一種含黃芪多糖鐵的豬用注射液的制作方法
【專利摘要】本發明提供一種含黃芪多糖鐵的豬用注射液，該注射液的有效組分及其重量份數為：黃芪多糖10?50份，鐵鹽15?30份。還涉及含有黃芪多糖鐵的豬用注射液的制備方法，包括黃芪多糖的提取與純化，黃芪多糖鐵的制備以及注射液成品制備。本發明采用離子交換樹脂法催化黃芪多糖與鐵形成絡合物，工藝新穎，成本低，還采用超濾膜過濾技術分離與純化黃芪多糖，且在進行超濾膜過濾前進行一次離心機過濾，在使用離心機進行過濾時加入活性炭，不僅能脫色，還能夠在經過脫色后的判斷是否需要再次離心去除肉眼看得到的較大雜質，保證了純化后的黃芪多糖的純度，不僅有補鐵功能，還有增強增強仔豬免疫力的作用。
【專利說明】一種含黃芪多糖鐵的豬用注射液 【技術領域】
[0001] 本發明屬于豬用補鐵劑領域，具體涉及一種含黃芪多糖鐵的豬用注射液。 【【背景技術】】
[0002] 黃芪為常用中藥，具有補氣固表，利尿托毒，排毒，斂瘡生肌等功效。黃芪的主要有 效成分是多糖、皂苷和黃酮等。黃芪多糖是一種水溶性多糖，是由葡萄糖、鼠李糖、阿拉伯糖 和半乳糖等重復單元連接而成的雜多糖，相對分子質量在l〇〇〇〇Da-50000Da左右，常溫下 為白色固體。黃芪多糖能促進淋巴細胞轉化、激活T細胞和B細胞、并能促進抗體的形成、增 強機體免疫力;黃芪多糖同時具有強心降壓、降血糖、抗腫瘤、抗病毒、抗輻射、抗氧化等多 種藥理功效;黃芪多糖還具有副作用小、無殘留、不產生耐藥性等優點。目前，黃芪多糖作為 免疫增效劑被廣泛用于獸醫臨床。農業部《獸藥質量標準》中闡述了黃芪多糖注射液(抗病 毒I號注射液)能誘導機體產生干擾素，調節機體免疫功能，促進抗體形成的功效。
[0003] 缺鐵性貧血是新生2-4周齡仔豬的一種常見疾病。新生仔豬體內鐵的貯量早在3-4 日齡即被消耗完，通常需要人工補鐵，這是因為新生仔豬生長發育迅速，對鐵的需要量急劇 增加，在最初數周，新生仔豬體內的鐵儲存量極少，僅為54mg，而母豬乳中含鐵量約為 1.3mg/L，每天僅能為每頭仔豬提供約lmg鐵，因此遠遠滿足不了仔豬對鐵的15mg日需量。而 且仔豬生長越快，鐵貯量消耗的越快，貧血的發病率也就越高。若不及時補鐵，會給仔豬帶 來許多的危害：1.不能形成血紅蛋白、肌紅蛋白、細胞色素酶及多種過氧化物酶，從而影響 體內營養物質的輸送;2.血紅蛋白含量低，血液稀薄，攜氧供氧能力低，造成機體器官衰竭； 3.生長受阻，下痢、水腫、白肌病等發病率升高，被毛粗亂，皮膚及粘膜蒼白，食欲不振;4生 理防衛機能下降，免疫力低下，易發生藍耳病、圓環病毒病、偽狂犬病等病毒性疾病，也使得 大腸桿菌、副豬嗜血桿菌、巴氏桿菌、葡萄球菌等條件性致病菌的發病率升高，造成巨大的 經濟損失，嚴重地制約了我國養豬業的發展。目前應用于臨床的仔豬補鐵產品主要為硫酸 亞鐵和右旋糖酐鐵等。硫酸亞鐵的吸收率較低，補鐵效果較差;右旋糖酐鐵對仔豬缺鐵性貧 血的治療效果相對較好，為提高豬生產水平起到非常重要的作用，但是右旋糖酐鐵的合成 是一個非常復雜的過程，是初生態的三價鐵氫氧化物與微分子葡聚糖分子的絡合反應，該 絡合反應非常不穩定，受反應體系的pH值和FeC13溶液濃度的影響較大，產品收率和質量均 不夠理想，加之，右旋糖酐價格較昂貴，導致生產成本較高，而且右旋糖酐鐵往往需要深部 肌肉注射，造成嚴重的應激反應，在一定程度上影響了其臨床應用。
