阿掏比克酸三唑基與1h?四氮唑基衍生物的組合物用于制備抗炎藥物的制作方法
【專利摘要】本發明公開了一種阿掏比克酸即Artalbic acid的O?(三唑基)乙基與O?(1H?四氮唑基)乙基衍生物的組合物在抗炎藥物中的應用，本發明涉及有機合成和藥物化學領域，具體涉及阿掏比克酸即Artalbic acid的O?(三唑基)乙基與O?(1H?四氮唑基)乙基衍生物的組合物、制備方法及其在制備抗炎藥物上的用途。本發明公開了一種阿掏比克酸即Artalbic acid的O?(三唑基)乙基與O?(1H?四氮唑基)乙基衍生物的組合物及其制備方法。藥理學實驗表明，本發明的阿掏比克酸即Artalbic acid的O?(三唑基)乙基與O?(1H?四氮唑基)乙基衍生物的組合物具有抗炎的作用，具有開發抗炎藥物的價值。
【專利說明】
阿掏比克酸三唑基與1H-四氮唑基衍生物的組合物用于制備 抗炎藥物
技術領域
[0001] 本發明涉及有機合成和藥物化學領域，具體涉及組合物、制備方法及其用途。
【背景技術】
[0002] 炎癥發生在局部，同時也可影響全身。局部臨床特征是紅、熱、腫、痛和功能障礙。 紅、熱是由于炎癥局部血管擴張、血流加快所致。腫是由于局部炎癥性充血、血流成分滲出 引起。研發具有抗炎作用的藥物對于緩解驗證、減輕痛苦有重要意義。
[0003] 炎癥的治療目前已有的藥物存在毒性大、安全性低的問題，從天然產物中尋找化 合物或先導化合物并進行結構修飾獲得其衍生物，從而得到高效低毒的潛在藥物有重要價 值。
[0004] 本發明涉及的化合物I是一個2011年發表（Antonella Maggio et al ·， 2011.Artalbic acid，a sesquiterpene with an unusual skeleton from Artemisia alba( As teraceae) from Sicily .Tetrahedron Letters ,52(2011 )4543-4545)的化合物，我 們對化合物I進行了結構修飾，獲得了兩個新的衍生物即化合物III和化合物IV，并用化合 物III和化合物IV制備了組合物并對該組合物抗炎癥活性進行了評價，其具有抗炎癥活性。
【發明內容】
[0005] 本發明公開了一個新的組合物，該組合物由化合物III和化合物IV組成，該組合物 中化合物III和化合物IV的質量百分數分別為70%和30%。
[0006]
[0007] 本發明公開的組合物可以制成藥學上可接受的鹽或藥學上可接受的載體。
[0008] 本發明的目的是提供組合物在制備抗炎藥物中的應用。所述的炎癥為無菌性炎 癥。
[0009] 本發明組合物在制備抗炎藥物中應用的有益效果如下：
[0010] 首先證明了本發明組合物具有有效抗炎作用。采用了經典的二甲苯所致的小鼠耳 腫脹模型以及大鼠瓊脂性足腫脹模型，觀察本發明組合物在一定時間內對實驗動物的抗炎 作用。研究表明：
[0011] 1、本發明組合物對二甲苯所致的小鼠耳腫脹有明顯抑制作用。
[0012] 2、本發明組合物對大鼠瓊脂性足腫脹有明顯抑制作用。
[0013] 以下通過實施例對本發明作進一步詳細的說明，但本發明的保護范圍不受具體實 施例的任何限制，而是由權利要求加以限定。
【具體實施方式】
[0014] 實施例1化合物Artalbic acid的制備
[0015] 化合物Artalbic acid(I)的制備方法參照Antonella Maggio等人發表的文獻 (Antonella Maggio et al.,2011.Artalbic acid,a sesquiterpene with an unusual skeleton from Artemisia alba(Asteraceae)from Sicily. Tetrahedron Letters ,52 (2011 )4543-4545)的方法。
[0016]
[0017] 實施例2 Artalbic acid的0-溴乙基衍生物（II)的合成
[0018] 將化合物I(266mg，l.OOmmol)溶于IOmL苯，向溶液中加入四丁基溴化銨（TBAB) (0.088)，1，2-二溴乙燒(3.76(^，20.00_〇1)和61]1]^的50%氫氧化鈉溶液。混合物在40攝氏 度攪拌iehieh之后將反應液倒入冰水中，立即用二氯甲烷萃取兩次，合并有機相溶液。然 后對有機相溶液依次用水和飽和食鹽水洗滌5次，再用無水硫酸鈉干燥，最后減壓濃縮去除 溶劑得到產物粗品。產物粗品用硅膠柱層析純化(流動相為:石油醚/丙酮= 100:1.0，v/V)， 收集棕色集中洗脫帶并揮去溶劑即得到化合物II的棕色粉末(272mg，73% )。
[0019] 1H NMR(500MHz,DMS0-d6)5ll.41(s,lH),6.06(s,lH),5.76(s,lH),4.99(s,lH), 4.71(s,1H),4.56(s,1H),3.86(s,2H),3.54(s,2H),2.65(s,1H),2.43(s,2H),2.33(s,2H), 2.10(s,lH),1.64(s,3H),1.54(s,lH),1.44(s,2H),0.95(s,3H).
