一種乙酰天麻素衍生物的新用圖
【專利摘要】本發明公開了一種乙酰天麻素衍生物的新用途，所述的乙酰天麻素衍生物在制備預防和/或治療阿爾茨海默病藥物中的應用。所述的乙酰天麻素衍生物如下式所示： 本發明所示的乙酰天麻素衍生物對阿爾茨海默病果蠅嗅覺學習記憶有明顯的改善作用，該用途屬于首次公開，具備突出的實質性特點。該物質可應用于制備防治阿爾茨海默病藥物且顯示良好的市場應用前景。
【專利說明】
一種乙酰天麻素衍生物的新用途
技術領域
[0001] 本發明屬于醫藥技術領域，具體涉及一種乙酰天麻素衍生物的新用途。
【背景技術】
[0002] 阿爾茨海默氏病（Alzheimeiy s disease，AD)是主要在老年人中流行的一種慢 性神經變性疾病。多數情況下，AD在65歲以上的老年人中發病，偶見中年發生的早發性 AD2006年，AD累及了全球2660萬人患病。預計到2050年全球每85人中將有1名AD患者，全 球受累人數超過 1 億（1〇,588 萬人，見 Brookmeyer，R ;Johnson，E ;Ziegler_Graham，K ; Arrighi,HM.2006prevalence estimate forecasting the global burden of Alzheimer7 s disease.Alzheimer7 s and Dementia.2007 ；3(3) :186-91.)〇
[0003] AD是以腦細胞丟失為特征的一種進展性疾病，導致嚴重癡呆和死亡。雖然每個人 AD的病程均有不同，但AD患者有許多共同的癥狀。最早觀察到的癥狀往往被誤以為是與 年齡有關的憂慮和緊張；早期階段最常見的癥狀是學習、記憶和認知障礙；隨著病情的進 展，產生的癥狀包括思維混亂，易怒和攻擊性，情緒波動，語言破裂，長期記憶喪失；晚期逐 漸發生身體功能喪失，最終導致死亡。當懷疑患有AD時，通常是根據行為評估，認知測試， 如果可能，經腦部掃描確認診斷（Waldemar G，Dubois B，Emre M，et al.Recommendations for the diagnosis and management of Alzheimer7 s disease and other disorders associated with dementia ：EFNS guideline.Eur J Neurol.2007 ；14(I) :el-26.)〇AD 患者個人的預后難以評估，據統計，AD患者的平均預期壽命約為七年，只有不到百分之三 的人活過十四年。
[0004] 現階段，較多研究已經證實，神經細胞以β-淀粉樣蛋白（β-amyloid protein，A β)沉積為核心形成的老年斑（SP)構成了AD的主要病理特征。腦脊液中AM2蛋白含量是 AD診斷的重要生物標志物，由于AM2蛋白在腦細胞上的沉積，可導致患者腦脊液AM2 蛋白含量顯著降低，這一指標具有顯著的特異性，且能夠進行合理解釋，所以可作為治療老 年癡呆癥效果的指標。
[0005] 天麻素對抗阿爾茨海默病成為近年藥物研究開發的熱點，在一篇文獻中，昆明醫 科大學的研究人員構建β-淀粉樣肽（1-40)(Αβ1-40)聯合D-半乳糖(D-gal)致癡呆模 型。探討了天麻素抗氧化的分子機制。他們的結論是天麻素影響了癡呆模型大鼠皮質部分 內源性巰醇抗氧化物(酶)如GSH和GR的含量，抑制了H 2O2的產生，影響了P-p38的表達， 對改善學習記憶能力，對抗大鼠神經系統的退行性變化有一定的作用(傅希玥李守民王婷 婷李興國孫俊陸地，天麻素對老年癡呆動物模型的抗氧化作用及其機制，解剖學報2010 年41卷04期485-490頁）。另一篇用Morris水迷宮實驗檢測天麻素對海馬內Αβ1-40 注射AD模型大鼠學習記憶的改善作用，結果證明了天麻素對海馬內Αβ1-40注射AD模 型大鼠 DEl學習記憶有改善作用（柳星汪萌芽，天麻素對海馬內Αβ_(1-40)注射阿爾茨 海默病模型大鼠學習記憶的改善作用。《中國臨床藥理學與治療學》2012年04期）。乙酰 天麻素在芐醇位的衍生物卻鮮有對抗阿爾茨海默病方面的報道。
