St?246液體配制物以及方法

St?246液體配制物以及方法
【專利摘要】本發明提供用于在環糊精中增溶難溶性ST?246的新型液體配制物以及制備所述配制物的新型方法。
【專利說明】ST-246液體配制物以及方法
[00011 本申請是申請日為2011年8月2日、申請號為201180048043.1、發明名稱為"ST-246 液體配制物以及方法"的中國發明專利申請的分案申請。
[0002] 相關申請的交叉參考
[0003] 該申請要求于2010年8月5日提交美國臨時申請號61/370,971以及于2011年3月8 日提交的美國臨時申請號61/450，359的優先權和權益，其內容以引用方式全部在此并入。
技術領域
[0004] 本發明涉及ST-246的新型液體配制以及用于制備液體配制物的方法。
[0005] 關于政府聯邦贊助研究的聲明
[0006] 本發明是在由生物醫學高級研究與發展管理局(Biomedical Advanced Research and Development Authority)以及美國國立衛生研究院（National Institute of Health (NIH))授予的合同號HHSN272200800041C的美國政府支持下進行。美國政府對該發明具有 某些權利。
【背景技術】
[0007] 在整個申請中，在文本中引用各種出版物。這些出版物的公開全部以引用方式并 入該申請內以便更完整地描述本領域技術人員已知的截至如本文所描述和所要求保護的 本發明日的技術發展水平。
[0008] 歷史上，在根除之前，估計天花病毒(天花的病原體)致死、致殘或毀容接近10%的 人口（1)。天花傳染性高以及攜有異常高的發病率。據報道在家庭成員未接種情況下第二次 發作達30%至80%。天花死亡率的范圍為最小1%至最大30%。隨著作為恐怖主義工具的生 物戰(biowarfare)的出現，天花可能不再僅作為歷史上具影響的疾病來考慮。
[0009] 目前除早期接種之外尚無治療方法可改變疾病結果或者在已經暴露于天花的種 群中潛在性預防疾病。接種攜有對某些免疫抑制接受者以及甚至一些健康接受者的不良反 應的內在風險(2)。而且，接種只有在暴露之后4天施用有效。因此，在開發保護性免疫之前 存在的易損性窗口期間，可將單獨或者可能聯合接種使用的抗病毒藥物用于治療個體。此 外，抗病毒藥物也可用于治療在人類中動物源性痘病毒疾病，例如猴痘。
[0010]最近已出現 ST-246(4-三氟甲基-N-( 3，3a，4，4a，5，5a，6，6a-八氫-1，3-二氧代-4， 6-亞乙烯基環丙[f]異吲哚-2(1H)_基)-苯甲酰胺）用作針對正痘病毒屬的高效候選物。評 估ST-246針對正痘病毒屬的活性的多個研究已經顯示出極佳的體外和體內功效(3，4)。當 針對水痘病毒(VV)、牛痘病毒(CV)、鼠痘病毒(ECTV)、猴痘、駱駝痘和天花病毒評估時，ST-246 以 0.07μΜ 或者更低的濃度抑制50% 的病毒復制（50%有效濃度 [EC50])。對于使用具有 ECTV、VV或CV的致死性感染的動物模型，報道ST-246無毒以及對預防或甚至當治療延緩至 多病毒接種后72h時，對降低死亡率非常有效(3,4)。也使用靜脈內VV的非致死性小鼠尾損 傷模型來評估ST-246。當以15或50mg/kg/體重每天兩次口服施用ST-2465時，尾損傷顯著降 低(4)。最近，給予嬰兒ST-246作為在暴露于預先部署的親本軍用天花免疫之后形成的牛痘 性濕疹的FDA授權的緊急治療(5)。
[0011] 鑒于ST-246針對天花的抗病毒治療的高功效以及缺乏經FDA批準的治療天花感染 的藥物，對開發通過各種施用途徑可施用的安全和有效的ST-246配制物有明確需求。然而， 在水和藥學上可接受的pH緩沖劑中ST-246的差溶解度造成制備安全和有效ST-246液體配 制物的困難。
[0012] 因此，基于藥物和其他生物的工業對配制不溶于水的ST-246至液體配制物內用于 口服、胃腸外或局部施用有急切需求。

【發明內容】

[0013] 本發明提供包含治療有效量的ST-246和環糊精以及進一步包含一種或多種藥學 上可接受的成分的液體藥物配制物。
[0014] 本發明也提供治療正痘病毒屬感染和/或牛痘性濕疹的方法，其包括向需要其的 受試者施用根據本發明的液體藥物配制物。
[0015] 本發明進一步提供制備根據本發明的液體配制物的方法，其包括以下步驟:a)在 藥學上可接受的液體載體中混合ST-246與環糊精；以及b)任選地過濾步驟a)的混合物。 [0016] 本發明也提供單位劑量液體配制物，其包含:a)約2mg/ml至約20mg/ml的ST-246含 量；以及b)約12.5mg/ml至約40mg/ml的輕丙基-β-環糊精含量。
[00?7]本發明進一步提供單位齊I」量液體配制物，其包含:a)約2mg/ml至約20mg/ml的ST-246;以及b)約12.5mg/ml至約40mg/ml的輕丙基-β-環糊精含量。
[0018] 本發明也提供用于制備水溶性固體ST-246藥物配制物的方法，其包括:a)在藥學 上可接受的液體載體中混合ST-246與環糊精；以及b)任選地過濾步驟a)的混合物；以及c) 凍干所述混合物。
【附圖說明】
[0019] 圖1示出ST-246在賦形劑的水溶液中的溶解度。
[0020]圖2示出ST-246在賦形劑的水溶液中的溶解度。
[0021 ]圖3示出ST-246在賦形劑的水溶液中的溶解度。
[0022] 圖4示出羥丙基-β-環糊精(ΗΡ-β-CD)結構。
[0023] 圖5示出在25 °C下ΗΡ-β-CD的ST-246水溶液。
[0024] 圖6示出在25°C下作為ΗΡ-β-CD的函數的ST-246濃度。
[0025]圖7示出作為ΗΡ-β-CD濃度的函數的ST-246溶解度。
[0026]圖8示出在助溶劑的存在下作為不同溫度的函數的ST-246的溶解度。
[0027] 圖9示出在25 °C和5 °C下pH對ST-246的溶解度的作用。
[0028]圖10示出含有ΗΡ-β-CD的靜脈內配制物的稀釋穩定性的作用。
[0029]圖11示出如與ST-246的口服施用相比較的ST-246的靜脈內施用的藥代動力學性 質。
[0030]圖12顯示形式II (來自三種不同樣品）的三張 X射線粉末衍射(XRPD)圖。
[0031]圖13顯示形式IV(來自兩種不同樣品）的兩張 X射線粉末衍射(XRPD)圖。
[0032]圖14顯示形式V的X射線粉末衍射(XRPD)圖。
[0033]圖15顯示形式VI (來自兩種不同樣品）的X射線粉末衍射(XRPD)圖。
[0034] 圖16顯示在小鼠中ST-246的口服和IV施用的血漿濃度曲線。顯示以30、100、300和 1000mg/kg的劑量向雌性BALB/c小鼠口服施用ST-246之后隨著時間的血漿濃度的均值和標 準偏差。以3、10、30和75mg/kg在向雌性⑶-1小鼠 IV輸注10分鐘之后隨著時間的血漿濃度的 均值和標準偏差。各時間點均是來自三只單獨的小鼠的平均值。
[0035] 圖17顯示在新西蘭白兔(New Zealand White Rabbit)中IV和口服施用之后隨著 時間的血漿濃度。顯示在口服施用l〇〇mg/kg;彈丸(bolus) IV施用lmg/kg;或者5分鐘IV緩慢 推注3、30或60mg/kg之后隨著時間的ST-246的血漿濃度。也顯示15分鐘IV輸注3mg/kg。各曲 線是來自兩只雄性和兩只雌性兔子的標準偏差的均值。
[0036]圖18顯示在食蟹猴中與4小時IV輸注相比，在口服施用之后隨著時間的ST-246血 漿濃度。在食蟹猴中與在4小時IV輸注1、3、10或30mg/kg之后血漿濃度曲線相比單次口服給 藥3、10或30mg/kg之后ST-246的血漿濃度。各曲線顯示均值和標準偏差。對于口服施用，在 各給藥組中有3只雄性和3只雌性，而對于IV輸注有2只雄性和2只雌性。
[0037]圖19顯示計算的來自IV輸注研究的清除率值。計算的以4或6小時IV輸注向食蟹猴 施用的各給藥組的清除率的均值和標準偏差。
[0038]圖20A和20B顯示向食蟹猴施用20或30mg/kg的不同施用方案的血漿濃度曲線。顯 示（圖20A)20mg/kg或（圖20B)30mg/kg的不同給藥方案隨著時間的血漿濃度的均值和標準 偏差。給藥方案包括口服施用(在各給藥組中有3只雄性和3只雌性）；4小時IV輸注(在各給 藥組中有2只雄性和2只雌性）；6小時IV輸注(在各給藥組中有2只雄性和2只雌性）；以及間 隔12小時開始的BID兩次4小時IV輸注(在各給藥組中有4只雄性和4只雌性）。
[0039] 發明詳述
[0040]本發明提供安全和有效的液體藥物配制物，其包含治療有效量的ST-246和環糊 精，以及任選進一步包含選自載體、賦形劑、稀釋劑、添加劑、填料、潤滑劑、增溶劑、防腐劑 和粘合劑的一種或多種藥學上可接受的成分。在一個實施方案中，環糊精是羥丙基-β_環糊 精。在另一實施方案中，羥丙基-β_環糊精具有約4至約8的取代度。在又一實施方案中，所述 環糊精是磺丁基醚-β_環糊精。
[0041 ] 在本發明的一方面中，羥丙基-β-環糊精以約10 %至約50重量％、更優選為約20 % 至約40重量％的量存在。在本發明的又一方面中，將液體藥物配制物調節至具有介于約3至 12之間、更優選為介于約3至10之間的pH。在本發明的又一方面中，本液體藥物配制物適合 口服、胃腸外、粘膜、經皮或局部施用。
[0042] 本發明也提供用于治療正痘病毒屬感染的方法，其包括向需要其的受試者施用液 體藥物配制物，該液體藥物配制物包含治療有效量的ST-246和環糊精以及進一步包含一種 或多種選自載體、賦形劑、稀釋劑、添加劑、填料、潤滑劑和粘合劑的藥學上可接受的成分。 在一個實施方案中，環糊精是羥丙基-β_環糊精。在另一實施方案中，羥丙基-β_環糊精具有 介于約4至約8的取代度。在又一實施方案中，環糊精是磺丁基醚-β-環糊精。
[0043] 本方法也包括治療牛痘性濕疹的方法，其包括向需要其的受試者施用治療有效量 的本液體配制物。根據本發明，可通過口服、胃腸外、粘膜、經皮或局部的施用途徑來施用。
