水基辣椒素制劑及制備方法和應用

水基辣椒素制劑及制備方法和應用
【專利摘要】本發明公開了辣椒素制劑和治療方法，其可被用來治療/減輕哺乳動物中的疼痛。通常，通過在離散部位注射給藥來提供更長時間的緩解疼痛。制劑以藥學上可接受的載體給藥。制劑包括足夠減輕辣椒素給藥的灼熱和痛覺過敏效果的量的鎮痛劑。本發明還包括通過施用皮質類固醇然后施用辣椒素來治療疼痛的方法。
【專利說明】
水基辣椒素制劑及制備方法和應用
[0001] 相關申請的交叉引用
[0002] 本申請要求2013年11月12日提交的美國申請號14/078,253的優先權的權益，其全 部內容通過引用被明確地納入到本申請中。
技術領域
[0003] 本發明涉及將辣椒素施用到局部的組合物。該組合物對治療多種涉及病痛（急性 和慢性的，溫和到嚴重的）的失調有用，并且它們提供了延長的疼痛緩解。本發明還涉及包 括預處理的方法，所述預處理限制與辣椒素注射有關的灼痛和刺痛。
【背景技術】
[0004] 辣椒堿，一種辣椒屬植物果實的辛辣物質，對由C神經末梢的局部退化引起的疼痛 有緩解作用；辣椒素是已知的唯一通過這種機制緩解疼痛的鎮痛劑。辣椒堿的活性源自其 結合并激活稱為香草酸受體I (VR1)的離子通道。在正常的情況下，當VRl離子被激活時，其 打開很短的時間，引起C神經向大腦傳遞疼痛信號。當辣椒堿結合并激活VRl時，其在使C神 經末端(或末端的C神經)退化的細胞中引起一系列的事件，從而阻止神經傳遞疼痛信號。
[0005] 雖然辣椒堿的止痛效果被認為是由于P物質的損耗，但最近的證據表明傷害感受 纖維"機能喪失"的過程是形成辣椒堿止痛效果的原因 。（Anand P ,Bley K. Topical capsaicin for pain management: therapeutic potential and mechanisms of action of the new high-concentration capsaicin 8%patch.Br J Anaesth.2011；107(4): 490-502.)
[0006] 辣椒堿局部軟膏和藥膏釋放能夠緩解輕微的疼痛以及肌肉和關節的疼痛。目前辣 椒堿作為含有低劑量辣椒堿的非處方局部使用、非滅菌藥膏和藥貼在市場上出售。辣椒堿 的濃度一般在0.025重量％至0.075重量％之間。消費者通常使用這些非處方局部用制劑來 緩解疼痛，當用來治療如骨關節炎、帶狀皰行疹(帶狀皰疹）、銀肩病和糖尿病神經炎的失調 時，同時伴隨著產生可變并且往往不足的結果。辣椒堿也可在可施用于背部的大型膠布繃 帶中利用。
[0007] 辣椒堿的局部用制劑在引起疼痛和瘙癢的各種皮膚失調中都有使用，例如帶狀皰 疹后神經痛、糖尿病神經炎、前列腺炎、銀肩病、叢集性頭痛、術后疼痛綜合征、鼻病、口腔黏 膜炎、皮膚過敏性反應、逼尿肌反射亢進、腰痛/血尿綜合征、頸痛、截肢殘端痛、反射性交感 神經萎縮癥、皮膚瘤、包括類風濕關節炎和的骨關節炎關節炎、術后疼痛、口腔痛和因受傷 而引起的疼痛以及其他失調。（Martin Hautkappe et al. ,Review of the Effectiveness of Capsaicin for Painful Cutaneous Disorders and Neural Dysfunction, Clin.J.Pain,14:97-106,1998)〇
[0008] 透明質酸(HA)或玻尿酸是滑膜液中的糖胺聚糖成分。HA影響著作為潤滑劑和減震 器的滑膜液的粘彈性的質量。將HA制劑注射到膝蓋和臀部通常用于治療骨關節炎，但是對 治療效果和效益風險比有爭議。當進行結果匯總時，采用5種不同的透明質酸產品的40個安 慰劑對照試驗的科克倫評論(Cochrane review)發現對負重疼痛在統計學上有顯著的改 善，但改善差別很大。
[0009] 將透明質酸（例如透明質酸鈉注射劑、海爾根（Hyalgan)、欣維可（Synvisc)、 Artzal和Nuflexxa)注射到關節--一種稱作粘彈性物補充療法的程序--可為膝蓋骨關 節炎提供疼痛緩解。雖然沒有進行重大安全問題的檢測，但是在安慰劑對照試驗中，在注射 部位會輕微發生輕度不良事件(例如短時疼痛），在用關節腔內透明質酸治療的患者中比在 用皮質類固醇治療的患者中頻率更高。（Zhang et al，.OARSI recommendations for the management of hip and knee osteoarthritis,part II:OARSI evidence-based,expert consensus guidelines.Osteoarthritis Cartilage 2008；16:137-162.)
[0010] 而且，已經顯示在小鼠的緩激肽誘導的關節痛模型中，HA能夠誘導痛覺缺失。該鎮 痛作用也具有分子量(麗)依賴性，因為在較低濃度下，較高麗制劑比較低麗的HA更能夠觀 察到顯著的效果。
[0011] (Gotoh Set al:Effects of the molecular weight of hyaluronic acid and its action mechanisms on experimental joint pain in rats.Ann Rheum Dis 1993, 52:817-822)。
[0012] HA可對P物質有直接或間接的影響，所述P物質可引起疼痛。由于P物質與興奮性氨 基酸、前列腺素和NO相互作用，所以HA對這些因素的影響可間接地影響P物質的藥理學作 用。此外，已顯示出HA能夠抑制P物質誘導的血管通透性的增加。
[0013] (Moore et al:Hyaluronan as a drug delivery system for diclofenac :a hypothesis for mode of action.Int J Tissue React 1995,17:153-156.)
[0014] 抗炎藥減輕了組織部位的炎癥和腫脹。它們通過阻斷某些生理活性物質來做到這 一點。例如，這些物質，前列腺素、P物質和組織胺，能引起小動脈擴張，隨后形成水腫或液 體。軟組織、肌肉和神經細胞變得容易發炎以及過度興奮。消炎藥可抑制這種炎癥過程。然 而，用抗炎藥來治療慢性疼痛受到了限制。
[0015] 在髖關節置換術和全膝關節置換術之后緩解疼痛的主要是阿片類藥物。雖然這些 藥物都是優秀的鎮痛藥，但是阿片類藥物也有限制其有效性的很多問題。其他鎮痛劑被認 為對這些手術引起的疼痛太溫和。
[0016] 美國專利5962532公開了用有效濃度的辣椒堿或其類似物在特定部位治療疼痛的 方法和組合物。所述方法涉及向施用辣椒堿或其類似物的部位提供麻醉，然后向關節施用 有效濃度的辣椒堿。
[0017] 美國專利8158682涉及治療或減輕患者疼痛的方法。具體地，該發明提供了減輕裸 露傷口或手術切口的鄰近部位疼痛的方法，包括向傷口或切口逐步施用包括辣椒堿的藥物 組合物，讓藥物組合物存在預定的時間段，然后清理傷口或切口以除去藥物組合物。該發明 還提供了用于減輕關節附近疼痛的方法，包括向關節進行關節腔內注射包含辣椒素的藥物 組合物，讓藥物組合物存在預定的時間段，然后清理關節以除去藥物組合物。在本發明某些 實施例中，辣椒素為辣椒堿。
[0018] 美國專利8420600公開了通過向人或動物的離散部位施用有效量的辣椒堿劑量以 去除離散部位的神經而不會誘發對離散位置之外的影響來緩解人或動物部位的疼痛的組 合物和方法。
[0019] US2004/0161481公開了用于緩解有此需要的人或動物部位疼痛的方法，包括通過 注射或滲透施用一劑辣椒素，以及聯合施用有效量的NSAID(非類固醇抗炎藥)來降低辣椒 素的不良效果。
[0020] US2004/0156931公開了用于緩解有此需要的人或動物部位疼痛的方法，包括通過 注射或滲透施用一劑辣椒素，以及聯合施用血管擴張劑。
[0021] US2004/0186182公開了用于緩解有此需要的人或動物部位疼痛的方法，包括通過 注射或滲透施用一劑辣椒素，以及聯合施用非麻醉鈉通道阻滯劑。
