專利名稱：以農業廢棄物為原料發酵生產微生物油脂的方法
技術領域：
本發明屬于生物化工領域，特別涉及一種微生物利用農業廢棄物(農作物秸稈、蔗渣和 玉米芯)半纖維素水解液發酵生產微生物油脂的方法。
背景技術：
生物柴油是一種以動植物油脂為原料生產的能夠替代化石柴油的綠色可再生能源，在石 油能源替代戰略中具有十分重要的地位。目前生物柴油的工業化生產主要以大豆油、菜籽油 以及廢油脂為原料。我國人多地少，以食用油為原料生產生物柴油不符合國情，而廢油脂的 數量有限，無法滿足現代經濟社會對能源的巨大需求。微生物油脂，又稱單細胞油脂，是微 生物生命活動中的一種代謝產物。某些微生物如酵母、霉菌、微藻、細菌能夠積累大量油脂， 有的菌體中油脂含量甚至達到干菌絲體的70°/。以上。這些油脂與一般植物油脂有類似的脂肪 酸組成，因此是一種具有巨大潛力的新型生物柴油生產原料。與動植物油脂相比，用微生物 生產油脂具有如下優點生長周期短，占地面積小，不受場地、氣候和季節限制，能連續大 規模生產。但傳統的油脂發酵以葡萄糖等為碳源，成本過高，限制了其在生物柴油生產中的 應用。利用各種工農業廢棄物，如農作物秸稈、食品工業和造紙行業廢水等發酵生產油脂， 既可大大降低微生物油脂的生產成本，又有利于環境保護。
木質纖維素是地球上最豐富的可再生資源，其主要成分為纖維素、半纖維素和木質素。 目前，纖維素和木質素均可找到有效利用的途徑，而半纖維素尚未得以有效利用。我國是一
個農業大國，各種農業廢棄物，如農作物秸稈、蔗渣等數量巨大，僅農作物秸稈每年就達7
億噸以上。過去，這部分木質纖維素資源經常被廢棄或低值化利用，如農作物秸稈經焚燒后 用于農田堆肥，但焚燒過程中產生的黑煙會污染環境。近年來，雖然眾多研究表明可利用秸 稈或庶渣來生產燃料乙醇等，但實際上被利用的主要是纖維素成分。相似的，不少利用木質 纖維素為原料產油脂的研究也是主要利用其纖維素成分，而對于半纖維素成分，卻往往不能 高效利用。半纖維素的主要組分是木聚糖，水解后可得到木糖、葡萄糖和阿拉伯糖等，且以 木糖為主，而自然界中很少微生物能夠利用木糖。利用一些特殊的微生物能夠以木糖為碳源
和能源積累油脂的特性，如發酵性絲孢酵母(7Wc/w^ora" /er附e"tora)，以農業廢棄物半纖維 素水解液為原料發酵生產油脂，可大大降低微生物油脂的生產成本，實現農業廢棄物中半纖維素資源的高值化利用，并有利于改善目前能源短缺和環境惡化的狀況。
發明內容
本發明的目的是為了解決現有技術存在的不足，提供一種以農業廢棄物為原料，高效利 用半纖維素發酵生產微生物油脂的方法。
本發明以廉價的農業廢棄物為原料，用稀酸將其水解，水解液經解毒預處理并濃縮后， 添加少量的氮源與微量元素，經產油微生物轉化獲取油脂。本方法將顯著降低微生物油脂的 生產成本，實現農業廢棄物半纖維素資源的高值化利用。
本發明目的通過如下技術方案實現-
以農業廢棄物為原料發酵生產微生物油脂的方法，包括如下步驟和工藝條件 (O半纖維素的水解將農業廢棄物粉碎至20—100目，按照農業廢棄物與水解酸溶液 的固液比為1 g: 10—20mL加入水解酸溶液，于110_140 。C下水解1—3h得到半纖維素水 解液；
(2)解毒預處理包括Ca(0H)2處理和吸附處理； Ca(0H)2處理向水解液中加入Ca(OH)2粉末，調節其pH至10.0—12.0，保持1 — 1.5 h 后，過濾，用酸將濾液pH調節為5.5—6.0，靜置l一2h，離心10—20min除去沉淀； 吸附處理選自步驟a、 b和c吸附中的一種