[0004] 新生仔豬都需要人工補鐵，目前生產上最常用的補鐵劑是葡聚糖鐵，由二價鐵與 葡聚糖絡合而成。給3-5日齡的仔豬肌肉注射該補鐵劑，有一定的補鐵效果，但單純補鐵，仔 豬死亡率沒有明顯下降，效果不甚理想。由于新生仔豬各器官功能不完善（如造血器官、免 疫器官、胃腸道器官），新生仔豬免疫力低，仔豬發生貧血的同時還并發其它病原菌的感染 等諸多因素的綜合作用，是造成仔豬死亡率高的原因。因此，尋求一種既能給仔豬補鐵又能 增強仔豬造血功能和提高免疫力的補鐵方法是各國動物營養學家所關心的問題。
[0005] 經過檢索得到以下文獻，公開了關于含黃芪多糖鐵的豬用注射液，中國專利： 201110128690.5，專利名稱:含有黃芪多糖鐵的豬用注射液及其制備方法，摘要:本發明涉 及一種含有黃芪多糖鐵的豬用注射液，其注射液的有效組分及其重量份數比為:黃芪多糖 15-50份;鐵鹽10-45份。還涉及含有黃芪多糖鐵的豬用注射液的制備方法，包括黃芪多糖的 提取，黃芪多糖鐵的制備以及注射液成品制備。本發明注射液質量穩定，能夠有效增強機體 免疫力，提高仔豬存活率、使其營養成分更加均衡全面，制作工藝簡單，是一種安全可靠的 含有黃芪多糖鐵的豬用注射液，但是其使用了大量的乙醇進行醇沉，生產成本較高。 【
【發明內容】
】
[0006] 本發明的目的在于克服現有技術的不足，提供一種含黃芪多糖鐵的豬用注射液， 該制備工藝新穎、簡單易行，制備出來的黃芪多糖鐵雜質少、純度含量高，不僅具有補鐵功 能，還具有增強增強仔豬免疫力的作用;且生產成本較低。
[0007] 為了實現上述目的，本發明采用的技術方案如下：
[0008] -種含黃芪多糖鐵的豬用注射液，該注射液的有效組分及其重量份數為:黃芪多 糖10-50份，鐵鹽15-30份；
[0009] (1)該含有黃芪多糖鐵的豬用注射劑中組分之一的黃芪多糖的提取與純化方法 為:取黃芪藥材粉碎成粗粉，然后用重量比1:5-8的蒸餾水回流提取2h，共3次，然后將回流 提取的回流液加質量濃度為50-60%的乙醇溶液在微波下進行3次處理，每次30-50s，且每 次微波處理后停止20-30S再進行微波處理，得到微波提取液，過60-120目篩去粗渣，收集 合并濾液，然后向濾液加入〇. 05-0.2倍體積的活性炭進行離心過濾1-3次后，在0.3MPa壓力 差下，使用超濾膜過濾，截留得出分子量范圍為20000Da-30000Da的黃芪多糖；
[0010] (2)該含有黃芪多糖鐵的豬用注射劑中所述的鐵鹽為質量濃度為10m〇l/L的三氯 化鐵溶液、質量濃度為8mol/L的硝酸鐵溶液、質量濃度為10m 〇l/L的硫酸鐵溶液或質量濃度 為1 Omo 1/L的硫酸亞鐵溶液中的一種。
[0011] 如上所述的一種含黃芪多糖鐵的豬用注射液的制備方法，該制備方法具體步驟 為：
