一種治療腦膠質瘤的藥物組合物及其用圖
【專利摘要】本發明屬于醫藥領域，具體涉及一種藥物組合物及其用于制備治療腦膠質瘤藥物中的應用。本發明藥物組合物以欖香烯和泊馬度胺為藥物活性成分，其中欖香烯和泊馬度胺的比例優選為0.003?100：1，進一步優選為0.01?50：1。本發明通過大量的藥理學實驗證實，欖香烯和泊馬度胺在治療腦膠質瘤方面具有顯著的協同作用，能夠顯著減小腫瘤體積，降低瘤重，延長生存期。本發明藥物組合物治療腦膠質瘤時療效確切、毒副作用小，具有很好的醫學應用前景。
【專利說明】
-種治療腦膠質瘤的藥物組合物及其用途
技術領域
[0001] 本發明屬于醫藥領域，設及一種治療腦膠質瘤的藥物組合物及其用途，具體設及 包含攬香締和泊馬度胺的組合物及其用于制備治療腦膠質瘤藥物中的用途。
【背景技術】
[0002] 膠質瘤是發生于神經外胚層的腫瘤，故亦稱神經外胚層腫瘤或神經上皮腫瘤。腦 膠質瘤是一種高復發的腦部腫瘤疾病，具有發病率、復發率、死亡率高和治愈率低等"Ξ高 一低"的特點，其發病病因至今仍不明確。腦膠質瘤(腦膠質細胞瘤)約占煩內腫瘤的46%， 發病率為3~10人/10萬人，發病年齡高峰在30-40歲，或10-20歲。腦膠質瘤占全身惡性腫瘤 的1%~3%，手術加放化療的平均生存期僅為8~11個月。膠質細胞瘤的生長特點為浸潤性 生長，與正常腦組織無明顯界限，多數不限于一個腦葉，向腦組織外呈指狀深入破壞腦組 織，偏良性者生長緩慢，病程較長，自出現癥狀至就診時間平均兩年，惡性者瘤體生長快，病 程短，自出現癥狀到就診時多數在3個月之內，70-80%多在半年之內。
[0003] 腦膠質瘤是一種浸潤性生長腫瘤，傳統多采用手術治療，但由于其呈浸潤性生長， 大多與正常腦組織無明顯分界，手術難W做到徹底切除，生存率較低。采用手術治療為主， 術后輔W放療、化療等綜合治療方案可W提高療效。腦膠質瘤的化療工作作為術后輔助治 療，關鍵是研制特效的藥物。
[0004]泊馬度胺(pomalidomide，商品名:Pomalyst)是新一代免疫調節劑，是沙利度胺類 似物，比沙利度胺和來那度胺更有效、毒性更小。泊馬度胺為膠囊劑，有lmg、2mg、3mg和4mg 四種規格，推薦起始劑量為每日4mg，28d為一個周期，前21d用藥，直到病情惡化。可W與地 塞米松聯合使用[3]。美國食品和藥物管理局(FDA)2013年2月批準泊馬度胺用于曾接受至 少兩種治療(包括來那度胺和棚替佐米)之后疾病仍然進展，W及對治療無效且在最后一種 治療60d內發生疾病進展的MM。攬香締化lemene)是從傳統中草藥姜科植物溫郁金(溫義術） 中提取獲得的祗締類化合物。攬香締注射液we-攬香締為主要成分，并含有少量T-和S-攬 香締及其它祗類化合物，通過實驗研究和臨床試驗已于1994年作為國家二類抗腫瘤新藥上 市應用。多年來，有關攬香締注射液進一步的基礎研究層出不窮，研究結果充分表明該藥對 多種腫瘤細胞具有顯著的抑殺作用，能夠誘導腫瘤細胞調亡和分化，逆轉腫瘤細胞多藥耐 藥和抗腫瘤轉移，與放化療聯合具有增敏減毒、提高機體免疫力W及毒副反應輕微等顯著 特點。
[0005] 經檢索，目前在治療腦膠質瘤的臨床藥物方面尚無 W攬香締和泊馬度胺為活性成 分的抗腦膠質瘤藥物組合物用于腦膠質瘤治療的臨床報道。
【發明內容】
[0006] 針對現有腦膠質瘤治療過程中缺乏有效的化療藥物，且現有的化療藥物毒副作用 大的缺陷，本發明提供一種安全有效的治療腦膠質瘤藥物，進一步增加腦膠質瘤患者的臨 床用藥選擇，該藥物組合物W攬香締和泊馬度胺為藥物活性成分，其對于腦膠質瘤的治療 效果好、毒副作用小，有很好的臨床應用前景。
