一種水稻秸稈富硒固氮解磷解鉀有機菌肥的制作方法
【專利摘要】一種水稻秸稈富硒固氮解磷解鉀有機菌肥，將水稻秸稈富硒發酵料、水稻秸稈固氮菌肥、水稻秸稈解磷解鉀菌肥等量或不等量混合，并按總重量的10?30%添加輔料，調節含水量至30%以下，即為本水稻秸稈富硒固氮解磷解鉀有機菌肥。本發明優點：1、變廢為寶；2、改善土壤性能和結構；3、大中微量元素等養分齊全、比例恰當、轉化為有機態，延長了養分保蓄時間，提高了養分利用效率；4、遵循生態原理，富含固氮解磷解鉀等功能菌，促進土壤養分自我積累、生態修復及長期高產穩產；5、富含有機養分及有機態硒，可明顯提高農產品品質及一定保健功能，尤其適合有機綠色農業領域廣泛推廣施用。
【專利說明】
一種水稻秸稈富砸固氮解磷解鉀有機菌肥
技術領域
[0001 ]本發明涉及農業肥料領域。
技術背景
[0002]多年來，人們習慣于大量施用化肥、農藥，土壤有機質嚴重缺乏，導致土壤貧瘠、板結、有益微生物稀少，土壤肥力及性能不斷下降，保水保肥及積蓄養分能力低下，作物吸收養分困難，已形成惡性循環，已成為農業發展的重要瓶頸。迅速補充土壤有機質及固氮解磷解鉀等功能菌，不斷修復土壤性能，減少化肥施用，是現代農業長期優質高產穩產主要必由之路。
[0003]
【發明內容】
[0004]本發明的目的，就是針對人們長期以來習慣于大量施用化肥、農藥，土壤有機質長期未得到有效補充、有益微生物稀少、土壤肥力及性能嚴重下降的現狀，而提供一種水稻秸桿富砸固氮解磷解鉀有機菌肥，制備方法為:
一)制備水稻秸桿富砸發酵料
(I)制備水稻秸桿發酵菌種液
A)制備菌種培養基
a、制備A液體培養基:將去皮土豆80-120g、水稻秸桿粉18-22g加水900-1100ml置于密閉容器內，加熱排除冷空氣后維持110-130°C、0.5-1小時，冷卻后再加入紅糖8-12g、補足水量，混勻，轉入100°C蒸汽滅菌0.5-1小時，制得A液體培養基；
b、制備B液體培養基:將水稻秸桿粉180-220g加水900-110ml置于密閉容器內，加熱排除冷空氣后維持110-130°C、0.5-1小時，冷卻后再加入尿素2-4g、補足水量，混勻，轉入1000C蒸汽滅菌0.5-1小時，制得B液體培養基；
c、制得C液體培養基:將水稻秸桿粉18-22g加水900-110ml置于密閉容器內，加熱排除冷空氣后維持110-130°(:、0.5-1小時，冷卻后再加入紅糖8-128、尿素4-68、蛋白胨4-68、補足水量，混勻，轉入100°C蒸汽滅菌0.5-1小時，制得C液體培養基；
d、制備D液體培養基:將水稻秸桿粉180-220g加水900-110ml置于密閉容器內，加熱排除冷空氣后維持110-130°(:、0.5-1小時，冷卻后再加入紅糖4-68、尿素8-128、補足水量，混勻，轉入100 0C蒸汽滅菌0.5-1小時，制得D液體培養基；
B)制備各菌種菌株的菌種液
a、將草菇菌種活化，無菌接入A液體培養基，轉速160-200r/min、25-45°C搖床培養5_7日，至菌液粘稠、顏色改變并可見菌絲大量生長；繼續無菌接入B液體培養基，轉速160-200r/min、25-45 °C培養6-8日，至發酵菌液粘稠、顏色改變、可見菌絲大量生長且菌絲生物量達500 mg/100ml以上；
b、將木霉菌種活化，無菌接入A液體培養基，轉速160-200r/min、25-40°C搖床培養5_7日，至菌液粘稠、顏色改變并可見菌絲大量生長；繼續無菌接入B液體培養基，轉速160-200r/min、25-40 °C培養6-8日，至發酵菌液粘稠、顏色改變、可見菌絲大量生長且菌絲生物量達500 mg/100ml以上；
c、將球毛殼菌菌種活化，無菌接入A液體培養基，轉速160-200r/min,25-40 °C搖床培養5-7日，至菌液粘稠、顏色改變并可見菌絲大量生長;繼續無菌接入B液體培養基，轉速160-200r/min、25-40°C培養6-8日，至菌絲生物量達500 mg/100ml以上；
d、將嗜熱側孢霉菌種活化，無菌接入A液體培養基，轉速160-200r/min、35-55°C搖床培養5-7日，至菌液粘稠、顏色改變并可見菌絲大量生長；繼續無菌接入B液體培養基，轉速160-200r/min、35-55°C培養7-9日，至發酵菌液粘稠、顏色改變、可見菌絲大量生長且菌絲生物量達500 mg/100ml以上；
e、將產黃纖維單胞菌菌種活化，活化后無菌接入C液體培養基，轉速160-200r/min、25-40°C搖床培養1-2日，至菌液渾濁、顏色改變;繼續無菌接入D液體培養基，轉速160-200r/min、25-40°C搖床培養1-2日，至發酵液渾濁、顏色改變，并經細胞平板涂抹計數達5 X 18/ml以上；
