專利名稱：用于制備1型鈉－氫交換劑抑制劑的方法
技術領域：
本發明涉及1型鈉-氫交換劑(NHE-1)抑制劑和制備該抑制劑的方法。
心肌缺血損傷可發生在門診以及手術前后的處置中，可導致猝死、心肌梗塞或充血性心衰的形成。預防或減少心肌缺血損傷、特別是手術前后的心肌梗塞的需要在醫學上尚沒有得到滿足。人們期望這療法對生命是安全的，減少高危患者的住院治療，提高他們的生命質量，降低他們的總保健成本。
藥理學上的心保護作用將減少心肌梗塞和機能障礙的發生和進展，它們可發生在這些手術處置中(手術前后)。除了減少缺血性心臟病患者的心肌損傷和改善缺血后心肌功能以外，心保護作用還將降低由“危險期”患者(例如年齡超過65歲、不耐受運動、冠狀動脈疾病、糖尿病、高血壓)心肌梗塞和機能障礙引起的心臟疾病的發病率和死亡率，他們需要非心臟手術。
人們還沒有充分了解引起缺血和再灌注后所觀察到的心肌損傷的機制。
各種公開出版物已經公開了胍衍生物的用途，例如用于心律失常的治療。
最近出版的專利申請PCT／IB 99／00206于1999年9月2日出版，公開號為W0 99／43663，其公開內容引用在此作為參考文獻，其中公開了各種NHE-1抑制劑，包括[5-環丙基-1-(喹啉-5-基)-1H-吡唑-4-羰基]胍。
《醫藥化學雜志》1997，40，2017-2034“(2-甲基-5-(甲磺酰)苯甲酰基)胍Na+／H+對向運輸劑抑制劑”和Arzneim．Forsch(《藥物研究》)25，Nr．10(1975)“取代的苯乙酰胍新一類抗高血壓劑”公開了合成酰基胍的方法，除了酰基氯和胍以外，使酯與胍偶聯，其中底物是芳族單環結構。
另外，《雜環化學雜志》24，1669(1987)“2-二甲氨基亞甲基-1，3-二酮與二親核試劑的反應Ⅵ1，5-二取代的1H-吡唑-4-羧酸乙酯或甲酯的合成”公開了5-取代的1-苯基-1H-吡唑-4-羧酸酯的制備方法。
因此，顯然目前需要用于手術前后心肌缺血治療的化合物及其制備方法，本領域也在繼續尋找中。
發明概述本發明在一方面涉及用于制備N-(5-環丙基-1-喹啉-5-基-1H-吡唑-4-羰基)胍、N-(5-環丙基-1-喹啉-5-基-1H-吡唑-4-羰基)胍與甲磺酸化合而成的單甲磺酸鹽的方法。
優選地，該化合作用是在一種極性非質子傳遞溶劑中、在約40℃至約80℃的溫度下進行的。也優選地，該溶劑是丙酮與1-甲基-2-吡咯烷酮的混合物。
本發明在另一方面涉及用于制備N-(5-環丙基-1-喹啉-5-基-1H-吡唑-4-羰基)胍的方法，該方法包括a．使5-環丙基-1-喹啉-5-基-1H-吡唑-4-羧酸與亞硫酰氯在甲苯中化合，生成5-環丙基-1-喹啉-5-基-1H-吡唑-4-酰基氯；和b．使鹽酸胍和氫氧化鈉與5-環丙基-1-喹啉-5-基-1H-吡唑-4-酰基氯的四氫呋喃懸浮液在約-10℃至約10℃的溫度下化合約1小時至約3小時。
優選地，5-環丙基-1-喹啉-5-基-1H-吡唑-4-羧酸與亞硫酰氯在約60℃至約90℃的溫度下化合約一至約三小時。也優選地，5-環丙基-1-喹啉-5-基-1H-吡唑-4-羧酸是在氫氧化鈉的存在下，通過用甲醇在回流下水解而制備的。
本發明在另一方面涉及用于制備5-環丙基-1-喹啉-5-基-1H-吡唑-4-羧酸甲酯的方法，該方法包括在一種胺堿的存在下，使喹啉-5-基肼與甲基-3-環丙基-2-二亞甲氨基-3-氧代丙酸酯在一種反應惰性溶劑中化合。
優選地，該溶劑是乙醇，該胺堿是三乙胺，該化合作用發生在約50℃至約回流的溫度下。