[0012] (1)該含有黃芪多糖鐵的豬用注射劑中組分之一的黃芪多糖的提取與純化方法 為:取黃芪藥材粉碎成粗粉，然后用重量比1:5-8的蒸餾水回流提取2h，共3次，然后將回流 提取的回流液加質量濃度為50-60%的乙醇溶液在微波下進行3次處理，每次30-50s，且每 次微波處理后停止20-30S再進行微波處理，得到微波提取液，過60-120目篩去粗渣，收集合 并濾液，然后濾液加入〇 . 05-0.2倍體積的活性炭進行離心過濾1-3次后，在0.3MPa壓力差 下，使用超濾膜過濾，截留得出分子量范圍為20000Da-30000Da的黃芪多糖，待用；
[0013] (2)黃芪多糖鐵的制備:將步驟（1)待用的黃芪多糖、酒石酸鈉和碳酸鈉按照重量 比為15: 3:5溶于蒸餾水，然后按照重量份數加入鐵鹽，得到溶液A，將溶液A以3-8BV/h的流 速通過裝載有堿性離子交換樹脂的交換柱，控制交換柱內的溫度為50-70°C，反應0.5-0.8h 后，冷卻，濾出樹脂，再用去離子水沖洗樹脂表面3-5次，再用濃度為70%-80%乙醇進行醇 析，在60-85 °C條件下烘干后即可得到黃芪多糖鐵；
[0014] (3)注射液成品制備：將黃芪多糖鐵加入到注射用水中配制成含鐵元素200-320mg/mL的溶液，加入25-40 %的堿液調pH值至11，對堿化后的溶液于60-75 °C進行加熱，然 后向加熱后的溶液中加入1-3%。碳粉，吸附不溶性顆粒，至無肉眼可見的不溶性顆粒，再攪 拌20-60min后過濾，收集濾液并對濾液進行滅菌，得到含有黃芪多糖鐵的豬用注射液成品。
[0015] 進一步地，所述堿性離子交換樹脂為三丁胺胺化強堿性陰離子交換樹脂或聚苯乙 烯強堿陰離子交換樹脂。
[0016] 進一步地，所述微波的功率為300-500W，壓力為0.1-0.3MPa。
[0017] 進一步地，所述步驟(2)中黃芪多糖鐵的制備還包括將溶液A通過裝載有堿性離子 交換樹脂的交換柱內的同時，以〇. 2-0.8BV/h的流速加入質量濃度為15%的氫氧化鉀溶液 或者質量濃度為15%的氫氧化銨溶液。
[0018] 進一步地，所述的超濾膜材質為聚醚砜，膜層材料為氧化鈦，孔徑為l-2nm。
[0019] 進一步地，在步驟（1)中，所述的離心過濾的轉速為2000-3000r/min，每次處理30-60s〇
[0020] 本發明中的原料均可在市面上采購。
[0021 ]綜上所述，由于采用了上述技術方案，本發明的有益效果是：
[0022] 1、本發明采用強堿型陰離子交換樹脂催化三氯化鐵與黃芪多糖發生反應新工藝， 離子交換樹脂是固體結構，結合在離子交換樹脂上的一 N+(CH3)30!T中的氫氧離子(0!〇可 以迅速釋出，0?Γ對催化Fe3+黃芪多糖發生絡合反應起關鍵作用，離子交換樹脂為固體物不 溶于水，離子交換樹脂催化反應是在固相和液相間進行，催化物與反應物處于固相和液相 分離狀態，催化物與產物容易分離，該方法不僅能夠實現絡合，還可在絡合過程中選擇性吸 附雜質將雜質去除，得到純凈的黃芪多糖鐵絡合物，具有高效、節能、環保的有點，且本工藝 對制備出來的黃芪多糖鐵絡合物的生物活性影響較小，具有補鐵的功能外，還具有增強仔 豬免疫力的作用。