C)制備水稻秸桿發酵菌種液
將上述培養的草菇菌種液、木霉菌種液、球毛殼菌菌種液、嗜熱側孢霉菌種液、產黃纖維單胞菌菌種液等量混合，即為水稻秸桿發酵菌種液；
(2)制備水稻秸桿富砸發酵料
A)發酵原料重量份配比:
水稻秸桿10000公斤養豬場豬糞尿及其沖洗水或其沼氣發酵后的沼渣沼液9000-12000公斤98%濃硫酸300-350公斤石灰200-250公斤紅糖100-150公斤尿素200-300公斤 KC150-100公斤 KH2PO4 50-100公斤 MgCl2 50-100公斤 FeSO4 50-100公斤MnCl2 50-80公斤 ZnSO4 50-80公斤 NaSeO3 10-30公斤；
B)發酵料制備方法:
a、水稻秸桿酸堿處理
將水稻秸桿粉粹為l-2cm小段，并等分為堆體甲和堆體乙;豬糞尿及其沖洗水或其沼渣沼液也等分為兩份，并分別加入堆體甲和堆體乙；堆體甲在加入豬糞尿及其沖洗水或其沼渣沼液時，隨之加入全部配方量的濃硫酸溶液并拌勻，并以豬糞尿及其沖洗水或其沼渣沼液調節含水量至65-75%，酸處理12-24小時，期間翻堆3_4次;堆體乙先拌入全部配方量的石灰，后加入豬糞尿及其沖洗水或其沼渣沼液，拌勻，并以豬糞尿及其沖洗水或其沼渣沼液調節含水量至65-75%，堿處理12-24小時，期間翻堆3_4次；
b、水稻秸桿低溫發酵
將上述經過酸、堿處理后的堆體甲、堆體乙進行混合、拌勻，按配方量加入全部KCl、KH2P04、MgCl2、FeS04、MnCl2、ZnS04、NaSe03、水稻秸桿發酵菌種液，并加入1/2配方量的尿素，拌勻，建堆發酵，約從第二天開始，每天翻堆1-2次，維持堆溫約25-40 °C，至第7-10日、堆體內可見菌絲明顯生長；
C、水稻秸桿高溫發酵
水稻秸桿低溫發酵過程中、至堆體內可見菌絲大量生長時，繼續加入全部配方用量的紅糖及余下配方用量的尿素，拌勻，適當覆膜，進行高溫發酵，至7-10日、堆體溫度經高溫自然降至常溫、堆料黑褐色并可見大量菌絲，結束發酵，打碎，即為水稻秸桿富砸發酵料；
二)制備水稻秸桿固氮菌肥
A)制備菌種培養基
a、制備E液體培養基
將水稻秸桿富砸發酵料90-110g加水900-1100ml置于密閉容器內，加熱排除冷空氣后維持110-130 °C、0.5-1小時，冷卻后再加入蛋白胨4-6g、補足水量，混勻，轉入100 °C蒸汽滅菌0.5-1小時，制得E液體培養基；
b、制備F液體培養基
將水稻秸桿富砸發酵料180-220g加水900-1100ml置于密閉容器內，加熱排除冷空氣后維持110-130°C、0.5-1小時，冷卻后補足水量，混勻，轉入100°C蒸汽滅菌0.5_1小時，制得F液體培養基；
B)制備固氮菌菌種液
a、將短小芽孢桿菌菌種進行活化，活化后無菌接入E液體培養基，轉速160-200r/min、25-40°C搖床培養1-2日，至菌液渾濁、顏色改變；繼續無菌接入F液體培養基，轉速160-200r/min、25-40 V搖床培養1_2日，至發酵液渾濁、顏色改變，并經細胞平板涂抹計數達5 X108/ml以上，即為短小芽孢桿菌菌種液；
b、將短芽孢桿菌菌種進行活化，活化后無菌接入E液體培養基，轉速160-200r/min、25-40°C搖床培養1-2日，至菌液渾濁、顏色改變;繼續無菌接入F液體培養基，轉速160-200r/min、25-40°C搖床培養1-2日，至發酵液渾濁、顏色改變，并經細胞平板涂抹計數達5 X 18/ml以上，S卩為短芽孢桿菌菌種液；
C、將賴氨酸芽孢桿菌菌種進行活化，活化后無菌接入E液體培養基，轉速160-200r/min、25-40 °(:搖床培養1_2日，至菌液渾濁、顏色改變;繼續無菌接入F液體培養基，轉速160-200r/min、25-40 V搖床培養1_2日，至發酵液渾濁、顏色改變，并經細胞平板涂抹計數達5 X108/ml以上，即為賴氨酸芽孢桿菌菌種液；
d、將上述培養的短小芽孢桿菌菌種液、短芽孢桿菌菌種液、賴氨酸芽孢桿菌菌種液等量混合，即為固氮菌菌種液；
C)制備水稻秸桿固氮菌肥
以1000公斤剛完成發酵的水稻秸桿富砸發酵料，加入固氮菌種液50-100公斤，并以固氮菌種液調節發酵料的含水量至約60-65%，結合翻堆，控制發酵溫度約25-45°C，培養7-8日，至堆體降為室溫，即為水稻秸桿固氮菌肥；
三)制備水稻秸桿解磷解鉀菌肥
A)制備菌種培養基:
a、制備G液體培養基
將水稻秸桿富砸發酵料90-110g、磷礦粉20-30g、鉀長石粉5-10g加水900-1100ml置于密閉容器內，加熱排除冷空氣后維持110-130°C、0.5-1小時，冷卻后再加入蛋白胨4-6g、補足水量，混勻，轉入100°C蒸汽滅菌0.5-1小時，制得G液體培養基；
