專利名稱：合成肽組合物及其生產方法
技術領域：
本發明涉及其適用于人和動物的含有合成肽組合物的制劑，以及涉及它們的生產方法。
背景技術：
從科學和醫學研究中發現，低分子的蛋白能夠以調節的方式干預生物的合成過程。這可能增進組織的功能或內分泌系統的功能。這些低分子蛋白也被稱為信號肽，同樣在神經水平上起神經遞質的作用，或在免疫水平上起分化因子的作用。它們存在于所有的組織中。因此，例如，多肽作為白細胞間素和粒細胞巨噬細胞集落穩定因子以同樣的方式調節早期T細胞在胸腺上皮的分化。這種多肽和其他多肽的合成復制以及它們在制劑中的用途使得它們有可能對獲得性免疫缺陷綜合癥、感染、過敏、自主免疫性疾病、神經內分泌疾病(如絲狀長骨體生長部類癌)有應答，同時也有可能對在化療或放射治療后免疫恢復效果有應答。
例如，WO98/53845揭示了一種統計上的合成胸腺肽組合物及其用作一種活性免疫和/或內分泌制劑，其中，合成胸腺肽對應于牛胸腺，而其胸腺肽組合物供活性免疫和/或內分泌制劑中應用。合成胸腺肽組合物在制劑中的應用使得人淋巴細胞增殖隨劑量而增加。結果，這種制劑可作為治療免疫衰弱，免疫缺陷性疾病以及激素紊亂性疾病的藥物。而且，這種制劑還可作為構建皮膚，毛發，指甲的一種物質，并用作化妝品和食物補充品。在這種情況下，合成胸腺肽來源于肽的新合成。
眾所周知，已知的合成胸腺肽及其組合物有如下不足它們對應于牛胸腺的肽以及肽組合物，另外，只有胸腺這種器官可作為肽及其組合物的制備模板。因此，合成胸腺肽及其組合物在制劑中的用途僅限于所述的激素作用和產物的協同內分泌作用。在這點上，用這種制劑治療人的器官中或人體內個別組織中的各基因、細胞或組織缺陷是不可能的。因此，不可能用對胸腺組織有效的信號肽來治療心、肝、肺或其他器官因基因、細胞或組織缺陷而造成的功能紊亂。同樣，次級淋巴組織如淋巴結、派爾班、腸聯合淋巴組織、和脾臟的功能性紊亂也完全不能治療。而在對人體的有效治療上還有一個問題，即從牛胸腺分離出的肽與人胸腺肽不同，因此在某些情況下病人會對動物蛋白產生耐受不良反應。
發明內容
本發明的一個目的在于提高和進一步研制前述類型制劑，其含有合成肽組合物，除了治療激素和內分泌紊亂之外，也可以用于其他醫學領域的治療，如治療基因、細胞和組織缺陷。本發明的另一目的在于，基于這種肽的組合物研制一些對人類有改進的特異性效力的產品。同樣，本發明的再一目的在于，提供一種具有相應性能的相應制劑的制備方法。
具體實施例方式
根據權利要求1所述的物質，含有本發明的合成肽組合物制劑可以實現上述的目的。因此，一種含有合成肽組合物的制劑的特征在于所述的肽組合物來源于人體組織的部份水解，而部份水解產物可以通過特殊的酶組合物得到。
根據本發明，業已發現，可以借助于在一定的試驗條件下可催化水解特殊的酶組合物通過人體組織的部份水解所得到的合成肽組合物。這些合成肽組合物可以用作激素和內分泌紊亂以及組織功能不良的治療藥物。另外，還發現，用人體組織的合成肽則可以提高制劑的效力，能有效地避免對動物蛋白質的耐受不良反應和排斥反應。
具體地說，本發明提供的合成肽組合物可以通過特殊的酶組合物得到。特殊的酶組合物這樣選擇以至于組織中特殊的、短鏈蛋白質可部份水解。這樣，這種部份水解應使得有可能分離信號肽以及其他有效蛋白質，然后用于制劑中。一定的試驗條件，如一定的PH值，溫度，鹽含量，或者加有特殊酶的組合物的水解持續時間，都可以有目的的控制部份水解。
在有目的的部份水解的情況下，如果可以得到質量從150到3000道爾頓的肽，則是有利的。這將使得制劑可以通過各種途徑給藥。
根據權利要求4的特征，含有本發明的合成肽組合物的制劑也可實現上述目的。因此，含有合成肽組合物制劑的特征在于肽組合物可由新合成的肽組成。新合成的肽在結構和成分上符合人體組織的肽和肽組合物。
關于這點，本發明也已發現，相當于人體組織肽的肽的新合成使得有可能認識到肽組合物可用作激素和內分泌紊亂以及組織功能不良的治療藥物。進一步發現，從頭合成有可能得以以一種重復的方式來生產肽和肽組合物。其結果是可以達到不使用人體組織而進行移植。
為了生產這些合成肽組合物，則會出現，以適當地通過化學方法而衍生出的各個氨基酸逐段排列形成短鏈肽，然后從它們的氨基末端和其側向功能團上的衍生形態釋放出這些合成肽。用這個方法，在制藥上是有可能以可重復，消毒的方式來生產肽和肽組合物。