【發明內容】
[0006] 本發明的目的在于提供一種乙酰天麻素衍生物的新用途。
[0007] 本發明的目的是這樣實現的，所述的乙酰天麻素衍生物在制備預防和/或治療阿 爾茨海默病藥物中的應用。
[0008] 本發明所述的乙酰天麻素衍生物可以有效降低β-淀粉樣蛋白沉積，提高患者腦 脊液ΑΜ2蛋白含量，所述的乙酰天麻素衍生物對基于AM2蛋白致病AD果蠅嗅覺學習記憶 有明顯的改善作用，可見，乙酰天麻素衍生物能夠有效改善由淀粉樣蛋白沉積引起的阿 爾茨海默病癥狀。
【附圖說明】
[0009] 圖1為給藥描述示意圖； 圖2為實驗組與對照組的行為指數平均值示意圖。
【具體實施方式】
[0010] 下面結合實施例對本發明作進一步的說明，但不以任何方式對本發明加以限制， 基于本發明教導所作的任何變換或替換，均屬于本發明的保護范圍。
[0011] 本發明所述的乙酰天麻素衍生物的新用途為所述的乙酰天麻素衍生物在制備預 防和/或治療阿爾茨海默病藥物中的應用。
[0012] 所述的乙酰天麻素衍生物如下式所示：
其中，R為具有生物活性的化合物殘基。
[0014] 本發明所述的乙酰天麻素衍生物的新用途中的乙酰天麻素衍生物的制劑為所述 的乙酰天麻素衍生物中加入藥學上可接受的輔料制備得到的口服制劑或注射制劑。
[0015] 所述的注射制劑的注射方式為肌肉注射。
[0016] 所述的口服制劑為片劑、口服液、丸劑、膠囊劑、顆粒劑、膏劑、滴丸劑、糖漿劑、散 劑、沖劑或酊劑。
[0017] 所述的注射劑為粉針劑或注射液。
[0018] 所述的口服制劑為片劑、口服液、丸劑、膠囊劑、顆粒劑、膏劑、滴丸劑、糖漿劑、散 劑、沖劑或酊劑。
[0019] 所述的注射劑為粉針劑或注射液。
[0020] 本發明提供了一種乙酰天麻素衍生物在制備防治阿爾茨海默病藥物的用途。該用 途是一種本發明所示的乙酰天麻素衍生物用于制備防治阿爾茨海默病藥物的應用。本發明 通過試驗研究了乙酰天麻素衍生物對改善基于AM2蛋白致病AD果蠅嗅覺學習記憶的的影 響，其中，接受KPC-3000157、KPC-3000159、KPC-3000161、KPC-3000162、KPC-3000165、KPC-3000170、KPC-3000172治療的實驗動物在致病AD果蠅嗅覺學習記憶模型中的行為指數分別 達到48.8、46.2、53.6、47.2、51.8、47.2、51.2,與陽性藥美金剛對照組相當，實驗結果表明 本發明所示乙酰天麻素衍生物具有改善阿爾茨海默病癥狀的作用;本發明通過人體實驗研 究了如式I所示的乙酰天麻素衍生物對人體腦脊液的AM2蛋白含量的影響，其中，接受 KPC-3000157、KPC-3000159、KPC-3000161、KPC-3000162、KPC-3000165、KPC-3000170、KPC-3000172治療的患者腦脊液的AM2蛋白含量分別升高了305.6 pg/ml、298.2pg/ml、 309 · 9pg/ml、295 · 6pg/ml、305 · 2pg/ml、297 · 7 pg/ml、307 · 4 pg/ml，實驗結果表明如式I所 示的乙酰天麻素衍生物可以提高患者腦脊液AM2蛋白含量。由此可見，本發明所示的乙 酰天麻素衍生物可以有效降低β-淀粉樣蛋白沉積，提高患者腦脊液AM2蛋白含量，也即 說明阻抗了 AD的發展速度；同時，本發明所示的乙酰天麻素衍生物對基于AM2蛋白致病 AD果蠅嗅覺學習記憶有明顯的改善作用，因此，本發明所示的乙酰天麻素衍生物對阿爾茨 海默病具有較好的治療作用，為臨床治療阿爾茨海默病提供了新的選擇。
[0021] 本發明所示的乙酰天麻素衍生物在制備防治阿爾茨海默病藥物的用途中所用試 劑、原料藥或輔料均可由市場購得。
[0022]下面以具體實施案例對本發明作進一步說明： 實施例1所示乙酰天麻素衍生物改善基于ΑΜ2蛋白致病AD果蠅嗅覺學習記憶的研究 表1實施例1涉及化合物