[0044] 本發明也提供制備本液體配制物的方法，其包括以下步驟:a)使ST-246與環糊精 混合；以及b)任選地過濾步驟a)的混合物。本方法包括選自多晶型形式I、形式II、形式III、 形式IV、形式V和形式VI的ST-246。
[0045] 在一個實施方案中，環糊精是羥丙基-β-環糊精。在另一實施方案中，羥丙基-β-環 糊精具有介于約4至約8之間的取代度。在又一實施方案中，環糊精是磺丁基醚-β-環糊精。
[0046] 在本發明的一方面中，本方法包括在藥學上可接受的液體載體中混合ST-246與環 糊精約15miη至72小時。在本發明的另一方面中，本方法包括在約28 °C至約70 °C的溫度下在 藥學上可接受的液體載體中混合ST-246與環糊精。在一個實施方案中，藥學上可接受的液 體載體是水。
[0047]在本發明的又一方面中，提供單位劑量液體配制物，其包含：a)約2mg/ml至約 20mg/ml的ST-246含量;b)約12.5mg/ml至約40mg/ml的輕丙基-β-環糊精含量；以及c)任選 地包含甘露醇、海藻糖脫水物、乳糖一水合物和純化水，使得液體配制物的總體積為約 100mL。在一個實施方案中，使用0. lHCL/NaOH將pH調節至約3.0至約5.0的范圍。在另一實施 方案中，使用檸檬酸緩沖劑將pH調節至約3.0至約5.0的范圍。
[0048]在本發明的又一方面中，提供單位劑量液體配制物，其包含：a)約2mg/ml至約 20mg/ml的ST-246;b)約12.5mg/ml至約40mg/ml的輕丙基-β-環糊精含量；以及c)任選地包 含選自聚乙二醇400、聚山梨酯80、聚乙二醇300以及純化水的一種或多種藥學上可接受的 成分，使得優選地，液體配制物的總體積是約100mL。在一個實施方案中，使用0. lHCL/NaOH 將pH調節至3.0至5.0的范圍。在另一實施方案中，使用檸檬酸緩沖劑將pH調節至約3.0至約 5.0的范圍。
[0049]
[0050] 依照該詳細描述，提供以下縮略語和定義。必須注意，如本文所使用，除非文本另 有明確表述，否則單數形式"一(a)"、"一個(an)"以及"所述(the)"包括復數參照對象。
[0051] 術語"藥物組合物"或"藥物配制物"旨在涵蓋包括活性成分、構成載體的藥學上可 接受的賦形劑以及直接或間接由任意兩種或多種成分組合、絡合或聚合所產生的任意產品 的藥物產品。因此，本發明的藥物組合物涵蓋通過摻合活性成分、活性成分分散劑或復合 物、另外的活性成分以及藥學上可接受的賦形劑而制備的任意組合物。
[0052]術語"半衰期"是藥代動力學術語，其用于表示消除50%在體內存在的藥物剩余量 所需的時間長度。
[0053] 術語"AUC"（即，"曲線下面積"、"濃度曲線下面積"或"濃度-時間曲線下面積"）是 藥代動力學術語，其用于表示基于以頻繁間隔取樣的個體血液或個體血液混合物血漿濃度 的圖的生物利用率或藥物吸收程度的測量方法;AUC直接與在患者血漿中未改變的血液總 量成比例。例如，AUC比對劑量的圖的線性曲線（即，上升直線)表示藥物被緩慢釋放至血流 內以及向患者提供穩定量的藥物;如果AUC比對劑量是直線關系，則這通常表示藥物最佳地 遞送至患者的血流內。相反，非線性AUC比對劑量曲線表示藥物快速釋放，使得一些藥物不 被吸收，或者在進入血流之前藥物被代謝。
[0054] 術語"C_max"（即，"最大濃度"）是用于表示在患者的血漿中特定藥物的峰濃度的藥 代動力學術語。
[0055] 術語"Tmax"（即，"最大濃度的時間"或者"Cmax的時間"）是藥代動力學術語，其表示 在藥物施用的時程中觀察到C max的時間。如所期望，包括即釋以及胃滯留組分的劑型具有比 即釋劑型的Cmax更高、但比完全胃滯留劑型的T max低的Tmax。
[0056] 如本文所使用，用于治療的術語"受試者"包括任意受試者，以及優選為需要治療 正痘病毒屬感染或相關病癥的受試者。受試者通常是動物，更通常地為哺乳動物。優選地， 哺乳動物是人。
[0057] 術語"化學修飾的環糊精"是指一種或多種化學修飾的環糊精，其中有獨立地多于 一種取代度，該取代度可從約〇. 5至約10.0變化。根據需要可改變化學修飾的環糊精的取代 度(每葡萄糖單元的官能團的平均數目）以提供ST-246的必要的溶解度和穩定性。例如，取 代度可以介于約〇. 5至約10.0之間。對于諸如2-羥丙基-β-環糊精的化學修飾的環糊精，取 代度(每葡萄糖單元的取代的羥基官能團）可以為例如約4.0至8.0之間。使用已知技術通過 質譜(MS)或核磁共振(NMR)光譜法來測定取代度。
[0058] 術語"難溶性治療劑"是指具有生物活性以及在20°C、25°C至37°C下在pH 1.2至7 的緩沖劑中小于約lmg/mL的在水中的溶解度的化合物。在某些實施方案中，難溶性治療劑 是具有小于1500g/mol以及優選小于500g/mol的分子量的有機化合物。在某些實施方案中， 難溶性治療劑是化合物，例如，在pH 7和20°C下具有小于約0.5mg/mL、小于約0.3mg/mL或小 于約0. lmg/mL的水性溶解度的有機化合物。
[0059] 如本文所使用，"治療有效量"是指無毒但足夠預防或減緩正痘病毒屬感染或相關 病癥的嚴重程度的ST-246的量。
[0060] 如本文所使用，"百分比"、"百分率"或符號"％"是指基于以重量/重量(w/w)、重 量/體積(w/V )或體積/體積(v/V )濃度計的在組合物中存在的載體的量，組合物中所示的組 分的百分比，如相對于任意特定組分所表示，所有均基于在組合物中存在的載體的量。因 此，不同類型的載體可以如所表示的至多100%的量存在，其不排除API的存在，其量可表示 成％或者在組合物中存在的確定數mg或者存在的特定數mg/mL，其中是基于在組 合物中存在的總載體的量。某些類型的載體可以組合存在以構成100%的載體。
[0061] 如本文所使用的術語"藥學上可接受的載體"為無毒或者具有某些毒性屬性(其對 于以所需的劑量和濃度向接受者實現治療優勢并非劑量限制的)并且與配制物的其他成分 相容。
[0062] 術語"藥學上可接受的賦形劑"包括媒介物、佐劑或稀釋劑或者其他輔助物質，例 如在本領域中常規的那些，其可由公眾容易地獲得，并且其是無毒的或以所采用的劑量和 濃度對于接受者具有可接受的毒性，并且與配制物的其他成分相容。例如，藥學上可接受的 輔助物質包括PH調節和緩沖劑、張力調節劑、穩定劑、防腐劑、增溶劑、潤濕劑等。
[0063] 環糊精
[0064] 環糊精是水溶性糖低聚物。存在許多不同環糊精以及通過吡喃葡萄糖單元的數量 來彼此區分。最常見的環糊精由6、7或8個α-D-葡萄糖單元組成。環糊精形成具有外部親水 性以及內部親脂性的空腔。葡萄糖單元數目決定空腔的尺寸。親水性外部給予環糊精在水 溶液中溶解性，而親脂性內部或者空腔提供對其他疏水性分子通常具吸引力的環境。通過 在疏水性核芯中螯合藥物，其用環糊精分子增溶，從而形成水溶性絡合物。環糊精可吸收分 子的全部或者僅吸收其一部分至空腔內。所得絡合物的穩定性取決于藥物分子嵌入環糊精 空腔的情況。
[0065] 對于環糊精是否改善諸如ST-246的特定藥物的溶解度仍有很高程度的不可預測 性。出人意料地，已經鑒定出包含環糊精的新型液體配制物，顯示其提供充分的ST-246溶解 性以及可以安全和有效方式將其遞送至受試者。
[0066]適合在本文所公開的組合物、配制物和方法中使用的環糊精通常為具有圓錐樣形 狀的環狀低聚糖。圓錐的內部用作疏水性空腔，而圓錐的外部為親水性。前者性能使環糊精 能形成具有大量親脂性分子的包合絡合物或其部分，其"嵌"入空腔內，而后者性能促進水 性溶解性。由于它們高水溶性以及低毒性，故環糊精衍生物已經廣泛研究用作胃腸外藥物 載體(Fromming&Szejtli，J. (1994)。
[0067] 化學修飾的環糊精
[0068] 適合在本文公開的組合物、配制物和方法中使用的環糊精優選為化學修飾的環糊 精。化學修飾的環糊精可包括環糊精、β_環糊精、γ環糊精或δ-環糊精。化學修飾的環糊 精可包括但不限于甲基-β_環糊精、2-6-二-0-甲基-β-環糊精、任意甲基化-β-環糊精、乙 基-β-環糊精、羧甲基-β-環糊精、二乙基氨基乙基-β-環糊精、2-羥丙基-β環糊精、3-羥丙 基-β-環糊精、2，3-二羥丙基-β-環糊精以及磺丁基醚-β-環糊精。優選地，化學修飾的環糊 精是2-羥丙基-β-環糊精、3-羥丙基-β-環糊精、2，3-二羥丙基-β-環糊精以及磺丁基醚-β-環糊精。更優選地，化學修飾的環糊精是2-羥丙基-β_環糊精或磺丁基醚-β_環糊精。優選 地，2-羥丙基-β-環糊精的取代度介于4至8之間。
[0069] 如本文所公開的藥物配制物的制備包括將化學修飾的環糊精溶解在合適體積的 水性載體介質（例如，注射用水）；去除氧氣（例如，使用氮氣、惰性氣體或者在真空下冷凍-融化）；隨后在劇烈攪拌下逐漸加入ST-246至環糊精溶液直至基本上所有的ST-246已被絡 合并且在溶液中。環糊精溶液的溫度可介于〇°C-80°C之間。優選地，環糊精溶液的溫度保持 在約2°C_70°C之間。
[0070]在加入ST-246之后，使用脫去氧氣的水性載體介質可使溶液達最終體積。然后通 過諸如過濾可將溶液滅菌和/或無菌轉移至小瓶或安瓿。可將溶液直接轉移至安瓿以用于 通過高壓滅菌法或輻射來滅菌。在諸如氮氣的惰性氣體下可將小瓶或安瓿密封。ST-246與 化學修飾的環糊精的摩爾比可以例如為約0.03m 〇l/m〇l。優選地，ST-246與化學修飾的環糊 精的摩爾比為約〇. 01至約1.0。更優選地，ST-246與化學修飾的環糊精的摩爾比為約0.03至 0·15mol/mol〇
[0071] 藥物組合物
[0072] 包含本發明的化合物的藥物組合物和單一單位劑量形式或其藥學上可接受的多 晶型物、前藥、鹽、溶劑化物、水合物或者包合物也涵蓋在本發明內。本發明的單獨劑量形式 也適用于口服、粘膜(包括舌下、口腔、直腸或鼻腔）、胃腸外(包括皮下、肌肉內、彈丸注射、 動脈內或者靜脈內）、經皮以及局部施用。