a. 活性炭吸附按照活性炭與Ca(OH)2處理所得水解液固液比1 g : 5—10 mL加入活性炭， 在30—40 'C下攪拌處理1 一2 h后過濾除去活性炭；
b. 離子交換樹脂吸附按照離子交換樹脂與Ca(OH)2處理所得水解液固液比1 g : 5—10 mL加入離子交換樹脂，在30—40 'C下攪拌處理1 一2 h后過濾除去離子交換樹脂；
c. 大孔樹脂吸附按照大孔樹脂與Ca(OH)2處理所得水解液固液比1 g : 5 — 10mL加入大 孔樹脂，在30—40 'C下攪拌處理l一2h后過濾除去大孔樹脂；
G)發酵培養基制備解毒預處理后的水解液在減壓條件下，于60— 70'C下濃縮至還原 糖濃度為80—120 g/L,然后按照其在混合物中的濃度添加如下物質1.2_2.4 g/L蛋白胨、 0.25—0.75 g/L酵母粉、0.4—0.6 g/L MgS04'7H20、 1.5—2.5 g/L KH2P04、 0.003 — 0.005 g/L MnSCU.H20和0.0001—0.0002 g/L CuS04'5H20,用酸調節pH至6,0_6.5，經滅菌后作為發 酵培養基；
(4)按體積比5 —15 : 100于發酵培養基中接入發酵性絲孢酵母(7Hc/zo^pora"/en^"tom) 種子液，在25—28。C培養7—9天，離心收集菌體，經有機溶劑提取方法獲得微生物油脂。 為進一步實現本發明目的，所述有機溶劑提取方法為按每克干菌體加入10mL濃度為3.5—4.5mol/LHCl,于80-100 。C處理30—60 min;冷卻后按體積比為2:1加入的氯仿和甲醇 混合溶劑進行萃取，收集氯仿層，用旋轉蒸發儀減壓去除有機溶劑，得到微生物油脂。 所述HC1的濃度優選為4mol/L。
所述農業廢棄物優選為水稻稈、小麥稈、高粱稈、玉米秸稈、蔗渣或玉米芯。 所述水解酸優選為硫酸、鹽酸或磷酸。 所述步驟(2) Ca(OH)2處理中酸優選為硫酸、鹽酸或磷酸。 所述步驟(3)發酵培養基制備中調節pH所用的酸優選為硫酸、鹽酸或磷酸。 相對于現有技術，本發明的以農業廢棄物半纖維素水解液為原料發酵生產微生物油脂的 方法，具有下述優點-
(1) 本發明能夠有效地利用農業廢棄物中的半纖維素成分來發酵生產微生物油脂，為解 決木質纖維素資源中半纖維素難以利用的難題提供了新方法和新途徑；
(2) 所利用的農作物廢棄物均為可再生資源，且來源廣泛、價格低廉，以其為原料生產 油脂不僅可變廢為寶，降低微生物油脂的生產成本，并且有利于環境保護。
具體實施例方式
下面結合實施例對本發明做進一步描述，本發明的實施例不限如此。 實施例l
1) 水稻秸稈半纖維素水解液制備
將水稻秸稈粉碎至20目，稱取40 g，按照水稻秸稈(固體)與2% (重量)稀硫酸(液 體)的固液比為1 g : 20mL加入稀硫酸溶液，于121 °C下水解1 h，過濾后得水解液。
2) 水解液的解毒處理
a, Ca(OH)2處理向水解液中加入Ca(OH)2粉末，調節其pH至10.0，保持1 h后，過 濾。用HC1調節濾液pH到5.5，靜置1h，再離心10min除去沉淀。
b. 活性炭吸附按固液比1 g :10 mL，將活性炭(粒徑為2.5 mm，德國Merck公司生產) 加入步驟a所得的水解液中，在40 'C下攪拌處理1 h后過濾除去活性炭。