實驗材料及方法： 果繩品系： wlll8(is〇CJl)作為實驗的對照組背景果蠅，為方便起見在報告中用"2U"代表。致病 性AM2蛋白（UAS- AM2; referred as H29.3)通過雜交在全腦表達的啟動子Gal4 line, elav-GAL4cl55 (P35)與攜帶AM2的UAS品系獲得。因此，行為實驗疾病果蠅通過以 下所示雜交獲得： 對照組(健康)果蠅： 疾病組果蠅：
果蠅飼養： 所有測試果繩的親本均在恒溫24°C,恒濕42% RH(Relative humidity)的繩房飼養和 繁殖。果蠅羽化后的第一天將對照組果蠅及疾病組果蠅和待喂藥組果蠅通過二氧化碳麻醉 之后，挑選正確性狀的果蠅在含有食物的玻璃管中。在給藥階段，所有測試果蠅在28度恒溫 和42%恒濕的保溫箱內飼養，以保證果蠅吃藥的效率。每日果蠅喂藥4小時，從挑出果蠅的第 二天一直喂藥到第8天。
[0023] 給藥描述： 見圖1，所喂藥物在挑蠅第二天配制并與配制當天給果蠅喂藥。化合物為干粉狀，用 100%DMS0根據分子量在室溫條件下將其溶解，得到濃度為IOmM的母液，并避光保存在4度冰 箱。在配制工作液時，用含有4%的蔗糖將IOmM母液稀釋至100 μΜ。另外，對照組果蠅喂含有 1%DMS0的糖水。對于每個行為指數(Performance Index)，需要有5管果繩組，每管中含有約 100只果繩。
[0024] 巴普洛夫嗅覺學習測試簡述： 實驗在恒溫25°C、恒濕70%，避光的行為房中進行，方法可見參考文獻(Tully et al， 1985; Tully et al, 1994)〇
[0025] 1)在訓練階段，將大約100只左右的果蠅裝入安置有銅網交叉電極的訓練管，先 后通入OCT和MCH兩種氣味各60 s，中間間隔45 s的新鮮空氣。在通入第一種氣味(CS+)的 同時給予果蠅60 V的脈沖電擊刺激(US，脈沖時長1.5 s，間隔3.5 s)。通入第二種氣味 (CS-)時不給予電擊。如此完成一個訓練周期。
[0026] 2)在瞬時記憶（學習）能力測試中，完成一個訓練周期的果蠅被立即轉移到Τ'- Maze 的選擇點， 同時從相對的兩個方向通入 CS+和CS-。經過 2 min 的選擇后兩側的果繩被分 別收集，麻醉或處死后進行計數。行為指數(Performance index，PI)的計算公式如下： PI - [(CS ?}~(CS 4')1/[(CS (CS 4 i] X IOO -分別使用OCT和MCH作為CS+進行訓練和測試，得到的五個PI的平均值作為一次實驗 的PI使用。PI=O表示測試中果蠅對于兩種氣味的選擇為50:50,即沒有形成記憶;PI=IOO表 示測試中果蠅全部逃避伴隨電擊的氣味，即完美記憶。對照果蠅需為相同遺傳背景和年齡。 [0027]數據分析： 數據分析和圖形展示通過使用excel 2007完成。
[0028]結果： 見圖2,橫軸代表不同的基因型和喂藥組，而縱軸代表行為指數的高低，即短時記憶的 高低。不同的代碼代表的意義如下所述： 〃2U*H29.3〃 代表基因型對照組(健康果蠅組） "P35*H29.3" 代表疾病對照組(不喂藥組） "PC" 代表陽性藥物組，即喂給疾病果蠅美金剛100 μΜ，作為陽性對照，我 們認為美金剛應能穩定挽救疾病果蠅短時記憶缺陷的問題。
[0029] 由此可見，本發明所示乙酰天麻素衍生物具有改善阿爾茨海默病癥狀的作用。
[0030] 實施例2本發明所示乙酰天麻素衍生物對腦脊液的ΑΜ2蛋白含量的影響 實驗安排： 72-78歲的AD患者80名，男女各40名，可明顯察覺的AD發病時間約為2年，（ 早期 AD)，分為八組，即實驗組（KPC-3000157、KPC-3000159、KPC-3000161、KPC-3000162、 KPC-3000165、KPC-3000170、KPC-3000172)和對照組，每組10名，男女各5名。分別給予 乙酰天麻素衍生物治療和保守治療，其中實驗組采用口服片劑，每次100毫克，每天一次， 對照組為傳統治療，以普通的促進腦循環、改善腦細胞營養為主。治療期為三個月。治療前 后分別檢測兩組患者的腦脊液的AM2蛋白含量，并計算八組患者的平均值，其數據如表 2〇