[0073] 本發明的藥物組合物和劑型包含本發明的化合物或其藥學上可接受的前藥、多晶 型物、鹽、溶劑化物或水合物。具體而言，之前在以引用方式并入本文的USSN 61/316,747中 已經顯示，ST-246以命名為形式I、形式II、形式III、形式IV、形式V以及形式VI的不同結晶 形式存在。也已經發現，形式I是ST-246的一水合物結晶形式，其顯示在大約7.63、10.04、 11.47、14.73、15.21、15.47、16.06、16.67、16.98、18.93、19.96、20.52、20.79、22.80、 25.16、26.53、27.20、27.60、29.60、30.23、30.49、30.68、31.14、33.65、34.33、35.29、 35.56、36.30、37.36、38.42、38.66度的反射角2Θ處具有特征峰的X射線粉末衍射圖。
[0074] 也已經顯示，形式II是ST-246的脫水結晶形式。形式II顯示具有根據圖12的特征 的X射線粉末衍射圖。
[0075] 進一步顯示，形式III是ST-246的一水合物結晶形式，其顯示在大約6.71、9.05、 12.49、13.03、13.79、14.87、15.72、16.26、16.74、18.10、18.43、19.94、21.04、21.51、 23.15、23.51、25.32、26.24、26.87、27.32、27.72、28.55、29.08、29.50、29.84、31.27、 33.48、35.36、39.56度的反射角2Θ處具有特征峰的射線粉末衍射圖。
[0076] 進一步顯示，形式IV是ST-246的脫水結晶形式。形式IV顯示根據圖13的特征的X射 線粉末衍射圖。
[0077] 而且，已經顯示，形式V是ST-246的半水合物結晶形式。形式VI顯示具有根據圖14 的特征的X射線粉末衍射圖。
[0078] 也已經顯示，形式VI是ST-246的一水合物結晶形式。形式VI顯示具有根據圖15的 特征的X射線粉末衍射圖。
[0079] ST-246形式I是優選的ST-246的多晶型形式。它似乎是熱力學最穩定形式，因為所 有其他均轉變為形式-I。
[0080] ST-246形式I穩定，因此可將其貯存在環境條件下。尚未顯示，在藥物可在制備和 貯存的各種階段經歷的數種環境和方法條件下形式I轉化至另一多晶型形式。一些測試的 條件包括在高溫和高濕度、室溫和高濕度、低濕度、至多60°C下貯存;使用濕式制粒法的膠 囊制備以及干燥;在研磨或微粉化方法中；在混懸液中；在室溫下長期貯存。而且，形式-I不 吸濕，因而即使在90%相對濕度條件下，也不會吸收水分。使用大于99.0%純度以及使用不 大于0.15%的任意單一雜質的市售結晶法來穩定制備形式I。本實施例描述具有ST-246形 式I的實驗。然而，可使用ST-246形式II、形式III、形式IV和形式V以類似地獲得穩定液體 ST-246配制物。
[0081] 適合口服施用的本發明的藥物組合物可作為離散的劑型存在，例如但不限于膠囊 和液體(例如，調味的糖漿劑）。這些劑型含有預定量的活性成分，以及可通過本領域技術人 員公知的藥物方法來制備。通常可見，Remington's Pharmaceutical Sciences,第18版， Mack Publishing,Easton Pa.(1990)〇
[0082] 根據常規藥物混合技術在具有至少一種賦形劑的緊密摻合物中合并活性成分來 制備通常的口服劑型。取決于需要施用的制劑形式，賦形劑可采用多種形式。例如，適合于 在口服液體或氣溶膠劑型中使用的賦形劑包括但不限于水、二醇、油、醇、調味劑、防腐劑以 及著色劑。用于口服施用的液體制劑可采用諸如溶液、糖漿劑或混懸液的形式，或者在使用 之前可將它們作為用水或其他合適媒介物復原的干燥產品呈示。使用諸如懸浮劑(例如，山 梨醇糖漿、纖維素衍生物或氫化可食用脂肪）；乳化劑(例如，卵磷脂或阿拉伯膠）；非水性媒 介物(例如，扁桃仁油、油脂、乙醇或分餾的植物油）；以及防腐劑(例如，對羥基苯甲酸甲基 或對羥基苯甲酸丙酯或者山梨酸）的藥學上可接受的添加劑通過常規方法可制備這些液體 制劑。根據需要，制劑也可含有緩沖鹽、調味劑、著色劑以及甜味劑。
[0083] 可在本發明的藥物組合物和劑型中使用的崩解劑包括但不限于:瓊脂、藻酸、碳酸 鈣、微晶纖維素、交聯羧甲基纖維素鈉、交聯聚維酮、聚克立林鉀、淀粉羥基乙酸鈉、土豆或 木薯淀粉、預先膠凝的淀粉、其他淀粉、粘土、其他藻膠、其他纖維素、樹膠、及其混合物。
[0084] 可在本發明的藥物組合物和劑型中使用的潤滑劑包括但不限于:硬脂酸鈣、硬脂 酸鎂、礦物油、輕質礦物油、丙三醇、山梨醇、甘露醇、聚乙二醇、其他二醇類、硬脂酸、十二烷 基硫酸鈉、滑石粉、氫化植物油(例如，花生油、棉籽油、向日葵油、芝麻油、橄欖油、玉米油以 及大豆油）、硬脂酸鋅、油酸乙酯、月桂酸乙酯、瓊脂及其混合物。
[0085] 通過各種途徑可將胃腸外劑型向患者施用，包括但不限于皮下;靜脈內（包括彈丸 注射）；肌肉內；以及動脈內。因為它們的施用通常繞過患者對污染物的天然防御，因此胃腸 外劑型優選無菌或者能夠在向患者施用之前被殺菌。胃腸外劑型的例子包括但不限于:準 備注射用的溶液;準備溶解或混懸在藥學上可接受的媒介物中的注射用干燥產品；準備注 射用的混懸液；以及乳劑。
[0086] 可用于提供本發明的胃腸外劑型的合適的媒介物是本領域技術人員公知的。例子 包括但不限于:USP注射用水;水性媒介物，例如但不限于注射氯化鈉、林格氏注射液、葡萄 糖注射液、葡萄糖和氯化鈉注射液以及乳酸鈉林格氏注射液;與水混溶的媒介物，例如但不 限于乙醇、聚乙二醇以及聚丙二醇；以及非水性媒介物，例如但不限于玉米油、棉籽油、花生 油、芝麻油、油酸乙酯、豆蔻酸異丙酯以及苯酸芐酯。
[0087] 可將增加本文公開的一種或多種活性成分的溶解度的化合物并入本發明的胃腸 外劑型內。
[0088] 本發明的經皮和局部劑型包括但不限于:乳膏、洗劑、軟膏劑、凝膠劑、溶液、乳劑、 混懸液或者其他本領域技術人員已知的其他劑型。參見，例如，R e m i n g t ο η ' s Pharmaceutical Sciences,第18版，Mack Publishing，Easton Pa.(1990);以及 Introduction to Pharmaceutical Dosage Forms，第4版，Lea&Febiger,Philadelphia (1985)。經皮劑型包括"貯庫型"或者"基質型"貼劑，可將其施加至皮膚以及攜帶一段時間 以使所需量的活性成分滲透。
[0089] 通過該發明涵蓋的可用于提供經皮和局部劑型的合適的賦形劑（例如，載體和稀 釋劑）以及其他材料是藥物領域技術人員公知的，并且取決于給定藥物組合物或劑型將向 其施加的特定組織。鑒于此，典型的賦形劑包括但不限于：水、丙酮、乙醇、乙二醇、丙二醇、 丁-1，3-二醇、豆蔻酸異丙酯、棕櫚酸異丙酯、礦物油、及其混合物以形成洗劑、酊劑、乳膏、 乳劑、凝膠劑或軟膏劑，其無毒并且為藥學上可接受的。如果需要，也可將保濕劑或潤濕劑 添加至藥物組合物和劑型。這些另外的成分的例子是本領域公知的。參見，例如， Remington's Pharmaceutical Sciences，第18版，Mack Publishing，Easton Pa.(1990)〇
[0090] 也可調節藥物組合物或劑型或者待施加藥物組合物或劑型的組織的pH以改善一 種或多種活性成分的遞送。類似地，可調節溶劑載體的極性、其離子強度或張力以改善遞 送。也可將諸如硬脂酸酯的化合物添加至藥物組合物或劑型以有利地改變一種或多種活性 成分的親水性或親脂性，從而改善遞送。在這點上，硬脂酸酯可用作配制物的脂質媒介物； 作為乳化劑或表面活性劑；以及作為遞送增強劑或滲透增強劑。可使用活性成分的不同的 鹽、水合物或溶劑化物以進一步調節所得組合物的性能。 _1] 靜脈內施用、劑量和持續時間
[0092]如在以下實施例4中所示，開發出種群PK模型以評估在未感染的雄性和雌性食蟹 猴中進行IV輸注之后ST-246的處置。具有劑量作為協變量的三室模型描述IV ST-246的非 線性PK(在更高劑量下，清除率降低）。診斷圖以及視覺診斷檢查證實:觀察到的數據通過所 提及的模型相當充分地描述。進行PK參數在猴中的異速生長的定標以測定在人中的PK參 數。
[0093]基于在經口服ST-246治療的人受試者中觀察到的濃度-時間曲線，先驗性測定暴 露的革G向范圍。進行蒙特卡羅模擬(Monte Carlo simulation)以測定可產生與之前在進行 400和600mg ST-246的重復口服施用之后健康、未感染的人中觀察到的類似的AUC、CmaJP Cmin值的IV ST-246的候選給藥水平。模擬多種不同的可能的給藥方案。首先將預測的AUC和 Cmax值與在口服給藥之后觀察的AUC和Cmax值相比較。此后比較(：_值。通常，可產生等同C min 的方法需要更長的輸注時間，其比產生等同AUC和Cmax的方案具有更高的AUC值。
[0094] 在5小時內115mg QD或者在1小時內65mg BID的重復IV輸注提供穩態的AUC和Cmax 值，其非常類似于在口服給藥400mg之后觀察到的那些值。在2小時內80mg BID的重復輸注 導致在12和24小時處的Cmin值類似于在健康的未感染人中口服施用400mg QD之后觀察到的 那些值。類似地，在4小時內145mg QD或者在1小時內95mg BID的重復IV輸注提供穩狀的AUC 和Cmax值，其非常類似于在口服給藥600mg之后觀察到的那些值。最終，在1小時內85mg BID 的重復IV輸注導致在12和24小時處的Cmin值類似于在健康的未感染的人中口服施用600mg QD之后觀察到的那些值。
