專利名稱：預防脫毛及促進毛發生長的組合物的制作方法
技術領域：
本發明涉及用于預防脫毛及促進毛發生長的、包含磷脂作為有效成分的組合物，更具體地，涉及用于預防脫毛及促進毛發生長的、包含來源于動物的磷脂作為有效成分的組合物。
背景技術：
過量的男性荷爾蒙作用、血液循環不良、由于過氧化物和細菌等導致的頭皮功能下降、遺傳因素、老化、壓力等被認為是脫毛的原因，但是直至目前不知道脫毛的原因。近年來，由于因飲食生活改變而導致的營養不均衡、因環境污染和社會環境而導致的壓力程度的增加等原因，擔心脫毛的人口的比例在增加，年齡在繼續降低，并且擔心脫毛的女性人口的比例也逐步地增加。為了治療及預防此類脫毛，已經開發了具有用于刺激血液循環、強化毛囊功能、頭皮保濕及抑制男性荷爾蒙的以女性荷爾蒙作為主要成分的配方，或具有米諾地爾、非那雄胺、粘多糖生長素(Trichosaccharide)等的配方。米諾地爾對毛發生長的作用機理還不明確，但是認為通過血管擴張增加營養物供應以及打開鉀通道的效果來誘導毛發生長。非那雄胺是5-α還原酶抑制劑，用作治療前列腺的藥物和通過不同的劑量預防脫毛的藥物。粘多糖生長素在方便性和效能方面是優良的藥品。然而，由于用于制備非那雄胺的試劑是昂貴或高毒性的，所以存在制造成本高以及污染環境的問題。特別是，存在以下問題:由于難以去除副產物，所以目標產物的純度降低；以及由于采用了其活性容易被水抑制的試劑和活性衍生物，所以難以大量生產。`
發明內容
技術問題本發明是被設計用于解決上述問題以及滿足上述需求，本發明的目的是提供一種預防脫毛或促進毛發生長的組合物。技術方案為了實現上述目的，本發明的例示性實施方式提供了用于預防脫毛或用于促進毛發生長的組合物，其中該組合物包含作為有效成分的磷脂。根據本發明一種實施方式，磷脂優選從動物中提取，所述動物優選是家畜，例如，牛或豬，但本發明不限于此。根據本發明的實施方式，磷脂優選采用從肺的洗滌液或肺組織的破碎物中提取，但本發明不限于此。根據本發明優選的實施例，磷脂優選是“具有高飽和度和相對短的烴鏈(尾鏈)長度的脂肪酸的磷脂質”，更優選烴鏈長度為14 16，但本發明不限于此。例如，所述磷脂包含選自由二棕櫚酰磷脂酰膽堿、磷脂酰膽堿、磷脂酰絲氨酸、磷脂酸和磷脂酰肌醇所組成的組中的任一種。
根據本發明的優選實施例，所述組合物更優選包含2價陽離子和含羧基的有機酸或其鹽，但本發明不限于此。以下對本發明進行描述。本發明通過對所有脫毛癥狀如男性型脫毛和女性型脫毛中所體現出的一般生物化學或生理學的現象的文獻的調查提出解決脫毛的新方法。對脫毛的新調查以及脫毛的解決方案如下:Yanez Soler在他已公開的論文中提出如下假設:脫毛是由從皮脂腺分泌的皮脂流入和進入毛囊或真皮乳頭導致的，即使該皮脂應該沿著毛發向外分泌。他提出在具有沿著頭發軸容易向外排出皮脂的條件的情況中，例如，當毛發的厚度越厚或者毛發的密度越高時，不容易發生脫毛。解釋該假設的很好例子是與枕頭接觸的部位不出現脫毛現象。那是因為當人們睡覺時，由于枕頭毛發被壓扁并相互接觸，所以皮脂容易沿著毛發表面去除(Yanez Soler2004, Med.Hypotheses62:980-985)。*本發明假設導致脫毛的根本原因與由組成中性脂肪成分的皮脂的過度分泌及積累密切相關。基于上述假設，我們嘗試解釋所有引起脫毛的原因。特別是，嘗試簡單地地解釋男性隨著年齡增長受脫毛之苦的理由。脫毛的生理學原因和生物化學的原因具有以下文獻中的共性和理論合理性。◎雄性激素，一種男生荷爾蒙，與體內代表性的中性脂肪的三酰甘油(TG)和膽固醇(cholesterol)的增加密切相關(Kao 等人，2001, J.1nt.dermatol, 116:443-451)。◎隨著年齡增長，與體內的極性脂肪相比，中性脂肪的比例增加(Nazzaro-Porro等人，1979, J.1nvest.Dermatol, 73:112-117)。◎皮脂的分泌和皮脂腺的活躍與根據年齡的男性荷爾蒙的含量密切相關(Pochi等人，1979, J.1nvest.Demotol, 73:108-111)。◎由于壓力，增加了膽固醇(一種代表性中性脂肪)的合成(O Donnell等人，1987，J.Royal Society Med,80:339-341)。◎在一些癌癥患者接受化療后，增加了中性脂肪(特別是三酰甘油)和低密度脂蛋白(LDL)及 LDL-膽固醇(Alexopoulos 等人，1992, Cancer Chemother.Pharmacol,30:412-416)。◎在組成皮脂及表皮周邊脂質的不飽和脂肪酸處在通過由脂質過氧化過程產生的單線態氧(1O2)的氧化應激的情況時,可以發生脫毛(Naito等人,2008, International.J.Mol.Med.22:725-729)。◎一些受脫毛之苦的患者可能表現微炎癥。過度的皮脂分泌可能提供附著和增殖微生物的良好環境(Mah ◎等人，2000, Internatonal J.Dermatol, 39:576-584)。由以上列出的科學依據，可以容易推理出由于男性荷爾蒙、壓力及年齡增長，體內的中性脂肪的比例可能增加，并且由中性脂肪組成產生的過度皮脂分泌和合成可能引起脫毛癥狀。在由于遺傳因素引起脫毛的情況中，可以推理出當存在對中性脂肪的機制的遺傳因素時，可以誘發極性脂肪和中性脂肪之間比例的不均衡，因此可以刺激脫毛。特別是，可以預料到由于線粒體主要起到脂 質機制有關的作用，所以禿頭遺傳是線粒體傳遞路徑的母系遺傳。一般認為禿頭可以由任何與線粒體相關的突變或脂質機制不均衡產生。