本發明在另一方面涉及用于制備甲基-3-環丙基-2-二亞甲氨基-3-氧代丙酸酯的方法，該方法包括在潔凈條件下，使甲基-3-環丙基-3-氧代丙酸酯與N，N-二甲基甲酰胺二甲基乙縮醛在約50℃至約110℃的溫度下化合約一至約五小時。
本發明在另一方面涉及用于制備N-(5-環丙基-1-喹啉-5-基-1H-吡唑-4-羰基)胍的單甲磺酸鹽的方法，該方法包括a．在潔凈條件下，使甲基-3-環丙基-3-氧代丙酸酯與N，N-二甲基甲酰胺二甲基乙縮醛在約50℃至約110℃的溫度下化合約一至約五小時；b．在一種胺堿的存在下，使喹啉-5-基肼與甲基-3-環丙基-2-二亞甲氨基-3-氧代丙酸酯在一種反應惰性溶劑中化合，生成5-環丙基-1-喹啉-5-基-1H-吡唑-4-羧酸甲酯；c．在氫氧化鈉的存在下，將5-環丙基-1-喹啉-5-基-1H-吡唑-4-羧酸甲酯與甲醇在回流下水解，生成5-環丙基-1-喹啉-5-基-1H-吡唑-4-羧酸；d．使5-環丙基-1-喹啉-5-基-1H-吡唑-4-羧酸與亞硫酰氯化合，生成5-環丙基-1-喹啉-5-基-1H-吡唑-4-酰基氯；e．使鹽酸胍和氫氧化鈉與5-環丙基-1-喹啉-5-基-1H-吡唑-4-酰基氯的四氫呋喃懸浮液在約-10℃至約10℃的溫度下化合約1小時至約3小時，生成N-(5-環丙基-1-喹啉-5-基-1H-吡唑-4-羰基)胍；和f．使N-(5-環丙基-1-喹啉-5-基-1H-吡唑-4-羰基)胍與甲磺酸化合，生成N-(5-環丙基-1-喹啉-5-基-1H-吡唑-4-羰基)胍的單甲磺酸鹽。
與1999年9月2日出版的WO 99／43663所公開的操作比較，本發明提供了多種優點。例如，優選的是與亞硫酰氯在甲苯中生成酰基氯，這是因為直接從反應中分離出酰基氯的HCl鹽，為固體。將酰基氯在四氫呋喃(THF)中用胍HCl和含水氫氧化鈉在低溫下處理，可提高純度和產率。高溫導致酰基氯水解的增加以及其他副產物的生成。
“藥學上可接受的”指載體、稀釋劑、賦形劑和／或鹽必須與制劑的其他成分是可相容的，對接受者是無害的。
本文所用的表達方式“反應惰性溶劑”和“惰性溶劑”指該溶劑或溶劑的混合物不與原料、試劑、中間體或產物發生不利于所需產物的產出這種方式的相互作用。
具有普通技能的化學工作者會認識到，某些本發明化合物將含有一個或多個具有特定立體化學或幾何構型的原子，從而形成立體異構體和構型異構體。所有這樣的異構體和它們的混合物也包括在本發明中。還包括本發明化合物的水合物和溶劑化物。
借助于描述本發明的說明書和權利要求書，其他特征和優點將是顯而易見的。
一般來說，本發明化合物、即[5-環丙基-1-(喹啉-5-基)-1H-吡唑-4-羰基]-胍及其鹽(包括單甲磺酸鹽)可以按照化學領域已知的方法加以制備，特別是按照本文的說明。本發明化合物的某些制備方法是作為發明的進一步特征加以提供的，通過下列反應流程加以闡述。其他方法描述在實驗部分。
流程Ⅰ
按照流程Ⅰ，式Ⅱ化合物與過量式Ⅲ化合物、即N，N-二甲基甲酰胺二甲基乙縮醛化合，可選地在一種酸催化劑、例如對甲苯磺酸的存在下，在潔凈條件下，在約50℃至約110℃的溫度下反應約一至約五小時，優選地在約70℃至約80℃的溫度下反應約一至約兩小時，制得式Ⅳ化合物。該反應也可以在乙酸乙酯中進行。
式Ⅳ化合物與式Ⅴ化合物在一種惰性溶劑、例如乙醇中環化，優選地在一種胺堿、例如三乙胺的存在下，在約50℃至約回流(78℃)的溫度下反應約1小時至約四小時，生成式Ⅵ的吡唑化合物。該反應也可以在乙酸乙酯和甲醇中進行。