3) 發酵培養基的配制
解毒后的水解液在減壓條件下，于60。C下濃縮至還原糖濃度為100 g/L，然后按照其在 該步驟最終混合物中的濃度添加如下物質1.8 g/L的蛋白胨、0.5 g/L的酵母粉、0.4 g/L的 MgSO4-7H2O、2.0 g/L的KH2PO4、0.003 g/L的MnS04.H20和0.0001g/LCuSO4'5H2O，用H2S04 調節pH至6.5， 121'C滅菌20min，制得發酵培養基。
4) 液體種子培養
6發酵性絲孢酵母(rr/c/205porafz/mMe"toraCICC 1368，購于中國工業微生物菌種保藏中心) 在液體種子培養基(葡萄糖20g/L、蛋白胨10g/L、酵母粉10g/L， pH為6.0)中于28'C、 160r/min培養24h，制得發酵種子液。
5) 微生物油脂發酵
以10% (體積)接種量將種子液接入50mL發酵培養基中，于25'C、 160 r/min培養8天，停 止發酵；將發酵液于8000 r/min離心10 min，收集菌體，用水洗滌后于105'C干燥至恒重，得 干菌體18.2g/L。
6) 微生物油脂提取
按每克干菌體加入10mL4mol/LHCl，于80'C處理60 min;冷卻后加入體積比為2:1的 氯仿和甲醇混合溶劑進行萃取，收集氯仿層，用旋轉蒸發儀減壓去除有機溶劑，得到微生物 油脂，菌體油脂含量為35.6%。
實施例2
1) 玉米芯半纖維素水解液制備
將玉米芯粉碎至40目，稱取40 g，按照玉米芯(固體)與3% (重量)稀鹽酸溶液(液 體)的固液比為1 g : 10mL加入稀鹽酸溶液，于140°C下水解3 h，過濾后獲得水解液。
2) 水解液的解毒處理
a. Ca(OH)2處理向水解液中加入Ca(OH)2粉末，調節其pH至10.0，保持1.5 h后， 過濾。用H2S04調節濾液pH到6.0,靜置2h，再離心15min除去沉淀。
b. 離子交換樹脂吸附將離子交換樹脂Bio-Rad AG l-X8按固液比1 g : 5mL加入水解液 中，在3(TC下攪拌處理2h后過濾除去離子交換樹脂。
3) 發酵培養基的配制
解毒后的水解液在減壓條件下，于60'C下濃縮至還原糖濃度為80 g/L，然后按照其在該 步驟最終混合物中的濃度添加如下物質蛋白胨1.2g/L;酵母粉0.75g/L; MgS04'7H20 0.6 g/L; KH2P042.5 g/L; MnS04'H20 0.004 g/L; CuS04.5H20 0.0001 g/L，用HC1調節pH至6.0， 121 'C滅菌20min，制得發酵培養基。
4) 液體種子培養
發酵性絲孢酵母(7Wc/205pora /^we tara CICC 1368 ，購于中國工業微生物菌種保藏中心) 在液體種子培養基(葡萄糖20g/L、蛋白胨10g/L、酵母粉10g/L， pH為6.0)中于28。C、 160r/min培養24h，制得發酵種子液。
5) 微生物油脂發酵以5°/。接種量(體積)將種子液接入50mL發酵培養基中，于28'C、 160 r/min培養9天，停 止發酵；將發酵液于8000 r/min離心10min,收集菌體，用水洗滌后于105 'C干燥至恒重，得 干菌體21.6g/L。
6)微生物油脂提取
按每克干菌體加入10mL4.5mol/LHCl，于90 。C水浴處理40min;冷卻后加入體積比為 2:1的氯仿和甲醇混合溶劑進行萃取，收集氯仿層，用旋轉蒸發儀減壓去除有機溶劑，得到微 生物油脂，菌體油脂含量為34.3%。