[0023] 2、本發明的原料純度高，黃芪多糖的提取采用的是先物理回流提取，后采用微波 提取，且微波與間隙時間間隔約為2:3-5,使得提取率比普通方法提取的提取率高出40%; 還采用超濾膜過濾技術分離與純化黃芪多糖，且在進行超濾膜過濾前進行一次離心機過 濾，在使用離心機進行過濾時加入活性炭，不僅能脫色，還能夠在經過脫色后的判斷是否需 要再次離心去除肉眼看得到的較大雜質，保證了純化后的黃芪多糖的純度，采用膜分離工 藝純化黃芪多糖，膜分離工藝流程簡單，能夠實現大批量生產，與傳統的醇析工藝相比較不 需要消耗大量乙醇，生產成本低。 【【具體實施方式】】
[0024] 實施例1:
[0025] -種含黃芪多糖鐵的豬用注射液，該注射液的有效組分及其重量份數為:黃芪多 糖10份，質量濃度為10m 〇l/L的三氯化鐵溶液15份；
[0026] 按照上述的原料配比，一種含黃芪多糖鐵的豬用注射液的制備方法，具體步驟為：
[0027] (1)該含有黃芪多糖鐵的豬用注射劑中組分之一的黃芪多糖的提取與純化方法 為:取黃芪藥材粉碎成粗粉，然后用重量比1:5的蒸餾水回流提取2h，共3次，然后將回流提 取的回流液加質量濃度為50%的乙醇溶液，于功率為300W，壓力為0.1 MPa的微波下進行3次 處理，每次30s，且每次微波處理后停止20S再進行微波處理，得到微波提取液，過60目篩去 粗渣，收集合并濾液，然后向濾液加入〇. 05倍體積的活性炭在轉速為2000r/min條件下離心 過濾1次30s后，然后在0.3MPa壓力差下，使用材質為聚醚砜，膜層材料為氧化鈦，孔徑為lnm 的超濾膜進行過濾，截留得出分子量范圍為20000Da的黃芪多糖，待用；
[0028] (2)黃芪多糖鐵的制備:將步驟（1)待用的黃芪多糖、酒石酸鈉和碳酸鈉按照重量 比為15: 3: 5溶于蒸餾水，然后按照重量份數加入鐵鹽，得到溶液A，將溶液A以3BV/h的流速 通過裝載有三丁胺胺化強堿性陰離子交換樹脂的堿性離子交換樹脂的交換柱，同時，以 0.2BV/h的流速加入質量濃度為15%的氫氧化鉀溶液，控制交換柱內的溫度為50°C，反應 0.5h后，冷卻，濾出樹脂，再用去離子水沖洗樹脂表面3次，再用濃度為70%乙醇進行醇析， 在60°C條件下烘干后即可得到黃芪多糖鐵；
[0029] (3)注射液成品制備:將黃芪多糖鐵加入到注射用水中配制成含鐵元素200mg/mL 的溶液，加入25%的堿液調pH值至11，對堿化后的溶液于60 °C進行加熱，然后向加熱后的溶 液中加入1%。碳粉，吸附不溶性顆粒，至無肉眼可見的不溶性顆粒，再攪拌20min后過濾，收 集濾液并對濾液進行滅菌，得到含有黃芪多糖鐵的豬用注射液成品。
[0030] 實施例2:
[0031] -種含黃芪多糖鐵的豬用注射液，該注射液的有效組分及其重量份數為:黃芪多 糖50份，質量濃度為8mol/L的硝酸鐵溶液30份；
[0032] 按照上述的原料配比，一種含黃芪多糖鐵的豬用注射液的制備方法，具體步驟為：
[0033] (1)該含有黃芪多糖鐵的豬用注射劑中組分之一的黃芪多糖的提取與純化方法 為:取黃芪藥材粉碎成粗粉，然后用重量比1:8的蒸餾水回流提取2h，共3次，然后將回流提 取的回流液加質量濃度為60 %的乙醇溶液，于功率為500W，壓力為0.3MPa的微波下進行3次 處理，每次50s，且每次微波處理后停止30S再進行微波處理，得到微波提取液，過120目篩去 粗渣，收集合并濾液，然后向濾液加入〇. 2倍體積的活性炭在轉速為3000r/min條件下離心 過濾3次后，每次處理60s，然后在0.3MPa壓力差下，使用材質為聚醚砜，膜層材料為氧化鈦， 孔徑為2nm的超濾膜進行過濾，截留得出分子量范圍為30000Da的黃芪多糖，待用；