一般認為作為女性不顯示男性型脫毛的理由，女性顯示出相對低的生理學皮脂分泌，而且通常她們與男性相比徹底洗干凈她們的臉，以及在洗臉時通過使用多種化妝品有效去除她們的中性脂肪皮脂成分。此外，可以推論出化妝品中包含的多種脂肪酸、脂肪酸衍生物及多種的乳化劑成分防止中性脂肪皮脂具有高的粘度，使得她們沒有顯示出男性型脫毛癥狀。另外，一般可以基于同樣的理由來說明具有少量體毛的亞洲人與具有大量體毛的西方人之間的差別。亞洲人以碳水化合物攝取為主，當在體內開始脂肪積累時容易增加儲存型的中性脂肪，使得亞洲人的體毛發育與西方人相比更低效。可以基于相同的理由來說明此現象。當皮脂(一種中性脂肪)不沿著毛發往外排出，而是轉移到毛囊方向，然后累積時，在被毛細管提供營養物的毛囊細胞及周邊細胞會存在問題。由于細胞增殖和細胞活動所需要的營養物以膠束或者脂質體(HDL或LDL，分泌囊包或者板層小體等)形式提供，所以如果皮脂(一種中性脂肪)在毛囊細胞周圍累積，則以被脂質膜包圍狀態提供的營養物的輸送會被中斷。另外，由于中性脂肪擠出水(水分)，所以將阻塞水溶性小分子(葡萄糖或氨基酸等)輸送至毛囊細胞。可以描 述為:當發生脫毛時所共同表現出的毛囊小型化現象，其是通過抑制毛囊及所有相關的周邊細胞提供來自血管的良好營養物，從而收縮細胞活動及大小，然后脫落細胞。此外，可以推論出:如果根據毛囊細胞的周期毛發脫落一次，應該再生長新的毛發，但是中性脂肪的積累抑制了形成毛囊的干細胞輸送到真皮乳頭，由此抑制了形成新的毛發。近年來，由受脫毛之苦的2(Γ30歲年輕男性在增加。引起年輕男性脫毛的原因可以解釋為與如下的中性脂肪代謝有關。在20世紀80年代，植物油(大豆油、玉米油、葡萄籽油、棉籽油/橄欖油等)以廉價的價格大量流通，因此各種飲食生活中增加了油炸類或加油食物攝取。商業化的植物油主要通過采用中性溶劑(例如，正己烷等)的萃取法大量制備。由于用中性溶劑的萃取法不給包含于植物的極性脂質包含到產品的條件或機會，因此幾乎純粹的中性脂肪組成的清晰且透明的油進入市場。其結果是，可以推理出現代人攝取許多包含不飽和脂肪酸的植物中性脂肪，有了高的中性脂肪代謝依存度，還具有高水平的中性脂肪在體內的累積和中性脂肪成分的皮脂分泌。如以上所述的，過多的中性脂肪可以引起脫毛。另外，由于來源于植物的中性脂肪包含大量不飽和脂肪酸，當暴露在空氣中時，中性脂肪將通過一系列的化學反應，即當暴露在空氣中時通過與氧分子結合的“脂質過氧化”。通過過氧化過程產生的氧化應激可能引起脫毛加速。年輕人脫毛可以通過個人的精神壓力產生，但脫毛能夠由中性脂肪有關的一系列生理學作用來解釋。另外，認為存在部分植物不飽和脂肪酸轉化為花生四烯酸，由此增加炎癥反應的可能性。當皮脂的分泌具有過多的中性脂肪成分以及皮脂逆向移動到毛囊引起脫毛時，可以通過使用現有已知的傳統方法減輕脫毛的癥狀。例如，可以采取如下方法:例如，使用抑制雄性激素活性的方法來降低皮脂合成和皮脂分泌的方法；或者使用防止由膽固醇合成雄性激素的抑制劑來降低雄性激素活性的方法。例如，使用米諾地爾(血管擴張劑的)和5α-還原酶(非那雄胺)的方法作為毛發生長的解決方案。然而，眾所周知當長期使用上述兩種藥物時才能獲得效果，并且還眾所周知在某些使用者中沒有預防脫毛的效果。已有報道長期服用非那雄胺可能產生如性功能障礙、精液減少及性欲減少等副作用(Kaufman等人，1998，J.Am.Acad.Dermatol, 39:578_589)，米諾地爾對一些患者可能伴隨如接觸性皮膚炎、濕疫等癥狀，或引起頭痛(Oslen 等人,2002, J.Am Acd.Dermatol, 47:377-385)。作為預防脫毛的其它方法，有用具有強力洗滌效果的洗滌劑、洗發劑等連續不斷地去除皮脂的方法。連續地去除皮脂的方法具有防止皮脂反向移動到毛囊的可能性。然而，會存在如下機會:如果用強力的洗滌劑或洗發劑，可能產生對頭皮或表皮的化學刺激，或可能損壞它們天然固有的保護功能，從而產生相反的效果。因此，存在一種穩定的方法，其不是減少產物或皮脂分泌物、或者簡單地去除皮脂累積的方法，而將皮脂的物性轉換為容易排出，由此預防脫發；并且還產生容易將營養物供應給毛囊細胞和周圍細胞的條件以促進毛發生長。根據本發明，發現當將包含從動物肺中提取后提純的磷脂、2價陽離子、以及有機酸(關于防止通過采用有機酸、有機酸鹽和2價陽離子的pH緩沖液來防止磷脂結塊的現象；例如，朽1檬酸、朽1檬酸鹽，pH值為5.8)的組合物局部應用于小鼠的表皮時,該組合物除了緩和表皮的發炎之外，可以促進毛囊的分化和毛發生長。本發明的觀察結果顯示出與傳統結果所觀測的不同類型的毛囊細胞活動(毛囊形成的典型過程，即由表皮基底細胞層的發育開始，之后在新的膨脹部形成毛囊)。由觀察組織學檢查的結果，可以確定:分布在皮下組織層的已有的毛囊細胞快速分化并且生長，與在傳統論文中已經公開的大量結果相比產生了大量的毛囊(參見圖7和圖8)。由以上結果，我們考慮了用于毛發生長的組合物的功能，然后創立了引起脫毛相關的新理論。因此，本發明是關于預防脫毛和促進毛發生長的組合物。本發明創立關于脫毛原因的新理論，并且作為新概念提出了用于防止和促進毛發生長的組合物。包含通過去除來源于動物的肺組織的中性脂肪和蛋白質而提純的磷脂、2價陽離子(鈣離子和/或鎂離子)和/或有機酸(例如，檸檬酸和檸檬酸鹽)的組合物促進了毛發生長。本發明的特征在于:使用從動物和人的肺組織向體外分泌的特定磷脂，其不同于從雞蛋或者大豆中提取的磷脂(一般稱為“軟磷脂”)，其中，由于從動物或人分泌的磷脂對磷脂的氧化具有穩定性，所以當其應用于暴漏在空氣中的頭皮和表皮部位時，是有利的。