一種改善子宮內膜容受性的中藥復方制劑及其制備方法和用圖

一種改善子宮內膜容受性的中藥復方制劑及其制備方法和用圖
【專利摘要】本發明屬中藥領域，涉及一種治療子宮內膜異位癥的中藥復方制劑及其制備方法。本發明遵循中醫治則補充和調節臟腑、氣血和經絡，采用中藥原料藥熟地黃，白芍，首烏，女貞子，山茱萸，麥冬，巴戟天，黨參，香附和菟絲子的提取物制備改善子宮內膜容受性的中藥復方制劑：經實驗結果顯示，本藥物制劑能改善子宮內膜容受性，有助于簡化體外受精-胚胎移植(即試管嬰兒)治療的步驟，提高妊娠率和活產率，以及建立中西醫結合的有效干預措施。進一步本復方制劑可用于制備治療不孕癥的藥物制劑。
【專利說明】
一種改善子宮內膜容受性的中藥復方制劑及其制備方法和用途
技術領域
[0001]本發明屬中藥領域，涉及一種治療子宮內膜異位癥的中藥復方制劑及其制備方法。【背景技術】
[0002]據文獻報道，不孕癥已成為影響家庭健康的嚴重衛生問題，當傳統的治療手段 (促排卵、宮腹腔鏡手術、人工授精等)失敗后，體外受精-胚胎移植(IVF-ET，俗稱“試管嬰兒)成為不孕癥治療的最有效手段。受婚育年齡的延遲和多種因素影響，在我國接受 IVF-ET治療的病例數呈上升趨勢。體外受精-胚胎移植治療包括控制的促排卵(C0H)、手術取卵、體外受精、胚胎培養和胚胎移植等多個環節。在這些多個環節中，控制的促排卵決定了子宮內膜的容受性，同時也決定了獲得卵子的數量和質量，因此在IVF-ET治療中作用至關重要。
[0003]研究顯示，應用于年輕婦女的長方案和應用于高齡婦女的短方案(亦稱經典方案)漸產生出下述弊病，其中，由于促排卵用藥時間長和用藥劑量大引起明顯的臨床并發癥，主要體現在卵巢過度刺激綜合征(0HSS)，中度和重度卵巢過度刺激綜合征的發生率為 10-30% ;0HSS是由于促排卵治療引起的醫源性疾病，主要體現在全身血管通透性改變而引起的胸水、腹水、有效血液循環不足、肝腎損傷及呼吸功能障礙等的全身性病變，重者危及生命安全；以及，由于刺激強烈導致卵巢明顯增大，增加了取卵手術后出血的風險和患者對卵巢囊腫、乳腺腫瘤等雌激素依賴性疾病的擔憂；此外，顯著延長了治療周期并增加了就診次數，加劇了病人的身心困擾和經濟負擔。
[0004]隨著IVF-ET技術的發展，微刺激促排卵方案逐漸受到生殖醫學界的關注和應用， 也越來越受到患者的廣泛認可和接受；但實踐顯示，在微刺激(或溫和刺激)治療中子宮內膜容受性受到負面影響，因此導致新鮮胚胎移植的可能性很低(< 10% )，大部分患者需要接受冷凍胚胎移植。
[0005]鑒于現有技術的傳統促排卵方案中存在的并發癥嚴重、時間長和花費大等的弊病，本申請的發明人擬提供一種改善子宮內膜容受性的中藥復方制劑，以通過中藥治療，補充和調節臟腑、氣血和經絡，改善子宮內膜容受性，增加新鮮胚胎移植幾率，提高新鮮胚胎移植成功率，進一步提高妊娠率和活產率。
【發明內容】

[0006]本發明的目的是為克服現有技術存在的缺陷，提供一種改善子宮內膜容受性的中藥復方制劑及其制備方法和用途；本發明的中藥復方制劑能遵循中醫治則補充和調節臟腑、氣血和經絡，改善子宮內膜容受性，達到增加新鮮胚胎移植幾率，提高新鮮胚胎移植成功率的效果，進一步提高妊娠率和活產率。
[0007]本發明有助于簡化體外受精-胚胎移植(即試管嬰兒)治療的步驟，提高妊娠率和活產率，建立中西醫結合的有效干預關于試管嬰兒實施措施。
[0008]具體的，本申請提供的中藥復方制劑(亦稱:補氣調經方)，其特征在于，采用下述中藥材原料藥的提取物制備改善子宮內膜容受性的中藥復方制劑:
[0009]熟地黃白芍首烏女貞子山茱萸麥冬巴戟天
[0010]黨參香附菟絲子
[0011]本發明中，每付中藥中的原料重量配比為:(g)
[0012]熟地黃10_12g 炒白芍10-12g 制首烏l〇-12g 女貞子9-12g 山茱萸 5_6g 6g麥冬10-12g巴戟天8-10g黨參10-13g香附8-10g菟絲子10-12g
