連翹苷、連翹苷衍生物、連翹苷與連翹脂素的組合物在制備抗炎藥物中的應用
【專利摘要】本發明公開了一種連翹苷、連翹苷衍生物、連翹苷與連翹脂素的組合物在制備緩解或/和治療炎癥藥物中的新應用。試驗證明，連翹苷、連翹苷衍生物、連翹苷與連翹脂素的組合物治療炎癥的療效顯著，見效快、毒副作用小、是一種安全、高效、穩定、制備工藝簡單的治療炎癥藥物，適于工業化生產，易于推廣。本發明為預防和治療炎癥及其并發癥提供了一種新的藥物來源。
【專利說明】
連翹苷、連翹苷衍生物、連翹苷與連翹脂素的組合物在制備 抗炎藥物中的應用
技術領域
[0001] 本發明涉及醫藥領域，涉及一種治療炎癥的藥物或保健食品，特別涉及一種中藥 連翹及連翹苷、連翹苷衍生物、連翹苷與連翹脂素的組合物在緩解和/或治療炎癥藥物或 保健食品中的應用。
【背景技術】
[0002] 炎癥（inflammation)是具有血管系統的活體組織對損傷因子所發生的防御性反 應。它包括致炎因子引起的損傷、機體防御性反應和組織損傷恢復三個方面。白細胞是機 體中的重要炎性細胞，它的粘附、穿越血管內皮向炎癥部位移行是炎癥反應的重要特征，其 分子基礎是位于白細胞和血管內皮細胞上的粘附分子之間的相互作用，以及各種細胞因子 對粘附分子表達的調節。白細胞粘附是一個多步驟的復雜的級聯反應過程，多種粘附分子 及細胞因子參與了這一復雜的過程。
[0003] 細胞粘附分子（cell adhesion molecules, CAMs)是泛指一類介導細胞與細胞或 細胞與細胞外基質間相互結合，起粘附作用的膜表面或膜外糖蛋白。它們在胚胎的發育和 分化、正常組織結構的維持、炎癥與免疫應答、淋巴細胞歸巢、傷口修復、凝血與血栓形成以 及腫瘤的浸潤和轉移等多種生理、病理過程中均具有重要作用。它的種類很多，目前根據 CAMs的化學結構和功能特點將其分為：（1)選擇素家族（selectin family) ;(2)整合素家 方矣（intergrin family) ; (3)免疫球蛋白超家方矣（immunoglobulin superfamily, IgGSF)；
[4] f丐粘附素家族（cadherin family) ; (5)其它粘附分子等。它們主要位于血管內皮細胞 和各種白細胞表面，常參與炎癥反應。細胞粘附分子具有廣泛的生物學活性，不同的粘附分 子其功能各異但具有某些共同特點：①通過受體與配體相結合的形式發揮作用，同一黏附 分子可與不同配體結合；②粘附分子幾乎無多態性，同一種屬不同個體的同類黏附分子基 本相同；③同一細胞表面可表達多種不同類型粘附分子；④粘附分子的作用往往通過多對 受體和配體共同作用而完成；⑤同一粘附分子在不同細胞表面可能發揮不同作用，同一生 物學功能也可能由不同粘附分子所介導；⑥粘附分子在介導粘附作用的同時往往也啟動信 號傳遞，粘附和信號傳遞效應粘附分子密度及其與配體的親和力有關。
[0004] 類風濕性關節炎（Rheumatoid Arthritis)是一種原因不明的多發性關節炎，主要 表現在上肢以手、腕、肘、肩關節，下肢以足、躁、膝、骸關節，脊柱以寰樞關節為主的慢性關 節炎、滑膜炎，一般是慢性發病，年齡在40-70歲之間，女性為男性的3-4倍，病情進展很慢， 病程較長，關節強直，變形嚴重，功能受損，并導致終身殘廢，臨床藥物治療控制效果不好， 是嚴重威脅人類身體健康的一種常見病、多發病：故有人稱之為."亞癌"。現代醫學主要 治療方法是以藥物治療為主，目的在于控制病情，緩解癥狀，保護關節，使用的藥物可分為 三類：非幽體類抗炎藥、調節性抗類風濕性藥和糖皮質類激素，由于藥物副作用嚴重，引起 的肝腎損害，肺纖維化等病人難以堅持長期服藥；另外藥物對于人體正常免疫功能大大降 低，從而使病人易患各種感染癥。外科治療主要是關節固定和人工關節，由于正常免疫功能 低下，人工關節的術后感染率高于正常的數倍。中醫學則采取祛風除濕、散寒止痛的治療方 法，利用中藥對人體毒副作用較低的特點，在長期的醫療實踐中積累了豐富的臨床經驗。
[0005] 連翹是中藥臨床常用傳統藥物之一，應用廣泛，用量巨大，臨床上常與其他的中草 藥制成配方。近年研究發現，連翹水提物對胃癌、肝癌、腸癌、食管癌細胞具有增殖抑制作 用，但是，其中具體活性成分尚不清楚，
【發明人】經過艱苦探索，制備提取了其中活性單體化 合物連翹苷，并經化學合成，制備了相應的衍生物，進行了一系列的藥理活性研究，發現連 翹苷、連翹苷衍生物、連翹苷與連翹脂素的組合物具有抑制炎癥，增強人體免疫功能活性， 為炎癥患者開辟了新的治療途經。
[0007] 本發明人通過大量的現代科學研究，采用先進的分離純化技術從連翹及連翹葉中 提取其治療炎癥的有效成分連翹苷，并經進一步研究合成制備了連翹苷衍生物。可以為炎 癥患者提供一種高效低毒的藥物。
【發明內容】
[0008] 本發明的首要目的是針對上述現有的預防或治療炎癥藥物或保健品存在的技術 問題，提供連翹苷、連翹苷衍生物、連翹苷與連翹脂素組合物（即連翹苷/連翹脂素）抗炎 癥的性能和功效，并提供連翹苷、連翹苷衍生物、連翹苷/連翹脂素組合物新的藥用用途， 即在抗炎藥物或保健食品中的新應用。
[0009] 為實現上述目的，本發明一方面提供一種連翹苷、連翹苷衍生物、連翹苷/連翹脂 素組合物在制備抗炎癥藥物或保健品中的應用。
[0010] 在篩選具有抗炎癥作用的天然活性成分的過程中，發明人發現連翹的化學成分中 連翹苷、連翹苷衍生物、連翹苷/連翹脂素組合物具有強烈的抗炎癥作用。
[0011] 其中，所述藥物或保健品由連翹苷、連翹苷衍生物或連翹苷/連翹脂素組合物和 藥學上可接受的載體組成。
[0012] 特別是，所述連翹苷衍生物選擇連翹脂素葡萄糖醛酸衍生物。