[0095]相應地，在一個實施方案中，可靜脈內施用本液體藥物配制物。優選地，每一次靜 脈內施用輸注約50至約500mg、更優選地約200mg至約400mg、最優選地約300mg的ST-246。在 另一實施方案中，以約7至約30天、優選地約7至約15天的時間段來進行治療。在又一實施方 案中，每次靜脈內施用的持續時間為約2至約24小時。在進一步的實施方案中，在治療過程 中以每天約50至約500mg的ST-246的劑量連續進行治療。可選擇地，可以以每天2次進行治 療，其中每次的持續時間是約2至約12小時。
【具體實施方式】
[0096] 實施例1-ST-246在各種賦形劑中的溶解度研究一在水、油性媒介物、表面活性劑 和助溶劑中的溶解度
[0097] ST_246(-種抗天花小分子）旨在通過各種施用途徑來施用，其在水中和在范圍為 2-11的藥學上可接受的pH緩沖劑中難溶。可注射的配制物的優選配制物是使用藥學上可接 受的添加劑制備的液體配制物。為了獲得液體配制物，藥物的溶解度應當為使得可將治療 有效量的藥物安全地遞送。而且，配制物應當能夠抵擋于諸如生理鹽水的常用的靜脈內稀 釋流體中以及在注射時于血液中的稀釋。因為ST-246是不溶性藥物，所以它造成開發安全 和有效的IV溶液配制物的挑戰性。
[0098]出人意料地，已經鑒定出組合物，其提供ST-246的充分溶解性以及可以安全和有 效方式遞送至受試者。
[0099] 對于這些實驗，研究多種助溶劑和表面活性劑以用于增溶ST-246。對于這些實驗， 使用ST-246多晶型形式I。助溶劑的溶液包括:聚乙二醇(PEG) 400、丙二醇、乙醇;表面活性 劑的溶液包括聚氧化乙烯蓖麻油、聚氧化乙烯氫化蓖麻油(CremophorKEL和RH 40)、聚山 梨酯(表面活性劑的吐溫?1系列）以及Solutol?HS、聚乙氧基化脂肪醇以及聚乙二醇化甘油 酯，Labrasol'此外，研究在包括芝麻油、大豆油和玉米油的多種油中ST-246的溶解度。溶 解試驗的結果顯示在表1中以及概括如下。
[0100]表1-ST246形式I 一水合物在各種賦形劑中的溶解度
[0103] 如表1所示，PEG 400表明具有最大的ST-246增溶作用，隨后為Labrasol'乙醇、丙 二醇、吐溫80、Cremophor EL和Cremophor RH-40，所有這些均經鑒定為可能的靜脈內配制 物候選物。因此，基于溶解度數據，選擇PEG 400和乙醇用于助溶劑組合分析。ST-246在油中 的絕對溶解度為小于5mg/ml，排除它們作為可能IV配制物候選物。
[0104] 基于這些實驗的結果，產生含有不同濃度的選擇的賦形劑的多種配制物。因此，使 用5%葡萄糖和0.05mM，pH 7.5，磷酸鹽緩沖劑來稀釋該配制物以確保配制物抵擋稀釋至少 12小時。獲得的結果確定所有測試的組合對于延長的IV輸注均為次佳的。即使當ST-246的 量由10mg/mL降低至5mg/mL，溶液穩定性延長小于2小時，這表明助溶劑和表面活性劑可能 不會生成適合于ST-246的IV配制物。這些結果可在表2中找到。
[0105] 表2:在5%w/v葡萄糖中和在PBS中含有5mg/ml ST-246的助溶劑組合

[0108] 實施例2-ST-246在各種濃度的水中的助溶劑/表面活性劑中的組合物
[0109] 基于由如實施例1所述的純凈配制物獲得的溶解度數據，聯合稀釋至各種濃度的 所選擇的賦形劑進行ST-246的進一步配制物研究。這些結果概述在表3中。對于這些實驗， 分析的賦形劑包括Cremophor EL、Cremophor RH-40、乙醇和PEG 400。通過HPLC分析測定在 24小時和48小時處的濃度。
[0110] 表3-ST-246在賦形劑的水溶液(0.5至10%w/v)中的組合物
LUiid 昍總，塒％的為外的賦形刑忸拈W柙關型的*1、糊梢（ΗΡ-?-Ο)和SBK(JL)共令個冋 分子量的兩種類型的聚乙二醇化磷脂（即PEG-磷脂-2000和PEG磷脂-5000)以及表面活性劑 吐溫80和Solutol HS，以及溶劑丙二醇和二甲基乙酰胺(DMA)。在水中以0.5至10%w/v的濃 度范圍配制這些賦形劑的水溶液，并且在24和48小時處通過HPLC分析測定ST-246在這些溶 液中的溶解度。這些實驗的結果概述在表4和圖1、2和3中。
[0113] 表4- ST-246在賦形劑的水溶液(0.5至10 % w/v)中的組合物
[0115]而且，由ST-246在水中的各種媒介物中的溶解度獲得的數據用于分析各賦形劑的 增溶效果。以下表5是如通過針對賦形劑在水中的w/v%所繪制的ST-246濃度的趨勢線斜率 所測定的增溶效果的概況;斜率越大，增溶效果越大。基于賦形劑的增溶效果的幅值按順序 排列賦形齊II，ST-246在水溶液中增溶效果最高的賦形劑排名第一。第5列表示以mg/ml測定 的ST-246在純(純凈100 % )賦形劑中的溶解度。
[0116]表5-ST-246在賦形劑的水溶液中的增溶的概況
[0118] ND =未進行
[0119] 在表5中第4和5列的比較揭示:其中ST-246具有最高溶解度的賦形劑(第5列)并不 一定對應使用水稀釋的賦形劑的ST-246的溶解度(第4列）。從增溶試驗獲得的數據表明：通 過兩種環糊精證實最高增溶效果，ΗΡ-β-CD最有效，隨后為SBECD。在所測試的所有表面活性 劑中，Cremophor EL和Cremophor RH-40表現出最大增溶能力，隨后為聚山梨酯80。在兩種 PEG磷脂之間，PEG磷脂-2000為比PEG磷脂-5000更好的增溶劑。
[0120] 實施例3-具有絡合劑的ST-246溶解度:
[0121] 進一步的試驗研究ST-246在環糊精中的溶解度。環糊精含有具有極性親水性外部 和非極性疏水性空腔的圓環形環。圖4圖示一種類型的環糊精，羥丙基-β-環糊精(ΗΡ-β-CD) 的結構以及表6提供環糊精的特征概況。
[0122] 表6-環糊精的特征
[0124] 而且，表7概述ST-246在20至40%的濃度的各種級別的環糊精的水溶液中的溶解 度。如表7中所示，在37 °C下由環糊精增溶的ST-246的范圍為1.5至I lmg/ml，其中ΗΡ-β-CD的 表現優于磺基丁基醚衍生的環糊精(SBECD)。由絡合試驗獲得的數據支持ΗΡ-β-CD作為靜脈 內配制物的可能候選物。
[0125] 表8-在37°C下ST-246在取代的β-環糊精的水溶液中的溶解度
[0127]而且，圖5概述作為環糊精濃度的函數的ST-246的溶解度。如圖5所示，隨著ΗΡ-β-CD濃度增加，ST-246的溶解度增加。而且，如與SBECD相比較，ΗΡ-β-CD提供更高的ST-246溶 解度。因此，由增溶試驗獲得的數據表明：通過SBECD和ΗΡ-β-CD獲得更高的ST-246增溶效 果，而就ST-246增溶效果而言，ΗΡ-β-CD優于SBECD。
[0128] 進行進一步的研究以測定在室溫下ST-246在不同濃度的ΗΡ-β-CD中的溶解度。對 于這些實驗，在25°C的恒定溫度下使小瓶的內容物達到溶解平衡，同時在旋轉混合器上混 合小瓶的內容物。而且，在72小時的混合之后，將小瓶的內容物過濾，然后使用RP-HPLC分析 所得濾液的ST-246濃度。用于該研究的ΗΡ-β-⑶的濃度列出在表9中。而且，進行HPLC分析之 后通過改變ΗΡ-β-⑶的濃度的ST-246的溶解度列于表9中。
[0129] 表9-在25°C下進行72小時振蕩之后作為ΗΡ-β-CD濃度的函數的ST-246的溶解度
[0132] 進行下一系列的試驗以測定作為溫度的函數的ST-246在40%w/v ΗΡ-β-CD組合物 中的溶解度。這些實驗測定在組合物中隨著溫度增加的ST-246的濃度。如圖7所概述，在70 °C下使用40 % w/v ΗΡ-β-CD濃度獲得21.23mg/mL的最大溶解度。
[0133] 另一系列的實驗研究在助溶劑/表面活性劑的存在下ST-246在ΗΡ-β-CD組合物中 的溶解度。這些實驗的結果概述在表10和圖8中。如由試驗的結果顯而易見，助溶劑/表面活 性劑的存在可改善在稀釋時藥物在ΗΡ-β-CD中的溶液性質，以及也有助于在ΗΡ-β-CD中更快 溶解藥物。
[0134] 表10-在各種溫度下在助溶劑的存在下ST-246的溶解度
[0136] 在表10中所示的溶解度數據表明：助溶劑(PEG 400)或非離子表面活性劑（吐溫 80)的存在未改善ST-246在ΗΡ-β-CD中的溶解度，因此沒有進行進一步的工作來評估三元絡 合。
[0137] 進行另一系列的試驗以確定ST-246在HPBCD組合物中的最大溶解度的pH范圍。對 于這些實驗，使用4.0至10.5的?!1制備31'-246在40%冊8〇)中的各種組合物。在25°(：和2°(：-8 °C下制備組合物。下表由在4.0至10.5的pH范圍中研究的組合物以及評價的緩沖劑組成。這 些實驗的結果概述在表11中。
[0138]表11 -測試pH對ST-246的溶解度的作用的配制物的組合物
[0140] 對于這些實驗，將過量的ST-246加入含有5mL的pH緩沖的ΗΡ-β-CD溶液的小瓶。在 2-8°C和25 °C下將樣品小瓶旋轉混合超過72小時。使用0.2um PVDF膜過濾器來過濾樣品，然 后將濾液恰當地稀釋，并且使用RP-HPLC來分析ST-246含量。而且，在開始溶解度研究之前 和之后監控樣品的PiLpH測試值表明：在樣品達到平衡之前和之后沒有顯著變化。作為不同 pH的函數的在40 % HPB⑶組合物中達到的ST-246的溶解度在圖9中示出。
[0141] 如圖9所示，在2°(：-8°(：和25°(：下隨著?!1由4.0增加至10.5，觀察到溶解度的增加。 對于另一系列的試驗，啟動可注射ST-246的放大研究以理解批次大小對ST-246與ΗΡ-β-CD 的絡合的作用。對于這些實驗，使用胃腸外級別ΗΡ-β-CD來制備配制物。在冷貯存溫度(2°C 至8°C)、受控制的室溫（25°C)以及溫暖溫度下將來自這些研究的樣品放置用于穩定性測 試。將樣品在常規時間間隔下移走，觀察任意物理變化(沉淀、顏色改變等）以及使用HPLC來 分析純度以檢測ST-246的任意降解。