將式Ⅵ吡唑用一種堿、例如氫氧化鈉在一種溶劑、例如甲醇中水解，適宜在環境溫度或優選在高溫(例如回流)下反應約一小時至約五小時，制得式Ⅶ的酸。
一般地，式Ⅶ酸與胍在一種適當的偶聯劑的存在下偶聯。適當的偶聯劑是可將羧酸轉化為反應性基團者，該反應性基團一旦與胺反應，即生成酰胺鍵。
偶聯劑可以是這樣一種試劑，當它與羧酸和胍一起混合時，即按照一罐法進行該縮合作用。示范性偶聯劑是鹽酸1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺-羥基苯并三唑(EDC／HOBT)、二環己基碳二亞胺／羥基苯并三唑(HOBT)、2-乙氧基-1-乙氧羰基-1，2-二氫喹啉(EEDQ)和二乙基磷酰氰。偶聯是在過量胍這種堿的存在下，在一種惰性溶劑、優選為一種非質子傳遞溶劑中、在約-20℃至約50℃的溫度下進行約1至約48小時。示范性溶劑包括乙腈、二氯甲烷、二甲基甲酰胺和氯仿或它們的混合物。
優選地，偶聯劑也是這樣的試劑，它把羧酸轉化為活化的中間體，后者在第一步中分離出來和／或生成，然后在第二步中與胍反應。這樣的偶聯劑和活化中間體的實例是用于生成酰基氯的亞硫酰氯或草酰氯、用于生成酰基氟或烷基氯甲酸酯(例如異丁基或異丙烯基氯甲酸酯)的氰尿酰氟、用于(與一種叔胺堿)生成羧酸混合酐的丙烷膦酸酐(丙烷膦酸的酸酐，PPA)或用于生成酰基咪唑的羰基二咪唑。如果偶聯劑是草酰氯，那么使用少量二甲基甲酰胺作為助溶劑以及另一種溶劑(例如二氯甲烷)是有利的，可催化酰基氯的生成。該活化的酸衍生物可以通過將該中間體在適當的溶劑中與適當的堿混合而進行偶聯。適當的溶劑／堿組合例如在過量胍這種堿的存在下的二氯甲烷、二甲基甲酰胺或乙腈或它們的混合物。其他適當的溶劑／堿組合包括水或(C1-C5)醇或它們的混合物以及一種助溶劑、例如二氯甲烷、四氫呋喃或二噁烷，和一種堿、例如氫氧化鈉、氫氧化鉀或氫氧化鋰，堿是足量的，以消耗反應中釋放的酸。這些偶聯劑的使用和溶劑與溫度的適當選擇是本領域技術人員已知的，或者按照本說明書可以容易地從文獻中加以確定。可用于偶聯羧酸的這些和其他示范性條件描述在Houben-Weyl，Vol XV，partⅡ，E．Wunsch，Ed．，G．Theime Verlag，1974，Stuttgart；M．Bodansky，肽合成原理(Principles of Peptide Synthesis)，Springer-Verlag，Berlin 1984；肽的分析、合成和生物學(ThePeptides，Analysis，Synthesis and Biology)(ed．E．Gross和J．Meienhofer)，vols 1-5(Academic Press，NY 1979-1983)。
在優選的實施方式中，將式Ⅶ酸用過量亞硫酰氯(例如3至6當量)在甲苯等非質子傳遞溶劑中、在約60℃至約90℃的溫度下活化約十五分鐘至約兩小時，優選地在約75℃的溫度下活化約一至約兩小時。
所得式Ⅷ的活化酰基氯的無水四氫呋喃溶液與過量鹽酸胍和一種無機堿(例如氫氧化鈉)水溶液在四氫呋喃中、在約-20℃至約10℃的溫度下化合約一小時至約三小時，在最后一小時使溫度升至環境溫度，制得式Ⅸ化合物。
式Ⅸ化合物與甲磺酸在一種非質子傳遞溶劑中、在約40℃至約80℃的溫度下化合約10分鐘至約一小時，溶劑優選為丙酮與1-甲基-2-吡咯烷酮的混合物，優選為約90％至60％丙酮，其余為1-甲基-2-吡咯烷酮，然后在避光條件下，在約20℃至約30℃的溫度下攪拌約3小時至約6小時，優選地在約環境溫度下攪拌約5小時。優選地，將固體再次在丙酮中拌漿約6至約17小時。鹽的生成也可以在四氫呋喃中進行。如果選擇了這種溶劑，那么95％乙醇淤漿是優選的。