[0013] 特別是，所述連翹苷衍生物包括33-羥基-連翹脂素葡萄糖醛酸苷（33-Hydroxy phi 1 lygenin-8-〇- β -D-glucuronide)、9-羥基-連翹脂素葡萄糖醛酸苷（9-Hydroxy phillygenin-8-〇-β -D-glucuronide)、33, 34-亞甲基二氧-連翹脂素葡萄糖醛酸 苷（33,34-Methylenedioxy phillygenin-8-〇-0-D-glucuronide)、連翅脂素葡萄 糖酸酸甲酯（（2R，3R，4R，5S)-methyl6-(5-((lR，4S)-4-(3,4-dimethoxyphenyl) hexahydrofuro[3, 4~c]furan-1-yl)-2-methoxyphenoxy)-3, 4, 5-trihydroxyte tra hydr〇-2H-pyran-2_carboxylate)、連翅脂素葡萄糖酸酸鈉（sodium(2R, 3R, 4R, 5S) -6 -(5-((1R, 4S)-4-(3, 4-dimethoxyphenyl)hexahydrofuro[3, 4~c]furan-1-yl)-2~met hoxyphenoxy)_3, 4, 5-trihydroxytetrahydr〇-2H-pyran-2_carboxylate)、連翅月旨素 葡萄糖酸酸鉀（potassium(2R,3R, 4R,5S)-6_ (5-( (1R,4S)-4_ (3, 4-dimethoxyphenyl) hexahydrofuro[3, 4~c]furan-1-yl)-2-methoxyphenoxy)-3, 4, 5-trihydroxytetrahydr〇-2H-pyran-2-carboxylate)、連翹脂素葡萄糖醛酸（(2R, 3R, 4R, 5S)-6-(5_((lR, 4S)-4_(3, 4 -dimethoxyphenyl) hexahydrofuro [3, 4~c] furan-1-yl)-2-methoxyphenoxy)-3, 4, 5~trih ydroxytetrahydr〇-2H-pyran-2_carboxylic acid);優選為 33-羥基-連翅脂素葡萄糖酸 酸苷、9-羥基-連翹脂素葡萄糖醛酸苷、33, 34-亞甲基二氧-連翹脂素葡萄糖醛酸苷、連翹 脂素葡萄糖醛酸甲酯、連翹脂素葡萄糖醛酸鈉或連翹脂素葡萄糖醛酸鉀。
[0014] 特別是，所述連翹苷與連翹脂素組合物中連翹苷與連翹脂素的重量份配比為2~ 98 :2~98 ;優選為2-10:90-98 ;進一步優選為80:20或20:80,進一步優選為90:10或 10:90,更進一步優選為98:2或2:98 ;再進一步優選為98:2。
[0015] 其中，所述的連翹苷、連翹苷衍生物的含量多1%，優選為多30%，進一步優選為 多60%，更進一步優選為多80%，再更進一步優選為多98% ;連翹苷與連翹脂素的組合物 含量多1%，優選為多30%，進一步優選為多60%，更進一步優選為多80%，再更進一步優 選為彡98%。
[0016] 特別是，所述的連翹苷、連翹苷衍生物含量為1%~98% ;優選為30~80% ;連翹 苷與連翹脂素的組合物含量為1 %~98% ;優選為30~80%。
[0017] 特別是，藥學上可接受的載體通常被保健專家認可用于這一目的且作為藥劑 的非活性成分。有關藥學上可接受的載體的匯編可以在《藥物賦形劑手冊》（Handbook of Pharmaceutical excipients，第 2 版，由 A. Wade 和 P.J. Weller 編輯；American Pharmaceutical Association出片反，Washington and The Pharmaceutical Press，London， 1994)等工具書中找到。
[0018] 尤其是，所述的載體包括賦形劑，如淀粉、水等；潤滑劑，如硬脂酸鎂等；崩解劑， 如微晶纖維素等；填充劑，如乳糖等；粘結劑，如預膠化淀粉、糊精等；甜味劑；抗氧化劑；防 腐劑、矯味劑、香料等；
[0019] 其中，所述藥物以片劑、膠囊劑、丸劑、散劑、顆粒劑、糖漿劑形式存在。
[0020] 特別是，所述的連翹苷、連翹苷衍生物含量多1%，優選為多30%，進一步優選為 多60%，更進一步優選為多80%，再更進一步優選為多98% ;連翹苷與連翹脂素組合物含 量多1%，優選為多30%，進一步優選為多60%，更進一步優選為多80%，再更進一步優選 為彡98%。
[0021] 本發明另一方面提供一種具有抗炎作用的藥物或保健品，該藥物或保健品含有連 翹苷、連翹苷衍生物或連翹苷與連翹脂素的組合物。
[0022] 其中，所述連翹苷衍生物選擇連翹脂素葡萄糖醛酸衍生物。
[0023] 特別是，所述連翹苷衍生物包括33-羥基-連翹脂素葡萄糖醛酸苷、9-羥基-連翹 脂素葡萄糖醛酸苷、33, 34-亞甲基二氧-連翹脂素葡萄糖醛酸苷、連翹脂素葡萄糖醛酸甲 酯、連翹脂素葡萄糖醛酸鈉、連翹脂素葡萄糖醛酸鉀、連翹脂素葡萄糖醛酸；優選為33-羥 基-連翹脂素葡萄糖醛酸苷、9-羥基-連翹脂素葡萄糖醛酸苷、33, 34-亞甲基二氧-連翹 脂素葡萄糖醛酸苷、連翹脂素葡萄糖醛酸甲酯、連翹脂素葡萄糖醛酸鈉或連翹脂素葡萄糖 醛酸鉀。
[0024] 其中，所述連翹苷與連翹脂素組合物中連翹苷與連翹脂素的重量份配比為2~ 98 :2~98 ;優選為2-10:90-98 ;進一步優選為80:20或20:80,進一步優選為90:10或 10:90,更進一步優選為98:2或2:98 ;再進一步優選為98:2。
[0025] 特別是，所述的連翹苷、連翹苷衍生物的含量多1%，優選為多30%，進一步優選 為多60%，更進一步優選為多80%，再更進一步優選為多98% ;連翹苷與連翹脂素的組合 物含量多1%，優選為多30%，進一步優選為多60%，更進一步優選為多80%，再更進一步 優選為彡98%。
[0026] 尤其是，所述的連翹苷、連翹苷衍生物的含量多1%，優選為1%~98% ;優選為 30~80%，更進一步優選為60% ;連翹苷與連翹脂素的組合物含量多1%，優選為1 %~ 98 % ;優選為30~80 %，更進一步優選為60 %。
[0027] 特別是，所述連翹苷、連翹苷衍生物或連翹苷/連翹脂素組合物的重量與所述藥 物或保健品的總重量之比為〇. 01-10 :1〇〇,優選為〇. 1~10 :1〇〇,進一步優選為1~10 : 100〇
[0028] 其中，所述連翹苷/連翹脂素組合物以連翹苷、連翹脂素單體組成、或采用溶劑加 熱提取方法制備而成的連翹脂素-連翹苷提取組合物，或連翹脂素和連翹苷與環糊精或環 糊精的衍生物組合而成連翹脂素-連翹苷-環糊精組合物。
