專利名稱：用于化妝品的液-固混合脂質納米緩釋系統及其制備方法
技術領域：
本發明屬于納米緩釋系統及其制備領域，特別涉及一種用于化妝品的液-固混合脂質納米緩釋系統及其制備方法。
背景技術：
用于化妝品中的緩釋技術，主要包括特殊乳化體系和脂質載體。特殊乳化體系主要包括液晶結構乳狀液、多重乳狀液、微乳液，脂質載體通常是由雙層或多層磷脂(如卵磷月旨)構成的，其原理是將固體脂質或者固體脂質混合物替換水包油乳化液中的液體油脂制備而成的，長期以來一直被用作運送化妝品中活性成分的一種理想載體。但其在應用過程中存在著一些缺陷，如載藥量低、突釋效應以及物理穩定性差等問題。以上所述的固體納米脂質微粒的局限性的產生是由于其在制備過程中形成了一 個很完整的結晶體，而當在固體脂質系統中混合了液體脂質，所得到的納米脂質載體則屬于不完整結晶，一般而言處于一種無定形狀態，更便于活性組分的包覆。究其原因在于這種多重脂質結構的納米脂質載體類似于多重乳狀液w/0/w系統，是一種油-固體脂質-水三相分散體系，活性組分可以很好地分散于多相組分中，因而大大提高了包封率。含液-固混合脂質的納米緩釋系統用于化妝品中，主要體現以下幾點特性(1)納米級的多重脂質結構的載體與皮膚角質層有很好的親和性，能有效地將活性組分輸送并滲透進角質層，使得活性組分更好地作用于皮膚的深層細胞。由此，可以制備一些含營養、療效成分的功能型護膚產品，使活性組分能有效地發揮其功效性；(2)粒徑小于400nm的納米脂質載體在皮膚上可以形成很好的閉合體系，可增強皮膚的水合作用，應用于各種護膚產品中可提高產品的保濕性能；(3)活性組分嵌于納米脂質載體微孔結構中后，可降低活性組分的化學降解性能從而增強其穩定性。因此，通過納米脂質載體微孔結構的包裹，可以將一些不穩定的活性組分應用于化妝品的配方中，如維生素C等。納米脂質載體獨有的特性吸引了國內外大量的學者，尤其是在醫藥領域的研究更為廣泛。德國柏林自由大學Muller教授所在的課題組是固體納米脂質的創始人之一，他們對其的載藥性能進行了比較系統而且廣泛的研究，從實驗室優化固體納米脂質載藥體系的性能到規模化中試生產(Muller R H et al.，Eur.J.Pharm.Biopharm. 2000,50:161-177;MuIler RH et al.,Eur.J.Pharm.Biopharm, 1995,41:62-69)。Gasco發明了用微乳法制備固體納米脂質并申請了專利保護(Gasco M R, US Pat. 1993，5250236)。國內也對固體納米脂質載運系統進行了一些研究工作，他們用不同方法制備了固體納米脂質，考察其理化性能、體外釋藥性能以及藥代動力學等，取得了一定的研究成果(程坤等，中國醫藥工業雜志，1999,80 (10) : 441-444 ;陳大兵等，藥學學報，2002，37 (I) :54-58 ;段磊等，東南大學學報(醫學版)，2004，23 (4) : 225-227)。但對于液-固混合脂質的納米載藥系統的研究少見報道。為了使液-固混合脂質的納米載藥系統能應用于化妝品中，所選用的液體與固體脂質需與化妝品的整個乳液體系具有很好的相容性，故采用單硬脂酸甘油酯作為固體脂質，肉豆蘧酸異丙酯為液體脂質，制得一種用于化妝品的含液-固混合脂質的納米脂質載運系統，迄今為止未見相關的文獻與專利報道。