[0022] US2005/0019436公開了用于通過在有此需要的人或動物的離散部位施用一劑有 效量的辣椒堿以去除離散部位的神經而不會誘發對離散位置之外的影響來緩解人或動物 部位疼痛的組合物和方法，辣椒堿的劑量范圍為Iyg至3000yg。
[0023] US2005/0020690公開了用于減弱或緩解有此需要的人或動物部位疼痛的組合物 和方法，通過在有此需要的人或動物的手術部位或裸露的傷口處浸潤一劑有效量的辣椒素 來去除手術部位或裸露傷口的神經，而不會誘發對手術部位或裸露傷口之外的影響。
[0024] US2005/0058734公開了用于緩解有此需要的人或動物部位疼痛的方法，包括通過 注射或滲透施用一劑辣椒素以及聯合施用血管收縮劑。
[0025] US2006/0269628公開了用于減弱或緩解有此需要的人或動物部位疼痛的方法，通 過在有此需要的人或動物的手術部位或裸露傷口處浸潤一劑有效量的辣椒素來去除手術 部位或裸露傷口處的神經，但接下來不會誘發對手術部位或裸露傷口之外的影響。
[0026]美國專利申請2006/0100272公開了用于治療疼痛、特別是神經性疼痛的方法。 [0027] US2006/0148903提供了用于緩解人或動物部位的術前和術后疼痛的辣椒素凝膠 劑和方法，通過在需要其的人或動物的手術部位施用一劑有效量的辣椒素來減輕手術部位 的術后疼痛，一劑辣椒堿的范圍為I OOyg至1 〇，OOOyg。
[0028] US2007/0293703提供了合成辣椒堿和/或辣椒堿類似化合物的反式異構體的方 法，其中反式構型從合成反應開始設置，并展開于整個合成過程。
[0029] US2008/0153780涉及用于生產治療疼痛藥劑的香草酸激動劑與糖胺聚糖或蛋白 聚糖的用途。
[0030] US2007/0036876提供了緩解人或動物部位疼痛所需的組合物和方法，通過在需要 其的人或動物離散部位施用一劑有效量的辣椒堿來去除離散部位的神經而不會誘發對離 散部位之外的影響，辣椒堿的劑量范圍為Iyg至3000yg。
[0031] US2008/0260791提供了緩解有此需要的人或動物離散部位疼痛的組合物和方法， 通過在有此需要的人或動物的離散部位使用以及有效量的辣椒堿來去除離散部位的神經 而不會誘發對離散部位之外的影響，辣椒堿的劑量范圍為Iyg至5000yg。
[0032] US2008/0262091A1提供了減弱或緩解有此需要的人或動物部位疼痛的組合物和 方法，通過在人或動物的手術部位或裸露傷口浸潤一劑有效量的辣椒素來去除手術部位或 裸露的傷口的神經，而接下來不會誘發對手術部位或裸露的傷口之前的影響。
[0033] US2009/0062359涉及緩解有此需要的人或動物部位疼痛的方法，包括通過注射或 滲透施用一劑辣椒素以及聯合施用非麻醉鈉通道阻滯劑。
[0034] US2009/0054527公開了緩解有此需要的人或動物部位疼痛的方法，包括通過注射 或滲透施用一劑辣椒素以及聯合施用血管擴張劑。
[0035] US2009/0111792公開了緩解有此需要的人或動物部位疼痛的方法，包括通過注射 或滲透施用一劑辣椒素以及聯合施用三環類抗抑郁劑。
[0036] US2009/0117167A1公開了緩解有此需要的人或動物部位疼痛的方法，包括通過注 射或滲透施用一劑辣椒素以及聯合施用血管收縮劑。
[0037] US2009/0118242公開了緩解有此需要的人或動物部位疼痛的方法，包括通過注射 或滲透施用一劑辣椒素以及聯合施用有效量的NSAID來降低辣椒素的不良效果。
[0038] US2011/0311592教導了提高溶解性差的化合物的溶解度的方法，以及制備和使用 這種化合物制劑的方法。
[0039] ALGRX-4975在臨床上被開發以治療與骨關節炎、肌腱炎與術后狀況相關的疼痛以 及發生繼發性神經損傷的神經性疼痛和其他慢性疼痛狀況。通過僅靶向C神經疼痛纖維， ALGRX-4975能產生顯著地長期痛覺缺失。在臨床研究中，ALGRX-4975已提供了來自單一治 療的長期疼痛的緩解，總結于表1中。
[0040] 表1 - ALGRX-497 5的臨床試驗總結
[0042] ⑴Cantilon，M.et al,Preliminary safety,tolerability and efficacy of ALGRX 4975in Osteoarthritis(OA)of the knee,The Journal of Pain1Vol.6,March, 2005.
[0043] (2)Diamond,E.et al,ALGRX 4975reduces pain of intermetatarsal neuroma: preliminary results from a randomized,double-blind,placebo-controlled,phase II multicenter clinical trial,The Journal of Pain,Vol.7,April,2006.
[0044] ⑶Aasvang，E·et al , The effect of wound instillation of a novel purified capsaicin formulation on postherniotomy pain: a double-blind， randomized,placebo-controlled study,Anesthesia and Analgesia，2008,107(1)， p.282-291.
[0045] 為了進行幾項臨床試驗，供應了瓶裝的高純度的反式辣椒堿，瓶中含有5mL的以 0.5mg/ml的濃度溶解在roG-300中的純的辣椒堿。將辣椒堿/PEG-300溶液儲存在15°C至25 °C的溫度下。在注射前的4小時內，將辣椒堿濃縮物的濃度進行稀釋以制備含有約20 % PEG-30 ， 約1. 5mg/ml 組氨酸和約 5 % 蔗糖 的制劑 。如表1I 中所示 ，在美國專利8420600中 所列的 3 個實施例的辣椒堿濃度為〇. 〇〇2mg/ml、0.02mg/ml和0.06mg/ml。
[0046]表1I-可注射的辣椒堿劑量水平
[0049] 在臨床試驗中注射辣椒堿時，立刻經歷了自發性灼痛和痛覺過敏，并且持續了 60 分鐘。這些不良的副作用歸因于在辣椒堿施用部位的外周傷害感受器的強烈活動和暫時性 的致敏。該活動和致敏在脫敏階段之前發生。在嘗試控制辣椒堿注射引起的灼熱和刺痛時， 在注射辣椒堿之前注射局部麻醉劑，然后退出。
[0050] 可注射的辣椒堿制劑應用的目前的限制為強烈的灼痛和刺痛(B&S)的可能性達1 小時，然后溫和的疼痛再持續1-2小時。，辣椒堿劑預期發生B&S被認為來自在傷害感受器脫 敏之前在興奮期期間發生的強烈的傷害感受器放電。
[0051] 在多種模型中的工作已經顯示出辣椒堿能激活感覺神經來誘導神經肽特別是降 鈣素基因相關肽（CGRP)以及炎性P物質（SP)的釋放Lundberg et al, Co-existence of substance P and calcitonin gene-related peptide-like immunoreactivities in sensory nerves in relation to cardiovascular and bronchoconstrietor effects of capsaicin.Eur.J.Pharmacol.,108,315-319,(1985).Martling et al,Calcitonin gene-related peptide and the lung:neuronal coexistence with substance P, release by capsaicin and vasodilatory effect.Regul.Pept.,20,125-139,（1988)〇
[0052] 已經證實辣椒堿誘導的水腫對抗炎類固醇和地塞米松的治療敏感，這與形成其他 形式的炎癥水腫形成對比。Newbold et al,An Investigation into the mechanism of capsaicin-induced edema in rabbit skin，Brit.J.of Pharma.，114,570-577,（1995)〇
