一種治療腸易激綜合征藥物組合物的制作方法【專利摘要】本發明提供一種治療腸易激綜合征藥物組合物，其包括丁香肉桂組合物、選擇性胃腸道鈣通道拮抗劑，和藥學上可接受的載體；以及該藥物組合物在制備治療或預防腸易激綜合征藥物中的用途。【專利說明】一種治療腸易激綜合征藥物組合物
技術領域：
[0001]本發明屬于制藥領域，具體涉及丁香、肉桂和選擇性胃腸道鈣通道拮抗劑制成的組合物。【
背景技術：
】[0002]腸易激綜合征（Irritablebowelsyndrome,IBS)是一種因腸道高敏感性所致的腸道應激性疾病，目前認為內臟敏感性增高是IBS最重要的病理生理特征之一，是IBS病人癥狀產生的基礎和癥狀多樣化的原因。內臟高敏感性指內臟組織對刺激的感受性增強，一般通過引起各種感覺的容量閾值或壓力閾值對內臟敏感性進行評估，在胃腸道尤為常用的是腔內球囊擴張致敏的腸道表現為疼痛閾值下降，即所謂痛覺過敏甚至正常生理狀態下不引起痛覺的刺激也能誘發疼痛，即痛覺異常。[0003]丁桂油軟膠囊具有溫散寒邪，行氣止痛之功效，適用于腸易激綜合征等疾病的治療。丁桂油軟膠囊由丁香和肉桂兩味中藥的活性成分組成，方中丁香性味辛、溫，功效溫中降逆、補腎助陽；肉桂性味辛、甘、大熱，功效散寒止痛、補火助陽、活血通經、引火歸元;全方共奏溫散寒邪、活血止痛之效。丁桂油軟膠囊尤其適用于腸易激綜合征出現腹痛，遇寒加重，腹瀉，便秘，脘腹脹滿，噯氣，畏寒，排便急迫或脹墜感，便后痛減，舌質淡，舌苔白，脈弦或緊等癥狀。[0004]選擇性作用于胃腸道的鈣離子通道詰抗劑（selectivecalciumchannelblocker，SCCB)，可直接作用于腸道平滑肌細胞，通過阻滯電壓依賴性鈣離子通道，抑制Ca2+內流，降低平滑肌細胞興奮性，防止平滑肌過度收縮運動。代表藥物包括奧替溴銨、匹維溴銨，對胃腸道有較好的解痙作用，能緩解IBS的主要癥狀如腹痛、腹脹等。[0005]5羥基色胺(5-HT)是一種廣泛存在于中樞神經系統和胃腸道的神經遞質。IBS的首要癥狀是腹痛，而5-HT能神經元是痛覺反應體系的重要組成成分，是調節背角神經元興奮性下行通路的化學物質之一，在內臟傷害性刺激的疼痛感知、痛閾調節及中樞鎮痛中均有重要作用。[0006]現有技術尚無關于丁香、肉桂制劑，或者丁香提取物與肉桂提取物，與選擇性胃腸道鈣通道拮抗劑的組合物或聯合用藥物的報道，以及丁桂油軟膠囊等丁桂油制劑與選擇性胃腸道鈣通道拮抗劑的組合物或聯合用藥物治療腸易激綜合征的報道。【
發明內容】[0007]本發明的一個目的在于提供一種治療腸易激綜合征的藥物組合物；[0008]本發明的另一個目的在于提供該藥物組合物在制備治療或預防腸易激綜合征藥物中的用途；[0009]本發明的第三個目的在于提供一種治療腸易激綜合征的藥盒。[0010]本發明的目的是通過如下技術方案實現的：[0011]作為本發明的一個方面，提供一種治療腸易激綜合征藥物組合物，該組合物的由活性成分及可選擇的藥學上可接受的載體制成，其中活性成分的原料由丁香、肉桂和選擇性胃腸道鈣通道拮抗劑組成。其中可選擇是指該組合物可以不添加藥學上可接受的載體，僅由活性成分制成。[0012]所述丁香肉桂組合物(丁香、肉桂的總重量)與選擇性胃腸道鈣通道拮抗劑的重量比為（1~9):1;優選為（1.5~4):1;優選為4:1或1.5:1。所述丁香、肉桂的重量比為(0.2~5):1，優選為1:1。[0013]所述選擇性胃腸道鈣通道拮抗劑選自奧替溴胺或匹維溴胺中的任意一種或兩種。[0014]所述活性成分中的丁香、肉桂的活性部分可以選擇丁香、肉桂粉碎得到，或丁香、肉桂單獨或合并提取得到的提取物;優選將丁香、肉桂分別提取揮發油，并將丁香揮發油、肉桂揮發油混合后得丁桂油及丁香、肉桂混合提取得到的揮發油(在本專利中將丁香、肉桂單獨提取混合后的揮發油及丁香、肉桂混合提取得到的揮發油為丁桂油）。