[0034] (2)黃芪多糖鐵的制備:將步驟（1)待用的黃芪多糖、酒石酸鈉和碳酸鈉按照重量 比為15: 3: 5溶于蒸餾水，然后按照重量份數加入鐵鹽，得到溶液A，將溶液A以8BV/h的流速 通過裝載有聚苯乙烯強堿陰離子交換樹脂的堿性離子交換樹脂的交換柱，同時，以0.8BV/h 的流速加入質量濃度為15 %的氫氧化鉀溶液或者質量濃度為15 %的氫氧化銨溶液，控制交 換柱內的溫度為70°C，反應0.8h后，冷卻，濾出樹脂，再用去離子水沖洗樹脂表面5次，再用 濃度為80%乙醇進行醇析，在85°C條件下烘干后即可得到黃芪多糖鐵；
[0035] (3)注射液成品制備:將黃芪多糖鐵加入到注射用水中配制成含鐵元素320mg/mL 的溶液，加入40%的堿液調pH值至11，對堿化后的溶液于75°C進行加熱，然后向加熱后的溶 液中加入3%。碳粉，吸附不溶性顆粒，至無肉眼可見的不溶性顆粒，再攪拌60min后過濾，收 集濾液并對濾液進行滅菌，得到含有黃芪多糖鐵的豬用注射液成品。
[0036] 實施例3:
[0037] -種含黃芪多糖鐵的豬用注射液，該注射液的有效組分及其重量份數為:黃芪多 糖25份，質量濃度為10m 〇l/L的硫酸鐵溶液20份；
[0038] 按照上述的原料配比，一種含黃芪多糖鐵的豬用注射液的制備方法，具體步驟為：
[0039] (1)該含有黃芪多糖鐵的豬用注射劑中組分之一的黃芪多糖的提取與純化方法 為:取黃芪藥材粉碎成粗粉，然后用重量比1:6的蒸餾水回流提取2h，共3次，然后將回流提 取的回流液加質量濃度為55 %的乙醇溶液，于功率為350W，壓力為0.15MPa的微波下進行3 次處理，每次40s，且每次微波處理后停止29S再進行微波處理，得到微波提取液，過80目篩 去粗渣，收集合并濾液，然后向濾液加入〇. 10倍體積的活性炭在轉速為2500r/min條件下離 心過濾2次后，每次處理38s，然后在0.3MPa壓力差下，使用材質為聚醚砜，膜層材料為氧化 鈦，孔徑為1.5nm的超濾膜進行過濾，截留得出分子量范圍為25000Da的黃芪多糖，待用；
[0040] (2)黃芪多糖鐵的制備:將步驟（1)待用的黃芪多糖、酒石酸鈉和碳酸鈉按照重量 比為15: 3: 5溶于蒸餾水，然后按照重量份數加入鐵鹽，得到溶液A，將溶液A以6BV/h的流速 通過裝載有三丁胺胺化強堿性陰離子交換樹脂的堿性離子交換樹脂的交換柱，同時，以 0.4BV/h的流速加入質量濃度為15%的氫氧化鉀溶液，控制交換柱內的溫度為55°C，反應 0.6h后，冷卻，濾出樹脂，再用去離子水沖洗樹脂表面4次，再用濃度為75%乙醇進行醇析， 在70°C條件下烘干后即可得到黃芪多糖鐵；
[0041] (3)注射液成品制備:將黃芪多糖鐵加入到注射用水中配制成含鐵元素250mg/mL 的溶液，加入30 %的堿液調pH值至11，對堿化后的溶液于65°C進行加熱，然后向加熱后的 溶液中加入2%。碳粉，吸附不溶性顆粒，至無肉眼可見的不溶性顆粒，再攪拌45min后過濾， 收集濾液并對濾液進行滅菌，得到含有黃芪多糖鐵的豬用注射液成品。
