專利名稱：一種從柑桔類種子中提取藥物活性物質的工藝的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種從植物種子中分別提取多種有效成份的方法，尤其是一種從柑桔類種子中提取藥物活性物質的工藝。
眾所周知，包括柑桔、橙子、柚子、檸檬在內的云香科柑桔類果實之種子是一類常用的中藥材，其主要原因在于它們含有多種藥物活性物質，如以亞油酸、亞麻酸為主的活性脂肪酸；以檸檬苦素類化合物為主的抗癌活性物質和以檸檬苦素配糖體為主的功能性活性物質。前者是一種降血脂、抗衰老的藥物活性物質，后者則是一類具有解毒作用和抗癌變的藥物活性物質。然而，至今尚未見有關從柑桔類種子中有效提取上述藥物活性物質的工業生產方法報道。中國專利CN1056804A公開了一種“含柑桔種子提取物的低溫或冷凍加工食品含柑桔種子提取物的組合物及其用途”，其主要技術特征是采用水提、醇提或水提與醇提相結合的傳統工藝方法將柑桔類果實、種子中的水溶性活性物質提取出來，配合其他的化學添加劑或抗菌性提取物，組合成一種用于低溫或冷凍加工食品中的殺菌、保鮮劑。該工藝方法的含柑桔種子提取物的組合物是一種組份雜亂、由大量水提、醇提物及其他化學添加劑和抗菌性提取物混雜在一起而組成的液態混合物，而起殺菌、保鮮作用的僅僅是其中少數幾種活性化合物或是其他抗菌性提取物，剩余的大部分化合物則既不能被分離、提純，又不能起到有益的或輔助的作用；有的化合物還不太穩定、易于發生物理或化學變化，進而影響有效成份的殺菌、保鮮效果。此外，該工藝方法缺乏規范化的工藝和操作要求，其種子提取物的成分確定性、穩定性及有效性均較難以保證。
本發明的目的就在于克服上述現有技術中的不足之處，提出一種工藝規范，流程合理，產品系列化且易于控制和操作，能夠充分提取柑桔類種子中的各種有效藥物活性物質并將其分離、提純，其綜合利用率、產品制得率及產品純度均較高的從柑桔類種子中提取藥物活性物質的工藝。
本發明的目的可以通過實施下列技術方案來達到將經過洗滌、干燥的柑桔類種子粉碎至40-80目，置于索氏提取器中并使用醚類有機溶劑于30-60℃的溫度下進行20-40小時的提取操作，經過濾器分離出濾渣和濾液；上述濾液經過加熱、減壓濃縮將醚類有機溶劑回收后，便得到含有多種活性脂肪酸的種子油；選擇性先用酮類或氯代烷烴類有機溶劑或選擇性先用醇類有機溶劑分別于30-60℃的溫度下，對所得濾渣進行上述兩類溶劑先后互補且各為5--10小時的兩次提取操作，并先后用過濾器分離出濾渣和濾液；先后獲得的兩種濾液分別經過加熱、減壓濃縮將酮類或氯代烷烴類有機溶劑或者醇類有機溶劑回收后，分別得到含有多種檸檬苦素類化合物的濃縮液和含有多種檸檬苦素配糖體化合物的濃縮液；再分別通過加入氯代烷烴溶解、加入異丙醇進行結晶、分離得到含有多種檸檬苦素類化合物的粗結晶體或者經過加入有機溶劑溶解、通過硅膠色譜柱進行結晶、分離得到各種檸檬苦素配糖體化合物結晶體；最后，經過先后兩次提取操作所剩余的濾渣通過造粒后成為顆粒肥料。為了獲得更佳的使用效果，本發明還可以進一步采取下列措施在索氏提取器中用來提取被粉碎柑桔類種子的最佳有機溶劑是石油醚；在提取操作中所使用的最佳酮類有機溶劑是丙酮；在提取操作中所使用的最佳氯代烷烴類有機溶劑是二氯甲烷；在提取操作中所使用的最佳醇類有機溶劑是乙醇；在得到的含有多種檸檬苦素類化合物粗結晶體中，再加入醇類有機溶劑溶解，經過硅膠色譜柱進行分離、結晶，分別獲得各種檸檬苦素類化合物結晶。