[0013]本發明的一個實施例中，優選的原料藥重量配比為，每付中藥:
[0014]熟地黃12g炒白芍12g制首烏12g女貞子9g
[0015]山茱萸6g麥冬12g巴戟天9g黨參12g香附9g英絲子12g
[0016]本發明采用上述中藥材的提取物制成顆粒劑沖服。
[0017]本發明所采用的原料藥的中藥藥材質量符合中國藥典2005年版一部相應藥材項下各有關規定。其中，
[0018]熟地黃甘溫入腎，補血滋陰益精；白芍酸苦微寒入肝養血調經斂陰，兩者配伍，二味是補血之要藥；制首烏補血養肝，益精固腎；山茱萸既能潤養肝腎之陰，又能溫補腎陽； 女貞子有補肝腎之陰的功用，三藥配伍，加強補益肝腎之作用。麥冬養陰生精，清心除煩；黨參補中益氣，生精養血；巴戟天補腎陽益精血；菟絲子既補腎陽又補腎陰，兩藥伍用，意在陽中求陰；香附善疏肝理氣、調經止痛；本發明的復方制劑于大量補血藥中配伍滋陰藥物， 意在調補經后期精血虧虛之證；同時加入少量補陽藥和理氣藥，意在陰中求陽，鼓舞陽氣， 又行氣和血，使血海充盈、氣血雙補。
[0019]本發明提供了上所述的中藥復方制劑的制備方法。
[0020]更具體的，本發明通過下述方法制備改善子宮內膜容受性的中藥復方制劑(亦稱:補氣調經方):首先將每味中草藥制成〇? 1mm至3mm直徑顆粒飲片，干燥，通過自動顆粒包裝機用無毒性熱封型紙，包裝成直接配伍煎煮使用的重量分別為lg、2g、3g、4g、6g、9g、 10g、12g、30g的小包裝，在小包裝內的中草藥占包裝袋體積的二分之一至三分之二；所述的無毒性熱封型紙包裝成的小包裝，集合為20-500倍，利用真空包裝機真空包裝；抽取樣本，通過顯微鑒定或/和薄層層析方法制得顯微鑒定圖或/和薄層圖譜；避免了肉眼觀察帶來的鑒定不準確，影響了鑒定結果，提高了鑒定的科技水平；克服了傳統中草藥粗、大、黑的缺點，精確了劑量，保證了產品質量，便于藥渣與藥液的分離，保證了原藥的功效，也減少了患者服用中藥的麻煩，同時，有利于藥物的貯存，更有利于中藥的產業化和推廣應用。
[0021]本復方制劑進行了動物試驗，結果表明:可明顯補充和調節臟腑、氣血和經絡，改善子宮內膜容受性(包括厚度、形態、血流等)，增加新鮮胚胎移植幾率，提高新鮮胚胎移植成功率。
[0022]本復方制劑進行了臨床試用，在34 (總68例)例的微刺激IVF治療對象中的結果顯示，加入本中藥復方制劑組的，其子宮內膜的厚度、形態和血流有明顯改善，新鮮胚胎移植的幾率提尚。
[0023]本發明進一步進行了有關所述的中藥復方制劑改善子宮內膜的分子機制的研究， 結果顯示，本發明的中藥復方制劑改善子宮內膜種植內環境，能影響血清中孕激素，促卵泡素和雌激素類似物的濃度，以及影響NFKB信號通路激活和相關基因的表達。研究數據顯示，內膜厚度(mm):觀察組(10.12±1.37)vs對照組(9.02±1.32) ;A型內膜人數(百分比％ ):觀察組(97.06% )vs對照組(76.47% );(+、++)型內膜人數(百分比％ ):觀察組 (94.11% )vs 對照組(70.59% ) ;P1:觀察組(0? 94±0.18)vs 對照組(1.32±0.25) ;IR:觀察組(0.58 ±0.12) vs 對照組(0.79 ±0.24)。
[0024]本發明的復方制劑可進一步用于制備治療不孕癥的藥物制劑，以及用于制備提高妊娠率的藥物制劑。
[0025]本發明的優點在于，
[0026]1，改善微刺激IVF-ET治療中的子宮內膜種植環境不良問題。
[0027]2,通過改善微刺激治療中內膜種植環境，提高子宮內膜受性，提高了微刺激 IVF-ET治療效率。
[0028]3,揭示了中藥輔助改善微刺激IVF-ET結局的分子生物學機制。
[0029]4,有助于建立中西醫結合的有效干預IVF-ET治療的實施措施。【附圖說明】
[0030]圖1是經典方案與微刺激促排卵方案的比較結果，其中顯示微刺激方案比較傳統方案有明顯優勢。
