一種生物活性微包納膠囊及其制備方法
【專利摘要】本發明公開了一種生物活性微包納膠囊及其制備方法，通過離子凝膠法和高壓靜電液滴法相結合的方法制得，粒徑為100～1000um，其由一海藻酸鹽微包納膠囊和位于其中的分泌型細胞及負載小分子藥物的殼聚糖納米粒組成。本發明的生物活性微包納膠囊通過微包納的結構，采用二級緩釋的系統，實現對遙控緩釋更為細致的調控，并避免了突釋效應，可用于藥物與細胞空間分配與搭載。
【專利說明】
一種生物活性微包納膠囊及其制備方法
技術領域
[0001 ]本發明具體涉及一種生物活性微包納膠囊及其制備方法。
【背景技術】
[0002]近年來，微囊/球等微粒性藥物緩釋體系得到飛速發展，在臨床上也得到了廣泛的應用。此外，很多疾病，比如I型糖尿病，帕金森綜合征等，單一的藥物治療往往難以達到理想的治療效果，并且長期持續的注射胰島素等方式，給患者帶來巨大的痛苦同時，也造成了巨大的經濟負擔。而細胞治療一次治療后能給患者帶來長期的療效，減輕了患者痛苦，減小經濟負擔與心理壓力。但是細胞治療在細胞失去活性后，患者仍將回到治療前的狀態，此時需要再次進行細胞治療。此外，目前藥物緩釋微囊/球常常面臨著藥物突釋效應、調節藥物溶出速率的手段單一、對藥物活性保護不夠等問題。對于藥物緩釋微囊/球負載藥物的釋放速率的調控手段，也只主要包括微囊/球表面多層覆膜、更替材料、以及對載體或者藥物進行修飾等。
【發明內容】
[0003]本發明的目的在于克服現有技術缺陷，提供一種生物活性微包納膠囊。
[0004]本發明的另一目的在于提供上述生物活性微包納膠囊的制備方法。
[0005]本發明的具體技術方案如下:
[0006]—種生物活性微包納膠囊，通過離子凝膠法和高壓靜電液滴法相結合的方法制得，粒徑為100?ΙΟΟΟμπι，其由一海藻酸鹽微包納膠囊和位于其中的分泌型細胞及負載小分子藥物的殼聚糖納米粒組成。
[0007]在本發明的一個優選實施方案中，所述粒徑為200?320μπι。
[0008]—種上述生物活性微包納膠囊的制備方法，包括如下步驟:
[0009](I)配制殼聚糖水溶液和三聚磷酸鈉水溶液；
[0010](2)在殼聚糖水溶液中加入適量的小分子藥物，得第一混合液；
[0011](3)在500?700rpm的高速勻漿的條件下，將三聚磷酸鈉水溶液逐滴滴入步驟(2)所得的第一混合液中，滴完后繼續攪拌，然后經超純水洗滌和凍干后，得平均粒徑為50±20nm，粒徑分布為15?115nm的負載小分子藥物的殼聚糖納米粒；
[0012](4)培養分泌型細胞，得到密度為2?8 X 17ceIlsAiL的細胞懸浮液，并配制海藻酸鈉水溶液；
[0013](5)將海藻酸鈉水溶液、負載小分子藥物的殼聚糖納米粒的懸浮液和細胞懸浮液按比例混合均勻，得第二混合液；
[0014](6)通過注射栗和高壓微膠囊成型裝置，將第二混合液滴入成型液中發生凝膠化反應，再經孵育后，即得所述生物活性微包納膠囊，上述高壓微膠囊成型裝置的具體參數為:電壓6.9?7.2kv、22#針頭、液面距18?22mm、推進速度95?102mm/h，使用茶漏收集;成型液中含有45?55mM CaCl2和0.8?1.2mM BaCl2o
[0015]在本發明的一個優選實施方案中，所述成型液中含有50mM CaCl2和ImM BaCl2。
[0016]在本發明的一個優選實施方案中，所述步驟(6)中高壓微膠囊成型裝置的具體參數為:電壓7.0kv、22#針頭、液面距20mm、推進速度100mm/h，使用茶漏收集。
[0017]在本發明的一個優選實施方案中，所述負載小分子藥物的殼聚糖納米粒的平均粒徑為50.4±18.711111，粒徑分布為20?11011111。
[0018]在本發明的一個優選實施方案中，所述第二混合液和成型液的體積比為4?6:100。