附圖
為本發明的生產工藝流程方框示意圖。
以下結合實施例及附圖對本發明作進一步詳細地描述。
實施例1取經洗滌、干燥的柚子種籽100克粉碎至40目后，置于索氏提取器中用800毫升石油醚在45℃溫度下浸泡提取24小時，經過濾器分離濾渣后，將濾液用旋轉蒸餾器進行減壓濃縮，回收石油醚并獲得柚籽油約45克。經測試柚籽油主要成分的重量百分比如下十四碳酸0．08油 酸22．4十五碳酸0．05亞油酸40．6十五碳烯酸 0．01亞麻酸6．34棕櫚酸 27．0芥子酸0．34十七碳酸0．11其 它0．11硬脂酸 3．14分離后的濾渣中加入300毫升丙酮，在40℃溫度下回流6小時，經過負壓抽濾分離濾渣后，收集濾液并用旋轉蒸餾器進行減壓濃縮，得膠狀濃縮物。加入為其等量的二氯甲烷溶解該濃縮物，再經過濾除雜質后，加入雙倍量的異丙醇充分混勻，靜置12小時，得粗結晶體約0．65克。將粗結晶體重復結晶兩次，獲得純檸檬苦素結晶約0．41克；收集結晶時的濾液，經硅膠色譜柱分離，以三氯甲烷∶甲醇=9∶1為洗脫劑，分段收集洗脫液并分別減壓濃縮后，分別獲得諾米林結晶約146毫克和奧吧叩酮結晶31毫克。
上述經過負壓抽濾分離后的濾渣中加入300毫升甲醇，在50℃溫度下回流6小時，經過負壓抽濾分離濾渣后，收集濾液并用旋轉蒸餾器進行減壓濃縮至40-50毫升，再經硅膠色譜柱分離，以三氯甲烷∶甲醇=9∶1為洗脫劑，分段收集洗脫液并分別減壓濃縮后，可得到檸檬苦素配糖體結晶62毫克，諾米林配糖體45毫克和奧吧叩酮配糖體13毫克。最終的濾渣可以通過調配適當的氮、磷、鉀比例和造粒工序制成顆粒肥料。
實施例2取經洗滌、干燥的柑桔種籽100克粉碎至60目后，于索氏提取器中用700毫升石油醚在50℃溫度下浸泡提取20小時，經過濾器分離濾渣后，將濾液用旋轉蒸餾器進行減壓濃縮，回收石油醚并獲得桔籽油約44克。經測試桔籽油主要成分的重量百分比如下十二碳酸0．04油 酸28．1十四碳酸0．01亞油酸36．8棕櫚酸 25．7亞麻酸6．62十七碳酸0．17芥子酸0．01硬脂酸 2．56其 它0．03分離后的濾渣中加入300毫升甲醇，在50℃溫度下回流6小時，經過負壓抽濾分離濾渣后，收集濾液并用旋轉蒸餾器進行減壓濃縮至40-50毫升，再經硅膠色譜柱分離，以三氯甲烷∶甲醇=9∶1為洗脫劑，分段收集洗脫液并分別減壓濃縮后，可以得到檸檬苦素配糖體結晶68毫克，諾米林配糖體54毫克和奧吧叩酮配糖體23毫克。
上述經過負壓抽濾分離后的濾渣中加入300毫升丙酮，在40℃溫度下回流6小時，經過負壓抽濾分離濾渣后，收集濾液并用旋轉蒸餾器進行減壓濃縮，得膠狀濃縮物。加入為其等量的二氯甲烷溶解該濃縮物，再經過濾除雜質后，加入雙倍量的異丙醇充分混勻，靜置12小時，得粗結晶體約0．62克。將粗結晶體重復結晶兩次，獲得純檸檬苦素結晶約0．394克；收集結晶時的濾液，經硅膠色譜柱分離，以三氯甲烷∶甲醇=9∶1為洗脫劑，分段收集洗脫液并分別減壓濃縮后，可獲得諾米林結晶約134毫克和奧吧叩酮結晶27毫克。最終的濾渣可以通過調配適當的氮、磷、鉀比例和造粒工序制成顆粒肥料。