[0031] 表2實驗組與對照組的腦脊液AM2蛋白含量平均值：（單位：pg/ml)
從表2可看出，實驗組顯著提高了患者腦脊液AM2蛋白含量，（雖然未達到正常人 的值），說明當前的AM2蛋白在腦細胞上的沉積減少了，也即說明阻抗了 AD的發展速 度。
[0032] 實施例3本發明所示乙酰天麻素衍生物片劑的制備 取本發明所示乙酰天麻素衍生物與常規輔料混合，按照常規方法制備獲得本發明所示 乙酰天麻素衍生物片劑。
[0033] 實施例4本發明所示乙酰天麻素衍生物口服液的制備 取本發明所示乙酰天麻素衍生物與常規輔料混合，按照常規方法制備獲得本發明所示 乙酰天麻素衍生物口服液。
[0034] 實施例5本發明所示乙酰天麻素衍生物丸劑的制備 取本發明所示乙酰天麻素衍生物與常規輔料混合，按照常規方法制備獲得本發明所示 乙酰天麻素衍生物丸劑。
[0035] 實施例6本發明所示乙酰天麻素衍生物膠囊劑的制備 取本發明所示乙酰天麻素衍生物與常規輔料混合，按照常規方法制備獲得本發明所示 乙酰天麻素衍生物膠囊劑。
[0036]實施例7本發明所示乙酰天麻素衍生物顆粒劑的制備 取本發明所示乙酰天麻素衍生物與常規輔料混合，按照常規方法制備獲得本發明所示 乙酰天麻素衍生物顆粒劑。
[0037]實施例8本發明所示乙酰天麻素衍生物膏劑的制備 取本發明所示乙酰天麻素衍生物與常規輔料混合，按照常規方法制備獲得本發明所示 乙酰天麻素衍生物膏劑。
[0038] 實施例9本發明所示乙酰天麻素衍生物滴丸劑的制備 取本發明所示乙酰天麻素衍生物與常規輔料混合，按照常規方法制備獲得本發明所示 乙酰天麻素衍生物滴丸劑。
[0039] 實施例10本發明所示乙酰天麻素衍生物糖漿劑的制備 取本發明所示乙酰天麻素衍生物與常規輔料混合，按照常規方法制備獲得本發明所示 乙酰天麻素衍生物糖漿劑。
[0040] 實施例11本發明所示乙酰天麻素衍生物散劑的制備 取本發明所示乙酰天麻素衍生物與常規輔料混合，按照常規方法制備獲得本發明所示 乙酰天麻素衍生物散劑。
[0041] 實施例12本發明所示乙酰天麻素衍生物沖劑的制備 取本發明所示乙酰天麻素衍生物與常規輔料混合，按照常規方法制備獲得本發明所示 乙酰天麻素衍生物沖劑。
[0042]實施例13本發明所示乙酰天麻素衍生物酊劑的制備 取本發明所示乙酰天麻素衍生物與常規輔料混合，按照常規方法制備獲得本發明所示 乙酰天麻素衍生物酊劑。
[0043]實施例14本發明所示乙酰天麻素衍生物粉針劑的制備 取本發明所示乙酰天麻素衍生物與常規輔料混合，按照常規方法制備獲得本發明所示 乙酰天麻素衍生物粉針劑。
[0044]實施例15本發明所示乙酰天麻素衍生物注射液的制備 取本發明所示乙酰天麻素衍生物與常規輔料混合，按照常規方法制備獲得本發明所示 乙酰天麻素衍生物注射液。
【主權項】
1. 一種乙酷天麻素衍生物的新用途，其特征在于所述的乙酷天麻素衍生物在制備預防 和/或治療阿爾茨海默病藥物中的應用。2. 根據權利要求1所述的乙酷天麻素衍生物的新用途，其特征在于所述的乙酷天麻素 衍生物如下式所示：其中，R為具有生物活性的化合物殘基。3. 根據權利要求2所述的乙酷天麻素衍生物的新用途，其特征在于R為4. 一種權利要求1~3任一所述的乙酷天麻素衍生物的新用途中的乙酷天麻素衍生物的 制劑，其特征在于所述的乙酷天麻素衍生物中加入藥學上可接受的輔料制備得到的口服制 劑或注射制劑。5. 根據權利要求4所述的乙酷天麻素衍生物的新用途中的乙酷天麻素衍生物的制劑， 其特征在于所述的口服制劑為片劑、口服液、丸劑、膠囊劑、顆粒劑、膏劑、滴丸劑、糖漿劑、 散劑、沖劑或町劑。6. 根據權利要求4所述的乙酷天麻素衍生物的新用途中的乙酷天麻素衍生物的制劑， 其特征在于所述的注射劑為粉針劑或注射液。
【文檔編號】A61K31/7034GK106074580SQ201610435435
【公開日】2016年11月9日
【申請日】2016年6月18日
【發明人】宋立明, 楊兆祥, 李劍峰
【申請人】昆藥集團股份有限公司