[0029] 特別是，所述連翹脂素-連翹苷-環糊精組合物選擇連翹脂素和連翹苷與α _、 β-或γ-環糊精或其衍生物相混合而成的混合物，或連翹脂素和連翹苷與α-、β-或 γ -環糊精或其衍生物經物理、化學方法處理形成的復合物。
[0030] 其中，所述連翹脂素-連翹苷-環糊精組合物中連翹苷和連翹脂素重量與環糊精 或環糊精的衍生物的重量之比為1 :1-50。
[0031] 特別是，所述環糊精為α-或β-、γ-環糊精；所述環糊精衍生物為羥乙基-環 糊精、2, 6-二甲基-環糊精、2, 3, 6-三甲基-環糊精、2, 6-二乙基-環糊精、2, 3, 6-三乙 基-環糊精、麥芽糖基-環糊精或磺丁醚β-環糊精、對甲基苯磺酰氯（p-TsCl)取代的 β -環糊精、6-位取代的β -⑶對甲基苯磺酸酯（β -環糊精-6-OTs)、2_氧羥丙基-β -環 糊精、2-位單取代的對甲基苯磺酸酯（β-環糊精-2-OTs)、β-環糊精對甲基苯磺酸酯 (Tosyl- β -CD)、β -環糊精的星形大分子 PCL- (Tos) 7- β -CD。
[0032] 特別是，所述藥物或保健品中還包括三七提取物、雷公藤提取物、柴胡提取物、粉 防己取物、黃芩提取物、苦參提取物、草木樨提取物、葡萄子提取物、石榴子提取物、維生素 C 及其衍生物或維生素 E及其衍生物中的一種或多種。
[0033] 與現有技術相比，本發明具有如下的明顯優點：
[0034] 1、本發明對已知化合物連翹苷發掘了新的藥用價值，將其用于緩解、治療炎癥，并 可制備成緩解和/或治療炎癥的藥物或保健食品，從而為連翹及連翹葉藥材的應用開拓了 一個新的領域。
[0035] 2、本發明的系列試驗研究證明連翹苷、連翹苷衍生物、連翹苷與連翹脂素組合物 (即連翹苷/連翹脂素）抗具有顯著的緩解、治療炎癥的功效。
[0036] 3、本發明的連翹苷、連翹苷衍生物、連翹苷與連翹脂素組合物（即連翹苷/連翹脂 素）抗炎藥理作用強，用于緩解、調理和治療炎癥的功效顯著，見效快、毒副作用小、安全性 好，能夠長期服用，具有良好的藥用前景。
[0037] 4、本發明的產品原料來源豐富、價廉、臨床使用安全，制備工藝簡單，可制成各種 劑型，且服量小，使用方便，因此易于推廣。
[0038] 5、本發明既可采用單一成分的連翹苷、連翹苷衍生物、連翹苷與連翹脂素組合物 (即連翹苷/連翹脂素）抗炎活性成分制備緩解和治療炎癥的藥物，又可采用連翹苷、連翹 苷衍生物、連翹苷與連翹脂素組合物抗炎與其它活性成分（例如與三七提取物、雷公藤提 取物、柴胡提取物、粉防己取物、黃芩提取物、苦參提取物、草木樨提取物、葡萄子提取物、石 榴子提取物、維生素 C及其衍生物或維生素 E及其衍生物）共同組方，制備治療炎癥的復方 藥物。
【具體實施方式】
[0039] 下面通過【具體實施方式】來進一步描述本發明所述配方的有益效果，這些實施例包 括了本發明的連翹苷、連翹苷衍生物的膠囊、片劑、軟膠囊劑的藥效學試驗。這些實施例僅 是范例性的，并不對本發明的范圍構成任何限制。本領域技術人員應該理解的是，在不偏離 本發明的配方思路、用途范圍下可以對本發明技術方案的細節和形式進行修改或替換，但 這些修改和替換均落入本發明的保護范圍內。
[0040] 本發明中所述連翹苷衍生物33-羥基-連翹脂素葡萄糖醛酸苷、9-羥基-連翹 脂素葡萄糖醛酸苷、33, 34-亞甲基二氧-連翹脂素葡萄糖醛酸苷與專利申請（申請號： 201510319303. 4,優先權號：201510164294.6)中所述連翹苷衍生物相同；連翹脂素葡萄糖 醛酸甲酯、連翹脂素葡萄糖醛酸鈉、連翹脂素葡萄糖醛酸鉀、連翹脂素葡萄糖醛酸與專利申 請（申請號：201510320579. 4,優先權號：201410825547. 5)中的相同。
[0041] 實施例1連翹苷片劑
[0042] 1、按照如下配比準備原料
[0043] 連翹苷（純度86%) 500g 淀粉 1000 g 滑石粉 1% (15g) 硬脂酸鎂 l%(15g)
[0044] 2、將連翹苷和淀粉混合均勻后，制成顆粒，加入滑石粉和硬脂酸鎂混合均勻后壓 制成10000片。
[0045] 實施例2連翹苷膠囊劑
[0046] 1、按照如下配比準備原料
[0047] 連翹苷（純度60% ) 200g
[0048] 淀粉 1000g
[0049] 2、將連翹苷和淀粉混合均勻后裝膠囊，制成10000粒。
[0050] 實施例3連翹苷膠囊劑
[0051] 1、按照如下配比準備原料
[0052] 連翹苷（純度98% ) 500g
[0053] 淀粉 1000g
[0054] 2、將連翹苷和淀粉混合均勻后裝膠囊，制成10000粒。
[0055] 實施例4連翹苷片劑
[0056] 1、按照如下配比準備原料
[0057] 連翹苷（純度63%) 50g 雷公藤提取物 200 g 維生素 C 400 g 淀粉 1000 g 滑石粉 1% (14,7g) 硬脂酸湊 1% (14.7g>
[0058] 2、將連翹苷、雷公藤提取物、維生素 C和淀粉混合均勻后制粒，再加入滑石粉和硬 脂酸鎂混勻后壓制成10000片。
[0059] 實施例5連翹苷膠囊劑
[0060] 1、按照如下配比準備原料
[0061] 連翹苷（純度98%) 300g 黃芩提取物 30 g 維生素 C 600 g 淀粉 1000 g
[0062] 2、將連翹苷、黃芩提取物、維生素 C和淀粉混合均勻后裝膠囊，制成10000粒。
[0063] 實施例6連翹苷顆粒劑
[0064] 1、按照如下配比準備原料
[0065] 連翹苷（純度92%) 500g 粉防己提取物 150 g 維生素 C 600 g
[0066] 蔗粉賴_ g
[0067] 2、將連翹苷、粉防己提取物、維生素 C和蔗糖粉混合均勻制成顆粒后裝袋，制成 10000 袋。
[0068] 實施例7連翹苷口服液
[0069] 1、按照如下配比準備原料
[0070] 連翹苷（純度98%) 4g 草木樨提取物 3g 柴胡提取物 3g 葡萄糖糖漿 ％ 去離子水 適量
