一種酶法預處理輔助提取禹白芷中總香豆素的工藝的制作方法
【專利摘要】本發明公開了一種酶法預處理輔助提取禹白芷總香豆素的工藝，該酶法預處理提取工藝低溫進行，使用本方法可以使流浸膏收率提高20%以上，總香豆素收率提高15%以上，本發明提取溫度低，能耗低，有效成分得率高，得到的產品質量穩定，反應條件易控制，適合于工業化放大生產。
【專利說明】
-種酶法預處理輔助提取禹白左中總香豆素的工藝
技術領域
[0001] 本發明屬于中藥提取工藝技術領域，具體設及一種可有效提高禹白巧中總香豆素 提取效率的酶法預處理提取工藝。
【背景技術】
[0002] 白巧為傘形科植物白巧或杭白巧的干燥根，是中醫臨床常用藥之一，它始記載于， 《神農本草經》，性溫，味辛，具有桂風、除濕、行氣、止痛，消瘡、止血、美容的功效，用于治療 感冒頭痛，眉棱骨痛，鼻淵、牙痛，瘡瘍腫痛等，現代藥理學研究表明，白巧具有抗炎，解熱， 鎮痛，抗病原微生物的作用，能抑制銀屑病，治療白齋風，具有括抗副交感神經的作用，有解 疫止痛效果等，商品白巧主要有祁白巧，禹白巧，杭白巧，川白巧，白巧中所含化學成分W揮 發油和香豆素類為主，香豆素類中，W氧化前胡素、歐前胡素、和異歐前胡素的含量居高，白 巧中總香豆素含量的高低，是中藥白巧品質評價的重要指標之一，研究表明白巧提取物中 總香豆素的含量越高，其療效也越好，因此如何提高白巧提取物中總香豆素的含量成為白 巧提取工藝的關鍵。白巧臨床應用廣泛，據統計，在中國藥典2000版一部收載的458個組方 中，有43個成分還有白巧，同時他也是一種很好的香料和調味輔料，在日常生活中廣泛應 用。
[0003] 香豆素的提取工藝，比較常用的主要有有機溶劑提取法，超臨界二氧化碳萃取法 等，其中有機溶劑的提取法由于工藝簡單，操作方便，反應條件較易控制等有點，目前仍是 最廣泛的一種提取方法，但是有機溶解提取通常需要較高的溫度和大量的有機溶劑，從而 在一定程度上影響了目標產物的活性，且香豆素的純度也會受到影響，二氧化碳超臨界提 取方法對設備的要求比較高。
【發明內容】
[0004] 本發明的目的在于提供一種酶法預處理提取禹白巧中總香豆素的方法，為實現上 述目的，本發明采用如下技術方案： 一種酶法預處理輔助提取禹白巧中總香豆素的工藝，它包括W下步驟： 第一步:取一份禹白巧粉碎過篩至40-60目，加入3份的純凈水攬拌均勻，水浴加熱至60 攝氏度左右，得禹白巧溶液； 第二步:在第一步得到的禹白巧溶液中加入6-lOU/g的纖維素酶，4-80U/g的淀粉酶和 3-7U/g的木瓜蛋白酶組成的復合酶，在PH3-5條件下反應2小時，得到酶解液； 第Ξ步:將第二步得到的酶解液，加入8倍量的70%乙醇溶液抽提3次，每次抽屜時間為2 小時，抽提溫度為60°C，過濾得到抽提液； 第四步:合并抽提液，減壓濃縮濾液得濃縮膏，計算出膏率； 第五步:濃縮液經噴霧干燥制備得到禹白巧提取物，噴霧干燥條件為:進液物料溫度為 70-80°(：，浸膏相對密度為1.08-1.10(60°(：)，進液速度為每分鐘60-701111，進風溫度為138- 140°(：，出風溫度為83-85°(：; 第六步:采用紫外分光光度法檢測禹白巧提取物中總香豆素含量檢測，具體步驟如下： 精密稱取歐前胡素對照品3.91mg，置于10ml量瓶中，加甲醇使其完全溶解并稀釋至刻度，搖 勻，分別吸取〇.lml、0.15ml、0.2ml、0.25ml、0.3ml，用甲醇稀釋定容到ml量瓶中，搖勻，在 30化m波長測定吸光度，W歐前胡素對照品濃度為橫坐標，吸光度為縱坐標繪制標準曲線， 去禹白巧總香豆素提取物適量，加入95%乙醇定容至250ml量瓶中，搖勻，精密吸取0.3ml，加 入95%乙醇定容至5ml量瓶中，搖勻，于303nm波長處測定吸光度，計算含量。