[0020] 13C NMR(125MHz,DMS0-d6)S201.95(s),175.93(s),149.13(s),148.15(s),117.05 (s),109.43(s),81.86(s),70.27(s),57.68(s),41.26(s),39.07(s),38.86(s),35.69(s), 33.36(s),30.72(s),20.44(s),18.42(s).
[0021] HRMS(ESI)m/z[M+H]+calcd for Ci7H26BrO4:373.1014；found 373.1017.
[0022]
[0023] 實施例3 Artalbic acid的0-(三唑基）乙基衍生物（III)的合成 [0024] 將化合物II(187mg，0.5mmo 1)溶于25mL乙腈當中，向其中加入無水碳酸鉀(345mg， 2 · 5mmol)，鵬化鉀（84mg，0 · 5mmol)和 1，2，3-三氮挫（2760mg，40mmol)，混合物加熱回流3h。 反應結束后將反應液倒入冰水中，用等量二氯甲烷萃取三次，合并有機相。依次用水和飽和 食鹽水洗滌合并之后的有機相，再用無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮去除溶劑得到產物粗品。產 物粗品用硅膠柱層析純化(流動相為:石油醚/丙酮= 100: l.〇，v/v)，收集淡黃色集中洗脫 帶即得到化合物III的淡黃色膠狀固體(124.5mg，69% )。
[0025] 1H NMR(500MHz,DMS0-d6)5l6.23(s,lH) ,7.99(d,J = 29.4Hz,2H) ,6.11(s,lH), 5.82(s,lH),4.76(d J=17.3Hz,2H),4.62(s,1H),4.24(s,1H),4.18(s,1H),3.84(s,2H), 2.70(s,lH),2.52(d J=16.3Hz,4H),2.02(s,lH),1.69(s,3H),1.62(s,2H),1.51(s,lH), 1.02(s,3H).
[0026] 13C NMR(125MHz,DMS0-d6)5201.95(s),175.95(s),149.17(s),148.18(s),136.99 (s),120.76(s),117.09(s),109.44(s),81.89(s),65.54(s),57.72(s),46.43(s),41.30 (s),39.08(s),38.89(s),35.71(s),30.77(s),20.46(s),18.43(s).
[0027] HRMS(ESI) :m/z[M+H].calcd for Ci9H28N3〇4:362.2080;found:362.2085〇
[0028]
[0029] 實施例4 Artalbic acid的0_(IH-四氮唑基）乙基衍生物的合成 [0030] 將化合物II(187mg，0.5mmo 1)溶于20mL乙腈當中，向其中加入無水碳酸鉀(345mg， 2 · 5mmo 1)，碘化鉀（84mg，0 · 5mmo 1)和IH-四氮唑（140 Img，20mmo 1)，混合物加熱回流5h。反應 結束后將反應液倒入冰水中，用等量二氯甲烷萃取三次，合并有機相。依次用水和飽和食鹽 水洗滌合并之后的有機相，再用無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮去除溶劑得到產物粗品。因為互 變異構作用，在反應條件下會生成IH-四氮唑基和2H-四氮唑基兩種取代產物。產物粗品用 硅膠柱層析純化(流動相為:石油醚/丙酮= 100:1.5，v/v)，收集黃色集中洗脫帶，再將洗脫 帶濃縮，用硅膠柱層析純化(流動相為:石油醚/丙酮=100: 〇. 5，v/v)，依次收集兩個淡黃色 的洗脫帶，濃縮前1個洗脫帶即得到化合物IV的淡黃色固體(41.6mg，23%)。
[0031] 1H NMR(500MHz，DMS0-d6)Sll.50(s，lH)，10.04(s，lH)，6.07(s，lH)，5.78(s，lH)， 4.69(d ,J=11.0Hz,2H) ,4.58(s, 1H) ,4.22(s , 1H) ,4.15(s, 1H), 3.84(s , 2H), 2.66(s, 1H), 2.52(s，2H)，2.45(s，2H)，2.20(s，lH)，1.65(d，J=8.0Hz，5H)，1.44(s，lH)，0.98(s，3H).
[0032] 13C NMR(125MHz，DMS0-d6)S201.92(s),175.93(s),149.14(s),148.15(s),145.18 (s) ,117.08(s) ,109.40(s),81.85(s),65.53(s),57.68(s),46.71(s),41.29(s),39.04 (s),38.85(s),35.70(s),30.73(s),20.42(s),18.42(s).