這樣生產的肽組合物的優點在于和自然制劑不一樣，它們能夠消除疾病風險，例如朊病毒風險，特別是牛綿狀腦病風險，或者病毒病原體。
這些肽的平均質量最好為150到3000道爾頓。這使得有可能這些短鏈肽的簡易從頭合成在藥物治療的耐受范圍內。這種制劑也可以應用于各種形式的用藥。
根據權利要求8的特征，在另一個變換的范圍內，含有本發明的合成肽組合物的制劑也可實現上述目的。因此，含有合成肽組合物制劑的特征在于可以自基因修飾微生物得到肽組合物。在這種情況下，所生產的肽的基因原材料對應于人體組織的肽的核苷酸序列。
在本變換措施的范圍內，本發明已經發現，微生物用對應于人體組織的肽的核苷酸序列的基因原材料的克隆，使得有可能生產可用作激素和內分泌功能紊亂的治療藥物，以及所有組織的功能不良的治療藥物的合成肽。本發明也發現，采用微生物使制藥上大規模再現性成為可能。在這種情況下，在工業范圍內，發酵槽中的液體培養物可以進行大量生產，因此，對于這種制劑將有很大的需求量。另外，和從動物有機體合成的肽相比，人體將對通過以上方法生產的肽有更好的耐受性。
合成肽的一種特別簡單的生產是用質粒來克隆微生物的cDNA。在這個過程中，cDNA可以通過反轉錄肽的mRNA得到。采用帶可能的選擇性標記的質粒中或者在有選擇性的培養基中的cDNA，可以保證只有這些含有所需肽的cDNA的微生物被選擇，除了選擇性的標記外，質粒中也可以加入啟動子，其有提高克隆的cDNA的表達的作用。
微生物可以以一種特別有利的方式釋放肽到培養基中，從中可以收集到相同的肽。這可以通過滲透性休克或電休克方法來實現。因此，合成肽可以通過簡單的方法加以之后的離心步驟和層析法得到。
本發明中的肽的平均質量較好為150到3000道爾頓。由于核苷酸序列的大小受到限制，所以它可以實現簡單而穩定的微生物克隆。另外，通過以上方法所生產的肽組合物可以通過所有途徑給藥。
此制劑含有合成肽組合物，故而其可以更有效的方式作為器官的功能不良的治療藥物之用。在這一點上，有可能通過合成肽組合物的作用使有缺陷的或被破壞的組織再生或者重建。
還有可能提供含有合成肽組合物作為免疫和/或內分泌活性制劑。在這一點上，有利的是，由人體器官復制的合成肽組合物完全排除牛綿狀腦病的風險或其它可以從動物傳播到人體的疾病的風險。
也有可能用含有合成肽組合物的制劑作為化妝品或食物補充劑。這樣可以確保那些不必以藥物治療的人也可以接受含有合成肽組合物。
至于生產方法，權利要求20的步驟可達到上述的目的。因此，一種制劑的生產方法的特征在于其組織借助于酶進行部分水解，而此組織來源于人體，且部分水解的產物可以借助于特殊的酶組合物得到。本發明的方法最好用于生產權利要求1-3和權利要求13-19中所述的制劑，這可參閱說明書的前述部分，以避免重復。
至于生產方法，權利要求21的步驟可同樣達到上述的目的。因此，一種制劑的生產方法的特征在于由適當地通過化學方法而衍生的各個氨基酸排列成肽，而新合成的肽在其結構和成分上對應于人體組織的肽和肽組合物。在這一點上，可以根據Merrifield固體相方法來安排生產方法。本發明的方法最好用于生產一種權利要求4-7和13-19中任何一項所述的制劑，這也可參閱說明書的前述部分，以避免重復。
在另一個變換的范圍內，同樣有可能以權利要求22的步驟定義一種本發明的方法。因此，一種制劑的生產方法的特征在于肽和肽組合物可以通過對微生物的基因修飾得到。在這種情況下，肽的基因原材料對應于人體組織的肽的核苷酸序列。本發明的方法最好用于生產一種根據權利要求8-19中任何一項所述的制劑，同樣在這種情況下，可參閱說明書的前述部分，以避免重復。
一種制劑的生產方法最好可以發展到這樣一種程度，以至于從部分水解組織得到的肽組合物或從肽的新合成所得到的肽組合物或由基因修飾微生物而得到的肽和肽組合物形成了一定比率和型式的有人體組織特性的氨基酸。這樣，就有可能確保從這些方法生產出和天然產品相同的產品。
最后，應該注意到，以有利的方式進一步提高和發展本發明的教導有無數的可能性。然而，上述的實施例僅為解釋要求保護的指導，而不限于這些實施例。