[0053] Ferrell等人（Neuroscience Letters 141:259-261,1992)證實將辣椒喊關節腔 內注射到大鼠的膝關節中導致無髓鞘纖維的數量顯著地減少，并且這種減少是可逆的。
[0054] 對可注射的辣椒堿制劑和疼痛的治療程序有一個未滿足的要求，這就是將辣椒堿 注射后產生的急性燒灼減小到最小程度。用辣椒素注射進行的臨床研究已經顯示了辣椒堿 減輕術前和術后疼痛、由關節炎、肌腱炎和其他外科手術引起的疼痛的能力。疼痛疾病最常 用阿片類藥物和NSAID來治療，慢性用途常常由于副作用受到限制。在安全有效的治療慢性 疼痛的療法方面還有未滿足的需求。
[0055] 發明目的
[0056] 本發明的目的是設計用于提供通過可注射的辣椒素來緩解哺乳動物中的疼痛的 制劑和方法，其克服了施用辣椒素經歷的強烈的灼痛。
[0057] 本發明的進一步的目的是提供用于減輕或阻止與辣椒素注射給藥相關的灼痛或 刺痛的制劑和方法。
[0058] 本發明的另一個目的是提供含有完全混溶的水性和親脂性組分的光學透明的溶 液。
[0059] 本發明的另一個目的是提供用于在沒有鎮靜或麻醉(例如神經、脊髓或硬膜外阻 滯)的情況下延長疼痛緩解的制劑和方法，用于一系列的治療應用。
[0060] 其他目的和益處從下面的說明書來看是顯而易見的。

【發明內容】

[0061] 本發明涉及用于在哺乳動物中注射的水性組合物，包括：
[0062] i)0.0002%_0.1% 重量的辣椒素，
[0063] i i )99.9 %-99.9998 %重量的水性載體，所述水性載體包括溶解所述辣椒素的增 溶劑以及在哺乳動物中注射所述組合物時使所述辣椒素從所述水性組合物中的釋放減慢 的延長釋放劑，
[0064] 其中所述水性載體減少或消除了在注射時所述辣椒素產生的灼熱和刺痛。辣椒素 通常為反式辣椒堿。增溶劑可以為聚乙二醇，延長釋放劑通常為具有平均分子量約1000千 道爾頓的透明質酸。延長釋放劑也可為膠原蛋白、彈性蛋白和可生物降解的聚合物基體。
[0065] 在一個有利的實施例中，所述水性組合物包括：
[0066] 0.005-0.05 %重量的辣椒堿，
[0067] 5-25%重量的聚乙二醇，以及
[0068] 0.2-1 %重量的透明質酸。
[0069] 在其他實施例中，所述水性組合物可包括抗炎性劑、鎮痛劑和/或表面活性劑 (.002-2%重量），例如非離子表面活性劑聚氧乙烯40氫化蓖麻油或PS 80。辣椒素與多山梨 醇酯80的重量比可以為1至5。
[0070] 在一個有利的實施例中，所述水性組合物包括：
[0071] 0.005-0.05 %重量的辣椒堿，
[0072] 0.025-0.15%重量的多山梨醇酯80或聚氧乙烯40氫化蓖麻油，
[0073] 0-25%重量的聚乙二醇300或400,以及
[0074] 0.2-1 %重量的透明質酸。
[0075] 本發明還涉及一種用于治療哺乳動物(例如人)的部位疼痛的方法，包括向所述哺 乳動物施用治療上有效量的本發明的水性組合物。通常在施用所述組合物之前施用麻醉 劑。在一個實施例中，在施用所述辣椒素組合物后的第一分鐘期間，要反復彎曲和伸展該關 節。而且，在施用所述辣椒素組合物之前、期間和/或之后，可向所述部位使用冷卻手段。以 約0.1ml至25ml體積的藥學上可接受的載體施用辣椒素組合物。
[0076] 本發明還涉及通過關節腔內注射施用辣椒素的試劑盒，包括:a)至少一個單位劑 量的麻醉劑，以及b)至少一個單位劑量的含有辣椒素和透明質酸的辣椒素溶液。該試劑盒 被設置為在辣椒素溶液之前施用所述麻醉劑。該試劑盒可包括用于給藥a)和b)的裝置，并 可以有給藥說明書。
【具體實施方式】
[0077] 本發明的制劑提供了一種用于管理溫和到嚴重的慢性(持續大于3個月）或急性疼 痛的長效的、非阿片類的治療方案。有效的辣椒素注射療法必須包括處理辣椒素給藥后灼 熱疼痛的位置的治療方式。
[0078] 通過部位特異性的辣椒堿注射引起患有致殘慢性疼痛病情的患者中的感覺神經 元的選擇性和可逆性的機能喪失，對于長期(數周到數月）緩解疼痛是一種具有吸引力的方 法。然而，由于注射時辣椒堿所引起的強烈的灼痛，采用辣椒堿注射緩解疼痛的關節等的治 療是非常復雜。
[0079] 本發明公開的辣椒素制劑和方法可被用來治療/減輕哺乳動物中的疼痛，通常通 過在離散部位注射來提供延長的一段時間的緩解疼痛。以藥學上可接受的滲透載體施用制 劑。所述方法和制劑進一步包括以減弱辣椒素給藥產生的灼熱和痛覺過敏效果的量給藥延 長釋放劑、抗炎藥、鎮痛劑和/或麻醉劑。這可以與在辣椒素注射前、期間或之后冷卻方法例 如冰袋或凝膠袋的應用結合進行。
[0080] 通過部位特異性的辣椒堿注射引起的感覺神經元的選擇性和可逆性的機能喪失 在患有致殘慢性疼痛病情的患者中提供了長期(數周到數月）的疼痛緩解，并且沒有或僅輕 微的系統性副作用。本發明的辣椒素制劑可在長的時間段里減輕或減弱部位處的疼痛。關 于與關節炎病情(例如骨關節炎)相關的疼痛，在某些實施例中，一個單位劑量的辣椒素注 射或植入減輕部位疼痛至少3個月，至少4個月、5個月或6個月。關于關節疼痛，在某些實施 例中，一個單位劑量的辣椒素注射或植入減輕部位疼痛至少1個月，至少3個月，和3至6個 月，以及大于6個月的時間段，例如6至12個月。關于術后疼痛，一個單位劑量的辣椒素注射 或植入減輕部位疼痛至少1周，并且在某些實施例中至少1個月。
[0081 ]本發明的組合物
[0082]通過將辣椒素摻入到藥學上以及生理上可接受的水性載體中制備辣椒素藥劑用 來注射、植入、滲透或局部應用進行降低基于應用產生的灼熱感。本發明的目的是將非常小 量的辣椒堿注射給藥到離散的局部區域來治療以及減輕疼痛。，顯著的益處產生于毫克級 和/或毫克量分數的辣椒堿，目的是通過改變受限區域的感覺神經的功能(TRPV-I)產生治 療結果。
[0083] 本發明組合物的組分討論如下 [0084]辣椒素
[0085]對本發明的辣椒素的一般性討論見美國專利申請2008/0262091，以及共同擁有的 美國系列申請號13/609100,其通過引用全部并入本申請。如在此使用的術語"辣椒素"包括 辣椒堿和除辣椒堿以外的辣椒素即二氫辣椒堿、降二氫辣椒堿、高二氫辣椒堿、高辣椒堿和 香草壬酰胺，以及辣椒堿與一種或多種其他辣椒素的混合物。藥物的使用量基于一劑辣椒 堿的治療上的劑量。辣椒素為制劑的〇.0002-. I %wt，有益的為制劑的0.005-0.05%wt。
[0086]或者，"辣椒堿類似物"（例如樹脂毒素）可部分或全部代替辣椒素給藥。被施用的 類似物以治療上與辣椒堿等效劑量的量給藥-見美國專利申請2008/0262091，通過引用將 其全部并入于此。在其他的實施例中，在本發明的制劑和方法中使用TRPVl促效藥而不是辣 椒素或辣椒堿類似物。
[0087]輸送載體
[0088]本發明使用的水性藥物組合物為單相水性/水系統的藥學上可接受的輸送載體， 所述單相水性/水系統包括藥學上可接受的溶劑(例如聚乙二醇（如PEG 300和PEG 400)、乙 醇和非離子表面活性劑(例如聚氧乙烯40氫化蓖麻油（克列莫佛RH40)和多山梨醇酯80(PS 80)))。延長釋放劑(例如透明質酸)可控制制劑的粘性并有助于制劑的穩定性。公開的水基 制劑的顯著的益處為水濃度可超過95wt. %。
[0089] 水性制藥載體中的額外組分的示例包括調節滲透壓和肌肉彈性的葡萄糖(蔗糖） 和/或氯化鈉，以及調節pH的緩沖劑。在辣椒堿/PS 80的水性溶液中包含0.9%NaCl、0.25% 苯酚、0.25 %薄荷醇和5 %葡萄糖不會導致混濁態或形成沉淀。
[0090] 延長釋放劑
[0091] 已經發現能夠使辣椒素從制劑中緩慢釋放出來（引起延長釋放）的某些化合物減 少了灼熱和刺痛效果。有利地，延長釋放劑將會在超過15分鐘、30分鐘、1小時，或超過4小時 的時間里釋放所述辣椒素。在一個實施例中，在超過一周的時間里釋放所述辣椒素。通常， 較高的劑量會在更長的時間里被釋放出來。在本發明的一個實施例中，所述延長釋放劑不 是糖胺聚糖或蛋白聚糖。
[0092] 透明質酸