[0015]上述丁桂油，即丁桂油提取物，是以丁香、肉桂為原料按常規提取方法提取的以揮發油為主要成分的提取物;所述丁香、肉桂的重量比為(0.2~5):1，優選為1:1;所述常規提取方法包括水蒸氣蒸餾法、浸提法、回流法、滲漉法、超聲法等;所述提取溶劑包括水或有機溶劑，所述有機溶劑包括石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、丙酮、乙醇或甲醇;優選水蒸汽蒸餾法或石油醚浸提法。[0016]優選的，所述丁桂油中，以重量百分比計，丁香酚和桂皮醛的總含量大于或等于50%，優選為50%-95%，進一步優選為61%-85%，更進一步優選61%、85%。[0017]所述藥物組合物可制備成口服制劑，如片劑、硬膠囊劑、軟膠囊劑、顆粒劑、泡騰劑、混懸劑、散劑、粉劑、滴丸、微球、口服液等。[0018]作為本發明的另一個方面，本發明還提供了上述藥物組合物在制備治療或預防腸易激綜合征藥物中的用途;優選的，在制備治療或預防腸易激綜合癥的腸道敏感癥狀藥物中的用途，或在制備降低腸易激綜合癥患者的5-羥色胺含量藥物中的用途。[0019]作為本發明的另一個方面，本發明進一步提供了一種藥盒，所述藥盒包括治療有效量的丁香、肉桂組合物制劑和選擇性胃腸道鈣通道拮抗劑。[0020]所述選擇性胃腸道鈣通道拮抗劑選自奧替溴胺或匹維溴胺。[0021]所述丁香肉桂組合物制劑是由丁香肉桂粉碎得到的組合物或提取得到的提取物制備成的片劑、硬膠囊劑、軟膠囊劑、顆粒劑、泡騰劑、混懸劑、散劑、粉劑、滴丸、微球或口服液等口服劑型。優選丁香、肉桂單獨或合并提取得到的丁桂油制成的軟膠囊劑。[0022]上述丁桂油，即丁桂油提取物，是以丁香、肉桂為原料按常規提取方法提取的以揮發油為主要成分的提取物;所述丁香、肉桂的重量比為(0.2~5):1，優選為1:1;所述常規提取方法包括水蒸氣蒸餾法、浸提法、回流法、滲漉法、超聲法等;所述提取溶劑包括水或有機溶劑，所述有機溶劑包括石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、丙酮、乙醇或甲醇;優選水蒸汽蒸餾法或石油醚浸提法。[0023]優選的，所述丁桂油中，以重量百分比計，丁香酚和桂皮醛的總含量大于或等于50%，優選為50%-95%，進一步優選為61%-85%，更進一步優選61%、85%。[0024]本發明所述的選擇性胃腸道鈣通道拮抗劑，又稱選擇性胃腸道鈣通道拮抗劑、選擇性胃腸道鈣通道阻斷劑、選擇性胃腸道鈣通道干擾劑等;本發明所述選擇性胃腸道鈣通道拮抗劑可作用于胃腸道。[0025]本發明所述"有效量"或"治療有效量"是指無毒性，但足夠量的提供所需的作用的藥物或藥劑。在本發明的聯合治療中，聯合中一種成分的"有效量"是指該成分在和其他成分聯合應用時有效提供所需效應的量。"有效量"會因受試者的不同而不同，依據年齡和個體的一般情況，特定的活性藥物等等。因此，不可能總是指精確的"有效量"，然而，任何個體病例中合適的"有效量"可以由本領域普通技術人員應用常規的實驗方法來測定。[0026]本發明所述"治療"指癥狀的嚴重程度減輕和/或頻率減少，癥狀和/或引起癥狀的原因的消除，癥狀的發生和/或它們引起癥狀的原因的預防，損害的改善或糾正。[0027]本發明所述"聯合給藥"指的是以某種給藥方案將藥物組合給予對象，如丁香肉桂組合物與選擇性胃腸道鈣通道拮抗劑以不同規格單位劑量同時、分別或依次給藥。[0028]本發明所述可藥用載體包括填充劑、崩解劑、潤滑劑、助懸劑、粘合劑、甜味劑、矯味劑、防腐劑、基質等。