用在本申請說明書的術語“提取物”的意思是指其通常為上述技術領域中熟知的粗提取物，然而在廣義上包括上述的溶劑組分。本發明的肺提取物通過使用溶劑來獲得，并且通過進一步應用提純工藝來獲得。例如，作為本發明的肺提取物，包括從提取物中通過具有某些分子截留值(cut-off value)的超濾膜所獲得的組分，和通過進一步進行的多種提純方法，例如，通過使用各種色譜的分離(通過根據大小、電荷、疏水性或親和力分離而制造的)所獲得的組分。根據本發明的肺提取物或者其餾分可以通過進一步的工藝如真空蒸餾以及冷凍-干燥或噴霧干燥來制備成粉末類型。本發明的組合物起到非常有效地預防脫毛及促進毛發生長的作用。在申請說明書中所使用的術語“預防脫毛”和“促進毛發生長”用作相同的含義，并且與本技術領域中使用的其它術語、毛發生長具有相同的含義。根據本發明的優選實方式，本發明的組合物可以作為藥物組合物、化妝品組合物或食品組合物的形式提供。在其中本發明的 組合物作為藥物組合物制備的情況中，本發明的藥物組合物包括藥學上可接受的載體。包含于本發明的藥物組合物中的藥學上可接受的載體包括:作為在制備時常見使用的載體，乳糖、右旋糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露糖醇、淀粉、阿拉伯膠、磷酸鈣、藻酸鹽、明膠、硅酸鈣、微晶纖維素、聚乙烯卩比咯烷酮、纖維素、水、糖漿、甲基纖維素、甲基羥基苯甲酸酯、丙基羥基苯甲酸酯、丙基羥基苯甲酸酯、滑石、硬脂酸、鎂及礦物油，但本發明不限于此。本發明的藥物組合物可以進一步包括潤滑劑、潤濕劑、甜味劑、乳劑、懸浮液、防腐劑等。適合的藥學上可接受的載體或配方在雷明頓的制藥科學(1995，第十九版)(Remington，s Pharmaceutical Sciences (19th ed., 1995))中有詳細描述。本發明的藥物組合物可以口服或非腸道給藥，優選地非腸道給藥。更優選地，通過以局部應用型進行施用。根據本發明的藥物組合物的合適劑量可以根據諸如配制方法、給藥方法、患者年齡、患者體重、患者性別、患者病態、飲食、給藥期間、給藥途徑、排泄率、以及反應靈敏度等因素進行多種規定。基于成人，包含于本發明的藥物組合物中的磷脂(一種生物活性物質)的劑量在0.0oriooomg/kg范圍內，優選在0.0orioomg/kg,更優選在0.01 50mg/kg。本發明的藥物組合物可以被制備為單位容量型，或者通過根據由熟知本發明相關技術領域的技術人員可以容易進行的方法，用藥學上可接受的載體和/或賦形劑將其放入高容量的容器來制備。此時， 劑型可以是溶液、懸浮液、糖漿劑、或在油或水介質中的乳劑；或者可以是提取物、消散劑、粉末劑、顆粒劑、片劑或者膠囊劑的類型。另外，可以進一步包括分散劑和穩定劑。在其中本發明的組合物作為化妝品組合物制備的情況中，本發明組合物包含上述肺提取物和由此分離的磷脂，以及還包含通常用于化妝品組合物的成分，其中所述成分包括:例如，輔劑如抗氧化劑、穩定劑、溶解劑、維生素、染料、調味品以及載體。此外，除了上述肺提取物和由此分離的磷脂之外，本發明的組合物可以使用與將不破壞本發明功能(毛發生長功能)范圍內通常使用的毛發生長促進劑和生發油混合的混合物。作為載體，可以使用凈化水、單價醇(乙醇或丙醇)、多價醇(甘油、1，3-丁二醇、或丙二醇)、高級脂肪酸(棕櫚酸或亞麻酸)、油脂(麥胚芽油、山茶油、希蒙得木油(jojobaoil)、橄欖油、角S烯、葵花油、澳洲堅果油(macadamia nut oil)、鱷梨油、大豆添加水的卵磷脂、脂肪酸甘油酯)等，但本發明不限于此。另外，如果必要的話，可以添加表面活性劑、抗微生物劑、抗氧化劑、紫外線吸附劑、抗炎劑和清涼劑。表面活性劑可以包含選自聚氧乙烯、氫化的蓖麻油、聚氧乙烯、油基醚、單油酸聚氧乙烯醚、聚氧乙烯、單硬脂酸甘油酯、單硬脂酸山梨糖醇、單油酸聚氧乙烯醚、山梨糖醇、蔗糖脂肪酸酯、單月桂酸六聚甘油酯、聚氧乙烯還原的羊毛脂、Ρ0Ε、甘油焦谷氨酸酯、異硬脂酸、二酯、N-乙酰谷胺和異硬脂酸酯中的一種。抗菌劑可以包含選自扁柏酚、三氯生、雙氯苯雙胍己烷葡萄糖酸鹽、苯氧基乙醇、間苯二酚、異丙基甲基苯酚、甘葡環烴、水楊酸和巰氧毗啶鋅中的一種。作為抗氧化劑，可以使用由丁羥基茴香醚、五倍子酸、五倍子酸丙酯和異抗壞血酸鹽中的任一種作為紫外線吸附劑，可以使用二苯甲酮如二羥基二苯甲酮、黑色素、對氨基苯甲酸乙基酷(paraaminobenzoic acid ethyl)、對二甲氛基苯甲酸2_乙基己酷、西諾賽特(cynocite)、對甲氧基肉桂酸2-乙基己酯、2-(2-輕基-5-甲苯基)苯并三唑、咪唑丙烯酸和金屬氧化物顆粒中的任一種。