[0033] HRMS(ESI) :m/z[M+H]+calcd for Ci8H27N4〇4:363.2032;found:363.2029〇
[0034]
[0035] 實施例5組合物抗炎藥效學研究
[0036] 試驗材料
[0037] 1.昆明(KM)種小鼠：雄性，6周，18.5-22.5g，由江蘇省實驗動物中心提供。
[0038] 2.大鼠(Wistar):雄性，體質量140~160g，由江蘇省實驗動物中心提供。
[0039] 3.組合物的制備：將研磨之后過200目網的70mg化合物III的粉末和研磨之后過 200目網的30mg化合物IV的粉末裝入帶蓋的小管中并用渦輪攪拌儀混合即得到IOOmg組合 物，使用時用水溶解這I OOmg的組合物即得到組合物的溶液。
[0040]試驗方法
[0041 ] 1.灌胃組合物對小鼠耳部炎癥的作用:取體質量18.5~22.5g健康雄性小鼠50只， 隨機分成5組，每組10只。分組為：組合物2.5mg · kg_\化合物III 2.5mg · kg_\化合物IV 2.5mg · kg'阿司匹林組(200mg · kg<)、空白對照組(生理鹽水）。各組分別灌胃給藥，連續 7d，第七天灌胃后lh，3組小鼠均在小鼠右耳前、后面均勻涂二甲苯0.02mL，制備耳廓炎癥模 型。Ih后后頸脫臼處死小鼠，沿耳廓基線剪下兩耳，用直徑8mm打孔器分別在兩耳的同一部 位打下圓耳片，稱重精確到O.OOOlg。立即用電子天平分別稱質量，以左右兩耳質量差作為 腫脹度，并計算其腫脹度。
[0042] 腫脹度=右耳片重一左耳片重
[0043] 2.灌胃組合物對大鼠瓊脂性足腫脹的作用：取體質量140~160g健康雄性Wistar 大鼠40只，隨機分成5組。組合物2.5mg · kg-\化合物III 2.5mg · kg-\化合物IV 2.5mg · kg'阿司匹林組(200mg · kg^1)、空白對照組(生理鹽水）。分別灌胃給藥，連續7d，第七天灌 胃后lh，大鼠的右后足跎皮下注射10g/L瓊脂0.1 mL制備足腫急性炎癥模型，用大鼠足容量 測量儀測其右后足正常容積。致炎后l、5、8h分別測量各鼠右后足容積，并計算腫脹度。
[0044] 腫脹度=右后足容積一左后足容積
[0045] 試驗結果
[0046] 1、組合物對小鼠耳部炎癥的影響
[0047] 致炎后，各組小鼠右耳立刻出現高度紅腫現象。阿司匹林組和組合物組對二甲苯 所致的小鼠耳腫脹均有顯著抑制作用，而化合物III和化合物IV則對二甲苯所致的小鼠耳 腫脹沒有顯著抑制作用，結果見表1。
[0048] 表1組合物對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響
[0050] 與模型組比較*Ρ〈0·01
[0051 ] 2、組合物對大鼠瓊脂性足腫脹的影響
[0052]注射瓊脂后，各組大鼠足爪均有一定程度的腫脹現象。在肉眼觀察下，模型組腫脹 發紅最明顯，阿司匹林組稍有腫脹無明顯發紅現象，組合物組有腫脹無明顯發紅現象。組合 物對大鼠足腫有顯著抑制作用，而化合物III和化合物IV則對大鼠足腫無顯著抑制作用， 見表2。
[0053]表2組合物對大鼠瓊脂性足趾腫脹度的影響
[0055] 與模型組比較*Ρ〈0·05
[0056] 結論:組合物對二甲苯所致的小鼠耳腫脹有明顯抑制作用；組合物對大鼠瓊脂性 足腫脹有明顯抑制作用。而化合物III和化合物IV則對二甲苯所致的小鼠耳腫脹無明顯抑 制作用;化合物III和化合物IV則對大鼠瓊脂性足腫脹無明顯抑制作用。組合物可以用于制 備抗炎藥物，化合物III和化合物IV不能用于制備抗炎藥物。
[0057]實施例6本發明所涉及組合物片劑的制備
[0058]取2克組合物，加入制備片劑的常規輔料18克，混勻，常規壓片機制成100片。
[0059] 實施例7本發明所涉及組合物膠囊的制備
[0060] 取2克組合物，加入制備膠囊劑的常規輔料如淀粉18克，混勻，裝膠囊制成100粒。
【主權項】
1. 一種組合物，其特征為該組合物由化合物HI和化合物IV組成，該組合物中化合物 III和化合物IV的質量百分數分別為70%和30%，2. 如權利要求1所述的組合物的制備方法，其特征為:將化合物III的粉末和化合物IV 的粉末按照質量百分數分別為70%和30%充分混合。3. 如權利要求1所述的組合物在抗炎癥藥物中的應用。4. 如權利要求3所述的組合物在抗炎癥藥物中的應用，其特征為:所述炎癥為無菌性炎 癥。5. 如權利要求4所述的組合物在抗炎癥藥物中的應用，其特征為:所述無菌性炎癥為化 學品刺激引起的。6. 如權利要求5所述的組合物在抗炎癥藥物中的應用，其特征為：所述化學品為二甲 苯。7. 如權利要求5所述的組合物在抗炎癥藥物中的應用，其特征為:所述化學品為瓊脂。
【文檔編號】A61K31/4192GK106074508SQ201610347675
【公開日】2016年11月9日
【申請日】2016年5月24日
【發明人】丁秋菊
【申請人】南京海澳斯生物醫藥科技有限公司