用于上述化合物的原料和試劑也是易于獲得的，或者易為本領域技術人員利用常規的有機合成方法合成。例如，本文所用的一些化合物涉及或者來源于存在巨大科學價值和商業需要的天然化合物，因此，這樣的化合物是商業上可得到的，或者是文獻中所報道的，或者通過文獻中所報道的方法易于從其他普遍可獲得的物質制得。
本領域技術人員將認識到，很多用在本文方法中的化合物可以以若干互變異構形式存在。所有這些互變異構形式被認為是本發明的一部分。例如，化合物的羰基胍部分的所有互變異構形式都是包括在本發明中的。
本發明化合物[5-環丙基-1-(喹啉-5-基)-1H-吡唑-4-羰基]-胍是堿性的，它與藥學上可接受的陰離子生成鹽。所有這樣的鹽、包括二鹽都在本發明的范圍之內，它們可以通過常規方法制備。例如，制備方法可以是在含水、不含水或部分含水的介質中，使酸性與堿性反應物簡單地接觸。回收鹽的方法可以是過濾、用一種非溶劑沉淀后過濾、蒸發溶劑，或者在水溶液的情況下，還可以是冷凍干燥，視情況而定。
另外，當本發明化合物生成代謝產物、水合物或溶劑化物時，它們也在本發明的范圍之內。
本領域技術人員將認識到，其他心血管劑可以與本發明化合物聯合使用，例如β-阻滯劑(如醋丁洛爾、阿替洛爾、波吲洛爾、拉貝洛爾、甲吲洛爾、納多洛爾、氧烯洛爾、吲哚洛爾、普萘洛爾、索他洛爾)、鈣通道阻滯劑(如氨氯地平、硝苯地平、尼索地平、尼群地平、維拉帕米)、ACE抑制劑(如卡托普利、依那普利)、硝酸鹽(如硝酸異山梨酯、5-單硝酸異山梨酯、硝酸甘油)、利尿劑(如氫氯噻嗪、吲達帕胺、吡咯他尼、希帕胺)、苷(如地高辛、甲地高辛)、溶血栓劑(如tPA)、血小板抑制劑(如reopro)、阿司匹林、雙嘧達莫、氯化鉀、可樂定、哌唑嗪、醛糖還原酶抑制劑(如唑泊司他)和腺苷A3受體激動劑。
本發明化合物抑制鈉／質子(Na+／H+)交換運輸系統，從而可用作由鈉／質子(Na+／H+)交換運輸系統的加速作用導致的疾病的治療劑或預防劑，例如心血管疾病(如動脈硬化、高血壓、心律失常(如缺血性心律失常、由心肌梗塞引起的心律失常、PTCA后或血栓溶解后的心律失常等)、心絞痛、心肥大、心肌梗塞、心衰(如充血性心衰、急性心衰、心肥大等)、PTCA后再狹窄、休克(如出血性休克、內毒素性休克等))、腎臟疾病(如糖尿病、糖尿病性腎病、缺血性急性腎衰等)、與缺血或缺血再灌注有關的器官病癥(如與心肌缺血再灌注有關的病癥、急性腎衰或由手術治療誘發的病癥，如冠狀動脈旁路搭橋術(CABG)、血管手術、器官移植術、非心臟手術或經皮經腔冠狀動脈成形術(PTCA))、腦血管疾病(如缺血性中風、出血性中風等)、腦缺血性病癥(如與腦梗塞有關的病癥、腦卒中后遺癥或腦水腫)。
本發明化合物可用作進行性心肌缺血(急性冠狀綜合征，例如心肌梗塞或不穩定性絞痛)或腦缺血(例如中風)患者的心肌保護劑。本發明化合物也可用作被診斷為冠狀心臟病(例如以前的心肌梗塞或不穩定性絞痛)的患者或心肌梗塞高危(例如年齡超過65歲，具備兩個或以上冠狀心臟病的危險因素)患者的慢性心肌保護劑。
本發明化合物有效減少由缺血導致的組織損傷(例如基本上防止了組織損傷，包括組織保護作用)。
單個或一組優選的缺血組織是心、腦、肝、腎、肺、腸、骨骼肌、脾、胰腺、神經、脊髓、視網膜組織、脈管系統或腸組織。尤其優選的缺血組織是心組織。缺血損傷可能發生在器官移植術過程中。