填充劑包括:淀粉、預膠化淀粉、乳糖、甘露醇、甲殼素、微晶纖維素、蔗糖等;崩解劑包括:淀粉、預膠化淀粉、微晶纖維素、羧甲基淀粉鈉、交聯聚乙烯吡咯烷酮、低取代羥丙纖維素、交聯羧甲基纖維素鈉等;潤滑劑包括:硬脂酸鎂、十二烷基硫酸鈉、滑石粉、二氧化硅等;助懸劑包括:聚乙烯吡咯烷酮、微晶纖維素、蔗糖、瓊脂、羥丙基甲基纖維素等;粘合劑包括:淀粉漿、聚乙烯吡咯烷酮、羥丙基甲基纖維素等;甜味劑包括:糖精鈉、阿斯帕坦、蔗糖、甜蜜素、甘草次酸等;矯味劑包括:甜味劑及各種香精;防腐劑包括:尼泊金類、苯甲酸、苯甲酸鈉、山梨酸及其鹽類、苯扎溴銨、醋酸氯乙定、桉葉油等;基質包括:PEG6000，PEG4000,蟲蠟等。[0029]作為本發明的另一個方面，本發明進一步提供，一種中藥組合物在制備增效選擇性胃腸道鈣通道拮抗劑治療腸易激綜合癥藥物中的應用，所述中藥組合物的原料藥由丁香、肉桂組成，丁香、肉桂的重量比為(0.2~5):1。[0030]所述中藥組合物可以制備成臨床可接受的劑型，制備方法包括丁香肉桂粉碎得到的組合物或提取得到的提取物制備成的片劑、硬膠囊劑、軟膠囊劑、顆粒劑、泡騰劑、混懸劑、散劑、粉劑、滴丸、微球或口服液等口服劑型。優選丁香、肉桂單獨或合并提取得到的丁桂油制成的軟膠囊劑。所述丁桂油，即丁桂油提取物，是以丁香、肉桂為原料按常規提取方法提取的以揮發油為主要成分的提取物;所述丁香、肉桂的重量比為(0.2~5):1，優選為1:1;所述常規提取方法包括水蒸氣蒸餾法、浸提法、回流法、滲漉法、超聲法等;所述提取溶劑包括水或有機溶劑，所述有機溶劑包括石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、丙酮、乙醇或甲醇;優選水蒸汽蒸餾法或石油醚浸提法。優選的，所述丁桂油中，以重量百分比計，丁香酚和桂皮醛的總含量大于或等于50%，優選為50%-95%，進一步優選為61%-85%，更進一步優選61%、85%〇[0031]本發明使用丁香肉桂組合物(優選丁桂油）以及選擇性胃腸道鈣通道拮抗劑的聯用/藥物組合物，一方面對于腸易激綜合癥的治療實現了協同增效的作用，顯著提高了對腸易激綜合征的治療效果，尤其對于降低腸道敏感性、降低患者體內的5羥色胺水平具有顯著作用；另一方面可有效降低選擇性胃腸道鈣通道拮抗劑的使用劑量，降低了其副作用，同時也可降低丁桂油的使用劑量。本發明的藥物組合物在實現治療效果協同增效的同時，可有效降低藥物使用劑量，減輕藥品副作用、降低治療藥品費用，取得了預料不到的技術進步。[0032]丁桂油軟膠囊與選擇性胃腸道鈣通道拮抗劑的主要代表藥物奧替溴銨、匹維溴胺按特定比例的藥物組合物具有顯著的治療腸易激綜合征的作用，優于單用組(P〈〇.〇lSp〈0.05)，并且能顯著降低丁桂油軟膠囊與奧替溴銨、匹維溴胺的劑量。本發明丁桂油軟膠囊與選擇性胃腸道鈣通道拮抗劑的藥物組合物對于腸易激綜合征的治療具有協同增效的作用。【具體實施方式】[0033]實施例1丁桂油的制備[0034]取丁香375g、肉桂375g，加8倍量水，隔水蒸餾8小時，收集揮發油，冷藏24小時，除去水分，共制36.Oml丁桂油。經測定，丁桂油中丁香酚與桂皮醛的總含量占丁桂油的85%。[0035]丁香酚檢測方法：[0036]色譜條件:PEG-20M彈性石英毛細管柱(251^0.20_\0.33以111)，柱溫175°(：^10檢測器，載氣:N2，流速:Iml·mirr1分流進樣，分流比:45:1，進樣量IyL。[0037]對照品溶液的制備:取丁香酚對照品約IOmg，精密稱定，置5mL量瓶中，精密加入正己烷溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。