[0019]本發明的有益效果是:
[0020]1、本發明的生物活性微包納膠囊通過微包納的結構，采用二級緩釋的系統，實現對遙控緩釋更為細致的調控，并避免了突釋效應，可用于藥物與細胞空間分配與搭載。
[0021]2、本發明的生物活性微包納膠囊利用海藻酸鹽為材料，具有良好的生物相容性，能夠對包載的細胞進行免疫隔離保護，免遭免疫系統攻擊，保持良好的生物活性。
[0022]3、本發明的生物活性微包納膠囊采用微囊內部包埋有殼聚糖納米粒的結構設計，保證了不同藥物的空間分配，提高了藥物的長效釋放和精細調控，降低了單純使用藥物的毒副作用。
[0023]4、本發明的納米粒利用堿性的殼聚糖為材料，降解產物具有營養作用與藥理功效。
[0024]5、本發明的制備方法結合了離子凝膠法和高壓靜電液滴法，工藝簡單，操作方便。
【具體實施方式】
[0025]以下通過【具體實施方式】對本發明的技術方案進行進一步的說明和描述。
[0026]實施例1
[0027]—種生物活性微包納膠囊，通過離子凝膠法和高壓靜電液滴法相結合的方法制得，粒徑為100?ΙΟΟΟμπι，其由一海藻酸鹽微包納膠囊和位于其中的分泌型細胞及負載小分子藥物的殼聚糖納米粒組成。本實施例以Y -氨基丁酸作為小分子藥物代表，以i3-TC-6細胞作為分泌型細胞模型進行實驗。
[0028]制備方法具體包括如下步驟:
[0029](I)配制0.1 % (w/v)的殼聚糖水溶液和0.1 % (w/v)的三聚磷酸鈉水溶液；
[0030](2)在殼聚糖水溶液中加入適量的γ -氨基丁酸，終濃度為20yg/mL，得第一混合液；
[0031](3)在600rpm高速勻漿的條件下，將三聚磷酸鈉水溶液逐滴滴入步驟(2)所得的第一混合液中，滴完后繼續攪拌lOmin，然后經超純水洗滌和凍干后，得平均粒徑為50.4土18.7nm，粒徑分布為20?I 1nm的負載小分子藥物的殼聚糖納米粒；
[0032](4)無菌環境下培養β-TC-e細胞，得到密度為2?8 X 17ceIlsAiL的細胞懸浮液，并配制1.8% (w/v)的海藻酸鈉水溶液；
[0033](5)將1.8 %海藻酸鈉水溶液、負載小分子藥物的殼聚糖納米粒的懸浮液(lmg/mL)和細胞懸浮液按8:1:1的比例混合均勻，得第二混合液；
[0034](6)通過微量注射栗(AJ5805，上海安吉電子設備有限公司)和高壓微膠囊成型裝置(WJN-50，上海理工大學)，將5mL第二混合液滴入10mL成型液中發生凝膠化反應，再經孵育1min后，即得平均粒徑為245.52±22.ΟΟμπι，粒徑分布為200?320μπι的所述生物活性微包納膠囊，上述高壓微膠囊成型裝置的具體參數為:電壓7.0kv、22#針頭、液面距20mm、推進速度100mm/h，使用茶漏收集;成型液中含有50mM CaCl2和ImM BaCl2。
[0035]將上述生物活性微包納膠囊給藥小鼠，在2周內使I型糖尿病小鼠的血糖值降低到正常值，并在3周后測定小鼠的胰腺辟田胞量有一定增加。
[0036]本領域普通技術人員可知，本發明的技術參數在下述范圍內變化時，仍然能夠得到與上述實施例相同或相近的技術效果，仍然屬于本發明的保護范圍:
[0037]—種生物活性微包納膠囊，通過離子凝膠法和高壓靜電液滴法相結合的方法制得，粒徑為100?ΙΟΟΟμπι，其由一海藻酸鹽微包納膠囊和位于其中的分泌型細胞及負載小分子藥物的殼聚糖納米粒組成。
[0038]上述生物活性微包納膠囊的制備方法，包括如下步驟:
[0039](I)配制殼聚糖水溶液和三聚磷酸鈉水溶液；
[0040](2)在殼聚糖水溶液中加入適量的小分子藥物，得第一混合液；