發明內容
本發明所要解決的技術問題是提供一種用于化妝品的液-固混合脂質納米緩釋系統及制備方法，在利用溶劑擴散法制備納米脂質緩釋系統的過程中，通過添加一定比例的液態脂質到固態脂質中，增大了原固體納米脂質的包封率，同時還增加了其儲存穩定性。本發明所述的一種液-固混合脂質納米緩釋系統，所述納米緩釋系統為液態脂質與固態脂質構成的納米粒，以及至少一種被包覆在所述納米粒中的活性組分組成。所述固體脂質和液體脂質的重量比為19:1。所述液-固脂質納米粒平均粒徑為200 300nm。 粒徑小于400nm的納米脂質載體在皮膚上可以形成很好的閉合體系，可增強皮膚的水合作用，因而與皮膚角質層有很好的親和性，能有效地將活性組分輸送并滲透進皮膚角質層，并通過緩釋作用使得活性組分作用于皮膚的深層細胞。所述液態脂質為肉豆蘧酸異丙酯，固態脂質為單硬脂酸甘油酯。所述活性組分為化妝品用水溶性活性物質。所述化妝品用水溶性活性物質為絲肽。所述的活性組分還可以是具有營養、療效成分的功能性活性物質。本發明所述的一種液-固混合脂質納米緩釋系統的制備方法，包括(I)在絲肽水溶液樣品中加入6mol · L—1的鹽酸及2 3滴苯酚，封口，同時抽真空脫氣，N2密封保護，油浴加熱，于150°C下水解I. 5h，水解完畢，將水解液旋蒸至干，用蒸餾水定容至原體積，搖勻，即得絲肽水解液，其中絲肽水溶液和鹽酸的體積比為1:5，絲肽水溶液的質量分數為14. 5% ；(2)將上述固體脂質和液體脂質的混合載體分散于有機溶劑中，加入上述活性組分，水浴加熱使固態脂質溶解，得到含液-固脂質及活性組分的有機相溶液；其中有機溶劑和活性組分的體積比為40:1 ;(3)將聚乙烯醇PVA配制成O. 5^2% (w/v)的水溶液，調節pH值至酸性，得到含PVA的水相溶液；其中聚乙烯醇的平均分子量為1750±50 ；(4)在機械攪拌條件下，將步驟(2)所得的有機相溶液加入到40mL、O°C的步驟(3)的水相溶液中攪拌，得到的混合脂質的分散液經超速離心、分離，所得沉淀即為納米緩釋系統。 所述步驟(2 )中的水浴溫度為50 V。所述步驟(2)中的有機溶劑為無水乙醇。所述步驟(3)中用O. Imol · Γ1鹽酸調節溶液pH值為f 2。所述步驟(4)中的機械攪拌速率為400r · mirT1,攪拌時間為5 8min ;離心轉速為20, OOOr · mirT1,離心時間為 30min。所述步驟(4)得到的納米緩釋系統經冷凍干燥得到納米緩釋系統的凍干粉，或經蒸餾水超聲分散l(T20min，得到納米緩釋系統的混懸液。所述的包覆了活性組分的液-固混合脂質的納米緩釋系統，可制成凍干粉、凝膠劑、乳劑、水分散型或混懸型制劑，能單獨或與化妝品的其他組分混合后形成乳液、凝膠液、水分散液、懸浮液、膏霜類、粉餅類等化妝品產品。有益.效果( I)本發明制備的液-固混合脂質納米粒粒徑大小可控，該納米粒可作為載體攜帶活性組分滲透進皮膚角質層，并通過緩釋作用起到活性組分應有的作用；(2)本發明所用的液態及固態脂質為化妝品中的常用組分，制得的納米粒與化妝品中的其他組分具有很好的相容性；(3)本發明制備的液-固混合脂質納米粒的包封率較單純的固體納米粒有很大的提聞;(4)本發明制備方法操作簡單，穩定性高。
圖I為分光光度法測定絲肽含量(甘氨酸標準曲線)(n=3)；圖2實施例I-對照實施例制得的絲肽納米脂質緩釋系統的體外釋放曲線。
