一種納米多層復合止血貼的制作方法
【專利摘要】本實用新型公開了一種納米多層復合止血貼，該止血貼由若干殼聚糖分子層和海藻酸鈉分子層交替排列組成，其中殼聚糖分子層為底層，海藻酸鈉分子層為表層，海藻酸鈉分子層外還有一層支撐層。本實用新型提供的納米多層復合止血貼透明透氣，既可便于觀察傷口愈合又顧及面部美觀，可廣泛應用于外傷、皮膚和黏膜創面出血與創傷的治療，同時，黏性強、操作方便，適用于內臟等軟組織傷口出血及創傷愈合。本實用新型納米多層復合止血貼的原料為天然多糖殼聚糖、海藻酸鈉，來源廣泛，成本低，安全性較高，適于推廣應用。
【專利說明】
一種納米多層復合止血貼
技術領域
[0001] 本實用新型涉及醫用止血材料技術領域，特別是涉及一種納米多層復合止血貼。
【背景技術】
[0002] 過度失血是事故和手術治療過程中致死的主要原因之一，因此研制高效、簡便、快 速的止血劑是傷員、病人救治保障的迫切要求，也是各國止血材料研發的熱點。常規的止血 方法，如人工擠壓、燒灼術和傷口縫合等，經常不能有效止血，還會延長手術時間，也有部分 傷情或組織并不適合用常規的止血方法止血。目前，針對中、重度外傷出血的強效止血材料 已經取得較好進展，例如:QuickClot、Hemcon、Combat Gauze。但是對于臟器出血、術中出血 及體表不規則區出血等局部止血材料的開發尚有待突破。在當前的醫療手術中，當內臟出 現出血時，臨床上多用醫用黏合劑等進行止血和組織黏合。但是被黏合劑粘接的部位容易 出現并發癥，有時甚至需要再次手術。在中小創口止血急救中，目前應用最廣的是止血紗布 和繃帶，這些對體表外傷包扎止血及中小血管破裂局部止血能起到一定療效，但是傷口愈 合過程結的痂會與紗布粘連，后期處理時會引發結痂粘連、出血并發創面感染等系列問題， 給傷患帶來極大痛苦。
[0003] 目前常用的止血產品為美國HemCon Medical Technologies公司生產的HemCon止 血海綿和英國MedTrade Products Limited公司生產的Celox止血顆粒，分別為殼聚糖海綿 和殼聚糖顆粒結構。HemCon、Ce Iox具有很好吸水性和止血功效，但HemCon和Ce Iox不透明、 黏附性差，沒有促燒創傷愈合的功效。HemConXelox的結構形式主要應用在外傷中、重度出 血的止血，不適用于體內外中小創面出血的止血，尤其不適用于內臟軟組織及體表、頌面部 不規則區域傷口創傷出血;且二種材料本身是不可吸收的，都需要清創，給傷患帶來極大痛 苦。常用的燒創傷愈合產品為納米銀醫用抗菌敷料一一愛可欣敷料，是將納米銀附著于醫 用紗布或無紡布的新型抗菌敷料，但愛可欣敷料為紗布或無紡布，不透明、吸水性弱、無黏 性、無止血功效且也需要清創。 【實用新型內容】
[0004] 本實用新型的目的是針對現有技術中存在的技術缺陷，提供一種同時具備止血、 抗感染和促進組織修復功效的納米多層復合止血貼，該止血貼由若干殼聚糖分子層、若干 海藻酸鈉分子層和支撐層組成，支撐層在最外層，殼聚糖分子層和海藻酸鈉分子層交替排 列。
[0005] 該止血貼從外至里依次為支撐層、海藻酸鈉分子層、殼聚糖分子層、海藻酸鈉分子 層、......、殼聚糖分子層。
[0006]所述殼聚糖分子層的厚度為0· l_30nm〇 [0007]所述海藻酸鈉分子層的厚度為0. l_30nm。