[0042] 實施例4:
[0043] -種含黃芪多糖鐵的豬用注射液，該注射液的有效組分及其重量份數為:黃芪多 糖42份，質量濃度為10m 〇l/L的硫酸亞鐵溶液28份；
[0044] 按照上述的原料配比，一種含黃芪多糖鐵的豬用注射液的制備方法，具體步驟為：
[0045] (1)該含有黃芪多糖鐵的豬用注射劑中組分之一的黃芪多糖的提取與純化方法 為:取黃芪藥材粉碎成粗粉，然后用重量比1:7的蒸餾水回流提取2h，共3次，然后將回流提 取的回流液加質量濃度為58 %的乙醇溶液，于功率為450W，壓力為0.15MPa的微波下進行3 次處理，每次48s，且每次微波處理后停止26S再進行微波處理，得到微波提取液，過100目篩 去粗渣，收集合并濾液，然后向濾液加入〇. 15倍體積的活性炭在轉速為2800r/min條件下離 心過濾2次后，每次處理48s，然后在0.3MPa壓力差下，使用材質為聚醚砜，膜層材料為氧化 鈦，孔徑為lnm的超濾膜進行過濾，截留得出分子量范圍為28000Da的黃芪多糖，待用；
[0046] (2)黃芪多糖鐵的制備:將步驟（1)待用的黃芪多糖、酒石酸鈉和碳酸鈉按照重量 比為15: 3: 5溶于蒸餾水，然后按照重量份數加入鐵鹽，得到溶液A，將溶液A以7BV/h的流速 通過裝載有聚苯乙烯強堿陰離子交換樹脂的堿性離子交換樹脂的交換柱，同時，以0.5BV/h 的流速加入質量濃度為15 %的氫氧化銨溶液，控制交換柱內的溫度為62 °C，反應0.7h后，冷 卻，濾出樹脂，再用去離子水沖洗樹脂表面3次，再用濃度為78%乙醇進行醇析，在75°C條件 下烘干后即可得到黃芪多糖鐵；
[0047] (3)注射液成品制備:將黃芪多糖鐵加入到注射用水中配制成含鐵元素300mg/mL 的溶液，加入32%的堿液調pH值至11，對堿化后的溶液于71°C進行加熱，然后向加熱后的溶 液中加入3%。碳粉，吸附不溶性顆粒，至無肉眼可見的不溶性顆粒，再攪拌50min后過濾，收 集濾液并對濾液進行滅菌，得到含有黃芪多糖鐵的豬用注射液成品。
[0048]依據上述實施例1-4制備出來的黃芪多糖與黃芪多糖鐵進行多糖含量與高價鐵質 量含量檢測，對照組為采用普通多糖制備方法+普通多糖鐵的絡合方法制備出來的多糖和 多糖鐵進行多糖含量與高價鐵質量含量檢測（多糖使用硫酸苯酚法檢測，多糖鐵使用鄰菲 羅啉法進行檢測），得到以下情況表；
[0049] 表1情況對照表
[0050]
[0051] 由上表可知，采用本發明方面制備的多糖和多糖鐵的質量含量均比普通方法的 高，且分別至少高出25%、2%。
[0052] 將本發明制備出來的黃芪多糖鐵進行相對分子質量檢測：利用凝膠滲透色譜法 (gelpermeation chromatography，GPC)檢測，用7個標準相對分子質量右旋糖酐作出標準 曲線，重均相對分子質量從4000-430000，色譜分析流動相為純水，樣品質量濃度lg/L，流速 0.16mL/min，檢測器溫度40 °C，凝膠色譜柱溫度60 °C。根據美國藥典要求，黃芪多糖鐵的表 觀分子量要求為34000Da-60000Da，重均分子量與數均分子量的比值小于1.7。