除此以外，本發明化合物值得注意的是它對細胞增殖的強抑制作用，例如成纖維細胞的增殖和血管平滑肌細胞的增殖。為此，本發明化合物作為治療劑是有價值的，用于細胞增殖代表主要或次要病因的疾病，因此可用作抗動脈硬化劑，以及對抗糖尿病晚期并發癥、癌癥、肺纖維變性、肝纖維變性或腎纖維變性等纖維變性疾病、腎小球硬化、器官肥大或增生，特別是前列腺增生或肥大、肺纖維變性、糖尿病并發癥或PTCA后復發的狹窄，或者是由內皮細胞損傷導致的疾病。
本發明化合物作為藥劑在哺乳動物(例如人)的如本文所述疾病治療中的應用例如手術過程中的心肌保護作用、進行性心或腦缺血患者的心肌保護作用或被診斷為冠狀心臟病的患者的慢性心保護作用，本發明化合物在常規的臨床前期心保護作用測定中的活性證實了這種應用(參見體內測定，Klein，H．等《循環》92912-917(1995)；離體心臟測定，Scholz，W．等《心血管研究》29260-268(1995)；抗心律失常測定，Yasutake M．等《美國生理學雜志》36H2430-H2440(1994)；NMR測定，Kolke等《胸心血管手術雜志》112765-775(1996))。這些測定也提供了一種可將本發明化合物的活性與其他已知化合物的活性進行比較的手段。這些比較的結果可用于在治療這些疾病時，確定對包括人在內的哺乳動物的劑量水平。
本發明化合物可以通過任意方法給藥，該方法將化合物優選地釋放到所需的組織(例如肝和／或心組織)。這些方法包括口服途徑、腸胃外、十二指腸內途徑等。一般來說，本發明化合物可以是單劑(例如每日一次)或多劑的，或者通過恒定輸液給藥。
本發明化合物例如可用于減少或減小損傷，它直接作用于任何對缺血／再灌注損傷敏感的組織(例如心、腦、肺、腎、肝、腸、骨骼肌、視網膜)，損傷是由缺血引起的(例如心肌梗塞)。活性化合物因此可用于預防性地防止、也就是(前瞻性地或預防性地)減弱或阻止面臨缺血(例如心肌缺血)危險的患者的組織損傷(例如心肌組織)。
一般來說，本發明化合物可以口服給藥或腸胃外給藥(例如靜脈內、肌內、皮下或髓內)。也可以適用局部給藥，例如患者患有胃腸道病癥，或者根據醫師的判斷，藥物治療應用于組織或器官表面是最好的。
化合物的給藥量和時間當然將取決于受治療者、疾病的嚴重性、給藥方式和開方醫師的判斷。由于患者與患者的差異性，下面給出的劑量是指導性的，醫師可以調節藥物的劑量，以達到醫師認為適合于患者的治療。在考慮所需的治療程度時，醫師必須權衡各種因素，例如患者的年齡、先前存在的疾病的表現以及其他疾病的表現(例如心血管疾病)。
例如，在一種給藥方式中，本發明化合物可以在心手術之前(例如手術前二十四小時內)和／或過程中和／或之后(例如手術后二十四小時內)給藥，手術存在心肌缺血的危險。在尤其優選的方式中，將輸液在手術前給藥，劑量為約1mg至約300mg，時間為約一分鐘至約一小時，然后在手術前的其余時間、手術中和手術后的階段進行恒定輸液，劑量為約1mg／kg／天至約100mg／kg／天，例如包括手術治療后約2至約7天。本發明化合物也可以以長期每日方式給藥。
本發明化合物的用量對缺血的保護作用是有效的。優選的本發明化合物的劑量為約0．001至約100mg／kg／天。尤其優選的本發明化合物的劑量為約0．01至約50mg／kg／天。
本發明化合物一般以藥物組合物的形式給藥，該組合物包含本發明化合物以及藥學上可接受的載體、賦形劑或稀釋劑。因此，本發明化合物可以單獨或與另一種試劑一起以任意常規的口服、腸胃外、直腸或透皮劑型給藥。