[0093] 辣椒堿和透明質酸及其鹽(天然存在于人體各種組織(皮膚、關節滑膜液和結蹄組 織）中的物質）的增溶有助于改善與局部使用和注射辣椒堿制劑相關的灼熱和刺痛。有利 地，使用1%至2%重量的透明質酸或其鹽。在本發明中描述的實驗測試中使用的透明質酸 的分子量具有800至1200千道爾頓的平均分子量。然而不希望被理論束縛，人們認為向辣椒 堿中加入透明質酸組分會在水溶液中形成多糖網，并引起辣椒堿以可控的方式緩慢地被釋 放出來，導致灼熱和刺痛的疼痛減輕。在本發明的一個實施例中，所述透明質酸為交聯水凝 膠的形式。
[0094] Jj父原蛋白和彈性蛋白
[0095] 膠原蛋白是動物中各種結蹄組織的主要結構蛋白。作為結締組織的主要組分，其 是哺乳動物中最豐富的蛋白，占據了整個身體蛋白含量的25%至35%。膠原蛋白為細長纖 維的形態，主要見于纖維組織，例如腱、韌帶和皮膚，并且在眼角膜、軟骨、骨頭、血管、腸和 椎間盤中也很豐富。
[0096] 彈性蛋白是結締組織中的一種蛋白，其具有彈性并讓身體中的許多組織在拉伸或 收縮后恢復它們的形狀。彈性蛋白幫助被戳或捏的皮膚回到其原來的位置。彈性蛋白還是 脊椎動物身體中的重要的承重組織以及在需要存儲機械能的地方使用。
[0097] 與辣椒素一起的膠原蛋白和/或彈性蛋白在治療包括OA疼痛的疼痛治療中是有利 的。加入到增溶的辣椒堿制劑中的膠原蛋白和/或彈性蛋白組分可在水溶液中形成蛋白網， 這有助于延遲或延長辣椒堿的釋放，從而有助于最小化來自局部應用或注射辣椒堿的灼熱 的不舒服感。此外，在用辣椒素注射時，這些天然存在的高分子量蛋白的功能是控制辣椒堿 向神經釋放的速率以減輕灼熱，提供了滑動骨表面的潤滑作用。向含有一種或兩種這些天 然存在的高分子量蛋白的辣椒素制劑中添加透明質酸進一步使耐受性和有效性最優化。在 本發明的組合物中，膠原蛋白或彈性蛋白必須為液體或凝膠形式。
[0098] 生物可吸收聚合物基體
[0099]生物可吸收聚合物基體，例如交聯氧化葡聚糖水凝膠，也可作為延長釋放劑被用 于本發明的制劑中。參見美國專利8435565,其內容通過引用全部結合在本申請中。
[0100] 溶劑
[0101] 聚乙二醇被稱為PEG，其作為溶劑、增塑劑、軟膏和栓劑的基質，以及在片劑和膠囊 中作為潤滑劑被用作非活性組分。PEG具有低毒性，全身吸收小于0.5%。術語"PEG"與數字 結合使用。在制藥工業中，所述數字表示平均分子量。低分子量液體聚乙二醇PEG 300和400 為優良的溶劑，并且是大量不易溶于水的物質的共溶劑。因此，它們廣泛地被用作活性物質 的溶劑和增溶劑以及液體和半固體制劑中的賦形劑。PEG與活性物質形成復合物的能力使 其具有優良的溶劑能力。聚乙二醇也可被用來調節液體制藥制劑的粘度、調節它們的吸收 性能以及穩定制劑。
[0102] 具有平均分子量達400的聚乙二醇在室溫下為非揮發性液體。直到PEG600的液體 PEG能與水以任意比例混合。但即使較高分子量的固體PEF等級在水中也有優良的溶解度。
[0103] 聚乙二醇顯示出了在急性和慢性口服毒性、胚胎毒性或皮膚兼容性方面的優秀的 毒理學安全性，這通過腸胃外/吸收/排泄研究得到了支持。它們已經在化妝品、食品和制藥 工業中使用了很多年。這些化合物中的許多列于FAD非活性成分列表中用于處方產品。本發 明的制劑包括多達25 %重量的溶劑，通常為5-25 %的重量。
[0104] PEG化合物的替代物為聚丙二醇。此外，醇類（包括乙醇、甘油和聚乙烯乙二醇等 等)可作為辣椒素增溶劑被添加到制劑中。
[0105] 表面活性劑
[0106] 表面活性劑，例如非離子表面活性劑，如PS80和/或克列莫佛flRH 40(聚氧乙烯40 氫化蓖麻油）；或者克列莫佛sELP或SolirteeHS 15，可與溶劑(如上面所描述的）或作為溶劑 的替代物一起用于本發明的制劑中。表面活性劑用作潤滑劑和乳化劑，并可減輕與辣椒素 給藥相關的初始刺痛或灼熱的不舒服感。
[0107] 進一步地，可形成用于在共同擁有的美國專利8637569描述中的該發明的制劑和 方法的表面活性劑/辣椒堿(或其他辣椒素)的濃縮物，通過引用所述美國專利8637569的全 部內容并入于此。可在本發明的制劑中使用這些濃縮物。
[0108] 本發明的制劑包括.〇〇 1 -2.5%重量的表面活性劑，通常為0.1-0.5%的重量。
[0109] 鎮痛劑和麻醉劑
[0110] 在本發明的制劑中使用鎮痛劑組分來改善或預防辣椒堿相關的初始急性灼痛或 刺痛。在本發明中可以使用各種鎮痛劑。
[0111] 苯酚和薄荷醇
[0112] 可在被治療的手術切口、裸露的傷口或注射部位施用苯酚和/或薄荷醇。可在施用 辣椒素之前施用苯酚和薄荷醇，或與辣椒素聯合施用。彈丸注射苯酚和薄荷醇濃度的有效 的24小時囊內膠囊濃度對于IOml關節液體注射體積應該為~25μg/ml或~250yg。
[0113] 苯酚和薄荷醇（1)都會快速滲透到與注射劑接觸的表面；（2)有助于減少或消除與 TRPVl促效藥(例如辣椒堿)給藥相關的急性灼痛和刺痛。也可以用丁香油酚。本發明包括使 用特定的可注射的鎮痛劑(例如苯酚和薄荷醇），所述鎮痛劑具有相對于辣椒堿的快速"起 效"以有效地減緩辣椒堿的灼熱感的作用。化合物的起效與其物理化學性質相關，一些藥劑 列于表1II中。
[0114] 表1II-所選的鎮痛劑的起效和麻醉劑成分
[0116]當伴隨給藥時，這些具有快速起效的選擇的鎮痛藥的使用有效地減緩了辣椒堿的 灼熱效果，而且提供了更直接的辣椒堿相關的疼痛緩解。在本發明的一個實施例中，注射的 鎮痛劑具有I60或更小的分子量。辣椒堿提供了更長期/長持久性的與注射鎮痛藥相關的疼 痛的緩解。
[0117]局部麻醉劑(例如利多卡因）通常添加到關節腔內注射中。它們被用于許多基礎醫 療手術中以產生短時間的麻木，包括被用于醫生的辦公室或醫院以麻醉受傷的或需要小外 科手術操作的區域。局部麻醉劑可添加到注射載體中以提供局部的疼痛緩解。麻醉劑的示 例為利多卡因、布比卡因、羅哌卡因、辛可卡因、普魯卡因、氯普魯卡因、普魯卡因、馬比佛卡 因、依替卡因、依替卡因和賽羅卡因。有利地，由于化合物起效的不同，在辣椒素給藥2-20分 鐘之前，施用麻醉劑。
[0118]抗炎劑
[0119]抗炎劑任選地被包括在所述制劑中。
[0120] 非類固醇抗炎藥(NSAID)
[0121] 非類固醇抗炎藥(例如阿司匹林、萘普生、吲哚美辛、雙氯芬酸鈉、羅非昔布和布洛 芬)抑制環氧合酶(C0X-2抑制劑），并因此降低前列腺素的合成。前列腺素是過敏和炎癥過 程期間被釋放出的炎癥介質。NSAID完全阻止前列腺素被合成、減少或消除疼痛。
[0122] NSAID抗炎劑(例如雙氯芬酸、阿司匹林、布洛芬、萘普生、苯惡洛芬、氟比洛芬、非 諾洛芬以及其他等等)可被添加到可注射組合物中來提供局部的疼痛緩解，同時伴隨最小 程度的或無全身吸收。
[0123] 皮質類固醇
[0124] 在本發明的一個實施例中，在辣椒堿之前或同時地施用輔助劑例如皮質類固醇 (糖皮質激素），以減輕來自施用辣椒堿藥劑的初始急性灼痛和刺痛。一些最有效的抗炎藥 為皮質類固醇。皮質類固醇已經被證實通過抑制引起炎癥的物質的產生來減輕炎癥。可注 射的皮質類固醇在疼痛管理中被廣泛應用。這些藥物憑借其抗炎特性可減少或消除疼痛的 病灶。皮質類固醇注射可以很高效，因為其可以直接向炎癥的部位輸送藥物。，皮質類固醇 注射是減輕包括由來自TRPV-I神經末梢的炎癥物質由于辣椒堿的存在引起的炎癥的有效 的方式。雖然不希望受限于理論，人們認為皮質類固醇給藥通過安神和減少某些生物遞質 (例如P物質和緩激肽)的炎癥反應起作用，其產生于辣椒素給藥。
[0125] 有多種皮質類固醇可以使用，包括地塞米松、醋酸甲基強的松龍、甲基潑尼松龍琥 珀酸鈉及其混合物。也可以使用本領域技術人員已知的其他等效的皮質類固醇。在一個實 施例中，根據美國專利8637569(其全部內容通過引用并入于此），皮質類固醇的溶解度通過 形成皮質類固醇的濃縮物(例如用PS 80或聚氧化40氫化蓖麻油)來增加。