[0053] 通過把本發明制成注射液進行實驗說明，把本發明黃芪多糖鐵作為原料藥加入到 注射用水中配制成含鐵元素350mg/mL的溶液，加入40 %的堿液調PH值至11，對堿化后的溶 液進行加熱，加熱溫度控制在50-80°C，然后向加熱后的溶液中加入3%。活性炭，吸附不溶性 顆粒，至無肉眼可見的不溶性顆粒，再攪拌20-60min后過濾，收集濾液并對濾液進行滅菌， 得到黃芪多糖鐵注射液成品。
[0054] 1臨床應用試驗
[0055] 將出生2-3天后的仔豬，隨機每窩仔豬分為三組。一組為本發明試驗組(實施例ΙΟ,二組為右旋糖酐鐵實驗組，三組為空白對照組，其中本發明組每頭注射黃芪多糖鐵注射 液lml，右旋糖酐鐵實驗組和對照組分別注射等量的右旋糖酐鐵注射液和生理鹽水。各組均 于試驗后兩周采血測定其血液血紅蛋白含量(g/dl);各組仔豬均于試驗當天和21日齡斷奶 時分別稱重，并統計其增重和存活情況。其結果如下表所示：
[0056] 表2仔豬注射黃芪多糖鐵注射液后血液血紅蛋白含量表：
[0057]
[0058] 從上表可以看出，注射本發明所研制的黃芪多糖鐵注射液與右旋糖酐鐵組、生理 鹽水對照組進行比較，血紅蛋白分別增加了 3.43、5.18-5.47。
[0059] 表3仔豬注射黃芪多糖鐵注射液后增重情況表
[0060]
[0061 ]從表3可知，仔豬注射本發明制備的黃芪多糖鐵注射液后日增重均高于右旋糖酐 鐵組合對照組和生理鹽水組。
[0062]表4仔豬注射黃芪多糖鐵注射液后存活情況表
[0063]
[0064] 從表4可知，注射本發明制備的黃芪多糖鐵注射液的仔豬比注射生理鹽水的仔豬、 右旋糖圈1鐵注射液組仔豬均提尚。
[0065] 毒性試驗:本發明黃芪多糖鐵鐵注射液為透明深褐色膠體溶液，用小白鼠肌肉注 射黃芪多糖鐵注射液，采用改良Karber法測定半數致死量(LD50)，結果為800.12mg/kg，按 照急性毒性分級，屬于實際無毒級。也證明了本發明制備的豬用黃芪多糖鐵原料藥為無毒 級。
[0066] 上述說明是針對本發明較佳可行實施例的詳細說明，但實施例并非用以限定本發 明的專利申請范圍，凡本發明所提示的技術精神下所完成的同等變化或修飾變更，均應屬 于本發明所涵蓋專利范圍。
【主權項】
1. 一種含黃芪多糖鐵的豬用注射液，其特征在于：該注射液的有效組分及其重量份數 為:黃芪多糖10-50份，鐵鹽15-30份； (1) 該含有黃芪多糖鐵的豬用注射劑中組分之一的黃芪多糖的提取與純化方法為：取 黃芪藥材粉碎成粗粉，然后用重量比1:5-8的蒸餾水回流提取2h，共3次，然后將回流提取的 回流液加質量濃度為50-60 %的乙醇溶液在微波下進行3次處理，每次30-50s，且每次微波 處理后停止20-30S再進行微波處理，得到微波提取液，過60-120目篩去粗渣，收集合并濾 液，然后濾液加入〇. 05-0.2倍體積的活性炭進行離心過濾1-3次后，在0.3MPa壓力差下，使 用超濾膜過濾，截留得出分子量范圍為20000Da-30000Da的黃芪多糖； (2) 該含有黃芪多糖鐵的豬用注射劑中所述的鐵鹽為質量濃度為10m〇l/L的三氯化鐵 溶液、質量濃度為8mol/L的硝酸鐵溶液、質量濃度為10m 〇l/L的硫酸鐵溶液或質量濃度為 1 Omo 1/L的硫酸亞鐵溶液中的一種。