[0007] 本發明人經過大量的藥理學實驗驚奇地發現攬香締和泊馬度胺聯合應用在治療 腦膠質瘤方面具有顯著地協同作用，本發明藥效部分實施例1表明含有攬香締和泊馬度胺 的藥物組合物對大鼠腦膠質瘤模型具有很好的治療作用，其能夠顯著抑制大鼠腦膠質瘤生 長，降低腦膠質瘤瘤重，明顯延長大鼠生存期。本發明藥效部分實施例2表明含有攬香締和 泊馬度胺的藥物組合物對裸鼠腦膠質瘤模型具有很好的治療作用，能夠顯著抑制裸鼠腦膠 質瘤生長，減小腫瘤體積。本發明藥物組合物治療腦膠質瘤的效果不僅顯著優于兩種藥物 單獨使用時的效果，更優于兩者效果的加和。兩種藥物聯合使用可W明顯減少各自用量，減 少不良反應發生。
[0008] 本發明目的之一是提供一種用于治療腦膠質瘤的藥物組合物，該藥物組合物的藥 物活性成分由攬香締和泊馬度胺組成。發明人通過大量藥理實驗發現，該藥物組合物中攬 香締和泊馬度胺在廣泛的比例范圍內均可W起到治療腦膠質瘤的協同治療效果。根據藥物 組合物的治療腦膠質瘤的效果和協同作用的強弱，本發明藥物組合物中攬香締與泊馬度胺 的重量比優選為0.003-100:1，進一步優選為0.01-50:1。
[0009] 本發明還提供了含有上述藥物組合物的藥物制劑，本發明藥物組合物可W根據需 要制備成合適的藥物制劑用于腦膠質瘤的治療，如微乳制劑、注射制劑、片劑、膠囊劑等。所 述微乳制劑所選用的輔料可W為薄荷油、聚氧乙締-23-月桂基酸、1,2-丙二醇、氨化挪油甘 油脂、月桂酷基聚乙二醇-32-甘油醋、聚乙二醇3350、辛酸油酸乙醋、聚乙二醇8000、留蘭香 油、十甘油單硬脂酸醋、聚氧乙締藍麻油化-40中的部分或全部。上述制劑的所用輔料及制 備方法均可采用其常規的輔料和制備方法制得。
[0010] 本發明目的之二是提供上述藥物組合物的醫藥用途，即該藥物組合物用于制備治 療腦膠質瘤藥物中的用途。本發明的藥物組合物在臨床上可用于治療腦膠質瘤。上述所述 的醫藥用途中，根據動物病情W及用藥部位可W將攬香締和泊馬度胺藥物組合物制備成合 適的藥物制劑W方便用藥，對于本發明治療腦膠質瘤的藥物組合物的給藥時間和給藥次數 需要根據病情的具體診斷結果而定，運在本領域技術人員掌握的技術范圍之內。例如，將對 大鼠腦膠質瘤的治療方案應用于人身上，所有藥物對人的有效劑量可W通過該藥物對大鼠 的有效劑量進行換算，運對于本領域的普通技術人員來說是顯而易見的。
[0011] 與現有技術相比，本發明藥物組合物在治療腦膠質瘤方面具有如下突出的優勢：
[0012] (1)與單獨給藥攬香締或泊馬度胺相比，本發明含有攬香締和泊馬度胺的藥物組 合物對大鼠腦膠質瘤模型治療效果更好，并且兩種藥物活性成分在降低腦膠質瘤瘤重和延 長患者存活時間方面體現出很好的協同增效作用。與單獨給藥攬香締或泊馬度胺相比，本 發明含有攬香締和泊馬度胺的藥物組合物對裸鼠腦膠質瘤模型治療效果更好，并且兩種藥 物活性成分在減小腫瘤體積方面體現出很好的協同增效作用。
[0013] (2)本發明藥物組合物含有泊馬度胺和攬香締，二者聯合用藥在具有協同作用的 同時，可W顯著降低二者用量，從而顯著降低患者用藥時的毒副作用，減少不良反應發生。
[0014] (3)本發明藥物組合物W固定組合的形式治療腦膠質瘤，與同時服用單藥相比服 用更佳方便，提高了患者的順應性和依從性，一定程度上增強了對疾病的治療效果。
【具體實施方式】