[0071] 2、取連翹苷、草木樨提取物、柴胡提取物，用乙醇溶解后加入葡萄糖糖漿，最終加 去離子水至l〇〇ml，即得。
[0072] 實施例8 33-羥基-連翹脂素葡萄糖醛酸苷片劑
[0073] 1、按照如下配比準備原料
[0074] 33-羥基-連翹脂素葡萄糖醛酸苷（純度66%) SOOg 淀粉 1000 g 滑石粉 15g 硬脂酸鎂 15g
[0075] 2、將33-羥基-連翹脂素葡萄糖醛酸苷和淀粉混合均勻后，制成顆粒，加入滑石粉 和硬脂酸鎂混合均勻后壓制成10000片。
[0076] 實施例9 33-羥基-連翹脂素葡萄糖醛酸苷膠囊劑
[0077] 1、按照如下配比準備原料
[0078] 33-羥基-連翹脂素葡萄糖醛酸苷（純度98 % ) 200g
[0079] 淀粉 l〇〇〇g
[0080] 2、將33-羥基-連翹脂素葡萄糖醛酸苷和淀粉混合均勻后裝膠囊，制成10000粒。
[0081] 實施例10 33-羥基-連翹脂素葡萄糖醛酸苷膠囊劑
[0082] 1、按照如下配比準備原料
[0083] 33-羥基-連翹脂素葡萄糖醛酸苷（純度90 % ) 500g
[0084] 淀粉 l〇〇〇g
[0085] 2、將33-羥基-連翹脂素葡萄糖醛酸苷和淀粉混合均勻后裝膠囊，制成10000粒。
[0086] 實施例11 33-羥基-連翹脂素葡萄糖醛酸苷片劑
[0087] 1、按照如下配比準備原料
[0088] 33-羥基-連翹脂素葡萄糖醛酸苷（純度63%) 50g 柴胡提取物 20 g 維生素 C 400 g 淀粉 1000g 滑石粉 14.7g 硬脂酸鎂 14.7g
[0089] 2、將33-羥基-連翹脂素葡萄糖醛酸苷、柴胡提取物、維生素 C和淀粉混合均勻后 制粒，加入滑石粉和硬脂酸鎂混勻后壓制成10000片。
[0090] 實施例12 33-羥基-連翹脂素葡萄糖醛酸苷膠囊劑
[0091] 1、按照如下配比準備原料
[0092] 33-羥基-連翹脂素葡萄糖醛酸苷（純度98%) 300 g 三七提取物 30g 維生素 C 600 g 淀粉 1000 g
[0093] 2、將33-羥基-連翹脂素葡萄糖醛酸苷、三七提取物、維生素 C和淀粉混合均勻后 裝膠囊，制成10000粒。
[0094] 實施例13 33-羥基-連翹脂素葡萄糖醛酸苷顆粒劑
[0095] 1、按照如下配比準備原料
[0096] 33-羥基-連翹脂素葡萄糖醛酸苷（純度92%) 500g 草木樨提取物 30 g 維生素 Γ 600 g 蔗糖粉 5_0 g
[0097] 2、將33-羥基-連翹脂素葡萄糖醛酸苷、草木樨提取物、維生素 C和蔗糖粉混合均 勻制成顆粒后裝袋，制成10000袋。
[0098] 實施例14 33-羥基-連翹脂素葡萄糖醛酸苷口服液
[0099] 1、按照如下配比準備原料
[0100] 33-羥基-連翹脂素葡萄糖醛酸苷（純度98%) 4g 柴胡提取物 ％ 草木樨提取物 3g
[0101] 葡萄糖糖漿 ：5g 去離子水 適量
[0102] 2、取33-羥基-連翹脂素葡萄糖醛酸苷、草木樨提取物、柴胡提取物，用乙醇溶解 后加入葡萄糖糖漿，最終加去離子水至l〇〇ml，即得。
[0103] 實施例15 9-羥基-連翹脂素葡萄糖醛酸苷片劑
[0104] 1、按照如下配比準備原料
[0105] 9-羥基-連翹脂素葡萄糖醛酸苷（純度66%) 5_:g 淀粉 1000 g 滑石粉 15g 硬脂酸鎂 ：15g
[0106] 2、將9-羥基-連翹脂素葡萄糖醛酸苷和淀粉混合均勻后，制成顆粒，加入滑石粉 和硬脂酸鎂混合均勻后壓制成10000片。
[0107] 實施例16 9-羥基-連翹脂素葡萄糖醛酸苷膠囊劑
[0108] 1、按照如下配比準備原料
[0109] 9-羥基-連翹脂素葡萄糖醛酸苷（純度97% ) 200g
[0110] 淀粉 1000g
[0111] 2、將9-羥基-連翹脂素葡萄糖醛酸苷和淀粉混合均勻后裝膠囊，制成10000粒。
[0112] 實施例17 9-羥基-連翹脂素葡萄糖醛酸苷膠囊劑
[0113] 1、按照如下配比準備原料
[0114] 9-羥基-連翹脂素葡萄糖醛酸苷（純度98% ) 500g
[0115] 淀粉 1000g
[0116] 2、將9-羥基-連翹脂素葡萄糖醛酸苷和淀粉混合均勻后裝膠囊，制成10000粒。
[0117] 實施例18 9-羥基-連翹脂素葡萄糖醛酸苷片劑
[0118] 1、按照如下配比準備原料
[0119] 9-羥基-連翹脂素葡萄糖醛酸苷（純度63%) 50g 柴胡提取物 20 g 維生素 C 400 g 淀粉 1000g 滑石粉 14.7g 硬脂酸鎂 14.7g
[0120] 2、將9-羥基-連翹脂素葡萄糖醛酸苷、柴胡提取物、維生素 C和淀粉混合均勻后 制粒，加入滑石粉和硬脂酸鎂混勻后壓制成10000片。
[0121] 實施例19 9-羥基-連翹脂素葡萄糖醛酸苷膠囊劑
[0122] 1、按照如下配比準備原料
[0123] 9-羥基-連翹脂素葡萄糖醛酸苷（純度98%) 300 g 二七提取掏 30' g 維生素 C 600 § 淀粉 1備?g
[0124] 2、將9-羥基-連翹脂素葡萄糖醛酸苷、三七提取物、維生素 C和淀粉混合均勻后 裝膠囊，制成10000粒。
[0125] 實施例20 9-羥基-連翹脂素葡萄糖醛酸苷顆粒劑
[0126] 1、按照如下配比準備原料
[0127] 9-羥基-連翹脂素葡萄糖醛酸苷（純度92%) 500g 草木樨提取物 30 g 維牛600 g 蔗糖粉 5000 g
[0128] 2、將9-羥基-連翹脂素葡萄糖醛酸苷、草木樨提取物、維生素 C和蔗糖粉混合均 勻制成顆粒后裝袋，制成10000袋。
[0129] 實施例21 9-羥基-連翹脂素葡萄糖醛酸苷口服液
[0130] 1、按照如下配比準備原料
[0131] 9-羥基-it翹脂素葡萄糖醛酸苷（純度98%) 4g. 三七提取物 ：? 草木樨提取物 ％ 葡萄糖糖漿 5g 去離子水 適量
[0132] 2、取9-羥基-連翹脂素葡萄糖醛酸苷、草木樨提取物、三七提取物，用乙醇溶解后 加入葡萄糖糖漿，最終加去離子水至l〇〇ml，即得。
[0133] 實施例22 33, 34-亞甲基二氧-連翹脂素葡萄糖醛酸苷片劑