[0008] 該止血貼的厚度為2-100μπι。
[0009] 殼聚糖分子層和海藻酸鈉分子層共2-1000層。
[0010] 殼聚糖分子層和海藻酸鈉分子層共2-200層。
[0011] 殼聚糖分子層和海藻酸鈉分子層共20-80層。
[0012] 該止血貼的直徑為0.3-50cm。
[0013] 本實用新型利用功能性兩性多糖分子殼聚糖和海藻酸鈉，通過旋涂輔助的逐層分 子自組裝技術，使殼聚糖的正電荷與海藻酸鈉的負電荷交錯疊加，形成了交錯的納米薄層， 層層薄層相疊加，并附以多糖支撐層，得到的納米多層復合止血貼為具有一定強度的膜狀 產品。該納米多層復合止血貼透明透氣，既可便于觀察傷口愈合又顧及面部美觀，可廣泛應 用于外傷、皮膚和黏膜創面出血與創傷的治療，尤其適合頭、頸、頌面等體表不規則區域，減 輕了患者因創口縫合、拆線所帶來的疼痛和恐懼感，避免了縫線對傷口的刺激及線結反應， 和因縫線引起的"蜈蚣樣"瘢痕。同時，本實用新型的納米多層復合止血貼黏性強、無細胞毒 性、無致敏反應、無皮膚刺激性、操作方便，具備良好的血液、細胞以及組織相容性，可促進 纖維細胞的增殖，顯著提高燒燙傷創面的愈合率，適用于內臟等軟組織傷口創傷出血的治 療。
【附圖說明】
[0014] 圖1所示為本實用新型納米多層復合止血貼的結構剖面示意圖；
[0015] 圖2所示為給予不同止血材料后燒傷小鼠創面愈合時間柱狀圖。
【具體實施方式】
[0016] 本實用新型利用功能多糖殼聚糖和海藻酸鈉，結合旋涂輔助的層層分子自組裝技 術得到納米層，再與多糖支撐層合成厚度可控的新型納米多層復合止血貼。其中，層層分子 自組裝技術（layer-by-layer self-assembly，LBL)是一種新型的多功能表面修飾和材料 構筑技術，尤其是旋涂輔助的層層分子自組裝(spin coating assisted LbL)技術，其原理 是利用具有相反電荷的雙離子或多聚離子聚合物，通過交替沉積、層層自組裝，得到分子級 有序排列的納米多層復合膜材料，這種多層膜材料可應用于制備新的光電、機械及醫療器 件與材料。
[0017] 由于本實用新型的新型納米多層復合止血貼采用了止血功能分子，并結合其合成 工藝的特點，使納米多層復合止血貼具有高黏性、透明透氣、可降解吸收等多個特點。本實 用新型提出的納米多層復合止血貼大小可自行剪裁，不需手術縫合，快速便捷，醫生和傷員 都可通過透明膜層觀察傷口愈合進度。由于殼聚糖等成分的存在，該納米多層復合止血貼 還具備止血、抗感染和促進組織修復等功效來幫助愈合傷口。本實用新型的納米多層復合 止血貼可作為廣泛應用于體內外中小創口，特別是組織器官及體表不規則區域的創傷止血 急救材料，以及促進創傷及燒燙傷創面愈合的敷料。
[0018] 以下結合具體實施例，更具體地說明本實用新型的內容，并對本實用新型作進一 步闡述，但這些實施例絕非對本實用新型進行限制。
[0019] 下述實施例中所用方法如無特別說明均為常規方法。所述百分比濃度如無特別說 明均為質量百分比濃度。