[0015] W下通過具體實施方法進一步描述本發明，但本發明的應用范圍不僅僅限于下列 實施例。在本發明的內容、精神和/或范圍內，對本發明技術特征的替換和/或組合，對本領 域的技術人員來說是顯而易見的，且包含在本發明之中。
[0016] 第一部分本發明藥物組合物制劑及其制備方法
[0017] 實施例1微乳濃縮物 [001引處方 糖香嫌 0 Ig 泊馬度胺 30g 薄荷油 40甚
[0019] 辛酸油酸乙驅 巧g 1，2-丙二醇 斗游 聚己二醇3350 40g
[0020] 制備工藝:稱取處方量薄荷油、辛酸油酸乙醋、1,2-丙二醇、聚乙二醇3350,混合后 攬拌均勻，然后加入攬香締、泊馬度胺溶解，也可W超聲波處理W加速溶解，得澄清濃縮液， 即為攬香締與泊馬度胺微乳濃縮物。激光粒度測定儀測定其粒徑，平均粒徑為40nm。上述微 乳濃縮物可進一步稀釋用于注射或口服。
[0021] 實施例2微乳濃縮物 [0022] 處方 攬香婦 20g 泊馬度胺 lOg 薄荷油 靴g
[0023] 辛酸油酸乙醋 55g 1:，2-丙二醇 45g 聚己二醇巧50 40g
[0024] 制備工藝同實施例1。激光粒度測定儀測定其粒徑，平均粒徑為20nm。上述微乳濃 縮物可進一步稀釋用于注射或口服。
[0025] 實施例3微乳濃縮物 [002引處方 攬香嫌 lOg 泊馬度胺 O.lg 薄荷油 4化
[0027] 辛酸油酸己醋 55g 1,，2-丙二醇 45g 聚乙二醇巧50 4好g
[0028] 制備工藝同實施例1。激光粒度測定儀測定其粒徑，平均粒徑為33nm。上述微乳濃 縮物可進一步稀釋用于注射或口服。
[0029] 實施例4微乳濃縮物 [0030] 處方 攬香婦 〇.3g 泊馬度胺 lOg
[0031] 薄荷油 3麵 聚氧石締 -23-月桂基酸 60g 1，2-巧二醇 30g
[0032] 制備工藝:稱取處方量薄荷油、聚氧乙締-23-月桂基酸、1,2-丙二醇，混合后攬拌 均勻，然后加入攬香締、泊馬度胺溶解，也可W超聲波處理W加速溶解，得澄清濃縮液，即為 攬香締與泊馬度胺微乳濃縮物。激光粒度測定儀測定其粒徑，平均粒徑為45nm。上述微乳濃 縮物可進一步稀釋用于注射或口服。
[0033] 實施例5微乳濃縮物
[OOW 處方 繼香嫌 越 泊馬度胺 O.ig
[003引薄荷油 35g 聚氧藝締 -23-月桂基髓 60貸 1，2-巧二酶： 30g
[0036] 制備工藝同實施例4。激光粒度測定儀測定其粒徑，平均粒徑為75nm。上述微乳濃 縮物可進一步稀釋用于注射或口服。
[0037] 實施例6微乳濃縮物 [00測處方 植香婦 D.5g 泊馬度胺 lOg
[0039] 薄荷油 35g 聚敏乙締 -23-月桂基職 60g 1，2-丙二醇 30g
[0040] 制備工藝同實施例4。激光粒度測定儀測定其粒徑，平均粒徑為50nm。上述微乳濃 縮物可進一步稀釋用于注射或口服。
[0041 ]實施例7微乳濃縮物 [0042] 處方 攬香婦 巧:g 巧馬度肢 么5g
[0043] 月桂醜基聚藝二醇-32-甘油醋 20g 聚氧乙締蘆麻油6以40 3始 1，2-丙二醇 ]5g
[0044] 制備工藝：
[0045] 稱取處方量月桂酷基聚乙二醇-32-甘油醋、聚氧乙締藍麻油化-40、1,2-丙二醇， 混合后攬拌均勻，然后加入攬香締、泊馬度胺溶解，也可W超聲波處理W加速溶解，得澄清 濃縮液，即為攬香締與泊馬度胺的微乳濃縮物。激光粒度測定儀測定其粒徑，平均粒徑為 63nm。上述微乳濃縮物可進一步稀釋用于注射或口服。