b、制備H液體培養基
將水稻秸桿富砸發酵料180-220g、磷礦粉20-30g、鉀長石粉5-10g加水900-1100ml置于密閉容器內，加熱排除冷空氣后維持110 -13 O °C、0.5 -1小時，冷卻后補足水量，混勻，轉入100°c蒸汽滅菌0.5-1小時，制得G液體培養基；
C、制備I液體培養基
將水稻秸桿富砸發酵料90-110g、黃豆粉18-22g、磷礦粉20-30g、鉀長石粉5-10g加水900-1100ml置于密閉容器內，加熱排除冷空氣后維持110-130°C、0.5-1小時，冷卻后補足水量，混勻，轉入100°C蒸汽滅菌0.5-1小時，制得I液體培養基；
d、制備J液體培養基
將水稻秸桿富砸發酵料180-220g、磷礦粉20-30g、鉀長石粉5-10g加水900-1100ml置于密閉容器內，加熱排除冷空氣后維持110 -13 O °C、0.5 -1小時，冷卻后補足水量，混勻，轉入100°C蒸汽滅菌0.5-1小時，制得J液體培養基；
B)制備解磷解鉀菌種液
a、將膠凍樣芽孢桿菌菌種進行活化，活化后無菌接入G液體培養基，轉速160-200r/min、25-40 °(:搖床培養1_2日，至菌液渾濁、顏色改變;繼續無菌接入H液體培養基，轉速160-200r/min、25-40 V搖床培養1_2日，至發酵液渾濁、顏色改變，并經細胞平板涂抹計數達5 X108/ml以上，即為膠凍樣芽孢桿菌菌種液；
b、將蠟樣膠質芽孢桿菌菌種進行活化，活化后無菌接入G液體培養基，轉速160-200r/min、25-40 °(:搖床培養1_2日，至菌液渾濁、顏色改變;繼續無菌接入H液體培養基，轉速160-200r/min、25-40 V搖床培養1_2日，至發酵液渾濁、顏色改變，并經細胞平板涂抹計數達5 X108/ml以上，即為蠟樣膠質芽孢桿菌菌種液；
c、制備肉桂褐鏈霉菌菌種液
將肉桂褐鏈霉菌菌種進行活化，活化后無菌接入I液體培養基，轉速160-200r/min、25-40°C搖床培養7-9日，至菌絲大量生長、菌液粘稠；繼續無菌接入J液體培養基，轉速160-20(^/1^11、25-40°(:搖床培養9-11日，至發酵菌液粘稠、顏色改變、可見菌絲大量生長且菌絲生物量達500 mg/100ml以上，S卩為肉桂褐鏈霉菌菌種液；
d、制備解磷解鉀菌種液
將上述膠凍樣芽孢桿菌菌種液、蠟樣膠質芽孢桿菌菌種液、肉桂褐鏈霉菌菌種液進行等量混合，即為解磷解鉀菌菌種液；
C)制備水稻秸桿解磷解鉀菌肥
以1000公斤剛發酵完成的水稻秸桿富砸發酵料，加入解磷解鉀菌菌種液50-100公斤，并以解磷解鉀菌種液調節發酵料的含水量至約60-65%，結合翻堆，控制發酵溫度約25-45°C，培養10-12日，至堆體降為常溫，即為水稻秸桿解磷解鉀菌菌肥；
四)制備菌肥輔料
將磷礦粉300公斤、鉀長石粉80-120公斤混勻，即為最終菌肥產品的輔料，用于調節最終產品含水量；
五)制備水稻秸桿富砸固氮解磷解鉀有機菌肥產品
將水稻秸桿富砸發酵料、水稻秸桿固氮菌肥、水稻秸桿解磷解鉀菌肥等量或不等量混合，并按總重量的10-30%添加輔料，調節含水量至30%以下，即為本水稻秸桿富砸固氮解磷解鉀有機菌肥。
[0005]
本發明優點: 1、變廢為寶。以水稻秸桿和養豬場糞尿及其沖洗水或其沼渣沼液為主要原料，通過系列微生物的作用，將纖維素等難降解物質轉變為易于降解和吸收的腐殖質等物質，顯著提高了水稻秸桿等廢棄物的經濟價值和社會效益；
2、產品有機質含量高，可保水保肥，顯著改善土壤性能和結構，可在較長時間滿足作物對各種養分及土壤性能的需求；
3、通過系列微生物作用，將氮磷鉀等速效無機養分轉變為有機養分且大中微量元素齊全、比例恰當，延長了養分保蓄時間，提高了養分利用效率；
4、配伍添加了多種固氮解磷解鉀功能菌，使施用土壤不斷增強自我養分積累及一定防病防蟲能力，促進土壤生態修復及長期高產穩產；
5、遵循生態原理，富含有機養分及有機態砸，生態安全環保，可明顯提高農產品品質及一定保健功能，尤其適合有機綠色農業領域廣泛推廣施用。
[0006]
【具體實施方式】
本產品最佳制備方法為:
一)制備水稻秸桿富砸發酵料
(I)制備水稻秸桿發酵菌種液
A)制備菌種培養基
a、制備A液體培養基:將去皮土豆80-120g、水稻秸桿粉18-22g加水900-1100ml置于密閉容器內，加熱排除冷空氣后維持110-130°C、0.5-1小時，冷卻后再加入紅糖8-12g、補足水量，混勻，轉入100°C蒸汽滅菌0.5-1小時，制得A液體培養基；