對口服給藥來說，藥物組合物可以采取溶液、懸浮液、片劑、丸劑、膠囊、粉末等形式。所用片劑含有各種賦形劑，例如檸檬酸鈉、碳酸鈣和磷酸鈣，以及各種崩解劑，例如淀粉、優選的馬鈴薯或木薯淀粉和某些復合硅酸鹽，以及粘合劑，例如聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖、明膠和阿拉伯膠。另外，潤滑劑、例如硬脂酸鎂、月桂基硫酸鈉和滑石通常對壓片是非常有用的。也使用相似類型的固體組合物作為軟膠囊和硬膠囊的填充劑；在這一點上優選的材料也包括乳糖或奶糖以及大分子聚乙二醇。當口服給藥需要含水懸浮液和／或酏劑時，可將本發明化合物與各種防腐劑、緩沖劑、甜味劑、矯味劑、著色劑、乳化劑和／或懸浮劑混合，以及稀釋劑，例如水、乙醇、丙二醇、甘油及其各種可能的組合。
對腸胃外給藥來說，例如可以使用芝麻油或花生油或含水丙二醇的溶液，以及相應水溶性鹽的無菌水溶液。如果必要的話，這些水溶液可以是適當緩沖的，并且液體稀釋劑首先用足量的鹽水或葡萄糖等賦予等滲性。這些水溶液尤其適合于靜脈內、肌內、皮下和腹膜內注射。在這一點上，所用無菌的含水介質按照本領域技術人員熟知的標準技術，都是易于得到的。
對透皮(例如局部)給藥來說，制備稀的、無菌的、含水或部分含水溶液(濃度通常為約0．1％至約5％)、不含水的溶液，與上述腸胃外溶液類似。
對本領域技術人員來說，制備含有一定量活性成分的各種藥物組合物的方法是已知的，或者按照本文所公開的將是顯而易見的。例如，制備藥物組合物的方法參見《Remington’s PharmaceuticalScience》Mack Publishing Company，Easter，Pa．，15th Edition(1975)。
根據本發明的藥物組合物例如可以含有0．0001％-95％的本發明化合物。不論怎樣，所要給藥的組合物或制劑將含有一定量根據本發明的化合物，其含量對治療患者的疾病／狀態是有效的。
本發明化合物一般將以適宜的制劑給藥。下列制劑實例僅供舉例說明，并不打算限制本發明的范圍。
在下列制劑中，“活性成分”指本發明化合物。
如下制備靜脈內制劑制劑1靜脈內溶液 將上述成分的溶液對患者靜脈內給藥。
上述活性成分也可以是試劑的組合。
實施例實施例1將甲基-3-環丙基-3-氧代丙酸酯(15g，106mmol，1eq(當量))和N，N-二甲基甲酰胺二甲基乙縮醛(14．7ml，111mmol，1．05eq)在75℃N2下加熱1．5小時。然后將所得橙色的油冷卻至室溫。TLC分析(1∶1 EtOAc／己烷)指示原料消失，出現微小弱極性斑點和明顯強極性斑點(甲基-3-環丙基-2-二亞甲氨基-3-氧代丙酸酯)。將粗的混合物用在下面的步驟中。
實施例2將粗的甲基-3-環丙基-2-二亞甲氨基-3-氧代丙酸酯(20．9g，106mmol，1．07eq)用乙醇(250ml)稀釋。按順序先加入三乙胺(34．4ml，247mmol，2．5eq)，再加入喹啉-5-基-肼(22．9g，98．6mmol，1eq)。加入喹啉-5-基-肼后觀察到有輕微氣體放出。所得不均勻的混合物在N2下加熱回流(78℃)2小時。加熱3分鐘后，混合物變得均勻和非常黑。然后將混合物冷卻至室溫。TLC分析(1∶1EtOAc／己烷)指示有輕微弱極性斑點(5-環丙基-1-喹啉-5-基-1H-吡唑-4-羧酸甲酯)。APCI質譜指示還有所需的產物。然后將反應混合物濃縮。向殘余物中加入EtOAc(300ml)和0．