[0020] 本實用新型的納米多層復合止血貼，結構如圖1所示，從外至里依次由支撐層3、海 藻酸鈉分子層2、殼聚糖分子層1、海藻酸鈉分子層2、......、殼聚糖分子層1組成。若干殼聚糖 分子層1和若干海藻酸鈉分子層2交替排列。該納米多層復合止血貼產品呈薄膜狀，透明透 氣，納米層（即殼聚糖分子層1和海藻酸鈉分子層2)每層厚度0.1_30nm，一般2-200層，優選 20-80層，每層厚度基本相同；在實際生產中也可以做更多層(如1000層），層數越多工藝耗 時越長，但對納米多層復合止血貼的性能無本質影響。復合支撐層后的納米多層復合止血 貼厚度為2-100μπι。
[0021]本實用新型的納米多層復合止血貼可以按照以下方法制備得到，包括以下步驟： [0022] 1)旋涂液的配制:將殼聚糖溶解于乙酸質量百分含量為0.1wt%_10wt%的乙酸水 溶液中（乙酸水溶液由乙酸和去離子水配制得到，優選乙酸含量為0.2wt % -5wt %的乙酸水 溶液），得到殼聚糖質量百分濃度為〇.〇5wt%-5wt%的殼聚糖乙酸水溶液（以下稱殼聚糖溶 液A);將海藻酸鈉溶解于去離子水中，得到海藻酸鈉質量百分濃度為0.05wt%-5wt%的海 藻酸鈉水溶液(以下稱海藻酸鈉溶液A)。
[0023] 2)殼聚糖分子層1:將直徑0.3cm-50cm的基底片4固定在旋涂儀上（旋涂儀：廠家 Laurell Technology Corporation，設備型號：WS-650Mz_8NPPB)，在基底片上滴加2yL_lL 殼聚糖溶液A(旋涂液的體積和基底片的直徑有關系，單位面積的基底片上能夠滴加的旋涂 液體積見表1)，轉速300-15000rpm旋涂5-180s，再滴加2yL-lL去離子水(去離子水體積與滴 加的旋涂液殼聚糖溶液A體積可以相同，也可以不同），離心旋涂清洗去除多余殼聚糖溶液 A，清洗1-10次(檢測膜材料表面不同位置點的厚度來判斷是否清洗干凈，各位置點厚度相 同，表面平整，即清洗充分，一般至少需要1-2遍清洗，多次不限），得到附著在基底片上的殼 聚糖分子層1，簡稱K層。
[0024]表1基底片大小與承載旋涂液體積范圍
[0026]基底片選用表面平整的材料，如硅片、玻璃片或塑料片等，直徑或邊長為0.3cm-50 cm，基底片每次可加入的旋涂液體積為2yL-1L。
[0027] 3)海藻酸鈉分子層2:在步驟2)得到的K層1表面滴加2yL-lL海藻酸鈉溶液A(海藻 酸鈉溶液A的滴加體積與步驟2)中殼聚糖溶液A的體積相同），轉速300-15000rpm旋涂5-180s，再滴加2yL-lL去離子水旋涂清洗去除多余海藻酸鈉溶液A，清洗1-10次(這一過程中 對清洗的控制與步驟2)對清洗的控制一致，清洗的控制包括去離子水的用量和清洗次數 等），得到附著在殼聚糖分子層上的海藻酸鈉分子層2,簡稱H層；
[0028]在得到的H層2上繼續重復步驟K層的制備和H層的制備，為以下過程:滴加殼聚糖 溶液A-旋涂-清洗、滴加海藻酸鈉溶液A-旋涂-清洗、……、滴加殼聚糖溶液A-旋涂-清洗、滴 加海藻酸鈉溶液A-旋涂-清洗，逐層交替旋涂組裝，得到逐層依次排列(K層-H層……-K層-H 層，如圖1中所示的間斷線）的附著在基底片上的納米薄層，該納米薄層即納米多層，K層和H 層的厚度分別為〇· l-30nm;