b、制備B液體培養基:將水稻秸桿粉180-220g加水900-110ml置于密閉容器內，加熱排除冷空氣后維持110-130°C、0.5-1小時，冷卻后再加入尿素2-4g、補足水量，混勻，轉入1000C蒸汽滅菌0.5-1小時，制得B液體培養基；
c、制得C液體培養基:將水稻秸桿粉18-22g加水900-110ml置于密閉容器內，加熱排除冷空氣后維持110-130°(:、0.5-1小時，冷卻后再加入紅糖8-128、尿素4-68、蛋白胨4-68、補足水量，混勻，轉入100°C蒸汽滅菌0.5-1小時，制得C液體培養基；
d、制備D液體培養基:將水稻秸桿粉180-220g加水900-110ml置于密閉容器內，加熱排除冷空氣后維持110-130°(:、0.5-1小時，冷卻后再加入紅糖4-68、尿素8-128、補足水量，混勻，轉入100 0C蒸汽滅菌0.5-1小時，制得D液體培養基；
B)制備各菌種菌株的菌種液
a、將草菇菌種活化，無菌接入A液體培養基，轉速160-200r/min、25-45°C搖床培養5_7日，至菌液粘稠、顏色改變并可見菌絲大量生長；繼續無菌接入B液體培養基，轉速160-200r/min、25-45 °C培養6-8日，至發酵菌液粘稠、顏色改變、可見菌絲大量生長且菌絲生物量達500 mg/100ml以上；
b、將木霉菌種活化，無菌接入A液體培養基，轉速160-200r/min、25-40°C搖床培養5_7日，至菌液粘稠、顏色改變并可見菌絲大量生長；繼續無菌接入B液體培養基，轉速160-200r/min、25-40 °C培養6-8日，至發酵菌液粘稠、顏色改變、可見菌絲大量生長且菌絲生物量達500 mg/100ml以上； C、將球毛殼菌菌種活化，無菌接入A液體培養基，轉速160-200r/min, 25-40 °C搖床培養5-7日，至菌液粘稠、顏色改變并可見菌絲大量生長;繼續無菌接入B液體培養基，轉速160-200r/min、25-40°C培養6-8日，至菌絲生物量達500 mg/100ml以上；
d、將嗜熱側孢霉菌種活化，無菌接入A液體培養基，轉速160-200r/min、35-55°C搖床培養5-7日，至菌液粘稠、顏色改變并可見菌絲大量生長；繼續無菌接入B液體培養基，轉速160-200r/min、35-55°C培養7-9日，至發酵菌液粘稠、顏色改變、可見菌絲大量生長且菌絲生物量達500 mg/100ml以上；
e、將產黃纖維單胞菌菌種活化，活化后無菌接入C液體培養基，轉速160-200r/min、25-40°C搖床培養1-2日，至菌液渾濁、顏色改變;繼續無菌接入D液體培養基，轉速160-200r/min、25-40°C搖床培養1-2日，至發酵液渾濁、顏色改變，并經細胞平板涂抹計數達5 X 18/ml以上；
C)制備水稻秸桿發酵菌種液
將上述培養的草菇菌種液、木霉菌種液、球毛殼菌菌種液、嗜熱側孢霉菌種液、產黃纖維單胞菌菌種液等量混合，即為水稻秸桿發酵菌種液；
(2)制備水稻秸桿富砸發酵料
A)發酵原料重量份配比:
水稻秸桿10000公斤養豬場豬糞尿及其沖洗水或其沼氣發酵后的沼渣沼液9000-12000公斤98%濃硫酸300-350公斤石灰200-250公斤紅糖100-150公斤尿素200-300公斤 KC150-100公斤 KH2PO4 50-100公斤 MgCl2 50-100公斤 FeSO4 50-100公斤MnCl2 50-80公斤 ZnSO4 50-80公斤 NaSeO3 10-30公斤；
B)發酵料制備方法:
a、水稻秸桿酸堿處理
將水稻秸桿粉粹為l-2cm小段，并等分為堆體甲和堆體乙;豬糞尿及其沖洗水或其沼渣沼液也等分為兩份，并分別加入堆體甲和堆體乙；堆體甲在加入豬糞尿及其沖洗水或其沼渣沼液時，隨之加入全部配方量的濃硫酸溶液并拌勻，并以豬糞尿及其沖洗水或其沼渣沼液調節含水量至65-75%，酸處理12-24小時，期間翻堆3_4次;堆體乙先拌入全部配方量的石灰，后加入豬糞尿及其沖洗水或其沼渣沼液，拌勻，并以豬糞尿及其沖洗水或其沼渣沼液調節含水量至65-75%，堿處理12-24小時，期間翻堆3_4次；
b、水稻秸桿低溫發酵
將上述經過酸、堿處理后的堆體甲、堆體乙進行混合、拌勻，按配方量加入全部KCl、KH2P04、MgCl2、FeS04、MnCl2 ,ZnSO4、NaSe03、水稻秸桿發酵菌種液，并加入1/2配方量的尿素，拌勻，建堆發酵，約從第二天開始，每天翻堆1-2次，維持堆溫約25-400C，至第7-10日、堆體內可見菌絲明顯生長；
C、水稻秸桿高溫發酵