[0126] 可注射的皮質類固醇能夠以水溶性或長效制劑獲得。水溶性皮質類固醇通常不被 用于關節腔內注射，因為它們會從注射區域快速地分散開，發揮全身作用。長效制劑會在被 注射的部位保留較長的時間，維持局部效果，對關節注射有益。有各種可以加以使用的長效 皮質類固醇，包括甲基強的松龍醋酸酯、倍他米松磷酸鈉、倍他米松醋酸酯、醋酸氫化可的 松、潑尼松龍(tebulate)、曲安奈德、己曲安奈德及其混合物。相比于較高溶解度的化合物， 具有較低溶解度的皮質類固醇具有長時間保持有效的滑膜液水平并產生較低的全身水平 的額外好處。
[0127] 當皮質類固醇與辣椒素一起施用時，所述施用向被治療的區域提供了灼痛和刺痛 的緩解。皮質類固醇給藥與辣椒堿或辣椒堿類似化合物給藥產生了較輕的辣椒堿給藥的疼 痛，并且在該部位長時間（大于1個月，有利的是大于3個月，最有利的是大于6個月）的緩解 疼痛。
[0128] 在矯形外科中，具有有效抗炎性活性的皮質類固醇與辣椒素一起使用消除了或實 質上減少了來自辣椒素給藥的急性疼痛。這可以以安全并有效的方式延長疼痛的緩解。
[0129] 水基辣椒堿可注射制劑-膠束/無
[0130]在表1V中所列的制劑依賴于增溶辣椒堿和鎮痛劑的PEG和乙醇、苯酚以及薄荷醇。 需要~15-40重量％PEG和~0-40重量％乙醇的名義上的含量來維持苯酚和薄荷醇的單相 水溶液。
[0131] 表1V-高PEG 300/400辣椒堿制劑(無膠束的）

[0134] 水基辣椒堿可注射制劑-在膠束中含有辣椒堿
[0135] 如在美國專利8637569的實施例V和實施例VIA至VID指出的，在水溶液中含有Img/ ml辣椒堿的組合物需要在水溶液中有10mg/ml的PS80。還需要指出，在PS80濃縮物中每增加 I Omg/m 1，辣椒堿的水溶解度增加約lmg/m 1。
[0136] 然而，共同擁有的美國專利8637569的實施例意外地教導了在水溶液中需要一半 (1/2)的PS 80濃度，即5mg/ml的PS 80溶解lmg/ml的辣椒堿。在相對水不溶的辣椒堿中以 5mg/ml的PS 80獲得lmg/ml濃度的比例表明辣椒堿被包含在膠束內。（見實施例1)因此，為 了獲得0.06mg/ml的辣椒堿濃度，僅需要0.3gm/ml的PS 80。
[0137] 在表V中引用的制劑依賴于PS 80、苯酚和薄荷醇，所述PS 80通過增溶和膠束劑溶 解辣椒素，并且PEG和乙醇的含量溶解鎮痛劑。需要5-20重量％PEG和~0-40重量％乙醇來 維持苯酚和薄荷醇的單相水溶液。
[0138] 表V-PS 80辣椒堿制劑
[0141]在表VI中引用的制劑依賴于溶解辣椒堿和鎮痛劑的克列莫佛? RH 40 (或者， 克列莫佛?ELP或Sdute6HS 15)、苯酚和薄荷醇。
[0142] 表VI-克列莫佛1!1 4〇辣椒堿制劑
[0144] 制備本發明制劑的方法
[0145] 在下面的實施例1-6中討論了制備本發明的制劑的方法。
[0146] 使用本發明的組合物的方法和給藥
[0147] 本發明提供了用于治療疼痛的水性辣椒素制劑的給藥。在離散部位、手術部位或 裸露的傷口施用有效量的單劑的辣椒素制劑，以去除注射部位、手術部位（例如腹腔鏡檢 查)或傷口（例如骨折或韌帶撕裂)神經。部位的示例包括關節、肌肉、腱、神經質或腫瘤。
[0148] 本發明的制劑對1)緩解關節腔內部位或體間隙的疼痛;2)減輕隨著卸下臨床護理 設施的患者所經歷的術后疼痛;3)提供有效的術后痛覺缺失，是有用的，從而減少了患者攝 入的鎮定劑的量，因此減少了術后康復的時間。
[0149] 本發明的組合物的用途和方法包括但不限于膝蓋、肩部、臂部、背部、脊柱、頸、肘 部、手、足的骨科障礙以及在特定部位涉及疼痛的其他障礙。關節腔內給藥的示例包括膝 蓋、肘部、臂部、腕骨、跗骨、腕、椎間盤、踝以及關節炎狀況的其他關節主體的注射。體間隙 的示例包括囊或腹膜。
[0150]骨關節炎(OA)與軟骨的減少有關。軟骨由稱作軟骨細胞的特化細胞組成，所述軟 骨細胞產生大量的由膠原蛋白纖維組成的細胞外基質、富含蛋白聚糖的豐富的基質以及彈 性蛋白纖維。
[0151] 本發明的組合物可用于管理和延長緩解哺乳動物中與骨關節炎、類風濕性關節 炎、肌腱炎、滑囊炎、術前和術后狀況有關的傷害性疼痛，以及用于發生繼發性神經損傷的 神經性疼痛。在美國專利8420600和共同擁有的美國系列號13/609100中描述了給藥的其他 用途和方法，其全部內容通過引入并入本申請。
[0152] 如在本發明中使用的"注射"的意思是通過皮膚向部位給藥。"植入"的意思是通過 嵌入一劑材料到皮膚、肌肉、腱或關節中在部位給藥。
[0153] 辣椒堿制劑可通過注射或滲透向部位給藥。對于外科手術或傷口，向外科手術或 傷口的部位周圍的肌肉、組織或骨頭施用藥劑。當通過滲透進行辣椒素給藥時，根據本領域 技術人員已知的工具將辣椒素施用到手術部位或傷口以通過滲透來給藥，例如針及注射 器。
[0154] 如在本發明中使用的"治療上有效量"是指產生臨床所需結果（例如生物應答）的 或減輕疾病或狀況的癥狀(例如減輕或消除疼痛)的藥劑的數量或劑量。
[0155] 當通過注射單劑進行辣椒堿給藥時，辣椒堿的注射體積取決于給藥的局部部位。 被輸送的合適的注射體積有利地在約0.1至約20ml，更有利地在約0.5至約IOml，以及最有 利地在約1.0至約5ml，取決于被治療的部位。
[0156] 接下來是治療關節痛并最小化或消除可注射辣椒堿的灼熱和刺痛效果的本發明 的可注射組合物有益的用途。為了減少感染的風險，對于注射，必須使用無菌技術。皮膚最 先用聚維酮碘或其他合適的防腐劑清洗。
[0157] 注射程序
[0158] 采用下面的程序將辣椒堿制劑注射到關節(例如膝關節）中：
[0159] 1.將針插入到關節，并抽出多余的液體。
[0160] 2.將麻醉劑（1%利多卡因）注射到受影響的關節并允許滲透到周圍的關節腔的表 面約5至10分鐘。在這段時間里，讓主體走動、彎曲以及伸展（屈伸)膝蓋來分散利多卡因。有 利的是，在辣椒素制劑給藥之前，沒有從關節移走麻醉劑。在注射利多卡因之前、期間和/或 之后，任選地將冷卻手段(例如冰袋)施用于受影響的膝蓋。
[0161] 3.注射利多卡因5至10分鐘后，以在5ml溶液中的0.2至0.5mg的劑量注射辣椒堿。 在辣椒堿制劑注射之前、期間和之后，任選地將冰袋或凝膠袋或冷卻裝置應用于受影響的 膝蓋。為了在關節中分散辣椒堿，在第一個1分鐘里(有利的為30秒），充分地反復彎曲和伸 展膝關節，而主體在臺上檢查。也可以讓主體走動以及彎曲膝蓋。
[0162] 注射辣椒堿后彎曲關節
[0163] 顯著地，辣椒堿給藥后的第一分鐘內，通過屈伸（彎曲和伸展)關節和行走活動關 節有助于使制劑循環，并減輕灼痛和刺痛。
[0164] 冷卻
[0165] 通過外部冷卻手段(例如冰袋或冷卻裝置)冷卻關節或給藥部位也可以減輕辣椒 素給藥的疼痛效果。在一個實施例中，冷袋或凝膠袋產生高于結冰的溫度，例如38-50華氏 度。
[0166] 本發明的治療方法使用辣椒堿(例如反式辣椒堿）的劑量范圍為0.0 Olmg至1.0 mg， 有利的是0.211^至0.411^。所述方法使用體積約0.11111至251111的水性載體，有利的是5-101111。 用于關節或非關節應用的辣椒素和載體的量根據本領域的技術人員決定而變化。
[0167] 本發明的組合物通過包括0.0002 %-0.1 %重量的辣椒素，有利的是0.01-0.05 % 重量的辣椒素。
[0168] 本發明的制劑和方法提供了緩解疼痛2至5天，有利的是7至21天，或更有利的是6 至8周，或者大于14周(例如大于1個月，有利的是大于3個月，以及最有利的是大于6個月）。
[0169] 可以使用相似的技術來緩解不同于關節痛的疼痛。
[0170] 下面的實施例用作說明，但不限于本發明的組合物和方法。通常會遇到多種條件 和參數的其他合適的改變以及變通，這對本領域的技術人員是顯而易見的，在本發明的精 神和范圍內。
[0171] 實施例1
[0172] 濃縮的辣椒堿/PS 80溶液的制備
[0173] 美國專利8637569教導了需要5mg/ml的PS 80溶解lmg/ml的辣椒堿，即為了獲得 0.06mg/ml的辣椒堿濃度，需要僅0.3gm/ml的PS 80。而且，測定了在膠束中含有相對地水不 溶性的辣椒堿，由于在辣椒堿溶解度方面，每增加 lmg/ml，則需要5mg/ml的PS 80。在購自 Croda公司的高純度的PS80中增溶辣椒堿方面使用了該專利的教導。.