作為抗炎劑,可以使用格利蒂利汀酸二鉀(glythylic acid dipotassium)或尿囊素；作為清涼劑，可以使用辣椒酊或1-薄荷醇。所述組合物的劑型是能夠結合肺提取物和由此分離的磷脂作為有效成分的任意劑型，以及作為預防脫毛和促進毛發生長的化妝品類型，它可以被制成各種類型如生發油、發乳、潤發油、粉劑、溶液如凝膠、溶膠凝膠、乳液、油、蠟和氣溶膠，但本發明不限于此。本發明組合物可以進一步包含用于促進毛發生長的輔助成分。促進毛發生長的輔助成分包括5 α -還原酶抑制劑、毛囊和毛囊活化劑、增加毛囊血液流量的成分、殺菌成分、頭皮屑防止劑、角蛋白軟化劑、清涼劑、保濕劑等。關于每個功能成分的實例如下:I) 5α-還原酶抑制劑綠茶提取物、非那雄胺、黃金側柏科籽提取物、苦參根狹葉提取物(sophoraangustifolia root extract)、亞麻酸、Y _亞麻酸、希蒙得木油、橄欖油、葵花油、鱷梨油、添加大豆的卵磷脂、丁香提取物、薏苡仁提取物、鹽膚木提取物(rhus semialata gallextracts)、姜黃提取物、檳榔提取物、黑兒茶提取物、牽牛子提取物、車前子提取物、降香黃檀提取物、甘草提取物、補骨脂提取物(bogolji extract)、沙巴棕、蘋果提取物等。2)毛囊和毛囊活性劑獐牙菜提取物、人參提取物、紅參提取物、軟棗獼猴桃果提取物(actinidiaarguta fruit extract)、丁香提取物、薏該仁提取物、地黃根提取物、何首烏根提取物、黃精提取物、泛酰乙醚(pantothenylethylether )、二泛酰醇(dipantothenol )、指甲花提取物、菖蒲提取物、扁柏酚、煙酰胺、L-薄荷醇等。3)增加毛囊血流的成分
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米諾地爾、銀杏提取物、紅參提取物、辣椒酊、醋酸生育酚酯、煙堿酸芐酯等。4 )殺菌及角蛋白溶解劑水楊酸、指甲花提取物、菖蒲提取物、吡羅克酮乙醇胺等。5)頭皮屑防止劑酮康唑、綠茶提取物等。6)清涼劑L-薄荷醇等。7)保濕劑橄欖油、希蒙得木油、山茶油、葵花油、澳洲堅果油、鱷梨油等。以下對本發明進行詳細說明。本發明中提出的關于脫毛的解決方案如下:1.用極性脂肪改變皮脂(一種中性脂肪)的性質。一種代表性極性脂肪的磷脂是特定的兩性材料，并且可以與中性脂肪很好的混合，同時也可以很好地與水混合。通過使用此類性質的磷脂改變皮脂的性質。皮脂可以很好地與水混合，因此該皮脂可以容易地排出，并且可能使皮脂不向后流到毛囊且不積累。因此，積累的皮脂不會阻塞輸送至血管的營養物。磷脂是組成細胞膜的脂質，并且可以作為毛囊細胞和周圍相關細胞所需要的細胞膜構成物提供。肥皂或者洗發劑可以相對容易地去除皮脂成分中具有小極性的脂肪酸或膽固醇，但很難去除完全中性的脂肪如三酰甘油或膽固醇。因此，如果頻繁地使用肥皂或洗發劑，會逐漸降低脂肪酸、膽固醇等的比例，所以存在可能產生皮脂凝固的擔心。由于使用磷脂質改變皮脂的性質的方法可以防止固化，所以期待皮脂容易被排出，并且在用肥皂或洗發劑時容易被去除。2.應選擇磷脂，然后使用。由于植物磷脂包含大量不飽和脂肪酸，當在應用于頭皮或表皮時通過暴露在空氣中從而與氧氣接觸時，它們會經受脂類過氧化過程。通過脂質過氧化過程產生的單線氧
(1O2)離子可能負面地影響(氧化應激)表皮細胞和毛囊細胞。先前報道有脂類過氧化可能引起脫毛(Naito 等人，2008, International J.Mol.Med, 22:725-729)或斑秀癥狀(Koca 等人，2005, Med.Sc1.Monit.11:296-299)。為了在身體的表皮上使用磷脂，不飽和脂肪酸的含量低或者不飽和脂肪酸不包含于磷脂中。在生理學方面與氧高度接觸的肺是僅有的包含大量不飽和脂肪酸的器官。一般認為肺的該特性是用于降低肺表面的表面張力以容易呼吸的方法，而且還由于在呼吸時連續暴露于氧氣中是不可避免，肺的該特性是防止脂質過氧化的副作用的進化結果之一。其結果是，包括人類的所有動物的肺具有大量的“含大量飽和脂肪酸的磷脂”，并且在肺的表面連續分泌這樣的磷脂。因此，最優選采用來自動物肺的磷脂作為能夠應用在表皮或頭皮的磷脂。存在采用植物提取油或特定脂肪酸作為一些與脫毛相關的產品的情況。植物提取油或來源于植物的脂肪酸可以允許皮脂液化(增加流動性)。另外，它們可以通過容易排出而顯示出對預防脫毛及促進毛發生長的效果。然而，不能充分地認為相反的效果是由不飽和脂肪酸-氧化引起的。3.用于使磷脂效果最大化的輔助因子，二價陽離子。難以通過給頭皮簡單地提供磷脂來預防脫毛或期望毛發快速生長。2價陽離子，特別是鈣離子(Ca2+離子)是供應由外部提供給到真皮乳頭和相關周圍細胞的磷脂所必不可少的。通常，鈣離子(Ca2+離子)或鎂離子(Mg2+離子)用于細胞-細胞間識別，并且是用于膠束或脂質融合至所選擇的細胞膜所必不可少的因素。為了在活體中表現出所選擇的磷脂的效果，2價陽離子應該實質上共存的。另外，期待這樣的2價陽離子中和磷脂的磷酸酯基團的負極性，以便磷脂可以確定它們的取向，或者具有穩定的結構。用于本發明中的非限制性實例的2價陽離子鈣的濃度仿效了在活體中的肺表面的鈣離子濃度，然后應用它。4.為了磷脂的有效功能的有機酸輔助因子。由于脂質極性端部具有極強的極性，所以磷脂表現出通過2價陽離子強烈聚集的現象。通過2價陽離子聚集的磷脂不容易分散在表皮上，由于聚集物的尺寸大，所以不容易滲透到表皮里，使得難以期待預防脫毛或者促進毛發生長的良好效果。為了使磷脂通過2價陽離子隨機聚集最小化，可以在組合物中使用表現出強烈負極性的有機酸(例如，與TCA周期有關的有機酸如檸檬酸鹽/檸檬酸、琥珀酸鹽/琥珀酸)。這些有機酸通過2價陽離子在涉及磷脂聚集的相互作用中發揮作用。該作用是通過代表性的螯合劑乙二胺四乙酸(EDTA)固定2價金屬離子的不同方式。另外，存在如下優點:有機酸以共軛酸或共軛堿(例如，檸檬酸或檸檬酸鈉)類型存在，使得有機酸可以用作控制應用于頭皮上的液體制劑的PH值的緩沖液。
本發明的原創性使用磷脂促進毛發生長的方法的實例在現有的專利中有公開。
