專利名稱：一種桉葉不飽和脂肪酸提取方法
技術領域：
本發明涉及一種植物資源中天然藥物開發技術領域，涉及不飽和脂肪酸的制作方法，特別是一種桉葉不飽和脂肪酸提取方法。
背景技術：
桉樹(Eucalypts)屬于桃金娘科(Myrtaceae),包括3個屬杯果木屬 (Angophora)、傘房屬(Corymbia)和桉樹屬(Eucalyptus),具有近950個樹種。由于桉樹具有速生高產、適應性廣、抗性強、耐干旱瘠薄、容易種植、萌芽力強等特點，被聯合國糧農組織推薦為三大速生造林樹種(桉、松、楊)之一。桉樹在我國廣東、廣西、海南、云南、福建、 四川、重慶、江西、湖南、貴州等18個省(區、市)800多個縣引種和種植桉樹，我國桉樹人工林面積達到360萬hm2。桉葉油是桉葉水蒸餾的林產品。桉葉油的主要化學成分為1，8_桉葉素(1，3，3_三甲基-2-氧雜雙環[2，2，2]辛烷)、α-崖柏烯、α-菔烯、莰烯等揮發性芳香揮發性有機物，也含有大量的脂肪酸類化學成分。桉葉醫藥、化工等方面利用價值也很高，據《現代中藥大辭典》和《中華人民共和國藥典》記載，桉葉作為中藥應用的主要植物來源為藍桉和大葉桉，具有清熱解毒、殺蟲止癢等功效，在我國南方各省民間均有應用，在醫學方面對其有效成分桉葉油(eucalyptus oil)的研究較多，目前已能進行工廠化生產，成為醫藥、香料及化學工業的重要原料。但不同的樹種、區域的、季節的桉葉的產油率及其的化學成分不盡相同，甚至不同檢測條件的對其成分和含量影響甚大。當前我國主要推廣的品種有尾巨桉、巨尾桉、巨赤桉和尾葉桉無性系等新品種，這些品種因桉葉油含量較低、不能作為傳統的桉葉揮發性油提取加工的原料而被廢棄或被農村作為柴禾燒掉，生物和經濟價值未得到充分利用。不飽和脂肪酸廣泛存在于植物、動物、微生物的油脂中，其中多不飽和脂肪酸中的亞麻酸、亞油酸為人體人體是無法合成的必需脂肪酸。具有預防和治療心腦血管病、降低血脂、 延緩衰老等功效。最近我們研究的巨桉、赤桉、藍桉等樹種桉葉均含有脂肪酸成分，特別是不飽和脂肪酸成分比較豐富。因此可利用廢棄的、資源豐富的桉葉或種植產豐富脂肪酸桉樹桉葉，直接開發不飽和脂肪酸醫藥(化妝品)、不飽和脂肪酸生產微生物利用原材料、食品原材料、飼料添加劑、天然保健食品、生物柴油等形式生，可滿足社會對脂肪酸產品需求。 桉葉在醫藥、化工等方面利用價值很高。在生物醫學方面對桉葉揮發性油的研究較多。目前關于桉葉脂肪酸特別是其中關于不飽和脂肪酸的研究以及開發利用報道還沒有。
發明內容
本發明的目的是為了彌補現有技術存在的不足，提供一種桉葉不飽和脂肪酸提取方法。為實現上述發明目的，本發明采取的技術方案是該桉葉不飽和脂肪酸提取方法按以下步驟(I)桉葉選擇
選擇新鮮的生長期在半年以內、無病蟲的桉樹葉，經自然氣干或80°C以下干燥桉樹葉至含水率< 10% ；(2)桉葉粉碎將干燥后的桉葉磨成粉末狀，過100目篩，獲得桉葉粉；⑶脂肪酸粗提取桉葉粉，按每公斤桉葉粉加入15L的有機溶劑，浸泡12小時，然后進行超聲波萃取I次，頻率為80KHZ，溫度為30°C，萃取時間30分鐘，溶液過濾后，按每公斤濾渣加入2L 有機溶劑沖洗濾渣，再次過濾，濾液合并后經旋轉蒸發儀減壓蒸餾，回收有機溶劑，得到桉葉粗脂；(4)不飽和脂肪酸分離取步驟⑶所得桉葉粗S旨，按每公斤加入5L有機溶劑混合，經冷凍至-10°c -20°c，有大量白色飽和脂肪酸結晶物，繼續冷凍1-2小時，在0°C 4°C過濾得到有機溶劑與不飽和脂肪酸混合溶液，然后水浴減壓蒸餾并回收有機溶劑，得不飽和脂肪酸提取物；(5)不飽和脂肪酸萃取取步驟(4)所得不飽和脂肪酸提取物，以是CO2超臨界萃取，萃取條件萃取壓力 30MPa，萃取溫度45°C，分離壓力I為8±lMPa，溫度50°C ;分離壓力2為6±lMPa，溫度為 35±3°C，萃取時間I 2小時。