[0142] 配制ST-246、形式1、11、111、1￥、￥和￥1以用于液體施用。合適的劑型包括約211^/1111 至約20mg/ml的ST-246以及約12 · 5mg/ml至約40mg/ml的HPBCD。任選地，配制物進一步包含 甘露醇、海藻糖脫水物、乳糖一水合物和純化水，使得液體配制物的總體積為約l〇〇ml。對于 這些配制物，通過使用HCL/NaOH、檸檬酸/檸檬酸鈉緩沖劑以及其他緩沖劑(包括但不限于 醋酸鹽、酒石酸鹽、甘氨酸、葡萄糖醛酸)可調節pH并且維持在2.5至6.0。上述液體配制物概 述在表12-16中。
[0143] 表12-5mg/mL ST-246IV配制物的組合物的例子
[0148] 表14-12.511^/1^31'-2461￥配制物的組合物的例子
[0152] 表16-20mg/mL ST-246IV配制物的組合物的例子
[0154] 包含ST-246、形式I、II、III、IV、V和VI的另外的液體配制物概述在表17-21中。合 適的劑型包含約2mg/ml至約20mg/ml的ST-246以及約12.5mg/ml至約40mg/ml的HPBO)。任選 地，配制物進一步包含聚乙二醇400、聚山梨酯80、聚乙二醇300以及至多100mL的純化水。對 于這些配制物，通過使用HCL/NaOH、檸檬酸/檸檬酸鈉緩沖劑以及其他緩沖劑(包括但不限 于醋酸鹽、酒石酸鹽、甘氨酸、葡萄糖醛酸)可調節pH并且維持在2.5至6.0。
[0155] 表17-含有助溶劑/表面活性劑的5mg/mL ST-246IV配制物的組合物的例子
[0157] 表18-含有助溶劑的7.5mg/mL ST-246IV配制物的組合物

[0166] 而且，表22概述在各種配制物中ST-246和HPBCD的范圍。
[0167] 表22-通過改變HPBCD濃度的ST-246IV配制物的組合物
[0169]而且，對于這些實驗，評估ST-246原型配制物與通常使用的輸注流體的0.9% (w/ v)NaCl的相容性。使用各種濃度的40%(w/v)HP-f3-CD來配制ST-246的五種配制物。使用 0.9 % (w/V)NaC 1以I: I、1: 2、1: 5和1: 10的比率來稀釋配制物。在RT和5 °C下貯存稀釋的溶 液，并在常規時間間隔下通過目視檢查、顯微鏡以及按照USP指南來監控它們的物理穩定 性。這些實驗的結果概述在表23中。
[0170] 表23-進行稀釋之后ST-246IV配制物的穩定性和相容性
[0172] 當貯存在RT以及冷凍條件下，在1:2稀釋液（在臨床條件下預期稀釋）中發現5-20mg/mL的ST-246的靜脈內配制物與0.9%NaCl相容至少48小時。
[0173] 獲得的結果表明：當貯存在RT以及冷凍條件下，發現含有5-20mg/mL的ST-246濃度 的經1:1和1:2稀釋的溶液與0.9%NaCl相容至少48小時。
[0174] 在小鼠、兔和非人靈長類(NHP)中ST-246IV配制物的藥代動力學
[0175] 評估在小鼠、兔和NHP中包含HPBCD的ST-246配制物的靜脈內（IV)施用。比較所得 藥代動力學參數與口服施用之后獲得的藥代動力學參數。這些研究的結果表明：當向需要 其的受試者施用時，如與口服ST-246配制物相比較，靜脈內ST-246配制物表現出類似的藥 代動力學參數。而且，包含ΗΡ-β-CD的ST-246配制物看似安全的并且藥代動力學參數是可接 受的。
[0176] 在小鼠中藥代動力學(PK)性質:三項初步小鼠研究（ASM246、ASM250和ASM257)明 確地表明：ST-246靜脈內配制物的短暫輸注提供與在ST-246 口服給藥之后獲得的暴露類似 的暴露，但劑量更低。具體而言，評估在雌性CD-I小鼠中四個劑量(3、10、30和75mg/kg)的10 分鐘ST-246輸注，并且在這些輸注的結束時測定血漿濃度。而且，如所期望，那些濃度為峰 血漿濃度并且在75mg/kg的10分鐘輸注的結束時的平均血漿濃度為238、333ng/mL。表24概 括ST-246靜脈內配制物的C max(ng/mL)血漿濃度以及AUCo-24(小時*ng/mL)，并且提供關鍵的 口服配制物參數。
[0177] 表24-Cmax和AUC值的比較

[0180] *比較在3個月研究中由PO研究-lOOOmg/kg獲得的最高值的值
[0181] 結果明確證實:包含ΗΡ-β-⑶配制物的ST-246組合物是安全和有效的，并且提供密 切模擬在口服施用ST-246之后獲得的那些的血漿濃度時間特征。
[0182] 在兔中的PK特征：將包含ΗΡ-β-CD的靜脈內ST-246配制物向兔子施用。而且，評估 在經由兩只雄性和兩只雌性天然新西蘭白兔的耳緣靜脈以3、30和60mg/kg ST-246的劑量5 分鐘緩慢IV推注之后的耐受性和藥代動力學參數。
[0183] 如表25所示，雄性和雌性兔子的使用3mg/kg的15分鐘輸注的峰血漿濃度分別為 7225ng/mL和4345ng/mL。通常，對于口服施用，觀察的Cmax血漿濃度和AUC值更高，并且血漿 清除半衰期更長。在口服和靜脈內施用之后在兔中的藥代動力學參數的概況顯示在表25 中。
[0184]表25-在PO和IV給藥之后在兔中的藥代動力學參數
[0186] a在輸注結束后5分鐘時的第一次取樣時間
[0187] b在輸注結束時的第一次取樣時間點
[0188] 在食蟹猴中的PK性能：研究設計包括三組的兩只雄性和兩只雌性猴子。對于這些 實驗，通過植入式血管入口（VAP)的方式在4小時靜脈內輸注期內以1、3和10mg/kg施用ST-246。對于這些實驗，ΗΡ-β-⑶在輸注流體中的濃度為13.3%w/v。在給藥前和在開始輸注后 0.5、1和2小時以及在輸注結束(E0I)時(4.0小時±10分鐘）、在E0I后0.25、0.5和1小時以及 在輸注開始之后6、8、12、16、20、24和48小時收集血漿樣品以準確測定終末清除半衰期。
[0189] 在食蟹猴中，1、3和10mg/Kg以及3、10、20和3〇11^/1^的口服配制物隨著時間的藥代 動力學參數(C max(ng/mL)血漿濃度和AUCo-24(小時*ng/mL))顯示在表26中。
[0190] 將ST-246的四小時靜脈內輸注成比例給藥，并且血漿濃度曲線看似具有雙相性， 其中對于1至l〇mg/kg劑量，終末清除半衰期值為6.6小時至8.6小時。在劑量范圍內分布(Vz 以及Vss)的表觀體積值未顯著變化，并且清除率也是如此，其在劑量范圍內保持約0.5L/小 時/kg〇
[0191] 表26-IV ST-246研究246-TX-018比對口服ST-246研究 1151-065
[0193] 而且，如圖11所示，ST-246IV和口服配制物顯示相當的藥代動力學特征。而且，這 些結果表明：ST-246施用的IV途徑可在可能的治療劑量范圍內提供穩定和可預測的藥代動 力學。
[0194] 實施例4-在小鼠、兔和猴中IV輸注或口服施用之后ST-246?的安全性和藥代動力 學的比較
[0195] 已經開發出含有在水溶液中的羥丙基β環糊精的ST-246的IV施用液體配制物。評 估在小鼠、兔和NHP中該配制物的耐受性和藥代動力學以測定最佳施用策略。比較口服施用 之后觀察到的藥代動力學的結果。
[0196] 研究設計和動物半衰期研究
[0197] 口服研究
[0198] 通過向BALB/c小鼠 （Charles River)、新西蘭白（NZW)兔（Harlan)以及食蟹猴 (NHP，Charles River) 口服管飼含有1%吐溫80的甲基纖維素混懸液配制物來施用ST-246。 在喂養之后立即向NHP施用ST-246以增加生物利用率（6)。通過口服管飼30、100、300和 1000mg/kg的劑量的混懸液配制物向雌性BALB/c小鼠施用。在每個以下時間點采集三只小 鼠的血樣來測量ST-246的濃度:在給藥后0.5、1、2、3、4、5、6、8、10、12和24小時。將31'-246以 100mg/kg的劑量的混懸液配制物向三只雄性和三只雌性NZW兔口服施用。在以下時間點收 集血液以用于ST-246濃度的測定:在施用之后0.5、1、2、3、4、5、6、8、12和24小時。在進食狀 態下向每劑量組三只雄性和三只雌性NHP施用以下口服劑量的ST-246 :0.3、3、10、20和 30mg/kg。在給藥之前以及在給藥施用之后0.5、1、2、3、4、6、8、12和24小時收集血樣以測定 ST-246濃度。
[0199] IV輸注研究
[0200]評估在以下三個動物物種中通過IV輸注施用的ST-246溶液配制物的藥代動力學 和耐受性：雌性BALB/c(Charles River)和CD-1小鼠 （Charles River)、NZW兔（Harlan)以及 食蟹猴(Charles River)。
[0201]以3、30和100mg/kg的劑量向少量插導管的雌性BALB/c小鼠施用ST-246溶液配制 物的緩慢推注(5分鐘）IV注射液。在IV施用10和30mg/kg劑量之后5、15、30分鐘和1、2、4、8和 24小時時收集血液樣品，但僅在給藥施用100mg/kg劑量之后2和4小時時收集血液樣品。導 管中的顯著差異限制每時間點處小鼠數量不超過兩只。通過以3、10、30和75mg/kg的劑量向 插導管的天然雌性CD-I小鼠手術植入頸靜脈套管來給予ST-246的10分鐘IV輸注。收集給藥 之后5、10 (輸注結束）、20、30分鐘和1、2、4、8、24小時的血液樣品。當終止流血時，收集來自 三只動物的各時間點的血液樣品。