美國專利第4，828，837號和美國專利第4，761，288號公開了通過采用磷脂制備的脂質體以使米諾地爾的效果最大化。這些專利使用了采用磷脂(卵磷脂)和合成的二棕櫚酰磷脂酰膽堿(DPPC)、大豆或蛋黃的脂質體包封米諾地爾。另外，為了穩定磷脂結構，該專利提出了另外使用膽固醇的實例。本發明的目的是采用從動物肺中提取，然后提純后的純化的磷脂促進毛發生長，而不是傳送促進毛發生長的成分如米諾地爾。利用公知常識，難以判斷活體中的構成成分磷脂刺激了分布在基底層的干細胞，使得該干細胞可以分化為毛囊細胞。因此，本發明的原理是通過使用從動物的肺組織中提純的純磷脂改變皮脂(一種中性脂肪成分的)的性質來防止皮脂固化，以及容易地排出或去除。皮脂的順利消除可以預防脫毛，并且有助于毛囊細胞能夠容易地接受來自于毛細管的營養物，使得它可以活化毛囊細胞和相關的周圍細胞，由此促進毛發生長。從蛋黃或大豆中提取的磷脂包含大量不飽和脂肪酸，使得存在通過氧接觸的容易過氧化而將氧化應激施加于毛囊細胞和相關的周圍細胞的高可能性。因此，如果可以，優選使用包含大量飽和脂肪酸的從動物肺中提純的磷脂，代替使用包含不飽和脂肪酸的磷脂(卵磷脂)。本發明涉及一種使 用有機酸或有機酸鹽(共軛酸或共軛堿)以防止由鈣引起的磷脂聚集、以及2價陽離子的組合物。因此，本發明具有完全不同于任何常見的磷脂相關產品的原創性。通過同時使用這樣的2價離子、以及有機酸和有機酸鹽，不利于制備出結構穩定的脂質體。其原因是具有強極性的磷脂的端基相互推出極性基。由于二棕櫚酰磷脂酰膽堿(DPPC)的含量高，結構穩定的脂質體是不利的。例如，已報道當在4度下儲存純DPPC脂質體，在 2 周內完全被破碎(Launois-Surpas 等人，1992, Colloid Polym.Sc1.270:901-911 )。為了改變存在于頭皮或表皮上的皮脂的性質，本發明優選采用簡單懸浮液型磷月旨。這是因為當傳送的脂質體結構穩定時，可以理解為不容易與暴露在頭皮或在皮脂腺里的皮脂混合。為了改變皮脂的性質而采用磷脂的方法比采用多種脂肪酸的毛發生長解決方法具有更好的優勢(美國專利號US2007/0154432A1)。因為脂肪酸可能對細胞脂類膜結構有不利影響，并且還可以容易地用作為細菌或真菌的能量來源。另外，脂肪酸的中間代謝物具有表現出不好氣味的特性(例如，丁酸、丙酸等)，使得存在很多不利點。此外，亞油酸通過人類細胞的新陳代謝變成花生四烯酸，然后最終成為白三烯-B4 (Ieukotriene-BO或前列腺素E2。這兩種物質起到增加炎癥反應的作用，使得當長期使用它們時，這具有刺激脫毛的潛力(Mahet 等人，2000, Inernational.Dermatol.,39:576_584)。使用脂肪酸的毛發生長產品可以起初通過與皮脂良好融合的皮脂軟化特性而表現出毛發生長效果。然而，不能忽略當由于長期使用它們而聚集時，這具有表現負面功能的潛力。作為本發明的組合物中的成分，所述組合物包含通過去除動物肺中的中性脂肪和肽(蛋白質)的純磷脂、2價陽離子(例如，鈣離子和/或鎂離子)、或有機酸(例如，檸檬酸檸檬酸鹽、琥珀酸/琥珀酸鹽、或蘋果酸/蘋果酸鹽)和用于線粒體的三羧酸循環中的有機酸(共軛酸或共軛堿)。另外，本發明的目的是通過改變由皮脂腺分泌的皮脂的性質而容易地去除或排出皮脂，然后預防脫毛和促進毛發生長。組合物的各種用途作為本發明的組合物，所述組合物對分布在表皮上的干細胞給予任何作用或刺激以形成新的毛囊細胞，然后促進毛發生長，這在理論上或實驗上都是沒有根據或者根據足。然而，在理論上或在實驗上已經證明了本發明的組合物改變了皮脂的性質而容易地排出或去除皮脂，由此促進毛發快速生長。作為通過傳統的動物實驗找出毛發生長的機制的結果，發現毛囊細胞的分化和產生是在被受傷、然后治愈后自然產生的(Cheng-Ming Chuong, 2007, Nature447:265-266和Ito等人，2007，Nature447:316-320)。當本專利的組合物應用于在形成輕傷后的輕傷處時，在傷口愈合過程期間新分化的毛囊細胞可以快速生長，然后可以穩定生長毛發。促進毛發生長的目的更強于預防脫毛的目的。作為另一種方法，期待在應用米諾地爾或非那雄胺后表現出細毛發生長的情況中，當應用本發明的組合物時，可以快速誘導毛發生長，由此計劃毛發的穩定生長。在其中脫毛進行中的人的頭皮上存在細毛發(稱作細軟毛)的情況下，預料到在頭皮上應用本發明的組合物，使得它通過細毛發的快速生長有助于緩和脫毛癥狀。此外，預料的是在對癌癥患者進行化療之前或者之后，當應用本發明組合物時，可以防止由化療的副作用而導致的脫毛，以及當在完成化療后生長新的毛發時，還可以使新的毛發快速生長，所以所述組合物有助于患者的恢復。發明效果由本發明的說明書可以看出，本發明通過采用從動物中提純的磷脂改變中性脂肪成分的皮脂的特性可以防止皮脂固化以及容易地排出或去除皮脂。順利地消除皮脂可以預防脫毛，并且幫助毛囊細胞容易接受來自毛細血管的營養物以活化毛囊細胞和相關的周圍細胞，由此毛發快速生長。