2. 根據權利要求1所述的一種含黃芪多糖鐵的豬用注射液的制備方法，其特征在于，該 制備方法具體步驟為： (1) 該含有黃芪多糖鐵的豬用注射劑中組分之一的黃芪多糖的提取與純化方法為：取 黃芪藥材粉碎成粗粉，然后用重量比1:5-8的蒸餾水回流提取2h，共3次，然后將回流提取的 回流液加質量濃度為50-60 %的乙醇溶液在微波下進行3次處理，每次30-50s，且每次微波 處理后停止20-30S再進行微波處理，得到微波提取液，過60-120目篩去粗渣，收集合并濾 液，然后濾液加入〇. 05-0.2倍體積的活性炭進行離心過濾1-3次后，在0.3MPa壓力差下，使 用超濾膜過濾，截留得出分子量范圍為20000Da-30000Da的黃芪多糖，待用； (2) 黃芪多糖鐵的制備:將步驟（1)待用的黃芪多糖、酒石酸鈉和碳酸鈉按照重量比為 15:3: 5溶于蒸餾水，然后按照重量份數加入鐵鹽，得到溶液A，將溶液A以3-8BV/h的流速通 過裝載有堿性離子交換樹脂的交換柱，控制交換柱內的溫度為50-70 °C，反應0.5-0.8h后， 冷卻，濾出樹脂，再用去離子水沖洗樹脂表面3-5次，再用濃度為70%-80%乙醇進行醇析， 在60-85Γ條件下烘干后即可得到黃芪多糖鐵； (3) 注射液成品制備:將黃芪多糖鐵加入到注射用水中配制成含鐵元素200-320mg/mL 的溶液，加入25-40 %的堿液調pH值至11，對堿化后的溶液于60-75 °C進行加熱，然后向加熱 后的溶液中加入1-3%。碳粉，吸附不溶性顆粒，至無肉眼可見的不溶性顆粒，再攪拌20-60min后過濾，收集濾液并對濾液進行滅菌，得到含有黃芪多糖鐵的豬用注射液成品。3. 根據權利要求2所述的一種含黃芪多糖鐵的豬用注射液的制備方法，其特征在于，所 述堿性離子交換樹脂為三丁胺胺化強堿性陰離子交換樹脂或聚苯乙烯強堿陰離子交換樹 脂。4. 根據權利要求2所述的一種含黃芪多糖鐵的豬用注射液的制備方法，其特征在于，所 述微波的功率為300-500W，壓力為0 · 1 -0 · 3MPa。5. 根據權利要求2所述的一種含黃芪多糖鐵的豬用注射液的制備方法，其特征在于，所 述步驟(2)中黃芪多糖鐵的制備還包括將溶液A通過裝載有堿性離子交換樹脂的交換柱內 的同時，以0.3-0.8BV/h的流速加入質量濃度為15 %的氫氧化鉀溶液或者質量濃度為15 % 的氫氧化銨溶液。6. 根據權利要求2所述的一種含黃芪多糖鐵的豬用注射液的制備方法，其特征在于，所 述的超濾膜材質為聚醚砜，膜層材料為氧化鈦，孔徑為l_2nm。7.根據權利要求2所述的一種含黃芪多糖鐵的豬用注射液的制備方法，其特征在于，在 步驟(1)中，所述的離心過濾的轉速為2000_3000r/min，每次處理30-60s。
【文檔編號】A61K31/715GK106038591SQ201610372877
【公開日】2016年10月26日
【申請日】2016年5月31日
【發明人】韓再滿
【申請人】田東縣浙緣農業科技有限公司