[0005] 本發明的有益效果:本發明W禹州道地中藥材禹白巧為研究對象，采用酶法預處 理后用常溫提取方法可W使出膏率比傳統工藝提高20%W上，提取物中總香豆素的含量提 高15%W上，采用該方法可W提高出膏率和提取物中總香豆素的含量，本發明產品，生產工 藝簡單易行，且產品質量穩定，低溫對提取物活性破壞小、能耗少、收率高，適宜于大規模生 產。
【具體實施方式】
[0006] 下面結合實施例對本發明作進一步的說明。
[0007] 實施例1 一種酶法預處理輔助提取禹白巧中總香豆素的工藝，包括W下步驟： 第一步:取100kg禹白巧粉碎過篩至40目，加入300kg的純凈水攬拌均勻，加熱至60攝氏 度左右，得禹白巧溶液； 第二步:在所述禹白巧溶液中加入8U/g的纖維素酶，60U/g的淀粉酶和抓/g的木瓜蛋白 酶組成的復合酶，在PH4條件下反應2小時，得到酶解液； 第Ξ步:取上述酶解液，加入8倍量的70%乙醇溶液抽提3次，每次抽提時間為2小時，抽 提溫度為60°C ;過濾得到抽提液； 第四步:合并抽提液，減壓濃縮濾液得濃縮膏10.1kg，出膏率為10.1%; 第五步:濃縮液經噴霧干燥制備得到禹白巧提取物，噴霧干燥條件為:進液物料溫度為 70°C，浸膏相對密度為1.00(60°C )，進液速度為每分鐘60ml，進風溫度為140°C，出風溫度為 85。。 第六步:采用紫外分光光度法檢測禹白巧提取物中總香豆素含量檢測，精密稱取歐前 胡素對照品3.91mg，置于10ml量瓶中，加甲醇使其完全溶解并稀釋至刻度，搖勻，分別吸取 0.1ml、0.15ml、0.2ml、0.25ml、0.3ml，用甲醇稀釋定容到ml量瓶中，搖勻，在303nm波長測定 吸光度，W歐前胡素對照品濃度為橫坐標，吸光度為縱坐標繪制標準曲線，去禹白巧總香豆 素提取物適量，加入95%乙醇定容至250ml量瓶中，搖勻，精密吸取0.3ml，加入95%乙醇定容 至5ml量瓶中，搖勻，于30化m波長處測定吸光度，計算出禹白巧提取物中總香豆素含量為 65.7〇/〇。
[000引實施例2 一種酶法預處理輔助提取禹白巧中總香豆素的工藝，包括W下步驟： 第一步:取100kg禹白巧粉碎過篩至50目，加入300kg的純凈水攬拌均勻，加熱至60攝氏 度左右，得禹白巧溶液； 第二步:在所述禹白巧溶液中加入7U/g的纖維素酶，5抓/g的淀粉酶和8U/g的木瓜蛋白 酶組成的復合酶，在PH3.5條件下反應2小時，得到酶解液； 第Ξ步:取上述酶解液，加入7倍量的80%乙醇溶液抽提3次，每次抽提時間為2小時，抽 提溫度為60°C，過濾得到抽提液； 第四步:合并抽提液，減壓濃縮濾液得濃縮膏10.8kg，出膏率10.8%; 第五步:濃縮液經噴霧干燥制備得到禹白巧提取物，噴霧干燥條件為:進液物料溫度為 75°C，浸膏相對密度為1.00(60°C)，進液速度為每分鐘65ml，進風溫度為139°C，出風溫度為 84。。 第六步:采用紫外分光光度法檢測禹白巧提取物中總香豆素含量檢測，禹白巧提取物 中總香豆素含量為66.5%. 