[0038]供試品溶液的制備:取實施例1制備的丁桂油約50mg，精密稱定，置25mL量瓶中，精密加入正己烷溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。[0039]內標液的制備：取聯苯10mg，置25mL量瓶中，精密加入正己烷溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為內標溶液。[0040]線性關系的考察:精密稱取丁香酚對照品102.70mg，置IOmL容量瓶中，加正己烷溶解并稀釋至刻度，分別精密量取〇.5、1.0、2.0、3.0、5.OmL于25mL的容量瓶中，加正己烷稀釋至刻度。分別精密吸取l.OyL，注入氣相色譜儀中，按上述色譜條件進行測定。以注入丁香酚量(X)為橫坐標，相應的對照品峰面積(y)為縱坐標，進行線性回歸，得到回歸方程。[0041]將供試品溶液按氣相色譜條件進行檢測，將檢測值帶入回歸方程計算得到實施例1制備的丁桂油中的丁香酚含量。[0042]桂皮醛檢測方法：[0043]色譜條件：2mX3mm玻璃柱（日本島津）固定液：2%0V-17擔體：60~80目chromosorbw(AW-DMCS)，載體：高純氮，流速:50ml/min，柱溫：175°C汽化室溫度220°C，檢測室溫度180°C，檢測器FID。[0044]對照品溶液的制備:精密稱取桂皮醛17.5ml于25ml量瓶中，CCU溶解溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。[0045]供試品溶液的制備:精密稱取實施例1制備的丁桂油25mg于50ml量瓶中，用CCl4溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。[0046]線性關系考察:6只IOml量瓶編號，依次加入對照品溶液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml，用CCl4稀釋互刻度，搖勻。分別精密吸取l.OyL，注入氣相色譜儀中，按步驟2所述色譜條件進行檢測，以濃度(X)對峰面積(Y)進行線性回歸，得回歸方程。[0047]將供試品溶液按氣相色譜條件進行檢測，將檢測值帶入回歸方程計算得到實施例1制備的丁桂油中的桂皮醛含量。[0048]實施例2丁桂油的制備[0049]按1:1比例，取丁香、肉桂藥材共750克，加6倍量石油醚50°C浸提4h，濾過，藥渣再加4倍量石油醚50°C浸提4h，濾過，合并石油醚提取液，回收石油醚，共制46.8ml丁桂油。參照實施例1方法進行測定，丁桂油中丁香酚與桂皮醛的總含量占丁桂油的61%。[0050]實施例3丁桂油軟膠囊的制備[0051]取實施例1制備的丁桂油3.6ml(25°C相對密度為1.10g/ml)與36.4ml大豆油混勻，備用。取明膠15g、甘油6g、單糖漿Ig，加去離子水15g混勻，加熱到60~70°C，保溫0.5小時，加入對羥基苯甲酸甲酯〇.〇15g、對羥基苯甲酸乙酯0.0075g，攪拌，抽真空，70°C保溫20分鐘，制成囊材。取丁桂油與大豆油的混合物，用囊材采用壓制法制成軟膠囊，檢驗，分裝，即得軟膠囊100粒，每粒裝〇.4g，含丁桂油約0.04g)。[0052]實施例4丁桂油片劑的制備[0053]取實施例2制備的丁桂油3m1，加微粉硅膠2.5mg，乳糖5.5mg，微晶纖維素5.3mg，糖粉3.Omg，用10%PVP-k30水溶液制粒，外加低取代羥丙基纖維素0.5mg和硬酯酸鎂0.2mg，壓片，即得。[0054]實施例5丁桂油顆粒劑的制備[0055]取實施例1制備的丁桂油5ml，并溶于少量乙醇中，備用。