含有一種細(xì)胞培養(yǎng)基的美容品或皮膚藥用組合物的制作方法

專利名稱：：含有一種細(xì)胞培養(yǎng)基的美容品或皮膚藥用組合物的制作方法含有一種細(xì)胞培養(yǎng)基的美容品^J^藥用組^tJ本發(fā)明涉及一種調(diào)理(conditioned)培養(yǎng)基和它的用途，特別是改善皮膚或粘膜動(dòng)態(tài)平衡。本發(fā)明因此涉及在美容品或皮膚科學(xué)領(lǐng)域的用途，但本發(fā)明也涉及在重建皮膚、制備方S^域和其因此可以被根據(jù)本發(fā)明的調(diào)理培養(yǎng)基或其提取物改良的IK。人，膚由兩層組成，稱為表層，上皮層，和深層，真皮層。表皮主要是由三種類型的細(xì)胞構(gòu)成的，即角質(zhì)化細(xì)胞(主要的)、黑色素細(xì)胞和郎格罕氏(Langerhans)細(xì)胞。這些細(xì)胞類型中的每一個(gè)借助它固有的功能在人體內(nèi)皮膚位置起到重要的作用，特別是保護(hù)人體對(duì)抗外來攻擊的作用。真皮為表皮提供牢固的支撐。它也是供養(yǎng)要素。它主要由成纖維細(xì)胞和細(xì)胞外基質(zhì)組成，它本身主要是由膠原、彈性蛋白和基質(zhì)構(gòu)成。其中也可以找到白細(xì)胞、肥大細(xì)胞和組織巨噬細(xì)胞。最后，血管和神經(jīng)纖維橫貫真皮層。皮膚構(gòu)成了一個(gè)屏障對(duì)抗外來攻擊，特別是化學(xué)的、機(jī)械的和感染性的攻擊，和在這方面，在這里發(fā)生的對(duì)抗環(huán)境因素(氣候、紫外線、煙草、污染、傳染等等)和/或生物體內(nèi)異物因素(例如，某藥鄉(xiāng)的軒防御反應(yīng)。因此，保持或重建它的多種功能的完整性和平衡是必要的，特別是細(xì)胞的更新和分化過程，或最佳濕度。一般性術(shù)語"皮膚動(dòng)態(tài)平衡'指的是普通皮膚的功能和生理平衡的維持。因此，需求一種維^^種皮膚動(dòng)態(tài)平衡的具有新穎性的方法，特別是維持屏障功能，a抗皮膚船x^衰老的癥狀。也需要一種改良的培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基會(huì),使制備單細(xì)胞、多細(xì)胞或單層模型或以重建組織形式的，莫型成為可能，且特別是從皮膚細(xì)胞以制備角化細(xì)胞培養(yǎng)物、成纖維細(xì)胞、角化細(xì)胞/黑素細(xì)胞共同培^tJ^S建皮膚。這些目的和其他的一些目的都通過"細(xì)胞'培養(yǎng)基或其提取物(也稱作調(diào)理4培養(yǎng)基)的用途實(shí)現(xiàn)。專利申請(qǐng)WO02/098365(高級(jí)組織科學(xué))給出了調(diào)理培養(yǎng)基用于美容品或藥物應(yīng)用的用途。調(diào)理培養(yǎng)基題過培養(yǎng)人皮膚細(xì)胞獲得的，特別是成纖維細(xì)胞或角質(zhì)化細(xì)胞。這些細(xì)胞被遺傳性的修飾以增加它們生長因子或培養(yǎng)基中抗氧化劑的產(chǎn)量，其通常包含可^ti膠原。US2005/0249691描述了美容品或j^TO組合物，包括與;搬基質(zhì)結(jié)合，用于皮膚或角質(zhì)層細(xì)胞的培養(yǎng)基；組合物必須包含膠原、殼聚糖和氨基多糖。US2006/0182701還描述了美容品^j^ffl組合物，包括用于皮Mg胞的培養(yǎng)基。其目的的是為組合物的施用的皮膚細(xì)胞提供一個(gè)培養(yǎng)基所述培養(yǎng)割每允許皿細(xì)胞按體外被獲得的類似方式生長。出人意料的，本發(fā)明發(fā)現(xiàn)，以完全不同于皮膚細(xì)胞的細(xì)胞調(diào)理的培養(yǎng)基可以被用于，皮膚的或它的附屬物保持完好狀態(tài)，因此，本發(fā)明的目的是一種含有調(diào)理細(xì)胞培養(yǎng)基或其提取物的美容品或皮膚藥用組合物，所述的培養(yǎng)基能夠通過與至少一種消化道細(xì)胞培養(yǎng)物和至少益生菌微生物撤蟲獲得。有益的，細(xì)胞培養(yǎng)基，根據(jù)本發(fā)明還可以稱為調(diào)理培養(yǎng)基，可以通31接觸外周血細(xì)胞，或源于夕卜周血細(xì)胞的細(xì)胞來獲得。這些細(xì)胞特別是白細(xì)胞，但也可以選自永生細(xì)胞株，來源于血細(xì)胞系，例如來自單核細(xì)胞；這些細(xì)胞非限定性的實(shí)施例是由LGCPromochem按照下列名稱出售的那些SCCATCC:CRL國9855)AML493(ATCC:CRL"9589)THP誦1(ATCC:TIB-202).這些外周血細(xì)胞或它的派生物，例如白細(xì)胞可以，例如，在消化道細(xì)胞的培養(yǎng)基的培養(yǎng)物中。雌的，這些白細(xì)lte要包含淋巴細(xì)胞，但還可以包含其^^卜周血細(xì)胞例如單核細(xì)胞，其被與培養(yǎng)觸。根據(jù)本發(fā)明一個(gè)有益的實(shí)施例，消化道細(xì)胞培養(yǎng)物是三維培養(yǎng)物。被用于實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的消化纖胞可以來源于消化道的不同部分，例如體、胃或腸。有益的，使用來源于腸道上皮的細(xì)胞；這種腸道上皮細(xì)胞是本領(lǐng)域技術(shù)員已知的。作為非限定性的實(shí)施例，腸來源的A^ffl胞制備的稱為CaC02、HT29或T84。相應(yīng)的株被保藏在ATCC的培養(yǎng)物保藏中心，編號(hào)如下Caco2:ATCCNo.HTB-37HT29:ATCCNo.HTB-38T84:ATCCNo.CCL248對(duì)于本發(fā)明的目的的，術(shù)語"益生菌微生物"是用來意指一個(gè)活的微生物，其被使用足夠數(shù)量時(shí)，對(duì)它的宿主的健康具有積極的效果，"jointFAO/WHOExpertConsultationonEvaluationofHealthandNutritionalPropertiesofProbioticinFoodIncludingPowderMlkwithLiveLacticAcidBacteriaFAO/WHO專家鑒定食物中益生菌對(duì)健康的價(jià)值和營養(yǎng)性質(zhì)，包括具有活乳酸菌的嫩)，2001年10月6日"，并且其可以特別改善腸道的物平衡。益生駒以用活細(xì)胞混懸液的形式引Alffl胞培養(yǎng)基其濃度可以由本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)混合物其他成分的量來調(diào)整。作為啟示，可以使用包括大約104到109cfb/ml的接種物(cfU^集落形成單位",即"能形成一賴落的單位")，tt^M少105cfo/ml。益生菌接種物可以通常濃度為大約106到107cfU。適合本發(fā)明的微生物可以特別選自子囊菌(ascomycetes)例如酵母(Saccharomyces)、耶羅威亞酵母(Yarrowia)、克盧費(fèi)氏酵母屬(Kluyveromyces)、有孢圓酵母屬(Torulaspom)、粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomycespombe)、德巴利酵母屬(Debaromyces)、假絲酵母(Candida)、畢赤氏酵母(Pichia)、曲霉(Aspergillus)和青霉菌(Penicillium)，和如下屬的細(xì)菌雙歧桿菌屬(B迅dobacterium)、畸形菌體(Bacteroides)、梭菌屬(Fusobacterium)、蜜^^t菌屬(Melissococcus)、丙酸桿菌屬(Propionibacterium)、腸球菌(Enterococcus)、孚L酸球菌屬(Lactococcus)、葡萄球菌(Staphylococcus)、消化鏈球菌屬(Peptostrepococcus)、桿菌(Bacillus)、小球菌屬(Pediococcus)、微球菌(Mcrococcus)、明串珠菌屬(Leuconostoc)、魏斯氏菌屬(Weissella)、氣球菌屬(Aerococcus)、乳球菌屬(Oenococcus)或乳桿菌屬(Lactobacillus),和其混合物。作為最適合于本發(fā)明的子囊菌(ascomycetes),特別的提及耶羅烕亞酵母(Yairowialipolitica)禾口乳酸克魯維斯酵母(Kluyveromyceslactis)，以及有包圓酵母屬(Torulaspora)、粟酒裂歹直酵母(Schizosaccharomycespombe)、假絲酵母(Candida)和畢赤氏酵母(Pichia)，或者可替換的酵母，例如釀酒酵母(Saccharomycescerevisiae)或酵母菌(boulardii)。關(guān)于益生菌微生物，通常^ffl下列細(xì)菌和酵母屬—乳酸菌(lacticacidbacteria):其Sil發(fā),產(chǎn)生乳酸。