[0046] 實施例8片劑
[0047] 處方 槐香稀 llg 泊馬度胺 0.5g 微晶纖維素 52g
[004引預膠化淀粉 4礎 交聯錢甲基纖維素鋼 15g 硬脂酸鎮 2.5g 10%淀粉漿 5.5g
[0049] 制備工藝:將藥物和輔料分別過80目篩，將攬香締與3?微晶纖維素、30g預膠化淀 粉和Ug交聯簇甲基纖維鋼充分混合，10%淀粉漿制軟材，18目篩制粒，60°C下干燥，得顆粒 1。將泊馬度胺與1始微晶纖維素、12g預膠化淀粉和2g交聯簇甲基纖維鋼充分混合，10%淀 粉漿制軟材，18目篩制粒，60°C下干燥，得顆粒2。按等量遞增原則，將顆粒1和顆粒2充分混 合，16目篩整粒，加入硬脂酸儀，混勻，壓片。
[0050] 實施例9膠囊劑
[0051 ] 處方 攬香稀 llg 泊馬度胺 0,確 淀粉 69g
[0052]乳糖 20g 交聯竣甲基纖維素銷 15g 硬脂酸漢 么罐 7%PVP溶液 10 5g
[0053]制備工藝:將藥物和輔料分別過80目篩，將攬香締與49g淀粉和13g交聯簇甲基纖 維素鋼充分混合，7%PVP溶液制軟材，18目篩制粒，60°C下干燥，得顆粒1。將泊馬度胺與20g 乳糖、20g淀粉和2g交聯簇甲基纖維素鋼充分混合，7%PVP溶液制軟材，18目篩制粒，60°C下 干燥，得顆粒2。按等量遞增原則，將顆粒1和顆粒2充分混合，16目篩整粒，加入硬脂酸儀，混 勻，灌膠囊。
[0化4] 實施例10注射液 [0055] 處方 攬香締 〇.2g 泊馬度朦 25g
[0化6] 氯化鋼 〇.85g 1，丙二醇 1.5g
[0057]制備工藝:取處方量的攬香締和泊馬度胺，加入適量的蒸饋水，再加入丙二醇進行 充分溶解，加入氯化鋼，過濾、灌封，100攝氏度滅菌30min即得。
[005引實施例11注射液
[0059] 處方 攬香締 lOg 泊馬度胺 〇.lg
[0060] 氯化輛 0.85g 1，2-丙二醇 1.5g
[0061] 制備工藝同實施例10。
[0062] 實施例12注射液
[0063] 處方 攬香締 0,5各 泊馬度胺 5g
[0064] 氯化鋼 0 iS5g 1，2-丙 ^一醇 1.5g
[00化]制備工藝同實施例10。
[0066] 第二部分藥效學實施例部分
[0067] 實施例1組合物對Wistar大鼠體內C6細胞的抑制作用實驗
[0068] UWistar大鼠腦膠質瘤模型的建立：
[0069] 選用健康雄性Wistar大鼠90只，體重250~280g。腫瘤細胞采用C6腦膠質瘤細胞 (細胞濃度為1.0 X lo^ul，細胞存活率為95% W上）。2%戊己比妥鋼(40mg/kg)腹腔注射全 身麻醉后，將大鼠頭部固定在立體定向儀上，接種祀點座標選定右側尾狀核(座標:前畫中 點前1.0cm，矢狀縫右旁3.0cm，硬膜下6.0cm)。將備用細胞懸液3ul W lu V3分鐘速度注射祀 點，注射完畢后留針5分鐘，使細胞充分沉積。拔針后用骨蠟封閉骨孔，術后連續3天注射青 霉素4萬U/日。分籠飼養，每天觀察大鼠的存活狀態及手術切口情況。將種植腫瘤后12天的 大鼠用于實驗。
[0070] 2、實驗分組與給藥終濃度如下：
[0071 ]模型對照組:灌胃給予等體積的賦形劑
[0072] 攬香締低量組:灌胃給予0.1 mg/kg攬香締
[0073] 攬香締高量組:灌胃給予10.0 mg/kg攬香締
[0074] 泊馬度胺低組:灌胃給予0.1 mg/kg泊馬度胺