[0029] 4)支撐層:將殼聚糖溶解于乙酸質量百分含量為0.1wt%-10wt%的乙酸水溶液中 (乙酸水溶液由乙酸和去離子水配制得到），得到殼聚糖質量百分濃度為0.1wt%-20wt%的 殼聚糖乙酸水溶液（以下稱殼聚糖溶液B);將步驟3)獲得的納米多層放入模具或旋涂儀中， 在表面的H層上均勻滴加或者旋涂3yL-lL殼聚糖溶液B作為支撐層3(此處的旋涂條件是轉 速300-5000rpm旋涂5-120s)，支撐層液體(殼聚糖溶液B)的滴加體積和基底片的直徑有關 系，基底片上能夠滴加的支撐層液體體積見表2:
[0030] 表2基底片大小與承載支撐層液體溶液體積范圍
[0032] 5)通風干燥2_24h后，從基底片4上揭下具有支撐層的納米多層，即得到本實用新 型呈薄膜狀的與支撐層復合的納米多層。
[0033] 6)最后密封包裝，滅菌，得到納米多層復合止血貼。
[0034] 實施例1、直徑5cm的納米多層復合止血貼
[0035] 用上述方法制備得到直徑5cm的納米多層復合止血貼，其性能為：呈薄膜狀，透明 透氣，納米層厚度每層1.5-5nm，本實施例是40層，復合支撐層后的納米多層復合止血貼產 品厚度8_15μπι。
[0036] 實施例2、直徑IOcm的納米多層復合止血貼
[0037] 用上述方法制備得到直徑IOcm的納米多層復合止血貼，其性能為:呈薄膜狀，透明 透氣，納米層厚度每層〇.5-4nm，本實施例是80層，復合支撐層后的納米多層復合止血貼產 品厚度35-50μηι。
[0038] 實施例3、直徑0.3cm的納米多層復合止血貼
[0039] 用上述方法制備得到直徑0.3cm的納米多層復合止血貼，其性能為：呈薄膜狀，透 明透氣，納米層厚度每層15_30nm，本實施例是200層，復合支撐層后的納米多層復合止血貼 產品厚度5-15μηι。
[0040] 實施例4、直徑50cm的納米多層復合止血貼
[0041] 用上述方法制備得到直徑50cm的納米多層復合止血貼，其性能為:呈薄膜狀，透明 透氣，納米層厚度每層0.6-5nm，本實施例是2層，復合支撐層后的納米多層復合止血貼產品 厚度 2-10μηι。
[0042] 實施例5、直徑30cm的納米多層復合止血貼
[0043]用上述方法制備得到直徑30cm的納米多層復合止血貼，其性能為:呈薄膜狀，透明 透氣，納米層厚度每層0.1-0.8nm，本實施例是20層，復合支撐層后的納米多層復合止血貼 產品厚度2_8μπι。
[0044] 實施例6、直徑3cm的納米多層復合止血貼
[0045] 用上述方法制備直徑3cm的納米多層復合止血貼，其性能為:呈薄膜狀，透明透氣， 納米層厚度每層1.2-8nm，本實施例是100層，復合支撐層后的納米多層復合止血貼產品厚 度65-100ym。
[0046] 本實用新型的納米多層復合止血貼的使用方法和療效
[0047] 將昆明小鼠隨機分為8組，實驗前一日背部剃毛，在每個小鼠背部中線處制作一個 面積2cm2的深Π 度圓形燒燙傷創面。
[0048] 小鼠燒傷創面的處理:除去創面壞死表皮(第一天沒有），創面經碘酒、75%乙醇擦 洗周圍皮膚，無菌紗布輕輕吸干。空白組不給予任何藥物和敷料，創面直接用油紗覆蓋包 扎;實驗組創面給予本實用新型實施例1-6的納米多層復合止血貼(25mmX 25mm)，無菌紗布 覆蓋后包扎固定，隔天換藥一次;對照組給予納米銀醫用抗菌敷料(愛可欣敷料，臨床上效 果較好的產品，購自深圳市愛杰特醫藥科技有限公司，25mmX 25mm)，用無菌紗布覆蓋后包 扎固定，隔天換藥一次。觀測指標包括創面愈合時間、創面愈合率，創面完全上皮化時，計算 創面愈合時間。以實施例1的納米多層復合止血貼為例，結果見圖2和表3,其中圖2中的A、B、 C分別代表空白組、實驗組和對照組。