1N HCl(400ml)。該乳液在室溫下攪拌10分鐘，然后通過硅藻土Celite墊過濾以除去固體。分離所得兩相混合物。含水層用EtOAc萃取(2x300ml)。合并后的有機層用0．1N HCl洗滌(2x300ml)，然后經硫酸鈉干燥，濃縮。向殘余物中加入熱的異丙醚(80ml)。所得渾濁溶液攪拌2分鐘。然后加入己烷(125ml)。使固體形成顆粒過夜。過濾收集固體，得到產物5-環丙基-1-喹啉-5-基-1H-吡唑-4-羧酸甲酯，為黃橙色粉末(20．8g，2步產率72％)。
實施例3向5-環丙基-1-喹啉-5-基-1H-吡唑-4-羧酸甲酯(20g，68．2mmol，1eq)的MeOH(120ml)溶液中加入2N NaOH(54．5ml，109mmol，1．6eq)。將所得溶液在N2下加熱回流(65℃)1．5小時，然后冷卻至室溫。TLC分析(1∶1 EtOAc／己烷)指示原料消失。在真空下的旋轉蒸發器上小心地加熱(35℃)，除去甲醇。堿性含水層然后用EtOAc洗滌(2x100ml)。所得堿性含水層用濃HCl緩慢酸化至pH 1至2。產物在酸化過程中沉淀出來。淤漿在室溫下攪拌0．5小時，然后過濾收集固體。固體用1N HCl洗滌(2x25ml)，干燥，得到酸，為淡棕色固體(18．8g，99％)。
實施例4向攪拌下的5-環丙基-1-喹啉-5-基-1H-吡唑-4-羧酸(25g，89．5mmol，1eq)的甲苯(250ml)懸浮液中加入亞硫酰氯(32．6ml，448mmol，5eq)。將所得懸浮液在75℃N2下加熱1．5小時。反應混合物始終是不均勻的。過濾收集固體酰基氯。黃褐色固體用甲苯洗滌(3x50ml)，在真空下干燥。將酰基氯的THF(250ml)懸浮液冷卻至0℃。在N2下，通過滴加漏斗歷經5-10分鐘加入鹽酸胍(17．1g，179mmol，2eq)和2N NaOH(224ml，448mmol，5eq)的水溶液。加入堿性胍的水溶液后反應變得均勻和兩相。混合物在0℃下攪拌，同時歷經1小時緩慢加熱至室溫，然后在室溫下再攪拌1小時。TLC分析(4∶1二氯甲烷／甲醇)指示出現強極性斑點(N-(5-環丙基-1-喹啉-5-基-1H-吡唑-4-羰基)-胍)和痕量原料酸。在真空下小心地加熱(35℃)，除去THF，導致產物沉淀出來。含水層在室溫下攪拌1小時，使產物形成顆粒。過濾收集固體，用水洗滌(2x50ml)，干燥。產物的顏色從灰白色到中等棕色不等。這一批是中等棕色。在MeOH(125ml)中再次拌漿30分鐘，得到所需產物N-(5-環丙基-1-喹啉-5-基-1H-吡唑-4-羰基)-胍(22．6g，產率79％)，為淡黃褐色固體。
實施例5將N-(5-環丙基-1-喹啉-5-基-1H-吡唑-4-羰基)-胍(3．08kg，9．61mol，1eq)懸浮在丙酮(30．8kg)中。加入1-甲基-2-吡咯烷酮(12．3kg)，得到均勻的溶液。另用4．8kg丙酮清洗前者(具體來說沒有過濾)。反應溶液加熱至50℃。加入甲磺酸(0．83kg，8．65mol，0．9eq)的丙酮(8．3kg)溶液，同時保持溫度低于55℃。將所得淤漿在50℃下攪拌1至2小時，然后冷卻，過濾。濾餅用丙酮清洗，然后干燥，得到N-(5-環丙基-1-喹啉-5-基-1H-吡唑-4-羰基)-胍的單甲磺酸鹽(3．24kg，81％)，為灰白色固體。
實施例6向3．165kg實施例5產物中加入123升(3．8體積)丙酮。將淤漿在室溫下攪拌20小時。淤漿過濾，固體在50℃下干燥。產物是具有等徑形式的無水晶體(3．145kg，99％)，熔點(開始)228℃。