水稻秸桿低溫發酵過程中、至堆體內可見菌絲大量生長時，繼續加入全部配方用量的紅糖及余下配方用量的尿素，拌勻，適當覆膜，進行高溫發酵，至7-10日、堆體溫度經高溫自然降至常溫、堆料黑褐色并可見大量菌絲，結束發酵，打碎，即為水稻秸桿富砸發酵料；
二)制備水稻秸桿固氮菌肥
A)制備菌種培養基 a、制備E液體培養基
將水稻秸桿富砸發酵料90-110g加水900-1100ml置于密閉容器內，加熱排除冷空氣后維持110-130 °C、0.5-1小時，冷卻后再加入蛋白胨4-6g、補足水量，混勻，轉入100 °C蒸汽滅菌0.5-1小時，制得E液體培養基；
b、制備F液體培養基
將水稻秸桿富砸發酵料180-220g加水900-1100ml置于密閉容器內，加熱排除冷空氣后維持110-130°C、0.5-1小時，冷卻后補足水量，混勻，轉入100°C蒸汽滅菌0.5_1小時，制得F液體培養基；
B)制備固氮菌菌種液
a、將短小芽孢桿菌菌種進行活化，活化后無菌接入E液體培養基，轉速160-200r/min、25-40°C搖床培養1-2日，至菌液渾濁、顏色改變；繼續無菌接入F液體培養基，轉速160-200r/min、25-40 V搖床培養1_2日，至發酵液渾濁、顏色改變，并經細胞平板涂抹計數達5 X108/ml以上，即為短小芽孢桿菌菌種液；
b、將短芽孢桿菌菌種進行活化，活化后無菌接入E液體培養基，轉速160-200r/min、25-40°C搖床培養1-2日，至菌液渾濁、顏色改變;繼續無菌接入F液體培養基，轉速160-200r/min、25-40°C搖床培養1-2日，至發酵液渾濁、顏色改變，并經細胞平板涂抹計數達5 X 18/ml以上，S卩為短芽孢桿菌菌種液；
C、將賴氨酸芽孢桿菌菌種進行活化，活化后無菌接入E液體培養基，轉速160-200r/min、25-40 °(:搖床培養1_2日，至菌液渾濁、顏色改變;繼續無菌接入F液體培養基，轉速160-200r/min、25-40 V搖床培養1_2日，至發酵液渾濁、顏色改變，并經細胞平板涂抹計數達5 X108/ml以上，即為賴氨酸芽孢桿菌菌種液；
d、將上述培養的短小芽孢桿菌菌種液、短芽孢桿菌菌種液、賴氨酸芽孢桿菌菌種液等量混合，即為固氮菌菌種液；
C)制備水稻秸桿固氮菌肥
以1000公斤剛完成發酵的水稻秸桿富砸發酵料，加入固氮菌種液50-100公斤，并以固氮菌種液調節發酵料的含水量至約60-65%，結合翻堆，控制發酵溫度約25-45°C，培養7-8日，至堆體降為室溫，即為水稻秸桿固氮菌肥；
三)制備水稻秸桿解磷解鉀菌肥
A)制備菌種培養基:
a、制備G液體培養基
將水稻秸桿富砸發酵料90-110g、磷礦粉20-30g、鉀長石粉5-10g加水900-1100ml置于密閉容器內，加熱排除冷空氣后維持110-130°C、0.5-1小時，冷卻后再加入蛋白胨4-6g、補足水量，混勻，轉入100°C蒸汽滅菌0.5-1小時，制得G液體培養基；
b、制備H液體培養基
將水稻秸桿富砸發酵料180-220g、磷礦粉20-30g、鉀長石粉5-10g加水900-1100ml置于密閉容器內，加熱排除冷空氣后維持110 -13 O °C、0.5 -1小時，冷卻后補足水量，混勻，轉入100°C蒸汽滅菌0.5-1小時，制得G液體培養基；
C、制備I液體培養基
將水稻秸桿富砸發酵料90-110g、黃豆粉18-22g、磷礦粉20-30g、鉀長石粉5-10g加水900-1100ml置于密閉容器內，加熱排除冷空氣后維持110-130°C、0.5-1小時，冷卻后補足水量，混勻，轉入100°C蒸汽滅菌0.5-1小時，制得I液體培養基；
d、制備J液體培養基
將水稻秸桿富砸發酵料180-220g、磷礦粉20-30g、鉀長石粉5-10g加水900-1100ml置于密閉容器內，加熱排除冷空氣后維持110 -13 O °C、0.5 -1小時，冷卻后補足水量，混勻，轉入100°C蒸汽滅菌0.5-1小時，制得J液體培養基；
B)制備解磷解鉀菌種液
b、將膠凍樣芽孢桿菌菌種進行活化，活化后無菌接入G液體培養基，轉速160-200r/min、25-40 °(:搖床培養1_2日，至菌液渾濁、顏色改變;繼續無菌接入H液體培養基，轉速160-200r/min、25-40 V搖床培養1_2日，至發酵液渾濁、顏色改變，并經細胞平板涂抹計數達5 X108/ml以上，即為膠凍樣芽孢桿菌菌種液；
b、將蠟樣膠質芽孢桿菌菌種進行活化，活化后無菌接入G液體培養基，轉速160-200r/min、25-40 °(:搖床培養1_2日，至菌液渾濁、顏色改變;繼續無菌接入H液體培養基，轉速160-200r/min、25-40 V搖床培養1_2日，至發酵液渾濁、顏色改變，并經細胞平板涂抹計數達5 X108/ml以上，即為蠟樣膠質芽孢桿菌菌種液；