實施例3取經洗滌、干燥的橙子種籽100克粉碎至50目后，于索氏提取器中用900毫升石油醚在40℃溫度下浸泡提取30小時，經過濾器分離濾渣后，將濾液用旋轉蒸餾器進行減壓濃縮，回收石油醚并獲得橙籽油約44克。經測試桔籽油主要成分的重量百分比如下十二碳酸0．03油 酸26．2十四碳酸0．02亞油酸37．8十五碳酸0．04亞麻酸6．45十七碳酸0．15芥子酸0．05棕櫚酸 26．3其 它0．06硬脂酸 2．83分離后的濾渣按實施例1用丙酮提取檸檬苦素類化合物粗晶體約0．65克。按實施例1進一步精制得到純檸檬苦素結晶約0．408克，諾米林結晶約144毫克和奧吧叩酮結晶33毫克。將上述丙酮提取后過濾分離的濾渣用300毫升乙醇在50℃溫度下回流提取2次，每次2小時，待加熱回收乙醇后，置于冰箱中在6℃溫度下存放12小時，然后過濾除去沉淀析出的黃酮類化合物，將濾液通過樹脂色譜柱進行分離處理，最后得到檸檬苦素配糖體65毫克，諾米林配糖體42毫克，奧吧叩酮配糖體14毫克。最終的濾渣可以通過調配適當的氮、磷、鉀比例和造粒工序制成顆粒肥料。
實施例4取經洗滌、干燥的柑桔種籽100克粉碎至60目后，置于索氏提取器中用900毫升乙醚在40℃溫度下浸泡提取28小時，經過濾器分離濾渣后，將濾液用旋轉蒸餾器進行減壓濃縮，回收乙醚并獲得種籽油約46克。分離后的濾渣中加入500毫升二氯甲烷，在45℃溫度下回流6小時，經過負壓抽濾分離濾渣后，收集濾液并用旋轉蒸餾器進行減壓濃縮，加入雙倍量的異丙醇充分混勻，靜置12小時，得檸檬苦素類化合物粗結晶體約0．63克。按實施例1進一步精制得到純檸檬苦素結晶約0．402克，諾米林結晶約137毫克和奧吧叩酮結晶29毫克。再按實施例3用400毫升乙醇對濾渣進行后處理，最后得到檸檬苦素配糖體60毫克，諾米林配糖體46毫克，奧吧叩酮配糖體15毫克。最終的濾渣可以通過調配適當的氮、磷、鉀比例和造粒工序制成顆粒肥料。
實施例5取經洗滌、干燥的柑桔種籽100克粉碎至70目后，置于索氏提取器中用800毫升乙醚在40℃溫度下浸泡提取30小時，經過濾器分離濾渣后，將濾液用旋轉蒸餾器進行減壓濃縮，回收乙醚并獲得種籽油約47克。分離后的濾渣中加入600毫升三氯甲烷，在45℃溫度下回流6小時，通過負壓抽濾分離濾渣，收集濾液并用旋轉蒸餾器進行減壓濃縮，經溶解、靜置后得檸檬苦素類化合物粗結晶體約0．66克。進一步精制得到純檸檬苦素結晶約0．411克，諾米林結晶約139毫克和奧吧叩酮結晶33毫克。再按實施例1用400毫升甲醇對濾渣進行后處理，最后得到檸檬苦素配糖體60毫克，諾米林配糖體44毫克，奧吧叩酮配糖體12毫克。最終的濾渣可以通過調配適當的氮、磷、鉀比例和造粒工序制成顆粒肥料。
以上制得的各種籽油經精練后可以直接食用或添加到缺少亞麻酸等活性脂肪酸的食用油中；檸檬苦素、諾米林和奧吧叩酮可用作抗癌藥物；檸檬苦素配糖體、諾米林配糖體和奧吧叩酮配糖體可用于食品飲料和日用化工品中；由濾渣配制成的顆粒肥料則可以直接施用于農作物或園藝植物。