[0174] 步驟I-辣椒堿和PS 80濃縮物的制備
[0175] 成分包括：
[0176] 10克的多山梨醇酯80(PS 80)，超精，Croda公司，CAS#9005-65-6
[0177] 2克的反式辣椒堿，Aversion Technologies公司，USP 30,95.7%反式-辣椒堿，平 衡順式辣椒堿
[0178] 程序：
[0179] 1.將10克的PS 80加入到50ml"Pyrex"的玻璃小瓶中。
[0180] 2.將2克的反式辣椒堿加入到步驟1中的PS 80中。
[0181] 3.將步驟2的混合物加熱到~125°C以溶解反式辣椒堿從而形成反式辣椒堿/PS80 濃縮物。
[0182] 將少量的辣椒堿顆粒加入到室溫的辣椒堿/PS 80溶液中沒有導致形成辣椒堿沉 淀，因此表明辣椒堿溶液沒有過飽和。獲得了意想不到的高濃度水平，即在I.Oml的PS 80中 200mg的辣椒堿(200mg/ml)。將2ml的該辣椒堿/PS 80濃縮物加入到98克的~70°C的水中導 致渾濁的溶液，當溶液混合物冷卻到室溫時，所述渾濁的溶液逐漸變得完全透明。因此將該 20 %辣椒堿/PS 80濃縮物加入到水中獲得了 4mg/ml的水性辣椒堿溶解度水平。相似地，將 I Oml的該辣椒堿/PS80濃縮物加入到90克的~70 °C的水中獲得渾濁的溶液，當溶液混合物 冷卻到室溫時，所述渾濁的溶液逐漸變得完全透明。因此，將該2%辣椒堿/PS 80的濃縮物 加入到水中獲得了 20mg/ml的水性辣椒堿的溶解度水平。
[0183] 還需要注意的是，在PS 80濃度每增加5mg/ml，辣椒堿的水性溶解度增加約Img/ ml。不希望受到理論的限制，這表明在PS 80膠束中含有辣椒堿。
[0184] 實施例2
[0185] 200克含有來自實施例1的辣椒堿/PS80濃縮物和透明質酸的水性溶液的制備
[0186] 步驟I-透明質酸溶液的制備
[0187] 成分包括：
[0188] 1 克的透明質酸，M.W· =1000千道爾頓，Lotioncrafter LLC，CAS#9067-32-7
[0189] 191.8克的蒸餾水，Poland Springs
[0190] 程序：
[0191 ] I.向400cc Pyrex燒杯中加入1克的透明質酸。
[0192] 2.向透明質酸中加入191.8克的水，并充分混合直到獲得澄清溶液。完全溶解透明 質酸需要更長的時間。
[0?93] 步驟II-0.6mg/ml辣椒堿，3.Omg/ml PS80&5mg/ml透明質酸水溶液的制備
[0194] 成分包括：
[0195] 來自實施例1的7.2克的辣椒堿/PS 80濃縮物
[0196] 來自步驟I的192.8克的透明質酸。
[0197] 程序：
[0198] 1.向步驟I中制備的并包含在400cc Pyrex燒杯內的192.8克的透明質酸溶液中緩 慢加入7.2克實施例1中制備的辣椒堿/PS 80濃縮物，同時充分攪拌。
[0199] 2.為了后續的包裝，現在準備好來自步驟1的混合物。
[0200] 在充分混合所述成分之后，獲得的混合物完全透明并且為中等粘度。混合物的粘 度可通過改變透明質酸的含量來調節。
[0201] 在PS80中的辣椒堿的高溫增溶是重要的。多次嘗試將PS80和辣椒堿加入到水中， 接著加熱到~70 °C - 90 °C的溫度導致只有一部分辣椒堿溶解。
[0202]如前文所描述的，在水性介質中獲得增加辣椒堿溶解度水平的能力使得被注射的 辣椒堿的液體體積顯著減少。當與PS80(具有膠束增溶作用）表面活性劑相比時，采用PEG-400 的實 驗沒有獲得辣椒堿的 溶解度 水平。
[0203] 實施例3
[0204] 200克的0.06mg/ml辣椒堿可注射溶液(無膠束)的制備
[0205]步驟I -辣椒堿、苯酚、薄荷醇溶液的制備 [0206]成分包括：
[0207] 60克的PEG-300，Spectrum Chemical，NF，CAS#25322-68-3
[0208] 16克的乙醇，Graves Grain Alcohol，190Proof
[0209] 0.2克的苯酚，液化(石碳酸），Spectrum Chemical，USP，CAS#108-95-2
[0210] 0.2克的L-薄荷醇，晶體，Spectrum Chemical，USP，CAS#2216-51-5
[0211] 0.012克的反式-辣椒堿，Aversion Technologies公司，USP 30,95.7%反式辣椒 堿，平衡順式辣椒堿
[0212]程序：
[0213] 1.將60克的PEG-300加入到400cc Pyrex燒杯中。
[0214] 2.將16克的乙醇加入到PEG-300中并充分混合。
[0215] 3.將0.2克的液化苯酚加入到步驟2的混合物中。
[0216] 4.將0.2克的L-薄荷醇晶體加入到步驟3的混合物中。
[0217] 5.將0.012克的反式-辣椒堿加入到步驟4的混合物中。
[0218] 6.將步驟5的混合物加熱到~40 °C以加速形成薄荷醇和辣椒堿的溶液。
[0219] 7.將步驟6中的溶液放置一邊，讓其冷卻到室溫。
[0220] 步驟II-透明質酸溶液的制備
[0221] 成分包括：
[0222] 1 克的透明質酸，M.W· =1000千道爾頓，Lotioncrafter LLC，CAS#9067-32-7
[0223] 122.6克的蒸饋水，Poland Springs
[0224] 程序：
[0225] 1.將1克的透明質酸加入到250cc Pyrex燒杯中。
[0226] 2.將122.6克的水加入到透明質酸中并充分混合，直到獲得澄清的溶液。完全溶解 透明質酸需要更長的時間，最有可能為30分鐘。
[0227] 步驟III -步驟I&步驟II溶液的組合
[0228] 成分包括：
[0229] 來自步驟I的溶液混合物。
[0230]來自步驟II的溶液混合物。
[0231] 程序：
[0232] 1.將來自步驟II的透明質酸溶液緩慢加入到來自步驟I的含有辣椒堿的溶液中， 同時充分攪拌。
[0233] 2.為了后續的包裝，現在準備好來自步驟1的混合物。
[0234] 表6含有包含在0.06mg/ml辣椒堿溶液中的成分。
[0235] 實施例4
[0236] 200克的0.06mg/ml辣椒堿/PS 80膠束可注射溶液的制備
[0237] 步驟I-辣椒堿和PS 80溶液的制備
[0238] 成分包括：（注意：為了保證重量精確，制備的辣椒堿/PS 80溶液的量是0.06mg/ml 可注射溶液所需的8倍）
[0239] 2克的多山梨醇酯80(PS 80)，Super refinecUCroda公司，CAS#9005-65-6
[0240] 0.125克的反式辣椒堿，Aversion Technologies公司，USP 30,95.7%反式辣椒 堿，平衡順式辣椒堿
[0241] 程序：
[0242] 1.將2克的PS 80加入到16ml Pyrex玻璃小瓶中。
[0243] 2.將0.125克的反式-辣椒堿加入到步驟1中的PS 80中。
[0244] 3.將步驟2中的混合物加熱到~55°C以溶解反式-辣椒堿，然后形成反式-辣椒堿/ PS 80溶液。
[0245] 步驟II-辣椒堿/PS 80、PEG_300、乙醇、苯酚&薄荷醇溶液的制備
[0246] 成分包括：
[0247] 20mg的PEG PEG-300，Spectrum Chemical，NF，CAS#25322-68-3
[0248] 10克的乙醇，Graves Grain Alcohol，190Proof
[0249] 0.27克的反式-辣椒堿/PS 80solution from STEP I.
