一種七葉皂苷的新用圖
【專利摘要】本發明提供了一種七葉皂苷及其衍生物在制備治療中耳炎方面的新用途，更具體地說是治療化膿性中耳炎、分泌性中耳炎、航空性中耳炎的醫藥用途。
【專利說明】
一種七葉皂苷的新用途
技術領域
[0001] 本發明涉及醫藥領域，具體涉及七葉皂苷及其衍生物在制備治療中耳或內耳炎癥 性疾病中的用途。
【背景技術】
[0002] 中耳炎是耳鼻喉科常見疾病，為累及中耳（包括咽鼓管、鼓室、鼓竇及乳突氣 房）全部或部分結構的炎性病變，一般臨床常見分泌性中耳炎及化膿性中耳炎兩大類。 近年研究發現，細菌感染、咽鼓管機械性阻塞及功能障礙、免疫反應等均與中耳炎發生相 關【楊琳，趙守琴.分泌性中耳炎發病機制的研究進展.聽力學及言語疾病雜志.2014; 22(3) :328-331】。另外，氣壓驟變【刀麗梅.航空性中耳炎的現代研究進展.工企醫 刊.2014 ;27(1) :605-607】和顱腦放療【張明潔，劉業海，李慧，等.鼻咽癌放療后并發分泌 性中耳炎的臨床分析[J].中華耳科學雜志，2013,11 (2) :256-258.】亦可誘發中耳炎，航空 性中耳炎在飛行人員耳鼻咽喉住院病癥譜和停飛病癥譜中均排在第1位。化膿性中耳炎主 要為肺炎球菌、流感嗜血桿菌、溶血性鏈球菌、葡萄球菌、變形桿菌等感覺中耳粘膜的化膿 性炎癥，常繼發于上呼吸道感染。通常情況下，針對急性化膿性中耳炎患者，應盡早使用足 量抗生素或其他抗菌藥物控制感染，但治療效果并不理想，大量患者轉為慢性化膿性中耳 炎。分泌性中耳炎是，是一種中耳非化膿性病變，臨床表現為因中耳積液導致聽力下降、耳 悶脹感、上呼吸道感染等癥狀。各類中耳炎均可影響中耳結構功能，致聽力障礙，乃至鼓室 硬化、鼓膜穿孔、聽骨壞死等病變，嚴重影響患者生活質量。對于患有該疾病的兒童，極易造 成聽力損失、語言功能障礙等。
[0003] 近年研究表明，急性化膿性中耳炎和急性分泌性中耳炎都與細菌感染有關，常出 現于兒童，早期都有耳痛、聽力下降、鼓膜急性充血表現，臨床難以區分；有學者認為，各型 中耳炎其實是同一個炎癥反應過程在修復、轉歸不同階段的表現形式，各型中耳炎可并存， 因此，較多的文獻和近年的分類將急性化膿性中耳炎和急性分泌性中耳炎統稱為急性中耳 炎（acute otitis media，Α0Μ)。其中最困擾臨床的是復發性AOM和頑固性Α0Μ。復發性 AOM是指在6個月內發作3次以上或12個月內發作4次以上，頑固性AOM是指在抗生素治 療期間仍然持續有中耳感染癥狀或抗生素治療結束后1個月內仍然反復發作的AOM【楊名 保，武勇進，鄭加創，等.復發性中耳炎中耳滲液細菌生物膜的觀察及方法學研究[J].中 華臨床醫師雜志（電子版），2012,18:078.】。然而，其確切發病機制、抗生素耐藥機制以 及反復發作的原因等至今尚未完全明確。2001年Post首次提出感染細菌形成細菌生物 膜（baccterial biofilms，BBF)與感染菌抗生素耐受和分泌性中耳炎發病相關【Post J C. Candidate's Thesis:direct evidence of bacterial biofilms in otitis media[J]. The Laryngoscope，2001，111(12):2083-2094.】〇