[0134] 1、按照如下配比準備原料
[0135] 33, 34-亞甲基二氧-連翹脂素葡萄糖醛酸苷（純度66%) 500g
[0136] 淀粉 1000g 滑石粉 I5g 硬脂酸鎂 15g
[0137] 2、將33, 34-亞甲基二氧-連翹脂素葡萄糖醛酸苷和淀粉混合均勻后，制成顆粒， 加入滑石粉和硬脂酸鎂混合均勻后壓制成10000片。
[0138] 實施例23 33, 34-亞甲基二氧-連翹脂素葡萄糖醛酸苷膠囊劑
[0139] 1、按照如下配比準備原料
[0140] 33, 34-亞甲基二氧-連翹脂素葡萄糖醛酸苷（純度97% ) 200g
[0141] 淀粉 1000g
[0142] 2、將33, 34-亞甲基二氧-連翹脂素葡萄糖醛酸苷和淀粉混合均勻后裝膠囊，制成 10000 粒。
[0143] 實施例24 33, 34-亞甲基二氧-連翹脂素葡萄糖醛酸苷膠囊劑
[0144] 1、按照如下配比準備原料
[0145] 33, 34-亞甲基二氧-連翹脂素葡萄糖醛酸苷（純度98% ) 500g
[0146] 淀粉 1000g
[0147] 2、將33, 34-亞甲基二氧-連翹脂素葡萄糖醛酸苷和淀粉混合均勻后裝膠囊，制成 10000 粒。
[0148] 實施例25 33, 34-亞甲基二氧-連翹脂素葡萄糖醛酸苷片劑
[0149] 1、按照如下配比準備原料
[0150] 33, 34-亞甲基二氧-連翹脂素葡萄糖醛酸苷（純度63%) 50g 三七提取物 20 g 維牛素 C 400 g 淀粉 ：m_g 滑石粉 i4.7g 硬脂酸鎂 i4.7g
[0151] 2、將33, 34-亞甲基二氧-連翹脂素葡萄糖醛酸苷、三七提取物、維生素 C和淀粉 混合均勻后制粒，加入滑石粉和硬脂酸鎂混勻后壓制成10000片。
[0152] 實施例26 33, 34-亞甲基二氧-連翹脂素葡萄糖醛酸苷膠囊劑
[0153] 1、按照如下配比準備原料
[0154] 33:，：34-亞:甲基二氧-連翹脂素葡萄糖醛酸苷(純度擁％:) :3_容
[0155] 三七提取物 30 g 維生素 C 600 g 淀:粉 l〇〇〇g
[0156] 2、將33, 34-亞甲基二氧-連翹脂素葡萄糖醛酸苷、三七提取物、維生素 C和淀粉 混合均勻后裝膠囊，制成10000粒。
[0157] 實施例27 33, 34-亞甲基二氧-連翹脂素葡萄糖醛酸苷顆粒劑
[0158] 1、按照如下配比準備原料
[0159] 33, 34-亞甲基二氧-連翹脂素葡萄糖醛酸苷（純度92%) 500g 草木樨提取物 30 g 維':k^c 600 g 蔗糖粉 5000 g
[0160] 2、將33,34_亞甲基二氧-連翹脂素葡萄糖醛酸苷、草木樨提取物、維生素 C和蔗 糖粉混合均勻制成顆粒后裝袋，制成10000袋。
[0161] 實施例28 33, 34-亞甲基二氧-連翹脂素葡萄糖醛酸苷顆粒劑
[0162] 1、按照如下配比準備原料
[0163] 33, 34-亞甲基二氧-連翹脂素葡萄糖醛酸苷（純度98%> WOg 草木樨提取物 10 g 維生素 C 600 g 蔗糖粉 5000 g
[0164] 2、將33,34_亞甲基二氧-連翹脂素葡萄糖醛酸苷、草木樨提取物、維生素 C和蔗 糖粉混合均勻制成顆粒后裝袋，制成10000袋。
[0165] 實施例29 33,34_亞甲基二氧-連翹脂素葡萄糖醛酸苷口服液
[0166] 1、按照如下配比準備原料
[0167] 33，34-亞甲基二氧-連翹脂素葡萄糖醛酸苷（純度98%) 4g 三七提取物 3g 草木樨提取物 3g 葡萄糖糖漿 3g 去離子水 造董
[0168] 2、取33, 34-亞甲基二氧-連翹脂素葡萄糖醛酸苷、草木樨提取物、三七提取物，用 乙醇溶解后加入葡萄糖糖漿，最終加去離子水至l〇〇ml，即得。
[0169] 實施例30連翹苷和連翹脂素組合物片劑制備
[0170] 1、按照如下配比制備連翹苷/連翹脂素組合物的片劑：
[0171] 連翹苷/連翹脂素組合物(兩者重量比為98:2) 500g 淀粉 480g 滑石粉 l()g 硬脂酸鎂 l〇g
[0172] 2、取連翹苷490g、連翹脂素 lOg與淀粉混合均勻后，制成顆粒，加入滑石粉和硬脂 酸鎂混合均勻后壓制成10000片。
[0173] 實施例31連翹苷/連翹脂素組合物顆粒劑制備
[0174] 1、按照如下配比制備連翹苷/連翹脂素組合物的顆粒劑：
[0175] 連翹苷/連翹脂素組合物（兩者重量比為98:2) 100g
[0176] 微晶纖維素 10000g
[0177] 2、取連翹苷98g、連翹脂素2g與微晶纖維素混勻后，制成顆粒裝袋，制成10000袋。
[0178] 實施例32連翹苷/連翹脂素組合物膠囊劑制備
[0179] 1、按照如下配比制備連翹苷/連翹脂素組合物的膠囊劑：
[0180] 連翹苷/連翹脂素組合物（兩者重量比為98:2) 250g
[0181] 淀粉 2500g
[0182] 2、取連翹苷245g、連翹脂素5g與淀粉混合均勻后裝膠囊，制成10000粒。
[0183] 實施例33-36連翹苷/連翹脂素組合物膠囊劑制備
[0184] 實施例33-36中，連翹苷/連翹脂素組合物分別按下表的重量比與淀粉混合均勻 后裝膠囊，各制成10000粒膠囊。
[0185]
[0186] 實施例：37-40連翹苷/連翹脂素組合物顆粒劑制備
[0187] 實施例37-30中，連翹苷/連翹脂素組合物分別按下表的重量比與微晶纖維素混 合均勻后，制成顆粒裝袋，制成10000袋。
[0190] 實施例41連翹苷/連翹脂素組合物片劑制備
[0191] 1、按照如下配比制備連翹苷/連翹脂素組合物的片劑：
[0192] 連翹苷/連翹脂素組合物(兩者重量比為98:2) 500g 淀粉 380g 苦參提取物 l〇〇g 滑石粉 l〇g 硬脂酸鎂 10g
[0193] 2、稱取連翹苷490g、連翹脂素10g與苦參提取物粉末混合均勻，再與淀粉混合均 勻后制成顆粒，加入滑石粉和硬脂酸鎂混合均勻后壓制成10000片。
[0194] 實施例42連翹苷/連翹脂素組合物顆粒劑制備
[0195] 1、按照如下配比制備連翹苷/連翹脂素組合物的顆粒劑：