取40gi3_環糊精，加入300ml蒸餾水，水浴加熱溶解，溫度降至35°C時加入揮發油乙醇溶液，混合均勻，超聲包合30min，冷藏過夜，抽濾，沉淀于38°C低溫干燥，得揮發油β-環糊精包合物。將β-環糊精包合物與適量糊精混合，采用90%乙醇為潤濕劑制軟材，過20目篩進行濕法制粒，65°C干燥，整粒，即得。[0056]實施例6丁桂油軟膠囊的制備[0057]取實施例1制備的丁桂油16g與64g大豆油混勻，備用。取明膠18g、甘油5g、單糖漿Ig，加去離子水15g混勻，加熱到65°C，保溫0.5小時，加入對羥基苯甲酸甲酯0.02g、對羥基苯甲酸乙酯O.OOlg，攪拌，抽真空，75°C保溫20分鐘，制成囊材。取丁桂油與大豆油的混合物，用囊材采用壓制法制成軟膠囊，檢驗，分裝，即得軟膠囊100粒，每粒裝〇.4g，含丁桂油約〇.16g)[0058]實施例7丁桂油軟膠囊與奧替溴銨的聯合用藥物/復合包裝藥盒的制備[0059]取實施例6制備的丁桂油軟膠囊，每粒含丁桂油約0.16g。[0060]奧替溴銨片，每片含奧替溴銨40mg。[0061]復合包裝形式:該包裝中含丁桂油片劑30粒、奧替溴銨片30片。[0062]實施例8丁桂油與匹維溴銨的復方片劑[0063]按實施例1方法制備丁桂油90g，并取匹維溴銨原料藥10g，備用。參照實施例5的方法，僅是將實施例五中20目篩替換為50目篩，制備β-環糊精包合的丁桂油提取物顆粒。將丁桂油提取物顆粒與匹維溴銨原料藥與適量藥用淀粉、微晶纖維素、二氧化硅混合，壓制成500片。[0064]實施例9丁桂油與匹維溴銨的復方膠囊劑[0065]按實施例1方法制備丁桂油80g，并取匹維溴銨原料藥20g，按常規制劑工藝制成膠囊劑。[0066]實施例10丁桂油與匹維溴銨的復方顆粒劑[0067]按實施例1方法制備丁桂油60g，并取匹維溴銨原料藥40g，按常規制劑工藝制成顆粒劑。[0068]實施例11丁桂油與奧替溴銨的復方片劑[0069]按實施例1方法制備丁桂油90g，并取奧替溴銨原料藥10g，備用。參照實施例5的方法，僅是將實施例五中20目篩替換為50目篩，制備β-環糊精包合的丁桂油提取物顆粒。將丁桂油提取物顆粒與奧替溴銨原料藥與適量藥用淀粉、微晶纖維素、二氧化硅混合，壓制成500片。[0070]實施例12丁桂油與奧替溴銨的復方膠囊劑[0071]按實施例1方法制備丁桂油80g，并取奧替溴銨原料藥20g，按常規制劑工藝制成膠囊劑。[0072]實施例13丁桂油與奧替溴銨的復方顆粒劑[0073]按實施例1方法制備丁桂油60g，并取奧替溴銨原料藥40g，按常規制劑工藝制成顆粒劑。[0074]實驗例1對內臟高敏感性IBS大鼠模型行為學(腸道敏感性)實驗[0075]1.實驗動物[0076]清潔級新生SD大鼠70只，雌雄各半，體質量（10±2)g，年齡8d。由四川省中醫藥科學院實驗動物中心提供，合格證號:SCXK(JII19)。[0077]2.藥品、主要試劑及儀器[0078]2.1給藥樣品[0079]丁桂油軟膠囊(0.4g/粒）：成人用劑量為6粒/天，按實施例3的方法制備獲得。取軟膠囊內容物，用〇.5%CMC-Na配制，放置冰箱保存備用。[0080]奧替溴銨(40mg/片）：成人用劑量為2-6片/天，由晉城海斯制藥有限公司提供，批號H20126490。將片劑用研缽研細，用0.5%CMC-Na配制，放置冰箱保存備用。[0081]匹維溴銨（50mg/片）：成人用劑量為3片/天，由AbbottHealthcareSAS(法國）提供，批號611259。將片劑用研缽研細，用0.5%CMC配制，放置冰箱保存備用。丁桂油軟膠囊與奧替溴銨，以及丁桂油軟膠囊與匹維溴銨聯合用藥物/藥物組合物的配比見表1、2所示;給藥劑量和濃度分別以丁桂油、奧替溴銨、匹維溴銨計算。