[0004] 七葉皂苷又稱七葉皂苷酸，為從七葉樹科七葉樹屬植物種子提取得到的總皂苷、 β -七葉皂苷或異七葉皂苷等的總稱。目前多以總七葉皂苷鈉應用于臨床，主要含有4種 成分。其中七葉皂苷A和B是β-型七葉皂苷，其結構基本相同，因而七葉皂苷A和B可合 并用結構式（1)表示；而七葉皂苷C和D也互為異構體，屬于異性七葉皂苷，又稱異七葉皂 苷，可合并結構式（2)來表示。
[0006] 七葉皂苷及其鹽在臨床上常用于治療各種原因引起的腦水腫及伴發的腦功能失 調、各種原因（如創傷、燒傷、手術）引起的炎癥與腫脹、靜脈回流障礙性疾病等，具有很強 的抗炎、抗滲出作用，能明顯降低急性炎癥的滲出。專利CN103948614A公開了七葉皂苷及 其鹽用于在制備α-受體阻滯劑藥物和治療慢性非細菌性前列腺炎藥物中的新用途，專 利CN1575797公開了七葉皂苷有其鹽在制備治療手術后腸功能恢復藥物中的用途，專利 CN1896092A公開了七葉皂苷賴氨酸鹽的制備方法和用途，專利CN1376675A公開了七葉皂 苷精氨酸鹽的制備方法及其用途。無論七葉皂苷的堿金屬鹽還是有機堿鹽，其藥理活性均 僅與七葉皂苷相關，而與其成鹽堿基無關。但七葉皂苷及其鹽對中耳炎的治療作用，未見公 開報道及臨床應用。
【發明內容】
[0007] 本發明提供了七葉皂苷及其衍生物在治療中耳炎中的應用。
[0008] 本發明所述的七葉皂苷衍生物可以是七葉皂苷與有機堿或無機堿金屬所成的鹽， 其中有機堿優選堿性氨基酸，如精氨酸七葉皂苷；無機堿金屬優選七葉皂苷鈉。
[0009] 本發明所述的中耳炎為化膿性中耳炎、分泌性中耳炎、航空性中耳炎。
[0010] 本發明所述的七葉皂苷及其衍生物的使用劑量為I-IOOmg(以七葉皂苷鈉計）/ 天，優選地5_20mg(以七葉皂苷鈉計）/天。
[0011] 本發明所述的七葉皂苷可從天師栗、七葉樹果實等植物中提取，也可通過化學方 法制備而成。
[0012] 本發明所述的七葉皂苷及共衍生物在用于治療中耳炎時，可通過靜脈或口服途徑 全身給藥，亦可采用凝膠劑、滴劑等局部給藥。
【具體實施方式】
[0013] 本發明以七葉皂苷鈉、精氨酸七葉皂苷為例進行進一步的描述，通過下列試驗來 證明七葉皂苷及其衍生物在制備治療中耳炎中的應用，然而，本發明的范圍并不限于下述 實例。本領域的專業人員能夠理解，在不背離本發明的精神和范圍的前提下，可以對本發明 進行各種變化和修飾。
[0014] 實施例1 :七葉皂苷鈉對肺炎鏈球菌致大鼠急性化膿性中耳炎的治療作用
[0015] 采用經聽泡穿刺注入肺炎鏈球菌到大鼠中耳腔，復制大鼠化膿性中耳炎，考查七 葉皂苷單用及與抗生素合用對急性化膿性中耳炎的治療作用。所采用肺炎鏈球菌系分離培 養自一例急性化膿性中耳炎患者的中耳膿性分泌物。大鼠造模后24小時，采用靜脈注射或 滴耳給予七葉皂苷鈉，連續給藥7天。末次給藥后24小時，采用鼓室聲導抗測試記錄鼓室 導抗圖及峰壓值，隨后無菌操作下用棉簽拭取實驗耳內積液作細菌培養鑒定。
[0016] 實驗期間，所有大鼠行為、飲食、活動均正常，無意外死亡，實驗結果表明（見表 1)。靜脈注射或外耳內滴入七葉皂苷鈉或靜脈注射精氨酸七葉皂苷均可明顯改善化膿性 中耳炎大鼠鼓室壓圖異常及鼓室峰壓值改變，給藥組中耳滲出液細菌培養陽性率亦明顯降 低。表明七葉皂苷鈉和精氨酸七葉皂苷均對化膿性中耳炎有一定治療作用。