[0202] 在兔中，在5分鐘時間段內以3、30和60mg/kg的劑量以及在15分鐘時間段以3mg/kg 通過耳緣靜脈輸注ST-246,隨后在多個時間點進行采集血樣以產生完整血漿濃度曲線。在 各給藥組中使用兩只雄兔和兩只雌兔。對于5分鐘緩慢推注IV注射，收集在施用之后10分鐘 (在注射結束后5分鐘）、20和30分鐘、1、2、4、8和24小時的血液樣品。在輸注開始后15分鐘 (在輸注結束時）、25和45分鐘以及1、2、4、8和24小時時采集15分鐘IV輸注的血液樣品。 [0203]通過在股靜脈中手術植入導管來準備進行非人靈長類(NHP)的ST-246施用，這些 導管通向皮下端口。在4小時內將1、3、10、20和3〇11^/1^的劑量輸注至由兩只雄性和兩只雌 性NHP組成的組。在6小時內向另外的組施用20和30mg/kg劑量。對于4小時IV輸注組，在以下 時間點處收集血液用于ST-246分析：在開始輸注之后0.5、1、2、4小時（輸注結束）、4.25、 4.5、 5、6、8、12、16、20、24和48小時。對于6小時IV輸注，在以下時間點處收集樣品：在開始給 藥施用之后1、2、4、6小時(輸注結束）、6.25、6.5、8、10、12、16、20、24和48小時。在多個時間 點處收集血液樣品以使可完成血漿濃度曲線的表征以及評估藥代動力學參數。將兩組的4 只雄性和4只雌性用于第二次研究中，在10天之后進行該研究。在第二階段，在10和15mg/kg 的劑量的每天兩次(BID)方案過程中表征藥代動力學參數，將該劑量以相隔12小時在兩次4 小時輸注期輸注。總日劑量為20和30mg/kg，相當于在4和6小時IV輸注過程中評估的兩個最 高劑量。對于BID研究，在以下時間點處收集血液用于ST-246濃度測定:在開始輸注第一劑 量之后0.5、2、4小時（第一次輸注結束）、4.5、6、8、12、12.5、14、16小時（第二次輸注結束）、 16.5、 18、20、24、32、36 和 60 小時。
[0204] 耐受性和毒性評價
[0205] 在所有研究中觀察籠側（Cage-side)的一般外觀、行為、死亡率和垂死率 (moribundity)。評估在NHP的整個研究中諸如生命指針測量、身體檢查和神經學檢查的不 良事件(AE)的臨床前評價。
[0206] 生物分析方法
[0207] 使用液相串聯質譜測定法(LC-MS/MS)方法來測量ST-246在小鼠、兔和NHP血漿中 的濃度。校準曲線的空白血衆和質量控制樣品購自Bioreclamation，Inc . (Westbury，NY)。 在這些研究的過程中使用兩種不同提取方法。按照FDA生物分析驗證指南驗證兩種方法 (7)。在一種方法中，通過將含有同位素內標的9部分的甲醇(450yL)加至1部分(50yL)血漿 樣品的簡單蛋白沉淀法來進行從血漿中提取ST-246。在高速離心之后，將IOOyL的上清液加 至200yL的補償溶液(在0.05 %氫氧化銨中的0.05 %醋酸：甲醇；36: 55，v/v)以及直接注入 LC-MS 中。
[0208] 第二次提取方法是液-液提取(LLE)方法。使用含有內標的甲醇以1:1稀釋血漿樣 品，并且加入三體積的水。渦旋這些混合物，并且將全部體積轉移至提取板(Biotage SLE， 200mg)。應用最小真空以荷載樣品，然后使其靜置5分鐘。將甲基叔丁基醚加入所有孔(500μ L/孔）以及使用最小真空洗脫。在氮氣(設置在50°C和30-40L/min)下將溶劑蒸發至干。隨后 通過輕輕地渦旋平板來重構樣品（在甲醇/水中的0.05 %醋酸和0.05 %氫氧化銨;65:35，v/ ν) O
[0209] 以400yL/min的流動速率使用在Me0H/H20中的0.05%氫氧化銨和0.05%醋酸用于 流動相、使用具有Securityguard柱的苯基-己基柱(50x 2.0mm，5μηι，Phenomenex)來進行色 譜分離。將3200(或4000)Qtrap(AB Sciex)質譜儀調諧至多級反應監控(MRM)模式以監控在 負離子模式下的m/z躍迀，ST-246的375.0/283.2以及內標的m/z 341.1/248.8。在5.00至 2000ng/mL的濃度內線性加權（l/x2)MS/MS應答。該方法的準確度和精密度是在定量下限 (5. Ong/mL)的± 20 %以及在其他濃度的± 15 %的允許范圍內。
[0210] 藥代動力學分析
[0211 ]開始使用非房室分析的WinNonlin Phoenix版本6. l(Pharsight,Mountain View, CA)軟件來分析藥代動力學參數，隨后一些研究進行房室分析。評估以下參數:終末清除半 衰期（t1/2);曲線下面積(AUC齡）；外推至無窮大的曲線下面積(AUCo- inf);清除率(CL);以及 穩態分布體積(Vss)。由實驗值圖解測定峰血漿濃度(C max)以及峰血漿濃度時間(Tmax)。
[0212] 統計分析
[0213] 使用基于單向方差分析(ANOVA)回歸模型的JMP8.0程序(SAS Corporation,Cary, NC)來分析Cma4PAUC〇-inf的未轉化數據和劑量歸一化數據，從而評估劑量線性和劑量比例 性。使用學生t檢驗來評估相同劑量組內的性別差異。p值〈0.05被認為是統計學顯著的。 [0214] 小鼠研究
[0215] 在BALB/c小鼠中ST-246的初步彈丸IV注射導致在34mg/kg的最高劑量下一些劑量 相關毒性和死亡率。緩慢(5分鐘推注）IV注射導致在100mg/kg劑量下呼吸困難和嗜睡的一 些臨床征象，但在3和30mg/kg下耐受性較好。這些觀察表明：毒性與峰血漿濃度相關以及輸 注越慢則可安全施用越高的劑量。因為在BALB/c小鼠中的大量導管未能顯著保留，所以進 一步增加向小鼠施用的持續時間則需要將BALB/c的小鼠品系改變成稍微更大的CD-I品系。 在研究證實小鼠品系的改變不會導致暴露或藥代動力學的顯著改變(數據未顯示)之后，以 3、10、30和75mg/kg的劑量向插導管的雌性CD-I小鼠施用10分鐘IV輸注。盡管在輸注結束之 后接受最高劑量75mg/kg的小鼠步伐不穩定，但在2-3小時后它們恢復正常。當施用10分鐘 IV輸注時，所有其他劑量均良好耐受。在臨床征象與輸注結束之間的相關性表明，但并非證 明：在以較高劑量IV施用之后，高C max濃度是造成小鼠中的臨床征象的原因。
[0216] 結果(表27和圖16)顯示:在10分鐘內的IV輸注導致ST-246的非常高的Cmax血衆濃 度。在75mg/kg的10分鐘IV輸注之后在雌性⑶-1小鼠中的平均Cmax濃度為238yg/mL，這為在 雌性BALB/c小鼠中進行單次口服施用1000mg/kg(高13倍的劑量)觀察的Cma^3.6倍。盡管 在這些短暫IV輸注之后的最大血漿濃度比施用更高口服劑量之后遠遠更高(表27)，但暴露 (AUCo-2切財)僅為相同的兩個劑量組的1.5倍。30mg/kg 口服給藥的暴露與相同劑量的10分鐘 IV輸注的暴露的比較顯示:對于該劑量，ST-246具有約41 %的生物利用率。隨著劑量增加， 在口服施用之后劑量歸一化的暴露降低，而在IV施用之后未觀察到相同趨勢。
[0217] 表27-在向雌性BALB/c小鼠口服施用之后以及在雌性CD-I小鼠中10分鐘IV輸注之 后ST-246的藥代動力學參數的比較
[0220] IV，靜脈內
[0221] p〇, 口服
[0222] IV輸注和口服給藥的清除半衰期類似，IV輸注給藥范圍為2.5至4.5小時，而口服 給藥范圍為2.2至4.5小時。這些值與在BALB/c小鼠的整個口服非臨床安全毒物動力學研究 中一致觀察到的值非常接近。在3-75mg/kg劑量范圍內的IV輸注之后清除率相對一致，但在 約30倍劑量范圍內在口服給藥后的表觀清除率增加約10倍。圖1明確圖示：即使小鼠中的短 暫IV輸注也提供隨著時間的與口服施用之后觀察到的血漿暴露類似的血漿暴露，但其具有 更高的最大血漿濃度。
[0223] 兔研究
[0224] 比較在NZW兔中ST-246的IV施用與口服施用的耐受性和藥代動力學。盡管初步研 究顯示lmg/kg的IV彈丸施用是良好耐受的，但在小鼠中IV輸注研究結果表明在快速IV施用 最高劑量之后可能缺乏耐受性。因此，在NZW兔中通過耳緣靜脈以3、30和60mg/kg的劑量5分 鐘緩慢推注IV注射來施用ST-246。盡管3和30mg/kg劑量均是良好耐受的，但施用60mg/kg劑 量的兔在進行注射之后立即表現出嗜睡、呼吸困難和麻醉。在注射之后30-60分鐘這些動物 看似完全恢復。3mg/kg劑量的緩慢(15分鐘)輸注也是良好耐受的。
[0225] 3mg/kg的15分鐘IV輸注導致5 · 79yg/mL的平均Cmax濃度，這僅為在口服施用IOOmg/ kg之后觀察到的2.86yg/mL的兩倍(表2)。然而，3mg/kg 1￥給藥的4110)-24值僅為2.38小時*4 g/mL，而100mg/kg 口服給藥的AUCo-24值為19.8小時*yg/mL，對于高33倍的劑量，其暴露僅高 8.3倍。僅在60mg/kg劑量處觀察兔的臨床征象，其中平均C max血漿ST-246濃度為94. lyg/mL， 而對于ST-246的良好耐受的30mg/kg劑量觀察到的平均最大血漿濃度較低，為38.5yg/mL。 然而短暫IV輸注的C max值比較高口服劑量（100mg/kg)遠遠更高，如通過AUC測量值測定的暴 露遠遠更低。在兩種性別中通過靜脈內緩慢推注30mg/kg劑量之后觀察到的AUCo-24值與 100mg/kg 口服給藥所記錄的AUCo-24值可比較，雖然其具有高Cmax，但顯然，由籠側觀察測試 物品可知該劑量的測試樣品和遞送速率在兔中均良好耐受。如使用小鼠所觀察，在兔中的 短暫靜脈內輸注產生非常高的最大ST-246濃度，這與在動物中觀察到臨床征象的時間相對 應。盡管AUC值比對應口服給藥的值更高，但其并不與在這些研究中觀察到的臨床征象相 關。使用3mg/kg ST-246的15分鐘IV輸注來評估在兔中藥代動力學參數。在15分鐘IV輸注研 究中，在輸注結束之后立即采集血液樣品，而不是如在開始IV輸注研究中在輸注結束之后5 分鐘取樣。第二次研究的C max因而是比開始的5分鐘IV輸注研究更加準確的對Cmax的反饋，并 且事實上，C max值基本上更高（參見表2)。單次更長輸注的結果證實在多次給藥研究中觀察 到的那些，即在短暫IV輸注后的C max值比在等量口服給藥之后觀察到的Cmax值遠遠更高。
[0226] 在兔IV輸注研究中血漿濃度曲線的半對數曲線顯示雙相性分布和清除（圖17)。似 乎有初始快速分布階段，隨后為緩慢終末清除期。在兔中IV輸注之后的清除半衰期沒有明 確的劑量相關性趨勢。對于IV輸注劑量組，清除半衰期的范圍為約1小時至12.2小時，而 10〇11^/1^口服劑量的清除半衰期為3.7小時(表28)。