實施例3
1) 蔗渣半纖維素水解液制備
將蔗渣粉碎至IOO目，稱取40 g，按照蔗渣(固體)與4% (重量)稀硫酸(液體)的固 液比為1 g : 15 mL加入稀硫酸溶液，于140 。C下水解1.5 h，過濾后獲得水解液。
2) 水解液的解毒處理
a, Ca(OH)2處理向水解液中加入Ca(OH)2粉末，調節其pH至11.0，保持1 h后，過 濾。用H3PCU調節濾液pH到5.5，靜置1.5h，再離心20min除去沉淀。
b. 大孔樹脂吸附將大孔樹脂AmberliteXAD-4按固液比1 g:5mL加入水解液中，在40 'C下攪拌處理1 h后過濾除去大孔樹脂。
3) 發酵培養基的配制
解毒后的水解液在減壓條件下，于70 'C下濃縮至還原糖濃度為120 g/L，然后按照其在 該步驟最終混合物中的濃度添加如下物質蛋白胨2.4g/L;酵母粉0.25g/L; MgSCV7H20 0.5 g/L; KH2P041.5 g/L; MnS04-H20 0駕g/L; CuS04'5H20 0.0002 g/L，用H3P04調節pH至 6.0， 121 。C滅菌20min，制得發酵培養基。
4) 液體種子培養
發酵性絲孢酵母(7Hc/zo^xjTO"/er附e"tora CICC 1368，購于中國工業微生物菌種保藏中心) 在液體種子培養基(葡萄糖20g/L、蛋白胨10g/L、酵母粉10g/L， pH為6.0)中于28'C、 160r/min培養24h，制得發酵種子液。
5) 微生物油脂發酵
以15%接種量(體積)將種子液接入50mL發酵培養基中，于25'C、 160 r/min培養7天，停 止發酵；將發酵液于8000 r/min離心10min，收集菌體，用水洗滌后于105 'C干燥至恒重，得 干菌體25.2 g/L。
6) 微生物油脂提取按每克干菌體加入10 mL 3。5 mol/L HC1，于100 'C水浴處理30 min;冷卻后加入體積比 為2:1的氯仿和甲醇混合溶劑進行萃取，收集氯仿層，用旋轉蒸發儀減壓去除有機溶劑，得 到微生物油脂，菌體油脂含量為38.4%。
實施例4
1) 玉米秸稈半纖維素水解液制備
將玉米秸稈粉碎至60目，稱取40 g，按照玉米秸稈(固體)與2% (重量)稀磷酸(液 體)的固液比為1 g : 10 mL加入稀磷酸溶液，于110 。C下水解3 h，過濾后獲得水解液。
2) 水解液的解毒處理
a, Ca(OH)2處理向水解液中加入Ca(OH)2粉末，調節其pH至12.0，保持1 h后，過 濾。用H2S04調節濾液pH到5.5，靜置lh,再離心20min除去沉淀。
b. 活性炭吸附將活性炭(粒徑為2.5 mm，德國Merck公司生產)按固液比1 g : 5 mL 加入水解液中，在30 'C下攪拌處理2h后過濾除去活性炭。
3) 發酵培養基的配制
解毒后的水解液在減壓條件下，于65 'C下濃縮至還原糖濃度為110 g/L，然后按照其在 該步驟最終混合物中的濃度添加如下物質蛋白胨1.6g/L;酵母粉0.75g/L; MgS04，7H20, 0.4g/L; KH2PO42.0 g/L; MnSO4'H2O0.004 g/L; CuSO4'5H2O0,0002 g/L，用H2S04調節pH至 6.5， 121'C滅菌20min，制得發酵培養基。
4) 液體種子培養