[0017] 表1.七葉皂苷鈉對急性化膿性中耳炎鼓室聲導抗測試結果及中耳積液細菌培養 結果的影響（^ ±5)
[0018]
[0019] 與正常組比較：aP〈0. 01 ;與模型組比較：bP〈0. 01。
[0020] 實施例2 :七葉皂苷鈉對金黃色葡萄球菌致豚鼠急性化膿性中耳炎的治療作用
[0021] 金黃色葡萄球菌是中耳炎主要致病菌之一，采用聽泡內反復注射金黃色葡萄球菌 復制豚鼠化膿性中耳炎模型，考察了七葉皂苷鈉對慢性化膿性中耳炎所致豚鼠聽力障礙的 治療作用。
[0022] 實驗選用聽性腦干反射正常健康雄性豚鼠，水合氯醛麻醉后，在顯微鏡下右側鼓 膜前下方穿刺，向鼓室內注射制備金黃色葡萄球菌懸液〇. 2ml。正常對照組耳內注入0. 2ml 無菌生理鹽水。2天后，同樣方法沿前次注射針孔再次向鼓室內注射制備的濃度金黃色葡萄 球菌懸液。再隔2天重復一次，共注射3次。最后1次注射完成24h后，顯微鏡下觀察：豚 鼠右耳鼓室內有膿液，鼓膜顯著充血、紅腫，細菌培養為接種的金黃色葡萄球菌者作為化膿 性中耳炎模型。隨后按表2所示分組給藥，連續用藥10天后，行聽性腦干反應（ABR)測定， ABR的閾值按豚鼠的III波作為標準。結果見表2。實驗耳注射金黃色葡萄球菌，復制化膿 性中耳炎后，ABR閾值明顯升高，表明實驗耳聽力異常，靜脈注射或滴耳給予七葉皂苷鈉或 靜脈注射給予精氨酸七葉皂苷后，ABR閾值較模型組明顯降低，表明七葉皂苷鈉和精氨酸七 葉皂苷均可改善化膿性中耳炎聽力障礙。
[0023] 表2.七葉皂苷鈉對豚鼠急性化膿性中耳炎ABR閾值的改善作用（
[0026] 與正常組比較：aP〈0. 01 ;與模型組比較：bP〈0. 01。
[0027] 實施例3 :七葉皂苷鈉對豚鼠航空性中耳炎的治療作用
[0028] 于豚鼠左鼻腔放置聚氯乙烯（PVC)管直至鼻咽部，造成同側鼻腔、鼻竇和鼻咽部 炎癥，并通過低壓艙模擬航空過程氣壓改變，建立航空性中耳炎動物模型，考查七葉皂苷鈉 對航空性中耳炎的治療作用。
[0029] 實驗選用耳廓反射靈敏，鼓膜完整，結構標志清楚，聽性腦干反射正常的健康雄性 豚鼠，水合氯醛麻醉后，用直徑2_，長度20_的PVC管自豚鼠左鼻腔插入直至鼻咽部后留 置，正常組行插管后隨即移除PVC管。于插管后第二天按表3所示將模型動物分組給藥，連 續給藥10天，末次給藥后24小時，將動物置低壓艙，以15m/s的速度上升至5000m高度，停 留5min后以70m/s的速度下降至地面，重復上升、下降3次。24h后，行電耳鏡檢查鼓動膜 充血情況。參考實施例2方法行聽性腦干反應（ABR)測試，結果見表3。
[0030] 表3.七葉皂苷鈉對低壓艙試驗致航空性中耳炎豚鼠鼓膜充血和ABR閾值升高的 影響（)
[0032] 與正常組比較：aP〈0. 01 ;與模型組比較：bP〈0. 01。
[0033] 左側鼻腔插管后低壓艙試驗致豚鼠左耳鼓膜嚴重充血，模型組評分結果明顯高于 正常對照組，靜脈注射或滴耳給予七葉皂苷鈉后，患側耳鼓膜充血評分明顯降低。ABR閾值 測定結果表明模型組ABR閾值明顯高于正常組，表明航空性中耳炎可致聽力障礙，給予七 葉皂苷鈉后，ABR閾值明顯降低。本實施例結果證明七葉皂苷鈉和精氨酸七葉皂苷均對航 空性中耳炎所致中耳病理性損傷和聽力障礙均有明確的改善作用。