本發明與現有技術相比較，具有工藝規范，流程合理，產品系列化且易于控制和操作，能夠充分提取柑桔類種子中的各種有效藥物活性物質并將其分離、提純，其綜合利用率、產品制得率及產品純度均較高等特點，便于普及推廣應用和工業化大批量生產。
權利要求
1．一種從柑桔類種子中提取藥物活性物質的工藝，其工藝步驟為a．將經過洗滌、干燥的柑桔類種子粉碎至40-80目，置于索氏提取器中并使用醚類有機溶劑于30-60℃的溫度下進行20-40小時的提取操作，經過濾器分離出濾渣和濾液；b．上述濾液經過加熱、減壓濃縮將有機溶劑回收后便得到含有多種活性脂肪酸的種子油；c．選擇性先用酮類或氯代烷烴類有機溶劑或選擇性先用醇類有機溶劑分別于30-60℃的溫度下，對步驟a所得濾渣進行上述兩類溶劑先后互補且各為5--10小時的兩次提取操作，并先后用過濾器分離出濾渣和濾液；d．先后獲得的兩種濾液分別經過加熱、減壓濃縮將酮類或氯代烷烴類有機溶劑或者醇類有機溶劑回收后，分別得到含有多種檸檬苦素類化合物的濃縮液和含有多種檸檬苦素配糖體化合物的濃縮液；e．上述濃縮液再分別通過加入氯代烷烴溶解、加入異丙醇進行結晶、分離得到含有多種檸檬苦素類化合物的粗結晶體或者經過加入有機溶劑溶解、通過硅膠色譜柱進行分離、結晶得到各種檸檬苦素配糖體化合物結晶體；f．經過步驟c先后兩次提取操作所剩余的濾渣通過造粒后成為顆粒肥料。
2．根據權利要求1所述的一種從柑桔類種子中提取藥物活性物質的工藝，其特征在于上述步驟a中用來提取被粉碎柑桔類種子的最佳醚類有機溶劑是石油醚。
3．根據權利要求1或2所述的一種從柑桔類種子中提取藥物活性物質的工藝，其特征在于上述步驟c中處理濾渣所使用的最佳酮類有機溶劑是丙酮。
4．根據權利要求1或2所述的一種從柑桔類種子中提取藥物活性物質的工藝，其特征在于上述步驟c中處理濾渣所使用的最佳氯代烷烴類有機溶劑是二氯甲烷。
5．根據權利要求1或2所述的一種從柑桔類種子中提取藥物活性物質的工藝，其特征在于上述步驟c中處理濾渣所使用的最佳醇類有機溶劑是乙醇。
6．根據權利要求1或2所述的一種從柑桔類種子中提取藥物活性物質的工藝，其特征在于上述步驟e所得到的含多種檸檬苦素類化合物粗結晶體中，再加入醇類有機溶劑溶解，經過硅膠色譜柱進行分離、結晶，分別獲得各種檸檬苦素類化合物結晶。
全文摘要
本發明提出了一種從柑桔類種子中提取藥物活性物質的工藝,主要是將干燥的柑桔類種子粉碎,經過反復的有機溶劑提取、過濾、分離操作,分別獲得種籽油、檸檬苦素類化合物、檸檬苦素配糖體及由濾渣配制成的顆粒肥料。本發明具有工藝規范,流程合理,產品系列化且易于控制和操作,能夠充分提取柑桔類種子中的各種有效藥物活性物質并將其分離、提純,其綜合利用率、產品制得率及產品純度均較高等特點,便于普及推廣應用和工業化大批量生產。
文檔編號C07H1/08GK1293055SQ0013062
公開日2001年5月2日 申請日期2000年9月30日 優先權日2000年9月30日
發明者傅敏恭, 陸豫, 朱為英, 傅雪 申請人:傅敏恭