[0082]2.2主要試劑及儀器[0083]5-m酶聯免疫吸附測試（定量)試劑盒，美國BPBBiomedicals公司提供，生產批號：QRCT-22113EIA-TL;[0084]酶標儀為BIO·RAD550型；[0085]離心機為LDZ4-0.8;[0086]恒溫箱為隔水式恒溫培養箱CNP-9260型。[0087]3.實驗方法及結果[0088]3.1動物分組及給藥[0089]按體重隨機分為空白對照組、模型對照組、丁桂油軟膠囊組、奧替溴銨組、匹維溴銨組和丁桂油軟膠囊+奧替溴銨1、2組、丁桂油軟膠囊+匹維溴銨1、2組，每組10只動物。空白對照組、模型對照組給予等量〇.5%CMC-Na。每只大鼠每天給藥1次，均于大鼠在刺激停止3周后連續給藥至第12周。[0090]3.2試驗方法[0091]3.2.IIBS模型的建立[0092]采用醋酸結腸慢性刺激法造成腸道高敏感性的IBS大鼠模型。新生SD大鼠每10只與其母鼠共同養在同一籠內，發育至25d后，將母鼠與幼鼠分離。分離后的大鼠每4只一籠，給予足夠的食物和水分。除空白組外的所有新生大鼠從第8天(第2周)開始，在8~28d(第2~4周）每天給予直腸內醋酸刺激:將石蠟油潤滑后的連續硬膜外導管(直徑Imm)經肛門插入2cm，注入0.5%的醋酸0.5ml。從第28天(第5周)后的3周內，不進行任何實驗操作。[0093]3.2.2腸道敏感性評估[0094]第12周后進行大鼠的腹部回縮反射(AWR)評估:大鼠乙醚麻醉后將石蠟油潤滑后的動脈栓子清除術導管經肛門插入，氣囊末端距離肛門lcm，用膠布把導管和大鼠尾巴根部纏在一起以固定氣囊。大鼠蘇醒后，將其放在特制的透明塑料籠(20cmX6cmX8cm)內，大鼠在此籠內只能前后運動，不能轉身。30min后待大鼠適應環境后，逐漸注水擴張腸道，分別觀察引起大鼠腹部隆起以及背部拱起的容量閾值，進行行為評估。每次直腸擴張持續20s。為得到準確的評估結果，對每一閾值都重復進行3次，數據取均值，結果見表1。[0095]氣囊容量與直徑的對應關系：Oml容量對應于2mm直徑;0.5ml對應于8.5mm;1.0ml對應于12mm;1.5ml對應于13mm。[0096]表1各組大鼠腹部隆起和背部拱起的擴張容納量閾值對比士gD:，n=10)[0098]與空白對照組相比：#P〈0.01，*P〈0.05;與模型對照組比，P〈0.01[0099]造模后，與空白組比較，模型組能引起大鼠腹部隆起和背部拱起的擴張容量閾值明顯降低，具有統計學意義(P〈〇.01)，說明醋酸結腸慢性刺激法造成的IBS大鼠模型的腸道敏感性增高。給藥后，單用組與模型組的差異無統計學意義(P>〇.05)，而聯合用藥的丁桂油軟膠囊+奧替溴銨/匹維溴銨1、2組均能顯著改善IBS模型大鼠腹部隆起和背部拱起的擴張容量閾值(Ρ〈〇·〇1，〇·〇5)。[0100]3.2.3血清5-輕色胺(5-ΗΤ)含量測定[0101]第12周后時，禁食12h，取抗凝靜脈血3ml，并在4°C冰箱中放置40min，3500r/min離心15min，取上清液，滴入100μΙ標準品和標本于相應的微孔板中，包括一個孔內加入IOOul的樣品稀釋液作為試劑空白以調零。在各個孔中加50μ1酶標試劑，輕輕振蕩混合5min;37°C孵育60min，通過倒調板內容物，把孵育混合物移走適當的廢棄容器中，用去離子水洗滌且倒空微孔板5次，在吸紙上敲打微孔板去除剩余水滴，然后在每孔中加入A、B液各50μ1，輕輕混合5min，37°C孵育15min;又在每孔中加入50μ1終止液終止反應。接著振蕩30min，確定所有的藍色完全地變成黃色，最后使用酶標儀，在30min內，用空白孔在450nm條件下讀取光密度值，通過內插法可從標準曲線上得到結果，結果見表2。