它們按照形態(tài)學(xué)被分為兩個(gè)群乳桿菌類(Lactobacillusspecies):嗜酸孚L桿菌(Lactobacillusacidophilus(LCl,NCFB1748));乳酸桿菌(amylovorus)、干酪乳桿菌(casei(Shirota))、鼠李糖乳桿菌(rhamnosus(strainGG))、短乳桿菌(brevis)、巻曲乳桿菌(crispatus)、德氏乳桿菌(delbrueckii(保加利亞亞種subspbulgaricus,lactis))、發(fā)酵乳桿菌(fermentum)、瑞士乳桿菌(helveticus)、雞乳桿菌(gallinarum)、格氏乳酸桿菌(gasserijohnsonii)、副干酪乳桿菌(paracasei)、植物孚L桿菌(plantarum)、羅伊氏乳桿菌(reuteri)、鼠李糖乳桿菌(rhamnosus)、唾液乳桿菌(salivarius))、消化乳桿菌(alimentarius)、彎曲乳桿菌(curvatus)、干酪乳桿菌干酪亞種(caseisubsp.Casei)、清酒乳桿菌(sake);Gocci:腸球菌(Enterococcus)(糞腸球菌faecalis、尿腸球菌faecium)、孚L酸乳球菌(Lactococcuslactis(subspplactis或cremoris))、腸膜明串珠菌葡聚糖亞禾中(Leuconstocmesenteroidessubspdextranicum)、孚L酸片^^菌(Pediococcusacidilactici)、嗜酸芽孢孚L酸菌(Sporolactobacillusinulinus)、Streptococcussalvariussubsp.Thermophilus、嗜熱鏈球菌(StreptococcusthermopMus)、肉葡萄球菌(S鄉(xiāng)hylococcuscamosus)、木糖葡萄球菌(Staphylococcus野l(fā)osus);—雙歧桿菌艦歧桿菌屬類青春雙歧桿菌(adolescentis)、動(dòng)物雙岐桿菌(animalis)、兩歧雙歧桿菌(b迅dum)、短雙岐桿菌(breve)、乳雙歧桿菌(lactis)、長雙歧桿菌(longum)、嬰兒雙歧桿菌(infantis)、假小鏈雙歧桿菌(pseudocatenulatum);一其他生成孢子的細(xì)菌桿菌(Bacillus)(Toyo菌cereusvartoyo或枯草芽孢桿菌subtilis)、凝結(jié)芽胞桿菌(Bacilluscoagulans)、地衣芽孢桿菌(Bacilluslicheniformis)、Escherichiacolistrainnissle、費(fèi)氏丙酸桿菌(Propionibacteriumfreudenreichii)。特定的益生菌微生物實(shí)施例是##雙歧桿菌(B迅dobacteriumadolescentis)、動(dòng)物雙岐桿菌(Bifidobacteriumanimalis)、兩歧雙歧桿菌(B迅dobacteriumb迅dum)、短雙岐桿菌(Bifidobacteriumbreve)、乳雙歧桿菌(Bifidobacteriumlactis)、長雙歧桿菌(Bifidobacteriumlongum)、嬰J改歧桿菌(B迅dobacteriuminfantis)、f叚小鏈雙歧桿菌(Bifidobacteriumpseudocatenulatum)、嗜酸乳桿菌(Lactobacillusacidophilus(LCI,NCFB簡))；銜定粉孚L桿菌(Lactobacillusamylovorus)、干酪乳桿菌(Lactobacilluscasei(Shirota))、鼠李糖乳桿菌(Lactobacillusrhamnosus(GG菌株))、短孚L桿菌(Lactobacillusbrevis)、巻曲孚L桿菌(Lactobacilluscrispatus)、德氏孚L桿菌(Lactobacillusdelbrueckii《呆力口禾U亞亞禾中subspbulgaricus,lactis))、發(fā)^L桿菌(Lactobacillusfermentum)、瑞士乳桿菌(Xactobacillushelveticus)、雞孚L酸桿菌(Lactobacillusgallinarum)、格氏孚L酸桿菌(Lactobacillusgasseri),Lactobacillusjohnsonii、畐(J干酷乳桿菌(Lactobacillusparacasei)、植物孚L桿菌(Lactobacillusplantarum)、羅伊氏孚L桿菌(Lactobacillusreuteri)、鼠李糖孚L桿菌(Lactobacillusrhamnosus)、唾液孚L桿菌(Lactobacillussalivarius)、消化孚L桿菌(Lactobacillusalimentarius)、彎曲孚L桿菌(Lactobacilluscurvatus)、干酪乳桿菌干酪亞禾中(Lactobacilluscaseisubsp.casei)、清酒孚L桿菌(Lactobacillussake)、乳酸乳球菌(Lactococcuslactis)、腸球菌(Enterococcus(類腸球菌faecaHs、尿腸球菌faecium))、孚L酸孚L球菌(Lactococcuslactis(subspplactis或cremoris))、腸膜明串珠菌葡聚糖亞禾中(Leuconstocmesenteroidessubspdextranicum)、乳酸片球菌(Pediococcusacidilactici)、嗜^^S孚L酸菌(Sporolactobacillusinulinus)、Streptococcussalvariussubsp.Thermophilus、嗜熱鏈球菌(Streptococcusthermophilus)、肉葡萄球菌(Staphylococcuscamosus)、木糖葡萄球菌(Staphylococcusxylosus)、酵母(Saccharomyces(cerevisiae或其他的boulardii))、桿菌Bacillus(Toyoi菌cereuswtoyo或枯草芽孢桿菌subtilis)、凝結(jié)芽胞桿菌(Bacilluscoagulans)、地衣，桿菌(Bacilluslicheniformis)、Escherichiacolistrainnissle禾卩費(fèi)氏丙酸桿菌(Propionibacteriumfreudenreichii),和它們的混合物。有益的，至少一個(gè)益生菌物是選自乳酸菌(lacticacidbacteria)、雙歧桿菌(b迅dobacteria)禾口酵母菌(Saccharomycesyeasts)的。更特別的，它們是來源于乳酸菌群的益生菌微生物，例如尤其是乳桿菌屬和/或雙歧桿菌屬，特別乳桿菌屬。作為這些乳酸菌的例證，更特別的可提及Lactobacillusjohnsonii、羅伊氏乳桿菌(Lactobacillusreuteri)、鼠李糖乳桿菌(Lactobacillusrhamnosus)、畐1』干酷乳桿菌(Lactobacillusparacasei)、Lactobacilluscasei或兩歧雙歧桿菌(B迅dobacteriumb迅dum)、短雙岐桿菌(B迅dobacteriumbreve)、^X歧桿菌(Bifidobacteriumlongum)、動(dòng)物雙il^桿菌(B迅dobacteriumanimalis)、孚改歧桿菌(B迅dobacteriumlactis)、嬰J風(fēng)歧桿菌(Bifidobacteriuminfantis)、青春雙歧桿菌(B迅dobacteriumadolescentis)或假小鏈雙歧桿菌(B迅dobacteriumpseudocatenulatum)，和它們的混合物。最適合的種類是Lactobacillusjohnsonii、副干酪乳桿菌(Lactobacillusparacasei)、青春雙歧桿菌(B迅dobacteriumadoleseentis)、長雙歧桿菌(B迅dobacteriumlongum)和乳雙歧桿菌(B迅dobacteriumlactisNCC2818)(也標(biāo)識(shí)為Bbl2ATCC27536);還可以特別JK下列菌株，按照布達(dá)M^條約保藏在culturecollectionoftheInstitutPasteur(28rueduDocteurRoux^F-75024Pariscedex15)的30/06/92、12/01/99、15/04/99、15/04/99和07/06/05:Lactobacillusjohnsonii(CNCMI-1225)、Lactobacillusparacasei(CNCMI-2116)、B迅dobacteriumadolescentis(CNCMI-2168)禾口Bifidobacteriumlongum(CNCMI-2170)和Bifidobacteriumlactis(CNCMI畫3446)、和屬B迅dobacterium1ongum(BB536)。B迅dobacteriumlactisCNCMI-3446株可以獲自Hansen(Chr.HansenA/S,10-12BoegeAlle，P.O.Box407，DK-2970Hoersholr^Denmark)。用于與細(xì)胞接觸的細(xì)胞培養(yǎng)基是適合所使用的不同類型的細(xì)胞存活和/或培養(yǎng)的任何營養(yǎng)培養(yǎng)基。其通常包含碳和氮源、礦物質(zhì)、維生素和/，量元素，例如氨基酸、糖、蛋白質(zhì)和脂肪酸。細(xì)胞可以在它們的來源組織之外培養(yǎng)。為此，它們將在接近于它們?cè)诮M織中的自然劍牛的環(huán)境下培養(yǎng)。這些培養(yǎng)在它們的培養(yǎng)基中需要^本的因子。該環(huán)境應(yīng)該具有確定的由礦物質(zhì)和生物材料組成的組合物，被稱為培養(yǎng)基。所述培養(yǎng)基通常由專業(yè)的供應(yīng)商提供，并且根據(jù)細(xì)胞類型具有特定的特征。培養(yǎng)基通常還包含適當(dāng)數(shù)量的水、碳和氮源、磷酸鹽和硫酸鹽、礦物質(zhì)、生長因子和維生素。