[0075] 泊馬度胺高組:灌胃給予30.0 mg/kg泊馬度胺
[0076] 組合物A組:灌胃給予10.0 mg/kg攬香締+0.1 mg/kg泊馬度胺
[0077] 組合物B組:灌胃給予1. Omg/kg攬香締+1. Omg/kg泊馬度胺
[0078] 組合物C組:灌胃給予0.1 mg/kg攬香締+30.0 mg/kg泊馬度胺 [00巧]3、實驗結果統計如下：
[0080] 給藥前用DMS0溶解各藥物有效成分，每天灌胃給藥1次。化療后密切觀察大鼠的狀 態，發現狀態不佳立刻處死，記錄生存期，在處死動物之前，向屯、腔注射0.5 %亞甲蘭酒精溶 液，使瘤組織與腦組織分界較清楚。取出鼠腦，分離出瘤體，稱重后，-70°C冰箱保存備用。每 組取3只鼠腦10%甲醒液固定，用于病理學檢查。
[0081] 計算腫瘤抑制率：
[0082] 腫瘤抑瘤率=(對照組平均瘤重-給藥組平均瘤重)/對照組平均瘤重X 100%
[0083] 表1組合物對Wistar大鼠腦膠質瘤大小的影響
[0084]
[0085] 與攬香締低量組相比嚴p<0.01;與攬香締高量組相比Λ<0.05嚴p<0.01;
[0086] 與泊馬度胺低量組相比，$9<0.05，$$9<0.01;與泊馬度胺高量組相比，￥口< 0.05;
[0087] 通過上述表1的結果可W看出，各治療組與模型對照組相比均有顯著差異（p< 0.05)，組合物A組、B組和C組與攬香締低劑量組相比具有極顯著性差異(p<0.01)，與攬香 締高劑量組相比也具有顯著性差異(P<〇. 05)，與泊馬度胺的兩個劑量組相比具有顯著性 差異或極顯著性差異。運表明，攬香締與泊馬度胺聯合后體內抑制腫瘤生長具有協同增效 作用，即可W顯著抑制腦膠質瘤生長、降低瘤重。
[0088] 此外，組合物A組、B組和C組在降低腦膠質瘤瘤重方面，具有更好的治療效果。
[0089] 表2組合物對Wistar大鼠存活時間的影響
[0090]
[0091] 與攬香締低量組相比嚴p<0.01;與攬香締高量組相比Λ<0.05嚴p<0.01;
[0092] 與泊馬度胺低量組相比，$9<0.05，$$9<0.01;與泊馬度胺高量組相比，￥口< 0.05;
[0093] 通過上述表2的結果可W看出，各治療組與模型對照組相比均有顯著差異（p< 0.05)，組合物A組、B組和C組與攬香締低劑量組相比具有極顯著性差異(p<0.01)，與攬香 締高劑量組相比也具有顯著性差異(P<〇. 05)，與泊馬度胺的兩個劑量組相比具有顯著性 差異或極顯著性差異。運表明，攬香締與泊馬度胺聯合后具有協同增效作用，能夠顯著延長 患者的生存期。
[0094] 綜上，攬香締與泊馬度胺聯用，與單藥相比，具有顯著的協同增效作用，能夠顯著 抑制患者腦膠質瘤生長，降低瘤重，延長患者生存期。并且，兩藥聯用具有更好的治療效果。 運在臨床應用上具有十分重要的意義。
[00M]實施例2組合物對裸鼠體內C6細胞的抑制作用實驗
[0096] 1、裸鼠腦膠質瘤模型的建立：
[0097] 1.1 U87細胞體外培養及接種前準備口脈了膠質瘤細胞在含10%胎牛血清的DMEM培 養基中培養，計數并調整細胞懸液濃度為1〇8個細胞/ml,錐蟲（臺吩)藍染色檢測活細胞比 率>95%。