[0034] 實施例4 :七葉皂苷鈉對分泌性中耳炎的治療作用
[0035] 分泌性中耳炎是一種常見耳部疾病，以耳脹悶感、耳痛、傳導性耳聾、耳鳴為主要 臨床表現，又名非化膿性中耳炎、卡他性中耳炎、滲出性中耳炎、漿液性中耳炎、粘液性中耳 炎、膠耳等。本病發病率有增高趨勢，國外健康普查報道發病率均在10%以上，成人及兒童 均可發病，但以兒童多見，是兒童最常見致聾原因。其確切發病機制不詳，但感染和局部變 態反應等可能參與了本病發生過程。
[0036] 采用中耳內接種滅活肺炎鏈球菌復制分泌性中耳炎模型，考察七葉皂苷鈉對分泌 性中耳炎的治療作用。
[0037] 本實驗選用肺炎鏈球菌系分離培養自一例急性化膿性中耳炎患者的中耳膿性分 泌物。實驗前取出該菌株于血瓊脂斜面上37°C培養24h，用無菌生理鹽水洗下肺炎鏈球菌 制成細菌懸液，并用721型分光光度計調整細菌密度為IX IO8CFUAiI。接種前水浴65°C 30 分鐘滅活細菌，并做細菌培養確保無細菌生長后備用。
[0038] 實驗選用耳廓反射靈敏，鼓膜完整，結構標志清楚，聽性腦干反射正常健康雄性豚 鼠，水合氯醛麻醉后，在顯微鏡下右側鼓膜前下方穿刺，向鼓室內注射滅活肺炎鏈球菌懸液 0. 2ml，左耳作為對照耳，注入0. 2ml無菌生理鹽水。5天后行耳內窺鏡檢查，鼓室有積液為 造模成功。取造模成功者，按下表4所示分組給藥。末次給藥后24h，各組動物行聽性腦 干反應（ABR)測定。結果見表4,模型組ABR閾值較正常對照組明顯升高，差異有統計學 意義（P〈0. 01)，表明鼓室注射滅活肺炎鏈球菌所致分泌性中耳炎可致聽力障礙。靜脈注 射給藥或滴耳給予七葉皂苷鈉，或靜脈注射精氨酸七葉皂苷各組ABR閾值明顯低于模型組 (P〈0. 01)，表明七聽皂苷鈉或精氨酸七葉皂苷對分泌性中耳炎具有治療作用。
[0039] 表4.七葉皂苷對滅活肺炎鏈球菌致豚鼠分泌性中耳炎ABR閾值的改善作用 (A· ± S )
[0041] 與正常組比較：aP〈0. 01 ;與模型組比較：bP〈0. 01。
【主權項】
1. 七葉皂苷及其衍生物在制備治療中耳炎方面的用途。2. 根據權利要求1所述的用途，其特征在于：所述的中耳炎為化膿性中耳炎、分泌性中 耳炎、航空性中耳炎中的任意一種。3. 根據權利要求1所述的用途，其特征在于：所述的七葉皂苷衍生物為七葉皂苷與有 機堿或無機堿形成的鹽。4. 根據權利要求3所述的用途，其特征在于：所述七葉皂苷與無機堿形成的鹽優選七 葉皂苷鈉。5. 根據權利要求3所述的用途，其特征在于：所述的七葉皂苷與有機堿形成的鹽優選 精氨酸七葉皂苷。6. 根據權利要求1-5任一項所述的用途，其特征在于：七葉皂苷及其衍生物的使用劑 量為l-100mg(以七葉皂苷鈉計）/天，優選地5-20mg(以七葉皂苷鈉計）/天。
【文檔編號】A61K31/704GK105982907SQ201510076067
【公開日】2016年10月5日
【申請日】2015年2月12日
【發明人】王振華, 鄭慶印, 傅風華, 楊小平, 宋艷芹, 崔香
【申請人】山東國際生物科技園發展有限公司