發酵性絲孢酵母(7h'c/KW/7oraw/m^"toraCICC 1368，購于中國工業微生物菌種保藏中心) 在液體種子培養基(葡萄糖20g/L、蛋白胨10g/L、酵母粉10g/L， pH為6.0)中于28。C、 160 r/min培養24 h，制得發酵種子液。
5) 微生物油脂發酵
以12.5%接種量(體積)將種子液接入50mL發酵培養基中，于25 °C、 160 r/min培養7天， 停止發酵；將發酵液于8000 r/min離心10 min，收集菌體，用水洗滌后于105 'C干燥至恒重， 得干菌體19.2g/L。
6) 微生物油脂提取
按每克千菌體加入10 mL 4 mol/L HC1，于80 t:水浴處理60 min;冷卻后加入體積比為 2:1的氯仿和甲醇混合溶劑進行萃取，收集氯仿層，用旋轉蒸發儀減壓去除有機溶劑，得到微 生物油脂，菌體油脂含量為28.0%。
實施例5
91) 高粱秸稈半纖維素水解液制備
將高粱秸稈粉碎至80目，稱取40 g，按照高粱秸稈(固體)與6% (重量)稀鹽酸(液 體)的固液比為lg: lOmL加入稀鹽酸溶液，于130。C下水解2.5 h，過濾后獲得水解液。
2) 水解液的解毒處理
a. Ca(0H)2處理向水解液中加入Ca(OH)2粉末，調節其pH至10.0，保持1.5 h后， 過濾。用H2S04調節濾液pH到5.5，靜置lh，再離心10min除去沉淀。
b. 離子交換樹脂吸附將離子交換樹脂Purolite MN-150按固液比1 g : lOmL加入水解液 中，在4(TC下攪拌處理lh后過濾除去離子交換樹脂。
3) 發酵培養基的配制
解毒后的水解液在減壓條件下，于60 t:下濃縮至還原糖濃度為90，然后按照其在該步 驟最終混合物中的濃度添加如下物質蛋白胨1.8g/L;酵母粉0.5g/L; MgS04*7H20 0.4 g/L; KH2PO42.0 g/L; MnS04'H20 0.003 g/L; CuS04.5H20 0.0001 g/L，用113 04調節pH至6.5， 121 。C滅菌20min,制得發酵培養基。
4) 液體種子培養
發酵性絲孢酵母(rric/Kw;wra"/erwe"toraCICC 1368，購于中國工業微生物菌種保藏中心) 在液體種子培養基(葡萄糖20g/L、蛋白胨10g/L、酵母粉10g/L， pH為6.0)中于28'C、 160 r/min培養24 h,制得發酵種子液。
5) 微生物油脂發酵
以10%接種量(體積)將種子液接入50mL發酵培養基中，于28。C、 160 r/min培養9天，停 止發酵；將發酵液于8000 r/min離心10 min,收集菌體，用水洗滌后于105 'C干燥至恒重，得 干菌體21.8g/L。
6) 微生物油脂提取
按每克干菌體加入10 mL 4 mol/L HC1，于100 'C水浴處理30 min;冷卻后加入體積比為 2:1的氯仿和甲醇混合溶劑進行萃取，收集氯仿層，用旋轉蒸發儀減壓去除有機溶劑，得到微 生物油脂，菌體油脂含量為33.1%。
實施例6
1) 小麥秸稈半纖維素水解液制備
將小麥秸稈粉碎至100目，稱取40 g，按照小麥秸稈(固體)與4% (重量)稀硫酸(液 體)的固液比為1 g: lOmL加入稀硫酸溶液，于140 °C下水解1 h,過濾后獲得水解液。
2) 水解液的解毒處理