在這種類型的培養(yǎng)凝中培養(yǎng)的細(xì)M常需要添加血清。所ML清具有復(fù)雜的組分，并至少為細(xì)胞提供激素、粘附因子和氨基酸。該血清可以，例如，全部或部分被本發(fā)明的調(diào)理培養(yǎng)基的添加所替代。事實(shí)上，調(diào)理培養(yǎng)基也可以另夕卜敗添加到培養(yǎng)基中，如同增濃。本領(lǐng)域技術(shù)人員能容易的確定合適的培養(yǎng)基。非限定性的，可提及的有RPM1640培養(yǎng)基、Dulbecco'sModifiedEagle's培養(yǎng)基pMEM),、最小基本培養(yǎng)S(MEM)、M199、RPM1640或Iscove'sModifiedDulbecco's培養(yǎng)基(EDMEM)、Ham'sF-12、Ham'sF-10、NCTC109和NCTC135。這些培養(yǎng)基可以以通常l細(xì)于細(xì)胞培養(yǎng)的任何添加劑補(bǔ)充，例如，非限定性的，磷脂前體、非必需氨基酸、核酸、維生素、抗生素、酶輔助因子、無機(jī)鹽、胰島素、轉(zhuǎn)鐵蛋白、三碘甲腺原氨酸、乙醇胺、O-磷酸乙醇胺或生長因子例如神經(jīng)生長因子或神經(jīng)營養(yǎng)因子-3。通常被用來補(bǔ)充細(xì)胞培養(yǎng)基的各種添加齊啲濃度可以被本領(lǐng)域技術(shù)人員特別地根據(jù)被培養(yǎng)的細(xì)胞的類型確定和調(diào)整。其他的培養(yǎng)基描述于Ham和McKeehan，"MethodsinEnzymology",58:44-93,1979中，或于Bottenstein等,'^MethodsinEnzymology，，,58:94誦109，1979,其內(nèi)容tt引入作為參考。此外，還可以使用不同培養(yǎng)基的混合物，特別是上述培養(yǎng)基的，例如DMEM/HAMF12的混合物。這些培養(yǎng)基可以由特定生長因子補(bǔ)充，或例如血清，不過后一組分也可以不補(bǔ)充。根據(jù)一個(gè)實(shí)施例，沒有膠原被^l加到培養(yǎng)基中。所述培養(yǎng)基可以是液體、半液體、凝膠或固體，ttiS少部分是液體。措詞"調(diào)理培養(yǎng)基的提取物"是用來特別意指fflMit滲析、射豁去、相分離、凝膠過濾層析、親和色譜法、沉淀、濃縮、凍干法等方法得到的所述調(diào)理培養(yǎng)基的部份或亞化合物。調(diào)理培養(yǎng)基可以從缺少血清和動(dòng)物產(chǎn)品的培養(yǎng)基中產(chǎn)生。該調(diào)理培養(yǎng)皿選在存在人白細(xì)胞盼瞎況下(并且特別是乳桿菌屬或雙歧桿菌屬類的益生菌存在下)由消化道細(xì)胞的刺激之后得到，具有益生菌。有益的，被用于本發(fā)明組合物的培養(yǎng)基(或它的提取物)是穩(wěn)定了的培養(yǎng)基，即，它已經(jīng)經(jīng)受了用于保存其在選擇的給定瞬間的>1^態(tài)的操作，通常是在制備過程的最后，同時(shí)已經(jīng)保存了它的固有性狀。特別的，該操作是用來^^f述培養(yǎng)基變得無菌的，即，能夠抑制微生物生長，同時(shí)保存了其具有的生物學(xué)性質(zhì)。培養(yǎng)基的穩(wěn)定可以通過本領(lǐng)域技術(shù)人員己知的任何方法獲得，例如，滅菌過濾、高壓蒸汽滅菌、超高溫(UHT方法)、高壓滅菌、，輻射或冷凍。根據(jù)本發(fā)明的條件培養(yǎng)基通常包含IL-IO，其不存在于起始培養(yǎng)基的任何組分中。IM0的量可以根據(jù)斜牛培養(yǎng)基的制備瞎況改變，但通常相應(yīng)的在與不同細(xì)胞型接觸之后回收的培養(yǎng)基中的濃度大于或等于20pg/ml。預(yù)料不到的是該調(diào)理培養(yǎng),有對(duì)皮膚和/或體表(integument)有益的性質(zhì)。為此原因，本發(fā)明的目的也在于M與如上所述的至少一種消化道細(xì)胞培養(yǎng)物和至少益生菌微生物接觸獲得的至少一種調(diào)理細(xì)胞培養(yǎng)基，或一種所述細(xì)胞培養(yǎng)基的提取物作為一種改善皮膚和/或體表動(dòng)態(tài)平衡的制劑的美容品用途。有益的是調(diào)理培養(yǎng)基可以通皿一步與外周血細(xì)胞或它的^j以細(xì)胞特別是白細(xì)胞接觸獲得。在本文的描述中，除非另作說明，術(shù)語"皮膚"是用來意指覆蓋人體的全部夕卜層部分，艮P，艦、粘膜和頭皮。術(shù)語"體表"指的是指甲、頭發(fā)和體毛，例如睫毛。特別地，本發(fā)明涉及一種培養(yǎng)基或它的提取物用作改善皮M頭皮的屏障功能的制劑的用途。根據(jù)本發(fā)明的另一方面，培養(yǎng)基或它的提取物是用作改善,或頭皮濕度的制劑。該培養(yǎng)基可以因此被特別用于對(duì)抗皮膚千燥癥狀，特別是千燥和敏感皮膚。通常，敏感艦15i皮膚的牛魏反應(yīng)界定。這種艦RiS通常ffl51不適癥狀表現(xiàn)反映出來的，這些不適癥狀就于接觸到具有不同根源的觸發(fā)因素的個(gè)體的反應(yīng)。這可以是在敏感皮膚表面應(yīng)用美容品、食物攝取、或暴te溫度急劇變化中、暴驗(yàn)大氣污染中和/或暴驗(yàn)紫外線或紅外線。相關(guān)因素諸如年齡和皮膚類型也存在。因此，皮膚更通常是指基于美容品標(biāo)準(zhǔn)的皮膚分類的干性或油性皮膚。具有敏感皮膚的個(gè)體因此屬于具有易刺激或過敏的皮膚，或具有耐受力低的i^。這些不適癥狀的表現(xiàn)，記載在下述接觸到具有不同根源的觸發(fā)因素的個(gè)體的記錄中的，是敏感,的必要癥狀之一。它主要包括了觸物感痛性觸覺。術(shù)譜'觸物感痛性觸覺"是指在一片皮肚的感覺，如剌痛、癢、灼熱感、緊繃感等。這些主觀感受的癥狀大多通常缺少可見的化學(xué)性癥狀表現(xiàn)如發(fā)紅或脫皮，并且無論如何也不會(huì)出現(xiàn)7jC腫。當(dāng)今公知的是這些皮膚易剌激反應(yīng)和耐受力低的反應(yīng)都特別是與上皮和真皮的神經(jīng)莉肖釋放的神經(jīng)肽相關(guān)。在這些皮膚敏感的急性表現(xiàn)中，神經(jīng)反應(yīng)可能被觸發(fā)。它的長期結(jié)果可以導(dǎo)致炎癥反應(yīng)和痛覺過敏鵬辦賣，并因此導(dǎo)致該過程轉(zhuǎn)成慢性化。不象記載的過敝鵬附，敏感艦的反應(yīng)表現(xiàn)并不是免疫反應(yīng)過程的結(jié)果，即，過敏反應(yīng)的應(yīng)答不僅發(fā)生在已經(jīng)發(fā)生敏化的皮膚上。它的應(yīng)答機(jī)制是術(shù)語"非特異使'。在這個(gè)方面，它是與皮膚病、濕疹和/或魚鱗癬癥的明顯炎癥和過敏反應(yīng)區(qū)別開的。在本發(fā)明盼瞎況下，調(diào)理培養(yǎng)基具有阻斷和/或治療所述的敏感皮膚的作用，特別是當(dāng)這種敏感皮膚與干性皮膚相關(guān)時(shí)。千性皮膚必然有緊繃和/或拉緊的感覺表現(xiàn)。它通常與皮膚濕度的下降和屏障功能的損傷相關(guān)，其M微小的水分流失測量。象上面特別指出的，敏感皮鵬不同于過敏艦的。它的反應(yīng)表現(xiàn)不是免疫反應(yīng)過程的結(jié)果，通常僅僅是觸物感痛性觸覺的反應(yīng)，可能伴有發(fā)紅，但是沒有腫脹和水腫。"敏感皮耽可以特別4頓工具評(píng)價(jià)皮膚的敏感反應(yīng)來確定。第一個(gè)工具是基于他們的正確設(shè)計(jì)，基于干燥皮膚的必要特征性癥狀，即這些不適癥狀的存在是由典型的施用夕卜物所導(dǎo)致。因此，乳酸'刺激試驗(yàn)"是第一個(gè)建議測試的項(xiàng)目。i&驗(yàn)M31記錄志愿者在鼻翼施用10^孚IMB的刺激反應(yīng)來完成。個(gè)體中表現(xiàn)出中等或強(qiáng)刺激反應(yīng)者稱之"刺激者"，并被認(rèn)為具有敏感皮膚。由于這種局部4頓某種產(chǎn)品的皮膚的敏感性，這些個(gè)體被選用于測試'敏感皮膚"產(chǎn)品。更近以來，為了特定地刺撒涉及不適癥狀和所謂的傷害感受器的外周神經(jīng)末梢，最近的定義涉及敏感皮膚，最新的試驗(yàn)已經(jīng)被建議為精確使用其他造成不適的剌激劑，如辣椒素，特別是在申請(qǐng)EP1374913中的。為了本發(fā)明的目的，術(shù)語"敏感皮膚"覆蓋了易刺激和耐受力低的皮膚。耐受力低的皮膚是那種對(duì)不同因素如美容品戯膚藥用產(chǎn)品或肥皂反應(yīng)的皮膚，反iSM:灼熱感、緊繃感、刺痛感和/戯紅表現(xiàn)。易刺激皮膚是那種艦瘙癢^Mf臓表現(xiàn)的對(duì)不同因素如環(huán)境、感瞎、飲食、風(fēng)、摩擦、刮胡須、高藥成分的硬化7K，纟鵬變化、濕度或羊毛制品反應(yīng)的皿。這兩種類型的艦通常與皮膚的千燥相關(guān)聯(lián)，與干屑相關(guān)戯關(guān)，或與表現(xiàn)出紅斑的皮膚相關(guān)。然而，耐受力低的皮膚也可以是與痤疫皮膚相關(guān)，或者甚至是與表現(xiàn)紅斑鵬的皮膚相關(guān)，與干屑相關(guān)頓關(guān)。如上所述，皮膚的干燥通常與皮膚濕度的下降相關(guān)，通過角質(zhì)儀(comeometty)評(píng)價(jià)，還與屏障功能的損傷相關(guān)，通過微小的7K分流失測量。