[0196] 連翹苷/連翹脂素組合物(兩者重量比為98:2> 250g 黃芩提取物 250g 苦參提取物 250g 微晶纖維素 2450%
[0197] 2、取連翹苷245g、連翹脂素5與黃芩提取物、苦參提取物粉末混合均勻，再與微晶 纖維素混合均勻后制成顆粒裝袋，制成10000袋。
[0198] 實施例43連翹苷/連翹脂素組合物膠囊劑制備
[0199] 1、按照如下配比制備連翹苷/連翹脂素組合物的膠囊劑：
[0200] 連翹苷/連翹脂素組合物<兩者重量比為98:2) 250g 粉防己提取物 250g 葡萄子提取物 250g 石榴子提取物 250g 綻粉 l_g
[0201] 2、連翹苷245g、連翹脂素5g與粉防己提取物、葡萄子提取物、石榴子提取物粉末 混合均勻，再與淀粉混合均勻后裝膠囊，制成10000粒。
[0202] 實施例44連翹苷/連翹脂素組合物片劑制備
[0203] 1、按照如下配比制備連翹苷/連翹脂素組合物的片劑：
[0204] 連翹苷/連翹脂素組合物(兩者重量比為80:20) 500g 淀粉 480g 葡萄子提取物 300g 滑石粉 l〇g 硬脂酸鎂 ：l,0:g
[0205] 2、取連翹苷490g、連翹脂素 lOg與葡萄子提取物粉末混合均勻，再與淀粉混合均 勻后制成顆粒，加入滑石粉和硬脂酸鎂混合均勻后壓，制成10000片。
[0206] 實施例45連翹苷/連翹脂素組合物顆粒劑制備
[0207] 1、按照如下配比制備連翹苷/連翹脂素組合物的顆粒劑：
[0208] 連翹苷/連翹脂素組合物(兩者重量比為90:10) 1000g 柴胡提取物 500g 三七提取物 500g 微晶纖維素 10000g
[0209] 2、取連翹苷900g、連翹脂素100g與上述提取物（柴胡、三七）粉末混合均勻，再與 微晶纖維素混合均勻后制成顆粒裝袋，制成10000袋。
[0210] 實施例46連翹苷/連翹脂素組合物膠囊劑制備
[0211] 1、按照如下配比制備連翹苷/連翹脂素組合物的膠囊劑：
[0212] 連翹苷/連翹脂素組合物(兩者重量比為94:6) 2000g 三七提取物 250g 雷公藤提取物 500g 葡萄子提取物 25+0g ??粉 丨000g
[0213] 2、連翹苷1880g、連翹脂素120g與上述提取物（三七、雷公藤、葡萄子）粉末混合 均勻，再與淀粉混合均勻后裝膠囊，制成10000粒。
[0214] 實驗例1連翹苷、連翹苷衍生物、連翹苷/連翹脂素組合物對脂多糖（LPS)誘導巨 噬細胞系RAW264. 7后細胞上清液中亞硝酸鹽含量的影響
[0215] 1材料及方法
[0216] 1.1藥品與試劑
[0217] 連翹苷（含量>98%)，白色粉末，大連富生天然藥物開發有限公司生產，經高 效液相色譜兩種檢測器紫外檢測器和蒸發光散射檢測器面積歸一化法測定，其純度為 99. 5%，并用中國藥品生物制品含量測定用連翹苷對照品標定和確認其含量為99. 5%。批 號：20130303。
[0218] 33-羥基-連翹脂素葡萄糖醛酸苷（連翹苷衍生物A，含量> 98% )，白色粉末，大 連富生天然藥物開發有限公司生產，批號=20130301。經高效液相色譜兩種檢測器紫外檢測 器和蒸發光散射檢測器面積歸一化法測定，其純度為98. 5%。
[0219] 9-羥基-連翹脂素葡萄糖醛酸苷（連翹苷衍生物B，含量> 98% )，白色粉末，大 連富生天然藥物開發有限公司生產，批號=20130302。經高效液相色譜兩種檢測器紫外檢測 器和蒸發光散射檢測器面積歸一化法測定，其純度為99. 2%。
[0220] 33, 34-亞甲基二氧-連翹脂素葡萄糖醛酸苷（連翹苷衍生物C，含量>98%)，白 色粉末，大連富生天然藥物開發有限公司生產，批號=20130301。經高效液相色譜兩種檢測 器紫外檢測器和蒸發光散射檢測器面積歸一化法測定，其純度為98. 7%。
[0221] 連翹苷/連翹脂素組合物A，連翹苷（含量>98%)，白色粉末，大連富生天然藥物 開發有限公司生產，批號：20130303 ;連翹脂素（含量> 98% )，白色粉末，大連富生天然藥 物開發有限公司生產，批號：20130301 ;連翹苷與連翹脂素的重量之比為98 :2。
[0222] 連翹苷/連翹脂素組合物B，連翹苷（含量>98%)，白色粉末，大連富生天然藥物 開發有限公司生產，批號：20130303 ;連翹脂素（含量> 98% )，白色粉末，大連富生天然藥 物開發有限公司生產，批號：20130301 ;連翹苷與連翹脂素的重量之比為90 :10。
[0223] 陽性對照藥：布洛芬（哈藥集團世一堂制藥廠生產，批準文號：H10950286,規格： 〇· 2g，批號：20140503)。
[0224] 脂多糖（LPS，批號：20140105)，Sigma 公司；RPMI 1640 培養基，Invitrogen 公司； 胎牛血清，杭州四季青生物工程材料有限公司；其余試劑為國產分析純。
[0225] 1. 2細胞株
[0226] 小鼠單核巨噬細胞白血病細胞系RAW264. 7,購于大連醫科大學典型培養物保藏中 心。
[0227] 1. 3主要儀器
[0228] 多元定量儀（美國MJRESEARCH公司）；多功能熒光酶標儀（瑞士 Tecan公司）； EDC-810基因擴增儀（東盛創新生物科技有限公司）；Napc〇5410型二氧化碳孵箱，美國 NAPC0公司；BCN-1360型超凈工作臺，北京東聯哈爾儀器制造有限公司。
[0229] 2試驗方法