實施例3 一種酶法預處理輔助提取禹白巧中總香豆素的工藝，它包括W下步驟： 第一步:取一份禹白巧粉碎過篩至60目，加入3份的純凈水攬拌均勻，水浴加熱至60攝 氏度左右，得禹白巧溶液； 第二步:在第一步得到的禹白巧溶液中加入7U/g的纖維素酶，5抓/g的淀粉酶和8U/g的 木瓜蛋白酶組成的復合酶，在PH3.5條件下反應2小時，得到酶解液； 第Ξ步:將第二步得到的酶解液，加入8倍量的70%乙醇溶液抽提3次，每次抽屜時間為2 小時，抽提溫度為60°C，過濾得到抽提液； 第四步:合并抽提液，減壓濃縮濾液得濃縮膏，出膏率10.8%; 第五步:濃縮液經噴霧干燥制備得到禹白巧提取物，噴霧干燥條件為:進液物料溫度為 80°C，浸膏相對密度為1.10(60°C)，進液速度為每分鐘70ml，進風溫度為138°C，出風溫度為 83。。 第六步:采用紫外分光光度法檢測禹白巧提取物中總香豆素含量檢測，具體步驟如下： 精密稱取歐前胡素對照品3.91mg，置于10ml量瓶中，加甲醇使其完全溶解并稀釋至刻度，搖 勻，分別吸取0.lml、0.15ml、0.2ml、0.25ml、0.3ml，用甲醇稀釋定容到ml量瓶中，搖勻，在 30化m波長測定吸光度，W歐前胡素對照品濃度為橫坐標，吸光度為縱坐標繪制標準曲線， 去禹白巧總香豆素提取物適量，加入95%乙醇定容至250ml量瓶中，搖勻，精密吸取0.3ml，加 入95%乙醇定容至5ml量瓶中，搖勻，于30化m波長處測定吸光度，計算出禹白巧提取物中總 香豆素含量為66.1%。
[0009]表1通過對比說明本發明提取工藝的提取效率。
[0010]由表1可知，本發明酶法提取工藝、實施例1、實施例2和實施例3的出膏率分別為 10.5%、10.1%、10.4%和10.5%，均高于普通乙醇提取工藝的8.5%，提高比例均高于15%;本發 明實施例提取的總香豆素含量均高于普通乙醇提取，提高效率均高于19%;由此表1可知，本 發明提取工藝優于普通乙醇提取工藝。
【主權項】
1. 一種酶法預處理輔助提取禹白芷中總香豆素的工藝，其特征在于，它包括以下步驟： 第一步：取一份禹白芷粉碎過篩至40-60目，加入3份的純凈水攪拌均勻，水浴加熱至 58-62攝氏度，得禹白芷溶液； 第二步:在第一步得到的禹白芷溶液中加入6-10U/g的纖維素酶，4-80U/g的淀粉酶和 3_7U/g的木瓜蛋白酶組成的復合酶，在PH3-5條件下反應2小時，得到酶解液； 第三步:將第二步得到的酶解液，加入8倍量的70%乙醇溶液抽提3次，每次抽屜時間為2 小時，抽提溫度為58-62°C，過濾得到抽提液； 第四步:合并抽提液，減壓濃縮濾液得濃縮膏，計算出膏率； 第五步:濃縮液經噴霧干燥制備得到禹白芷提取物，噴霧干燥條件為:進液物料溫度為 70-80°C，浸膏相對密度為1.08-1.10(60°C)，進液速度為每分鐘60-70ml，進風溫度為138-140°C，出風溫度為83-85°C; 第六步:采用紫外分光光度法檢測禹白芷提取物中總香豆素含量檢測，具體步驟如下： 精密稱取歐前胡素對照品3.91mg，置于10ml量瓶中，加甲醇使其完全溶解并稀釋至刻度，搖 勻，分別吸取〇.lml、0.15ml、0.2ml、0.25ml、0.3ml，用甲醇稀釋定容到ml量瓶中，搖勻，在 303nm波長測定吸光度，以歐前胡素對照品濃度為橫坐標，吸光度為縱坐標繪制標準曲線， 去禹白芷總香豆素提取物適量，加入95%乙醇定容至250ml量瓶中，搖勻，精密吸取0.3ml，加 入95%乙醇定容至5ml量瓶中，搖勻，于303nm波長處測定吸光度，計算含量。
【文檔編號】A61K36/232GK105998111SQ201610535105
【公開日】2016年10月12日
【申請日】2016年7月8日
【發明人】朱永喜, 解克偉, 江紅格, 馬革新, 陳福林, 陳軍綺
【申請人】禹州市合同泰藥業有限公司