10a, Ca(OH)2處理向水解液中加入Ca(OH)2粉末，調節其pH至12.0，保持1 h后，過 濾。用HC1調節濾液pH至J 5.5，靜置1h，再離心15min除去沉淀。
b. 離子交換樹脂吸附將離子交換樹脂Bio-Rad AG50W-X8按固液比1 g : lOtnL加入水解 液中，在4(TC下攪拌處理lh后過濾除去離子交換樹脂。
3) 發酵培養基的配制
解毒后的水解液在減壓條件下，于60'C下濃縮至還原糖濃度為90g/L，然后按照其在該 步驟最終混合物中的濃度添加如下物質蛋白胨1.8g/L;酵母粉0.25g/L; MgSCV7H20 0.5 g/L; KH2PO42.0g/L; MnS04'H20 0.004 g/L; CuS04'5H20 0,0002 g/L，用HC1調節pH至6.5, 121 'C滅菌20min，制得發酵培養基。
4) 液體種子培養
發酵性絲孢酵母(7Wc/^/wo"/ementomCICC 1368，購于中國工業微生物菌種保藏中心) 在液體種子培養基(葡萄糖20g/L、蛋白胨10g/L、酵母粉10g/L， pH為6.0)中于28。C、 160r/min培養24h，制得發酵種子液。
5) 微生物油脂發酵
以10%接種量(體積比)將種子液接入50mL發酵培養基中，于28。C、 160r/min培養9天， 停止發酵；將發酵液于8000 r/min離心10 min，收集菌體，用水洗滌后于105 'C干燥至恒重， 得干菌體24.8 g/L。
6) 微生物油脂提取
按每克干菌體加入10 mL 4 mol/L HC1，于80 。C水浴處理60 min;冷卻后加入體積比為 2:1的氯仿和甲醇混合溶劑進行萃取，收集氯仿層，用旋轉蒸發儀減壓去除有機溶劑，得到微 生物油脂，菌體油脂含量為35.5%。
實施例7
與實施例3的不同之處在于步驟1)中原料為水稻秸稈，粉碎至40目，水解溫度和時間分 別為130'C和2h;步驟2)中所用大孔樹脂為Amberiite XAD-8，固液比為1 g :10 mL，攪 拌處理溫度和時間分別為30'C和2h;步驟5)中微生物油脂發酵時間為8天。實施結果得到千 菌體28.0g/L，菌體油脂含量為40.1%。
實施例8
與實施例2的不同之處在于步驟1)中原料為玉米秸稈，所用的稀酸為3%的稀硫酸，步驟 2)中所用離子交換樹脂為Purolite MN-150。實施結果得到干菌體21.2 g/L，菌體油脂含量為 29.6%。實施例9
與實施例2的不同之處在于步驟1)中原料為高粱秸稈，所用的稀酸為2%的稀硫酸，步驟 2)中所用離子交換樹脂為Purolite A-860S。實施結果得到干菌體20.1 g/L，菌體油脂含量為 34.4% 。
實施例IO
與實施例3的不同之處在于步驟1)中原料為水稻秸稈，粉碎至60目，所用的稀酸為2%的 稀硫酸，步驟2)中所用大孔樹脂為AmberliteXAD-8。實施結果得到干菌體25.8 g/L，菌體油 脂含量為38.5%。
權利要求
1、以農業廢棄物為原料發酵生產微生物油脂的方法，其特征在于包括如下步驟和工藝條件(1)半纖維素的水解將農業廢棄物粉碎至20-100目，按照農業廢棄物與水解酸溶液的固液比為1g∶10-20mL加入水解酸溶液，于110-140℃下水解1-3h得到半纖維素水解液；(2)解毒預處理包括Ca(OH)2處理和吸附處理；Ca(OH)2處理向水解液中加入Ca(OH)2粉末，調節其pH至10.0-12.0，保持1-1.5h后，過濾，用酸將濾液pH調節為5.5-6.0，靜置1-2h，離心10-20min除去沉淀；吸附處理選自步驟a、b和c吸附中的一種a.