[0031]圖2隨機數字表法分本復方制劑組和非中藥組，比較子宮內膜厚度、形態和血流變化的技術路線示意圖。
[0032]圖3隨機數字表法分本復方制劑組和非中藥組，比較適宜新鮮胚胎移植比率；比較新鮮胚胎移植后臨床結局。
[0033]圖4本復方制劑改善子宮內內膜客受性子宮內膜種植內環境差異比較。
[0034]圖5本復方制劑組和非中藥組兩組間血清中孕激素，促卵泡素和雌激素類似物的濃度變化。
[0035]圖6,本復方制劑組和非中藥組NFKB信號通路激活情況，RT-PIR和方法檢測一個環節的相關基因表達。【具體實施方式】
[0036]實施例1制備改善子宮內膜容受性的中藥復方制劑
[0037]取下述組成的原料藥:熟地黃白芍首烏女貞子山茱萸麥冬巴戟天當生香附菟絲子；分別按每付中藥中的原料重量配比，將各原料藥的提取物制成顆粒；首先將每味中草藥制成〇.1mm至3mm直徑顆粒飲片，干燥，通過自動顆粒包裝機用無毒性熱封型紙， 包裝成直接配伍煎煮使用的重量分別為lg、2g、3g、4g、6g、9g、10g、12g、30g的小包裝，在小包裝內的中草藥占包裝袋體積的二分之一至三分之二；所述的無毒性熱封型紙包裝成的小包裝，集合為20-500倍，利用真空包裝機真空包裝；抽取樣本，通過顯微鑒定或/和薄層層析方法制得顯微鑒定圖或/和薄層圖譜；避免了肉眼觀察帶來的鑒定不準確，影響了鑒定結果，提高了鑒定的科技水平；克服了傳統中草藥粗、大、黑的缺點，精確了劑量，保證了產品質量，便于藥渣與藥液的分離，保證了原藥的功效，也減少了患者服用中藥的麻煩，同時， 有利于藥物的貯存，更有利于中藥的產業化和推廣應用。
[0038]實施例2體內實驗
[0039]本復方制劑進行了初步臨床試驗試驗，結果表明:本復方制劑可明顯補充和調節臟腑、氣血和經絡，改善子宮內膜容受性(包括厚度、形態、血流等)，增加新鮮胚胎移植幾率，提高新鮮胚胎移植成功率。
[0040]實施例3臨床試用研究
[0041]1.病人入組選擇
[0042]接受IVF-ET治療的患者(25歲-40歲之間)，無以下情況，PC0S，肥胖(BMI彡30)， 輸卵管積水，無宮腔病變(粘連、息肉)，吸煙；
[0043]臨床確定為腎虛氣虛病人；根據病人年齡分組，分為正常反應組(< 35歲)和低反應組(> 36?40歲)，再根據卵巢對促排卵用藥反應程度(獲卵數、優質胚胎數)再次分為多胚組(多4)和少胚胎組3)進行分層研究；
[0044]2.觀察應用本復方制劑對病人內膜厚度、形態、血流的影響
[0045]根據分組，用隨機數字表法將病人分為本復方制劑治療組和非治療組，在促排卵過程中，觀察子宮內膜厚度變化、形態變化、血流變化，并在移植日收集內膜脫落細胞，分析比較內膜種植相關基因表達差異(IL1、IL8、IL18、LIF、HB-EGF);
[0046]3.比較新鮮胚胎移植后臨床結局
[0047]應用隨機數字表法將病人分為應用本復方制劑組和對照組，比較適合新鮮胚胎移植(扳機日內膜厚度8-14mm，形態A-B型，內膜血流“ + ”以上)周期比率。并比較兩組間新鮮胚胎移植臨床結果，包括妊娠率、種植率、流產率、活產率、出生體重和胎兒畸形發生率等指標；
[0048]試驗結果顯示，微刺激IVF治療對象中，加入本中藥復方制劑組的，其子宮內膜的厚度、形態和血流有明顯改善，新鮮胚胎移植的幾率提高。
[0049]實施例4中藥改善子宮內膜的分子機制研究
[0050]研究對象及干預方案:
[0051]接受IVF-ET治療的患者(25歲-40歲之間)，無以下情況，PC0S，肥胖(BMI彡30)， 輸卵管積水，無宮腔病變(粘連、息肉)，吸煙；
[0052]微刺激促排卵治療中，每天用150iu的Gn，保證卵巢的適度反應，以獲得滿意數目的卵子，有助于保證良好的妊娠率；
[0053]①比較本發明中藥組和非中藥組子宮內膜種植內環境差異；
[0054]②比較本發明中藥組和非中藥組間血清中孕激素，促卵泡素和雌激素類似物的濃度變化；