圖1是從豬肺中提取并提純的磷脂的薄層色譜分析的照片。在圖1中，I道的試樣是在二氧化硅色譜柱之前從豬肺中提取的磷脂，2道的試樣是從豬肺中提取的純化磷脂，3道的試樣是PC (左旋-阿爾法-磷酸卵磷脂，西格瑪#P3556) ；4道的試樣是PI (磷脂酰肌醇鈉鹽，Fluka#79403) ；5道的試樣是PS (3-順-磷脂酰-左旋-絲氨酸鈉鹽，西格瑪#P5660 )；6道的試樣是PA( 3-順式-磷脂酸鈉鹽，西格瑪#P9511);7道的試樣是PE(左旋-阿爾法-磷脂酰乙醇胺，西格瑪#P7943) ；8道的試樣是DPPC (1-2- 二棕櫚酰基-順式-丙三醇-3-膽堿磷酸，西格瑪# 4329) ;9道的試樣是大豆卵磷脂(純正化學#86015-1201，日本)。通過使用薄層色譜確認了特定磷脂的類型。通過使用薄層色譜確認的磷脂是DPPC、PC、PS、PI和PE。用于薄層色譜的顯色劑是氯仿:甲醇:水(65:25:4，體積比)。在噴射5%的硫酸鹽溶于乙醇的溶液后，在190度下加熱以碳化和確認每個成分。在圖2中，I道的試樣是由豬肺中提純的磷脂；2道的試樣是由大豆提取的磷脂(大豆卵磷脂，純正化學#86015-1201，日本)；以及3道試樣是由蛋黃提取的磷脂(雞蛋卵磷脂，東京化學工業株式會社札0022，日本)。從薄層色譜的方法，確認了由豬肺中提取的磷脂與眾所周知的常見磷脂具有完全不同的成分。圖31是證實了毛囊的活化現象的照片。在使用DNFB(2，4_二硝基氟苯)敏化功能引起發炎的小鼠背部表皮上應用通過由豬肺中提取的磷脂，進行了確認降低發炎的實驗。其結果是，偶然地證實了活化毛囊細胞的生長。圖3是表皮組織的正常背部；圖4是僅用DNFB治療的小鼠表皮組織；圖5是應用他克莫司(商品名，普特皮，日本安斯泰來制藥有限公司)之后的表皮組織；圖6是應用地塞米松(0.1%地塞米松乙醇溶液)之后的表皮組織；圖7應用由豬肺中提取的磷脂(IOmg/ml)后的表皮組織；以及圖8是以15天為應用期應用由豬肺磷脂(10mg/ml)中提取的磷脂(20mg/ml)后的表皮組織。在橢圓形紅色虛線內存在大量活化的毛囊細胞。部分觀察到典型類型的脫毛(表現為細胞基層凹陷和毛囊細胞分化的現象)(圖5中應用他克莫司)。在應用本發明的組合物(圖7和8)之后，在細胞基層下存在活化的毛囊細胞，其中活化的毛囊細胞顯示出與常見類型的毛發生長相比不同類型的毛發生長。圖9-11是本發明的組合物對促進小鼠毛發生長的效果的照片圖。圖9是在去除實驗用小鼠(balb/c)的毛發后應用鹽溶液2周后的結果的照片圖。圖10是在去除同種同齡的小鼠的毛發后應用所述組合物2周之后的小鼠狀態。通過肉眼可以發現明確的小鼠毛發生長。圖11是在去除實驗用小鼠(C3H)的毛發后比較應用蒸餾水的小鼠和應用組合物的小鼠之間長度。確認了應用所述組合物的小鼠的毛發(右側)快速生長。刻度尺間距為
`Imnin圖12 16是在將本發明的組合物應用于人體的實例的照片圖。將含有濃度為5mg/ml的磷脂的組合物應用于顯示脫毛的志愿者之后，然后觀測結果。將一滴(分別為5(T60ml)所述組合物應用于2cmX 2cm脫毛區域每天兩次，并揉擦約20秒。圖12是志愿者A在應用之前的外觀；圖13是應用后15周的外觀；圖14是應用后20周的外觀；圖15是志愿者B應用之前的外觀；以及圖16是應用后15周的外貌；甚至使用肉眼也可以容易和清楚地觀察到所述組合物的效果。圖17-24是含各種濃度的有機酸的組合的本發明組合物的效果的照片圖。通過實驗用小鼠(C3H)的去除毛發面積為基準計算毛發生長面積的比例，將毛發生長效果轉換成數據化(實驗例4:毛發生長效果實驗)；參見動物實驗例3的內容(有機酸效果和大豆卵磷脂效果)和表格。圖17是僅應用蒸餾水的實驗組；圖18是僅應用米諾地爾(5%)的實驗組；圖19是應用由豬肺中提取的磷脂+1.5mM CaCl2 + 2.5mM檸檬酸鹽/檸檬酸(pH值為5.8)的實驗組；圖20是應用由豬肺中提取的磷脂+1.5mM CaCl2 + 5mM檸檬酸鹽/檸檬酸(pH值為
5.8)的實驗組；圖21是應用由豬肺中提取的磷脂+1.5mM CaCl2 + 7mM檸檬酸鹽/檸檬酸(pH值為5.8)的實驗組；圖22是應用由豬肺中提取的磷脂+1.5mM CaCl2 + 5mM檸檬酸鹽/檸檬酸+ 5mM蘋果酸鹽/蘋果酸(pH值為5.8)的實驗組；圖23是應用由豬肺中提取的磷脂+1.5mM CaCl2 + 2.5mM檸檬酸鹽/檸檬酸+ 2.5mM蘋果酸鹽/蘋果酸(pH值為5.8)的實驗組；以及圖24是應用由大豆卵磷脂中提取的磷脂+1.5mM CaCl2 + 5mM檸檬酸鹽/檸檬酸(pH值為5.8)的實驗組。確認了當組合物含有有機酸的濃度為5mM的檸檬酸時，觀察到最有效的結果，在含有與其他檸檬酸循環相關的有機酸(例如，蘋果酸)組合的情況中，表現出相當優秀的毛發生長效果。圖25 27是本發明的組合物中所含有的2價陽離子的效果的照片圖。采用5mM琥珀酸鹽/琥珀酸(pH值為5.8)代替了組合物中所含有的5mM檸檬酸鹽/檸檬酸(pH值為5.8)。在應用該組合物之后，觀察到改變后的組合物對毛發生長的效果。圖25是僅應用蒸餾水的實驗組；圖26是應用含有1.5mM CaCl2 + 5mM檸檬酸鹽/檸檬酸(pH值為5.8)的組合物(應用2.5周)的實驗組。以及圖27是應用含有1.5mM CaCl2 +5mM琥珀酸鹽/琥珀酸(pH值為5.8)的組合物的實驗組。發現應用含琥珀酸的組合物的小鼠的毛發生長沒有規律，而且與應用含檸檬酸的組合物的小鼠的毛發生長狀態相比具有粗糙的結構。可以確認琥珀酸鹽最優選作為包含于所述組合物中的有機酸，并且琥珀酸鹽也具有促進毛發生長的效果。圖28-29是作為包含于本發明組合物中的2價陽離子鎂離子的效果的照片圖。將包含1.5mM MgCl2代替1.5mM CaCl2的組合物應用于實驗用小鼠(Balb/c)2周。控制實驗用動物組(圖28)應用了蒸餾水，并且在效果組應用了由豬肺提取的20mg/ml磷脂質，1.5mM MgCl2和5mM檸檬酸鹽。其中包含鎂離子的組合物單獨表現了不同類型的毛發生長。發現包含于組合物的2價陽離子中鈣離子最有效的促進毛發生長，并且鎂離子對毛發生長也有效果。圖30和31是與本發明組合物的劑型相關的實驗。