權利要求
1.一種應用于人類和動物且含有合成肽組合物的制劑，其特征在于，肽組合物從組織的部分水解得到，而組織來源于人體，其部分水解的產物通過特殊的酶組合物得到。
2.根據權利要求1所述的含有合成肽組合物的制劑，其特征在于，可以這樣選擇酶組合物以便進行有目的的部分水解。
3.根據權利要求1或2所述的含有合成肽組合物的制劑，其特征在于，有目的的部分水解所得到的肽的質量是150到3000道爾頓。
4.一種應用于人類和動物且含有合成肽組合物的制劑，其特征在于，肽組合物可以由新合成的肽組成，而新合成的肽在結構和成分上對應于人體組織的肽和肽組合物。
5.根據權利要求4所述的含有合成肽組合物的制劑，其特征在于，合成肽可以通過組合單個的氨基酸得到。
6.根據權利要求4或5所述的含有合成肽組合物的制劑，其特征在于，合成肽的平均質量是150到3000道爾頓。
7.根據權利要求4-6中任何一項所述的含有合成肽組合物的制劑，其特征在于，所得到的合成肽沒有朊病毒風險，尤其是沒有牛綿狀腦病風險。
8.一種應用于人類和動物且含有合成肽組合物的制劑，其特征在于，肽組合物可自基因修飾的微生物得到，所得的肽在其基因原材料上對應于人體組織的肽的核苷酸序列。
9.根據權利要求8所述的含有合成肽組合物的制劑，其特征在于，微生物可以通過質粒中含的cDNA序列克隆而得到。
10.根據權利要求8或9所述的含有合成肽組合物的制劑，其特征在于，微生物釋放肽到培養物的培養基中。
11.根據權利要求8-10中任何一項所述的含有合成肽組合物的制劑，其特征在于，肽可以在培養物的培養基中收集。
12.根據權利要求8-11中任何一項所述的含有合成肽組合物的制劑，其特征在于，釋放到培養物的培養基中的合成肽的平均質量是150到3000道爾頓。
13.根據權利要求1-12中任何一項所述的含有合成肽組合物的制劑，其特征在于，所述的制劑用作治療器官的功能不良的藥物。
14.根據權利要求1-12中任何一項所述的含有合成肽組合物的制劑，其特征在于，所述的制劑用作治療免疫衰弱和免疫缺陷的藥物。
15.根據權利要求1-12中任何一項所述的含有合成肽組合物的制劑，其特征在于，所述的制劑用作治療基因缺陷的藥物。
16.根據權利要求1-12中任何一項所述的應用于人和動物且含有合成肽組合物的制劑，其特征在于，所述的制劑用作治療細胞或組織的缺陷的藥物。
17.根據權利要求1-12中任何一項所述的含有合成肽組合物的制劑，其特征在于，所述的制劑用作治療激素功能紊亂的藥物。
18.根據權利要求1-12中任何一項所述的含有合成肽組合物的制劑，其特征在于，所述的制劑用作化妝品。
19.根據權利要求1-12中任何一項所述的含有合成肽組合物的制劑，其特征在于，所述的制劑用作食物補充劑。
20.一種根據權利要求1所述的制劑的生產方法，其特征在于，組織是依靠酶來部分水解，而組織來源于人體，以及部分水解的產物可以通過特殊的酶組合物得到。
21.一種根據權利要求4所述的制劑的生產方法，其特征在于，以適當地通過化學方法而衍生的各個氨基酸排列而形成肽，而新合成的肽在結構和成分上對應于人體組織的肽和肽組合物。
22.一種根據權利要求8所述的制劑的生產方法，其特征在于，肽和肽組合物由微生物得到，而肽在基因原材料上對應于人體組織的肽的核苷酸序列。
23.一種根據權利要求20-22中任何一項所述的制劑的生產方法，其中，組織部分水解或者以適當地通過化學方法而衍生的各個氨基酸排列而形成肽，或者通過基因修飾微生物生成，其特征在于，所述的方法包括以下步驟形成一定比率以及型式上有人體組織特征的氨基酸。
全文摘要
一種適用于人和動物且含有合成肽組合物的制劑，其特征在于，肽組合物來源于人體組織的部分水解；肽組合物從新合成的肽得到，后者的結構和成分與人體組織對應；或者肽組合物是通過基因修飾微生物得到，所產生的肽在它們的基因原材料上對應于人體組織的肽的核苷酸序列。本發明也揭示了這種肽組合物的生產方法。
文檔編號A61Q19/00GK1809373SQ200480017017
公開日2006年7月26日 申請日期2004年6月17日 優先權日2003年6月17日
發明者G·H·克雷特－勞可 申請人:羅樂·瑪利亞·克雷特－勞可