具體實施例方式下面結合具體實施例，進一步闡述本發明。應理解，這些實施例僅用于說明本發明而不用于限制本發明的范圍。此外應理解，在閱讀了本發明講授的內容之后，本領域技術人員可以對本發明作各種改動或修改，這些等價形式同樣落于本申請所附權利要求書所限定的范圍。實施例I取3mL的市售絲肽水溶液(14. 5%)樣品于三口燒瓶中，加入15mL的6mol · L—1的HCl及2 3滴苯酚，封口，同時抽真空脫氣，N2密封保護，油浴加熱，于150°C下水解I. 5h，水解完畢，將水解液旋蒸至干，用蒸餾水定容至原體積，搖勻，即得絲肽水解液。精確稱取單硬脂酸甘油酯(為固體脂質A)，肉豆蘧酸異丙酯(為液體脂質B)的混合載體共200mg，其中液體脂質B的比例為5% (w/w)，分散于4mL無水乙醇中，加入絲肽水解液O. ImL,于50°C水浴中，加熱促使固體脂質溶解。在400r · mirT1機械攪拌條件下,將所得的混合物溶液(有機相)傾入冰浴((TC)條件下含l%PVA(w/v)的40mL酸性水相溶液中(用O. Imol *L_1鹽酸調節pH值至I. 2),繼續攪拌5min,得絲肽-液-固混合納米脂質載體分散液。將該分散液經20，OOOr · mirT1的速率超速離心30min，所得沉淀用適量蒸餾水超聲分散lOmin，得到絲肽-液-固混合脂質納米混懸液(脂質濃度為2mg · mL—1)。將混懸液用雙蒸水稀釋至脂質濃度為O. Img · ml/1，用納米粒度儀測定絲肽-液-固混合納米脂質粒子的粒徑；將混懸液用PH=L 20的1%PVA水溶液稀釋至脂質濃度為O. Img ·πι Λ用電位分析儀測定液-固混合納米脂質粒的表面電位，結果見表I所示。將混懸液O. 5mL置于超濾離心管中(截留分子量100，OOODa),低溫(4 °C )，14，OOO X g離心5min。取準確體積的濾液，于25mL具塞試管中，加2mL磷酸鹽緩沖液，充分搖勻，再加I. 0mL3%茚三酮乙二醇溶液，搖勻。沸水浴加熱15min，冷卻后，于573nm波長處測定吸光度U=3)，用分光光度法建立絲肽含量分析的標準曲線(圖1)，由甘氨酸標準曲線換算成絲肽的含量，并按下式計算包封率
包封率(％)=投^ 斯物總、g 一濾'液申1 xl00 n ,投料藥物總量包封率的結果列于表I中。將超速離心后所得的絲肽-液-固混合脂質納米粒沉淀分別加入到9mL pH=5. 8的緩沖溶液中(含一定濃度解吸附劑)，超聲分散，各分成三等份，置于37°C恒溫水浴中，磁力攪拌，攪拌速率為60r *min_1,間隔一定時間取出全部釋放液,釋放液于20，OOOr *min_1離心5min，上清液用孔徑為O. 22 μ m水性微孔濾膜過濾，用分光光度法測定濾液中絲肽的含量，剩余的離心后的沉淀補加3mL新鮮的pH=5. 8的緩沖溶液(含一定濃度解吸附劑)，使納米粒 分散均勻后置于恒溫水浴中，磁力攪拌，繼續體外釋放試驗。所得體外釋放實驗的結果見圖2。對照實施例精確稱取單硬脂酸甘油酯200mg，絲肽水解液O. ImL,置4mL無水乙醇中，水浴50°C使固態脂質溶解。在400r · mirT1機械攪拌條件下,將所得的混合物溶液加入到40mL含1%PVA (w/v)的0°C的酸性水溶液中(用O. Imol · Γ1鹽酸調節pH值至I. 