千性皮膚必然有緊繃和/或拉緊的感覺表現(xiàn)。所述皮膚也應(yīng)該有觸覺和表現(xiàn)出SM有皮屑。當(dāng)皮膚輕微干燥時(shí)，這些皮屑數(shù)量豐富，但是肉眼不可見。這種皮膚千燥的原因可以是體質(zhì)原因或后天形成的原因。在這種后天形成的干性皮膚中，涉及的外部因素是具有決定性的，如暴露在化學(xué)試劑中，暴露在惡劣的氣候^f牛中，或者暴曬下，或者可替換的一定治療劑的治療(如類維生素A)。在這些外部影響下，艦隨后可以變得暫時(shí)和局部千燥。這可以涉及任何的皮膚。這種非病理性的干性皮膚體質(zhì)的情況中，干'^R態(tài)的嚴(yán)重性取決于已經(jīng)提到的外部因素。老年的皮膚(隨著年齡增長皮膚的新陳代謝出現(xiàn)通常的衰退為特征)、脆弱的艦(對(duì)外部因素非常敏感，并通常以紅斑和紅斑鵬為表現(xiàn))和普通干燥病(很可能^il傳原因并主要表現(xiàn)在面部、手側(cè)部和手背部)都屬于這種皮l^類型范疇?？梢岳斫獾氖歉尚云つw狀態(tài)是一種生理狀態(tài)，它獨(dú)立于任意的生理表現(xiàn)，符合正常皮膚標(biāo)準(zhǔn)，這種生理狀態(tài)的舒適度與表現(xiàn)需要通過美容品手段得到改善。本發(fā)明的組合物、方法和用途因此被證明對(duì)于阻止和/或治療敏感的和/或干性皮膚是最為特別有效的，和更特別M那些涉及的反應(yīng)性、易刺激性和/或耐受'瞎、后天形成的干性i^^和/或先天性干性皮膚。本發(fā)明的目的也是調(diào)理培養(yǎng)基的用途或它的提取物的用途，為對(duì)抗衰老癥狀，不管是實(shí)際年齡上的衰老還是由光誘導(dǎo)的衰老。隨著時(shí)間的流逝，固有衰老^J非常典型的不同癥狀表現(xiàn)在艦上，特別是反映在皮膚結(jié)構(gòu)和功能上的改變。其他的成因都是外部的(Yaar和Gilchrest，JInvestDermatol,1998)。事實(shí)上，衰老可以由于環(huán)境因而加速，例如皮膚反復(fù)暴驗(yàn)日曬中，和特別是在紫外線A和B輻射，^&復(fù)暴露在污染中，特別是^^油顆粒中，和皮皿復(fù)暴atf^煙環(huán)境中。大氣污染對(duì)皮膚結(jié)構(gòu)(纖維、細(xì)胞、酶)的毒害作用，特別是油氣污染如二氧化硫、臭氧和氧化氮，特別涉及它們的對(duì)自由基的初始活性，它們是導(dǎo)致生物細(xì)胞損傷的氧化環(huán)境的根源。這種損傷導(dǎo)致J^衰老的加速。皮膚衰老的表現(xiàn)特別在于起鈹紋和直紋、皮膚私S喊張力下降。本發(fā)明的其中一個(gè)目的是調(diào)理培養(yǎng)基或其提取物用于，在組，的制備中的用途，調(diào)理培養(yǎng)基、其提取物和/或組合物用于改善皮膚動(dòng)態(tài)平衡和/或皮膚的屏障功能和/或皮膚、頭皮和/^^^表的纟顯度。本發(fā)明的目的也是改善皮膚動(dòng)態(tài)平衡和/或屏障功能和/或皮膚濕度或頭皮濕度的美容方法，特征是至少一種細(xì)胞培養(yǎng)基或至少一種培養(yǎng)觀取物或含有相同組分的組合物施用到皮膚或頭皮上，所述培養(yǎng)基如上文記載的那樣，能夠ffl31與至少一種消化道細(xì)胞培養(yǎng)物和至少益生菌微生物接觸獲得。根據(jù)另一方面，發(fā)明涉及了至少一種細(xì)胞培養(yǎng)基或至少一種培養(yǎng)S^^物用于帝'J備治療禾口/或阻斷肌膚緊張癥狀表現(xiàn)的組合物的用途，所述培養(yǎng)基能夠M與至少一種消化iM胞培養(yǎng)物和至少益生菌微生物接觸獲得，如上文限定的那樣。這樣的組合物可以是一種美容品或制藥用途的組合物，特別是一種皮科藥用制劑組合物。組合物中的本發(fā)明的調(diào)理培養(yǎng)基或其提取物的用量可以被本領(lǐng)域技術(shù)人員調(diào)整以便獲得預(yù)期的效果。有效量可以因itkM常規(guī)技術(shù)手段確定，包括體外i^^和體內(nèi)測試，特別是取決于4細(xì)的提取物的鄉(xiāng)和選定的配方的鄉(xiāng)。通過指定，調(diào)理培養(yǎng)基活性物質(zhì)的濃度相對(duì)于組合物的總重量可以在0.001%至50重量％之間，特別是少于或等于10%，這些量可以在沒有任何不利因素的下變化。根據(jù)本發(fā)明的組合物還包含生理可接受的培養(yǎng)基，特別是一個(gè)美容品或藥學(xué)可接受的培養(yǎng)基。對(duì)于本發(fā)明的目的，術(shù)語"美容品組合物^品"是用來特別意指任何用于與人體的各種表面部分(表皮、頭發(fā)和體毛系統(tǒng)、指甲、口唇和外生殖器)、或牙齒或口腔粘膜接觸的物質(zhì)或制劑，用于專門的或主要的，來清潔它們、來芳香它們、改變它們的外觀和/^^喬正體暢口/劍尉戶他們或使它們維持在好的狀態(tài)(CosmeticGuideline(美容品指萄76/768/EEC修正版)。這些組合物通常具有一種會(huì)調(diào)在人體mh^A愉快的氣嚇卩外觀。雌的，本發(fā)明的組合物是被應(yīng)用到皮鵬粘膜上的。根據(jù)考慮到的使用的方法，其可以是ftf可通常使用的植物制劑的形式。為了局部施用到皮膚或粘膜，特別地，組合物的形式可以是洗、M血清類型的水或油溶液或分散體、通過^7jC相中分散油類(O/W)或反之亦然(W/O)獲得的乳液類型的液體或半液綱度的乳劑、或具有水或無水乳膏或凝膠類型的具有柔軟狀態(tài)的性質(zhì)的混懸液或孚L劑、或微囊或微粒、或離子的和/或非離子類型的泡狀的分散體、或泡沫。它們的形式也可以是用于控制釋放的微球或納^旨穀包或高肝微泡或高好修補(bǔ)劑和水繊。根據(jù)一個(gè)有益的實(shí)案，所述組合物是皮容品組合物，包含根據(jù)本發(fā)明的至少一種調(diào)理培養(yǎng)基或一種提取物在美容品或藥物可接受的載體中，比例按重量計(jì)為相對(duì)于組合物的總重量的至少0.001%，并雌從0.05%到3%。這些組合物按照常用的方法制備。根據(jù)本發(fā)明的組合物中各種組分的用量是按照本領(lǐng)域的常用量考慮使用的。其組分和用量ttit不會(huì)影響調(diào)理培養(yǎng)基或它的提取物的活性，即降低所述活性。在美容品領(lǐng)域，特別地，這些組合物組成用于臉、用于手、用于腳、用于大的組織鈹褶或用于身體的清潔、保護(hù)、治療或護(hù)理乳膏(例如，日霜、麟、卸妝霜、粉底霜、防曬霜)，粉底液、卸妝乳、護(hù)膚乳或護(hù)理液、防曬乳、護(hù)理洗液、凝膠或泡沫，例如清潔洗液、AX曬Sfe液、沐浴組合物、包含殺菌劑的除臭組合物、或須后凝膠微液。根據(jù)本發(fā)明的組合物也可以制備成固體形式，制劍巴皂逾吉膚皂。組^還可以包裝成氣霧劑組，的形式，也包括擠壓輸送的f!3S劑。根據(jù)本發(fā)明的組合物還可以是頭皮護(hù)理組合物，特別是洗發(fā)劑、頭發(fā)定型7k、治療性洗液、定M或定型膏、生發(fā)洗液、防脫發(fā)洗液或凝膠、抗寄生蟲洗發(fā)劑、去頭屑洗發(fā)劑等等。組合物還可以用于口牙用途，例如牙膏。在這種情況下，組合物可以包含通常用于口腔用組，的常規(guī)輔料和添加劑，特別地，和表面活性劑、增稠抓濕潤劑、磨光劑例如二氧化硅、各種活性成分例如氟化物、特別是氟化鈉、和15可選擇的甜味劑例如糖糊。當(dāng)組合物是乳劑時(shí)，油相的比例按重Si十相對(duì)于組合物的總重量可以從大約5%到80重*%變化，和t^按M計(jì)從大約5%到50%。用于乳劑形式的組合物的油、蠟、乳化齊訴口輔助乳化劑魏自美容品領(lǐng)域常規(guī)f頓的種類。在組合物中，乳化齊訴口輔助孚L化劑按重量計(jì)相對(duì)于組合物總重量以從0.3%到30%的比例存在，和按重^從0.5%到20%。乳劑還可以包含脂囊泡。當(dāng)組合物是油性溶鵬時(shí)，油相可以以^m合物總重量90%的比例存在。以己知的方式，美容品組合物還可以包含美容品領(lǐng)域常用的輔料，例如親水的或親脂性的膠凝劑、親水的或親脂性的添加劑、防腐抓抗氧化劑、竊IJ、芳香劑、填料、遮蔽劑、氣味吸收劑和染料。這些各種輔料的用量是美容品領(lǐng)域的常用量，和，例如，范圍是從組合物總重量的大約0.01%到10%。，于它們的自然特性，這些輔料可以被被引入油相、引A7jC相和減引入脂質(zhì)小球中。作為可以被用于本發(fā)明的油或蠟，可皿到礦物油(液體石蠟)、植物油(牛油樹月旨的液體部份、向日葵油)、動(dòng)物油(^M化角暨瞎)、合成油(普賽林)、硅油或蠟(環(huán)甲硅油)和氟代油(全氟聚醚)、蜂蠟、巴西棕vt司蠟或石蠟。月旨肪醇和脂肪酸(硬脂酸)也可以被添加到這些油中。作為可以用于本發(fā)明的乳化劑，駄到的孚L化劑可以是，例如，硬脂酸甘油酯、聚山梨酸酯60和由Gattefosse公司以Tefose63出售的PEG-6/PEG-32/硬脂酸乙二醇酯的混合物。作為可用于本發(fā)明的鋭IJ，艦到低級(jí)醇，特別是乙醇和異丙醇、和丙二醇。作為可用于本發(fā)明的親水膠凝劑，皿到羧基乙烯聚合物(CaAomer⑧)、丙烯酸共聚物例如丙烯酸醇丙烯^S酯共聚物、聚丙烯翻安、多糖例如羥丙纖維素、天然的膠質(zhì)和粘土，和作為親脂性的膠凝劑，艦到改良粘土例如有機(jī)皂土、金屬脂肪Kk例如硬脂麟、船JC性二氧化硅、乙基纖維素和聚乙烯。在根據(jù)本發(fā)明的皮膚美容品組合物中，調(diào)理培養(yǎng)難取物可以齢l^見黃醇或皮質(zhì)甾類、或與自由,除劑、a-羥酸或a-酮酸或它們的衍生物、或離子鵬阻滯劑相結(jié)合。