[0227] 表28-在向新西蘭白兔口服施用和IV施用之后的ST-246藥代動力學參數的比較
[0230] EOI，輸注結束
[0231] IV，靜脈內
[0232] P0, 口服
[0233] NHP 研究
[0234] 在NHP中以1、3、10、20和30mg/kg的劑量通過手術植入式血管入口在4小時內經IV 輸注來施用ST-246。在ST-246的4小時IV輸注中血漿濃度增加，在輸注結束時達到最大濃度 (表29,圖18)。在IV輸注之后的最大血漿濃度（C max)比在口服施用等同劑量之后更高（表 29)。在較高劑量處，在口服和IV Cmax濃度之間的差異增加。在口服施用之后的Cmax濃度增加 小于劑量比例，而在IV輸注之后的峰血漿濃度的增加大于基于劑量比例所預期的值。
[0235] 表29-在食蟹猴中在口服施用和IV輸注之后的ST-246藥代動力學參數的比較
[0238] S0I，開始輸注
[0239] IV，靜脈內
[0240] P0, 口服
[0241] BID: -天兩次
[0242] 當劑量增加100倍(從0.3至30mg/kg)時，在口服施用ST-246之后的最大血漿濃度 僅增加37倍，而暴露(AUC inf-Clbs)增加接近劑量的比例增加，或者84倍。在口服施用之后清除 也是雙相性的，其血漿濃度曲線類似于在兔中觀察到的那些。
[0243] 在IV輸注之后的血漿清除呈現具有至少兩個不同的階段，在輸注結束時快速分布 階段，隨后為緩慢終末清除期（圖18)。對于lmg/kg劑量組的大部分動物在24小時之前的血 漿濃度降低至定量下限（LL0Q = 5.0ng/mL)，而對于較高劑量組的所有其他動物，在48小時 的最后時間點處ST-246高于LL0Q。
[0244] 對個別動物使用非房室分析來計算藥代動力學(PK)參數。對于IV輸注，各給藥組 由兩只雄性和兩只雌性動物組成，而對于口服給藥，各給藥組具有三只雄性和三只雌性動 物。進行學生t檢驗以評估關于Cmax和AUCinf的PK參數的可能的性別差異。在95%置信區間測 試的各劑量水平下對于CmaxSAUCinf值均沒有顯著性別差異(p>0.05)。因此，通過包括各給 藥組兩性別的所有動物來計算均值和標準偏差。在各給藥組內個別C max或AUCinf值的變化性 非常小，除了經疏忽和明顯皮下注射的一只或兩只動物并且其值從該組的均值排除。
[0245] 當4小時IV輸注劑量由1增加至10mg/kg時，盡管CmaJPAUCinf值按劑量比例增加，但 在20和30mg/kg劑量下這些值的增加大于劑量比例(表29)。3和10mg/kg劑量的(：腹值分別為 lmg/kg劑量的2.7倍和11.5倍，而20和3〇11^/1^劑量的對應值分別為其的31倍和52倍。與 lmg/kg劑量相比，對于3、10、20和30mg/kg劑量，AUCinf值分別增加3 · 0、11 · 0、32和53倍。當在 4小時內輸注的劑量增加時，在劑量比例以上暴露的增加也反饋清除率(Cl =劑量/AUC)降 低的強烈趨勢，這表明分布或清除機制的飽和（圖19)。對于20和30mg/kg劑量延長IV輸注長 度至6小時比較短輸注的清除率增加(并且降低暴露）。然而，更高劑量的更久輸注的清除率 值也比1、3和10mg/kg劑量低。對于4小時輸注，當通過ANOVA評估劑量組時，清除率值均沒有 統計學上顯著差異。
[0246] 4小時輸注的Cmax血漿濃度比6小時輸注的高約50%，并且更短輸注計算的暴露也 更高，但僅高約20%。對于所有IV輸注，在輸注結束之后的血漿濃度看似具有至少兩個階 段，在EOI之后馬上觀察到清晰的快速分布階段，隨后為緩慢終末清除期。除了 Tmax和實際血 漿濃度之外，兩種輸注速率和劑量的血漿濃度曲線看起來類似。
[0247] 在劑量范圍和6.6至9.1小時的不同輸注長度內，在IV輸注之后的清除半衰期相對 恒定(表29)。與口服施用3mg/kg劑量的9.9小時半衰期相比，3〇11^/1^劑量的口服施用導致 17.7小時終末清除半衰期。至多20mg/kg的劑量的口服施用具有類似的清除半衰期;并且這 些清除半衰期非常類似于在IV輸注之后觀察到的清除半衰期(表29)。
[0248]通過在一次24小時時間段內相隔12小時開始的兩次4小時IV輸注來進行兩個最高 總日劑量的一天兩次(BID)施用研究（圖20A和20B)。單次劑量分別是10和15mg/kg，所以兩 個劑量組的總日劑量是20和30mg/kg/天。在每個4小時IV輸注時間段內血漿濃度增加，而對 于大部分動物，C max出現在輸注結束時。在第一次輸注結束之后，血漿ST-246濃度下降直至 12小時時間點處，當第二次4小時IV輸注開始時。至于第一次輸注，血漿濃度增加直至輸注 結束，然后在研究剩余時間內降低。在最后時間點處，在第一次IV輸注給藥開始之后60小 時，對于在兩個劑量組中所有動物，ST-246濃度非常接近定量下限（5ng/mL)。半對數圖（圖 20A和20B)表明：在第二次輸注結束之后ST-246從血漿的清除至少為雙相性的，即對于兩個 劑量在清晰觀察到Tm ax2后的快速分布，以及緩慢終末清除期。
[0249] BID施用研究具有在各給藥組中的4只雄性和4只雌性，提供更大數，利用該數來評 估在IV輸注之后藥代動力學參數的任意可能的性別差異。除了以10mg/kg/劑量水平給藥的 第一階段中觀察到的Cmax之外，PK參數(C max、AUC麵或者AUCinf、Cl和Vss)的學生t檢驗分析顯 示兩種性別等同（P〈〇.05)。因為兩種性別的藥代動力學參數之間沒有一致差異，所以通過 合并各給藥組的兩種性別的數據來計算ST-246的最終平均值和標準偏差值。
[0250] 在第一次4小時IV輸注期間，15mg/kg劑量的CmaJPAUCiast值為10mg/kg劑量的那些 值的1.6倍。在第二次IV輸注期間，增加稍微多些，CmaJPAUC值約為1.8倍。由第二次輸注計 算的終末清除半衰期基本上相等，對于兩個劑量分別為8.9和9.1小時。對于該兩個劑量，清 除率也基本上等同以及均在單次IV輸注所觀察到的范圍內。
[0251 ]如在小鼠和兔中IV輸注研究也可觀察到，在NHP中最高劑量的快速輸注，在4小時 內輸注30mg/kg，導致與輸注結束相一致的臨床征象。在4小時輸注持續時間內接受30mg/kg 劑量的ST-246的四只動物中的三值只表現出輕度全身性震顫。這些震顫出現在給藥日輸注 結束之后13分鐘內，并且在結束輸注之后約2小時消失，這表明該毒性的可逆性。在6小時內 給藥30mg/kg的動物中或者在通過輸注持續時間接受20mg/kg劑量的動物中未觀察到震顫。 此外，在任意NHP的整個BID研究中未觀察到任何臨床征象。30mg/kg 4小時輸注組的平均峰 血漿濃度為20.0 yg/mL，而在6小時內輸注的相同劑量的平均峰血漿濃度為約13. Oyg/mL。在 20mg/kg劑量組以及BID研究中的峰血漿濃度遠遠更低(表29)。
[0252] _
[0253] 在小鼠 、兔、地松鼠、草原犬鼠和NHP中口服施用之后已經證實ST-246對痘病毒科 的抗病毒功效(3,8-13)。在小鼠、見^和人中已經徹底表征在口服施用之后51'-246的藥代動 力學，而在兔、大鼠和狗中僅具有有限的信息。因為在人類中缺乏有價值的正痘(orthopox) 疾病，則人治療劑量的選擇必然基于動物ρκ/ro關系來選擇，所以對待評估功效的種屬的藥 代動力學的完整理解很重要。人劑量計算的最相關動物種屬是NHP。
[0254] 與在口服施用之后觀察到的相比，在結束輸注之后在兔中血漿濃度曲線降低非常 快，其中在單次口服施用l〇〇mg/kg之后顯著延長的吸收提供具有相對高濃度的長終末清除 期（圖17)。令人感興趣地，當IV輸注的劑量由30mg/kg增加至60mg/kg時，在終末清除期中觀 察到的濃度增加，這表明更高的劑量已飽和一些清除機制，如在NHP中所觀察到的。需要另 外的輸注研究以證實在兔中施用劑量和清除率之間可能的關系。
[0255] 在NHP中口服ST-246研究評估在0.3至30mg/kg的劑量范圍內的藥代動力學性質， 這涵蓋在功效研究中使用的那些劑量。結果表明當口服施用的劑量增加時吸收看似飽和， 并且這反饋在C max*度以及暴露中。盡管Cmax以及暴露在該口服劑量范圍內增加，但它們增 加小于劑量比例。當劑量增加100倍時，C max僅增加37倍，而如通過AUCinJ^定的暴露增加84 倍，這更接近100倍劑量增加。
[0256] 在IV輸注相同劑量之后未觀察到隨著口服劑量增加導致血漿濃度和暴露降低的 吸收飽和。基于比較相同的口服和IV劑量在NHP中ST-246的生物利用率的范圍為77% (在 3mg/kg下）至31 % (在20和30mg/kg劑量下）。在IV輸注之后，在這些高劑量下的暴露實際上 比基于劑量比例暴露所期望的值更高。20和30mg/kg的4小時IV輸注的暴露分別為在lmg/kg IV輸注給藥之后觀察到的暴露的30倍和50倍(表29)。更久輸注降低C max值接近20和30mg/kg 劑量的劑量比例，而AUC值降低至為4小時lmg/kg IV輸注所觀察到的暴露的25倍和45倍(表 29)』ID給藥方案證實該觀察，即更慢的輸注不僅降低Cmax，也降低總暴露值至接近劑量比 例。這些結果表明ST-246的快速輸注使一些清除機制飽和。在類似劑量范圍內，口服吸收可 隨著劑量增加而降低，使得清除率保持相對穩定，或者甚至稍微增加。
[0257] 在口服施用ST-246之后血漿濃度曲線的目視檢查表明吸收延長以及可對清除半 衰期具有一些明顯影響。然而，對于三個種屬研究中的任一種，在口服和IV施用之間的清除 半衰期均未顯著改變。鑒于在通過口服和IV輸注檢查的所有三個種屬中這些類似的清除半 衰期，看起來應當施用更久的IV輸注來降低高血漿濃度，以及避免一致的毒性，同時維持在 目前口服研究中使用的一天一次的給藥方案。
[0258] 本發明還包括下述具體實施方案：