2)，繼續攪拌5min，得絲肽-固態納米脂質粒分散液。將該分散液以20，OOOr · mirT1的速率超速離心30min，所得沉淀用適量蒸餾水超聲分散lOmin，得到絲肽-固態納米脂質混懸液(脂質濃度為 2mg · mL 1X將混懸液用雙蒸水稀釋至脂質濃度為O. Img · mL—1，用納米粒度儀測定絲肽-固體納米粒子的粒徑；將混懸液用PH=L 20的1%PVA水溶液稀釋至脂質濃度為O. Img · mL—1，用電位分析儀測定納米粒的表面電位，結果見表I所示。將上述混懸液O. 5mL置于超濾離心管中(截留分子量100，OOODa)，低溫(4°C )，14，000 X g離心5min。取準確體積的濾液，于25mL具塞試管中，加2mL磷酸鹽緩沖液，充分搖勻，加I. 0mL3%茚三酮乙二醇溶液，搖勻。沸水浴加熱15min，冷卻后，于573nm波長處測定吸光度(取三次測定值的平均值，n=3)，并計算包封率，包封率的結果列于表I中。將超速離心后所得的絲肽-固體脂質納米粒沉淀分別加入到9mL pH=5. 8的緩沖溶液中(含一定濃度解吸附劑)，超聲分散，各分成三等份，置于37°C恒溫水浴中，磁力攪拌，攪拌速率為60r mirT1,間隔一定時間取出全部釋放液,釋放液于20，OOOr mirT1離心5min,上清液用孔徑為O. 22 μ m水性微孔濾膜過濾，用分光光度法測定濾液中絲肽的含量，剩余的離心后的沉淀補加3mL新鮮的pH=5. 8的緩沖溶液(含一定濃度解吸附劑)，使納米粒分散均勻后置于恒溫水浴中，磁力攪拌，繼續體外釋放試驗。所得體外釋放實驗的結果見圖2。表I實施例I-對照實施例制得的絲肽納米脂質載運系統的性質
液' K Hffii ±v[- M tn
實施例 ' ' 平均粒徑/rnn表面電位/mv包封率/%
B含量/%百分比/%
對照實施
L0049JO 284.9-9.4047.27
例35.63
實施例 I 5 276.19 3164 11
表I說明，通過在固體脂質中添加了液體脂質后，所得液-固混合脂質納米粒的包封率大大增加。原因是由于固體脂質納米粒在制備過程中形成了一個很完整的結晶體，類似于結實的“磚墻”，而液-固混合脂質納米粒屬于不完整結晶，一般屬于無定形狀態，因而更便于活性組分的包覆。圖2說明，活性組分從納米粒中的釋放，呈現一種雙相釋放的特征。初始9小時，藥物呈現快速釋放，隨后速度放慢呈持續的緩慢釋放，并呈線性關系(線性方程見圖2)。而加入了液態脂質B后，緩和了固態脂質的突釋效應。實施例2按照實施例I制備含液態脂質B為5% (w/w)的絲肽-液-固混合脂質納米粒的混懸液(乳液)，記為1# ;將空白絲肽-液-固混合脂質納米粒(含液態脂質B為5%，但按實施例I制備時不加絲肽水解液)超聲分散于蒸餾水中，并在此混懸液中加入制備實施例I時相同量的絲肽水解液，所得混合乳液記為2#。將1#與2#乳液在兩個不同的相對濕度環境下用體外稱重法進行體外保濕實驗(n=3)，結果見表2。表2絲肽-液-固混合脂質納米緩釋系統的體外保濕實驗結果
權利要求
1.一種液-固混合脂質納米緩釋系統，其特征在于所述納米緩釋系統為液態脂質與固態脂質構成的納米粒，以及至少一種被包覆在所述納米粒中的活性組分組成。
2.根據權利要求I所述的一種液-固混合脂質納米緩釋系統，其特征在于所述固體脂質和液體脂質的重量比為19:1。