根據(jù)本發(fā)明的皮膚美容品組合物還可以包含情性的或乃至藥效^m容活性的添加劑或這些添加齊啲組合，且特別是潤濕劑、脫色劑例如氫醌、壬二酸、咖啡酸或曲酸；軟化劑；潤濕劑例如甘油、PEG-400^^素；抗衰老劑、抗皮月辭益劑或抗痤疫劑，例如S-羧甲基半胱氨酸、S-苯甲基巰基乙胺、它們的鹽和它們的衍生物，或苯甲酰過氧化抓抗生素例如紅霉素和其酯、新霉素、氯潔霉素和其酯、四環(huán)素；抗真菌劑例如酮康唑或4,5-聚亞甲基3-異噻唑；{4毛發(fā)再生的藥劑，例如米諾ii^K(2,4誦二氨基6誦,定基嘧P定-3-氧化物)和其衍生物、二氮嗪(7-氯-3-甲基—1,2,4-苯丙噻二嗪l,l-二氧化物)和苯妥英(5，4-二苯基咪唑啉-2,4-二酮)；非甾體類抗炎劑、類胡蘿卜素，和特別的P—胡蘿卜素;牛皮癬治療齊,如蒽林和其衍生物,和最后的二十碳-5,8,11,14-四烯酸和二十碳-5,8,11-trynoic酸、其酯和醐安?？顾ダ蟿┨亓睐i的是抗糖化劑、NO-合,制抓鄉(xiāng)l微表皮或真皮高分子的合成或阻斷它們的糊牟的制抓鄉(xiāng)l撒成纖維細(xì)胞或角化細(xì)胞增殖和/或角化細(xì)胞分化的制劑。術(shù)語"濕潤靴'傾向于指的是一或者一種用以維持角質(zhì)層的濕度的呈現(xiàn)屏障功能的化合物，或一種閉合化，。提至啲可以有神經(jīng)醐安、鶴醇?jí)A基化合物、卵磷脂、鞘糖脂、磷脂、膽固醇和它的衍生物、植物甾醇(豆甾醇、P—谷甾醇、菜油甾醇)、必需脂肪酸、1,2-甘油二酯、苯并二氫吡喃4-酮、五環(huán)三砲烯如熊果酸、凡士林油和羊毛脂；一或直接增加角質(zhì)層含7jC量的化合物，如海藻糖和它的衍生物、透明質(zhì)酸和它的衍生物、甘油、戊二醇、pidolate鈉、絲氨酸、tKII醇、孚L,、聚甘油基丙烯酸酯、依克多因與其衍生物、殼聚糖、低聚糖和多糖、環(huán)>^碳酸酯、N-月桂酰吡咯烷酮羧基酸和N-a-苯甲酰-L精氨酸；—或活化皮脂腺的化合物，如類固醇衍生物(包括DHEA)和維生素D與其衍生物。這些化合物可以以本發(fā)明組合物總重量的0.001%到30%存在，并且im是從0.01%到20%。適用于本發(fā)明的NO-合,制劑的例子包括，特別是葡萄屬(Ptew'm/era)植物的提取物，特別是Euromed公司銷售的名稱為無色花青素葡萄干上等品CLeucocyanidinesderaisinsextra)，或是Indena公司銷售的名稱為Leucoselect的，或，最后，是Hansen公司銷售的名稱為Extraitdemarcderaisin的；橄攬(o/ea植物的提取物，優(yōu)選自橄欖樹葉和特別是VINYALS公司銷售的為干提取物形式的，或Biologia&Technologia公司銷售的商品名為EurolBT;和銀杏(GinkgoMoba)植物提取物，,是Beaufour公司銷售的該植物千燥的7jC提取物商品名為Ginkgobilobaextraitstandard。在這些用于促進(jìn)表皮高分子或阻斷它們的糊軍的活性劑中，提及的那些作用為一或者膠原合成，例如積雪草的提取物；積雪草苷與其衍生物；抗壞血酸或維生素C及其衍生物，如維生素C醣苷(Hayashibara公司銷售)；AX合成肽如iamin、Sederaia公司銷售的商品名為"BiopeptideCL"的棕櫚itH月甜氨酸-組氨酸-賴氨酸;從植物中提取的肽類，如Coletic公司銷售的商品名為Phytokine的大豆7K解產(chǎn)物；大豆纖維提取物，如Silab公司銷售的名稱為'Raffermine"的；植物類激素如生長素和木月歸；特別是Sedeima公司銷售的名稱為'Matrixyl"的棕櫚酰五肽賴氨酸-蘇氨酸-蘇氨酸-賴氨酸-絲氨酸；二甲基氨基乙醇；柴胡(Bupleurumchinenserhizome)提取物，如Sederma公司以名禾農(nóng)'Pleurimincyl"和'Lipocare"銷售的；特別是用棕櫚?；；男←湹鞍姿俏?，如Seppic公司銷售名稱為"LipacidPVB"的產(chǎn)品；輔酶Q10;維生素A、二棕櫚S5^基脯氨酸，特別是Seppic公司銷售名稱為"SepiliftDPHP"的產(chǎn)品，和含有異黃酮的紅三葉草(7h，'謂尸rate艦)提取物。一或者彈性蛋白合成，例如LSN公司銷售的商品名為Cytovitiif的Saccharomycescerivisiae的H取物；禾HSecma公司銷售的商品名為Kelpadelie的algaMacrocystispyriferra的^^(物；—或舒占多糖合成，如牛奶M5i郷乳桿菌(lactobacillusvulgaris)發(fā)酵得到的產(chǎn)品，為Brooks公司銷售的商品名為的yogourtif的；AlbanMiiller公司銷售的商品名為HSP3⑧的褐色algaPadinapavonica;以及Saccharomycescerivisiae提取物特別從Silab公司購得商品名為FinnalifP或從LSN公司購得商品名為Cytovitin;—或者纖維粘連蛋白合成，如Seporga公司銷售的浮游生物Salina的提取物，其商品名為GP4G⑧；可獲得的酵母提取物可以特別地從AlbanMiiller公司購得，其商品名為Drieline;Sedemia公司銷售的棕櫚酰五肽，其商品名為Matrixil;—或者在表皮-真皮交界處存在的化，合成(如膠原w和/或rv和/或昆布氨酸)，例如二棕櫚,基脯氨酸，特別Seppic公司銷售的商品名為"SeppmftDPHP"，或phytostetyl硫酸酯，如Vincience公司銷售的商品名為"Phytocohesine";—或金屬蛋白酶抑制作用(基質(zhì)金屬蛋白酶或MMP)，例如更特別地是MMP1,2,3或9。可以駄的是類維生素A及其衍生物、寡肽和脂肽、月歸基酸、Cdetica公司銷售的商品名為的CoMiff的麥芽提取物；藍(lán)莓或,香提取物；番茄紅素；異黃酮、它們的衍生物或含有它們的植物提取物，特別是指大豆提取物(IchimaruPharcos公司銷售的商品名為FlavosteroneSB⑧的產(chǎn)品)、紅三葉草提取物(例如Saderma公司銷售的商品名為"Sterocare^'的產(chǎn)品)、亞麻提取物、虎耳草或香紫蘇提取物；姜黃素提取物；豨薟屬植物提取物(例如Saderma公司銷售的產(chǎn)品)；一絲氨酸蛋白KW制作用，如白細(xì)胞彈性蛋白酶或組織蛋白酶G?？梢蕴峒暗目梢允嵌诡惙N子的肽提取物(Pisumsativum),購自LSN公司，商品名為Parelastyl;鄉(xiāng)干素；和假二肽如{2-[乙酰基(3-三氟甲基苯蜀氨基]-3-甲基-丁酰氨}乙酸。本發(fā)明組合物也可以含有防腐劑，如對(duì)羥基苯甲酸酯、穩(wěn)定劑、濕潤劑、孚L化劑、UVA和UVB遮蓋劑和抗氧化劑，如a-生育酚、丁基羥基苯甲鵬丁基羥基甲苯。本發(fā)明涉及的另一方面，涉及了至少一種細(xì)胞培養(yǎng)基的用于制備一種細(xì)胞禾口/或組織培養(yǎng)基用誠至少一種細(xì)胞培養(yǎng)S^取物的用途，如上述限定的，所述培養(yǎng)基通過與至少一種消化道細(xì)胞培養(yǎng)物和至少益生菌微生物接觸獲得。本發(fā)明的調(diào)理培養(yǎng)基或其提取物可以因此在細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)中被用作輔助成分，特別是改善三維空間系統(tǒng)和獲得最佳培養(yǎng)條件用于淹沒系統(tǒng)或暴露系統(tǒng)中的培養(yǎng)。特別地，調(diào)理培養(yǎng)凝口/或其提取物(和/或含有它們的組合物)可以被用于一種體外皮膚等同物的制備。事實(shí)上，調(diào)理細(xì)胞培養(yǎng)基及其提取物可以im被^i蟲使用或與常規(guī)培養(yǎng)基混合i頓，用于體外培養(yǎng)細(xì)胞，特別是艦細(xì)胞如角化細(xì)胞。這樣的培養(yǎng)系統(tǒng)已經(jīng)特別被記載，例如在專利EP285471、EP789074或EP857971中，并包括在載體上的一個(gè)較多的或較少的分化的角質(zhì)化細(xì)胞的三維培養(yǎng)物。培養(yǎng)物中也可以含有其他皮自胞類型，如黑素細(xì)胞、樹枝狀細(xì)胞或自口格罕氏細(xì)胞、成纖維細(xì)胞，但也含有神經(jīng)細(xì)胞或內(nèi)皮細(xì)胞。載體可以由惰性載體組成，特別是多孑L載體或半透性的載體。載體可以更特別ite自膠原基質(zhì)、可選擇的含有成纖維細(xì)胞和/^te多糖、去表皮的真皮，真皮等同物、透明質(zhì)酸和/或膠原和/或纖維粘連蛋白(fibronectin)和/或纖維膜，和—種惰性載體。本發(fā)明的目的也是一種制備組合物的方法，特別是美容品或艦學(xué)組合物，特別的可以艦包括第一階段的方法制備，在所述的第一階段中制備調(diào)理培養(yǎng)基，可選擇地制備所述調(diào)理培養(yǎng)基的提取物。