[0250] 0.2克的苯酚，液化(石碳酸），Spectrum Chemical，USP，CAS#108-95-2
[0251] 0.2克的L-薄荷醇，晶體，Spectrum Chemical，USP，CAS#2216-51-5 [0252]程序：
[0253] 1.將20克的PEG-300加入到400cc Pyrex燒杯中。
[0254] 2.將10克的乙醇加入到PEG-300中并充分混合。
[0255] 3.將0.27克的反式-辣椒堿/PS 80溶液加入到步驟2的混合物中并充分攪拌。
[0256] 4.將0.2克的液化苯酚加入到步驟3的混合物中。
[0257] 5.將0.2克的L-薄荷醇晶體加入到步驟4的混合物中。
[0258] 6.將步驟5的混合物加熱到~40 °C以加速薄荷醇溶液。
[0259] 7.將步驟5的溶液放置在一邊，讓其冷卻到室溫。
[0260]步驟III-透明質酸溶液的制備
[0261] 成分包括：
[0262] 1 克的透明質酸，M.W· =1000千道爾頓，Lotioncrafter LLC，CAS#9067-32-7
[0263] 169.5克的蒸饋水，Poland Springs
[0264] 程序：
[0265] 1 ·將1克的透明質酸加入到400cc Pyrex燒杯中。
[0266] 2.將169.5克的水加入到透明質酸中并充分混合直到獲得澄清的溶液。完全溶解 透明質酸需要更長的時間。
[0267] 步驟III -步驟I&步驟II溶液的組合
[0268] 成分包括：
[0269] 來自步驟I的溶液。
[0270]來自步驟I的溶液。
[0271] 程序：
[0272] 1.將來自步驟II的透明質酸溶液緩慢加入到來自步驟II的含有辣椒堿的溶液中， 同時充分攪拌。
[0273] 2.為了后續的包裝，現在準備好來自步驟1的混合物。
[0274] 表6含有包含在0.06mg/ml辣椒堿溶液內中的成分。
[0275] 實施例5
[0276] 200克的4mg/ml辣椒堿、lmg/ml薄荷醇和lmg/ml苯酸的透明的水性濃縮物的制備 [0277]下面的步驟遵循4mg/ml辣椒堿、lmg/ml薄荷醇和lmg/ml苯酸濃縮物的制備。
[0278] 成分包括：
[0279] 0.40克的反式辣椒堿，Aversion Technologies公司，USP 30,95.7%反式辣椒堿， 平衡順式辣椒堿
[0280] 0.10克的苯酚，液化(石碳酸），Spectrum Chemical，USP，CAS#108-95-2
[0281] 0.10克的L-薄荷醇，晶體，Spectrum Chemical，USP，CAS#2216-51
[0282] 2克的克列莫彿?RH 40，CAS號61788-85-0,購自Sigma Aldrich(圣路易斯?莫）
[0283] 程序：
[0284] 1.將0.4克的辣椒堿粉末、0.1克的薄荷醇晶體和0.1克的液化苯酚加入到300 cc Pyrex燒杯中。
[0285] 2.將2.0克的克列莫佛gRH 40加入到步驟1的混合物中。
[0286] 3.將步驟2的混合物加熱到約125°C。
[0287] 4.將水緩慢加入到來自步驟3的混合物中，同時充分攪拌以提供重達200克的水性 混合物。
[0288] 得到含有4mg/ml辣椒堿、lmg/ml薄荷醇、lmg/ml苯酸和20mg/ml克列莫佛lglRH 40的 光學澄清的水溶液。辣椒堿、薄荷醇和苯酚的混合物與克列莫佛?40表面活性劑的組合重量 比為 1.0/3.33。
[0289] 實施例6
[0290] HA/PEG/辣椒堿注射溶液的制備
[0291] 在可注射制劑中使用的辣椒堿是用于藥物用途的高純合成的反式辣椒堿產品。臺 耀化學(Formosa Laboratories)為經過認證的制造商(DMF#16769)。馬薩諸塞州的Johnson Compounding of Waltham制備作為無菌液體的辣椒堿注射制劑，Bioventus LLC of Durham，NC供應用于制備無菌辣椒堿-HA注射溶液的無菌透明質酸(HA)制劑，透明質酸鈉注 射劑。辣椒堿溶液和透明質酸鈉注射劑的制造和發行符合藥品生產質量管理規范(GMP)。
[0292] 用溶解于100 %聚乙二醇300 (PEG)的辣椒堿制備辣椒堿溶液。將由此獲得的溶液 無菌過濾并無菌地裝入5ml的I型玻璃小瓶中，然后密封。辣椒堿溶液的組分和組合物列于 表VII中。
[0293] 表VII-辣椒堿溶液的組分
[0295] 1從臺灣的臺耀化學獲取cGMP 99+wt%反式-辣椒堿
[0296] 2Sigma-Aldrich,圣路易斯?莫（貨號#81162)
[0297] 然后將辣椒堿溶液與透明質酸鈉注射劑混合。透明質酸鈉注射劑為純的高分子量 (620000-1170000道爾頓）的透明質酸鈉(透明質）的無菌的、粘彈性的無熱源溶液，pH為 6.8-7.8。每毫升透明質酸鈉注射劑含有IOmg溶于生理鹽水的玻璃酸鈉(玻尿酸）（1.0%溶 液）。透明質酸鈉(透明質酸)從雞冠中提取出來。透明質酸鈉(透明質酸)為含有葡糖醛酸重 復雙糖單元的聚糖。透明質酸鈉注射劑的組分和組合物顯示于表VIII。
[0298] 表VIII -透明質酸鈉注射劑的組分
[0300]水性辣椒堿-HA無菌注射溶液的辣椒堿的濃度范圍為在5ml的無菌注射溶液中 0.2-0.5mg的辣椒堿，并在剛好注射進關節腔內膝關節之前，通過辣椒堿與透明質酸制劑 (透明質酸鈉注射劑)混合來制備。
[0301] 實施例7
[0302] HA/PEG/辣椒堿溶液注射到膝蓋中
[0303]患有疼痛的膝骨關節炎的72歲男性接受含有1%利多卡因的8ml溶液注射到他的 左膝關節的關節腔內。在5ml的水性辣椒堿-HA無菌溶液關節腔內注射之前，通過行走和膝 關節屈伸約5分鐘使利多卡因溶液分布到整個關節腔。通過0.5ml的辣椒堿溶液與4.5ml含 有透明質酸鈉注射劑載體的HA混合獲得0.2mg辣椒堿的辣椒堿劑量水平。在注射水性辣椒 堿-HA無菌溶液之前，將膝關節預冷約3分鐘，在后續的治療過程中繼續進行膝關節冷卻。辣 椒堿注射后，立即猛力地屈伸(彎曲和伸展)膝關節約1分鐘來將關節腔內的水性辣椒堿-HA 無菌溶液進行分散。疼痛水平一度上升到中等水平，通過休息以及屈伸膝關節快速消退。注 射水性辣椒堿-HA無菌溶液后7分鐘，完成程序，主體經歷了骨關節炎疼痛癥狀的完全緩解。 表1X總結了過程疼痛水平作為經過的時間的函數。
[0304]表1X-注射后的膝關節#1
[0305] 0.5ml辣椒堿溶液和4.5ml透明質酸鈉注射劑(0.2mg辣椒堿劑量水平）
[0308] 注意:從辣椒堿注射到完全緩解疼痛所經過的時間=7分鐘
[0309] 實施例8
[0310] HA/PEG/辣椒堿溶液注射到膝關節中