[0259] I.-種液體藥物配制物，其包含治療有效量的ST-246和環糊精以及進一步包含一 種或多種藥學上可接受的成分。
[0260] 2.根據具體實施方案1所述的液體藥物配制物，其中所述藥學上可接受的成分選 自：載體、賦形劑、稀釋劑、添加劑、填料、潤滑劑和粘合劑。
[0261] 3.根據具體實施方案1所述的液體藥物配制物，其中所述環糊精是羥丙基-β-環糊 精。
[0262] 4.根據具體實施方案3所述的液體藥物配制物，其中所述羥丙基-β-環糊精以約20 重量％至約40重量％的量存在。
[0263] 5.根據具體實施方案1所述的液體藥物配制物，其中所述環糊精是磺丁基醚-β-環 糊精。
[0264] 6.根據具體實施方案1所述的液體藥物配制物，其具有約3至10的pH。
[0265] 7.根據具體實施方案3所述的液體藥物配制物，其中所述羥丙基-β-環糊精具有約 4.0至約8.0的取代度。
[0266] 8.-種治療正痘病毒屬感染和/或牛痘性濕疹的方法，其包括向需要其的受試者 施用根據具體實施方案1所述的液體藥物配制物。
[0267] 9.根據具體實施方案8所述的方法，其中通過胃腸外施用來施用所述液體配制物。
[0268] 10.根據具體實施方案8所述的方法，其中通過口服施用來施用所述液體配制物。
[0269] 11.根據具體實施方案8所述的方法，其中通過局部施用來施用所述液體配制物。
[0270] 12.根據具體實施方案8所述的方法，其中通過靜脈內施用來施用所述液體配制 物。
[0271] 13.根據具體實施方案12所述的方法，其中每一次靜脈內施用輸注約50至約500mg 的ST-246。
[0272] 14.根據具體實施方案12所述的方法，其中每一次靜脈內施用輸注約200至約 400mg的ST-246。
[0273] 15.根據具體實施方案12所述的方法，其中每一次靜脈內施用輸注約300mg的ST- 246 〇
[0274] 16.根據具體實施方案12所述的方法，其中進行周期為約7至約30天的所述治療。
[0275] 17.根據具體實施方案12所述的方法，其中進行周期為約7至約15天的所述治療。
[0276] 18.根據具體實施方案12所述的方法，其中每次靜脈內施用的持續時間為約2至約 24小時。
[0277] 19.根據具體實施方案12所述的方法，其中以約50至約500mg的ST-246/天的劑量 在治療過程中連續進行所述治療。
[0278] 20.根據具體實施方案12所述的方法，其中以每天兩次進行所述靜脈內施用。
[0279 ] 21.根據具體實施方案20所述的方法，其中每次的持續時間為約2至約12小時。
[0280] 22.-種制備根據具體實施方案1所述的液體配制物的方法，其包括以下步驟：
[0281 ] a)在藥學上可接受的液體載體中混合ST-246與環糊精；以及
[0282 ] b)任選地過濾步驟a)的混合物。
[0283] 23.根據具體實施方案22所述的方法，其中所述ST-246選自：ST-246多晶型形式I; ST-246多晶型形式11;31'-246多晶型形式111;31'-246多晶型形式1￥;31'-246多晶型形式￥以 及ST-246多晶型形式VI。
[0284] 24.根據具體實施方案22所述的方法，其中所述環糊精是羥丙基-β-環糊精。
[0285] 25.根據具體實施方案22所述的方法，其中所述羥丙基-β-環糊精以約20重量％至 約40重量％的量存在。
[0286] 26.根據具體實施方案22所述的方法，其中將所述液體配制物調節至約3至10的 pH。
[0287] 27.根據具體實施方案24所述的方法，其中所述羥丙基-β-環糊精具有約4.0至約 8.0的取代度。
[0288] 28.根據具體實施方案22所述的方法，其中在25°C的溫度下使所述步驟(a)的混合 物達到溶解平衡。
[0289] 29.根據具體實施方案22所述的方法，其中在約37°C的溫度下使所述步驟(a)的混 合物達到溶解平衡。
[0290] 30.根據具體實施方案22所述的方法，其中將所述ST-246與藥學上可接受的載體 混合約72小時。
[0291 ] 31. -種單位劑量液體配制物，包含：
[0292] a)約2mg/ml至約20mg/ml的ST-246含量；以及
[0293] b)約12.5mg/ml至約40mg/ml的輕丙基-β-環糊精含量。
[0294] 32.根據具體實施方案31所述的單位劑量液體配制物，進一步包含選自甘露醇、海 藻糖脫水物、乳糖一水合物和純化水的一種或多種藥學上可接受的成分。
[0295] 33.根據具體實施方案31所述的單位劑量液體配制物，其具有約3.0至約10.0的pH 范圍。
[0296] 34.根據具體實施方案31所述的單位劑量液體配制物，其具有約100mL的總體積。
[0297] 35. -種單位劑量液體配制物，包含：
[0298] a)約2mg/ml至約20mg/ml的ST-246;以及
[0299] b)約12.5mg/m 1至約40mg/m 1的輕丙基-β-環糊精含量。
[0300] 36.根據具體實施方案35所述的單位劑量液體配制物，其進一步包含選自聚乙二 醇400、聚山梨酯80、聚乙二醇300和純化水的一種或多種藥學上可接受的成分。
[0301] 37.根據具體實施方案35所述的單位劑量液體配制物，其具有約100mL的總體積。
[0302] 38.根據具體實施方案35所述的單位劑量液體配制物，其具有約3.0至約10.0的pH 范圍。
[0303] 39.-種用于制備水溶性固體ST-246藥物配制物的方法，其包括：
[0304] a)在藥學上可接受的液體載體中混合ST-246與環糊精；
[0305] b)任選地過濾步驟a)的混合物；以及 [0306] c)凍干所述混合物。
[0307] 40.根據具體實施方案1所述的方法，其中所述環糊精是羥丙基-β-環糊精。
[0308] 參考文獻
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【主權項】
1. 一種液體藥物配制物，其包含治療有效量的4-三氟甲基-N-( 3，3a，4，4a，5，5a，6，6a-八氫-1，3-二氧代-4,6-亞乙烯基環丙[f]異吲哚-2(1H)_基)-苯甲酰胺）（ST-246)和環糊精 以及進一步包含一種或多種藥學上可接受的成分。2. 根據權利要求1所述的液體藥物配制物，其中所述藥學上可接受的成分選自：載體、 賦形劑、稀釋劑、填料、潤滑劑和粘合劑。3. 根據權利要求1或權利要求2所述的液體藥物配制物，其中所述環糊精是羥丙基-β-環糊精，所述輕丙基-β-環糊精任選地以20重量％至40重量％的量存在，或任選地具有4.0 至8.0的取代度。4. 根據權利要求1或權利要求2所述的液體藥物配制物，其中所述環糊精是磺丁基醚-β-環糊精。5. 根據權利要求1-4中任一項所述的液體藥物配制物，其具有3至10的pH。6. 根據權利要求1所述的液體藥物配制物，其用于治療正痘病毒屬感染和/或牛痘性濕 疹。7. 根據權利要求6所述的配制物，其中所述液體配制物用于胃腸外施用、口服施用、局 部施用或靜脈內施用。8. 根據權利要求7所述的配制物，其中所述液體配制物用于靜脈內施用，且其中每一次 靜脈內施用輸注50至500mg的ST-246，進行周期為7至30天的所述治療，每次靜脈內施用的 持續時間為2至24小時，以50至500mg的ST-246/天的劑量在治療過程中連續進行所述治療， 或以每天兩次進行所述靜脈內施用，其中每次的持續時間任選地為約2至約12小時。9. 一種制備根據權利要求1-5中任一項所述的液體配制物的方法，其包括以下步驟： a) 在藥學上可接受的液體載體中混合ST-246與環糊精；以及 b) 任選地過濾步驟a)的混合物。10. 根據權利要求9所述的方法，其中所述ST-246選自：ST-246多晶型形式I; ST-246多 晶型形式II; ST-246多晶型形式III; ST-246多晶型形式IV; ST-246多晶型形式V以及ST-246 多晶型形式VI。11. 根據權利要求9所述的方法，其中將所述液體配制物調節至3至10的pH，在25°C的溫 度下使所述步驟(a)的混合物達到溶解平衡，或將所述ST-246與藥學上可接受的載體混合 72小時。12. -種單位劑量液體配制物，包含： a) 2mg/ml至 20mg/ml 的4-三氟甲基-N_( 3，3a，4，4a，5，5a，6，6a_ 八氫-1，3-二氧代-4，6-亞乙烯基環丙[f]異吲哚-2(1H)_基)-苯甲酰胺）（ST-246)含量；以及 b) 12 · 5mg/ml至40mg/ml的輕丙基-β-環糊精含量。13. 根據權利要求12所述的單位劑量液體配制物，進一步包含選自甘露醇、海藻糖脫水 物、乳糖一水合物和純化水的一種或多種藥學上可接受的成分，或選自聚乙二醇400、聚山 梨酯80、聚乙二醇300和純化水的一種或多種藥學上可接受的成分。14. 根據權利要求12或權利要求13所述的單位劑量液體配制物，其具有3.0至10.0的pH 范圍，或具有l〇〇ml的總體積。15. -種用于制備水溶性固體4-三氟甲基-N-(3，3a，4，4a，5，5a，6，6a-八氫-1，3-二氧 代-4,6-亞乙烯基環丙[f]異吲哚-2(1H)_基)-苯甲酰胺）（ST-246)藥物配制物的方法，其包 括： a) 在藥學上可接受的液體載體中混合ST-246與環糊精，例如羥丙基-β-環糊精； b) 任選地過濾步驟a)的混合物；以及 c) 凍干所述混合物。
【文檔編號】A61K31/4035GK106074370SQ201610599807
【公開日】2016年11月9日
【申請日】2011年8月2日 公開號201610599807.0, CN 106074370 A, CN 106074370A, CN 201610599807, CN-A-106074370, CN106074370 A, CN106074370A, CN201610599807, CN201610599807.0
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