[009引 1.2立體定向裸鼠腦內種植U87細胞□選用健康Nu/Nu裸小鼠，體重20~25g。裸鼠麻 醉后固定于腦立體定向儀上。消毒后沿中線縱向切開頭皮約1cm，暴露前因，用直徑1mm的牙 科鉆小屯、鉆穿煩骨。煩骨開窗的中屯、位于前因中點前1 mm，矢狀縫右旁開2mm，W lOul化milton注射器抽取配好的U87細胞懸液5ul(5X105個細胞），緩慢垂直煩骨進針 2.5mm，回退0.5mm，Wlul/m in的速度注入細胞懸液。留針5min后緩慢拔針。用聚氯乙締膜 封閉骨孔，縫合頭皮，常規飼養，每天觀察裸鼠的存活狀態及手術切口情況。造模7天后，將 裸鼠隨機分成8組，每組10只。
[0099] 2、實驗分組與給藥終濃度如下：
[0100]模型對照組:皮下注射等體積的賦形劑 [0101 ]攬香締低量組:皮下注射0.06mg/kg攬香締 [01 02]攬香締高量組:皮下注射6. Omg/kg攬香締
[0103] 泊馬度胺低組:皮下注射0.06mg/kg泊馬度胺
[0104] 泊馬度胺高組:皮下注射18.Omg/kg泊馬度胺
[010日]組合物A組:皮下注射6. Omg/kg攬香締+0.06mg/kg泊馬度胺
[0106] 組合物B組:皮下注射1 .Omg/kg攬香締+1 .Omg/kg泊馬度胺
[0107] 組合物C組:皮下注射0.06mg/kg攬香締+18. Omg/kg泊馬度胺
[0108] 3、實驗結果統計如下：
[0109] 給藥前用DMS0溶解各藥物有效成分，每天皮下注射1次。定期觀察裸鼠精神、飲食 和排便，用游標卡尺測量腫瘤結節的最長徑(a)和最短徑(b)，根據公式計算腫瘤體積，V = l/63iab2，計算腫瘤體積的平均值。
[0110] U87膠質細胞種植后第21天處死動物，并取腫瘤組織固定于10%福爾馬林溶液中， 石蠟包埋，組織切片，肥染色，進行組織病理檢查。
[0111] 表3組合物對裸鼠腦膠質瘤大小的影響
[0112]
[0113]
[0114] 與攬香締低量組相比嚴p<0.01;與攬香締高量組相比嚴p<0.01;
[0115] 與泊馬度胺低量組相比，$9<0.05，$$9<0.01;與泊馬度胺高量組相比，￥口< 0.05。
[0116] 通過上述表3的結果可W看出，各治療組與模型對照組相比均有顯著差異（p< 0.05)，組合物A組、B組和C組與攬香締低劑量組相比具有極顯著性差異(p<0.01)，與攬香 締高劑量組相比也具有極顯著性差異(P<〇.01)，與泊馬度胺的兩個劑量組相比具有顯著 性差異或極顯著性差異。運表明，攬香締與泊馬度胺聯合后體內抑制腫瘤生長具有協同增 效作用，即可W顯著抑制腦膠質瘤生長、減小腫瘤體積。
【主權項】
1. 一種治療腦膠質瘤的藥物組合物，其特征在于其藥物活性成分由欖香烯和泊馬度胺 組成。2. 如權利要求1所述的藥物組合物，其特征在于所述藥物組合物中欖香烯和泊馬度胺 的重量比為0.003-100:1。3. 如權利要求2所述的藥物組合物，其特征在于所述藥物組合物中欖香烯和泊馬度胺 的重量比為0.01-50:1。4. 如權利要求1-3中所述的藥物組合物，其特征在于所述藥物組合物為口服制劑。5. 如權利要求4所述的藥物組合物，其特征在于所述口服制劑為口服微乳、片劑、膠囊 劑。6. 如權利要求1-3中所述的藥物組合物，其特征在于所述藥物組合物為注射制劑。7. 如權利要求6所述的藥物組合物，其特征在于所述注射制劑為注射液、注射微乳。8. 如權利要求1所述的藥物組合物在制備治療腦膠質瘤藥物中的用途。
【文檔編號】A61K31/015GK105998019SQ201610497971
【公開日】2016年10月12日
【申請日】2016年6月29日
【發明人】王傳秀
【申請人】青島云天生物技術有限公司