活性炭吸附按照活性炭與Ca(OH)2處理所得水解液固液比1g∶5-10mL加入活性炭，在30-40℃下攪拌處理1-2h后過濾除去活性炭；b.離子交換樹脂吸附按照離子交換樹脂與Ca(OH)2處理所得水解液固液比1g∶5-10mL加入離子交換樹脂，在30-40℃下攪拌處理1-2h后過濾除去離子交換樹脂；c.大孔樹脂吸附按照大孔樹脂與Ca(OH)2處理所得水解液固液比1g∶5-10mL加入大孔樹脂，在30-40℃下攪拌處理1-2h后過濾除去大孔樹脂；(3)發酵培養基制備解毒預處理后的水解液在減壓條件下，于60-70℃下濃縮至還原糖濃度為80-120g/L，然后按照其在混合物中的濃度添加如下物質1.2-2.4g/L蛋白胨、0.25-0.75g/L酵母粉、0.4-0.6g/L MgSO4·7H2O、1.5-2.5g/L KH2PO4、0.003-0.005g/LMnSO4·H2O和0.0001-0.0002g/L CuSO4·5H2O，用酸調節pH至6.0-6.5，經滅菌后作為發酵培養基；(4)按體積比5-15∶100于發酵培養基中接入發酵性絲孢酵母種子液，在25-28℃培養7-9天，離心收集菌體，經有機溶劑提取方法獲得微生物油脂。
2、 根據權利要求l所述的以農業廢棄物為原料發酵生產微生物油脂的方法，其特征在于 所述有機溶劑提取方法為按每克干菌體加入10mL濃度為3,5—4.5mol/LHCl，于80—100 'C處理30—60min;冷卻后按體積比為2 : 1加入的氯仿和甲醇混合溶劑進行萃取，收集氯仿 層，用旋轉蒸發儀減壓去除有機溶劑，得到微生物油脂。
3、 根據權利要求2所述的以農業廢棄物為原料發酵生產微生物油脂的方法，其特征在于 所述HC1的濃度為4mol/L。
4、 根據權利要求l所述的以農業廢棄物為原料發酵生產微生物油脂的方法，其特征在于 所述農業廢棄物為水稻稈、小麥稈、高粱稈、玉米秸稈、蔗渣或玉米芯。
5、 根據權利要求1所述的以農業廢棄物為原料發酵生產微生物油脂的方法，其特征在于 所述水解酸為硫酸、鹽酸或磷酸。
6、 根據權利要求l所述的以農業廢棄物為原料發酵生產微生物油脂的方法，其特征在于 所述步驟(2) Ca(OH)2處理中酸為硫酸、鹽酸或磷酸。
7、 根據權利要求1所述的以農業廢棄物為原料發酵生產微生物油脂的方法，其特征在于 所述步驟(3)發酵培養基制備中調節pH所用的酸為硫酸、鹽酸或磷酸。
全文摘要
本發明公開以農業廢棄物為原料發酵生產微生物油脂的方法。該方法將農業廢棄物用稀酸水解，水解液經解毒預處理后制備發酵培養基，濃縮至還原糖濃度為80-120g/L，然后按照其在混合物中的濃度添加1.2-2.4g/L蛋白胨、0.25-0.75g/L酵母粉等，滅菌后按體積比為5-15％接入微生物種子液，培養7-9天，離心收集菌體，按有機溶劑提取方法獲得微生物油脂。解毒預處理為Ca(OH)<sub>2</sub>處理和吸附處理。本發明原料來源廣泛、價格低廉，工藝簡單易行，可實現農業廢棄物中半纖維素資源的高值化利用，降低微生物油脂的生產成本。
文檔編號C11B1/00GK101580856SQ200910040550
公開日2009年11月18日 申請日期2009年6月25日 優先權日2009年6月25日
發明者虹 吳, 宗敏華, 超 黃 申請人:華南理工大學