權利要求
1.用于制備N-(5-環丙基-1-喹啉-5-基-1H-吡唑-4-羰基)-胍的單甲磺酸鹽的方法，該方法包括使N-(5-環丙基-1-喹啉-5-基-1H-吡唑-4-羰基)-胍與甲磺酸化合。
2.如權利要求1所述的方法，其中該化合物是在一種極性非質子傳遞溶劑中、在約40℃至約80℃的溫度下被化合的。
3.如權利要求2所述的方法，其中該溶劑是丙酮與1-甲基-2-吡咯烷酮的混合物。
4.用于制備N-(5-環丙基-1-喹啉-5-基-1H-吡唑-4-羰基)胍的方法，該方法包括a．使5-環丙基-1-喹啉-5-基-1H-吡唑-4-羧酸與亞硫酰氯在甲苯中化合，生成5-環丙基-1-喹啉-5-基-1H-吡唑-4-酰基氯；和b．使鹽酸胍和氫氧化鈉與5-環丙基-1-喹啉-5-基-1H-吡唑-4-酰基氯的四氫呋喃懸浮液在約-10℃至約10℃的溫度下化合約1小時至約3小時。
5.如權利要求4所述的方法，其中5-環丙基-1-喹啉-5-基-1H-吡唑-4-羧酸與亞硫酰氯在約60℃至約90℃的溫度下化合約一至約三小時。
6.如權利要求4所述的方法，其中5-環丙基-1-喹啉-5-基-1H-吡唑-4-羧酸是在氫氧化鈉的存在下，通過用甲醇在回流下水解而制備的。
7.用于制備5-環丙基-1-喹啉-5-基-1H-吡唑-4-羧酸甲酯的方法，該方法包括在一種胺堿的存在下，使喹啉-5-基-肼與甲基-3-環丙基-2-二亞甲氨基-3-氧代丙酸酯在一種反應惰性溶劑中化合。
8.如權利要求7所述的方法，其中該溶劑是乙醇，該胺堿是三乙胺，該化合作用發生在約50℃至約回流的溫度下。
9.用于制備甲基-3-環丙基-2-二亞甲氨基-3-氧代丙酸酯的方法，該方法包括在潔凈條件下，使甲基-3-環丙基-3-氧代丙酸酯與N，N-二甲基甲酰胺二甲基乙縮醛在約50℃至約110℃的溫度下化合約一至約五小時。
10.用于制備N-(5-環丙基-1-喹啉-5-基-1H-吡唑-4-羰基)-胍的單甲磺酸鹽的方法，該方法包括a．在潔凈條件下，使甲基-3-環丙基-3-氧代丙酸酯與N，N-二甲基甲酰胺二甲基乙縮醛在約50℃至約110℃的溫度下化合約一至約五小時；b．在一種胺堿的存在下，使喹啉-5-基肼與甲基-3-環丙基-2-二亞甲氨基-3-氧代丙酸酯在一種反應惰性溶劑中化合，生成5-環丙基-1-喹啉-5-基-1H-吡唑-4-羧酸甲酯；c．在氫氧化鈉的存在下，將5-環丙基-1-喹啉-5-基-1H-吡唑-4-羧酸甲酯用甲醇在回流下水解，生成5-環丙基-1-喹啉-5-基-1H-吡唑-4-羧酸；d．使5-環丙基-1-喹啉-5-基-1H-吡唑-4-羧酸與亞硫酰氯化合，生成5-環丙基-1-喹啉-5-基-1H-吡唑-4-酰基氯；e．使鹽酸胍和氫氧化鈉與5-環丙基-1-喹啉-5-基-1H-吡唑-4-酰基氯的四氫呋喃懸浮液在約-10℃至約10℃的溫度下化合約1小時至約3小時，生成N-(5-環丙基-1-喹啉-5-基-1H-吡唑-4-羰基)胍；和f．使N-(5-環丙基-1-喹啉-5-基-1H-吡唑-4-羰基)胍與甲磺酸化合，生成N-(5-環丙基-1-喹啉-5-基-1H-吡唑-4-羰基)胍的單甲磺酸鹽。
全文摘要
公開了制備NHE－1抑制劑的方法。NHE－1抑制劑可用于減少由組織缺血導致的組織損傷。
文檔編號C07D215/02GK1295070SQ0013166
公開日2001年5月16日 申請日期2000年10月24日 優先權日1999年10月29日
發明者N·J·湯姆 申請人:輝瑞產品公司