這種方法至少包括下述步驟a)在第一營養(yǎng)培養(yǎng)基中的載體(特別是多孔載體)上培養(yǎng)來源于腸道上皮的細(xì)胞一S^夠獲得它們的分化的時(shí)間；b)在覆蓋有外周血細(xì)胞或其衍生物(例如白細(xì)胞)的毪狀物的槽中制備第二細(xì)胞培養(yǎng)基；c)回收步驟a)結(jié)束時(shí)獲得的在載體(特別是多孔載體)上的分化細(xì)胞培養(yǎng)物，并轉(zhuǎn)移至步驟b)結(jié)束時(shí)獲得的第二培養(yǎng)基；d)把在第二培養(yǎng)基中來源于腸道上皮的所述的分化細(xì)胞的培養(yǎng)物與至少包括益生菌的微生物培養(yǎng)物相接觸足夠的時(shí)間，以使細(xì)胞之間產(chǎn)生妊作用，所述益生菌可以是，例如，乳桿菌屬的(Lactobacillusspecies)和/或雙歧桿菌屬的(B迅dobacteriumspecies);e)除去細(xì)胞培養(yǎng)物并回收第riffl胞培養(yǎng)基，去除白細(xì)胞，以獲得調(diào)理培養(yǎng)基；f)將調(diào)理培養(yǎng)基，或其提取物，合并到美容品^膚藥用組合物中。雌的，步驟a)中的載體是多孔載體。術(shù)語"多孑L載體"是用來特別意指骨架上包括小孔的插入單元。例如，孔徑大小可以是從0.001到10拜，雌大于或等于0.3拜。作為非限定性的例子，因此適用于本發(fā)明的多L插入單元的骨架可以包含選擇性地包MM基多糖和/或成纖維細(xì)胞的多孔的膠原基質(zhì)，透明質(zhì)酸和/或膠原和/織占連蛋白和/或纖維蛋白;鵬或薄膜、^t透性糊肖化纖維、尼龍、牛魏隆、聚碳酸酯、聚乙烯、聚丙烯或聚對(duì)苯二甲酸乙二醇酯(PET)薄膜、半滲透性的AnopOTe②無t鵬、醋酸纖維薄膜、Biopore-OVf半纖、^t透性的聚酯薄膜和聚羥基乙酸薄膜。在步驟a)中的接觸時(shí)間可以由本領(lǐng)域技術(shù)人員調(diào)整，但通常在幾小時(shí)和幾天之間，特別是在1天和35天之間，例如從18到22天，im大約21天。細(xì)胞初始被以單層的形5^爐，因而在步驟a)結(jié)束時(shí)，得到一個(gè)具有若干層分化細(xì)胞的三維體系。有益的，培養(yǎng)割每被有規(guī)律地更新，例如每2天，以{跌源于腸道上皮的細(xì)胞，例如Caco2細(xì)胞，獲得最佳的分化。在步驟b)中，夕卜周血細(xì)胞或其衍生物，特別是白細(xì)胞形成了細(xì)胞的毪狀物;即腔室的表面基本上均勻的覆蓋了白細(xì)胞；它們可以是單層或多層的形式。特別的，這些白細(xì)胞是收集自至少經(jīng)過一個(gè)分離步驟(特別是離心分離)然后至少部分的去除單核細(xì)胞之后的血液樣品。隨后它們被懸浮在與它們的生存能力相適應(yīng)的營養(yǎng)培養(yǎng)基中，特另提RPM培養(yǎng)基。通常，培養(yǎng)基可以由本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)他們的常識(shí)選擇，特別是ivU:述培養(yǎng)基中選擇。鄉(xiāng)(諫說，適合用于本發(fā)明的腔室，可駄培養(yǎng)平板的L，例如通常用于細(xì)胞培養(yǎng)的6-、12-、24-、48-孔或96-孔細(xì)胞培養(yǎng)板。有益的，在步驟c)中的轉(zhuǎn)移之前，分化細(xì)胞培養(yǎng)物將要f頓適舒白細(xì)胞生存能力的培養(yǎng)纖。分化細(xì)胞和益生菌之間的撤蟲，在白細(xì)胞參與盼瞎況下，將要進(jìn)行允許建立交互作用的時(shí)間，即在不同細(xì)胞類型之間的化學(xué)或生物學(xué)的効奐。對(duì)于本發(fā)明，措辭"細(xì)胞的化學(xué)交換"是用^^由分子代表的所有信號(hào)，所述^從細(xì)胞中釋放并能夠影響遠(yuǎn)處的另一個(gè)細(xì)胞的活性，所述的另一個(gè)細(xì)胞可以屬于或不屬于相同的細(xì)胞類型。非限定性的，所述肝可以，例如，是肽、蛋白質(zhì)、月旨質(zhì)、糖、甾類或兒^安。其可以3M分泌的形式釋放。應(yīng)該理解，這種^S作用可以在沒有直接物理性接觸的不同細(xì)胞類型之間發(fā)生；特別的，ffi31安排第一、來源于腸道上皮的細(xì)胞和，第二可以是或不是放置在單獨(dú)腔室中的白細(xì)胞的細(xì)胞毪狀物，依靠將它們培養(yǎng)在其中的培養(yǎng)基開始彼此交換，沒有腸道細(xì)胞培養(yǎng)物的細(xì)胞能夠與其他細(xì)胞毪狀物的細(xì)ltt接接觸，例如在細(xì)胞體之間自胞延伸的方法接觸。有益的，益生菌微生物被在從頂端添加到腸道細(xì)胞培養(yǎng)物中。適合粒這種交互作用的時(shí)段可以是幾個(gè)小時(shí)到幾天，通常至少6小時(shí)，ifciS少io，特別的大于或等于16小時(shí)，但可以無限擴(kuò)展。益生菌被，例如，與腸道細(xì)胞在包括白細(xì)胞的腔室中接觸6到36小時(shí)。隨后，從所有細(xì)胞中分離回收出培養(yǎng)基例如，在基底側(cè)水平采集獲得這種培養(yǎng)基己經(jīng)穀倆種細(xì)胞鄉(xiāng)和它們的相互關(guān)系的影響。如同在前面表明的，這樣回收的i咅養(yǎng)基還稱為"調(diào)理培養(yǎng)基"，包含濃度大于或相等20pg/ml的IL"IO，特別題50到200pg/ml。在作為成分被弓l入組合物，特別是根據(jù)本發(fā)明的美容品或藥學(xué)^膚美容品組合物之前，其隨后可以經(jīng)受本領(lǐng)域g人員本身公知的濃縮、提取和/或分餾步驟。美容美容本發(fā)明組，被特別用于正常皮膚和/或粘膜和/或受影響的皮膚和/或粘膜的治療或預(yù)防治療，它可以是表i贓膚、體表和/或頭發(fā)疾病狀態(tài)的，例如特別是一干性皮膚或頭發(fā)，一皮臓障功能的損傷，一敏感皮膚戯發(fā)，—細(xì)卜基質(zhì)中具有改變的皮膚，一涉，抗菌劑或抗真菌劑治療的^^病，—被麟干擾弓l起的(油性皮膚)或涉及去頭屑的疾病癥狀。進(jìn)一步，組合物可以阻止或治療涉及年齡衰老的特定的損傷。本發(fā)明將在下述的實(shí)施例中更詳細(xì)的說明。在這些實(shí)施例中，參考附圖，附圖顯示的是指標(biāo)化合物滲想l壞同割牛下培養(yǎng)的重建i^中的^^牛。實(shí)施例l:制備調(diào)理培養(yǎng)基接近于人腸道上皮細(xì)胞的細(xì)胞，Caco2(在通道60和65之間)以2.5x105細(xì)^/ml的濃度接禾中在25mm培養(yǎng)插入單元中(具有0.4Mm的核孔，BectonDickinson,Basle,Switzerland)。這種插入單元M^文置在培養(yǎng)皿(Nunc)中，并在37。C/10。/。C02的DMEM(包含谷氨酰胺和高濃度葡萄糖(Amimed^Allschwill,Switzerland))中培養(yǎng)18到22天，所述DMEM補(bǔ)充了非必需氨基敏Gibco,BRL)、10mg/ml慶大霉素(GIBCOBRL)和0.1%的青霉素/鏈霉素(10000IU/ml和10000^i^ml)(GIBCO)。每2天更換一次培養(yǎng)基直到細(xì)胞完全分化(21天)。當(dāng)Caco2細(xì)胞融合成一個(gè)單層時(shí)，i頓多孔(multicell)ERS電極(伏f射十/歐嫩十)不斷的測量經(jīng)上皮的電阻大小。此外，通過淋巴細(xì)胞的離心，從無關(guān)的正常供血者的周圍血液中分離來自于正常志愿者的血白細(xì)胞。細(xì)胞懸銜107細(xì)鵬ml)被放置在陪替氏培養(yǎng)皿中，在37C培養(yǎng)1小時(shí)30分讓單核細(xì)胞粘附。因此，包含在非粘附細(xì)胞群中的白細(xì)胞，主要是T淋巴細(xì)胞，用它們的在有綿羊紅細(xì)胞存在盼瞎況下形微瑰花形的性質(zhì)被純化。隨后在存在NH4Cl(8.7mg/1)的情況下通5i滲透性沖擊去除綿羊紅細(xì)胞。最終，白細(xì)胞懸液的存活力大于95%。隨后這些白細(xì)胞被稀釋在包含20%去補(bǔ)體人AB血清(在56'C去補(bǔ)體30分鐘，Sigm^StLouis,Missouri,USA)的RPM1640中。隨后可以制備Caco2/白細(xì)胞共培養(yǎng)l難。為此，Caco2細(xì)胞培養(yǎng)插入單元在RPMI1640培養(yǎng)基中洗兩次，并轉(zhuǎn)移到一^S含RPMI培養(yǎng)基的6—孔培養(yǎng)平板中，其中孔已經(jīng)提前涂有毪狀物的新近純化的白細(xì)胞(2xl06細(xì)胸ml)。因此，白細(xì)胞在基底層和Caco2細(xì)胞在頂端層。根據(jù)如下所述的條件對(duì)具有益生菌的Caco2/白細(xì)胞(外周血白細(xì)胞)共培養(yǎng)物進(jìn)行刺激如此，lxl07cfb/ml的益生菌被從頂端加入。單獨(dú)的培養(yǎng)基作為陰性對(duì)照。在共培養(yǎng)物刺激6到36小時(shí)(37°C,10%CO2)后，從基底側(cè)收集調(diào)理培養(yǎng)基。Lactobacillusparacasei，特別是在CNCM以編號(hào)No.CNCMI-2116保藏的菌株，被特別用作益生菌。實(shí)施例2:屏障功能的效果按照實(shí)施例1獲得的調(diào)理培養(yǎng)基，但在用108cfU副干酪乳桿菌(Z^tok^7/船戸raco^z)刺激16小時(shí)后，與Episkin②重建^l^接觸6天，在該*魏階段，模型繼續(xù)增歹直。皮膚的這種生成Episkin②模型的屏障功育&t后被研究。草案在D6接受Episkin試劑盒，然后根據(jù)五個(gè)斜牛在增殖階段培養(yǎng)直到D13。1、常規(guī)的Episkin⑧割牛(條件A):用Episkin⑧分化i咅養(yǎng)基從D6到D13處理。