所述桉樹包括尾葉桉、尾巨桉、巨尾桉或巨桉等。所述不飽和脂肪酸為亞油酸、亞麻酸。所述有機溶濟為乙醇、丙酮或石油醚。本發明的桉葉不飽和脂肪酸提取方法，是通過采用有機溶劑包括乙醇、丙酮、石油醚提取，溶解后經低溫結晶處理，獲得不飽和脂肪酸粗提物，最后以CO2超臨界萃取獲得不飽和脂肪酸產品。桉葉不飽和脂肪酸含有括亞油酸、亞麻酸等多不飽和脂肪酸，而提取方法簡便，成本低、工藝穩定、提取效率高，且產品綠色、無污染，毒副作用小，產品可應用于食品、飼料、化妝品、農化產品等各個領域。
具體實施例方式實施例一(I)桉葉選擇選擇新鮮的(半年以內)、無病蟲的桉樹葉，經自然氣干或80°C以下干燥桉樹葉片 (含水率< 10% )。(2)桉葉粉碎取干燥后的桉葉磨成粉末狀，過100目篩，獲得桉葉粉(粒經0.15mm)。(3)脂肪酸粗提取IKg桉葉粉，加入15L乙醇溶液，浸泡12小時，進行超聲波(頻率為80KHZ、溫度為30°C )，萃取I次，萃取時間30分鐘，溶液過濾后，IKg濾渣加入2L乙醇溶液沖洗濾渣，再次過濾，濾液合并后經旋轉蒸發儀減壓蒸餾，回收乙醇，得到桉葉粗脂。(4)不飽和脂肪酸分離
取IKg桉葉粗酯，加入5L的乙醇混合，經冷凍至-10°C _20°C，有大量白色飽和脂肪酸結晶物，繼續冷凍1-2小時，在(TC 4°C過濾得到乙醇與不飽和脂肪酸溶液，然后水浴減壓蒸餾并回收乙醇，得不飽和脂肪酸提取物。(5)不飽和脂肪酸萃取取不飽和脂肪酸提取物，在萃取壓力30MPa，萃取溫度45°C，分離壓力I為8MPa，溫度50°C ;分離壓力2為6MPa，溫度可35°C的條件下，CO2超臨界萃取時間I 2小時，最后 CO2超臨界萃取純化得到不飽和脂肪酸棕綠色油脂。實施例二(I)選擇新鮮的(半年以內)、無病蟲的桉樹葉片，經自然氣干或80°C以下干燥桉樹葉片至含水率< 10%。(2)將干燥的桉葉，磨成粉末狀，過100目篩，獲得桉葉粉(粒徑I. 5mm)。(3)取IOkg桉葉粉置于大塑料桶或其他容器中，加150L丙酮溶液，浸泡12小時以上，然后以超聲波(頻率為80KHZ、溫度為30°C )處理30分鐘，溶液過濾后，加入20L丙酮溶液沖洗濾渣，再次過濾，合并濾液后經旋轉蒸發儀減壓蒸餾，回收丙酮，得到棕綠或棕黃色桉葉粗脂約O. 5kg。(4)取O. 5kg的桉葉粗酯，加入2. 5L丙酮再溶解，經冷凍至-10°C _20°C，有大量白色飽和脂肪酸結晶物，繼續冷凍1-2小時，在0°C 4°C過濾得到丙酮與不飽和脂肪酸混合溶液，然后水浴減壓蒸餾并回收丙酮，得不飽和脂肪酸提取物。(5)將不飽和脂肪酸提取物以CO2超臨界萃取純化，CO2超臨界萃取條件C02超臨界萃取條件萃取壓力30MPa，萃取溫度45°C，分離壓力I為8MPa，溫度50°C;分離壓力2為 6MPa，溫度可35°C，萃取時間I 2小時；最后得到不飽和脂肪酸含量大于70%的棕綠色油脂。實施例三(I)選擇新鮮的(半年以內)、無病蟲的桉樹葉片，經自然氣干或80°C以下干燥桉樹葉片至含水率< 10%。