3.根據權利要求I所述的一種液-固混合脂質納米緩釋系統，其特征在于所述液-固脂質納米粒平均粒徑為20(T300nm。
4.根據權利要求I所述的一種液-固混合脂質納米緩釋系統，其特征在于所述液態脂質為肉豆蘧酸異丙酯，固態脂質為單硬脂酸甘油酯。
5.根據權利要求I所述的一種液-固混合脂質納米緩釋系統，其特征在于所述活性組分為化妝品用水溶性活性物質。
6.根據權利要求5所述的一種液-固混合脂質納米緩釋系統，其特征在于所述化妝品用水溶性活性物質為絲肽。
7.根據權利要求1飛中任一所述的一種液-固混合脂質納米緩釋系統的制備方法，包括 (1)在絲肽水溶液樣品中加入6mol· Γ1的鹽酸及2 3滴苯酚，封口，同時抽真空脫氣，N2密封保護，油浴加熱，于150°C下水解I. 5h，水解完畢，將水解液旋蒸至干，用蒸餾水定容至原體積，搖勻，即得絲肽水解液，其中絲肽水溶液和鹽酸的體積比為1: 5，絲肽水溶液的質量分數為14. 5% ； (2)將固體脂質和液體脂質的混合載體分散于有機溶劑中，加入活性組分，水浴加熱使固態脂質溶解，得到含液-固脂質及活性組分的有機相溶液；其中有機溶劑和活性組分的體積比為40:1 ； (3)將聚乙烯醇PVA配制成O.5^2% (w/v)的水溶液，調節pH值至酸性，得到含PVA的水相溶液； (4)在機械攪拌條件下，將步驟(2)所得的有機相溶液加入到40mL、0°C的步驟(3)的水相溶液中攪拌，得到的混合脂質的分散液經超速離心、分離，所得沉淀即為納米緩釋系統。
8.根據權利要求7所述的一種液-固混合脂質納米緩釋系統的制備方法，其特征在于所述步驟(2)中的水浴溫度為50°C，有機溶劑為無水乙醇。
9.根據權利要求7所述的一種液-固混合脂質納米緩釋系統的制備方法，其特征在于所述步驟(3)中用O. Imol · Γ1鹽酸調節溶液pH值為廣2。
10.根據權利要求7所述的一種液-固混合脂質納米緩釋系統的制備方法，其特征在于所述步驟(4)中的機械攪拌速率為400r mirT1,攪拌時間為5 8min ;離心轉速為20, OOOr · mirT1,離心時間為 30min。
11.根據權利要求7所述的一種液-固混合脂質納米緩釋系統的制備方法，其特征在于所述步驟(4)得到的納米緩釋系統經冷凍干燥得到納米緩釋系統的凍干粉，或經蒸餾水超聲分散l(T20min，得到納米緩釋系統的混懸液。
全文摘要
本發明涉及一種用于化妝品的液-固混合脂質納米緩釋系統及其制備方法，緩釋系統由液態脂質與固態脂質構成的納米粒，及至少一種被包覆在所述納米粒中的活性組分組成。制備方法(1)將固體脂質和液體脂質的混合載體分散于有機溶劑中，加入活性組分，水浴加熱使固態脂質溶解，為有機相溶液；(2)將聚乙烯醇配制成水溶液，調節pH值至酸性，為水相溶液；(3)在機械攪拌條件下，將上述有機相溶液加入到水相溶液中攪拌，得到的混合脂質的分散液經離心、分離，即得。該納米緩釋系統制備方法簡單，穩定性高；尺寸在納米級，且粒徑大小可控；液-固混合脂質納米粒的包封率較單純的固體納米粒有很大的提高。
文檔編號A61Q19/00GK102793628SQ20121030309
公開日2012年11月28日 申請日期2012年8月23日 優先權日2012年8月23日
發明者林苗, 楊勇 申請人:東華大學