Episkin分化培養(yǎng)基是RoguetR、CohenC、DossouKG、RougierA所記載23的Episkin，用于體外評(píng)定局部施用化^l刺激性的重建的人類表皮(Toxicolinvitro1993:8:283—291)。2、陰性對(duì)照(條件B):用30X陰性對(duì)照培養(yǎng)基從D6到D13處理(調(diào)理培養(yǎng)S^自Caco2/PBMC培養(yǎng)16小時(shí))。3、陽'M照(^f牛C):用30X調(diào)理培養(yǎng)基Caco2/PBMC+益生菌(副干酪乳桿菌(Lactobacillusparacasei)CNCM1-2116+教及敬瑜卿^foto簡ww/actoJ)NCC2818(也標(biāo)為BM2ATCC27536))/人D6至廿D13鵬。因此，試劑盒在D14被接收在培養(yǎng)基上。之后培養(yǎng)基用觀賦培養(yǎng)基替換(它的構(gòu)成與分化培養(yǎng)對(duì)目同，僅用5XFCS替換10X胎牛血清(FCS))在培養(yǎng)箱中37'C下培養(yǎng)24小時(shí)。之后，該測i式培養(yǎng)基用1.5ml的PBS+0.25。/o(w/w)吐溫80替換，并在^ffi前在32'C下穩(wěn)定1小時(shí)。Episkiif試劑盒以它們的單位l頓。條件A、B、C對(duì)于每一個(gè)Episkin②批次都在6孔中測試研究?；衔?-硝基-沐亞苯基-二胺(染料)的滲透作用在不同的雌后被研究。微辦測試按照以下步驟執(zhí)fiSi)配制劑在含染料5mM(1部分)的配方和緩沖液，PH9,5(1部分)間的混合物。染料在配制劑中的最終濃度lmM的初始原料。<table>tableseeoriginaldocumentpage24</column></row><table>ii)對(duì)擴(kuò)翻胞滲透作用的研究-應(yīng)用鵬32°C-給與的劑量250Mlcm'2-應(yīng)用時(shí)間4小時(shí)國接收液體PBS，0.25%吐溫80(具有2,5mM維生素強(qiáng)化鈉)iii)接收液體被收集，之后在HPLCJl^份分析。4OT在PBS，0.25%吐溫803中0.5mM的儲(chǔ)存溶液在同一天制備的標(biāo)準(zhǔn)范圍來確定濃度。iv)滲透的程度M31相關(guān)測試濃度和給與劑量計(jì)算，還考慮體積因素，例如70^1配制劑和600^1接收液體。肌C方凝始譜茲應(yīng)用的HPLC系統(tǒng)是一種Alliance2695系統(tǒng)和WatersPAD996檢測器，按照^fOT說明書^ffl。為了進(jìn)行分析，標(biāo)準(zhǔn)范圍^^和要被分析的樣品的等分i^f被分別放在裝有進(jìn)樣器的小瓶中。染料樣本定fii^用Mlleniumv.3.2采集和處理系統(tǒng)禾將。斜牛A(例如常規(guī)E一kir^斜牛)4柳Episkin⑧分化培養(yǎng)基作為培養(yǎng)基，這對(duì)于模型分化是最佳的。批次B條件(例如陰性對(duì)照組)因此使用比這個(gè)分化培養(yǎng)基少30%的培養(yǎng)基。所以，ffiii剝牛B實(shí)現(xiàn)的屏障功能因此被發(fā)測氏于條件A。下述表格反映了使用的Episki^批次(在D14下調(diào)理)的條件A、B和C下參照化糊的滲透率。03國epis-4/07/2003斜牛A批次A常規(guī)培養(yǎng)基平均值7.96SD0.52CV6.52斜牛B批次B(+30%非剌#±咅養(yǎng)基)平均值9.78SD2,21CV22.59條件C批次C(+30%由益生菌刺激的副干酪乳桿菌+乳雙歧桿菌NCC2818)平均值7.15SD0.25CV3.45結(jié)果顯示與陰性對(duì)照組相比屏障功能有了顯著的改善。只有斜牛C與陰性對(duì)照組相比屏障功能有了顯著的改善。益生菌刺激的條件調(diào)理培養(yǎng)基的i頓使獲得常規(guī)斜牛下同樣的屏障功能成為可能。結(jié)論證明30%益生1」激的調(diào)理培養(yǎng)基(條件C)能使屏障功能有顯著的改善。實(shí)施例3:屏障功能的重建本研究的目的是評(píng)價(jià)益生菌對(duì)以獨(dú)立細(xì)胞存在的,羊離體皮膚的屏障功能(BF)重建的影響。源于用益生菌副干酪乳桿菌(L.paracasei)刺激的混合培養(yǎng)調(diào)理培養(yǎng)基,如同實(shí)施例1記載的那樣獲得，方JCA容納液體中被研究。這使得評(píng)價(jià)被月桂酉l^(SLS)肖U弱的屏障功能重建的^媒成為可能。為此，術(shù)后被立即覆蓋的人敬膚±央用Franz②細(xì)胞系統(tǒng)替換，用來測量隨時(shí)間的微小的7jC分丟失(IWL)。新鮮腹部皮膚褶裥樣本的評(píng)價(jià)被執(zhí)行。在DIO，在32'C下皮膚i央方燈在Fran戶細(xì)胞中。在Fran^細(xì)胞中的皮膚塊的表面積是10.18cm2。適宜維持存活條件的培養(yǎng)基被添加Franz細(xì)胞的容納室中(5.5ml)，以30%比例添加調(diào)理培養(yǎng)基(該培養(yǎng)基是記載在BoisticS,Branchet-GumilaMC,merial國KienyC,NoceraT;SkinPharmacolPhysiol2005:18:201-208中的一種)。測試餅如下對(duì)照條件2，有一個(gè)用SLS("單獨(dú)的")處理未刺激的調(diào)理培養(yǎng)基(稱做培養(yǎng)基2)，相應(yīng)的一個(gè)與重建模型接觸(Caco2/PBMC)的簡單調(diào)理培養(yǎng)基對(duì)比。條件3(以"雙份的")用益生菌副干酪乳桿菌(L.paracasei)剌激的調(diào)理培養(yǎng)基(稱之為培養(yǎng)基3)與源于腸內(nèi)系統(tǒng)的體外模型代表(Caco2/PBMC)(刺、Wil副干酪乳桿菌(L.paracasei)在108cflj/ml與Caco2/PBMC重建模型接觸16小時(shí))的刺激的調(diào)理培養(yǎng)基對(duì)比。條件4中有一個(gè)用SLS的處理(以"雙份的")用益生菌副干酪乳桿菌(L.pamcasei)刺激的調(diào)理培養(yǎng)基(稱之為培養(yǎng)基3)，與源于腸內(nèi)系統(tǒng)的體外模型存在(Caco2/PBMC)(刺激ilil副干酪乳桿菌(L.paracasei)在108cfij/ml與Caco2/PBMC重建模型接觸16小時(shí))的刺激作用的調(diào)理培養(yǎng)基對(duì)比。2個(gè)供條屏障功能損害后，按照以下方mift行分析在D0，在培養(yǎng),在的情況下j^^被制備并被固定在Franz細(xì)胞上。然后，在IWL首次測量之前，為了使之再平衡，特另拷慮PH和水交換，所述的細(xì)胞被放置1小時(shí)。固定3小時(shí)后，調(diào)理培養(yǎng)基被預(yù)處理添加在Franz細(xì)胞培養(yǎng)基中過夜。在D1在與調(diào)理培養(yǎng)基^l蟲過夜后，IWL的首次測量在早上大約8.30am進(jìn)行。SLS之后被閉合下在10%應(yīng)用為獲得顯著的但可逆的劍門的Franz—細(xì)胞一固定的分離塊的屏障功能的損害，在部分閉合下每cn^必須被使用20^124小時(shí)(通過石蠟切片在供體室上延展的優(yōu)點(diǎn))。剩余的SLS用600m1的milliQ7jC清洗(洗3遍之后通過棉毛尖拋光涂敷)。Franz細(xì)胞中的培養(yǎng)基被更換。1小時(shí)之后測量IWL，之后每2小時(shí)測量(一天4次)。在D3在8.30am，測量IWL，之后更換培養(yǎng)基。另夕卜，每2小時(shí)測量IWL(—天4次)。在D4在8.30am，測量IWL并終止操作。M31被分析的Franz細(xì)胞測量IWL兩次。探針被方j(luò)[g在i^^樣本表面。結(jié)果第一塊皮膚D0在Tlh5.2±1.7D0在T4h餅2=添加培養(yǎng)基2餅3=添加培養(yǎng)基2或3餅4=添加培養(yǎng)基3Franz細(xì)胞固定后Dl在T20h±0.84.45±1.8D1+SLS應(yīng)用SLS3小時(shí)應(yīng)用SLS3小時(shí)Dl在Tlh女5.5±2.210.5±1Dl在T3h女16.25±1.255,4±1.99.5±0.8D2在T19h女7.65爆54.7±3.15.55±1D2在T21h火7.95±0.155.6±2.67.95±0.2D2在T23h女9,5±1.25.1±2.958±0.2D2在T26h火7.6±0,45.07±2.86.65±0.1D2在T29h女7.3±0.14.8±1.79.25迫75D3在T45h女7.55±0.455.3±2.36.45±1.5*:涉及SLS的細(xì)胞處理之后，開始計(jì)時(shí)。按照本發(fā)明，用副干酪乳桿菌(L.pamcasei)以108cfo刺激的調(diào)理培養(yǎng)基限制了SLS消弱的屏障功能的損害，并使該功能更快咴復(fù)，達(dá)到正常水平(恢復(fù)到?jīng)]有^ffl處理的碎i^i:發(fā)現(xiàn)的IWL值)。