如上定義)；7’)C2-5鏈烯基R41(其中R41如上定義)；8’)C2-5炔基R41(其中R41如上定義)；9’)R42(其中R42代表吡啶酮基，苯基或含有1-3個選自O、N和S的雜原子的5-6-元芳族雜環基(經碳或氮連接)，并且所述吡啶酮基、苯基或芳族雜環基可以在碳原子上帶有多至5個選自如下的取代基羥基、鹵素、氨基、C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4羥基烷基、C1-4氨基烷基、C1-4烷基氨基、C1-4羥基烷氧基、羧基、三氟甲基、氰基、-CONR43R44和-NR45COR46(其中R43，R44，R45和R46可以相同或不同，各自代表氫，C1-4烷基或C1-3烷氧基C2-3烷基))；10’)C1-5烷基R42(其中R42如上定義)；11’)C2-5鏈烯基R42(其中R42如上定義)；12’)C2-5炔基R42(其中R42如上定義)；13’)C1-5烷基X6R42(其中X6代表-O-，-S-，-SO-，-SO2-，-NR47CO-，-CONR48-，-SO2NR49-，-NR50SO2-或-NR51(其中R47，R48，R49，R50和R51各自獨立代表氫，C1-3烷基或C1-3烷氧基C2-3烷基)，并且R42如上定義)；14’)C2-5鏈烯基X7R42(其中X7代表-O-，-S-，-SO-，-SO2-，-NR52CO-，-CONR53-，-SO2NR54-，-NR55SO2-或-NR56-(其中R52，R53，R54，R55和R56各自獨立代表氫，C1-3烷基或C1-3烷氧基C2-3烷基)，并且R42如上定義)；15’)C2-5炔基X8R42(其中X8代表-O-，-S-，-SO-，-SO2-，-NR57CO-，-CONR58-，-SO2NR59-，-NR60SO2-或-NR61-(其中R57，R58，R59，R60和R61各自獨立代表氫，C1-3烷基或C1-3烷氧基C2-3烷基)，并且R42如上定義)；16’)C1-3烷基X9C1-3烷基R42(其中X9代表-O-，-S-，-SO-，-SO2-，-NR62CO-，-CONR63-，-SO2NR64-，-NR65SO2-或-NR66-(其中R62，R63，R64，R65和R66各自獨立代表氫，C1-3烷基或C1-3烷氧基C2-3烷基)，并且R42如上定義)；和17’)C1-3烷基X9C1-3烷基R41(其中X9和R41如上定義)。
8.根據前述任一項權利要求的化合物，其中R6和R7都為氫。
9.根據前述任一項權利要求的式(IB)化合物 其中X，R1，R2，R3，R4，R5，R6，R7，R8和R9如權利要求1或權利要求7中定義。
10.根據前述任一項權利要求的化合物，其中R5選自基團OR11，其中R11為氫或C1-4烷基；或基團NR12R13，其中R12或R13之一為氫，而另一個為任選取代的C1-6烷基、任選取代的芳基或任選取代的雜環基，或者R12和R13與它們所連接的氮原子一起形成雜環。
11.根據權利要求1-6或8-10中任一項的化合物，所述化合物為式(I)化合物的磷酸酯前藥。
12.制備權利要求1中定義的式(I)化合物的方法，該方法包括使式(II)化合物 其中X，R8，R9如權利要求1中定義，R1′，R2′，R3′，R4′相應地為權利要求1中定義的基團R1，R2，R3，R4，或者它們的前體；且R85為離去基團，與式(III)化合物反應 其中R6和R7如權利要求1中定義，R5’為權利要求1中定義的基團R5或其前體基團；隨后如果期望或有必要，將任何前體基團R1′，R2′，R3′，R4′或R5’相應地轉化為基團R1，R2，R3，R4或R5，或者將基團R5轉化為不同的這種基團。
13.權利要求1中定義的式(I)化合物或其鹽、酯、酰胺或前藥在制備用于抑制aurora2激酶的藥物中的應用。
14.在需要抑制aurora2激酶的這種治療的溫血動物如人體中抑制aurora2激酶的方法，該方法包括對所述動物施用有效量的式(I)化合物或其鹽、酯、酰胺或前藥。
15.一種藥物組合物，其包括權利要求1中定義的式(I)化合物或其鹽、酯、酰胺或前藥，以及可藥用的載體。
全文摘要
本發明涉及式(I)化合物或其鹽、酯或酰胺；其中X為O，或S，S(O)或S(O)
文檔編號C07D239/88GK1391560SQ00816000
公開日2003年1月15日 申請日期2000年9月18日 優先權日1999年9月21日
發明者A·A·莫特洛克, N·J·基恩 申請人:阿斯特拉曾尼卡有限公司