[0311]在將IOml含有1 %利多卡因的溶液注射到他的左膝關節的關節腔內之前，患有疼 痛膝骨關節炎的74歲男性已經從他的左膝關節移除14cc的液體。在關節腔內注射5ml的水 性辣椒堿-HA無菌溶液之前，通過行走和膝關節屈伸約7分鐘使利多卡因溶液分布到整個關 節腔內。通過0.75ml的辣椒堿溶液與4.25ml的含有透明質酸注射劑載體的HA混合獲得 0.3mg的辣椒堿劑量水平。在注射辣椒堿-HA無菌溶液之前，預冷膝關節約2分鐘，后續的治 療程序繼續進行膝關節的冷卻。辣椒堿注射后，立即猛力地屈伸膝關節約1分鐘來分散關節 腔內的水性辣椒堿-HA無菌溶液。疼痛水平一度上升到中等水平，通過使用額外的冰敷和膝 關節屈伸快速消退。注射水性辣椒堿-HA溶液后14分鐘，完成程序，主體經歷了骨關節炎疼 痛癥狀的完全緩解。表X總結了過程疼痛水平作為經過的時間的函數。
[0312] 表X-注射后的膝關節#2
[0313] 0.75ml辣椒堿溶液&4.25ml透明質酸鈉注射劑0.4mg辣椒堿的劑量水平
[0316] 注意:從辣椒堿注射到完全緩解疼痛所經過的時間=14分鐘
[0317] 實施例9
[0318] HA/PEG/辣椒堿溶液注射到膝關節中
[0319] 在將含有1 %利多卡因的IOml溶液注射到他的左膝關節的關節腔內之前，患有疼 痛膝骨關節炎疼痛的如實施例8中相同的74歲男性已從他的右膝關節移除Hcc的液體。在 關節腔內注射5ml的水性辣椒堿-HA無菌溶液之前，通過行走和膝關節屈伸約8分鐘使利多 卡因溶液分布到整個關節腔內。通過Iml的辣椒堿溶液與4ml的含有透明質酸注射劑載體的 HA混合獲得0.3mg的辣椒堿劑量水平。在注射辣椒堿-HA無菌溶液之前，預冷膝關節約2分 鐘，在后續的治療程序中繼續進行膝關節的冷卻。辣椒堿注射后，立即猛力地屈伸膝關節約 1分鐘來分散關節腔內的水性辣椒堿-HA無菌溶液。疼痛水平一度上升到中等水平，通過膝 關節的屈伸和靜止快速消退。注射水性辣椒堿-HA溶液后11分鐘，完成程序，主體經歷了他 的骨關節炎疼痛癥狀的完全緩解。表XI總結了過程疼痛水平作為經過的時間的函數。
[0320]表XI-注射后的膝關節#3
[0321 ] Iml辣椒堿溶劑&4ml透明質酸鈉注射劑0.4mg辣椒堿的劑量水平
[0324] 注意:從辣椒堿注射到完全緩解疼痛所經過的時間=11分鐘
[0325] 上文引用的所有文件和文獻均通過引用將它們的全部內容在此并入到該申請中。
[0326] 雖然本發明以示例性的實施例進行描述，但本領域的技術人員將理解在沒有脫離 本發明的范圍情況下，可以進行各種改變，可以等同替換其元素。此外，在沒有脫離本發明 的基本范圍的情況下，可以根據本發明的教導進行多種修飾來適應特定的情形或材料。因 此，本發明將不會被考慮實施本發明最優的模型公開的特定的實施例所限制，而是本發明 將包括落入所附權利要求內所有的實施例。
【主權項】
1. 一種用于在哺乳動物中注射的水性組合物，包括： O · 0002 %-O · 1 %重量的辣椒素， 99.9 % -99.9998 %重量的水性載體，所述水性載體包括溶解所述辣椒素的增溶劑以及 在哺乳動物中注射所述組合物時使所述辣椒素從所述水性組合物中的釋放減慢的延長釋 放劑， 其中，所述水性載體減輕或消除了在注射時所述辣椒素產生的灼熱和刺痛。2. 根據權利要求1所述的水性組合物，其中所述辣椒素為辣椒堿。3. 根據權利要求1所述的水性組合物，其中所述辣椒素為反式辣椒堿。4. 根據權利要求1所述的水性組合物，其中所述辣椒素為含有非離子表面活性劑的濃 縮物的形式。5. 根據權利要求1所述的水性組合物，其中所述增溶劑選自聚乙二醇-300、聚乙二醇-400和聚丙二醇組成的群組。6. 根據權利要求1所述的水性組合物，其中所述延長釋放劑為透明質酸。7. 根據權利要求6所述的水性組合物，其中所述緩釋劑為0.5%-1.5%重量的透明質 酸。8. 根據權利要求6所述的水性組合物，其中所述透明質酸具有1000千道爾頓的平均分 子量。9. 根據權利要求6所述的水性組合物，其中所述透明質酸為水凝膠的形式。10. 根據權利要求1所述的水性組合物，其中所述延長釋放劑選自膠原蛋白、彈性蛋白 和可生物降解的聚合物基體組成的群組。11. 根據權利要求1所述的水性組合物，包括： 0.005-0.05 %重量的辣椒堿， 5-25%重量的聚乙二醇，以及 0.2-1 %重量的透明質酸。12. 根據權利要求1所述的水性組合物，進一步包括非離子表面活性劑。13. 根據權利要求12所述的水性組合物，其中所述辣椒素為辣椒堿，所述非離子表面活 性劑為聚氧乙烯40氫化蓖麻油。14. 根據權利要求12所述的水性組合物，其中所述辣椒素為辣椒堿，所述非離子表面活 性劑為多山梨醇酯80。15. 根據權利要求14所述的水性組合物，其中辣椒堿與多山梨醇酯80的重量比為1至5。16. 根據權利要求1所述的水性組合物，進一步包括抗炎劑。17. 根據權利要求16所述的水性組合物，其中所述抗炎劑為皮質類固醇。18. 根據權利要求1所述的水性組合物，進一步包括鎮痛劑。19. 根據權利要求18所述的水性組合物，其中所述鎮痛劑為苯酚、薄荷醇和丁香油酚組 成的群組中的一種或多種。20. 根據權利要求1所述的水性組合物，進一步包括麻醉劑。21. 根據權利要求1所述的水性組合物，包括： 0.005-0.05 %重量的辣椒堿， 0.025-0.15%重量的多山梨醇酯80或聚氧乙烯40氫化蓖麻油， 0-25%重量的聚乙二醇300或400,以及 0.2-1 %重量的透明質酸。22. -種用于治療哺乳動物部位疼痛的方法，包括： 向所述哺乳動物的所述部位施用治療有效量的根據權利要求1所述的水性組合物。23. 根據權要求22所述的方法，其中所述哺乳動物為人。24. 根據權要求22所述的方法，其中在施用所述水性組合物之前施用麻醉劑。25. 根據權要求24所述的方法，其中以約0.1ml至25ml體積的藥學上可接受的載體施用 所述麻醉劑。26. 根據權要求22所述的方法，其中在施用所述水性組合物之后的第一分鐘期間，重復 彎曲和伸展關節。27. 根據權要求22所述的方法，其中在施用所述水性組合物之前、期間和/或之后，向所 述部位使用冷卻手段。28. 根據權要求22所述的方法，其中通過注射施用所述水性組合物。29. 根據權要求22所述的方法，其中通過滲透施用所述水性組合物。30. 根據權要求22所述的方法，其中所述疼痛源自傷口或手術部位。31. 根據權要求22所述的方法，其中辣椒素為0.0 Olmg至0.5mg范圍的反式辣椒堿水平。32. 根據權要求22所述的方法，其中以約0.1 ml至25ml的體積施用所述水性組合物。33. 根據權要求22所述的方法，其中所述水性組合物包括辣椒素、透明質酸和聚乙二 醇。34. -種用于通過關節腔內注射施用辣椒素的試劑盒，包括： a) 至少一個單位劑量的麻醉劑， b) 至少一個單位劑量的辣椒素溶液，所述辣椒素溶液含有辣椒素和透明質酸， 其中所述試劑盒被設置為在所述辣椒素溶液之前施用所述麻醉劑。35. 根據權利要求34的試劑盒，進一步包括用于施用a)和b)的裝置。36. 根據權利要求34的試劑盒，進一步包括給藥說明書。37. 根據權利要求34的試劑盒，其中所述辣椒素、透明質酸和麻醉劑被配制在一起。
【文檔編號】A61K31/165GK105960230SQ201480071773
【公開日】2016年9月21日
【申請日】2014年11月12日
【發明人】查爾斯·A·比爾巴拉, 菲利普·J·比爾巴拉, 丹尼爾·巴克斯, 瑪麗·庫格林
【申請人】Vizuri健康科學有限責任公司