第二塊皮膚DO在Tlh6±1.7D0在T4h餅2=添加培養(yǎng)基2餅3=添加培養(yǎng)基3餅4=添加培養(yǎng)基3Franz細(xì)胞固定后Dl在T20h±15±0.9D1+SLS應(yīng)用SLS3小時(shí)應(yīng)用SLS3小時(shí)Dl在Tlh女22,85±1.253±0.312.65±0.5D2在T19h頭11.9±23.35±18±1.6D2在T21h女11.75±0.453.4±0.465.35±0.7D2在T23h頭12.5±0.53.25±0.45.8±0.2D2在T26h女14±0.23.4±0.59.9±2.1D3在T45h女8±0.13.7±0.34±0.6*:涉及SLS的細(xì)胞處理之后，開始計(jì)時(shí)。28就像在前面的例子，用調(diào)理培養(yǎng)基按照本發(fā)明處理限制了SLS消弱的屏障功能的損害，并使該功能M恢復(fù)。實(shí)施例4:應(yīng)用到皿或頭皮的局部組^t(各成分用它們的CTFA名稱)制備防止陽光的^a，刺激的調(diào)理培養(yǎng)基*2.5%防腐劑1.35%檸檬,0,035%PEG—401.25%季戊四醇四辛酸酉旨4%甘油7%船K山梨糖醇三硬脂酸酯0.3%杏核油2%鯨蠟醇0.7%丙二醇2%三乙醇胺0.4%環(huán)己硅氧烷2%卡波姆0.75%生育酚1%肚2%維生素C,0.1%聚己酸內(nèi)酯_|3胡蘿卜素5%水適量至100%*按照實(shí)施例1制得魏光劑的組糊刺激的調(diào)理培養(yǎng)基"鯨蠟?zāi)己脱跻蚁┗L蠟基硬脂醇的混合物(33EO)80/203.5%7.0%甘油單硬脂酸酯和二硬脂酸酯的混合物2.0%鯨蠟醇1.5%聚二甲基硅繊1.5%液態(tài)凡士林15.0%丁基甲氧基二苯甲?；卒?.0%奧克立林(octociylene)7.0%甘油20%去離子7jC適量至100%按照實(shí)施例l制得，但用Z^/o/jm謹(jǐn)'/(CNCMNo.1225)作為益生菌治療脫發(fā)的組她微液刺激的調(diào)理培養(yǎng)基***1%丙二醇23%乙醇55%Aminexil1.5%水適量至100%謝按照實(shí)施例1制得，但用微歧桿菌(及/o"gz/附;)(CNCMNo.2170)作為益生菌含，皿防止污染、香煙導(dǎo)致的損傷的抗氧化劑成分的組^f刺激的調(diào)理培養(yǎng)基****2.0%羥丙基纖維素(Hercules公司銷售的KlucelH)1.0%抗氧化劑一維生素E2.0%異丙醇40.0%防腐劑0.30%水適量至100%""按照實(shí)施例1制得，但用副干酪乳桿菌(L.Paracasei)和長雙歧桿菌(B.longum)的混合物作為益生菌用于干燥皮膚的沐浴液礦物油8.0%棕^I,丙酯5.0%聚甘油—3二異硬脂酸酯4.0%辛基十二烷醇4.0%卡鵬0.3%剌激的調(diào)理培養(yǎng)基*2.0%椰油基谷氨,2.0%防腐劑0.5%香料0.5%水體至層％*按照實(shí)施例1制得7.0%椰油?；繁鸩藟A(cocamidopropylbetaine)2.0%月桂基硫娜白勝內(nèi)2.0%調(diào)理培養(yǎng)S^取物"4.0%氯化鈉1.0%防腐劑0.5%香料0.5%水適輕濯％"凍干提取物按照實(shí)施例1制得，但用學(xué)改歧桿菌(B.lactis)(NCC2818)作為益生菌孚慮花生山崳醇/花生S1異十六烷甜杏仁油孚L木果油(sheabutter)萄蹄3.0%7.0%3.0%2.0%甘油5.0%刺激的調(diào)理培養(yǎng)基^3.0%BHT0.05%甲基POB0.1%丙基POB0.05%水驢至100%*按照實(shí)施例1制得孚慮調(diào)理培養(yǎng)觀取物*****1.5%石更脂TO油酯和PEG100硬脂酸酯5.0%異十六烷8.0%乳木果油5.0%甘油3.0%卡波姆9810.2%0.2%Lubragel5.0%^乙醇1.0%氫氧化鈉適量至PH6BHT0.05%DC15031.0%水適量至100%"凍干提取物按照實(shí)施例1制得，但用兩歧雙歧桿菌(及說:/^/mJ作為益生菌權(quán)利要求1、含有調(diào)理細(xì)胞培養(yǎng)基或其提取物的美容品或皮膚藥用組合物，所述的培養(yǎng)基可以通過與至少一種消化道細(xì)胞培養(yǎng)物和至少益生菌微生物接觸獲得。2、如權(quán)利要求1所述的組^tl，其特征在于所述的培養(yǎng)基可以fflil另外與外周血細(xì)胞接觸獲得。3、如權(quán)利要求2所述的組合物，其特征在于外周血細(xì)胞為白細(xì)胞。4、前述權(quán)利要求中任意一項(xiàng)所述的組合物，其特征在于消化纖胞的培,^H維培養(yǎng)物。5、前述權(quán)利要求中任意一項(xiàng)所述的組合物，其特征在于消化道細(xì)胞為腸道上皮細(xì)胞。6、前述權(quán)利要求中任意一項(xiàng)所述的組合物，其特征在于至少一種益生菌微生物選自以下組酵母菌屬、耶羅烕亞酵母、克魯維斯酵母屬、有孢圓酵母屬、粟酒裂殖酵母、德巴利酵母屬、假絲酵母、畢赤氏酵母、曲霉、青霉菌、雙歧桿菌屬、畸形菌體、梭菌屬、蜜!W菌屬、丙酸桿菌屬、腸球菌、乳酸球菌屬、葡萄球菌、消化鏈球菌屬、桿菌、小球菌屬、微球菌、明串珠菌屬、魏斯氏菌屬、氣球菌屬、孚L球菌屬和乳桿菌屬。7、前述權(quán)利要求中任意一項(xiàng)所述的組合物，其特征在于至少一種益生菌微生物選自乳酸菌、雙歧桿菌和酵母菌。8、前述權(quán)利要求中任意一項(xiàng)所述的組合物，其特征在于至少一種微生物選自乳桿菌屬和雙歧桿菌屬種。9、如前述權(quán)利要fe—所述的M31與至少一種消化道細(xì)胞培養(yǎng)物和至少益生菌微生物接觸獲得的至少一種細(xì)胞培養(yǎng)基或所9胞培養(yǎng)基的提取物作為改善皮膚動(dòng)態(tài)平衡的試劑的美容品用途。10、如權(quán)利要求9所述的至少一種細(xì)胞培養(yǎng)基或其提取物的用途，其特征在于所述的培養(yǎng)基可以M31另外與白細(xì)胞接觸獲得。11、如權(quán)利要求9和10之一所述的至少一種細(xì)胞培養(yǎng)基或其提取物的用途，其特征在于培養(yǎng)基或其提取物是用作改善皮膚或頭皮的屏障功能的試劑。12、如豐又利要求9和10至少一項(xiàng)所述的至少一種細(xì)胞培養(yǎng)基或其提取物的用途，其特征在于培養(yǎng)基或其提取物是用作改善皮M頭皮的濕度的試劑。13、如權(quán)利要求9-12中至少一項(xiàng)所述的至少一種細(xì)胞培養(yǎng)基或其提取物的用途，其特征在于培養(yǎng)基或其提取物是用作延緩、減低和/或P恥皮膚衰老癥狀的試劑。14、用于改善皿或頭皮的,動(dòng)態(tài)平衡和/或屏障功能和/或濕度的美容方法，其特征在于至少一種細(xì)胞培養(yǎng)基或至少一種培養(yǎng)基提取物被用在皮膚或頭皮上，所述培養(yǎng)基可以按照權(quán)利要求1至8之一項(xiàng)所限定的，M31與至少一種消化道細(xì)胞培養(yǎng)物和至少益生菌微生物接觸獲得。15、至少一種細(xì)胞培養(yǎng)基或至少一種培養(yǎng)^il取物用于制備用于治療敏感皮膚的組，的用途，所3t培養(yǎng)基倉,按照^i利要求1至8之一項(xiàng)所限定的，fflil與至少一種消化道細(xì)胞培養(yǎng)物和至少益生菌微生物接觸獲得。16、至少一種細(xì)胞培養(yǎng)基或至少一種培養(yǎng)基提取物用于制備治療和/或預(yù)防MI^緊張癥狀的組合物的用途，所述培養(yǎng)基會(huì),按照權(quán)利要求1至8之一項(xiàng)所限定的，M51與至少一種消化道細(xì)胞培養(yǎng)物和至少益生菌微生物接觸獲得。17、至少一種細(xì)胞培養(yǎng)基或至少一種培養(yǎng)基提取物用于制M外皮膚等同物的用途，所述培養(yǎng)基育,按照權(quán)利要求1至8之一項(xiàng)所限定的，ffi31與至少一種消化道細(xì)胞培養(yǎng)物和至少益生菌微生物撤蟲獲得。18、制備包含至少一種細(xì)胞培養(yǎng)基或其提取物的美容品或皮膚藥用組合物的方法，其特征在于它包括以下步驟a)在第一營養(yǎng)培養(yǎng)基中的多孔載體上培養(yǎng)來源于腸道上皮的細(xì)胞一S^夠獲得它們的分化的時(shí)間；b)在覆蓋有白細(xì)胞毪狀物的腔室中制備第二細(xì)胞培養(yǎng)基；c)回收步驟a)結(jié)束時(shí)獲得的在多孔載體上的分化細(xì)胞培養(yǎng)物，并轉(zhuǎn)移至步驟b)結(jié)束時(shí)獲得的第二培養(yǎng)基；d)使在第二培養(yǎng)基中的來源于腸道上皮的所述分化細(xì)胞的培養(yǎng)物與至少包括乳桿菌屬種的益生菌的微生物培養(yǎng)物接觸足夠的時(shí)間，該時(shí)間足以使細(xì)胞之間產(chǎn)生交互作用；e)除去細(xì)胞培養(yǎng)物并回收第二細(xì)胞培養(yǎng)基，去除白細(xì)胞，以獲得調(diào)理培養(yǎng)基；f)將調(diào)理培養(yǎng)基或其提取物合并到美容品^i^藥用組合物中。全文摘要本發(fā)明涉及一種含有一種調(diào)理細(xì)胞培養(yǎng)基或其提取物的美容品或皮膚藥用組合物，所述的培養(yǎng)基能夠通過與至少一種消化道細(xì)胞培養(yǎng)物和至少益生菌微生物接觸獲得。本發(fā)明也涉及調(diào)理細(xì)胞培養(yǎng)基改善皮膚動(dòng)態(tài)平衡的用途。文檔編號(hào)A61Q19/08GK101254164SQ20081009207公開日2008年9月3日申請(qǐng)日期2008年2月25日優(yōu)先權(quán)日2007年2月26日發(fā)明者A·古尼切申請(qǐng)人:萊雅公司