[0230] 狀1264.7細胞株培養于含10%胎牛血清1001]/1111青霉素的冊?11640培養基中， 在37°C5%二氧化碳條件下培養。細胞懸液以每孔lX 105/100 μl接種于96孔板，培養 24h，空白對照組采用含0. 1% DMS0的RMPI1640培養細胞；模型組采用LPS(lmg/L)刺激細 胞；藥物組采用向細胞培養液中添加相應劑量的藥物，刺激細胞，其中添加連翹苷15mg/L、 30mg/L、60mg/L，作為連翹苷低、中、高劑量組；連翹苷衍生物A 15mg/L、30mg/L、60mg/L，作 為連翹苷衍生物A低、中、高劑量組；連翹苷衍生物B 15mg/L、30mg/L、60mg/L，作為連翹苷 衍生物B低、中、高劑量組；連翹苷衍生物C 1511^/1、3〇11^/1、6〇11^/1，作為連翹苷衍生物〇 低、中、高劑量組；連翹苷/連翹脂素 A 15mg/L、30mg/L、60mg/L，作為連翹苷/連翹脂素 A 低、中、高劑量組；連翹苷/連翹脂素 B 15mg/L、30mg/L、60mg/L，作為連翹苷/連翹脂素 B 低、中、高劑量組；陽性藥組采用布洛芬50mg/L ;連翹脂素組采用添加60mg/L ;用上述劑量 處理細胞，同時加入終濃度為lmg/L LPS，各組分別刺激細胞24h，48h后，吸取96孔板中的 培養液100 μ 1到另一孔板中，加入等體積的Griess reactin試劑，室溫放置lOmin，用酶標 儀讀取540nm處吸光度（A)，計算各劑量組在不同處理時間對細胞上清液中亞硝酸鹽抑制 率，試驗結果如表1所示。
[0231] 抑制率=(模型組A-藥物組A)八模型組A-空白對照組A) X 100 %
[0232] 3實驗結果
[0233] 采用SPSS 11. 5軟件統計分析，采用方差分析，結果用i±S:表示，P〈0. 05有統計學 意義。
[0234] 表1連翹苷、連翹苷衍生物、連翹苷/連翹脂素對LPS刺激RAW264. 7細胞生成N0 的影響（發ts,、n = 3)
[0237] 由表1的測定結果可知：LPS刺激RAW264. 7細胞可產生大量的N0,模型組細胞上 清液中N0產物亞硝酸鹽含量顯著提高，與空白對照組相比有顯著性差異。連翹脂素組細胞 試驗結果與模型組無差別，說明連翹脂素不能抑制細胞上清液中亞硝酸鹽的含量，說明其 不具有抗炎的藥理作用；連翹苷、連翹苷衍生物、連翹苷/連翹脂素不同劑量在不同時間點 均能顯著抑制細胞上清液中亞硝酸鹽的含量，并呈現良好的劑量依賴關系；而且連翹苷與 連翹脂素組合使用，具有協同增效作用，顯著抑制細胞上清液中亞硝酸鹽的含量，提高了抗 炎效率。
[0238] 實驗例2連翹苷、連翹苷衍生物、連翹苷/連翹脂素組合物對LPS刺激RAW264. 7 細胞上清液中TNF-α和IL-6含量的影響
[0239] 1材料及方法
[0240] 1. 1藥品與試劑
[0241] 連翹苷、33-羥基-連翹脂素葡萄糖醛酸苷（連翹苷衍生物A)、9-羥基-連翹脂素 葡萄糖醛酸苷（連翹苷衍生物B)、33, 34-亞甲基二氧-連翹脂素葡萄糖醛酸苷（連翹苷衍 生物C)、連翹苷/連翹脂素組合物A、連翹苷/連翹脂素組合物B與試驗例1相同；
[0242] 陽性對照藥：布洛芬（哈藥集團世一堂制藥廠生產，批準文號：H10950286,規格： 〇· 2g，批號：20140503)。
[0243] 脂多糖（LPS，批號：20140105)，Sigma 公司；RPMI 1640 培養基，Invitrogen 公 司；胎牛血清，杭州四季青生物工程材料有限公司；人腫瘤壞死因子-α (TNF-α)及白介 素-6 (IL-6) ELISA試劑盒，美國R&D公司；其余試劑為國產分析純。
[0244] 1. 2細胞株
[0245] 小鼠單核巨噬細胞白血病細胞系RAW264. 7,購于大連醫科大學典型培養物保藏中 心
[0246] 1. 3主要儀器
[0247] 與試驗例1相同
[0248] 2試驗方法
[0249] 狀￥264.7細胞株培養于含10%胎牛血清1001]/1111青霉素的冊?11640培養基中， 在37°C 5%二氧化碳條件下培養。將細胞隨機分為空白對照組，模型組（即LPS刺激組）和 連翹苷低、中、高劑量組；連翹苷衍生物A低、中、高劑量組；連翹苷衍生物B低、中、高劑量 組；連翹苷衍生物C低、中、高劑量組；連翹苷/連翹脂素組合物A低、中、高劑量組；連翹苷 /連翹脂素組合物B低、中、高劑量組；每組設個3復孔，空白對照組用RPMI1640完全培養液 常規培養；模型組采用LPS(lmg/L)刺激細胞，藥物組采用不同劑量藥物刺激細胞，其中，連 翹苷1511^凡、3〇11^凡、6〇11^凡，作為連翹苷低、中、高劑量組 ；連翹苷衍生物4 1511^凡、3〇11^/ L、60mg/L，作為連翹苷衍生物A低、中、高劑量組；連翹苷衍生物B 15mg/L、30mg/L、60mg/L， 作為連翹苷衍生物B低、中、高劑量組；連翹苷衍生物C 15mg/L、30mg/L、60mg/L，作為連翹 苷衍生物C低、中、高劑量組；連翹苷/連翹脂素 A 1511^/1、3〇11^/1、6〇11^/1，作為連翹苷/連 翹脂素 A低、中、高劑量組；連翹苷/連翹脂素 B 15mg/L、30mg/L、60mg/L，作為連翹苷/連 翹脂素 B低、中、高劑量組；陽性藥組采用布洛芬50mg/L ;連翹脂素組采用添加60mg/L ;同 時加入終濃度為lmg/L LPS。37°C 5% C02孵育12h，收集上清液，用ELISA法檢測細胞上清 液中TNF-α和IL-6含量，操作步驟按試劑盒說明書進行，試驗結果見表2。3實驗結果
[0250] 采用SPSS 11. 5軟件統計分析采用方差分析，結果用X±S表示，P〈0. 05差異有統計 學意義。
[0251] 表2連翹苷、連翹苷衍生物、連翹苷/連翹脂素對LPS刺激RAW264. 7細胞上清液 中 TNF-α 和 IL-6 含量的影響（ng/L，η = 3)
[0252]
[0254] 表2的試驗結果表明：連翹苷、連翹苷衍生物、連翹苷與連翹脂素組合物對LPS誘 導的RAW264. 7細胞產生TNF- α和IL-6的影響明顯，空白對照組僅有少量TNF- α和IL-6 表達，LPS模型組TNF-α和IL-6含量明顯增加，連翹脂素組TNF-α和IL-6含量亦明顯增 加，與LPS模型組無差別，說明連翹脂素不具有抗炎的作用，連翹苷、連翹苷衍生物、連翹苷 與連翹脂素組合物各劑量組與LPS刺激組相比，TNF-a和IL-6蛋白含量明顯減少，說明連 翹苷、連翹苷衍生物、連翹苷與連翹脂素組合物可顯著抑制TNF-α和IL-6的表達；而且連 翹苷與連翹脂素組合使用，具有協同增效作用，顯著抑制細胞TNF-a和IL-6的表達，具有 明顯的抗炎作用。
[0255] 試驗例3連翹苷、連翹苷衍生物、連翹苷與連翹脂素組合物對小鼠耳腫脹的影響