圖30中的中間試管顯示由于1.5mM氯化鈣而聚集的純化磷脂的現象。圖30中的右邊試管顯示由于加入5mM檸檬酸鹽/檸檬酸(pH值為5.8)沒有產生因鈣而導致的聚集磷脂的狀態。圖30中的左邊試管是將所述組合物分散于蒸餾水中的渾濁結果。由上述結果可以確定:包含于所述組合物中的有機酸對促進毛發生長起重要的作用，并且有機酸是保持渾濁的均勻化組合物的狀態所必不可少的因素。通過確認在蒸餾水中形成半透明的奶色溶液來確定脂質體的形成。然而，混合有5mM檸檬酸/檸檬酸鹽+1.5mM氯化鈣的溶液(右邊試管)具有均勻化的渾濁狀態，并且存在不透明的絮凝顆粒，使得它可以被確定為未形成脂質體(參考照片，可以通過右邊不透明的試管來區別)。圖31是為了形成脂質體結構采用從肺中提取的磷脂在圓形燒瓶上形成脂質膜后通過劇烈漩渦嘗試形成脂質體的實驗結果。將經過同樣過程的大豆卵磷脂維持透明的脂質溶液狀態(圖31的左側圖)，但當從動物肺中提取的磷脂放置約I小時時，會產生很多氣泡和許多的沉淀物(圖31的右側圖)。可以確定磷脂和用于本發明的溶液的條件不利于形成脂質體。下面由非限定的實施例來更詳細地說明本發明。然而下面的實施例僅是說明本發明，但是本發明的范圍不限于下述的實施例。實施例1:從豬肺中提純磷脂在由危害分析臨界控制點(HACCP)授權的屠宰場屠宰豬后，立即獲取肺組織，然后儲存于冰水浴中。屠宰后，在5小時內使用豬肺組織，或者在不立即使用的情況下，將其儲存在-20度下，然后必要時解凍且使用它。磷脂質的提取過程如下:I)研磨豬肺組織；2)去除肺組織中的血液；3)沉淀全部脂質；4)用有機溶劑提取全部脂質；5)用中性溶劑去除中性脂肪；6)為了去除剩下的中性脂肪、肽和蛋白質，采用二氧化硅色譜柱提純；7)去除溶劑并干燥。I)研磨豬肺組織從豬肺組織中去除堅硬的組織(例如，器官)或粗血管(例如，主動脈和肺動脈)，切割成4 X 4 X 4cm大小，然后采用磨機研磨豬肺。將冷生理鹽水(700ml)加入到研磨后的組織中(250g)，然后使用帶金屬葉片的攪拌機(HMF-390，韓一電機公司，韓國)進一步研磨I分鐘。2)去除肺組織中的血液將用混合機研磨后的肺組織放置于冰水浴I小時以使其冷卻。將冷卻后的肺組織在4度、4500g下離心分離40分鐘(Component-R，韓一電機公司，韓國)以收集沉淀物，然后去除稀釋的血上清液。3)沉淀全部脂質將包含5mM CaCl2的儲存溶液(70mM NaCl)添加到所獲得的沉淀物中，然后放入冰水浴中I小時以使其冷卻。冷卻后的試樣在4度、4500g下離心分離45分鐘以獲得沉淀物。使用鈣離子誘導肺組織中的獨特蛋白質和磷脂的聚集，然后即使在較低的離心加速度(g)下也容易誘導沉淀。4)用有機溶劑提取全部脂質將4倍體積的二氯甲烷:乙醇(2:1的體積比)混合溶液傾倒入所獲得的沉淀物中以去除含水材料溶液，然后獲得有機酸-可溶解材料(全部脂質包含磷脂)。使用真空旋轉蒸發儀去除溶劑，然后濃縮所包含的脂質材料。5)用中性溶劑去除中性脂肪將濃縮后的含磷脂組分再溶解于二氯甲烷，然后應用于二氧化硅色譜柱以去除包含于試樣中的膽固醇、三酰甘油、脂肪酸等，然后獲得純磷脂。采用直徑長度比為1:4的玻璃色譜柱，以及采用默克230-400目(Merck230-400mesh)目作為硅膠。起初采用無極性或中性的溶劑，然后逐漸采用高極性度的顯色劑，以首先洗提中性脂肪，最后洗提極性脂肪，由此容易提純。依次使用I體積硅膠的丙酮以及I體積硅膠的二氯甲烷；為了得到磷脂，采用7體積硅膠的二氯甲烷:乙醇:水(6:8:1的體積比)運行色譜柱。將洗提后的組分應用于薄層色譜(TLC)以確認磷脂的洗提。從薄層色譜挑選并獲得具有0.3^0.7的Rf值(磷脂Rf值)的脂質組分。使用三氯甲烷:甲醇:水(65:25:4體積比)作為薄膜色譜的顯色劑。6)為了去除剩余的中性脂肪、肽和蛋白質采用二氧化硅色譜柱提純采用真空旋轉蒸發儀從最后獲得的磷脂組分中去除有機溶劑。此外，向所獲得的磷脂固體中加入純乙醇，然后進行再蒸發過程以去除剩余的二氯甲烷。最后，采用冷凍干燥器在-85度下去除剩余的水分以獲得粉末型磷脂。7)去除有機溶劑并干燥通過使用薄層色譜(TLC)確認純化后的磷脂的純度。在薄層色譜上存在的脂質上噴射5%的溶于乙醇的硫酸溶液，然后在190度進行炭化以顯色。采用三氯甲烷:甲醇:水(65:25:4的體積比)作為薄層色譜顯色劑。顯色溶液有很強的極性；中性脂肪如脂肪酸和膽固醇具有高的運轉率(Rf值為0.8以上)；但是蛋白質或肽不會從打點處(dotting point)移動(Rf值為0.1以下)。磷脂具有0.3^0.76的Rf值。證實了 DPC (二棕櫚酰磷脂酰膽堿)、PC (磷脂酰膽堿)、PS (磷脂酰絲氨酸)、PE (磷脂酰乙醇胺)、PI (磷脂酰)以及PA (磷脂酸)包含于采用薄層色譜提純的磷脂中(圖1)。
由薄層色譜分析證實了從肺部提取的磷脂(卵磷脂)具有完全不同于在大豆卵磷脂或雞蛋卵磷脂中所包含的成分(圖2)。