[0102]表2各組大鼠血清5-HT含量對比（^士SD,n=10)[0104]與空白對照組相比：#P〈0.01，*P〈0.05;與模型對照組比：##P〈0.01[0105]造模后，與空白組比較，模型組能顯著引起大鼠血清5-HT的升高，差異具有統計學意義(P〈0.01)。給藥后，單用組與模型組的差異無統計學意義(P>0.05)，而聯合用藥的丁桂油軟膠囊+奧替溴銨/匹維溴銨1、2組均能顯著降低IBS模型大鼠血清5-HT的水平(與模型組比較，P〈〇.01、〇.05)至恢復正常(與空白組無顯著性差異，P>0.05)。[0106]4結論[0107]丁桂油軟膠囊與選擇性胃腸道|丐通道詰抗劑（selectivecalciumchannelblocker，SCCB)主要包括奧替溴銨、匹維溴銨在重量配比1:1~9:1的范圍內，優選1.5:1-4:1，尤其是重量配比為4:1、1.5:1聯用后能顯著改善IBS模型大鼠的行為學和5-HT含量，并且能降低丁桂油軟膠囊與選擇性胃腸道鈣通道拮抗劑的使用劑量。說明丁桂油軟膠囊與選擇性胃腸道鈣通道拮抗劑在重量配比1:1~9:1的范圍內，優選1.5:1-4:1，尤其是重量配比為4:1、1.5:1聯用，能顯著增加治療IBS的作用，并降低藥物使用劑量。【主權項】1.一種治療腸易激綜合征藥物組合物，該組合物的原料由活性成分及可選擇性添加的藥學上可接受的載體制成，其中活性成分的原料由丁香、肉桂和選擇性胃腸道鈣通道拮抗劑組成。2.如權利要求1所述的藥物組合物，其特征在于，所述丁香、肉桂的重量比為(0.2~5):1;丁香、肉桂的總重量與選擇性胃腸道鈣通道拮抗劑的重量比為（1~9):1;優選為（1.5~4):1;更有選4:1或1.5:1。3.如權利要求1所述的藥物組合物，其特征在于，所述選擇性胃腸道鈣通道拮抗劑選自奧替溴胺、匹維溴胺中的一種或兩種。4.如權利要求1所述的藥物組合物，其中丁香、肉桂直接作為活性成分，或丁香、肉桂單獨或合并提取得到的提取物作為活性成分;優選丁香、肉桂單獨或合并提取得到的揮發油作為活性成分。5.如權利要求1~4任一項所述藥物組合物在制備治療或預防腸易激綜合征藥物中的用途;優選在制備治療或預防腸易激綜合癥的腸道敏感癥狀藥物中的用途，或在制備降低腸易激綜合癥患者的5-羥色胺含量藥物中的用途。6.-種中藥組合物在制備增效選擇性胃腸道鈣通道拮抗劑治療腸易激綜合癥藥物中的應用，所述中藥組合物的原料藥由丁香、肉桂組成，丁香、肉桂的重量比為(0.2~5):1;優選的選擇性胃腸道鈣通道拮抗劑制劑選自奧替溴胺、匹維溴胺中的一種或兩種制成的制劑。7.-種藥盒，其特征在于，所述藥盒包括治療有效量的丁香肉桂組合物制劑和選擇性胃腸道鈣通道拮抗劑制劑。8.如權利要求7所述的藥盒，其特征在于，所述選擇性胃腸道鈣通道拮抗劑制劑選自奧替溴胺、匹維溴胺中的一種或兩種制成的制劑。9.如權利要求7所述的藥盒，其特征在于，所述丁香肉桂組合物制劑是由丁香、肉桂粉碎得到的組合物或提取得到的提取物制備成的片劑、硬膠囊劑、軟膠囊劑、顆粒劑、泡騰劑、混懸劑、散劑、粉劑、滴丸、微球或口服液;所述丁香肉桂組合物制劑優選為丁香、肉桂單獨或合并提取得到的丁桂油制備的軟膠囊劑。10.如權利要求9所述的藥盒，其特征在于，所述丁桂油中，以重量百分比計，丁香酚和桂皮醛的總含量大于或等于50%，優選為50%-95%，進一步優選為61%-85%，更進一步優選61%、85%。【文檔編號】A61K31/245GK106074714SQ201610438149【公開日】2016年11月9日【申請日】2016年6月17日【發明人】王國明,劉紹勇,薛東升,李坤,方靜【申請人】上海凱寶藥業股份有限公司