[0256] 1試驗材料
[0257] 1. 1藥品與試劑
[0258] 連翹苷、33-羥基-連翹脂素葡萄糖醛酸苷（連翹苷衍生物A)、9_羥基-連翹脂素 葡萄糖醛酸苷（連翹苷衍生物B)、33, 34-亞甲基二氧-連翹脂素葡萄糖醛酸苷（連翹苷衍 生物C)、連翹苷/連翹脂素組合物A、連翹苷/連翹脂素組合物B與試驗例1相同；
[0259] 陽性對照藥：地塞米松，鄭州卓峰制藥有限公司，國藥準字H41020055,批號： 20140701
[0260] 1. 2實驗動物
[0261] 清潔級昆明小鼠，體重18~22g，雌雄各半，購自大連醫科大學實驗動物中心，質 量合格證號：SCXK2014-0002。
[0262] 2試驗方法：
[0263] 2. 1劑量選擇
[0264] 根據受試物的人體推薦用量及樣品的最大可能灌胃劑量設置3個連翹苷實驗組， 即連翹苷低、中、高劑量組，劑量分別為3、6、12mg/kg ;
[0265] 連翹苷衍生物A、B、C分別設置9個連翹苷衍生物實驗組，即連翹苷衍生物A低、 中、高劑量組，劑量分別為3、6、12mg/kg ;連翹苷衍生物B低、中、高劑量組，劑量分別為3、6、 12mg/kg ;連翹苷衍生物C低、中、高劑量組，劑量分別為3、6、12mg/kg ;
[0266] 連翹苷/連翹脂素組合物A、B分別設置6個連翹苷/連翹脂素實驗組，即連翹苷 /連翹脂素 A低、中、高劑量組，劑量分別為3、6、12mg/kg ;連翹苷/連翹脂素 B低、中、高劑 量組，劑量分別為3、6、12mg/kg。
[0267] 另設一個連翹脂素組（連翹脂素，12mg/kg)、空白對照組和陽性藥物對照組（地塞 米松，20mg/kg)。
[0268] 2. 2分組與給藥
[0269] 取清潔級昆明小鼠210只，各組雌雄各半，隨機分為21組，每組10只，即空白對照 組、連翹苷藥組（低，中，高三個劑量組）、連翹苷衍生物A、B、C (低，中，高三個劑量組）、連 翹苷/連翹脂素組合物A、B (低，中，高三個劑量組）、連翹脂素組、陽性藥對照組（地塞米松 組）。給藥60min后，每鼠左側耳廓正反面均勻涂抹二甲苯0. 05ml，右耳作對照。30min后 脫臼處死，沿耳廓對稱剪下小鼠兩耳，用打孔器在左右耳廓相同部位打下圓耳片取材，精密 電子天平稱量，以每鼠的左右耳片重量之差作為腫脹度，并計算抑制率，試驗結果如表3所 不。
[0270] 腫脹抑制率（％) = [(空白對照組腫脹度-給藥組腫脹度）/空白對照組腫脹 度]X100%〇
[0271] 3實驗結果
[0272] 采用SPSS 11. 5軟件統計分析采用方差分析，結果用x±s表示，P〈0. 05差異有統計 學意義。
[0273] 表3連翹苷、連翹苷衍生物、連翹苷與連翹脂素組合物對小鼠耳腫脹的影響（X±s, η = 10)
[0274]
[0276] 表3的試驗結果表明：連翹脂素不具有抗急性炎癥的作用，連翹苷組、連翹苷衍生 物、連翹苷/連翹脂素均具有抗急性炎癥的作用，而且作用效果明顯；而且連翹苷與連翹脂 素組合使用，具有協同增效作用，顯著抑制腫脹度，抗炎作用明顯。
[0277] 結論：動物體內實驗可知，連翹苷、連翹苷衍生物、連翹苷與連翹脂素組合物可明 顯抑制由二甲苯引起的小鼠耳腫脹，說明連翹苷、連翹苷衍生物、連翹苷/連翹脂素有明顯 的抗炎作用。連翹苷、連翹苷衍生物、連翹苷與連翹脂素組合物能顯著抑制N0，TNF-a和 IL-6的生成與釋放，能顯著降低TNF-α和IL-6mRNA的表達。由此可推測連翹苷、連翹苷衍 生物、連翹苷與連翹脂素組合物可能通過調節巨噬細胞產生NO, TNF-α和IL-6等炎癥因子 來發揮抗炎作用；尤其是，連翹苷/連翹脂素組合物中由于連翹苷與連翹脂素組合使用，協 同增效，使得抗炎效果明顯增強。
【主權項】
1. 連翹苷、連翹苷衍生物、連翹苷與連翹脂素的組合物在制備抗炎藥物或保健品中的 應用。2. 根據權利要求1所述的應用，其特征是所述藥物由連翹苷、連翹苷衍生物、連翹苷與 連翹脂素的組合物和藥學上可接受的載體組成。3. 根據權利要求1或2所述的應用，其特征是所述藥物以片劑、膠囊劑、丸劑、散劑、顆 粒劑、糖漿劑、溶液劑形式存在。4. 根據權利要求1或2所述的應用，其特征是所述連翹苷、連翹苷衍生物的純度為 彡1% ;連翹苷與連翹脂素的組合物的含量彡1%。5. 根據權利要求4所述的應用，其特征是所述連翹苷、連翹苷衍生物的純度為1 %~ 98% ;連翹苷與連翹脂素的組合物的含量為1 %~98%。6. -種抗炎藥物或保健品，其特征是含有連翹苷、連翹苷衍生物或連翹苷與連翹脂素 的組合物。7. 根據權利要求6所述的藥物或保健品，其特征是所述連翹苷、連翹苷衍生物的純度 為彡1% ;連翹苷與連翹脂素的組合物的含量彡1%。8. 根據權利要求6所述的藥物或保健品，其特征是所述連翹苷、連翹苷衍生物、連翹苷 與連翹脂素組合物的重量與所述藥物或保健品的總重量之比為〇. 01-10 :1〇〇。9. 根據權利要求6所述的藥物或保健品，其特征是所述連翹苷與連翹脂素組合物選擇 連翹脂素和連翹苷與α_、β-或γ-環糊精或其衍生物相混合而成的混合物，或連翹脂素 和連翹苷與α-、β-或γ-環糊精或其衍生物經物理、化學方法處理形成的復合物。10. 根據權利要求6所述的藥物或保健品，其特征是還包括三七提取物、雷公藤提取 物、柴胡提取物、粉防己取物、黃芩提取物、苦參提取物、草木樨提取物、葡萄子提取物、石榴 子提取物、維生素 C及其衍生物或維生素 Ε及其衍生物中的一種或多種。
【文檔編號】A23L33/105GK106063791SQ201510633006
【公開日】2016年11月2日
【申請日】2015年9月29日 公開號201510633006.7, CN 106063791 A, CN 106063791A, CN 201510633006, CN-A-106063791, CN106063791 A, CN106063791A, CN201510633006, CN201510633006.7
【發明人】魯明明, 富力, 王凱乾, 惠敏, 蓋鑫, 付強, 劉國友, 劉正賢
【申請人】富力