[0041 ] (3)在500?700rpm的高速勻漿的條件下，將三聚磷酸鈉水溶液逐滴滴入步驟(2)所得的第一混合液中，滴完后繼續攪拌，然后經超純水洗滌和凍干后，得平均粒徑為50±20nm，粒徑分布為15?115nm的負載小分子藥物的殼聚糖納米粒；
[0042](4)培養分泌型細胞，得到密度為2?8 X 17ceIlsAiL的細胞懸浮液，并配制海藻酸鈉水溶液；
[0043](5)將海藻酸鈉水溶液、負載小分子藥物的殼聚糖納米粒的懸浮液和細胞懸浮液按比例混合均勻，得第二混合液；
[0044](6)通過注射栗和高壓微膠囊成型裝置，將第二混合液滴入成型液中發生凝膠化反應，再經孵育后，即得所述生物活性微包納膠囊，上述高壓微膠囊成型裝置的具體參數為:電壓6.9?7.2kv、22#針頭、液面距18?22mm、推進速度95?102mm/h，使用茶漏收集;成型液中含有45?55mM CaCl2和0.8?1.2mM BaCl2。
[0045]以上所述，僅為本發明的較佳實施例而已，故不能依此限定本發明實施的范圍，SP依本發明專利范圍及說明書內容所作的等效變化與修飾，皆應仍屬本發明涵蓋的范圍內。
【主權項】
1.一種生物活性微包納膠囊，其特征在于:通過離子凝膠法和高壓靜電液滴法相結合的方法制得，粒徑為100?ΙΟΟΟμπι，其由一海藻酸鹽微包納膠囊和位于其中的分泌型細胞及負載小分子藥物的殼聚糖納米粒組成。2.如權利要求1所述的生物活性微包納膠囊，其特征在于:所述粒徑為200?320μπι。3.—種權利要求1或2所述的生物活性微包納膠囊的制備方法，其特征在于:包括如下步驟: (1)配制殼聚糖水溶液和三聚磷酸鈉水溶液； (2)在殼聚糖水溶液中加入適量的小分子藥物，得第一混合液； (3)在500?700rpm的高速勻漿的條件下，將三聚磷酸鈉水溶液逐滴滴入步驟(2)所得的第一混合液中，滴完后繼續攪拌，然后經超純水洗滌和凍干后，得平均粒徑為50 土 20nm，粒徑分布為15?115nm的負載小分子藥物的殼聚糖納米粒； ⑷培養分泌型細胞，得到密度為2?8X 17ceIlsAiL的細胞懸浮液，并配制海藻酸鈉水溶液； (5)將海藻酸鈉水溶液、負載小分子藥物的殼聚糖納米粒的懸浮液和細胞懸浮液按比例混合均勻，得第二混合液； (6)通過注射栗和高壓微膠囊成型裝置，將第二混合液滴入成型液中發生凝膠化反應，再經孵育后，即得所述生物活性微包納膠囊，上述高壓微膠囊成型裝置的具體參數為:電壓6.9?7.21^、22#針頭、液面距18?22111111、推進速度95?102111111/11，使用茶漏收集;成型液中含有45?55mM CaCl2和0.8?I.2mM BaCl2。4.如權利要求3所述的制備方法，其特征在于:所述成型液中含有50mMCaCl2和ImMBaCl2o5.如權利要求3所述的制備方法，其特征在于:所述步驟(6)中高壓微膠囊成型裝置的具體參數為:電壓7.0kv、22#針頭、液面距20mm、推進速度100mm/h，使用茶漏收集。6.如權利要求3所述的制備方法，其特征在于:所述負載小分子藥物的殼聚糖納米粒的平均粒徑為50.4±18.711111，粒徑分布為20?11011111。7.如權利要求3所述的制備方法，其特征在于:所述第二混合液和成型液的體積比為4?6:1OO0
【文檔編號】A61K31/197GK106074443SQ201610417848
【公開日】2016年11月9日
【申請日】2016年6月15日 公開號201610417848.3, CN 106074443 A, CN 106074443A, CN 201610417848, CN-A-106074443, CN106074443 A, CN106074443A, CN201610417848, CN201610417848.3
【發明人】劉源崗, 王士斌, 翁偉績, 李惠惠, 李騰騰
【申請人】華僑大學