[0055]③研究本發明中藥輔助組和非中藥輔助組NFKB信號通路激活情況，RT-PIR和方法檢測個環節的相關基因表達；
[0056]取移植日脫落子宮內膜組織，比較兩組種植相關基因的表達差異(LIF、IL6、IL18、 HB-EGF 等)；
[0057]比較本發明中藥組和非中藥組患者血清中FSH，E2, E3和雌激素類似物的濃度；并比較兩組中內膜組織和孕激素受體與雌激素受體的表達差異；
[0058]比較本發明中藥組和非中藥組中IL1 a，ILf3表達差異，并比較分析IL1 a，IL0 激活的NFKB信息傳導通路在應用本發明中藥組和非中藥組的激活程度；
[0059]實驗結果如圖1所示，對比經典方案，微刺激方案不需要GnRHa降調，對卵巢深度抑制得到了緩解，相應促性腺素(Gn)應用劑量明顯減少；在微刺激促排卵中Gn的總應用劑量為經典方案的1/5以下，因此，顯著降低卵巢過度刺激和術后出血的風險，增加治療過程中和取卵手術后的身體舒適度；微刺激發生重度0HSS的發生率顯著低于經典方案(0.05% vs 5%);微刺激促排卵方案避免了使用昂貴的GnRHa藥物降調，且Gn用藥時間短并劑量小，因此大幅度降低了治療費用，同時微刺激方案減少了就診次數，縮短了微刺激IVF治療周期，因此減輕了患者的經濟負擔和身心困擾，證明微刺激IVF治療劇透有效、安全、經濟的優勢；
[0060]基于現有技術中的微刺激治療中，通常需采用枸櫞酸氯米芬(CC)抑制LH峰、抑制早發排卵等。但由于CC的抗雌激素作用，大部分病人的子宮內膜生長受到抑制和子宮內膜微環境不良，因此往往不能夠在取卵當月做新鮮胚胎移植，大部分病人需要做冷凍胚胎移植，因此，冷凍胚胎移植增加了治療環節，也在一定程度上增加了治療費用，尤其是胚胎冷凍的安全性尚無明確科學答案，存在未可知的隱患；本申請采用改善子宮內膜容受性的中藥復方制劑用于微刺激IVF治療中能改善子宮內膜容受性，使新鮮胚胎移植成為可能，為中藥協同微刺激方案治療新鮮胚胎移植提供了契機。
【主權項】
1.一種改善子宮內膜容受性的中藥復方制劑，其特征在于，由下述原料藥的提取物制 成:熟地黃炒白芍制首烏女貞子山茱萸麥冬巴戟天黨參香附菟絲子。2.按權利要求1所述的改善子宮內膜容受性的中藥復方制劑，其特征在于，所述的 每付中藥中的原料藥的重量配比為:熟地黃l〇_12g炒白芍10_12g制首烏10-12g女貞 子9-12g山茱萸5-6g 6g麥冬l〇-12g巴戟天8-10g黨參l〇-13g香附8-10g英絲子10-12g〇3.按權利要求1所述的改善子宮內膜容受性的中藥復方制劑，其特征在于，所述的每 付中藥中的原料藥的重量配比為:熟地黃12g炒白芍12g制首烏12g女貞子9g山茱萸6g麥冬12g巴戟天9g黨參12g香附9g英絲子12g。4.權利要求1或2或3的改善子宮內膜容受性的中藥復方制劑的制備方法，其特征在 于，按每付中藥中的原料重量配比，取原料藥:熟地黃白芍首烏女貞子山茱萸麥冬巴戟 天當生香附菟絲子進行提取獲得提取物，分別將各原料藥的提取物制成顆粒；將每味中 草藥制成〇.1_至3mm直徑顆粒飲片，干燥，包裝成直接配伍煎煮使用的重量分別為lg、2g、 3g、4g、6g、9g、10g、12g、30g的小包裝；抽取樣本，通過顯微鑒定或/和薄層層析方法制得顯 微鑒定圖或/和薄層圖譜，進行精確劑量，保證產品質量。5.權利要求1或2或3的改善子宮內膜容受性的中藥復方制劑在用于制備治療不孕癥 的藥物制劑中的用途。6.按權利要求5的用途，其特征在于，所述的中藥復方制劑改善子宮內膜容受性，增加 新鮮胚胎移植幾率，提高新鮮胚胎移植成功率。7.按權利要求5的用途，其特征在于，所述的中藥復方制劑用于制備提高妊娠率和活 產率的藥物制劑。
【文檔編號】A61P15/00GK105983052SQ201510096165
【公開日】2016年10月5日
【申請日】2015年3月3日
【發明人】童國慶, 戴德英
【申請人】上海中醫藥大學附屬曙光醫院