c、制備肉桂褐鏈霉菌菌種液
將肉桂褐鏈霉菌菌種進行活化，活化后無菌接入I液體培養基，轉速160-200r/min、25-40°C搖床培養7-9日，至菌絲大量生長、菌液粘稠；繼續無菌接入J液體培養基，轉速160-20(^/1^11、25-40°(:搖床培養9-11日，至發酵菌液粘稠、顏色改變、可見菌絲大量生長且菌絲生物量達500 mg/100ml以上，S卩為肉桂褐鏈霉菌菌種液；
d、制備解磷解鉀菌種液
將上述膠凍樣芽孢桿菌菌種液、蠟樣膠質芽孢桿菌菌種液、肉桂褐鏈霉菌菌種液進行等量混合，即為解磷解鉀菌菌種液；
C)制備水稻秸桿解磷解鉀菌肥
以1000公斤剛發酵完成的水稻秸桿富砸發酵料，加入解磷解鉀菌菌種液50-100公斤，并以解磷解鉀菌種液調節發酵料的含水量至約60-65%，結合翻堆，控制發酵溫度約25-45°C，培養10-12日，至堆體降為常溫，即為水稻秸桿解磷解鉀菌菌肥；
四)制備菌肥輔料
將磷礦粉300公斤、鉀長石粉80-120公斤混勻，即為最終菌肥產品的輔料，用于調節最終產品含水量；
五)制備水稻秸桿富砸固氮解磷解鉀有機菌肥產品
將水稻秸桿富砸發酵料、水稻秸桿固氮菌肥、水稻秸桿解磷解鉀菌肥等量或不等量混合，并按總重量的10-30%添加輔料，調節含水量至30%以下，即為本水稻秸桿富砸固氮解磷解鉀有機菌肥。
[0007]
菌種來源:中國農業微生物菌種保藏管理中心及中國工業微生物菌種保藏管理中心
中國農業微生物菌種保藏管理中心:草燕(菌株保藏號50900)、木霉(菌株保藏號32591)、球毛殼菌(菌株保藏號32593)、嗜熱側孢霉(菌株保藏號30346)、產黃纖維單胞菌(菌株保藏號11055)、短小芽孢桿菌(菌株保藏號19379)、短芽孢桿菌(菌株保藏號19423)、賴氨酸芽孢桿菌(菌株保藏號19456)、膠凍樣芽孢桿菌(菌株保藏號10090)、肉桂褐鏈霉菌(菌株保藏號40130)；
中國工業微生物菌種保藏管理中心:蠟樣膠質芽孢桿菌(菌株保藏號22670)；
使用方法:
本產品主要用于作物基肥及追肥。基肥按每畝施用量500-800公斤，追肥可根據情況于行間每畝施用200-300公斤。施用后覆土或翻耕覆土。施用時以不同時噴施農藥為宜。因富含有充足的有機態養分、固氮解磷解鉀功能菌及各種大中微量元素、砸、硅等有益和健康元素，長期施用本產品，可顯著改善土壤結構和性能，提高保水保肥抗旱及抗蟲防病能力，提高作物品質和產量，尤其適合水稻等各種作物的有機及綠色種植。
【主權項】
1.一種水稻秸桿富砸固氮解磷解鉀有機菌肥，其特征在于制備方法為: 一)制備水稻秸桿富砸發酵料 (I)制備水稻秸桿發酵菌種液 A)制備菌種培養基 a、制備A液體培養基:將去皮土豆80-120g、水稻秸桿粉18-22g加水900-1100ml置于密閉容器內，加熱排除冷空氣后維持110-130°C、0.5-1小時，冷卻后再加入紅糖8-12g、補足水量，混勻，轉入100°C蒸汽滅菌0.5-1小時，制得A液體培養基； b、制備B液體培養基:將水稻秸桿粉180-220g加水900-110ml置于密閉容器內，加熱排除冷空氣后維持110-130°C、0.5-1小時，冷卻后再加入尿素2-4g、補足水量，混勻，轉入1000C蒸汽滅菌0.5-1小時，制得B液體培養基； c、制得C液體培養基:將水稻秸桿粉18-22g加水900-110ml置于密閉容器內，加熱排除冷空氣后維持110-130°(:、0.5-1小時，冷卻后再加入紅糖8-128、尿素4-68、蛋白胨4-68、補足水量，混勻，轉入100°C蒸汽滅菌0.5-1小時，制得C液體培養基； d、制備D液體培養基:將水稻秸桿粉180-220g加水900-110ml置于密閉容器內，加熱排除冷空氣后維持110-130°(:、0.5-1小時，冷卻后再加入紅糖4-68、尿素8-128、補足水量，混勻，轉入100 0C蒸汽滅菌0.5-1小時，制得D液體培養基； B)制備各菌種菌株的菌種液 a、將草菇菌種活化，無菌接入A液體培養基，轉速160-200r/min、25-45°C搖床培養5-7日，至菌液粘稠、顏色改變并可見菌絲大量生長；繼續無菌接入B液體培養基，轉速160-200r/min、25-45 °C培養6-8日，至發酵菌液粘稠、顏色改變、可見菌絲大量生長且菌絲生物量達500 mg/100ml以上； b、將木霉菌種活化，無菌接入A液體培養基，轉速160-200r/min、25-40°C搖床培養5_7日，至菌液粘稠、顏色改變并可見菌絲大量生長；繼續無菌接入B液體培養基，轉速160-200r/min、25-40 °C培養6-8日，至發酵菌液粘稠、顏色改變、可見菌絲大量生長且菌絲生物量達500 mg/100ml以上； c、將球毛殼菌菌種活化，無菌接入A液體培養基，轉速160-200r/min、25-40°C搖床培養5-7日，至菌液粘稠、顏色改變并可見菌絲大量生長;繼續無菌接入B液體培養基，轉速160-200r/min、25-40°C培養6-8日，至菌絲生物量達500 mg/100ml以上； d、將嗜熱側孢霉菌種活化，無菌接入A液體培養基，轉速160-200r/min、35-55°C搖床培養5-7日，至菌液粘稠、顏色改變并可見菌絲大量生長；繼續無菌接入B液體培養基，轉速160-200r/min、35-55°C培養7-9日，至發酵菌液粘稠、顏色改變、可見菌絲大量生長且菌絲生物量達500 mg/100ml以上； e、將產黃纖維單胞菌菌種活化，活化后無菌接入C液體培養基，轉速160-200r/min、25-40°C搖床培養1-2日，至菌液渾濁、顏色改變;繼續無菌接入D液體培養基，轉速160-200r/min、25-40°C搖床培養1-2日，至發酵液渾濁、顏色改變，并經細胞平板涂抹計數達5 X 18/ml以上； C)制備水稻秸桿發酵菌種液 將上述培養的草菇菌種液、木霉菌種液、球毛殼菌菌種液、嗜熱側孢霉菌種液、產黃纖維單胞菌菌種液等量混合，即為水稻秸桿發酵菌種液； (2)制備水稻秸桿富砸發酵料 A)發酵原料重量份配比: 水稻秸桿10000公斤 養豬場豬糞尿及其沖洗水或其沼氣發酵后的沼渣沼液9000-12000公斤 98%濃硫酸300-350公斤 石灰200-250公斤 紅糖100-150公斤 尿素200-300公斤 KC150-100 公斤 KH2PO4 50-100公斤 MgCl2 50-100公斤 FeSO4 50-100公斤 MnCl2 50-80公斤 ZnSO4 50-80公斤 NaSeO3 10-30 公斤； B)發酵料制備方法: a、水稻秸桿酸堿處理 將水稻秸桿粉粹為l-2cm小段，并等分為堆體甲和堆體乙；豬糞尿及其沖洗水或其沼渣沼液也等分為兩份，并分別加入堆體甲和堆體乙；堆體甲在加入豬糞尿及其沖洗水或其沼渣沼液時，隨之加入全部配方量的濃硫酸溶液并拌勻，并以豬糞尿及其沖洗水或其沼渣沼液調節含水量至65-75%，酸處理12-24小時，期間翻堆3_4次;堆體乙先拌入全部配方量的石灰，后加入豬糞尿及其沖洗水或其沼渣沼液，拌勻，并以豬糞尿及其沖洗水或其沼渣沼液調節含水量至65-75%，堿處理12-24小時，期間翻堆3_4次； b、水稻秸桿低溫發酵 將上述經過酸、堿處理后的堆體甲、堆體乙進行混合、拌勻，按配方量加入全部KCl、KH2P04、MgCl2、FeS04、MnCl2 ,ZnSO4、NaSe03、水稻秸桿發酵菌種液，并加入1/2配方量的尿素，拌勻，建堆發酵，約從第二天開始，每天翻堆1-2次，維持堆溫約25-400C，至第7-10日、堆體內可見菌絲明顯生長； C、水稻秸桿高溫發酵 水稻秸桿低溫發酵過程中、至堆體內可見菌絲大量生長時，繼續加入全部配方用量的紅糖及余下配方用量的尿素，拌勻，適當覆膜，進行高溫發酵，至7-10日、堆體溫度經高溫自然降至常溫、堆料黑褐色并可見大量菌絲，結束發酵，打碎，即為水稻秸桿富砸發酵料； 二)制備水稻秸桿固氮菌肥 A)制備菌種培養基 a、制備E液體培養基 將水稻秸桿富砸發酵料90-1 1g加水900-1 10ml置于密閉容器內，加熱排除冷空氣后維持110-130 °C、0.5-1小時，冷卻后再加入蛋白胨4-6g、補足水量，混勻，轉入100 °C蒸汽滅菌0.5-1小時，制得E液體培養基； b、制備F液體培養基 將水稻秸桿富砸發酵料180-220g加水900-1100ml置于密閉容器內，加熱排除冷空氣后維持110-130°C、0.5-1小時，冷卻后補足水量，混勻，轉入100°C蒸汽滅菌0.5_1小時，制得F液體培養基； B)制備固氮菌菌種液 a、將短小芽孢桿菌菌種進行活化，活化后無菌接入E液體培養基，轉速160-200r/min、25-40°C搖床培養1-2日，至菌液渾濁、顏色改變；繼續無菌接入F液體培養基，轉速160-200r/min、25-40 V搖床培養1_2日，至發酵液渾濁、顏色改變，并經細胞平板涂抹計數達5 X108/ml以上，即為短小芽孢桿菌菌種液； b、將短芽孢桿菌菌種進行活化，活化后無菌接入E液體培養基，轉速160-200r/min、25-40°C搖床培養1-2日，至菌液渾濁、顏色改變;繼續無菌接入F液體培養基，轉速160-200r/min、25-40°C搖床培養1-2日，至發酵液渾濁、顏色改變，并經細胞平板涂抹計數達5 X 