(2)將干燥的桉葉，磨成粉末狀，過100目篩，獲得桉葉粉(粒徑I. 5mm)。(3)取IOkg桉葉粉置于大塑料桶或其他容器中，加150L石油醚溶液，浸泡12小時以上，然后以超聲波(頻率為80KHZ、溫度為30°C )處理30分鐘，溶液過濾后，加入20L石油醚溶液沖洗濾渣，再次過濾，合并濾液后經旋轉蒸發儀減壓蒸餾，回收石油醚，得到棕綠或棕黃色桉葉粗脂約O. 5kg。(4)取O. 5kg的桉葉粗酯，加入2. 5L丙酮再溶解，經冷凍至-10°C _20°C，有大量白色飽和脂肪酸結晶物，繼續冷凍1-2小時，在0°C 4°C過濾得到丙酮與不飽和脂肪酸混合溶液，然后水浴減壓蒸餾并回收丙酮，得不飽和脂肪酸提取物。(5)將不飽和脂肪酸提取物以CO2超臨界萃取純化，CO2超臨界萃取條件C02超臨界萃取條件萃取壓力30MPa，萃取溫度45°C，分離壓力I為8MPa，溫度50°C;分離壓力2為 6MPa，溫度可35°C，萃取時間I 2小時；最后得到不飽和脂肪酸含量大于70%的棕綠色油脂。
權利要求
1.一種桉葉不飽和脂肪酸提取方法，其特征是按以下步驟(1)桉葉選擇選擇新鮮的生長期在半年以內、無病蟲的桉樹葉，經自然氣干或80°c以下干燥桉樹葉至含水率< 10% ；(2)桉葉粉碎干燥后的桉葉磨成粉末狀，過100目篩，獲得桉葉粉；(3)脂肪酸粗提取桉葉粉，按每公斤按葉粉加入15L的有機溶劑，浸泡12小時，然后進行超聲波萃取I 次，頻率為80KHZ，溫度為30°C，萃取時間30分鐘，溶液過濾后，按每公斤濾渣加入2L有機溶劑沖洗濾渣，再次過濾，濾液合并后經旋轉蒸發儀減壓蒸餾，回收有機溶劑，得到桉葉粗月旨;(4)不飽和脂肪酸分離取步驟(3)所得桉葉粗酯，按每公斤加入5L有機溶劑混合，經冷凍至-10°C _20°C， 有大量白色飽和脂肪酸結晶物，繼續冷凍1-2小時，在0°C 4°C過濾得到有機溶劑與不飽和脂肪酸混合溶液，然后水浴減壓蒸餾并回收有機溶劑，得不飽和脂肪酸提取物；(5)不飽和脂肪酸萃取取步驟(4)所得不飽和脂肪酸提取物，以是CO2超臨界萃取，萃取條件萃取壓力 30MPa，萃取溫度45°C，分離壓力I為8±lMPa，溫度50°C ;分離壓力2為6±lMPa，溫度為 35±3°C，萃取時間I 2小時。
2.根據權利要求I所述桉葉不飽和脂肪酸提取方法，其特征在于所述桉樹包括尾葉桉、尾巨桉、巨尾桉或巨桉等。
3.根據權利要求I所述桉葉不飽和脂肪酸提取方法，其特征在于所述不飽和脂肪酸為亞油酸、亞麻酸。
4.根據權利要求I所述桉葉不飽和脂肪酸提取方法，其特征在于所述有機溶濟為乙醇、丙酮或石油醚。
全文摘要
本發明涉及一種桉葉不飽和脂肪酸提取方法，是采用有機溶劑提取，溶解后經低溫結晶處理，獲得不飽和脂肪酸粗提物，最后CO2臨界萃取獲得含量大于70％的不飽和脂肪酸成分。本發明提取方法簡便，成本低、工藝穩定、提取效率高。桉葉不飽和脂肪酸含有括亞油酸、亞麻酸等多不飽和脂肪酸，為天然提取物，具有抗菌、抗氧化、降血脂、降膽固醇、提高記憶力、抑制腫瘤等作用。可廣泛應用于飼料、化妝品、食品、生物化工、甚至醫藥等領域。
文檔編號C11B1/10GK102604735SQ20121007822
公開日2012年7月25日 申請日期2012年3月12日 優先權日2012年3月12日
發明者吳志華, 張婧, 楊巧麗, 謝耀堅, 黃赤夫 申請人:國家林業局桉樹研究開發中心