[0049]表3燒燙傷小鼠不同時間創面愈合率測定結果(均值±標準差）
[0051] 小鼠背部燒燙傷后，創面表皮壞死，給予不同敷料治療后結果顯示:燒燙傷小鼠給 予不同敷料后，在創面愈合時間上，實驗組和對照組的愈合時間較空白組有明顯縮短(實驗 組為21天，而空白組23.5天，P<0.05,圖2)，尤其是本實用新型的納米多層復合止血貼與無 敷料空白組在愈合時間上有非常顯著的差異(實驗組為21天，而空白組28天，P<0.001，圖 2)。燒燙傷小鼠不同時間創面愈合率測定結果顯示:本實用新型的納米多層復合止血貼于 小鼠燙傷后6、10、14、18d的創面愈合率均較無敷料空白組非常顯著提高（實驗組分別為 60%、75%、88%和97% ;空白組則分別為30%、51%、75%和86%;?<0.001，表3)，較愛可 欣敷料對照組創面愈合率也有顯著提高（實驗組分別為60%、75%、88%和97%;對照組則 分別為 47%、65%、85%和92%;卩<0.05，表3)。
[0052] 以上實驗結果表明，本實用新型得到的納米多層復合止血貼，以膜的形式覆蓋創 面，透水透氣性能好，且具有抗菌功效，可充分吸收滲液，促進創面壞死組織的溶脫，可有效 促進小鼠深π度燒燙傷創面愈合。
[0053] 其他實施例也有類似效果，在此不--贅述。
[0054] 以上所述僅是本實用新型的優選實施方式，應當指出的是，對于本技術領域的普 通技術人員來說，在不脫離本實用新型原理的前提下，還可以做出若干改進和潤飾，這些改 進和潤飾也應視為本實用新型的保護范圍。
【主權項】
1. 一種納米多層復合止血貼，其特征在于，該止血貼由若干殼聚糖分子層、若干海藻酸 鈉分子層和支撐層組成，支撐層在最外層，殼聚糖分子層和海藻酸鈉分子層交替排列。2. 根據權利要求1所述納米多層復合止血貼，其特征在于，該止血貼從外至里依次為支 撐層、海藻酸鈉分子層、殼聚糖分子層、海藻酸鈉分子層、殼聚糖分子層。3. 根據權利要求1所述納米多層復合止血貼，其特征在于，所述殼聚糖分子層的厚度為 0.l-30nm〇4. 根據權利要求1所述納米多層復合止血貼，其特征在于，所述海藻酸鈉分子層的厚度 為0·l_30nm。5. 根據權利要求1-4任一所述納米多層復合止血貼，其特征在于，該止血貼的厚度為2-100μL?ο6. 根據權利要求5所述納米多層復合止血貼，其特征在于，殼聚糖分子層和海藻酸鈉分 子層共2-1000層。7. 根據權利要求6所述納米多層復合止血貼，其特征在于，殼聚糖分子層和海藻酸鈉分 子層共2_200層。8. 根據權利要求7所述納米多層復合止血貼，其特征在于，殼聚糖分子層和海藻酸鈉分 子層共20_80層。9. 根據權利要求8所述納米多層復合止血貼，其特征在于，該止血貼的直徑為0.3-50cm〇
【文檔編號】A61L15/42GK205598092SQ201521063105
【公開日】2016年9月28日
【申請日】2015年12月17日
【發明人】甘慧, 竇桂芳, 孟志云, 朱曉霞, 顧若蘭, 吳卓娜, 孫文種, 高磊, 李儉, 鄭穎
【申請人】中國人民解放軍軍事醫學科學院野戰輸血研究所