18/ml以上，S卩為短芽孢桿菌菌種液； C、將賴氨酸芽孢桿菌菌種進行活化，活化后無菌接入E液體培養基，轉速160-200r/min、25-40 °(:搖床培養1_2日，至菌液渾濁、顏色改變;繼續無菌接入F液體培養基，轉速160-200r/min、25-40 V搖床培養1_2日，至發酵液渾濁、顏色改變，并經細胞平板涂抹計數達5 X108/ml以上，即為賴氨酸芽孢桿菌菌種液； d、將上述培養的短小芽孢桿菌菌種液、短芽孢桿菌菌種液、賴氨酸芽孢桿菌菌種液等量混合，即為固氮菌菌種液； C)制備水稻秸桿固氮菌肥 以1000公斤剛完成發酵的水稻秸桿富砸發酵料，加入固氮菌種液50-100公斤，并以固氮菌種液調節發酵料的含水量至約60-65%，結合翻堆，控制發酵溫度約25-45°C，培養7-8日，至堆體降為室溫，即為水稻秸桿固氮菌肥； 三)制備水稻秸桿解磷解鉀菌肥 A)制備菌種培養基: a、制備G液體培養基 將水稻秸桿富砸發酵料90-110g、磷礦粉20-30g、鉀長石粉5-10g加水900-1100ml置于密閉容器內，加熱排除冷空氣后維持110-130°C、0.5-1小時，冷卻后再加入蛋白胨4-6g、補足水量，混勻，轉入100°C蒸汽滅菌0.5-1小時，制得G液體培養基； b、制備H液體培養基 將水稻秸桿富砸發酵料180-220g、磷礦粉20-30g、鉀長石粉5-10g加水900-1100ml置于密閉容器內，加熱排除冷空氣后維持110 -13 O °C、0.5 -1小時，冷卻后補足水量，混勻，轉入100°C蒸汽滅菌0.5-1小時，制得G液體培養基； C、制備I液體培養基 將水稻秸桿富砸發酵料90-110g、黃豆粉18-22g、磷礦粉20-30g、鉀長石粉5-10g加水900-1100ml置于密閉容器內，加熱排除冷空氣后維持110-130°C、0.5-1小時，冷卻后補足水量，混勻，轉入100°C蒸汽滅菌0.5-1小時，制得I液體培養基；d、制備J液體培養基 將水稻秸桿富砸發酵料180-220g、磷礦粉20-30g、鉀長石粉5-10g加水900-1100ml置于密閉容器內，加熱排除冷空氣后維持110 -13 O °C、0.5 -1小時，冷卻后補足水量，混勻，轉入100°c蒸汽滅菌0.5-1小時，制得J液體培養基； B)制備解磷解鉀菌種液 將膠凍樣芽孢桿菌菌種進行活化，活化后無菌接入G液體培養基，轉速160-200r/min、25-40°C搖床培養1-2日，至菌液渾濁、顏色改變；繼續無菌接入H液體培養基，轉速160-200r/min、25-40 V搖床培養1_2日，至發酵液渾濁、顏色改變，并經細胞平板涂抹計數達5 X108/ml以上，即為膠凍樣芽孢桿菌菌種液； b、將蠟樣膠質芽孢桿菌菌種進行活化，活化后無菌接入G液體培養基，轉速160-200r/min、25-40 °(:搖床培養1_2日，至菌液渾濁、顏色改變;繼續無菌接入H液體培養基，轉速160-200r/min、25-40 V搖床培養1_2日，至發酵液渾濁、顏色改變，并經細胞平板涂抹計數達5 X108/ml以上，即為蠟樣膠質芽孢桿菌菌種液； c、制備肉桂褐鏈霉菌菌種液 將肉桂褐鏈霉菌菌種進行活化，活化后無菌接入I液體培養基，轉速160-200r/min、25-40°C搖床培養7-9日，至菌絲大量生長、菌液粘稠；繼續無菌接入J液體培養基，轉速160-20(^/1^11、25-40°(:搖床培養9-11日，至發酵菌液粘稠、顏色改變、可見菌絲大量生長且菌絲生物量達500 mg/100ml以上，S卩為肉桂褐鏈霉菌菌種液； d、制備解磷解鉀菌種液 將上述膠凍樣芽孢桿菌菌種液、蠟樣膠質芽孢桿菌菌種液、肉桂褐鏈霉菌菌種液進行等量混合，即為解磷解鉀菌菌種液； C)制備水稻秸桿解磷解鉀菌肥 以1000公斤剛發酵完成的水稻秸桿富砸發酵料，加入解磷解鉀菌菌種液50-100公斤，并以解磷解鉀菌種液調節發酵料的含水量至約60-65%，結合翻堆，控制發酵溫度約25-45°C，培養10-12日，至堆體降為常溫，即為水稻秸桿解磷解鉀菌菌肥； 四)制備菌肥輔料 將磷礦粉300公斤、鉀長石粉80-120公斤混勻，即為最終菌肥產品的輔料，用于調節最終產品含水量； 五)制備水稻秸桿富砸固氮解磷解鉀有機菌肥產品 將水稻秸桿富砸發酵料、水稻秸桿固氮菌肥、水稻秸桿解磷解鉀菌肥等量或不等量混合，并按總重量的10-30%添加輔料，調節含水量至30%以下，即為本水稻秸桿富砸固氮解磷解鉀有機菌肥。
【文檔編號】C12R1/465GK106007896SQ201610313973
【公開日】2016年10月12日
【申請日】2016年5月13日
【發明人】方華舟
【申請人】荊楚理工學院