通過在薄層色譜上噴射0.2%的溶于乙醇的茚三酮溶液，確認了包含于試樣中的蛋白質或肽是否存在。在用茚三酮染色的薄層色譜上未檢測到蛋白質或肽(未提供該結果)。試樣中所包含的全部磷脂的濃度是通過使用Fiske-Subbarow試劑改良的巴氏實驗(Miller KJ，1985，細菌學期刊，162:263-270)定量分析的。通過采用HPLC-ELS (蒸發光散色)檢測系統(Water e2695模塊系統，美國)，定量分析在肺試樣中所包含的獨特磷脂DPPC的含量。購買L-a- 二棕櫚酰磷脂酰膽堿(西格瑪化學有限公司，美國)用于濃度分析。在全部試樣中包含的DPPC的含量被確認為約32% (該結果未提供)。實施例2:組合物的制備由于提純的磷脂以粉末類型存在，為了應用于表皮，將磷脂分散在水中。在磷脂質分散在水后，在121度和15Ib/cm2壓力下進行15分鐘高壓滅菌。作為輔助因子使用的2價陽離子(氯化鈣或氯化鎂)和有機酸(檸檬酸、馬來酸等)被制備成濃縮溶液、分別進行高壓滅菌、加入到分散的磷脂溶液中、以及然后至所需的濃度。有機酸的制備物是通過混合酸形式(例如，檸檬酸)和鈉鹽形式(例如，檸檬酸三鈉)的PH值為5.8的緩沖溶液。為了驗證效果，采用磷脂的濃度分別為5mg/ml、10mg/ml、20mg/ml,2價陽離子濃度為1.5mM,有機酸的濃度(有機酸和有機酸鹽的總濃度)最終為5mM。實驗例1:毛發生長效果的測試:動物實驗I (觀察毛發生長效果)為了制備特應性皮炎、或接觸性皮膚炎和過敏性皮炎的動物樣本，用DNFB敏化處理I周后，然后將DNFB以每2周共10次應用于小鼠的背部以人為誘發過敏性炎癥。根據先前出版的文獻(論文)(Inagaki等人，Eur J Pharmacol, 546:189-196)進行給藥顯示出效果的材料和精制劑的方法、以及制備動物樣本的表述。自從應用DNFB5次后，將本發明的組合物、他克莫司軟膏(商品名，普特皮阿斯特拉制藥有限公司，韓國)、以及地塞米爾(西格瑪化學有限公司，美國， 0.1%溶于乙醇的溶液)以60ml量每天兩次分別應用于發生炎癥的小鼠的背部。在應用后10天，收集小鼠組織檢測實驗。在應用本發明組合物(磷脂的濃度為10mg/ml (圖7)和20mg/ml (圖8))的小鼠組織上觀察到積極的毛囊生長，而在應用地塞米松(圖6)的小鼠組織上并沒有觀察到。在小鼠背部治愈的過程中，應用他克莫司的小鼠組織上觀測到通過將基底細胞的干細胞分化成毛囊細胞而形成新的毛囊細胞以及凹陷的現象(圖5)，但是在應用本發明組合物的小鼠組織的基底細胞膜下存在毛囊細胞的生長。此結果是能夠推論出本發明的組合物具有毛發生長功能，勝于預防脫毛功能的根據。實驗例2:毛發生長效果測試:動物測試2 (毛發生長的生長速率的測試)購買(韓國京畿道三南市東方生物(Oriental Bi0.SungNam-si, Kyungg1-do, Korea)同年齡的雄性實驗用小鼠(5周齡，白變種實驗室小鼠(balb/c))，并且在新環境下適應一周。自由提供食物和水并通過調整成上午8點開燈并下午8點關燈，調整了晝夜規律。為了飼養采用動物飼養機(DJ-201，DaejongLab, Seoul, Korea)，調節濕度、溫度、空氣清潔和循環為25度和50%濕度。以5只小鼠為一組進行了測試。去除同齡(6周)的雄性小鼠的毛發后，應用本發明的組合物，然后觀察毛發生長。作為對比組，采用相等量的蒸餾水代替所述組合物，并以同樣次數揉擦(圖9)。所述組合物通過混合將20mg/ml磷脂與包含1.5mM的CaCl2和5mM朽1檬酸/朽1檬酸鹽(朽1檬酸、無鹽和檸檬酸三鈉鹽)的溶液混合來簡單地制備。將60ml的組合物按每日2次使用2周(除星期六和星期日，共10天)(圖10)。2周后,兩組之間存在明顯的差異(圖9和圖10)。除了 Balb/c實驗用小鼠外，通過采用C3H實驗用小鼠比較了毛發生長的生長速率。通過將僅使用蒸餾水和所述組合物的小鼠毛發拔下，比較了它們的長度。圖11是由兩實驗組拔出的毛發的長度，并且每刻度表示Imm間距。實驗例3:用于毛發生長效果的測試:志愿者測試選擇正在進行脫毛或者已經進行了相當多脫毛的志愿者，然后應用包含濃度為5mg/ml磷脂的本發明組合物。排除了給藥影響脫毛的藥物或在頭皮上應用該藥物的志愿者。選擇13位志愿者并且進行志愿者實驗。7位志愿者參加直到15 20周實驗完成為止。平均年齡是37歲。將一滴(約5(T70ml)本發明的組合物以每天2次滴到脫毛部位(2cmX2cm)，然后揉擦20秒。沒節制或推薦使用洗發劑、洗滌劑、食物、酒類或抽煙。在日常生活期間應用所述組合物。在應用所述組合物后的志愿者有4個問題，其中所述問題涉及脫毛減少的變化、毛發增加、毛發的生長速率以及毛發的厚度。志愿者選擇他們滿意的標準，最大(Γ5分涉及上述每個問題。[表 1]
權利要求
1.一種用于預防脫毛或促進毛發生長的組合物，該組合物包含磷脂作為有效成分。
2.根據權利要求1所述的組合物，其中，所述磷脂從動物中提取。
3.根據權利要求1所述的組合物，其中，所述磷脂從牛或豬中提取。
4.根據權利要求2或3所述的組合物，其中，所述磷脂從動物肺中提取。
5.根據權利要求1-3中任一項所述的組合物，其中，所述磷脂選自由二棕櫚酰磷脂酰膽堿、磷脂酰膽堿、磷脂酰絲氨酸、磷脂酸和磷脂酰肌醇所組成的組中。
6.根據權利要求1所述的組合物，進一步包括選自由2價陽離子、和含羧基的有機酸或其鹽所組成的組中的一種或多種成分。
7.根據權利要求1所述的組合物，其中，所述組合物是藥物組合物。
8.根據權利要求1所述的組合物，其中，所述組合物是化妝品組合物。
9.根據權利要求8所述的組合物，其中，所述化妝品組合物是生發油、發乳、頭發洗劑、洗發香波、染發液 、護發素、發膠、氣霧劑、潤發油、粉劑或凝膠劑。
全文摘要
本發明涉及一種預防脫毛或促進毛發生長，并且包含磷脂作為有效成分的組合物。更詳細地，本發明涉及一種預防脫毛或促進毛發生長，并且包含從動物萃取的磷脂作為有效成分的組合物。
文檔編號A61Q5/00GK103079536SQ201180035321
公開日2013年5月1日 申請日期2011年5月17日 優先權日2010年5月19日
發明者崔性鉉 申請人:株式會社百謳必得